梅毒螺旋体检测标准操作规程
甲苯胺红不加热血清试验标准操作程序
甲苯胺红不加热血清试验标准操作程序黑龙江省性病防治中心(黑龙江省皮肤病防治研究所)实验室标准操作规程hljsxb(hljspy)-sop-TRUST甲苯胺红不加热血清试验标准操作程序 1. 目的:当人体感染梅毒螺旋体后4,10周左右，血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性反应素(主要是IgM、IgG)。
这些抗体可用免疫学方法进行检测。
血清学检查是辅助诊断梅毒的重要手段。
2. 原理:梅毒螺旋体感染人体后，宿主会产生抗类脂抗原的抗体(反应素)，与一定比例的心磷脂、卵磷脂、及胆固醇混合物抗原反应，可检测梅毒患者血中的抗类脂抗原的抗体。
3. 仪器材料:3.1水平旋转仪3.2试剂盒:TRUST抗原液、直径为18mm圆圈的反应卡片、抗原滴管、针头。
4. 标本采集:4.1血清:抽取静脉血，室温静止凝固后，分离新鲜血清。
也可采用冻存的血清。
4.2血浆:各种抗凝剂制备的血浆。
5. 操作步骤:5.1定性试验:5.1.1加样:吸取50uL血清(浆)放在卡片圆圈中，并均匀地涂1黑龙江省性病防治中心(黑龙江省皮肤病防治研究所)实验室标准操作规程hljsxb(hljspy)-sop-TRUST布在整个圈内。
5.1.2加抗原:将TRUST抗原轻轻摇匀，用9号针头(60?1滴/mL)加一滴抗原。
5.1.3反应:将卡片置水平旋转仪旋转8分钟(100?2转/分钟)。
立即在亮光下观察结果。
5.2定量试验:5.2.1稀释液准备:在圆圈内加入50uL生理盐水(根据需要确定稀释度)，勿浆盐水涂开。
5.2.2加样:吸取50uL血清(浆)与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。
5.2.3加抗原:将TRUST抗原轻轻摇匀，用9号针头(60?1滴/mL)加一滴抗原。
5.2.4反应:将卡片置水平旋转仪旋转8分钟(100?2转/分钟)。
立即在亮光下观察结果。
6. 结果判读:凝集反应强度分级:3+,4+:圆圈内出现中到大的红色絮状物，液体清亮2+:圆圈内出现小到中的红色絮状物，液体较清亮1+:圆圈内出现小的黑色絮状物，液体浑浊–:圆圈内仅见甲苯胺红颗粒集于中央一点或均匀分散 7. 结果报告:7.1定性试验:2黑龙江省性病防治中心(黑龙江省皮肤病防治研究所)实验室标准操作规程hljsxb(hljspy)-sop-TRUST7.1.1阳性:出现1+,4+强度的凝集反应。
梅毒螺旋体血清学试验常用方法
梅毒螺旋体血清学试验常用方法标题：深度解析梅毒螺旋体血清学试验常用方法梅毒螺旋体血清学试验是检测梅毒感染的常用方法之一，其结果对于梅毒的诊断有重要意义。
本文将深度解析梅毒螺旋体血清学试验的常用方法，包括其原理、操作流程、结果解读以及临床应用，并对梅毒螺旋体血清学试验的意义进行探讨。
1.梅毒螺旋体血清学试验的原理梅毒螺旋体血清学试验是通过检测患者血清中的抗梅毒螺旋体抗体来判断是否感染了梅毒。
常用的方法包括不同类型的血清学试验，如血浆凝集试验（RPR）、螺旋体血清凝集素试验（TPPA）和梅毒血清酶免疫吸附试验（EIA）。
这些方法可以检测患者的血清中是否含有特异性的抗梅毒螺旋体抗体，从而进行梅毒的诊断。
2.操作流程及常用方法梅毒螺旋体血清学试验的操作流程包括标本采集、标本处理、试剂配置、反应操作等步骤。
常用的方法包括RPR、TPPA和EIA。
RPR是一种快速筛查试验，可以在诊断初期进行使用，但其结果需要进一步确认。
TPPA是一种高度特异性的确认试验，可以用来确认疑似梅毒感染的患者。
EIA是一种定量检测方法，可以检测血清中特异性的抗体水平，有助于判断患者的感染程度。
