Agilent1200型高效液相色谱仪标准操作、维护保养程序

合集下载

高效液相色谱仪器维护和保养

高效液相色谱仪器维护和保养

HPLC故障诊断
保留时间不稳定。 首先观察保留时间是否有规律的变化,并同时观察压力是否稳定 若压力稳定而保留时间呈有规律变化,多数是色谱柱未平衡好,特别
HPLC日常维护
5. 安装有seal wash组件的,无论是否使用缓冲盐,开泵之前都应该使之 充满流动的液体(10%IPA水溶液)并调流速为20滴/分钟。
6. 正相色谱、反相色谱切换时应使用IPA过渡,长期使用正相,应更换正 相柱塞密封垫
7. 样品进样之前最好过滤,如果样品量太少,可以适当抬高进样针的位 置
Agilent 1100四元泵中使用盐溶液和有机溶剂时,建 议将盐溶液接到下面的 口上,有机溶剂接到上面的梯度阀口 上。有机溶剂通道最好直接在盐溶液通 道的上面。建议定期 用水冲洗所有MCGV通道,以去除在阀口上可能出现的盐 沉淀 。
四元/二元/单元泵日常维护
更好地使用四元泵
将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面(或较高处)。
流程
检测器使用注意事项及日常维护
可变波长紫外检测器使用注意事项. 如果流动池被污染可先用以下方法处理:在不连接色谱柱的情
况下先用高纯水冲洗20分钟,然后用5%硝酸冲洗2小时,最后再 用高纯水冲洗至流出液中性即可。 如上述方法不果,就需更换流动池的检测窗。
上述处理方法也适用于DAD的流动池。
检测器使用注意事项及日常维护
关闭泵,拧开脱气机出口或比例阀入口管线 ,此时溶剂会因为重力流出,脱气机或溶剂过 滤头堵塞时,溶剂会流出不畅或不流出。
Agilent 1100 泵头(Pump Head)结构图
5
Holding/Lock Screw (PEEK)
2 34 6
1
7
带有Seal Wash的泵头结构图

简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项

简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项

简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
安捷伦高效液相色谱仪(Agilent HPLC)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物、环境等领域。

其操作流程和注意事项如下:
操作流程:
1. 准备样品溶液:根据分析目的选择适当的溶剂,将样品溶解或稀释至所需浓度。

2. 准备色谱柱:根据分析需求选择合适的色谱柱,并按照柱床规定的要求进行预处理,如洗涤、调pH等。

3. 连接系统:将色谱柱安装在仪器上,连接好进样器、泵、检测器和废液收集器等组件,确保连接紧密无漏。

4. 设置方法参数:根据分析需求,设置泵的流速、进样器的进样量、检测器的波长和灵敏度等方法参数。

5. 系统平衡:启动泵和检测器,运行空白试验,确保色谱柱和系统内部达到平衡状态。

6. 样品进样:将样品进样器插入样品瓶中,抽取足够的样品并注入进样器,按下进样按钮进行进样。

7. 进行分离:启动泵,使流动相通过柱床,样品分离过程中不断采集检测器的信号。

8. 数据处理:分析和处理检测器输出的信号,得出对应的峰面积、峰高度等结果,进行数据分析和解释。

注意事项:
- 严格按照使用手册和方法要求操作仪器,遵循操作规程,避免误操作和事故发生。

- 确保色谱柱、进样器及连接部分的密封性良好,防止泄漏和污染。

- 选择适当的溶剂和流动相,避免与柱材和样品相互作用,影响分析结果。

- 定期检查和维护仪器,如泵的排气、封头的更换、泄漏点的处理等,确保仪器正常运行。

- 样品处理过程中,注意避免光线、温度和湿度的影响,尽量保持稳定的分析环境。

- 使用仪器前,需提前熟悉相关方法和仪器操作,做好实验前的准备工作。

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作安捷伦高效液相色谱仪 (Agilent High Performance Liquid Chromatography,简称HPLC) 是一种常用的色谱分析仪器,广泛应用于化学、生物、药学等领域中的分析和研究工作。

