提高缺氧耐受力功能评价方法及修订说明
蜂胶滴丸耐缺氧实验研究

蜂胶滴丸耐缺氧实验研究 李海燕; 李驰坤; 张明天; 成光宇 【期刊名称】《《特产研究》》 【年(卷),期】2019(041)004 【总页数】4页(P68-71) 【关键词】蜂胶滴丸; 耐缺氧; 亚硝酸钠; 中毒 【作 者】李海燕; 李驰坤; 张明天; 成光宇 【作者单位】长春中医药大学附属医院 长春 130103 【正文语种】中 文 【中图分类】S896.6
蜂胶为蜜蜂科昆虫意大利蜂(Apis mellifera L.)工蜂采集的植物树脂与其上颚腺、蜡腺等分泌物混合形成的具有粘性的固体胶状物,味苦、辛、寒,归脾、胃经,具有补虚弱、化浊脂,止消渴之功效。蜂胶具有抗菌、抗病毒、增强免疫、抗氧化、抗疲劳、抗癌等众多药理作用。近年来有些文献报道过蜂胶具有耐缺氧的作用,而我国有许多岗位需要在低氧甚至是缺氧的状态下进行的。本研究旨在于发现并验证蜂胶具有耐缺氧的作用,可提高人体机能的耐缺氧能力。 蜂胶具有多种活性。刘立波[1]给正常小鼠灌以蜂胶黄酮发现,蜂胶黄酮可以显著提高小鼠肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,降低肝脏丙二醛(MDA)含量。蜂胶在体外能明显抑制样自由基引发的小鼠肝微粒体脂质过氧化反应,体内能明显抑制四氧嘧啶致小鼠肝脏的损伤作用,降低MDA含量[2]。蜂胶灌胃对正常小鼠、衰老模型小鼠脑组织中SOD、CAT、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性有显著提高作用,同时能显著减低脑组织中MDA含量,对脑组织起到了抗氧化保护作用[3]。蜂胶也能显著提高老龄小鼠血清GSH-Px 活力,降低血中MDA 含量[4];能明显提高正常小鼠睾丸及卵巢组织的SOD 活性[5];增加小鼠胸腺SOD 的活力,降低MDA 及NO 的含量[6]。蜂胶体外能抑制血管紧张素II(AnglI)诱导的平滑肌细胞增殖过程,增加SOD 活力,降低MDA 含量,增加高血脂症兔SOD活力,降低低密度脂蛋白(LDL)、MDA含量[7]。小鼠灌服蜂胶4 周后红细胞Na+ K+ ATP 酶和SOD 活性显著高于对照组,血浆MDA 含量显著降低[8]。在观察蜂胶黄酮对果蝇寿命的影响及预防小鼠自由基损伤的作用时也证明,蜂胶黄酮可显著提高果蝇及小鼠体内SOD 活性,降低MDA 含量,说明蜂胶黄酮通过有效清除自由基、抑制或减轻机体组织和细胞的过氧化过程起到延缓衰老的作用[9]。 近期研究结果表明,蜂胶能显著抑制缺氧诱导的线粒体活性氧(ROS)的产生和小胶质细胞中核因子-B(NF-B)的激活,表明蜂胶可能有益于预防缺氧诱导的神经炎症[10]。Julio B.Daleprane 等[11]通过体内和体外模型的实验,证明红蜂胶多酚是通过影响内皮细胞中的缺氧诱导因子-1来稳定抑制血管,从而发挥抗血管活性。潘燕等[12]在研究蜂胶黄酮对小鼠缺血再灌注后心肌线粒体自由基损伤时发现,与对照组比较,给药组的SOD、GSH-Px、总抗氧化能力(T-AOC)在力竭后的不同时刻均明显升高,MDA 含量明显下降,其原因可能与增强机体缺氧耐受力有关。近期报道,具有耐缺氧的处方组成中也含有蜂胶[13,14]。为了验证蜂胶是否对小鼠具有提高缺氧耐受力的能力,本试验对蜂胶滴丸进行了如下研究,为评价蜂胶具有提高缺氧耐受力提供实验依据。 1 材料、试剂、仪器 1.1 材料 蜂胶滴丸(广州市杰禾蜂业有限公司),由蜂胶、聚乙二醇6 000 为原料制成的保健食品;规格:20 mg/粒(每粒含蜂胶10 mg);样品形态:圆形;食用方法及食用量:口服,4 粒/次,每日 1 次;保质期:24 个月;贮存方法:常温。 1.2 试剂及配制 羧甲基纤维素钠(CMC-Na,沈阳化学试剂厂,批号:200111011,规格:250g)。 分别按 40.0 mg/kg、26.7 mg/kg、13.3 mg/kg 剂量(相当于人体推荐剂量的30 倍、20 倍、10 倍)配制蜂胶高、中、低剂量组。称取蜂胶适量,加入0.5%CMC-Na,配制成浓度分别为4.00、2.67、1.33 mg/mL 的溶液,充分混匀备用;阴性对照组剂量为10 mL/kg,配制0.5%CMC-Na 溶液。 1.3 实验动物 小鼠:昆明种,雄性,80 只,18~22 g,SPF 级;质量合格证:No.211002300022072。