3.结果解读及临床意义梅毒螺旋体血清学试验的结果需要进行准确解读。
阴性结果可以排除梅毒感染的可能，但也有假阴性的风险；阳性结果需要结合临床症状、病史及其他检测结果进行综合分析。
对于梅毒感染的患者，早期诊断和治疗至关重要，可以避免并发症的发生，同时也有助于阻断梅毒的传播。
4.个人观点和理解在进行梅毒螺旋体血清学试验时，我们需要充分理解不同方法的原理和操作流程，以确保结果的准确性。
梅毒螺旋体血清学试验的结果需要综合分析，结合临床情况进行判断，避免假阳性或假阴性结果的影响。
对于梅毒患者，及时的诊断和治疗对于控制疾病的传播和预防并发症的发生至关重要。
总结梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的重要方法之一，其结果对于患者的治疗和预后有重要意义。
通过深度解析梅毒螺旋体血清学试验的常用方法，我们可以更加全面地理解梅毒的诊断和治疗，为临床工作提供重要参考。
梅毒甲苯胺红不加热血清试验保准操作规程
梅毒甲苯胺红不加热血清试验保准操作规程梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）1.原理采用VDRL抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液，在白色卡片上进行试验，检测血清或血浆中反应素。
可作为梅毒病人的诊断和疗效参考。
2.标本采集标本采集前病人准备：受检者应空腹。
标本种类：血清标本要求：采集静脉血2ml，室温放置不超过4小时，分离血清备用。
3. 标本储存：待测样本在2–8℃不超过48小时，-20℃不超过三个月，-70℃以下长期保存。
应避免反复冻融。
4. 标本运输：室温运输。
5.标本拒收标准：细菌污染、溶血、脂血标本不能作测定。
6.试剂试剂名称：梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂盒试剂生产厂家：上海荣盛生物技术有限公司包装规格：120人份试剂组成：6.4.1 TRUST抗原悬液×1瓶6.4.2 阳性对照血清1m×1支6.4.3 阴性对照血清1m×1支6.5.4 试验专用卡片120人份6.5.5 专用滴管及针头1套6.5.6 使用说明书1份试剂储存条件及有效期：保存于2-8℃，有效期1年。
7.操作步骤定性试验：7.1.1 分别吸取50微升梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。
7.1.2 取待检血清50微升（不需灭活）置于纸卡的另一圆圈中。
7.1.3 用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂1滴于上述血清中。
7.1.4 按每分钟100转摇动8分钟，肉眼观察结果。
定量试验将待检血清用生理盐水作倍比稀释，然后按上述定性方法进行试验，以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。
8.结果判断阳性反应（+++～++++）：可见中等或较大的红色凝聚物。
弱阳性反应（+～++）：可见较小的红色凝聚物。
阴性反应（－）：可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。
9.临床意义TRUST阳性为诊断梅毒的筛选试验。
10.参考范围：阴性11.质量控制：每次试验均应做阴性和阳性对照，阴性对照不出现凝聚物，阳性对照出现明显凝聚物；同时应以2NCU/ml含量的梅毒抗体质控血清试验，应出现可见凝聚物。
梅毒的实验室检测与技术规范课件.
