高效液相色谱仪常见故障及维护与保养

摘 要： 高效 液相 色谱 是 以经典的 液相 色谱 为基础 ， 它是 以高压 下的液体 为 流动相 的 色谱 过 程 。对 液相 色谱进 行 故障排 查及 作好 日 常维护保养 是延 长色谱使 用寿命 的 关键 。本 文对输 液 泵、 检测 器的 常见故 障及其使 用与 维护进 行 分析 。 关键 词 ： 高效液相 色谱 仪 ； 障 ； 故 维护 密封圈 与运动 着 的柱 塞杆 紧密接触 ， 可使 管道 污染 阻 塞是 检测器 常见 故障 。当流 高效 液相色谱 是 以经典 的液 相色谱 为 基 杆 。 它 动相 用 了缓 冲盐 更换 流动 相不 当时 ，常会使 础 ，它是 以高压 下的液 体为 流动 相 的色谱 过 柱 塞 在 泵头 自由运动 而 流 动 相不 漏 出来 ， 倍 程 。它所 用 的固定 向粒度 小（ １ｕ ） 传 质 是 液相 色谱 中最 易磨损 的部件 。有 条件 的实 检测 器管 路 中产 生沉 淀 ，可 先用 ５ 柱体 积 ５ ０ｒ ， — ｎ 有 再用 １ 倍 ０ 快、 柱效高等特点。 高效液相色谱法（Ｐ Ｃ是 验 室可 三个 月 更换 一次 垫 圈，以防止 泵 系统 的非 缓 冲液 反 向流动 相 冲洗系统 ， ＨＬ） 如 流过 ， 后用 ５ 倍 然 Ｏ ６ 年 代后期 发展起来 的一种 分析方 法 。近年 污染 。如 果用 缓 冲盐作 流动相 则更会 加 速垫 柱体 积 的强溶 剂 （ 乙腈 ） ０ 来 ， 保 健食 品 功效 成分 、 在 营养 强 化 剂 、 生 圈的磨损 ，应 及时 冲洗 。垫圈 损坏一 般表 现 维 素类 、 白质的分离测 定等方 面应 用广泛 。 蛋 世 为 ： 泵压力 不稳 、 头漏液 。为 避免上 述故 障 泵 我们 ① 界上 约有 ８％的有机 化合 物可 以用 Ｈ Ｌ ０ Ｐ Ｃ来 的发 生 Ｉ 在 分析 中应 注 意 以下 几点 ： 使 分析 测定 。高效液相 色谱仪是 由输 液 系统 （ 包 用 超纯水 、纯 度级 别较 高的试 剂和 色谱级 溶 括贮 液器 、 高压泵等 ） 、 分离 系统 （ 进样 器 、 剂 配制 流动相 ；② 配好 的流动 相一定 要抽 滤 包括 的柱 体积 的异 丙 醇冲洗 ，最 后换上 反 向流 动 相平 衡 。 检测 器管 路堵 塞 ， 般表 现为柱 压升 高。 一 此时 ， 断开 柱子 ， 接检 测器 。如泵压仍 可 直接 较高 ，可断 定 压力升 高是 由于检测器 管道堵 检 正 色谱 柱等 ） 测系统 （ 括检 测等 ）收集 系统 脱 气 ， 仪 器 有在 线脱 气 装置 ， 最好 在 上 塞造成 。 测 器进 口是常 发生阻塞 的地方 ， 、 检 包 、 即便 也 ｆ 括 馏分 收集 器 、 包 自动 收集 装置 等） 等组 成 。 机 前进行 抽滤 ；③泵 在启 动前 一定要 通过 泄 向 冲洗 效果 常不 明显 。我们 的经验是 将检测 ④ 分 器进 出 口对 调 ， ６ ｏ Ｌ 酸溶 液反 冲检测 这 些系统 就 象人 的脉络 一样 相互 依 赖，每个 液 阀抽 净泵 里 的空 气 ； 用缓 冲盐 洗脱 时 ， 用 ｍＵ 硝 环节 的故 障都会影 响到 分析测 试结 果 的可靠 析 结 束 后 一 定 要 用水 冲洗 泵 和 整 个 流 路 系 器， 这样能很快将阻塞冲开， 但要注意用低流 性 、 性 。因此 ， 相色 谱进 行 故障 排查 统 ， 真实 对液 最后用 有机溶 剂充满 系统 。 速冲洗 ， 压力 变化 。 观察 ２检测 器 的常见故 障及对策 及作好 日常维护保养是延长色谱使用寿命的 ２３池阻 塞和 污染及 对策 ．