试验动物提供单位:辽宁长生生物技术有限公司;试验动物生产许可证号:(辽)2017-0001;试验动物使用许可证号:SYXK(辽)2017-0001。 SPF 级维持鼠料(沈阳市于洪区前民动物实验饲料厂);生产许可证号:SCXK(辽)2017-0002;试验动物饮用水:纯化水,自由摄取;动物室环境条件:温度20~25 ℃、相对湿度40%~70%。 1.4 仪器 秒表(DM1-001,上海银泽仪器设备有限公司);电子天平(CP124S,北京赛多利斯仪器系统有限公司);电子天平〔PL1002E型,梅特勒托利多仪器(上海)有限公司〕。 2 实验方法 2.1 常压耐缺氧实验 动物在实验动物房中适应3d,取雄性小鼠40 只,按体重随机分为4 组,即蜂胶高、中、低3 个剂量组,1个阴性对照组,每组10 只。连续灌胃给予30 d,于末次灌胃后1 h,将各组小鼠分别放入盛有5 g 钠石灰的250 mL 磨口瓶内(每瓶1 只),用凡士林封严瓶口,以呼吸停止为指标,记录小鼠因缺氧而死亡的时间。 2.2 亚硝酸钠中毒存活实验 动物在实验动物房中适应4 d,取雄小鼠40 只,按体重随机分为4 组,即高、中、低3 个剂量组,1 个阴性对照组,每组10 只。给予方式均为灌胃,连续给予30 天。于末次灌胃后1h,各组小鼠按照240mg/kg剂量腹腔注射亚硝酸钠(注射量为0.1 mL/10g),立即计时,记录动物存活时间。 2.3 数据处理 实验数据用spss22 软件,采用单因素方差分析,组间比较采用Duunet-t检验进行统计学处理,P<0.05表示有显著性差异,证明该数据具有统计学意义。 3 结果与分析 3.1 小鼠常压耐缺氧试验 与阴性对照组比较,蜂胶各剂量组试验动物体重均无显著差异(P>0.05),蜂胶中、低剂量组试验动物存活时间具有显著差异(P<0.05)。结果见表1、表2。 表1 蜂胶滴丸常压耐缺氧实验动物体重Tab1 Change of mice weight in anti-hypoxia test of Propolis Dropping pills (g)组别Groups给药量(mg/kg)Dosage动物数(只)Number of the animals初重(g)Starting weight第 1 周重(g)First week weight第 2 周重(g)Second week weight第 3 周重(g)Third week weight终重(g)Final weight阴性对照组Negative group 0.5%CMC-Na 10 22.05±1.02 27.44±1.45 34.91±2.13 39.32±1.89 43.25±1.88高剂量组High dose group 40.0 10 22.36±1.88 28.24±1.02 35.27±1.48 39.89±2.13 43.81±2.17中剂量组Middle dose group 26.7 10 22.43±2.14 27.50±1.76 34.52±1.94 39.45±2.45 43.56±2.25低剂量组Low dose group 13.3 10 22.13±1.89 27.14±1.95 34.76±1.55 39.23±2.06 43.27±2.36 表2 蜂胶滴丸常压耐缺氧实验结果Tab 2 Result of anti-hypoxia test of Propolis Dropping pills注:*.与阴性对照组比较,P <0.05。Note:*.Differencesces compared with positive control group,P <0.05.组别 Groups 给药量(mg/kg)Dosage动物数(只)Number of the animals存活时间(s)Survival time阴性对照组 Negative group 0.5%CMC-Na 10 1160.3±190.4高剂量组 High dose group 40.0 10 1254.5±178.6中剂量组 Middle dose group 26.7 10 1416.6±213.4*低剂量组 Low dose group 13.3 10 1379.1±175.7* 3.2 亚硝酸钠中毒存活试验 与阴性对照组比较,蜂胶各剂量组试验动物体重均无显著差异,蜂胶中、低剂量组试验动物注射亚硝酸钠后存活时间具有显著差异(P<0.05)。