梅毒的实验室检测与技术规范课件.一、教学内容本节课我们将学习《梅毒的实验室检测与技术规范》的相关内容。
主要涉及教材第十二章，详细内容包括梅毒的病原学、实验室检测方法、技术规范及质量控制。
二、教学目标1. 了解梅毒的病原学特点，掌握梅毒实验室检测的基本方法。
2. 学习梅毒实验室检测的技术规范，提高实验操作技能。
3. 掌握梅毒实验室检测的质量控制要点，确保实验结果的准确性。
三、教学难点与重点教学难点：梅毒实验室检测技术规范及质量控制。
教学重点：梅毒实验室检测方法及其操作要点。
四、教具与学具准备1. 教具：多媒体课件、实验室检测设备模型、实验操作视频。
2. 学具：教材、笔记本、实验操作手册。
五、教学过程1. 实践情景引入（5分钟）通过展示梅毒病例，让学生了解梅毒的危害，引出梅毒实验室检测的重要性。
2. 理论讲解（15分钟）讲解梅毒病原学特点、实验室检测方法、技术规范及质量控制。
3. 例题讲解（10分钟）分析梅毒实验室检测中常见的问题，讲解解决方法。
4. 随堂练习（10分钟）（1）梅毒实验室检测的主要方法有哪些？（2）简述梅毒实验室检测技术规范要点。
（3）如何进行梅毒实验室检测的质量控制？5. 实验操作演示（20分钟）播放实验操作视频，让学生了解实验操作流程。
6. 课堂小结（5分钟）六、板书设计1. 梅毒的实验室检测方法血清学检测病原学检测分子生物学检测2. 梅毒实验室检测技术规范样本处理试剂选择操作流程结果判断3. 梅毒实验室检测质量控制严格遵循操作规程试剂质量控制设备维护与校准结果复核七、作业设计1. 作业题目：（1）简述梅毒实验室检测的常用方法及其优缺点。
（2）根据梅毒实验室检测技术规范，设计一份实验操作流程。
（3）分析梅毒实验室检测中可能出现的误差，并提出相应的质量控制措施。
2. 答案：（2）结合教材和实验操作手册，自行设计。
八、课后反思及拓展延伸1. 反思：本节课学生对梅毒实验室检测方法及操作流程的掌握程度，以及实验操作中的注意事项。
分析化学发光法检测梅毒螺旋体抗体的结果误差因素及解决办法
分析化学发光法检测梅毒螺旋体抗体的结果误差因素及解决办法分析化学发光法是一种常用的检测方法，可以在很短的时间内得到准确的分析结果。
在医学领域，发光法也被广泛应用于检测梅毒螺旋体抗体。
在进行梅毒螺旋体抗体检测时，有时会出现结果误差的情况。
本文将分析分析化学发光法检测梅毒螺旋体抗体的结果误差因素，并提出解决办法。
一、结果误差因素1. 样本处理不当样本处理不当是导致结果误差的常见因素之一。
样本的质量和稳定性对于检测结果至关重要。
如果在样本采集、保存和运输过程中出现问题，就会导致梅毒螺旋体抗体的浓度发生变化，从而影响检测结果的准确性。
2. 试剂盒存储条件不佳分析化学发光法检测梅毒螺旋体抗体通常需要使用试剂盒，而试剂盒的存储条件对于检测结果至关重要。
如果试剂盒长期暴露在高温、潮湿或光照的环境下，就会导致试剂盒内的荧光物质和发光底物分解，结果误差将不可避免。
3. 操作不规范检测人员的操作技术和经验也会对检测结果产生影响。
操作不规范、操作技术不熟练都可能导致检测结果的误差。
二、解决办法1. 严格控制样本处理过程对于样本的采集、保存和运输过程，需要严格控制每一个步骤，确保样本的质量和稳定性。
在采集样本时，应尽可能避免输血过程中的血液凝结、溶血和污染现象；在保存和运输样本的过程中，应避免暴露在高温、潮湿或光照的环境中。
2. 优化试剂盒的存储条件对于试剂盒的存储条件，应当根据试剂盒的要求，严格控制存储温度和湿度，避免高温、潮湿或光照等不利因素的影响。
3. 加强操作规范培训对于检测人员，应加强操作规范的培训，提高他们的操作技术和经验。
在日常操作中，应严格按照操作规程进行操作，避免因为操作不规范而导致的结果误差。
除了以上三点，还有一些其他因素也可能对结果产生影响，比如仪器的性能和使用条件，环境条件等。