为了确保正确、可靠地操作 HPLC 仪器,以下是一些规范操作的步骤和注意事项。

1.仪器准备-开启仪器电源,并等待仪器自检完成。

-检查仪器的梯度系统、进样系统、柱温控制系统、检测系统等是否正常。

-检查注射器、柱、检测器等是否清洁干净,并按需更换柱筒。

2.试剂准备-准备所需的溶剂、标准品和样品,并确保其纯度和浓度符合实验要求。

-制备规范的稀释液或内标溶液,以便进行质量控制和校准。

3.方法设置-设置流速、梯度、柱温、检测器波长等实验参数。

-设定样品进样量、进样方式和柱温控制方式。

-根据实验要求选择合适的检测器(如紫外检测器、荧光检测器等)。

4.柱的装置和平衡-根据实验需求选取合适的柱,并将柱安装在柱底座上。

-将导线连接到柱温控制系统,并设置柱温。

-选择适当的流动相溶剂,用它们预平衡柱,以确保柱达到稳定状态。

5.校正与质控-使用标准品进行系统灵敏度和线性范围的校正。

-定期进行质控分析,以检验仪器的准确性和精确性。

-根据需要,进行合适的质量控制和校正操作。

6.样品进样-根据实验要求选择合适的进样方式(如自动进样器、手动进样器等)。

-通过进样器吸取样品,并确保进样量准确无误。

-进行一定的进样准备,如过滤、稀释等。

7.开始分析-确保所有仪器参数正确设置,样品进样准备完毕,并进行柱的平衡。

-点击“开始”按钮,启动分析程序。

-监测分离曲线或结果,确保分析结果的准确性与可靠性。

8.数据分析与存储-持续监测和记录实时分析结果。

-对结果进行后处理和数据分析,如绘制色谱图、峰面积计算等。

-存储数据,以备后续分析和查阅。

9.仪器维护与清洁-使用完毕后,关闭仪器并断开电源。

-清洗注射器和柱等关键部位,以防止残留的样品引起交叉污染。

高效液相色谱仪的操作与维护指南

高效液相色谱仪的操作与维护指南

高效液相色谱仪的操作与维护指南高效液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)作为一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、药学、环境科学等领域。

