医学分子生物学考试重点

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医学生物与分子生物学复习资料

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医学生物与分子生物学复习资料名词解释1、肽键:肽键是一分子氨基酸的α-羧基和一分子氨基酸的α-氨基脱水缩合形成的酰胺键,即-CO-NH-。

氨基酸借肽键联结成多肽链。

2、蛋白质的一级结构:指多肽中从N-端到C-端的氨基酸序列,包括二硫键的位置。

3、蛋白质的二级结构:蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构,也就是该段肽链主链骨架原子的相对空间结构。

4、结构域:是生物大分子中具有特异结构和独立功能的区域,特别指蛋白质中这样的区域。

5、氨基酸等电点:在某一pH的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等,所带净电荷为零,呈电中性,此时溶液的pH称为该氨基酸的等电点。

6、蛋白质的变性:在某些物理和化学因素作用下,其特定的空间构象被破坏,即有序的空间结构变成无序的空间结构,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失,称为蛋白质的变性。

特点:蛋白质的变性不涉及一级结构的改变,蛋白质变性后,其溶解度降低容易沉淀、黏度增加,生物活性丧失,易被蛋白酶水解。

7、蛋白质的空间结构:包括二级、三级和四级结构,蛋白质分子的多肽链按照一定方式折叠盘绕成特有的空间结构,也称为蛋白质的构象或高级结构。

8、蛋白质的复性:指蛋白质变性程度较轻,去除变性因素后,有些蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能。

9、变构效应:一个蛋白质与其配体(或其他蛋白质)结合后,蛋白质的空间结构发生改变,使它适用于功能的需要,这一类变化称为别构效应或变构效应。

10、化学修饰:酶蛋白肽链上某些残基在酶的催化下发生可逆的共价修饰,从而引起酶活性的改变,这种调节称为酶的化学修饰。

11、蛋白质模体:指的是由2个或3个具有二级结构的肽段,在空间上相互接近,形成一个特殊的空间结构。

12、肽单元:是指肽单元肽键中的4个原子及相邻的2个α-C原子重复形成的长链结构DNA分子两条链上的碱基通过氢键连接成碱基对,并且碱基配对有一定的规律:A一定与T配对,G一定与c配对.碱基之间的这种一一对应的关系,叫碱基互补13、DNA的一级结构:是指DNA分子中的脱氧核苷酸的排列顺序。

医学分子生物学(新)重点知识大全

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泛基因阶段孟德尔的遗传因子阶段摩尔根的基因阶段顺反子阶段操纵子阶段现代基因阶段DNA分子中含有特定遗传信息的核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。

合成有功能的蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核酸序列(通常是DNA序列)。

一个基因应包含不仅是编码蛋白质肽链或RNA的核酸序列,还包括为保证转录所必需的调控序列、5′非翻译序列、内含子以及3′非翻译序列等所有的核酸序列(蛋白质基因和RNA基因)。

根据其是否具有转录和翻译功能可以把基因分为三类第一类是编码蛋白质的基因,它具有转录和翻译功能,包括编码酶和结构蛋白的结构基因以及编码阻遏蛋白的调节基因第二类是只有转录功能而没有翻译功能的基因,包括tRNA基因和rRNA基因第三类是不转录的基因,它对基因表达起调节控制作用,包括启动基因和操纵基因。

原核生物基因组:染色体基因组(chromosomal genome)染色体外基因组(extrachromosomal genome )真核生物基因组:染色体基因组(chromosomal genome)染色体外基因组(extrachromosomal genome )生物体的进化程度与基因组大小之间不完全成比例的现象称为 C value paradox,又称C值悖论)病毒基因组很小,且大小相差较大病毒基因组可以由DNA组成,或由RNA组成多数RNA病毒的基因组是由连续的RNA链组成基因重叠基因组的大部分可编码蛋白质,只有非常小的一部份不编码蛋白质形成多顺反子结构病毒基因组都是单倍体(逆转录病毒除外)噬菌体(细菌病毒)的基因是连续的,而真核细胞病毒的基因是不连续的1981年,美国首先发现获得性免疫缺陷征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS),其病原体是一种能破坏人免疫系统的逆转录病毒1986年,命名为:人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)HIV特异性地侵犯并损耗T细胞而造成机体免疫缺陷HIV如何感染免疫细胞并复制捆绑――当HIV病毒的gp120蛋白捆绑到T-helper细胞的CD4蛋白时,HIV病毒附着到机体的免疫细胞上。