在实际检测中，需要结合具体情况，全面进行分析并加以解决。
分析化学发光法检测梅毒螺旋体抗体是一种准确、灵敏的检测方法，但在实际操作过程中，也存在一些因素可能导致结果误差。
梅毒的实验室检测与技术规范课件
事故处理
如发生意外事故，应立即报告实验室负责人，采 取相应的处理措施，如清洗伤口、消毒环境等。
CHAPTER 05
梅毒实验室检测结果分析与 解读
检测结果判定原则
明确检测原理
01
了解和掌握梅毒检测的基本原理和方法，包括抗原抗体反应、
梅毒的实验室检测与 技术规范课件
目录
• 概述 • 梅毒的实验室检测技术 • 梅毒实验室规范化操作流程 • 梅毒实验室技术规范与标准操作规程 • 梅毒实验室检测结果分析与解读 • 梅毒实验室检测新技术与发展趋势
CHAPTER 01
概述
定义与背景
梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢 性传染病，可累及全身器官。
基于免疫学技术的检测方法改进与创新
化学发光免疫分析
该技术结合了化学发光和免疫分 析的优点，具有高灵敏度、宽线 性范围和良好的稳定性，已广泛 应用于梅毒血清学检测。
酶联免疫吸附试验
该技术利用酶催化底物反应产生 光信号，从而实现对梅毒抗体的 定量检测，具有操作简便、成本 低等优点。
基于生物信息学在梅毒诊断中的应用前景
合理布局实验室空间，设置独立 的阳性血清和脑脊液检测区域，
以避免交叉污染。
实验器材
使用一次性实验器材，如注射器 、吸管、离心管等，避免交叉感
染。
实验人员
实验人员应接受专业培训，熟悉 梅毒检测的原理、操作流程和质
量控制要求。
标准操作规程
1 2
样本采集
采集血液样本时，应使用真空采血管，避免直接 接触血液。采集脑脊液样本时，应使用无菌穿刺 技术。
血清学筛查
血清学确证
使用酶联免疫吸附试验（ELISA）等血清学 方法筛查患者血清中的梅毒抗体。
梅毒的实验室检测与技术规范课件.
梅毒的实验室检测与技术规范课件.一、教学内容本节课的内容主要围绕梅毒的实验室检测与技术规范展开，涉及的教材章节为《临床微生物学》第十二章第二节。
详细内容包括梅毒病原学、实验室检测方法、检测技术规范及质量控制要点。
二、教学目标1. 理解梅毒病原学特点，掌握梅毒实验室检测方法。
2. 掌握梅毒实验室检测技术规范和质量控制要点，提高检测准确性和安全性。
3. 培养学生实际操作能力，提高实验室检测技能。
三、教学难点与重点教学难点：梅毒实验室检测技术规范和质量控制要点。
教学重点：梅毒病原学特点、实验室检测方法及其操作技巧。
四、教具与学具准备1. 教具：梅毒病原体模型、显微镜、投影仪、PPT课件。
2. 学具：实验服、手套、口罩、消毒剂、检测仪器、试剂。
五、教学过程1. 导入：通过介绍梅毒的危害性，引出梅毒实验室检测的重要性。
2. 理论讲解：（1）梅毒病原学特点；（2）梅毒实验室检测方法：暗视野显微镜检查、免疫学检测、分子生物学检测等；（3）梅毒实验室检测技术规范和质量控制要点。
3. 实践操作：（1）示范操作：教师演示梅毒实验室检测方法，讲解操作技巧；（2）学生分组练习：学生分组进行实验操作，教师巡回指导；（3）实验结果分析：分析实验结果，讨论检测准确性及可能存在的问题。
4. 例题讲解：讲解梅毒实验室检测中常见的实际问题，分析原因和解决方法。
5. 随堂练习：设计梅毒实验室检测的相关题目，巩固所学知识。
六、板书设计1. 梅毒病原学特点2. 梅毒实验室检测方法暗视野显微镜检查免疫学检测分子生物学检测3. 梅毒实验室检测技术规范和质量控制要点七、作业设计1. 作业题目：（1）简述梅毒病原学特点及其检测方法。
（2）论述梅毒实验室检测技术规范和质量控制要点。
2. 答案：八、课后反思及拓展延伸2. 拓展延伸：引导学生关注梅毒实验室检测新技术、新方法的研究进展，提高学术素养。