为了保证仪器的正常运行和获得可靠的分析结果,正确的操作和科学的维护是非常重要的。

本指南将详细介绍高效液相色谱仪的操作和维护方法,以帮助用户正确使用该仪器。

一、高效液相色谱仪的操作方法1. 准备工作在操作前,需要先进行一些准备工作。

首先,检查仪器是否处于稳定的工作环境中,以确保仪器不受外界干扰。

其次,检查所有的连接与密封件是否完好,确保流体不会泄漏。

最后,检查溶剂和样品的储存条件,保证其符合要求。

2. 开机与关闭正确的开机和关闭步骤可以延长仪器的寿命。

开机前,需要检查电源和其他外部连接。

按照仪器的说明书,按顺序打开电源和其他必要的开关。

关闭仪器时,应按照相反的顺序关闭开关,并断开电源。

3. 样品准备与进样在进行进样操作前,需要准备好样品和溶剂。

样品准备时,应遵循相应的样品制备方法,确保样品的准确性和稳定性。

进样时,应根据实验需求设置适当的进样方式,并注意定量准确。

4. 仪器参数设置在进行分析之前,需要设置仪器的参数,以调整流速、温度、检测波长等参数。

仪器的参数设置应根据实验目的和样品特性进行优化调整,确保获得准确的分析结果。

5. 分析运行与数据处理设置好仪器参数后,可以开始进行分析运行。

根据实验要求和样品特性,选择合适的分析方法和梯度程序。

在分析过程中,应定期检查仪器运行状态,注意观察流速、峰面积、保留时间等数据,并记录相关结果。

6. 仪器清洗与维护分析结束后,必须对仪器进行清洗和维护。

首先,关闭流体通道,清除流体残留物和样品残留物。

然后,根据仪器说明书的要求,进行仪器的常规清洗和维护工作。

定期检查和更换液相柱、检测器等易损件,以保证仪器的正常运行。

二、高效液相色谱仪的维护方法1. 液相柱维护液相柱作为HPLC分离的重要组件,需要定期维护和保养。

高效液相色谱紫外检测器操作和维护保养规程

高效液相色谱紫外检测器操作和维护保养规程

文件制修订记录1.目的建立高效液相色谱(紫外检测器)的操作规程,使检验员正确使用高效液相色谱,确保实验结果准确性。

2.适用范围适用于检验人员使用高效液相色谱。

3.操作规程3.1开机:按下输液泵和检测器模块电源开关,蜂鸣器短暂鸣响,进入自检界面,然后进入程序主界面。

打开柱温箱,设置柱温。

3.2排液:将进液管及过滤头放入相应流动相,将排液阀旋钮以逆时针方向旋转180°,以打开排液阀。

开启purge键,以9mL/min的流速开始排空,3min后自动停止排空。

3.3流量设定:在输液泵模块,按“Func”光标在“流量设定”字段中闪烁,按照标准要求,输入0.8或1.0mL,按“Enter”确认。

开始走基线,以低流速运行30min左右。

(要更改其他参数,按“Func”,可依次修改流量、最大压力限制和最小压力限制。

在访问一项时光标在要被修改的字段闪烁,提示输入新值,按“Enter”确认。

按“Func”可以进一步访问其他功能。

按“CE”回到初始界面。

)3.4波长设定:在检测器模块,按“λ”键,光标闪烁,根据国标输入标准中要求的波长,按“Enter”确认。

按“CE”回到初始界面。

3.5登录用户名:电脑开机,打开色谱工作站软件“Survey”,登录,用户名:Admin,密码:a12345。

3.6配置仪器(初次使用时设置):登录仪器配置,选择仪器,根据实验需要,配置仪器单元,选择“仪器1”,将需要的单元添加进去。

不需要的单元移除。

3.7新建项目(初次使用时设置),首先在项目层次结构中选择创建项目的位置,即选择要创建的父项目。

选择父项目文件夹,点击“新建”出现“新建项目”对话框,命名项目。

3.8连接仪器:登录工作站,选择项目后,点击“确定”,在“打开仪器”下空白对话框输入随意数字,点击“确认”,进入仪器操作界面。

右击泵/检测器的图标,点击连接。

3.9新建仪器方法:在泵的图标上右击,选择当前方法,在泵模块,可对泵的流速、梯度压力等进行设置,在检测器模块设置波长,在手动进样器模块设置进样体积20uL,在色谱柱模块,填写色谱柱信息,设置完成后点击保存,方法保存为.IC文件。