医学分子生物学简答题

医学分子生物学简答题

四、简答题1.碱基对间在生化和信息方面有什么区别?2.在何种情况下有可能预测某一给定的核苷酸链中“G”的百分含量?3.真核基因组的哪些参数影响Cot1/2值?4.请问哪些条件可促使DNA复性(退火)?5.为什么DNA双螺旋中维持特定的沟很重要?6.大肠杆菌染色体的分子量大约是2.5×109Da1),核苷酸的平均分子量是330Da,两个邻近核苷酸对之间的距离是0.34mn;双螺旋每一转的高度(即螺距)是3.4nm,请问:(l)该分子有多长?(2)该DNA有多少转?7.曾经有一段时间认为,DNA无论来源如何,都是4个核甘酸的规则重复排列(如,ATCG.A TCG.A TCG.A TCG…),所以DNA缺乏作为遗传物质的特异性。

第一个直接推翻该四核苷酸定理的证据是什么?8.为什么在DNA中通常只发现A—T和C—G碱基配对?9.列出最先证实是DNA(或RNA)而不是蛋白质是遗传物质的一些证据。

10.为什么只有DNA适合作为遗传物质?ll.什么是连锁群?举一个属于连锁基因座的例子。

12.什么是顺反子?用“互补”和“等位基因”说明“基因”这个概念。

13.对于所有具有催化能力的内含子,金属离子很重要。

请举例说明金属离子是如何作用的。

14.列出真核生物mRNA与原核生物mRNA的区别。

15.列出各种tRNA所有相同的反应及个别tRNA的特有反应。

16.在体内,rRNA和tRNA都具有代谢的稳定性,而mRNA的寿命却很短,原因何在?17.为什么真核生物核糖体RNA基因具有很多拷贝?18.为什么说信使RNA的命名源自对真核基因表达的研究,比说源自对原核基因表达的研究更为恰当?19.说明为什么mRNA仅占细胞RNA总量的一小部分(3%一5%)。

20.为何rRNA和tRNA分子比mRNA稳定?21.起始tRNA具有哪两种与其他tRNA不同的特性?22.区别rRNA和mRNA在翻译中的作用。

23.氨基酸分子如何与正确的tRNA分子连接?24.简要说明证明信使的存在及其本质为RNA的证据。

分子生物学复习重点

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分子生物学复习重点名词解释1.R NAi:由一类小分子RNA介导基因沉默的机制称为RNA干扰(RNAi)2.信号转导:细胞通讯启动细胞内一系列化学反应,导致一组成分的活性、水平或亚细胞定位改变,最终引起细胞反应,包括改变代谢物浓度和代谢速度,最终导致细胞的生长、分裂、分化、衰老、死亡速度改变,这一过程称为信号转导。

3.基因组:细胞或生物体中,一套完整单体的遗传物质的总和即为基因组4.启动子:是指基因序列中能被RNA聚合酶识别、结合、,从而形成转录起始复合物并启动转录的DNA序列,大多数位于基因(或操纵子)转录区的上游,具有方向性,属于调控元件。

5.基因诊断:基因诊断属于分子诊断,是指直接检测基因组中致病基因或疾病相关基因的结构异常或表达水平的改变,或病原体基因的存在,从而对人体健康做出评价,或对人体疾病做出诊断。

6.逆转录:逆转录又称反转录,是以RNA为模板,以dNTP为原料,在逆转录酶的催化下合成DNA 的过程。

这是一个从RNA向DNA传递遗传信息的过程,与从DNA向RNA传递遗传信息的转录过程相反,所以称为反转录。

7.c DNA文库:是指某生物某一发育时期所转录的mRNA 全部经反转录形成的CDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。