重点和难点解析1. 梅毒实验室检测技术规范和质量控制要点2. 实验操作技巧及结果分析3. 作业设计中的论述题详细补充和说明：一、梅毒实验室检测技术规范和质量控制要点1. 样本采集：确保采集的样本具有代表性、及时性和无菌性，避免样本污染和降解。
浅谈梅毒螺旋体实验室检查标本的采集与规范操作
浅谈梅毒螺旋体实验室检查标本的采集与规范操作梅毒螺旋体又称苍白密螺旋体苍白亚种，是导致人类患梅毒疾病的病原体，也是以人为唯一宿主的少见病原体。
在临床慢性性传播疾病中，梅毒是常见病种之一，对人类健康的危害性也较为严重。
临床根据感染途径的不同，将梅毒分为先天性梅毒及获得性梅毒，先天性梅毒是梅毒螺旋体通过孕妇的胎盘垂直传播给胎儿，致使胎儿发生感染；获得性梅毒则主要通过性接触传播感染，极少数情况下接吻、哺乳及接触带有梅毒螺旋体的分泌物也可发生感染。
临床根据梅毒患者病程的不同，又将获得性梅毒分为三期，即Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期梅毒。
由于梅毒螺旋体在不含有活体细胞的培养基中无法完成生长繁殖，梅毒的诊断主要依赖于临床标本中的病原体直接检查和血清学诊断，检查方法的选择主要取决于患者的临床表现和标本类型，即检查方法的选择因梅毒患者的病程、取材部位的不同而异。
潜伏期梅毒患者临床症状、体征不明显，多采集血液标本检测梅毒抗体或反应素为主要手段；Ⅰ期梅毒(又称为硬下疳期)患者，外生殖器易形成硬结、溃疡，溃疡部位渗出液中含有大量的梅毒螺旋体，此阶段的感染性较强，用暗视野显微镜容易查见梅毒螺旋体，此期多采集硬下疳渗出液，用暗视野显微镜直接查找运动活泼的梅毒螺旋体活体或镀银染色光学显微镜查找梅毒螺旋体死体为实验室常用检查手段，Ⅰ期梅毒末期，也可以采集患者的血液标本检测梅毒螺旋体抗体或是反应素；Ⅱ期梅毒患者，往往全身皮肤、粘膜出现梅毒疹和淋巴结肿大，其中含有较多梅毒螺旋体，有较强的传染性，血清学反应几乎100%为阳性，此期以采集血液标本检测梅毒抗体或反应素为主，也可采集患者皮损渗液或局部淋巴结抽出液于暗视野显微镜下查找梅毒螺旋体；Ⅲ期梅毒患者，由于病程较长，病变可波及全身组织、器官，其基本损害为慢性肉芽肿和局部组织坏死，皮肤、肝、脾和骨骼常被累及，甚至侵害中枢神经系统而引起神经性梅毒，此期患者的梅毒血清学反应常为阳性，多采集患者血液、脑脊液标本做梅毒血清学检测。
梅毒检测临产绿色通道制度及流程
梅毒检测临产绿色通道制度及流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!以下是一个梅毒检测临产绿色通道制度及流程的示例：一、制度目的为了确保梅毒感染的孕妇能够及时得到诊断和治疗，保障母婴健康，特制定本绿色通道制度。
检验科梅毒胶体金复检流程
检验科梅毒胶体金复检流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!检验科梅毒胶体金复检流程如下：一、准备工作1.1 检查仪器设备：确保胶体金免疫层析仪、梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（胶体金法）等仪器设备正常运行，并在有效期内使用。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
目 的：规范的梅毒螺旋体检验操作，确保检测结果准确。
适用范围：性病实验室工作人员责任 人：实验操作者1、标本的采集与处理1.1标本采集的基本要求1.1.1操作应规范化。
1.1.2所有标本都应当被视为具有传染性，医务人员应戴手套谨慎操作。
1.2梅毒标本采集梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清学检测方法，各期梅毒的检测方法及部位见下表。