安捷伦液相操作维护保养规程

安捷伦液相操作维护保养规程

安捷伦液相操作维护保养规程一、安全操作规范:1.操作前必须穿戴个人防护装备,包括实验服、手套、护目镜等。

2.在操作液相设备时,要保证周围环境干燥、清洁无尘。

3.不得将有机溶剂直接排放到下水道中,应按照相关规定进行处理。

4.避免与有机溶剂发生直接接触,防止引起火灾和爆炸。

在操作过程中要小心避免溢漏。

二、操作准则:1.严密密封液相系统,避免泄漏。

2.在使用气溶胶短管时,注意定期更换新管,并将废弃管进行妥善处理。

3.当不使用设备时,要关闭电源,并将设备清洁干净,避免灰尘和污渍。

4.设备放置时要水平摆放,不可放置在湿润或有机溶剂易波及的地方。

5.使用过程中,要定期检查设备的密封部分是否正常,如有破损应及时更换。

三、操作流程:1.根据实验要求,合理选用相关仪器设备,并调整好设备的参数。

2.操作前先进行设备的预热,保持设备恒定的温度。

3.将待测样品注入进样装置中,确保样品完全进入进样管。

4.打开进样阀,将样品注入到色谱柱中,观察色谱曲线并记录相关数据。

5.实验结束后,使用合适的溶剂将色谱柱进行洗脱,防止发生堵塞现象。

6.将设备进行清洗,除去可能残留下来的污物。

7.对设备进行维护检查,保证下次使用时设备处于良好状态。

四、设备保养:1.定期检查设备的电源线和数据线,如有破损应及时更换。

2.定期清洗仪器的进样口和进样管,防止堵塞。

3.对仪器设备进行定期润滑,确保设备的正常运转。

4.定期校准仪器的测量参数,确保仪器的准确性。

5.确保仪器设备的周围环境干燥,避免设备受潮。

五、事故及处理方法:1.发生溢漏情况时,立即关闭设备,及时清理溢漏物,并通风排气。

3.发生火灾或爆炸时,迅速撤离现场,并使用灭火器等灭火工具进行灭火。

六、员工培训和操作技能提升:1.新员工入职时,进行液相操作培训,包括安全操作规范、设备操作流程等方面的培训。

2.定期组织员工进行操作技能培训和考核,提高员工的操作技能和专业知识水平。

3.鼓励员工参加相关培训和学习,提升专业水平和操作技能。

Agilent 1200液相色谱仪操作规程

Agilent 1200液相色谱仪操作规程一、准备工作:1、开启计算机系统电源进入Windows XP界面。

1、依次开启在线脱气机、泵、检测器电源开关,等待自检完毕。

2、待网络连接成功后,双击桌面上仪器1(联机) ,启动化学工作站,显示主机各单元图标画面。

3、单击泵图标→Setup Pump(1)设置泵参数:5ml/min(2)打开Purge阀(逆时针2—3圈)排气泡,平时常用此仪器需2—3分钟,不常用时需时间稍长些。

(3)开泵:单击泵图标,在图标上选Control→Pump→On,击OK,观察无气泡止。

(4)降流量=1ml/min(5)关闭Purge阀(顺时针)二、方法编辑:1、在Method and Run Control界面下,单击Method→Edit Entire Method,在该界面下四项都选中,击OK。