8.密码子:信使RNA链上(或DNA)决定一个氨基酸的相邻的三个碱基,亦称三联体密码。

9.蛋白质组学:应用组学技术研究一定条件下的蛋白质组,包括组成、结构、性质、功能、分布、相互作用和条件变异等,建立和应用蛋白信息数据库。

10.基因治疗:是指在基因水平上治疗疾病,包括基因添加、基因置换、基因修饰、基因干预、自杀基因治疗、免疫基因治疗等。

简答题1.基因治疗方法和步骤基因治疗是指在基因水平上治疗疾病,包括基因添加、基因置换、基因修饰、基因干预、自杀基因治疗、免疫基因治疗等。

基因治疗的方法主要包括(1)将正常基因导入病变细胞,表达产物参与细胞代谢。

(2)将反义核酸导入病变细胞,抑制致病基因的过度表达。

医学分子生物学重点汇总

医学分子生物学重点汇总

分子生物学:从分子水平研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的学科。

医学分子生物学:从分子水平研究人体和疾病相关生物在正常和疾病状态下生命活动及其规律、从分子水平开展人类疾病的预防、诊断和治疗研究的科学。

基因:是负责编码RNA或一条多肽链的DNA片段,包括编码序列、编码序列外的侧翼序列及插入序列结构基因:基因中编码RNA或蛋白质的DNA序列。

顺式作用元件:真核生物生物基因中的调控序列,包括启动子和上游的启动子元件、增强子、反应元件和poly(A)加尾信号基因突变改变遗传信息的几种形式?断裂基因:真核生物基因在编码区内含有非编码的插入序列。

基因型:是指逐代传递下去的成对因子的集合,因子中一个来源于父本,另一个来源于母本。

表现型(phenotype):是指一些容易区分的个体特征的总和增强子:一段含有多个作用元件,可以特异性的与转录因子结合,增强基因的转录活性的短的DNA序列。

转录:遗传信息从DNA分子抄录到RNA分子的过程基因组(genome):泛指一个细胞或病毒的全部遗传信息。

真核生物基因组:指一套完整单倍体DNA(染色体DNA)的全部序列,既包括编码序列,也包括大量存在的非编码序列。

原核生物基因组结构特征:其结构比较简单,通常由环状双链DNA分子组成,具有操纵子结构,基因密度高,编码序列比例大,含有编码同工酶的同基因,不同元和生物基因组中的GC含量变化大。

其非编码区域主要是一些调控序列,细菌的基因组可产生转座现象,还含有可以自主复制的质粒DNA。

真核生物基因组结构特征:真核基因组一般比较庞大,结构基因所占的比例小,编码序列就更少,且存在大量重复序列。

由染色体DNA和染色体外DNA组成,非编码序列多于编码序列,具有多基因家族和假基因操纵子(operon):原核生物的绝大多数结构基因按功能相关性成簇地排列于染色体上,连同其上游的调控区(包括启动子和操作元件)以及下游的转录终止信号共同组成一个基因表达单位。