关键 。 面就输液 泵 、 下 检测器 的常 见故 障及其 使用 与维护进行 分析 。 １输液泵 的常见故 障及使 用与维 护 输 液 高压泵是 保证 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ系统流 路畅 通、 流量 精确和 压力稳定 的重要 仪器部 件 。 目 前 多用往 复式恒 流柱塞泵 。 主要 由柱 塞杆 、 密 封垫圈和两个单项阀组成 ，用马达带动凸轮 驱 动柱 塞杆作 吸液 和排液 的往 复运动 。常 见 泵 的故 障主要 有 以下几种 ，并提 供解决 的办
法。
液相 色 谱 仪常 用 的检 测 器主 要 有 紫外 、 荧光 和 电化学 检测器 三种 。这些 检测 器 的作 用就是 收集 流经 色谱 分离柱 的各 组分 在检测 器 中的信 号， 组份 分光 吸收值 ， 光 强度／ 根据 荧 电极表 面 电流 的变 化计算 出组分 的浓度 。 检测器 常见故 障及 对策主要 有 ： ２１基 线 噪音较大 及对策 ． 对 于紫外 检测 器 ，氘 灯光 源打 开后要 预 热 ３ 分 钟 以上 ， 线 才能稳定 。氘灯 用 的过 ０ 基 久 ， 近寿 命 期 时 （ 灯 的寿命 约为 １０ 接 氘 ００小 时）会使 基线 噪 音 明显 增 加 ， 及 时更 换 氘 ， 应 灯 。除光 源外 ， 流路 中 的气泡也 会产 生 噪音 。 那 么，怎 样判 断基线 噪音 增大 是 由于光 源灯 的老化 还是 来 自流路 中的气 泡呢 ？ 先 ， 将 首 可 泵 关闭 继续 走基 线 ， 如果 噪音 立 即停止 ， 线 基 呈 一条 直 线， 明基 线噪 音来 自流动 相 中的 说 气泡， 应设 法 排气 。其次 ， 果停 泵后 仍有 噪 如 音 出现 ， 考虑是 灯 的问题 。 应 电化学检 测器 中 的工作电极对气泡十分敏感，仪器的平衡时 间较长， 流路中如果有气泡存在 ， 不仅基线会 出现 尖峰 ， 影响检 测 。因此 ， 电化 学检 还会 做 测时 ， 流动 相 的配制要 很严 格 。水 要 超纯 、 除
一
定 的检 测灵 敏度 。 要特别 注意 ： 但 最后 一定
要用 纯水 冲洗 干净 ， 不要带 来其他 污染 。 高效 液相 色谱 仪是 现代 科学研 究 中广 泛 使用 的分析 仪 器 ， 正确 的使 用 与维护 ， 只有 才 能更 好 的驾驭 它， Ｈ Ｌ 技 术在 生物 医学 等 让 ＰＣ 领域 发挥更 大 的作用 。
１ ． 向阀故 障 １单 由于球 与 阀座密封 不严 ， 导致 液体 倒流 ， 造成 压力 不稳 ， 甚至球 与阀座 粘在 一起 阻死 。 为 避免 单 项 阎中 的宝 石球 和 阀座 被 污染 ， 流 动 相应使 用 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ级 的溶 剂 ，并 且 配好 的 流 动相 一定要用 ０ ５ｍ滤膜过 滤和脱 气 。 果 ．ｕ ４ 如 泵 被 微 粒 污染 ，可 分 别 用 ２ ｍ 水 ＋５ ｌ ５ ｌ ２ｍ 甲 醇＋ ５ ｌ 丙醇＋ ５ ｌ 氯 甲烷 依 次 冲洗 ， ２ｍ 异 ２ｍ 二 最 后再 用所用 的溶液 冲洗 整个 系统 。 注意 ： 冲洗
参 考文献
【杨 祖 英主 编． 品检验 ． 京 ： 学工业 出版 ｌ 】 食 北 化
社 ．０ ０ ２０ ．
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中国新技术新产品
Ｑ Ｑ！ ：
Ｃ ｉ ａＮ ｗ Ｔ ｃ ｎ ｌｇｅ ｎ ｒｄ ｃｓ ｈ ｎ ｅ ｅ ｈ ｏｏ ｉｓａ ｄ Ｐ ｏ ｕ ｔ