(1)在Method Comments下面方框中输入方法描述(如:This Method is for trainning),击OK。

(2)在泵参数设置(Setup Pump)界面输入泵参数,单击OK。

(3)在检测器参数设置(VWD Signal)界面输入波长及响应时间。

2、在Signal Details: Instrument 1编辑界面击OK。

3、在积分参数设置(Edit Integration Events)界面击OK。

4、在Specify Report界面击OK。

5、在Instrument Curves界面击OK。

6、在Run Time Checklist 编辑界面选Data Acquisition和Standard Data Analysis 击OK。

7、方法保存:击Method→Save Method As 输入存盘方法文件名(扩展名为“ .m”)→确定→OK。

三、运行样品:1、打开Purge阀。

2、运行Instrument菜单下的System On。

3、待废液管中无气泡流出,关闭Purge阀。

高效液相色谱仪器维护和保养

Agilent 1100四元泵中使用盐溶液和有机溶剂时,建议将盐 溶液接到下面的 口上,有机溶剂接到上面的梯度阀口上。有 机溶剂通道最好直接在盐溶液通 道的上面。建议定期用水冲 洗所有MCGV通道,以去除在阀口上可能出现的盐 沉淀。
四元/二元/单元泵日常维护
更好地使用四元泵
将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面(或较高处)。
Agilent 1100 泵头(Pump Head)结构图
若压力稳定而保留时间呈有规律变化,多数是色谱柱未平衡好,特别是含有盐的流动相,需较长的时间去平衡。
当需要长时间使 用0.
5
切但勿是用 在5梯m度l/m阀in的流混速合去点排,液但。是在H梯o度ld阀in的g/混Lo合ck点S,cr重ew力作用使盐颗粒 沉淀下来。
四元/二元/单元泵日常维护
打开Purge阀,设定泵的流速2ml/min,提起当前所使用溶剂瓶内的溶剂过滤头,使之脱离液面一小段时间,此时溶剂传送管内会产生
一小段气泡,放下过滤头,让此段气泡通过脱气机,如果脱气机正常,气泡应消失或缩小。
关闭排液阀,设置流速使压力达到350bar,并使系统在此压力下保持15分钟。
泵的使用须知
当泵头安装有冲洗附件时,由于该附件中也有密封垫,这样就会增加活 塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10%异丙醇,并将其流速调至 约20滴/分钟使这溶液流过冲洗装置。
10%异丙醇有助于降低水的表面张力,并有抑菌作用。不要用其它溶剂 代替。
当泵头安装有冲洗附件而不开启10%异丙醇,会使密封垫及活塞杆的寿 命减短。
高效液相色谱仪 器维护和保养
溶剂过滤头的清洗
1.取下过滤头放在(1:4,V/V)的硝酸溶液烧杯中 超声清洗15分钟;
2.取出后用蒸馏水超声清洗10分钟; 3.用吸球吹出过滤头中的液体; 4.再用蒸馏水超声清洗10分钟; 5.用吸球吹净过滤头中的水份; 6.将过滤头重新插入溶剂瓶中(正相系统注意将

高效液相色谱仪色谱柱的正确操作及维护和修理保养

高效液相色谱仪色谱柱的正确操作及维护和修理保养高效液相色谱仪色谱柱的正确操作色谱柱是高效液相色谱仪最紧要的部件,被测物质能否被很好的分别和测定,色谱柱的性能起着决议性的作用。

因此,在日常工作中,应特别注意色谱柱的正确使用和维护和修理保养,以延长色谱柱的使用寿命。

1、使用预柱和保护柱预柱(pre—column)安装于泵和进样器之间,它给色谱柱中的流动相供应了完全的平衡,并防止了对柱填料有破坏作用的组分或污染物进入色谱柱。

保护柱(guardcolumn)可以阻拦能够坚固地吸附于色谱柱上的组分进入色谱柱,保护柱应与色谱柱的填料相同。

预柱和保护柱可以常常更换,而不需要常常更换色谱柱,这就延长了色谱柱的使用寿命。

2、防止气体进入有些色谱柱(如凝胶柱)是不允许气泡进入的,否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。

因此,为了防止气泡进入色谱柱,确定要使用经过脱气的流动相,并且要严格依照下列步骤来安装色谱柱。

a、拆卸下色谱柱入口处的密封螺丝,察看是否有溶剂渗出;b、如有溶剂渗出,即可将色谱柱接到管路上,以避开气泡的进入;c、如无溶剂渗出时,表明色谱柱的此端已经进去空气了,此时,可将色谱柱的出口端接到进样阀上,以流动相来反方向冲洗色谱柱,以便将柱内的空气排出。

建议以0、2ml/min的小流量来冲色谱柱,假如溶剂的流速太快或者是压力蓦地的上升都将会导致柱性能的降低;d、假如流出的溶剂里不含有气泡,说明柱内的气体已经被排出了,再将色谱柱以正确的方向接好,这样气泡就进不到色谱柱里面了。

3、清洗为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中,在每次的样品分析工作完成之后,都应适时地清洗色谱柱。

首先要用对被测样品洗脱本领强的溶剂来洗脱色谱柱,以分析工作中常用的反相色谱分析法为例,因其先流出的物质是极性大的物质,此时应用100%的甲醇或使用异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性小的物质洗脱下来,洗脱液的用量一般为柱体积的20倍即可。