医学生物化学考试重点复习内容

医学生物化学考试重点复习内容

医学生物化学考试重点复习内容医学生物化学是医学专业中的一门重要课程,它研究生物体内生物化学过程的基本原理和分子机制。

在医学生物化学考试中,学生需要掌握一系列的重点内容,下面将从分子生物学、代谢途径和生化分析等方面进行论述。

一、分子生物学分子生物学是医学生物化学的基础,它研究生物体内的基因表达、蛋白质合成和细胞信号传导等过程。

在考试中,学生需要掌握DNA的结构和复制、RNA的转录和翻译、基因调控以及蛋白质的结构和功能等内容。

1. DNA的结构和复制:DNA是生物体内存储遗传信息的分子,它由核苷酸组成。

学生需要了解DNA的双螺旋结构、碱基配对规律以及DNA的复制过程,包括DNA的解旋、复制酶的作用和DNA链的合成等。

2. RNA的转录和翻译:RNA是DNA的转录产物,它在细胞中起着重要的信息传递和蛋白质合成的作用。

学生需要了解RNA的结构和功能,以及RNA的转录过程和翻译过程中的密码子和氨基酸对应关系。

3. 基因调控:基因调控是细胞内基因表达的调节过程,它包括转录因子的结合和启动子的活化等。

学生需要了解基因调控的机制,包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA的调控等。

4. 蛋白质的结构和功能:蛋白质是生物体内功能最为复杂和多样的分子,它们具有结构和功能的密切关联。

学生需要了解蛋白质的结构层次、氨基酸序列和蛋白质的功能调控机制等。

二、代谢途径代谢途径是医学生物化学的核心内容,它研究生物体内物质的合成、分解和能量的转化。

在考试中,学生需要掌握糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢等重点内容。

1. 糖代谢:糖代谢是维持生命活动所必需的能量供应途径,它包括糖原的合成和分解、糖酵解和糖异生等过程。

学生需要了解糖代谢途径中的关键酶和调控机制,以及糖尿病等疾病的发生机制。

2. 脂代谢:脂代谢是维持细胞结构和功能的重要途径,它包括脂肪酸的合成和分解、胆固醇代谢和脂蛋白转运等过程。

学生需要了解脂代谢途径中的关键酶和调控机制,以及高血脂症等疾病的发生机制。

医学分子生物学的重点

医学分子生物学的重点

第六章基因表达调控1.顺式作用元件:指调控真核生物结构基因转录的DNA序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和反应元件等。

