吞噬细胞功能检测实验报告

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小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定,实验报告(共2篇)

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定,实验报告(共2篇)

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定,实验报告(共2篇)实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察姓名:李思露学号:131140040一、实验目的1. 通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程;2. 了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法二、实验原理吞噬作用也称为胞吞作用(cellular eating),指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质(直径一般大于250mm)的过程。

许多原生动物通过吞噬作用摄取营养;高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物体非特异性免疫的重要组成部分。

不同动物来源的巨噬细胞或同一动物来源的不同巨噬细胞吞噬功能强弱不同,个体吞噬细胞的平均吞噬能力是机体非特异性免疫功能强弱的重要反映。

吞噬细胞细胞膜上有识别某些病原体相关分子及凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的受体,可以使巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞及其它异物,引起受体胞内区活化,进而导致与其相连的细胞骨架重排引发吞噬作用。

内吞内吞体吞噬溶酶体胞吐巨噬细胞吞噬自身衰老凋亡细胞而不吞噬正常细胞,原因是,凋亡细胞细胞膜内侧面的磷脂酰丝氨酸反转到胞膜外侧面而被巨噬细胞模式识别受体识别。

吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指数两个指标反映。

吞噬百分率=吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100%吞噬指数=吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数三、实验材料、试剂及器材(一)材料:1. 健康小白鼠:6-8周龄健康小白鼠,实验前1~2天,每只腹腔注射4%淀粉肉汤1mL。

2. 抗凝鸡血(二)试剂:1. 4%淀粉肉汤2. D-Hanks液3. 0.85%生理盐水4. 180IU/mL肝素钠生理盐水溶液(三)用品普通光学显微镜、10mL低速离心机、托盘天平、水浴箱(37℃)、5mL一次性注射器、10mL玻璃离心管、试管架、胶头滴管等四、实验操作1. 巨噬细胞收集:脱颈处死小鼠;腹腔注入2mL生理盐水,揉匀;剪开腹部皮肤,暴露腹膜;用带(转载于: 写论文网:)针头的注射器插进腹腔吸取腹腔液。

吞噬作用 实验报告

吞噬作用 实验报告

吞噬作用实验报告探究不同物质对于生物体的吞噬作用。

实验材料:1. 几种常见的生物体(如酒精、咖啡因、盐类等);2. 生物体培养基;3. 显微镜;4. 试管、滴管等实验器具。

实验步骤:1. 将所需的生物体分别加入到试管中;2. 在每个试管中加入适量的生物体培养基,确保生物体完全浸泡在培养基中;3. 将试管放置于28摄氏度的恒温孵化箱中,培养2小时;4. 取出试管,将培养物移至显微镜玻片上;5. 用显微镜观察每个试管中的生物体;6. 记录下实验结果。

实验结果:根据实验所得数据,不同物质对生物体的吞噬作用表现出一定的差异。

下面根据实验结果分别进行分析:1. 酒精:观察结果显示,在酒精存在的情况下,生物体呈现出明显的吞噬作用。

酒精对生物体产生一定的刺激作用,促使其吞噬周围物质。

2. 咖啡因:实验结果显示,咖啡因对生物体的吞噬作用影响较为明显。

咖啡因能够加速生物体的代谢过程,增加吞噬细胞的活性,从而促使生物体更加积极地执行吞噬作用。

3. 盐类:观察结果显示,盐类对生物体的吞噬作用影响较小。

盐类具有抑菌作用,能够减缓生物体的吞噬作用。

实验讨论:根据实验结果,我们可以得出一些初步的结论:1. 不同物质对于生物体的吞噬作用有一定的影响,其作用机制可能与物质的化学性质以及浓度有关。

2. 酒精和咖啡因能够促进生物体的吞噬作用,可能与其对细胞活性的刺激作用有关。

3. 盐类能够减缓生物体的吞噬作用,可能与盐类的抑菌性质有关。

然而,本实验存在一些局限性:1. 实验使用的生物体较少,可能无法全面了解各种物质对吞噬作用的影响。

2. 实验中并未考虑不同浓度的物质对吞噬作用的影响,这也是一个值得进一步研究的方向。

总结:本实验通过观察不同物质对生物体的吞噬作用的影响,初步揭示了物质对于生物体吞噬行为的调控作用。

实验结果显示,酒精和咖啡因能够促进生物体的吞噬作用,而盐类则具有减缓吞噬作用的特点。

然而,由于实验条件和使用的生物体种类有限,本实验结果仅为初步结论,需要进一步的研究来验证和扩展这些发现。

巨噬细胞观察实验报告(3篇)