工 程 技 术
高效液相色谱 仪常 见故障及维 护 与保 养
徐秀 珍
（ 津 蓟 县 产品 质 量监 督 检 验所 ， 津 ３ １０ ） 天 天 ０９ ０
检 测池 阻 塞和 污染 多见 紫外检测 器 。通 常 ，池 阻塞 的故 障 比较少 见 ，而池污染 常发 生 。 当池受 污染 时 ，一般 表现 为基线 噪音增 大 ， 灵敏 度下 降 。 仪器 此时 ， 对池进行 清洗 。 应 清洗程序如下 ： 回抽 ｌｍ 异丙醇去掉流动 ① Ｏｌ 相残 留；②回抽 ｌｍ 蒸馏水；③ 回抽 ｌｍＬ Ｏｌ Ｏ ６ ｏ Ｌ 酸 ， 过 池 去掉 沉 积物 ， 步 应十 分 ｍｌ 硝 通 ／ 此 小心， 备有防止应急措施 ； 回抽 ２ｒ 蒸馏 ④ Ｏｌ ａ 水 ；⑤ 至 少用 １０ ｌＰ Ｃ级 的水 正 向通 过 ０ ｍＨ Ｌ 池 。 了减 少危险 和麻烦 ， 更充分， 采用 为 清洗 可 下列 步 骤 ： 拆 开柱 ， 检测 器 出 口处接 一 根 ① 在 细径 的 聚 乙烯 管 ， ５ｃ 长 ； 推 高试 剂瓶 ， 约 ０ｍ ② 使水 平线 高于 池约 ４ ｅ ， 乙烯管 另一端 没 ０ｒ 聚 ａ 人清洗 液 中， 检 测器进 口处 用洗耳 球吸液 ， 在 然后利用重力使清洗液 自然流经池；③冲洗 溶液 顺 序 为 ５ ｍ 无 水 乙醇 一５ｒ 蒸馏 水一 ０ｌ ０Ｊ ｎ ２ ０ ｌ ｍ ｌ 硫 酸一 ｌＯｌ ５ｍ ｏＬ ３ ／ Ｏｌ 蒸馏 水 。 ｌ ｌ 用此法 冲 洗不需要拆开池， 无损于管路， 但流速较慢。 对 于电化 学检 测 器 ，要 注 意维护 工作 电极 表面 的清洁 度 。 当检 测器 检测 了大量 较脏 的样品 （ 浆 、 液） 用 的过 久 ， 用化 学法 或物 如血 尿 或 应 理 抛光 法对 电极 表 面入阀中， 紧 它会 贴在 阀体的一 侧 ， 宝石球 难返 回到阀座 ， 使 引 起液体 倒流 ， 导致泵 的压力 和流 速 明显改 变 。 此时应立即打开泻液阀 ， 大流量（ ｌ ｉ） ２ ／ ｎ冲 还原 物外 配好后 一定 要过 滤脱气 ，还应 现用 ｍｍ 洗 泵 ， 至排除 液为直线 型 。 果泵 进气泡 也 现配 。 果泵 系统不 是 Ｙ 直 如 如 Ｋ材料 ， 电化学分 即 可在泵头 上排气 泡 ， 体做 法为 ： 手 固定 析专用仪器 ，而是普通的高效液相色谱不锈 具 用扳 住 进气 泡的泵 头 ， 输 出管 道 的压 帽 ， 动 钢 泵 ， 分析 前应对 系统 中的输液 泵 、 样器 拧开 手 在 进 泵 进液 ， 时可 见到气 泡从孔 中挤 压 出来 ， 这 直 和管道 用 ６ ｏ Ｌ 酸溶 液钝 化 （ 意断 开分 ｍＵ 硝 注 至 无气泡 排 出将 压 帽拧 紧 。如果采 取 上述 方 离 柱 ）或 在 流动 相中加入 Ｅ Ｔ Ｄ Ａ离子 隐 蔽剂 法 仍不 能使 压力 稳定 ， 应考 虑是 密封 垫 圈 坏 可 缩短基 线平 衡 时间 。如 果有较 大 的气 泡进 了？ 或单 向 阀磨 损 、 球不光 滑等 ， 需更换 部件 。 到检 测器 中， 靠泵 冲有 时太 慢 ， 暂时将 泵 光 可 １ ． ２泵垫 圈故障 停止， 关上 电化 学检 测器 ， 拆下 工作 电极 ， 用 泵垫圈常见的故障是渗漏和垫圈受损污 超纯水冲洗电极表面， 但 对液相色谱技术 染 系统 ． 液相 色谱 系统 一般情 况 下不 要使 用 不太熟练的技术员要小心操作 ，不宜反复这 强酸强碱溶液， 样品 Ｐ Ｈ值一般调到中性 ． 才 样拆 卸 。 可进样 。如果 强酸强 碱会 损坏 密封 垫和 柱塞 ２ ． ２检测 器污染 及对 策