结果见表3、4。 表3 蜂胶滴丸亚硝酸钠中毒存活实验小鼠体重Tab3 Change of mice weight in sodium nitrite poisoning test of Propolis Dropping pills (g)组别Groups给药量(mg/kg)Dosage动物数(只)Number of the animals初重(g)Starting weight第 1 周重(g)First week weight第 2 周重(g)Second week weight第 3 周重(g)Third week weight终重(g)Final weight阴性对照组Negative group 0.5%CMC-Na 10 21.56±1.22 26.56±1.28 34.58±1.56 39.01±1.79 43.14±2.04高剂量组High dose group 40.0 10 21.40±1.32 26.72±1.15 35.66±1.69 39.12±2.56 43.38±2.65中剂量组Middle dose group 26.7 10 21.53±1.23 26.80±1.56 34.72±1.44 39.35±2.69 43.48±2.53低剂量组
高原高寒环境对人体功能的影响及预防措施研究

高原高寒环境对人体功能的影响及预防措施研究高寒是一个地理学术语,属于气候特征,是由于海拔高或者纬度高而形成的特别寒冷的气候区。
在我国来讲,新疆、西藏等地,就有很大一部分地区属于高原高寒环境,其中最显著的代表,就是青藏高原。
高原高寒环境的特殊性,决定这些地区对于人体功能有较大影响,而如何预防这些影响的出现,是关系到人们在高原高寒环境下生活和工作的关键。
2高原高寒环境对人体功能的影响高原高寒环境的特点是低压缺氧、寒冷干燥、日照长辐射强。
特殊的环境条件使得高原高寒环境对于人体各系统都有较大的影响,包括生理和心理。
很多研究表明,低温、低氧、强辐射等会引起机体功能的变化,尤其是对于初次到高原接触高寒环境的人来说,更有可能出现不适,甚至可能危及生命安全。
2.1低压缺氧对人体功能的影响低压缺氧主要是因为高原高寒环境下大气压较低,大气中的含氧量和氧分压降低,这使得人们在呼吸时进入体内的氧分也低,使得人体肺泡内氧分压降低,弥散血液循环中的氧也降低,动脉血氧分压和饱和度随之降低。
当血氧饱和度降到一定水平时就可引起各器官组织供氧不足,从而产生功能或器质性变化,进而出现缺氧症状,如头痛、头晕、心慌、气短、恶心、呕吐、食欲下降、失眠、记忆力下降等,其中脑功能损害是最早发生且后果最严重的损害,而且暴露时间越长损害越严重。
低压缺氧是各种高原病发生的根本原因。
而且长时间缺氧有可能导致心肌损伤或坏死,特别是人体在低环境下进行剧烈运动时,氧气供需失衡严重,导致心血管功能下降。
低压缺氧还可能影响机体免疫功能,因为低氧对机体的免疫抑制会随着海拔升高而降低,而且也会抑制红细胞、中性粒细胞、巨噬细胞等细胞的免疫功能,增加机体的敏感性。
2.2寒冷干燥对人体功能的影响高原地区气温会随着海拔高度的升高而逐渐下降,一般每升高1000米,气温下降约6℃。
而且高原地区大部分空气稀薄,白天地面会接收大量的太阳辐射,温度较高,但到了晚上,地面气温急剧下降,这使得昼夜温差很大。
三七银杏茶

主要功能: 提高缺氧耐受力适宜人群: 处于缺氧环境者申请人名称: 云南祥康生物科技发展有限公司主要原料: 三七、菊花提取物、银杏叶提取物、蔗糖、糊精功效成分/标志性成分含量: 每100g含:总皂甙(以人参二醇计)4.8g不适宜人群: 少年儿童注意事项: 本品不能代替药物贮藏方法: 避光,置阴凉干燥通风处三七银杏茶叶主要功效成分:银杏叶黄酮:扩张血管、抗心肌缺血、抗血拴形成、降血糖、降血脂、降血压、保肝、抗癌、增强免疫功能、延缓衰老。
总皂苷:抗心肌缺血、抗血栓形成、抗动脉粥样硬化、降血脂、抗肿瘤、强身延年。
抗心律失常、抗心肌缺血、抗肿瘤、强壮滋补、生血安神。
本品含有可抵抗多种疾病及延缓衰老的生物活性物质,其中银杏黄酮甙具有舒张血管、改善微循环作用,特别是对大脑血流障碍和脑动脉硬化治疗效果显著;能增进心脑血流量,改善脑营养,克服脑功能障碍;降低胆固醇和高血脂,拮抗血小板活化因子活性,对脑血栓患者的脑循环、葡萄糖代谢有调节作用;具有超氧化物歧化酶样作用,清除自由基,延缓血脑血管老化,对与自由基有关的疾病,如老年性痴呆、衰老、心脑血管系统疾病均有改善作用。