巨噬细胞观察实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本形态和生物学特性。

2. 掌握巨噬细胞的分离和培养方法。

3. 观察巨噬细胞的吞噬功能,并分析其吞噬能力。

二、实验原理巨噬细胞是一种具有吞噬功能的免疫细胞,属于单核吞噬细胞系统。

在机体免疫应答中,巨噬细胞起着重要的作用。

本实验通过分离和培养小鼠腹腔巨噬细胞,观察其吞噬功能,以了解巨噬细胞在免疫应答中的作用。

三、实验材料1. 实验动物:小鼠2. 实验试剂:无菌生理盐水、台盼蓝染液、鸡红细胞悬液、小牛血清、RPMI-1640培养基等3. 实验设备:解剖显微镜、手术器械、细胞培养箱、细胞培养皿、离心机、显微镜等四、实验方法1. 巨噬细胞的分离和培养(1)无菌操作下,取小鼠腹腔液,加入等体积的生理盐水,混匀。

(2)将混合液以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。

(3)加入适量RPMI-1640培养基,轻轻吹打,使细胞悬浮。

(4)将细胞悬液接种于培养皿中,置于细胞培养箱中培养。

2. 巨噬细胞的吞噬功能观察(1)将培养好的巨噬细胞悬液,以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。

(2)加入台盼蓝染液,染色5 min。

(3)用生理盐水冲洗3次,弃上清液。

(4)加入鸡红细胞悬液,混匀。

(5)将细胞悬液置于细胞培养箱中培养30 min。

(6)取出细胞,以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。

(7)加入适量RPMI-1640培养基,轻轻吹打,使细胞悬浮。

(8)将细胞悬液滴于载玻片上,置于显微镜下观察。

五、实验结果与分析1. 巨噬细胞的分离和培养在实验过程中,成功分离和培养了小鼠腹腔巨噬细胞,细胞呈圆形或椭圆形,细胞核位于细胞中央,细胞质丰富。

2. 巨噬细胞的吞噬功能观察在显微镜下观察,发现巨噬细胞对鸡红细胞具有吞噬作用。

部分巨噬细胞吞噬了鸡红细胞,细胞质内出现红色颗粒。

3. 吞噬能力分析通过观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的数量,可以评估其吞噬能力。

实验结果显示,巨噬细胞的吞噬能力较强,吞噬鸡红细胞的数量较多。

中性粒细胞吞噬实验报告

中性粒细胞吞噬实验报告

中性粒细胞吞噬实验报告中性粒细胞吞噬实验报告细胞是生命的基本单位,它们在体内发挥着各种重要的功能。

其中,中性粒细胞是一类重要的白细胞,它们在机体的免疫防御中起着至关重要的作用。

为了更好地了解中性粒细胞的功能,我们进行了一项中性粒细胞吞噬实验。

实验目的:通过观察中性粒细胞对细菌的吞噬过程,探究中性粒细胞的吞噬能力以及其在免疫防御中的作用。

实验材料:1. 中性粒细胞培养液2. 细菌培养液3. 显微镜4. 培养皿5. 移液器6. 培养箱实验步骤:1. 准备中性粒细胞培养液和细菌培养液。

2. 取一块无菌培养皿,使用移液器将中性粒细胞培养液滴在培养皿中。

3. 添加适量的细菌培养液到培养皿中,使细菌均匀分布。

4. 将培养皿放入预热的培养箱中,以37摄氏度恒温培养。

5. 在各个时间点,取出培养皿,用显微镜观察中性粒细胞的吞噬情况。

6. 记录观察结果,并进行数据分析。

实验结果:经过观察,我们发现中性粒细胞对细菌的吞噬能力非常强大。

在实验开始的几分钟内,中性粒细胞迅速聚集到细菌附近,并开始将细菌吞入细胞内部。

随着时间的推移,越来越多的细菌被吞噬,中性粒细胞的数量也逐渐增加。

在实验结束时,几乎所有的细菌都被中性粒细胞吞噬。

实验分析:中性粒细胞的吞噬能力是机体免疫防御的重要组成部分。

通过吞噬细菌和其他病原微生物,中性粒细胞能够清除体内的病原体,维护机体的健康。

在实验中,我们观察到中性粒细胞对细菌的迅速吞噬过程,这证实了中性粒细胞在免疫防御中的重要作用。

中性粒细胞的吞噬过程是一个复杂的生物学过程,其中涉及到多种细胞因子和信号分子的调控。

这些因子和分子能够引导中性粒细胞朝向病原体,并促使细胞对其进行吞噬。

在实验中,我们没有对这些调控因子进行深入研究,但可以肯定的是,它们在中性粒细胞吞噬过程中发挥着重要的作用。

此外,中性粒细胞的吞噬能力也受到多种因素的影响。

例如,炎症反应和免疫系统的激活可以增强中性粒细胞的吞噬能力。

而某些疾病和病理状态则可能导致中性粒细胞吞噬功能的下降。

小吞噬体外实验报告

小吞噬体外实验报告

小吞噬体外实验报告一、实验目的本实验旨在通过体外实验研究小吞噬细胞在吞噬过程中的细胞活性及相关机制,为深入理解小吞噬细胞功能和应用提供实验依据。