它们通过与反式作用因子相互作用来发挥转录调控作用。

2.反式作用因子:指真核基因的转录调节蛋白,包含DNA结合结构域和转录激活结构域。

它们与顺式作用元件、RNA聚合酶相互作用,以及转录因子之间相互协同或者拮抗,反式调控另一基因的转录。

3.操纵子:原核生物绝大多数基因按照功能相关性成簇串联排列,与启动子、操纵基因等调控元件共同组成一个转录单位,实现协调表达。

4.增强子是一种能够提高转录效率的顺式作用元件。

5.真核生物的调控元件:顺式作用元件和反式作用因子6.顺式作用元件是指起转录调控作用的DNA序列,包括启动子、增强子、沉默子等。

7.转录水平的调控是原核生物基因表达的关键环节。

8.大肠杆菌的RNA聚合酶是σ亚基和核心酶构成。

9.转录起始是真核生物基因表达调控的关键。

10.真核生物表达可以在DNA水平、转录水平、转录后水平、翻译水平、翻译后水平上进行调控。

11..基因表达调控的基本规律是?A、基因表达具有时空特异性。

B、诱导表达和阻遏表达是基因表达调控的普遍方式。

C、基因表达受顺式作用元件和反式作用因子共同调节。

D、蛋白质-DNA以及蛋白质-蛋白质的相互作用是基因表达调控的分子基础。

E、基因表达调控是多层次的复杂调节。

12.真核基因组的特点有?A.真核基因组比原核基因组大得多。

B.真核基因组中只有10%的序列编码蛋白质、rRNA、tRNA。

C.真核生物编码蛋白质的基因是不连续的,转录后需要剪接去除内含子,这就增加了基因表达调控的层次。

D.真核生物是一个结构基因转录生成一条mRNA,即mRNA是单顺反因子,许多功能相关的蛋白将涉及多个基因的协调表达。

E.真核生物DNA在细胞核内与多种蛋白质结合构成染色质,这种复杂的结构直接影响着基因表达。

F.真核生物的遗传信息不仅存在于核DNA上,还存在于线粒体DNA上,调控既相互独立而又需要协调。

分子生物学知识点整理

分子生物学知识点整理

分子生物学知识点整理1.基本分子生物学概念:基因、DNA、RNA和蛋白质是分子生物学的基本概念。

基因是一段DNA序列,负责编码产生RNA和蛋白质。

DNA是脱氧核糖核酸,由含有遗传信息的碱基序列组成。

RNA是核糖核酸,负责将DNA的信息转录成具体蛋白质的制作指令。

蛋白质是由氨基酸组成的大分子,负责细胞的结构和功能。

2.DNA的结构:DNA是双螺旋结构,由两条互相缠绕的链组成,这两条链通过碱基之间的氢键相互连接。

DNA的碱基包括腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)。

3.DNA复制:DNA复制是细胞分裂的过程中,DNA双链被复制为两条相同的DNA双链。

这是生命的一个基本过程,确保每个新细胞都有完整的遗传信息。

DNA复制是由DNA聚合酶酶进行的,它们能够将新的碱基加到原有的DNA链上。

4.转录:转录是将DNA的信息复制成RNA的过程。

这个过程包括三个步骤:启动、延伸和终止。

在转录开始时,RNA聚合酶酶会识别DNA链上一个特定的启动位点,然后沿着DNA模板链向前延伸合成RNA链。

转录的终止是由特定的序列标志着的,一旦被识别,RNA聚合酶酶就会停止合成RNA。

5.翻译:翻译是将RNA的信息转化成蛋白质的过程。

这个过程涉及到tRNA和核糖体的作用。

tRNA具有与特定氨基酸结合的能力,并根据mRNA 模板上的密码子序列,将氨基酸逐个带入核糖体中合成蛋白质。

6.基因调控:基因调控是细胞内基因表达的调控机制,使细胞能够根据需要调整哪些基因的表达,以适应不同的环境条件。

这包括启动子、转录因子和RNA干扰等机制。

7.基因突变和遗传变异:基因突变是指在DNA链上发生的改变,可能导致蛋白质的结构和功能的改变。

遗传变异包括基因重组、基因扩增和基因缺失等,能够产生新的基因组和生物特征。

8.PCR:聚合酶链式反应(PCR)是一种用于扩增DNA片段的技术。

它涉及到短的引物,用于界定所需扩增的DNA片段,然后通过多次的加热和冷却循环,DNA被不断复制,产生大量的DNA片段。

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一、概念:1.旁侧序列(侧翼序列):存在于结构基因的第一个和最后一个外显子外侧的一段不被转录的非编码区。

2.断裂基因:真核生物的结构基因的DNA序列(转录部分)由编码序列和非编码序列两部分组成,编码序列(外显子)是不连续的,被非编码序列(内含子)分割开来,形成镶嵌排列的断裂方式,故真核基因又被称为断裂基因。

3.顺式作用元件:是指与靶基因处在同一条染色体(DNA)上,起调控作用的DNA序列。

通常不编码蛋白质,位于基因的旁侧或内含子中,包括启动子、增强子、终止子、反应元件和沉默子等。

4.反式作用元件:能特异地结合靶基因的顺式调控元件上,来调控另一个基因表达的基因编码产物(蛋白质或RNA(microRNA,piRNA)等)称为反式作用因子,编码反式作用因子的基因与受调控的基因多半不在同一条染色体上。

5.RNA编辑:某些RNA,特别是mRNA前体的一种加工方式,如插入,删除,或取代一些核苷酸残基,导致DNA所编码的遗传信息发生改变,成为RNA编辑。

6.因沉默机制被称为RNA干扰(RNAi)。

7.基因打靶:是利用活细胞染色体DNA可与外源DNA的同源序列发生同源重组的性质,以定点修饰改造染色体上某一基因的方法。

8.基因组DNA文库:将某生物体的全部基因组DNA 用限制性内切酶或机械力量切割成一定长度范围的DNA片段,与合适的载体在体外重组并转化相应的宿主细胞, 在培养基上选择性生长的阳性菌落的集合称基因组DNA文库,简称G-文库。

9.cDNA文库:以来源于特定(类型或发育阶段)组织的mRNA为模板,用逆转录酶合成cDNA;与含有某一种限制酶切点的双链寡核苷酸接头连接后,用该酶切割成粘性末端,与载体连接后转化宿主细胞, 由此得到的所有阳性菌落总和,称该组织的cDNA文库. 10.遗传异质性:几个基因中的任何一个发生突变都可以导致相同的表型。

遗传异质性的存在也阻碍了基因定位的进程11.单亲二倍体:所有染色体(2n)来自父或母单方的二倍体。

在胚胎时夭折,父源的就形成葡萄胎,母源的就形成卵巢畸胎瘤。

12.单亲二体型:一对同源染色体都来自父或母方,一般三体型丢失一条后其数目正常,但都来自于单亲。

13.早现遗传:一些遗传病表现出连续世代传递中发病年龄提早,病情也加重,这种现象就称为早现遗传。

这与动态突变中三核苷酸拷贝数的扩展程度有关。

14.遗传印记:双亲的基因或染色体存在功能上的差异,因而基因来自父方或母方而产生不同表现型的现象。

这是由于生殖细胞分化过程中受到不同修饰的结果。

15.动态突变:某些遗传性疾病与三核苷酸重复拷贝数的扩展有关,三核苷酸重复拷贝数在正常情况下有一定的变异范围,而扩展时就表现为疾病,这种突变不稳定,其拷贝数与病情正相关16.易患性:遗传因素和环境因素共同作用并决定一个个体是否患病的可能性,个体患病的可能性有高有低,大多数为中等水平17.易感性:遗传因素决定一个个体患病的风险(遗传因素:若干微效而具有累积效应的致病基因)。