“富贵”不是错,“富贵病”的克星解密:“祸从口出,病从口入”。
贫穷时代的病是“虚”,富贵时代的病是“瘀”,瘀则不通,富贵病源于“不通”。
例:心梗、脑梗、心绞痛、肿瘤等都是因瘀、堵、不通而成。
心肌缺血、脑萎缩、胃肠病、关节等病都是由于“不通畅”血液供应不足而成。
胆汁反流,反流性食道炎、呕吐等都是因“不通顺”逆反而成。
“通则无病,一通百通”。
祥康“三七银杏茶”通畅您的血管,让我们“富贵”不得病。
祥康“三七银杏茶”1+1>2的科学果实:源于云南文山州,国家验证的“绿色、无污染、无公害”的“三七”。
素有“金不换”、“南国神草”之称。
古书记载:三七“活血不伤新”、“止血不留瘀”。
“人参补气第一,三七补血第一”。
是唯一具有既能活血,又能止血,还能补血功能为一身的中药材,唯中国拥有的神药。
昆阆牌复方人参片的耐缺氧及抗疲劳作用研究

昆阆牌复方人参片的耐缺氧及抗疲劳作用研究李淑惠;王绚卉;江一川;于晓风;武毅【摘要】目的观察昆阆牌复方人参片的耐缺氧及抗疲劳作用.方法通过常压耐缺氧、亚硝酸钠中毒及急性脑缺血缺氧实验,观察复方人参片的耐缺氧作用;以小鼠负重游泳存活时间,血尿素氮、乳酸、MDA含量及SOD活性为指标,观察复方人参片的抗疲劳作用.结果复方人参片0.8、1.6g/kg均能明显延长小鼠常压缺氧条件下、亚硝酸钠中毒后、急性脑缺血缺氧以及负重游泳的存活时间,降低运动后血清尿素氮、乳酸增量及MDA的堆积,显著提高SOD活性.结论复方人参片具有明显的耐缺氧及抗疲劳作用.【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2018(030)005【总页数】4页(P2-5)【关键词】复方人参片;耐缺氧作用;抗疲劳作用;小鼠【作者】李淑惠;王绚卉;江一川;于晓风;武毅【作者单位】吉林昆阆医药科技有限公司,蛟河132500;吉林昆阆医药科技有限公司,蛟河132500;吉林昆阆医药科技有限公司,蛟河132500;吉林大学药学院,长春130021;吉林大学药学院,长春130021【正文语种】中文航空航天、运动员、高原及井下特殊岗位作业人员,常常受到低压、缺氧等应激因素的影响。
累积性缺氧可损害身心功能,加重疲劳,降低工作效率,甚至诱发安全事故。
因此,开发“有助于提高缺氧耐受力”的保健食品是一种有益的预防和保健措施。
昆阆牌复方人参片是以五加科人参属植物人参(Panax ginseng C.A Mayer)、木兰科植物五味子(Schisandra chinensis Baill.)及蔷薇红景天(Rhodiola rosea L.)为原料开发的一种“提高缺氧耐受力”的保健食品。
国内外研究发现,人参、五味子及红景天均具有抗疲劳及耐缺氧活性[1~6]。
目前尚未见有关将人参、五味子及红景天配伍用于提高缺氧耐受力的研究报道及保健食品问世。
本文观察昆阆牌复方人参片的耐缺氧及抗疲劳作用,为其开发利用提供实验依据。
五加双参片耐常压缺氧及抗疲劳作用

五加双参片耐常压缺氧及抗疲劳作用作者:宋红儒,杨丽甲,储雪蓉【关键词】五加双参片;耐常压缺氧;抗疲劳作用[摘要]目的研究五加双参片的耐常压缺氧及抗疲劳作用方法以“氢化可的松”,“利血平”处理小鼠,随机分成3组,ig给药,实验、观察、记录,统计学处理。
结果经本品防治的经“氢化可的松”或“利血平”处理小鼠其游泳存活时间明显延长;本品与刺五加片同样具有良好的适应原样作用。
结论五加双参片具有较好的耐常压缺氧、抗疲劳作用和调整免疫功能的作用。
[关键词]五加双参片;耐常压缺氧;抗疲劳作用五加双参片是我院多年来在传统医药开发中,采用现代科学技术手段研制而成的一种中药制剂。
经动物实验和临床研究结果表明,该制剂耐常压缺氧、抗疲劳作用效果满意,现报告如下。
1 材料与方法1.1 材料(1)动物:Balb/c小鼠30只,体重(30±2)g,雄性(第四军医大学动物中心提供)。
(2)五加双参片(解放军第323医院药厂、050613);由刺五加、当归、当参、黄芪等九味中药材提取加工制成。
(3)刺五加片(哈尔滨三木制药厂、050510);氢化可的松(西安利君制药有限责任公司、050930);利血平(上海复旦复华药业有限公司、050401)。
1.2 方法1.2.1 以氢化可的松(简称“氢考”)处理小鼠将小鼠随机分成3组,“氢考”组与防治组深部im。