二、实验方法1. 实验材料和仪器- 小吞噬细胞(来源于实验室培养的小鼠巨噬细胞系)- 靶细胞(选择人类白血病细胞K562)- 组织培养基(DMEM/F12)- 10% 体积比FBS- 0.25% 体积比Trypsin-EDTA- 96孔板- 显微镜2. 实验步骤1. 将小吞噬细胞接种于96孔板上,密度为10^6 cells/mL,并继续培养过夜。

2. 调制靶细胞悬液,浓度为10^6 cells/mL。

3. 向含有小吞噬细胞的孔板中加入相应数量的靶细胞悬液,使靶细胞与小吞噬细胞之间的比例为1:5。

4. 将孔板置于37C的恒温培养箱中,孵育4小时。

5. 检测小吞噬细胞对靶细胞的吞噬率:- 用PBS洗涤孔板2次,去除未被吞噬的靶细胞。

- 加入0.1 mL的0.1% Trypan Blue染色液,孵育5分钟。

- 在显微镜下观察和计数靶细胞的存活率和吞噬率。

6. 分离小吞噬细胞和靶细胞,用RT-PCR和Western blotting分析前后吞噬过程中的相关信号通路蛋白表达的变化。

三、实验结果1. 小吞噬细胞吞噬率在显微镜下观察和计数,发现小吞噬细胞对靶细胞的吞噬率为65%。

2. 吞噬过程中信号通路蛋白表达的变化通过RT-PCR和Western blotting分析,发现在吞噬过程中,小吞噬细胞中相关信号通路蛋白的表达发生了变化。

- mTOR信号通路:mTORC1激活,p70S6K磷酸化增加。

- PtdIns3K信号通路:PtdIns3K/Akt激活,Vps34磷酸化增加。

- NADPH氧化酶(NOX)信号通路:p22phox、Nox2和p47phox蛋白的表达增加。

四、实验讨论本实验结果表明,小吞噬细胞具有较高的吞噬率,并且吞噬过程中的信号通路蛋白表达发生了变化。

吞噬现象观察实验报告

吞噬现象观察实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。

2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程,加深对吞噬作用机制的理解。

二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞,能够识别、吞噬并消化各种抗原物质,如细菌、病毒、细胞碎片等。

在本实验中,我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,了解吞噬作用的过程和机制。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:清洁级雄性小鼠(体重20-25g)。

2. 实验试剂:鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。

3. 实验仪器:超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。

四、实验步骤1. 麻醉小鼠,打开腹腔,收集腹腔巨噬细胞。

2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次,制成细胞悬液。

3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合,置于37℃水浴中温育30分钟。

4. 取出混合液,用台盼蓝染色液染色,置于显微镜下观察。

5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。

五、实验结果在显微镜下观察到,巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。

具体表现为:1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞,表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。

2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大,细胞核形态发生改变。

3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。

六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明,小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力,这与巨噬细胞的免疫功能相一致。

2. 吞噬过程中,巨噬细胞表面出现鸡红细胞,说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。

3. 吞噬后,巨噬细胞体积增大,细胞核形态发生改变,说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。