Agilent1200简易操作步骤

安捷伦1200液相色谱简易操作1、打开计算机,进入Windows XP画面。

2、打开 1200 LC 各模块电源。

3、待各模块自检完成后,双击Instrument 1 (联机)图标,化学工作站自动与1200LC通讯,进入的工作站画面如下所示。

4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 单击“视图”菜单中的“系统视图”,”样品视图”,使其命令前有“√”标志,来调用所需的界面。

5、把流动相放入溶剂瓶中。

6、打开Purge(冲洗)阀。

(逆时针旋3下)7、单击泵图标,出现参数设定菜单,单击设置泵选项,进入泵编辑画面。

8 、设流速:4~5ml/min,单击确定。

9、单击泵图标,出现参数设定菜单,单击控制泵选项,选中启动,单击确定,则系统开始冲洗,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续冲洗,直到所有要用通道无气泡为止。

(每个通道均冲洗5分钟左右)10、单击泵图标,设流速:0ml/min,单击确定。

关闭冲洗阀。

11、单击泵下面的瓶图标,如图所示(以二元泵为例),输入溶剂的实际体积和瓶体积。

也可输入停泵的体积。

单击确定。

(二)数据采集方法编辑:1、开始编辑完整方法:●从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项,如上图所示选中除“数据分析”外的三项,单击确定,进入下一画面。

●2、方法信息:●在“方法信息”中加入方法的信息(如:方法的用途等)。

●单击“确定”进入下一画面。

3、泵参数设定:(以二元泵为例)●在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂B”处输入80,(A=100-B) ,也可插入一行“时间表” ,编辑梯度。

在“压力限上限”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。

●单击确定进入下一画面。

4、自动进样器参数设定:●选择合适的进样方式, 如图所示,进样体积5ul,洗瓶位置为81号。

“标准进样”----只能输入进样体积,此方式无洗针功能。

“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置,此方式针从样品瓶抽完样品后,会在洗瓶中洗针。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

厦门市仙岳医院精神疾病生物遗传研究室SOP文件
1
Agilent1200型高效液相色谱仪标准操作程序
一、 目的:规范Agilent1200型高效液相色谱仪的使用。
二、 范围:适用于Agilent1200型高效液相色谱仪的使用。
三、 使用人员:陈彬彬 孙爱慧。
四、 操作步骤:
4.1 系统组成:
本系统由G1311A四元泵、G1322A真空脱气机、G1313A自动进样器、
1100型柱温箱、1100型DAD检测器、Agilent Chemstation B.01.XX化学工
作站和电脑等组成,另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。

4.2 准备
4.2.1 准备所需的流动相,用合适的0.45μm滤膜过滤,超声脱气合适时间。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱(注意方向)。
4.2.3 配制样品和标准溶液,用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

4.3 开机:
接通电源,依次开启不间断电源、四元泵、真空脱气机、自动进样器、
DAD检测器,待泵和检测器自检结束后,打开打印机、电脑显示器、主机,
最后打开色谱工作站。

4.4 参数设定,按《Agilent 1100 HPLC化学工作站操作培训教材》。
4.4.1 波长设定:移动鼠标至检测器显示屏,按左键,用数字键输入所需波长值,
按[确定]键确认。
4.4.2 流速设定:移动鼠标至流速显示屏,按左键,用数字键输入所需的流速(柱
在线时流速一般不超过1ml/min),按[确定]键确认。
4.4.3 流动相比例设定:移动鼠标至流速显示屏,按左键,用数字键分别输入四
个泵不同的百分数,并标明四个流动相的具体成分,按[确定]键确认。
4.4.4 柱温箱设定:移动鼠标至柱温箱显示屏,按左键,用数字键输入所需温度,
按[确定]键确认。
4.4.5 进样体积设定:移动鼠标至进样体积显示屏,按左键,用数字键输入所需
体积,按[确定]键确认。根据需要选择“正常进样”或“洗针进样”等。
厦门市仙岳医院精神疾病生物遗传研究室SOP文件
2
4.5 更换流动相并排气泡
4.5.1 将四个管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中;
4.5.2 逆时针转动泵的排液阀180°,打开排液阀;
4.5.3 移动鼠标至流速显示屏幕,按左键,设定流速,泵大约以9 ml/min的流速
冲洗,3min(可设定)后停止;
4.5.4 将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀。
4.5.5 如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至气泡排尽。
4.5.6 如按以上方法不能排尽气泡,从柱入口处拆下连接管,放入废液瓶中,设
流速为5 ml/min,冲洗3min后减低流速停泵,重新接上柱并将流速重设为
规定值。

