食品中菌落总数测定流程图(精)
常见微生物指标检测—菌落总数的测定(食品微生物检验技术课件)
36 3.6×103（cFu/mL）
（4）根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度， 本次实验分别选取1：10；1：100；1：1000三个稀释液，以吸取该稀释度的吸 管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。 （ 5 ） 稀 释 液 移 入 平 皿 后 ， 应 及 时 将 凉 至 460C 营 养 琼 脂 培 养 基 注 入 平 皿 15ml~20mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释 液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。 （6）等琼脂凝固后，翻转平板，置（36±1）0C恒温箱内培养（48±2）h取出， 计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1g（1mL）样品所含菌落总数。
1、菌落总数检验程序
2、检样稀释及培养
（1）以无菌操作，将检样25mL放于含有225mL灭菌蒸馏水水的三角锥瓶 中，摇匀，做成1：10的均匀稀释液。 （2）另取1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭 菌水（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做 成1：100的稀释液。 （3）另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递 增稀释一次，即换用1支1ml灭菌吸管。
3、菌落计算方法
（1）菌落计数方法 做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防
遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总 数。
（2）菌落计数的报告
酱油中细菌总数结果记录
稀释度 平板
10-1
1
2
10-2
12Biblioteka 10-312
菌落数 ＞300 ＞300
35 37
2
未检出
平均菌落数 细菌总数
菌落总数检验(食品微生物课件)
二、菌落总数的报告
（1）菌落数小于100 CFU 时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。
（2）菌落数大于或等于100 CFU 时，第3 位数字采用“四舍五入”原则修 约后，取前2 位数字，后面用0 代替位数；也可用10 的指数形式来表示，按 “四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。
二、菌落总数的报告
知识点：菌落总数测定原理
情境：微生物检测技术 任务：菌落总数测定
课程：食品微生物技术
菌落总数测定原理
一、菌落总数
什么叫菌落总数
食品检样经过处理，在一定条件下(如培养基、培养 温度和培养时间等)培养后，所得每g(mL)检样中形成 的微生物菌落总数。
二、菌落总数测定原理
平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释 之后，其中的微生物充分分散成单个细胞， 取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培 养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见 的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一 个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和 取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
(n1 0.1n2 )d
式中： N——样品中菌落数； ∑C——平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和； n1——第一稀释度（低稀释倍数）平板个数； n2——第二稀释度（高稀释倍数）平板个数； d——稀释因子（第一稀释度）。
一、菌落总数的计算方法
（3）若所有稀释度的平板上菌落数均大于300 CFU，则对稀释度最高的平 板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释 倍数计算。
菌落总数检测报告
一、菌落总数的计算方法
（1）若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板 菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）样品中菌 落总数结果。
菌落总数测定
（（一一））、、样样品品的稀稀释释及及做做平平板板
6、及时将15 mL～20 mL 冷却至46 ℃ 的平板计数琼脂培养基（可放置于 46 ℃±1 ℃恒温水浴箱中保温）倾 注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
1ml 1ml 1ml
生理盐 水
1:10
1:100 1:1000 1:10000
1ml
25g/m 1ml
食品中菌落总数的测定
一、菌落总数
• 食品检样经过处理，在一定条件下 （如培养基、培养温度和培养时间等） 培养后，所得每g（mL）检样中形成的 微生物菌落总数。
二、菌落总数测定的意义