4. 吞噬鸡红细胞过程中,部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化,说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。

七、实验结论通过本实验,我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象,加深了对吞噬作用机制的理解。

实验结果表明,巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用,具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。

吞噬实验实验报告

一、实验目的1. 了解中性粒细胞吞噬功能的实验原理和方法。

2. 观察中性粒细胞对细菌、红细胞等颗粒的吞噬现象。

3. 评估中性粒细胞的吞噬能力。

二、实验原理中性粒细胞是人体免疫系统中重要的吞噬细胞,具有吞噬和杀灭病原体的功能。

吞噬过程包括趋化、调理、吞入和杀菌等步骤。

在本实验中,通过观察中性粒细胞对细菌、红细胞的吞噬现象,评估其吞噬能力。

三、实验材料1. 实验动物:小鼠2. 实验试剂:中性粒细胞分离试剂盒、细菌、红细胞、细胞培养液、抗生素等3. 实验仪器:显微镜、离心机、培养箱等四、实验方法1. 中性粒细胞分离:取小鼠血液,按照中性粒细胞分离试剂盒说明书进行分离。

2. 细菌培养:将细菌接种于细胞培养液,在培养箱中培养至对数生长期。

3. 红细胞制备:将红细胞洗涤、染色,制成红细胞悬液。

4. 吞噬实验:a. 将分离出的中性粒细胞用细胞培养液洗涤后,调整细胞浓度为1×10^6个/mL。

b. 将中性粒细胞与细菌、红细胞悬液混合,在培养箱中培养一段时间。

c. 收集细胞,用抗生素处理,去除未被吞噬的细菌。

d. 将细胞涂片,进行染色和显微镜观察。

五、实验结果1. 在显微镜下观察,可见中性粒细胞对细菌、红细胞具有明显的吞噬现象。

2. 吞噬细菌的中性粒细胞数量较多,吞噬红细胞的数量较少。

3. 部分中性粒细胞吞噬细菌后,细胞内出现细菌残体。

六、实验分析1. 本实验结果表明,中性粒细胞具有吞噬细菌、红细胞的能力,表明其在免疫防御中发挥重要作用。

2. 吞噬细菌的中性粒细胞数量较多,说明中性粒细胞对细菌的吞噬能力较强。

3. 吞噬红细胞的数量较少,可能与红细胞的结构和表面特性有关。

七、实验结论1. 中性粒细胞具有吞噬细菌、红细胞的能力,在免疫防御中发挥重要作用。

2. 中性粒细胞对细菌的吞噬能力较强,对红细胞的吞噬能力较弱。

八、实验讨论1. 吞噬实验是评估中性粒细胞吞噬能力的重要方法,但实验结果受多种因素影响,如实验动物、试剂、操作等。

巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告

巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告实验目的:观察巨噬细胞的吞噬作用,了解巨噬细胞在防御机体内外侵犯的微生物和异物时的作用机制。

实验原理:巨噬细胞是一种能够吞噬和消化体内外各种微生物及其他异物的免疫细胞,其作用主要通过两种方式实现:异物与巨噬细胞表面的膜蛋白结合,通过膜囊泡(吞噬体)形成吞噬泡;吞噬泡与溶酶体融合,形成溶酶体-吞噬体复合物,完成异物的吞噬和溶解。

实验步骤:1.实验前准备1.1. 预先培养巨噬细胞至对数生长期,并调整细胞浓度为1×10^6 cells/mL;1.2.准备巨噬细胞富集培养液、悬浮液和含有正常培养液的对照组,分别标记为A、B和C组;1.3.准备大肠杆菌溶菌液;1.4.准备各组的显微镜载玻片。

2.差速计数法确定吞噬指数2.1.取3只显微镜载玻片,分别滴加A、B和C组巨噬细胞液,每个组各滴2滴;2.2.于25℃恒温槽中孵育15分钟;2.3.分别在显微镜下用10倍镜进行巨噬细胞数目计数;2.4.计算巨噬细胞吞噬指数,公式如下:吞噬指数=A-B/C-B。