在复杂疾病中,若干作用微小但有累积效应的致病基因构成了个体患某种病的遗传因素18.数量性状:在群体中不可分出具有和不具有该性状的全部群体,性状的变异在群体中的分布是连续的,单峰。

19.肿瘤抑制基因(TSG):存在于正常细胞中能够抑制细胞恶性转化,对细胞的增殖起负性调节作用的基因,其失活使正常细胞增殖失控,进而转化形成肿瘤细胞。

20.癌基因:存在于致癌病毒、人和动物细胞中能导致细胞恶性转化的核酸片段,促进细胞的生长和增殖。

21.微卫星不稳定(MSI):指基因组中微卫星DNA重复序列的增加或减少所导致的遗传性改变。

22.端粒:是位于细胞染色体末端的一种特殊结构,由端粒DNA序列和端粒相关蛋白(端粒酶,TRF1,TRF2等)组成,对染色体具有保护作用。

23.端粒酶:由RNA和蛋白质组成的复合体,以核内RNA为模板合成DNA的反转录酶。

24..RFLP:又名限制性片段长度多态性,使用限制性DNA内切酶消化某个DNA分子后出现的长度多样性。

25.VNTR:基因组内广泛存在串联重复序列,串联重复首尾相连。

在群体中不同的个体或不同的染色体中,其串联重复的拷贝数不同而产生的多态。

26.间接基因诊断:应用基因内或基因近旁DNA多态为遗传标记进行连锁分析,判断是否获得了带有致病基因的染色体而作出诊断。

27.基因治疗:应用DNA重组技术,将外源目的基因转移到患者体内,使其正常表达,补偿或替代原基因的缺陷和异常而达到治疗目的。

28.反义核酸技术:以反义寡核苷酸或者反义RNA阻断或抑制DNA的转录或翻译,达到靶向抑制基因表达。

二、简答:1.简述DNA结构的基本特征和生物学意义。

DNA结构基本特征:①A=T、C ≡G结合;②碱基的排列顺序就是DNA序列——储存;③双螺旋互补结构是的基础;④双螺旋的沟,尤其是大沟为蛋白质分子结合的场所;⑤双螺旋的互补性是分子识别的原理之一,也是现代分子技术核心技术——分子杂交的基础。

生物学意义:①它是遗传信息的载体,贮存并传递支配生命活动的指令;②它是构建生物体的蓝图;③它是人为操作、研究生命和改造生命特征的元件;④它是生命科学技术遵循的原则。

2.简述线粒体DNA的遗传学特征。

①mtDNA是半自主性,能独立复制、转录和翻译;②Mi基因组的遗传密码与普通密码不同;③mtDNA 为母系遗传;④mtDNA突变率高;⑤mtDNA 具有阈值效应的特性;⑥mtDNA的进化率极高。

3.何为转座子?简述转座子的转座途径?转座子:细胞中能改变自身位置的一段脱氧核糖核酸(DNA)序列,或存在于染色体DNA 可自主复制和移位的基本单位。

转座途径:①复制转座 : 转座因子在转座期间先复制一份拷贝,复制的拷贝转座到新的位置,在原先的位置上仍然保留原来的转座因子。

复制转座有转座酶和解离酶的参与。

转座酶作用于原来的转座因子的末端,解离酶则作用于复制的拷贝。

②非复制转座 : 转座因子直接从原来位置上转座插入新的位置,并留在插入位置上。

这种转座只需转座酶的作用。

非复制转座的结果是在原来的位置上丢失了转座因子,而在插入位置上增加了转座因子。

4.反式作用元件通过哪几种常见的基序与顺式作用元件结合来调节基因的表达?①亮氨酸拉链基序:为一富含亮氨酸的氨基酸拉链。

典型的为每七个氨基酸组成一个单体,两个单体形成双聚体呈Y形结构;②螺旋-环-螺旋基序(HLH):长短两个 -Helix由可塑性的环结合,可使两个螺旋折叠而相反结合,亦可形成异源的二聚体。