1、判定食品被细菌污染的程度及卫生质量。 2、预测食品存用的期限长短。 3、了解细菌在食品中的繁殖动态。
三、设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设 备和材料如下：
• 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。 • 冰箱：2 ℃～5 ℃。 • 恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。 • 天平：感量为0.1 g。 • 均质器。 • 振荡器。 • 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1
4、上述 操作程序，制备10 倍系列稀释样品 匀液。每递增稀释一次，换用1 次1 mL 无 菌吸管或吸头。
（（一一）、、样样品品的的稀稀释释及及做做平平板 板
5、根据对样品污染状况的估计，选择2 个～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样 品可包括原液），在进行10 倍递增稀释 时，吸取1 mL 样品匀液于无菌平皿内， 每个稀释度做两个平皿。同时，分别吸 取1 mL 空白稀释液加入两个无菌平皿内 作空白对照。
性选择培养温度和时间？
资料源自网络
(四)、检验注意事项
1、对照平板出现几个菌落时，要追加对照 平板；
食品中菌落总数的测定
任务四 平板制备
选择适宜的稀释样液根据对标本情况的估计,选择 3个 适宜稀释度,吸取该稀释度1mL稀释液于空平皿内。
待培养基冷却至46℃左右，以无菌操作倒入无菌培养 皿中。每个平皿倒入约15-20mL培养基，并转动平皿使其 混合均匀。放至水平面上自然冷却凝固，切勿随意晃动而 使培养基表面不平整影响涂布操作。
从样品稀释到平板 制备要求在15min 内 完成。
任务五、培养计数
待琼脂凝固后,倒置平板,置36±1℃温箱内培养48+2h。 平板取出,计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每
g(或mL)样品所含菌落总数。 菌落计数以平板内菌落形成单位（CFU）表示。
恒平 温板 培计 养数
食品中菌落总数的测定
检测依据
GB 4789.2-2010
任务一 仪器试剂准备
• 所用器具干净、烘干、灭菌，既不能存在活菌也不能存在 抑菌物质。
• 应注意无菌操作。
任务二 仪器试剂灭菌
玻璃器皿
----干热灭菌160-170℃ 1-2h
平皿可以用牛皮纸或 双层报纸包扎成捆， 或放入金属筒内再灭 菌。
在吸管粗头顶端约 0.5cm处，塞上一 小段棉花，后用45cm宽的报纸将其 包好。
内部框架 带盖外筒பைடு நூலகம்
电热恒温干燥箱
培养基、生理盐水-----湿热灭菌121 ℃ 15-30min
任务三 样品稀释制备
全过程遵循无菌操作程序
⑴检样处理 以无菌操作取经过充分摇 匀的检样25mL，放入含有225mL灭菌 生理盐水的灭菌广口瓶内做成1:10的均 匀稀释液。
⑵样品稀释 用1mL灭菌吸管,吸取1:10 稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭 菌生理盐水或其他稀释液的试管内（注 意吸管尖端不要触及管内稀释液),充分 振摇试管，使之混合均匀,制备成1:100 的稀释液。另取1mL灭菌吸管,按上项操 作顺序，作10倍递增稀释液,如此每递增 稀释一次,即换用1支1mL灭菌吸管。
简述食品中菌落总数测定流程
简述食品中菌落总数测定流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!食品中菌落总数测定流程一般包括以下步骤：1. 样品采集与制备选择具有代表性的食品样品，如肉类、乳制品、果蔬等。
简述食品中菌落总数测定流程
简述食品中菌落总数测定流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!食品中菌落总数测定流程。
1. 准备。
收集代表性食品样本。
食品中菌落总数的测定
产气 EMB等
乳糖发酵管
革兰氏阳性
革兰氏阴性无芽胞 产气
不产气
大肠杆菌阴性 报告
大肠杆菌阳性 大肠杆菌阴性
报告
报告
检
样
稀
释
各加入1ml 1:100
各加入1ml
各加入10ml 1:10
初 发 酵
单料乳糖 胆盐发酵
管
单料乳糖 胆盐发酵
管
双料乳糖胆
分
盐发酵管
离
检样量1g/ml
检样量0.1g/ml
耶尔森氏菌属 (Yersinia) 欧文氏菌属 (Erwinia)
鼠疫耶尔森氏菌 (Y.pestis)
鼠疫
草原居民欧文氏菌 (E.herbicola)
植物寄生菌，曾从人体肠道及化脓扁桃体中分 离到
二、大肠菌群的测定意义
1、粪便污染的指标菌： 大肠菌群或大肠杆菌
2、以大肠菌群作为粪便指标菌原因
1) 在粪便中数量最大； 2) 在外环境中存活的时间与致病菌大体相
很少引起原发性感染
哈夫尼亚菌属 (Hafnia) 沙雷氏菌属 (Serrati) 变形杆菌属 (Proteus)
蜂窝啥夫尼亚菌 (H.alvei) 粘质沙雷氏菌 (S.marcescens)
普通变形杆菌 (P.vulgaris)
对人无致病性
条件致病菌，引起泌尿系， 呼吸道及创伤感染
食物中毒，泌尿系、呼吸道感染 等
或中心深紫色，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光 滑，常有金属光泽； 在麦康凯琼脂上的典型菌落:呈桃红色或中心桃红、 圆形，扁平，光滑湿润。
EMB平板照片及原理
麦康凯琼脂平板 Age of culture is 24 h
大肠杆菌、大肠菌群选择性显色培养基--COLI ID 用于在37℃下对食品中大肠菌群和大肠杆菌进行检测、计数及大肠杆菌的鉴定