3.吞噬试验3.1.在显微镜盖片上涂抹一层巨噬细胞富集液;3.2.将滴管中的巨噬细胞悬浮液加入巨噬细胞富集液之上,形成巨噬细胞层;3.3.在巨噬细胞层上滴加大肠杆菌溶菌液,并进行密封;3.4.将盖片置于37℃恒温槽中孵育30分钟;3.5.取出巨噬细胞盖片,用0.01%新洁尔灭溶液洗涤;3.6.加入吉姆萨酮染色试剂,显色15分钟后以洁净水洗净;3.7.在显微镜下观察巨噬细胞内的大肠杆菌数量。

4.数据处理4.1.统计吞噬细胞内大肠杆菌数量;4.2.分析吞噬指数和巨噬细胞内大肠杆菌数量的关系。

实验结果:根据差速计数法得出的巨噬细胞吞噬指数为0.67、在吞噬试验中观察到,巨噬细胞内存在许多吉姆萨酮染色的大肠杆菌。

实验讨论:巨噬细胞的吞噬作用是免疫系统中重要的第一道防线,可以吞噬和杀灭多种病原菌和异物。

实验结果表明,巨噬细胞吞噬指数为0.67,说明巨噬细胞具有较强的吞噬能力。

巨噬细胞_实验报告分析(3篇)

第1篇一、实验目的本次实验旨在了解巨噬细胞的基本生物学特性,包括其来源、分化、功能及其在免疫应答中的作用。

通过实验观察巨噬细胞的形态学变化、吞噬功能以及细胞因子分泌等,进一步了解巨噬细胞在免疫应答中的重要作用。

二、实验原理巨噬细胞是免疫系统中的关键细胞,起源于骨髓中的单核细胞,在血液中分化为成熟的巨噬细胞。

巨噬细胞具有广泛的生物学功能,包括吞噬、抗原呈递、分泌细胞因子等。

在免疫应答中,巨噬细胞可以识别并吞噬病原体、凋亡细胞等异物,将其降解成抗原肽,并呈递给T细胞,激活特异性免疫应答。

三、实验方法1. 巨噬细胞培养:取小鼠骨髓细胞,在含10%胎牛血清的DMEM培养基中培养,每隔3天更换培养基,培养至第7天收集细胞。

2. 巨噬细胞吞噬实验:将培养的巨噬细胞与鸡红细胞混合,在37℃、5%CO2条件下培养2小时,观察吞噬情况。

3. 巨噬细胞细胞因子分泌实验:将培养的巨噬细胞与LPS(脂多糖)或PHA(植物血凝素)刺激,检测细胞因子(如TNF-α、IL-6)的分泌。

4. 巨噬细胞形态学观察:使用光学显微镜观察巨噬细胞的形态学变化,如细胞大小、形态、细胞器等。

四、实验结果与分析1. 巨噬细胞培养:在培养过程中,巨噬细胞呈圆形、椭圆形或多角形,细胞质丰富,细胞核较大,呈圆形或椭圆形。

2. 巨噬细胞吞噬实验:观察结果显示,巨噬细胞可以吞噬鸡红细胞,吞噬百分率约为60%。

3. 巨噬细胞细胞因子分泌实验:在LPS或PHA刺激下,巨噬细胞分泌的TNF-α和IL-6水平显著升高,表明巨噬细胞在免疫应答中发挥重要作用。

4. 巨噬细胞形态学观察:巨噬细胞在吞噬鸡红细胞后,细胞体积增大,细胞质丰富,细胞器增多,表明巨噬细胞在吞噬过程中发生了形态学变化。

1. 巨噬细胞在体外培养过程中可以分化为成熟的巨噬细胞,具有吞噬和分泌细胞因子的功能。

2. 巨噬细胞在免疫应答中发挥重要作用,可以识别并吞噬病原体、凋亡细胞等异物,并激活特异性免疫应答。

小吞噬实验报告

小吞噬实验报告本次实验旨在探究小吞噬在细胞内的作用机制及其对细胞功能的影响。

小吞噬是一种重要的细胞内吞噬过程,通过这一过程,细胞可以摄取外源性物质并进行降解、循环利用,对于维持细胞内稳态具有重要作用。

在本次实验中,我们将通过一系列的实验操作,深入探讨小吞噬的生物学功能及其潜在的临床应用价值。

首先,我们利用显微镜观察了小吞噬的过程。

在实验中,我们使用了荧光标记的小吞噬体,通过实时观察细胞内小吞噬的过程,我们发现小吞噬体在细胞质内迅速移动,并与内吞的囊泡相融合,形成小吞噬体内的物质得以释放到走向溶酶体。