1.2.1血液1.2.1.1血清标本根据需要，用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml，室温静置1-2小时（或37℃静置30分钟），待血液凝固、血块收缩后，3000r/min离心10-15分钟，分离新鲜血清，备用。
也可采用保存于2-8℃或-20℃的血清。
溶血、脂血或污染的标本可影响试验结果。
1.2.1.2血浆标本根据需要，用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml，轻轻颠倒混匀8-10次，3000r/min离心10-15分钟，分离血浆，备用。
血库血浆以及EDTA 抗凝血浆同样可以用于梅毒血清学实验（一般仅用于RPR实验，），但易出现假阳性反应（需用血清复试），如用其他抗凝剂应首先评价后再用。
1.2.1.3末梢全血消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择手指或耳垂，1岁以下儿童采用足跟部）。
一次性采血针刺破皮肤，用无菌棉签擦掉第一滴血。
收集滴出的血液，立即用于检测。
1.2.2皮损部位组织液1.2.2.1用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片立即用于暗视野显微镜检测，或取渗出液直接涂片，用于镀银染色试验。
1.2.2.2用于核酸检测用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，刮取渗出液，加入有DNA保存液（1ml/管）的标本管中，备用。
1.2.3淋巴液无菌操作下穿刺腹股沟淋巴结，注入0.3ml无菌生理盐水并反复抽吸2-3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片后立即进行暗视野镜检或备用。
1.2.4脑脊液操作由专业人员进行，一般用腰椎穿刺术获得。
患者侧卧于硬板床，两手抱膝紧贴腹部，头向前胸屈曲，使躯干呈弓形，以髂后上棘连线与后正中线的交点为穿刺点，相当于第3-4腰椎棘突间隙，消毒处理后，用2%利多卡因自皮肤到椎间韧带作局部麻醉。
术者用左手固定穿刺皮肤，右手持穿刺针以垂直背部方向缓缓刺入，针尖稍斜向头部，成人进针深度约4-6cm，儿童约2-4cm。
当针头穿过韧带与硬脑膜时，有阻力突然消失落空感，此时可将针芯慢慢抽出，即可见脑脊液流出，至于合适的容器中，备用。
1.3标本接收的标准1.3.1核对样品与运送单，检查样品管有无破损和溢漏。
如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒并做记录。
1.3.2检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、脂血以及黄疸等情况。
如果样品污染或者认为样品不能被接受，应将样品安全废弃。
并将样品情况立即通知运送机构。
1.3.3对不合要求的标本，可以拒绝接受。
2、梅毒的实验室检查2.1梅毒螺旋体暗视野显微镜检查2.1.1原理梅毒螺旋体侵入人体后，在皮肤黏膜下增殖，并很快沿着淋巴管到达附近淋巴结，经过2-4周的潜伏期，在侵入部位发生炎症反应，称为硬下疳，数天到1周后，淋巴结肿大。
二期梅毒是梅毒螺旋体由局部经淋巴结进入血液，在人体内大量播散后而出现的全身表现，一般发生在感染后的7-10周或硬下疳出现后6-24周，主要为皮肤黏膜损害，有扁平疣、黏膜斑和玫瑰斑疹等。
患梅毒的孕妇可以通过胎盘使胎儿受染。
研究证明，在妊娠期7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘。