“氢考”每天4.5 mg/kg,连续9天;对照组同法给等量生理盐水,第8天起,防治组ig本品按3.8 g/(kg・d),连续7天,其他两组ig等量注射用水,实验末1.5 h后将各组小鼠置于15 ℃水温下分别入水游泳。
1.2.2 以利血平处理小鼠将小鼠随机分成3组,利血平组与防治组ig,利血平0.5 mg/kg,qod共4次;防治组同时ig,本品3.8 g/(kg・d),连续用7天,对照组同法给予等量生理盐水和注射用水,实验末1.5 h,将各组小鼠置于15 ℃水温下分别入水游泳。
国家规定保健食品27种功能 ▲●

国家规定保健食品27种功能국가규정에규정한건강기능식품의27가지기능▲只做动物试验▲동물시험만하면된다. ●只做人体试验●인체시험만하면된다. 其他为两者均做기타표기없는항목은동물및인체시험둘다해야된다.01增强免疫力▲면역력증강02辅助降脂보조지방다운03辅助降糖혈당내림04抗氧化항산화05辅助改善记忆力기억력개선06缓解视疲劳●눈피로완화07促进排铅시각피로완화08清咽功能clearing heat from throat09辅助降血压혈압다운10改善睡眠▲수면개선11促进泌乳모유분비촉진12缓解体力疲劳▲몸피로완화13提高缺氧耐受力▲산소부족때의내수력증강14对辐射危害有辅助保护功能▲방사위해에대한몸보호15减肥다이어트16改善生长发育성장발육상황개선17增加骨密度골밀도증가18改善营养性贫血영양적빈혈개선19对化学性肝损伤有辅助保护▲간손상보호20祛痤疮●여드름제거21祛黄褐斑●황갈반제거22改善皮肤水分●피부수분개선23改善皮肤油份●피부기름기개선24通便功能변통기능25对胃粘膜损伤有辅助保护功能위점막손상을보호26调节肠道菌群장의세균군조절27促进消化소화개선保健食品检验与评价技术规范(中华人民共和国卫生部2003年版)规定,保健食品可申报的功能从之前的22种调整为27种:1. 增强免疫力功能。
2. 辅助降血脂功能**。
3. 辅助降血糖功能**。
4. 抗氧化功能**。
5. 辅助改善记忆功能**。
6. 缓解视疲劳功能*。
7. 促进排铅功能**。
8. 清咽功能**。
9. 辅助降血压功能**。
10. 改善睡眠功能。
11. 促进泌乳功能**。
12. 缓解体力疲劳#。
13. 提高缺氧耐受力功能。
14. 对辐射危害有辅助保护功能。
15. 减肥功能**#。
16. 改善生长发育功能**。
17. 增加骨密度功能。
18. 改善营养性贫血**。
19. 对化学肝损伤有辅助保护功能。
20. 祛痤疮功能*。
21. 祛黄褐斑功能*。
国家规定保健食品27种功能 ▲●

国家规定保健食品27种功能국가규정에규정한건강기능식품의27가지기능▲只做动物试验▲동물시험만하면된다. ●只做人体试验●인체시험만하면된다. 其他为两者均做기타표기없는항목은동물및인체시험둘다해야된다.01增强免疫力▲면역력증강02辅助降脂보조지방다운03辅助降糖혈당내림04抗氧化항산화05辅助改善记忆力기억력개선06缓解视疲劳●눈피로완화07促进排铅시각피로완화08清咽功能clearing heat from throat09辅助降血压혈압다운10改善睡眠▲수면개선11促进泌乳모유분비촉진12缓解体力疲劳▲몸피로완화13提高缺氧耐受力▲산소부족때의내수력증강14对辐射危害有辅助保护功能▲방사위해에대한몸보호15减肥다이어트16改善生长发育성장발육상황개선17增加骨密度골밀도증가18改善营养性贫血영양적빈혈개선19对化学性肝损伤有辅助保护▲간손상보호20祛痤疮●여드름제거21祛黄褐斑●황갈반제거22改善皮肤水分●피부수분개선23改善皮肤油份●피부기름기개선24通便功能변통기능25对胃粘膜损伤有辅助保护功能위점막손상을보호26调节肠道菌群장의세균군조절27促进消化소화개선保健食品检验与评价技术规范(中华人民共和国卫生部2003年版)规定,保健食品可申报的功能从之前的22种调整为27种:1. 增强免疫力功能。
2. 辅助降血脂功能**。
3. 辅助降血糖功能**。
4. 抗氧化功能**。
5. 辅助改善记忆功能**。
6. 缓解视疲劳功能*。
7. 促进排铅功能**。
8. 清咽功能**。
9. 辅助降血压功能**。
10. 改善睡眠功能。
11. 促进泌乳功能**。
12. 缓解体力疲劳#。
13. 提高缺氧耐受力功能。
14. 对辐射危害有辅助保护功能。
15. 减肥功能**#。
16. 改善生长发育功能**。
17. 增加骨密度功能。
18. 改善营养性贫血**。