这一结构可与特异基因调节蛋白相互作用;③螺旋-转-螺旋(HTH)基序:由一短氨基酸分开的两个α-Helix 组成。

两个α-Helix朝不同方向转,故与HLH不同,在不同平面,主要由其C-末端helix特异识别并结合于DNA大沟,控制所识别的DNA序列;④锌指基序:由四个保守的氨基酸结合一个锌离子形成一个环,通常是串联重复。

一般由2个丝氨酸和2个组氨酸或4个丝氨酸结合一个Zn 2+。

组成一α-Helix和一β-片层或2个螺旋,由Zn2+协调,结合于DNA大沟。

5.因,开放阅读框架是由数个内含子和外显子间相排列的,故选择剪接的外显子不同所表达的基因产物不同;②原核生物的mRNA同时可编码多种蛋白,只编码一中的称单顺反子,编码多种蛋白的称多顺反子,其是一种相邻或相互重叠的基因的转录产物,往往存在前一个编码序列包含或半包含下一个编码序列的现象,且是由一个操纵子控制;③在前体mRNA阶段存在RNA编辑,和再编码以及化学修饰等过程,由细胞内环境调节下序列发生改变,表达不同的蛋白产物6.细胞DNA克隆的主要步骤DNA克隆: 将目的基因/DNA与基因运载体重组,在宿主细胞中表达/扩增得到大量相同DNA片段的过程。

基本过程:①分离纯化目的基因;②构建重组DNA分子;③宿主细胞的转化;④含重组体的宿主细胞的筛选、扩增;⑤分离重组DNA7.载体的一般特性以及常用载体的种类载体特性:①分子量小,以容纳较大的外源DNA ;②有多种限制酶单一识别序列,有助于外源DNA片段插入;③载体DNA被切割并插入外源DNA后,不影响其复制能力;④有标记基因,有利于筛选重组体;⑤克隆载体上要有复制起点,表达载体上还要有启动子。

载体种类:①克隆较小片段DNA的载体:质粒;②克隆中等大小片段DNA的载体:λ噬菌体,粘粒载体;③克隆大片段DNA的载体:细菌人工染色体(BAC)载体,噬菌体P1载体;④克隆巨大片段DNA的载体:酵母人工染色体(YAC)。

8.PCR及PCR-DHPLC的基本原理PCR原理:以合成的两条已知序列的寡核苷酸为引物,在DNA聚合酶作用下,将位于两引物之间的特定DNA片段进行复制。

通过变性,退火,延伸一个循环,每一个循环的产物作为下一个循环的模板,反复进行n次循环,就可以得到2n倍DNA。

PCR-DHPLC原理:PCR扩增后的DNA片断通过一个DNA分离柱进行分离,经流动相洗脱的核酸片段通过紫外或荧光检测器检测转换成数字信号储存于计算机中,然后进行分析。

9.核酸杂交(Southern)的基本原理、步骤及应用原理:是指DNA-DNA杂交,以标记的DNA探针检测靶DNA,应用于DNA分子的检测、分析。

应用:①克隆基因的酶切图谱分析;②基因的定性及定量分析;③基因突变分析:缺失、插入,影响到酶切位点的点突变;④RFLP连锁分析;步骤:①DNA提取提取组织或细胞的基因组DNA②DNA分离限制酶消化DNA ,凝胶电泳分,离大小不同的DNA片段③DNA变性:凝胶中的DNA在碱性溶液中变性④转膜:将变性的DNA片段从凝胶原位转移印迹在硝酸纤维素膜或尼龙膜上⑤杂交:将标记的探针变性,同固着的靶DNA片段杂交,与靶DNA中的互补DNA序列形成异源双链⑥洗膜:未结合的多余DNA探针以及非特异性结合的DNA探针通过洗膜去除⑦放射自显影:将杂交的膜进行放射自显影。

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