其梅毒患者硬下疳、淋巴结、皮肤黏膜损害以及孕妇羊水中均可检查到梅毒螺旋体。
将标本置于暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上，可使梅毒螺旋体折射出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。
2.1.2方法2.1.2.1仪器耗材：1)暗视野显微镜2)无菌纱布3)不锈钢刮刀4)灭菌棉拭子5)载玻片、盖玻片6)注射器，注射针头7)灭菌生理盐水2.1.2.2检测流程1)将待检标本制成生理盐水涂片，加盖玻片后立即备检。
2)在预先调整好的暗视野显微镜的聚光器上加数滴浸油，轻轻调低聚光器，使之在载物台下方。
3)将标本玻片置载物台上，上升聚光器，使浸油接触载玻片底面，避免浸油内有气泡。
4)镜检：先低倍后高倍，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。
2.1.3结果2.3.1.1结果判读：在暗视野显微镜下观察,发现有纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长6-20um,直径小于0.2um，有6-14个螺旋，具有旋转、蛇行及伸缩等特征性的运动方式，可判断为梅毒螺旋体。
2.3.1.2结果报告：暗视野显微镜下若发现上述特征的梅毒螺旋体则报告阳性结果；未见到上述特征的梅毒螺旋体则报告阴性结果。
2.1.4临床意义1)梅毒螺旋体暗视野显微镜检测阳性在临床上可确诊梅毒，特别是对于有皮肤黏膜损害和淋巴结病变的一、二期梅毒的诊断具有重要价值，且具有快速，方便，易操作等特点。
2)若未能发现梅毒螺旋体，不能排除梅毒诊断。
阴性结果原因可能为：标本中的微生物数量不足（单次的暗视野检测其敏感性低于50%）、病人已接受治疗、皮损已接近自然消退或取自非梅毒性皮损。
3)无论暗视野显微镜检查的结果如何，都应进一步进行血清学检测。
2.1.5注意事项1)取材前，应用无菌生理盐水清洁皮肤表面，取材时应注意无菌操作。
2)应取到组织渗出液，尽量避免出血，以提高检出阳性率。
3)取材后应立即置暗视野显微镜下观察，如搁置太久，梅毒螺旋体活动能力会下降，导致镜下难以观察到阳性结果。
4)对口腔溃疡标本，在暗视野显微镜下如观察到梅毒螺旋体的特征性形态和运动方式，应与其他螺旋体相区别。
2.2.甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）2.2.1原理梅毒螺旋体一旦感染人体，宿主迅速对感染早期被损害的自身细胞以及梅毒螺旋体细胞表面所释放脂类物质做出免疫应答，在3-4周内可产生抗类脂抗原的抗体（亦称为反应素）。
这种抗体在体外可与心磷脂、卵磷脂和胆固醇等组成的抗原（0.03%心磷脂、0.21%卵磷脂和0.90%胆固醇）发生抗原-抗体反应。
心磷脂、卵磷脂和胆固醇都是醇溶性脂类，遇水形成胶体溶液。
当含有反应素的梅毒血清与之混合时，即粘附在胶体颗粒的周围。
经摇动、碰撞，形成抗原抗体复合物，出现凝集颗粒，即为阳性反应。
甲苯胺红不加热血清试验即在抗原中加入甲苯胺红颗粒作为指示物，与待检血清（浆）中的反应素结合，形成肉眼可见的红色絮状物。
血清不需灭活，肉眼可观察结果。
2.2.2方法2.2.2.1仪器耗材：1)TRUST试剂盒2)水平旋转仪：要求旋转环状直径为2cm，转速为（100±2）r/min，并带有计时器和保湿盖）3)无菌生理盐水（0.9%）2.2.2.2检测流程：2.2.2.2.1定性试验1)试剂准备：检测前将试剂盒置室温预温30分钟2)加标本：吸取50μl血清（浆）置试验卡片圈中，并均匀地涂布在整个卡圈内。
不能将标本溢出环圈外面。
3)加抗原：将抗原轻轻摇匀，在每个标本圈中，用专用滴管针头垂直滴加1滴（60±1滴/ml，约17μl/滴）抗原,不需要手工混匀。