4.6 平衡系统
4.6.1 按流速显示屏的“开关”键,启动泵。用检验方法规定的流动相冲洗系统,
一般最少需6倍柱体积的流动相。
4.6.2 检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。
4.6.3 观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1 bar。如超过则可初步判
断为柱前管路仍有气泡,按4.5.6操作。
4.6.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声为<0.001mV时,
可认为系统已达到平衡状态,可以进样。

4.7 进样:设置好序列,按“开始”键,即开始运行。
厦门市仙岳医院精神疾病生物遗传研究室SOP文件

3
Agilent1200型高效液相色谱仪维护保养程序
一、 目的:维护保养Agilent1200型高效液相色谱仪保证正常工作。
二、 使用范围:临床药学室
三、 使用人员:陈彬彬 孙爱慧
四、 工作流程:
1. 色谱柱与进样器及其出口端与检测器之间应为无死体积连接,以免试样扩散
影响分离。
2 . 新柱或被污染柱用适当溶剂冲洗时,应将其出口端与检测器脱开,避免污染。
3. 使用的流动相应与仪器系统的原保存溶剂能互溶,如不互溶,则先取下上次
的色谱柱,用异丙醇冲洗过渡,进样器和检测器的流通池也注入异丙醇进行
过渡,过渡完毕后,接上相应的色谱柱,换上本次使用过的流动相进行操作。
4. 发现记录基线波动,出现毛刺现象,首先应检查检测器流通池中是否有气泡
或污染,如不是流动相引起,可等待氘灯稳定,同时检查仪器的接地是否良
好,必要时,换上磨擦的氘灯,仪器稳定后方能进行操作。
5. 压力表无压力显示或压力波动时不能进行分析,应检查泵中气泡是否排除,
各连结处有无漏液,排除故障后方能进行操作。如压力升高,甚至自动停泵,
应检查柱端有无污染堵塞,可以小心卸开柱的进口端螺帽,控制被污染填充
剂,补入同类填充剂,仔细安装好,再进行操作。
6. 进样前,色谱柱应用流动相充分冲洗平衡如系统适用性并不符合规定,填充
剂已损坏,则就更换新的同类色谱柱进行分析,由于同类填充剂的化学键合
相的键合度及性能等存在一定差异,往往依法操作达不到预定的分离时,可
更换另一牌号的同类色谱柱进行试验。
7. 以硅胶作载体的化学键合相填充剂的稳定性受流动相PH值的影响,使用时,
应详细参阅该柱的说明书,在PH值范围(2.5-7.5)内选用流动相。使用PH
值流动相时,可在泵与进样器之间连接一硅胶短柱,以饱和流支相,保护分
析柱,并尽可能缩短在高PH值下使用时间,用后立即冲洗。
8. 各色谱柱的使用予以登记,以方便选择和更新。
9. 色谱流路系统,从泵、进样器、色谱柱、到检测器流通池,在分析完毕后,
均应充分溃洗,特别是用过含盐流动相的,更应注意先用水,再用甲醇充分
冲洗。如发现泵漏液等较严重情况,应请有经验的维修人员进行检查、维修。

相关文档
最新文档