19. 对化学肝损伤有辅助保护功能。
20. 祛痤疮功能*。
21. 祛黄褐斑功能*。
保健品的区分

保健品的区分保健品百科名片保健品GB16740-97《保健(功能)食品通用标准》第3.1条将保健食品定义为:“保健(功能)食品是食品的一个种类,具有一般食品的共性,能调节人体的机能,适用于特定人群食用,但不以治疗疾目前市场上的保健品大体可以分为保健食品、保健药品、保健化妆品、保健用品等。
保健食品具有食品性质,如茶、酒、蜂制品、饮品、汤品、鲜汁、药膳等,具有色、香、形、质要求,一般在剂量上无要求;保健药品具有营养性、食物性天然药品性质,应配合治疗使用,有用法用量要求,如目前带“健”字批号的药品;保健化妆品具有化妆品的性质,不仅有局部小修饰作用,且有透皮吸收、外用内效作用,如保健香水、霜膏、漱口水等;保健用品具有日常生活用品的性质,如健身器、按摩器、磁水器、健香袋、衣服鞋帽、垫毯等。
保健食品与一般食品的区别保健食品含有一定量的功效成分,能调节人体的机能,具有特定的功效,适用于特定人群。
一般食品不具备特定功能,无特定的人群食用范围。
保健食品不能直接用于治疗疾病,它是人体机理调节剂、营养补充剂。
而药品是直接用于治疗疾病。
保健品标志的含义保健食品标志的颜色为天蓝色图案,图标下半部分有保健食品字样。
国家工商局和卫生部在日前发出的通知中规定,在影视、报刊、印刷品、店堂、户外广告等可视广告中,保健食品标志所占面积不得小于全部广告面积的1/36。
其中报刊、印刷品广告中的保健食品标志,直径不得小于1厘米保健品标志。
如何鉴别保健品真伪一、购买保健品确保通过正规渠道购买二、先看有无卫生部的”小蓝帽”这是国家为让消费者辨认区分真假保健品的特制标志,三、其次看包装是否规范,有无清晰的或无法识别的部分.四、看GMP认证标志:GMP是国际通行的食品医药企业良好的生产流程和管理规范,是我国药品和保健品生产的强制项目。
五、看成分表:消费者要仔细看保健产品成分说明,大家购买时一定要看仔细。
保健食品与营养品有什么区别?保健品不是营养品。
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附件5:提高缺氧耐受力功能评价方法(征求意见稿)保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 试验项目1.1 体重1.2 常压耐缺氧实验:存活时间1.3常压缺氧模型实验:红细胞数和血红蛋白,丙二醛(MDA),总抗氧化能力(T-AOC)1.4 亚硝酸钠中毒缺氧实验:1.4.1 缺氧损伤实验: 高铁血红蛋白含量(MetHb)1.4.2 缺氧存活实验: 存活时间2 试验原则所列指标均为必做项目3 结果判定3.1常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒缺氧实验、常压缺氧模型实验三项实验中任两项结果阳性可判定受试样品具有提高缺氧耐受力功能。
3.2其中缺氧存活实验、缺氧损伤实验的结果均为阳性可判定亚硝酸钠中毒缺氧实验结果阳性。
提高缺氧耐受力功能检验方法Method for the Assessment ofEnhancing Anoxia Endurance Function1.常压耐缺氧实验1.1 原理缺氧对机体是一种紧张性刺激,影响机体各种代谢,特别是影响机体的氧化供能,最终会导致机体的心、脑等主要器官缺氧供能不足而死亡。
1.2 材料250mL磨口瓶、秒表、凡士林、钠石灰(或等量氢氧化钠和碳酸钙)。
1.3 实验动物推荐用近交系成年小鼠,单一性别,小鼠体重18-22克,每组10-15只。
1.4 实验方法1.4.1 剂量和分组至少设三个剂量组,同时设对照组。
以人体推荐量的10倍为其中的一个剂量组,另设两个剂量组,最高剂量不得超过人体推荐量的30倍。
1.4.2受试样品的给予经口灌胃给予受试样品,无法灌胃时将受试样品掺入饲料,并记录每只动物的饲料摄入量。
受试样品给予时间30天,必要时可以延长至45天。
1.4.3 实验步骤每日经口灌胃给予受试样品,对照组给予纯净水。
将动物每周称重两次,按体重调整给予受试样品的量。
各组于末次灌胃后1小时,将各组小鼠分别放入盛有5g钠石灰的250mL磨口瓶内(每瓶1只),用凡士林封瓶口,盖严,使之不漏气,立即计时,以呼吸停止为指标,记录小鼠死亡的时间。
1.4.4 检测指标小鼠因缺氧而死亡的时间。