4)反应：将卡片置水平旋转仪上，建议罩上保湿盖，（100±2）r/min旋转8分钟。
5)从旋转仪中取出卡片后立即在亮光下用肉眼观察结果。
用手轻微的旋转或倾斜卡片可有助于弱阳性和阴性标本。
2.2.2.2.2定量实验1)实验卡片准备：在卡片中圈1到圈4中分别标上1:2，1：4，1：8，1：162)稀释液准备：在圈1到圈4中加入50μl生理盐水，勿将盐水液滴涂开。
3)标本稀释：吸取50μl血清（浆）于圈1中，用移液器来回吸放5-6次已混合圈1中的生理盐水和标本，但要避免产生气泡。
从圈1（1:2）中移取50μl到圈2（1：4）用上述同样方法混合后依次稀释至圈3（1：8）和圈4（1：16）。
混旋后从圈4中弃去50μl。
4)依次从圈4-圈1将不同稀释度的标本涂布整个圈内。
5)加抗原等以下实验步骤同定性试验的2-4。
6)如阳性反应滴度大于1;16,则继续稀释以测定最高稀释反应滴度。
2.2.3结果2.2.3.1结果判读1)阳性反应：圆圈内出现中或大的红色絮状物，液体清亮；2)弱阳性反应：圆圈内出现小的红色絮状物，液体混浊；3)阴性反应：圆圈内仅见炭颗粒集中于中央一点或均匀分散。
2.3.3.2结果报告1)定性试验：出现凝集反应报告阳性，不产生凝集反应报告阴性。
2)定量实验：出现凝集反应的血清最高稀释倍数为抗体滴度，结果报告滴度为1：X，X依次为1、2、4等稀释倍数。
2.2.4临床意义1)梅毒螺旋体一旦感染人体后产生抗类脂抗原的抗体，未经治疗可长期存在。
经适当治疗后，抗体可以逐渐减少至转为阴性，早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗后3个月，TRUST抗体滴度可下降2个稀释度，6个月可下降4个稀释度，一期梅毒一般约1年后可转为阴性，二期梅毒2年后可转为阴性。
但晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢，2年后约50%病人血清反应仍为阳性。
2)TRUST定性试验结果可用于现症梅毒诊断。
TURST定量试验结果可用于疗效观察和判愈。
2.2.5注意事项1)生物学假阳性：非梅毒螺旋体抗原血清学试验采用的抗原为心磷脂、卵磷脂和胆固醇的混合物，所检测的抗心磷脂抗体易见于其他多种疾病，如急性病毒性感染、自身免疫性疾病、结缔组织病、静脉吸毒者以及怀孕的妇女等。
因此该类反应会出现假阳性反应。
所以该类试验阳性标本需进一步采用梅毒螺旋体抗原血清学试验（如TPPA、ELISA）等复检，以排除生物学假阳性，确认是否为梅毒螺旋体感染。
2)前带现象：只对早期梅毒患者进行非梅毒螺旋体抗原血清试验时，有时血清中存在高浓度的抗体，导致抗原抗体浓度不匹配，出现弱阳性、不典型或阴性反应的结果，此时需将血清稀释后再进行试验，可出现阳性结果。
该现象称为前带现象。
2.3梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）2.3.1原理梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）是用超声裂解梅毒螺旋体抗原致敏明胶粒子，致敏粒子与待检血清（浆）中的梅毒螺旋体抗体结合，产生肉眼可见的颗粒凝集。
2.3.2方法2.3.2.1仪器耗材：1)TPPA检测试剂盒2)移液器3)保湿盒2.3.2.2检测流程：1)试剂准备：试验前30分钟将待检标本和试剂从冰箱中取出，恢复至室温。
2)加稀释液：每份样本作4孔，用移液器将血清稀释液滴入微量反应板第1孔（100μl），从第2孔-第4孔各滴25μl。
3)样本稀释：用移液器取待检血清25μl置第1孔中，然后以2n 的方式从第1孔稀释至第4孔。
4)加对照液：用移液器在第3孔滴入25μl未致敏粒子；在第4孔滴入25μl致敏粒子。