斑马鱼LD50鱼类(斑马鱼)急性毒性(重铬酸钾)实验报告

鱼类(斑马鱼)急性毒性(重铬酸钾)实验报告

一、实验目的与实验要求

1、通过本实验，熟悉和掌握急性毒性试验的设计、条件、操作步骤，以及

试验结果的计算、分析和报告等全过程。

2、掌握常用的动物染毒途径和方法。掌握急性毒性实验设计，操作方法，

结果判定。

3、了解一次或24小时内多次给予受试化学物后，动物所产生的急性毒性反

应及其严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因，观察受试物毒

性反应与剂量的关系，求出半数致死量。能较熟练地计算出LC50及毒性判定。

4、对比观察毒物对斑马鱼的作用。

5、体验开放式实验教学，培养生物实验意识，提高学习的主动性、获取实

验知识的能力和撰写实验报告水平。

二、实验方案

1、实验仪器

天平、手套、50mL烧杯、量筒、培养皿、鱼缸、曝气装置

2、实验药品

斑马鱼100条、重铬酸钾、鱼食

3、实验原理

(1)方法的设置

鱼类毒性实验方法可以分为静态法和动态法两大类。本实验采用静态法，以96小时为一试验周期，在24、48、72、96小时记录斑马

鱼的死亡率，确定斑马鱼死亡50%时的受试物浓度。半数致死浓度用

24h LC50、48h LC50、72h LC50和96h LC50表示，并记录无死亡的最

大浓度和导致鱼类全部死亡的最小实验浓度。

(2)受试药物

受试毒物要为常见毒物，并在水体中会存在，对鱼类养殖的影响较为严重。另外受试毒物在水中应要稳定，不易分解，易溶解等。

(3)受试鱼类

实验鱼类一般选择对污染物敏感，在生态类群中具有代表性，经济价值比较高，来源丰富、取材方便、遗传稳定，生物学背景资料

丰富，大小适中，在室内条件下易于饲养和繁殖的种类。

斑马鱼是国际上通用的鱼类急性毒性实验鱼种。建议的实验温度21-25℃，建议实验鱼的全长2.0∓1cm。

(4)研究意义

鱼类是水生食物链的顶级生物，也是水体中最为重要的经济动物。

在污染水体中，当污染物达到一定浓度时，就会引起鱼类各种中毒反

应，例如行为失常，组织器官病变，生理功能紊乱乃至死亡。在人为

控制条件下，进行各种鱼类毒性实验，不仅用于化学品毒性强度测定、

水体污染程度、废水及其处理效果检查，而且也为制定水质标准、

评价环境质量和管理废水排放提供科学依据。因此，开展鱼类急性毒

性实验的研究，对实验结果给出正确合理的评价，对于我国水资源保

护具有重要意义。

4、实验步骤

(1)预实验

正式实验前必须对实验用鱼进行驯养，然后根据预实验得出的结果(以上部分内容可另行安排实验时间)，在包括使鱼全部死亡的最低

浓度和96h鱼类全部存活的最高浓度之间至少应设置5个浓度组。每

个实验浓度组应至少设3个平行系列，每一系列设一个空白对照。

(2)正式试验

浓度系列：每组分别取0，50，100，150mg/L重铬酸钾加入鱼缸水中，充分混匀。

在实验开始后3h或6h观察各处理组鱼的状况，并记录实验鱼的异常行为〈如鱼体侧翻、失去平衡，游泳能力和呼吸功能减弱，色素

沉积等〉。

至少在24h、48h、72h和96h后检查受试鱼的状况，并做记录。

如果受试鱼没有任何肉眼可见的运动，如鳃的扇动、碰触尾柄后无反

应，即可判断该鱼已死亡。观察并记录死鱼数目后，将死鱼从容器中

取出。

三、实验结果与数据处理

1、斑马鱼数据记录情况

表1斑马鱼时间-存活条数

10 4 4 3 3 3 3

40 4 4 4 4 4 4

70 4 4 4 4 4 4

100 4 4 3 3 3 3

150 4 4 4 4 4 2

2、数据处理结果（直线内插法）

表2 斑马鱼死亡率-浓度关系

0 0 0 0 0 0 0

10 0 0 25 25 25 25

40 0 0 0 0 0 0

70 0 0 0 0 0 0

100 0 0 25 25 25 25

150 0 0 0 0 0 50

图1 24LC50图2 48LC50任取72小时数据分析误差25-0/25=100%，任选100mg/L浓度分析误差24-48小时25-0=25，其他小时25-25=0

四、实验结论

1、数据评价

a.由表格记录数据仅126小时150mg/L浓度死亡率为50%其他数据作

图不能够得出LC50。

b.由误差分析可以得到数据误差率为100%，因而可以认为鱼类死亡为

偶然因数或者因饥饿死亡，数据不具参考价值。

c.由预实验和相关文献分析得到斑马鱼的24小时半致死浓度为

350mg/L，大于所设的150mg/L的范围。

d.有上述实验结果对照《化学物质对鱼类急性毒性危害分级标准》

150mg/L对斑马鱼为低毒。

2、原因分析

a.所设浓度不在范围之内，故现象不明显。

b.实验之前鱼类没有养殖好，存在饥饿等不适应因素。

c.药品被水里有机物影响。

五、实验心得体会

1．实验用水使用高质量的自然水或标准稀释水(见本节附录)，也可以使

用饮用水(必要时应除氯)。

2．溶解氧不低于空气饱和值的60%。曝气时不能使受试物明显受损。

3．预实验不够准确，故没有很好的得到实验数据，因而需要预习充分。