1.5 数据处理数据采用方差分析,但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验,方差齐,计算F值,F值< F0.05,结论:各组均数间差异无显著性;F值>F0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计;对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换,待满足正态或方差齐要求后,用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的,改用秩和检验进行统计。
1.6 结果判定受试样品组与对照组比较,存活时间延长,并具有统计学意义,则判定该实验结果阳性。
1.7 注意事项:1.7.1每个磨口瓶内只放1只小鼠。
1.7.2磨口瓶一定要密闭封严,以防漏气,否则会影响实验结果。
1.7.3磨口瓶必须等容量(误差 1ml),实验前先用水加以校正。
1.7.4每批实验动物的体重应尽量保持一致。
2 常压缺氧损伤模型实验2.1 原理在总大气压保持不变的情况下,降低空气中氧的百分含量,机体吸入氧量降低,导致血液中氧含量降低,组织细胞不能从血液中获得充足的氧而使能量代谢障碍,导致重要脏器组织细胞的损伤。
2.2 仪器低氧分压呼吸效应实验系统、血细胞分析仪、可见光分光光度计、酶标仪、微量加样器、恒温水浴锅、普通离心机、混旋器、具塞离心管、组织匀浆器。
2.3 实验动物推荐用近交系成年小鼠,单一性别,体重18-22g,每组10-15只。
2.4 实验方法2.4.1 剂量和分组至少设三个剂量组,同时设阴性对照组和模型对照组二个对照组。
以人体推荐量的10倍为其中的一个剂量组,另设二个剂量组,最高剂量不得超过人体推荐量的30倍。
2.4.2受试样品的给予经口灌胃给予受试样品,受试样品给予时间30天,必要时可以延长至45天。
2.4.3 实验步骤2.4.3.1造模方法每日经口灌胃给予受试样品,阴性对照组和模型对照组给予同等容量溶剂。
将动物每周称重两次,以调整受试样品剂量。
每次给予样品后,将模型对照组与各剂量组的实验动物依次放入常压缺氧装置中,通过充入氮气方法把装置内的氧含量从21%大气氧含量调整下降至10.0±0.5 % 氧含量,维持此低氧含量处理样品组和模型对照组动物6~8 h/天,每周5~6次,连续2~3周。
末次缺氧处理后,采血并取脑进行各项指标的检测。
2.4.4指标检测体重、血红蛋白含量(Hb)、脑匀浆丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)。
2.4.4.1血红蛋白含量测定方法EDTA·K2能与血液中的钙离子结合成为螯合物,从而阻止血液凝固,全血抗凝后用一般血常规检验的血细胞分析仪检测(仪器法)。
2.4.4.1.1试剂配制乙二胺四乙酸二钾(EDTA·K2·2H2O,MW404.47),称量8mg EDTA·K2加纯净水至100ml制成抗凝剂,50μl抗凝剂可抗凝1ml小鼠全血。
1.5~2.2mg的EDTA·K2可阻止1ml血液凝固。
2.4.4.1.2 采血以摘除小鼠眼球的方法采集全血,采用干净无菌的眼科镊子摘取小鼠一侧或双侧眼球,让血液自由滴入装有抗凝剂的1.5ml离心管(或商品化的抗凝管)中,采血过程中不断混匀血液与抗凝剂防止血液凝固,每只动物采集抗凝全血约1ml。
2.4.4.1.3 检测分析上机前血液颠倒混匀,注意检查是否存在凝块。
在24h内以全血细胞分析仪检测血液红Hb。
上机操作参照仪器说明书。
2.4.4.2组织中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)含量测定2.4.4.2.1 原理MDA(malondiadehycle)是细胞膜脂质过氧化的终产物之一,测其含量可间接估计脂质过氧化的程度。
1个丙二醛(MDA)分子与2个硫代巴比妥酸(TBA)分子在酸性条件下共热,形成粉红色复合物。
该物质在波长532nm有极大吸收峰。
可用分光光法进行测定。