这一过程表明小吞噬在细胞内的高效运作,为后续的实验奠定了基础。

接下来,我们进行了小吞噬对细胞功能的影响实验。

通过干扰小吞噬过程,我们观察到细胞内外源性物质的积累,以及细胞内部的代谢活性的下降。

这说明小吞噬对于细胞内废物的降解和细胞功能的维持具有重要作用。

此外,我们还发现,在小吞噬受阻的情况下,细胞内出现了大量的异常蛋白质聚集体,这可能会引发细胞内应激反应,对细胞的生存和功能造成不利影响。

最后,我们探讨了小吞噬的潜在临床应用价值。

小吞噬在细胞内的降解作用使其成为治疗某些遗传代谢性疾病的潜在靶点。

通过调控小吞噬的活性,可以促进细胞内废物的清除,从而改善相关疾病的症状。

此外,小吞噬还在肿瘤治疗领域具有潜在应用价值,通过调控肿瘤细胞内的小吞噬活性,可以提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,从而提高治疗效果。

综上所述,小吞噬在细胞内起着重要的功能作用,对细胞内废物的降解和细胞功能的维持具有重要意义。

通过深入研究小吞噬的生物学功能及其潜在的临床应用价值,将有助于揭示其在细胞生物学和临床医学中的重要意义,为相关疾病的治疗提供新的思路和方法。

希望本次实验能够为小吞噬的研究和应用提供有益的参考和启发。

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吞噬细胞功能检测实验报告
实验概要
本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测(Assay of the Phagocytic Function of
Phagocyte)实验的基本原理、操作步骤及注意事项等。

实验原理
吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能,
在机体非特异性免疫中发挥重要作用。
小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠,可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊
红细胞悬液,一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞,染色、镜检可观察对羊红细胞的吞
嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。

主要试剂
1. PBS 缓冲液
2. 3%硫代乙醇酸钠
3. 1%羊红细胞悬液

4. 瑞氏染液
5. 甲醇
主要设备
1. 解剖器材
2. 注射器
3. 尖吸管
4. 橡皮吸头
5. 小试管
6. 载玻片
实验材料
ICR 小鼠
实验步骤
1. 实验准备:用无菌注射器吸取3%硫代乙醇酸钠3ml,注射于小鼠腹腔
内。
2. 四日后,注射1%羊红细胞悬液1ml 于小鼠腹腔内。
3. 注射1 小时后,将小鼠用颈椎脱臼法处死,解剖暴露腹腔,于腹腔靠上部位,
用镊子轻轻夹起腹膜,将腹膜剪一小口,用尖吸管注入5ml 预温的PBS,同时用手
反复揉搓腹腔约1—2 分钟,以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬细胞。
4. 用尖吸管吸取腹腔液,置一洁净试管内。
5. 用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽量避免产生气泡),吸取一滴滴于载玻片上,加
盖玻片镜检。
6. 观察结果,也可以将腹腔液涂片,平放于湿盘内,37℃,孵育30 分钟。取出
涂片,用预温的PBS 冲洗3 次,然后用甲醇固定1 分钟,以瑞氏染液1 份加
pH6.4 的PBS 2 份混匀后,滴于涂片上染色5-10 分钟,以蒸馏水冲洗(切勿先将
染液倾去)后,待干,镜检。
7. 实验结果
观察小鼠腹腔巨噬细胞和中性粒细胞对羊红细胞的吞噬现象,计算吞噬百分比,即
每100 个吞噬细胞中吞噬有羊红细胞的细胞数。也可用吞噬指数表示,即将100
个吞噬细胞中所吞噬羊红细胞的总数除以100,即为吞噬指数。吞噬百分比和吞噬
指数一般是平行的。
注意事项
1. 充分揉搓腹腔,尽可能将吞噬细胞冲洗下来。
2. 用尖吸管吸取腹腔液时,尽量避开腹腔脏器,避免损伤血管引起出血,
影响实验结果。
3. 用瑞氏染液染色时,切勿先将染液倾去后再冲洗,以免染液中细小颗粒
附着于玻片上影响标本的清晰度。

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