2.4.4.2.2试剂0.2M乙酸盐缓冲液pH3.50.2M乙酸溶液185mL0.2M乙酸钠溶液15mL1mmol/L四乙氧基丙烷(贮备液,4℃保存3个月),临用前用水稀释成40nmol/mL8.1%十二烷基硫酸钠SDS0.8%硫代巴比妥酸TBA0.2M磷酸盐缓冲液pH7.40.2M磷酸氢二钠1920mL0.2M 磷酸二氢钾480mL2.4.4.2.3 实验步骤2.4.4.2.3.1 样品制备组织匀浆样品:取一定量的大脑组织,生理盐水冲洗、拭干、称重,置匀浆器中,加入0.2M磷酸盐缓冲液,以20000r/min匀浆10s,间歇30s,反复进行3次,制成10%组织匀浆(W/V),3000r/min离心5-10min,取上清液待测。
2.4.4.2.3.2样品测定试剂空白管样品管标准管10%脑组织匀浆0.2mL40nmol/mL四乙氧基丙烷0.2mL8.1%SDS 0.2mL 0.2mL 0.2mL0.2M乙酸盐缓冲液 1.5mL 1.5mL 1.5mL0.8%TBA 1.5mL 1.5mL 1.5mLH2O 0.8mL 0.7mL 0.7mL混匀,避光沸水浴60min,流水冷却,于532nm比色注:如用试剂盒,可按试剂盒的操作要求进行2.4.4.2.3.3计算B - A B- A 1过氧化脂质含量=————×C×K = ———×40×————————(nmol/mg组织) F - A F - A 0.2×10%×1000 A: 空白管吸光度B:样品管吸光度F:四乙氧基丙烷吸光度C:四乙氧基丙烷浓度(40nmol/mL)K:稀释倍数2.4.4.3 组织中总抗氧化能力(T-AOC)测定方法2.4.4.3.1 原理机体中有许多抗氧化物质,能使Fe2+还原成Fe3+,后者可与菲啉类物质形成稳定的橙黄色络合物,通过在520nm比色可测出其抗氧化能力的高低。
2.4.4.3.2 试剂采用商品试剂盒:抗氧化能力(T-AOC)测定试剂盒。
2.4.4.3.3 样品制备准确称取脑组织重量,按重量体积比加9倍生理盐水,以20000r/min匀浆10s,间歇30s,反复进行3次,制成10%组织匀浆(W/V),2000~2500r/min离心10min,取上清液待测。
同时用双缩脲试剂测定10%脑组织匀浆蛋白。
2.4.4.3.4 样品测定:按试剂盒的操作要求进行。
如:试剂对照管(mL)样品管(mL)10%脑组织匀浆a*试剂一 1.0 1.0试剂二 2.0mL 2.0mL试剂三应用液0.5mL 0.5mL漩涡混匀器充分混匀,37℃水浴30分钟试剂四0.2mL 0.2mL待测样本a*试剂五0.2 mL 0.2 mL混匀,放置10分钟,蒸馏水调零1cm光径,520nm测各管吸光度。
* 参考取样量:10%组织匀浆参考取样量:0.1~0.2ml2.4.4.3.5计算OD U-OD C总抗氧化能力=——————÷30×N÷C prot(单位/mg蛋白)0.01OD U: 测定管吸光度OD C:对照管吸光度N:反应体系稀释倍数(反应液总体积/取样量)C prot:稀释倍数待测样本蛋白浓度(mg/ml)2.5 数据处理数据采用方差分析,但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验。
方差齐,计算F值,F值< F0.05,各组均数间差异无显著性;F值>F0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计。
对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换,待满足正态或方差齐要求后,用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的,改用秩和检验进行统计。
2.6 结果判定模型对照组与阴性对照组比较,Hb、MDA升高、T-AOC含量降低有统计学显著性意义(P<0.05),表示模型成立。
在模型成立的前提下,受试样品组MDA含量降低或T-AOC含量升高有统计学意义(P<0.05),且Hb<210g/L,判定该项实验结果阳性。
注: 红细胞增多症评价标准参考值Hb>210g/L。
3 亚硝酸钠中毒缺氧实验3.1 原理亚硝酸钠使二价铁血红蛋白转变为三价铁血红蛋白,生成高铁血红蛋白(MetHb),破坏血红蛋白携氧能力,造成组织细胞缺氧,随着亚硝酸钠剂量的增加,MetHb含量增加,导致组织缺氧直至死亡。
3.2 实验动物推荐使用近交系成年雄性小鼠,体重18~22g,每组10~15只。
3.3 材料亚硝酸钠, 20μl毛细管, 1ml注射器,秒表。
3.4 剂量分组实验设三个剂量组和一个阴性对照组,以人体推荐量的10倍为其中的一个剂量组,另设两个剂量组。
受试样品给予时间30天。