细胞凝集反应实验报告
细胞建议实验二细胞的凝集反应（参考）
细胞建议实验二细胞的凝集反应实验一、实验原理红细胞凝集包括由病毒、细胞凝集素和抗体而引起的三种类型的细胞凝集现象。
凝集素（lectin）是从各种植物的种子和动物组织中提取的糖蛋白或结合糖蛋白，因为能凝集红细胞，故名凝集素。
凝集素最大的特点是能识别糖蛋白和糖脂中，特别是细胞膜中复杂的碳水化合物结构，即细胞表面的糖基。
通过与细胞表面的糖分子相连，在细胞间形成桥，从而引起细胞的凝集。
一种凝集素只对某一种特异的糖基具有特异结合的能力，如刀豆素A与吡喃糖基甘露糖结合，马铃薯凝集素专一结合的是N-乙酰氨基葡萄糖二聚体和N-乙酰氨基半乳糖。
加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集作用。
另外，凝集素还具有多价结合的能力，能与荧光素、酶生物素、铁蛋白、胶体金结合而不影响其生物活性，可用于光镜或电镜水平的免疫细胞化学研究。
二、实验目的1、理解细胞凝集的原理。
2、显微镜下观察细胞凝集反应。
三、实验用品1、器材和仪器仪器：电子天平，大烧杯，小烧杯，显微镜，移液器，离心机，玻璃棒，镊子。
耗材：10ml小试剂瓶，载玻片，盖玻片，1.5ml离心管，擦镜纸，吸头（蓝、黄）。
2、试剂：PBS缓冲液，3.8%的柠檬酸钠，生理盐水，3、材料：鸡血，土豆。
四、实验前准备主要仪器：普通光学显微镜（1台/组，共25台/班）；离心机（1台/班）；电子天平（1台/组，共5台/班）；移液器（1套/组，25套/班）。
辅助仪器：镊子（1把/组，25把/班）；玻璃棒（1根/组，25根/班）；100mL烧杯（1个/组，共25个/班）；大烧杯（1个/组，共25个/班）。
耗材：10ml小试剂瓶（1个/组，25个/班），载玻片（3片/组，75片/班），盖玻片（若干），1.5ml离心管（1个/组，25个/班），吸头（蓝黄吸头各1盒/组，各25盒/班），擦镜纸（若干）。
试剂：PBS缓冲液（10ml/组，250ml/班），3.8%柠檬酸钠溶液（5ml/班），生理盐水（13～15ml/组，375ml/班）备注：PBS缓冲液：称取7.2g NaCl ，1.48g NaH2PO4 ，0.46g KH2PO4，用蒸馏水定容至1000ml，调pH为7.2。
细胞凝集胞实验报告
实验1.血细胞凝集Lab1.Blood cell agglutination摘要：细胞凝集指的是细胞与细胞之间通过某种凝集素的作用而相互粘连在一起的现象，最终形成大的细胞团块。
而凝集素由于可使细胞凝集而成为一种重要实验和临床试剂。
本次实验就是通过进行对兔血细胞的凝集操作，观察细胞凝集现象，并掌握凝集素促进细胞凝集的实验原理和操作方法。
关键词：细胞凝集、凝集素前言：凝集素是一类能专一识别糖并与之非共价可逆结合的非酶非抗体蛋白质。
凝集素是指从各种植物、无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红细胞，故名凝集素。
凝集素按来源可分为植物凝集素、动物凝集素和微生物凝集素三大类;植物凝集素分为7个家族：豆科凝集素、几丁质结合凝集素、单子叶甘露糖结合凝集素、2型核糖体失活蛋白、木菠萝素家族、葫芦科韧皮部凝集素和苋科凝集素；动物凝集素按分子结构分为C-型凝集素、S-型凝集素、P-型凝集素、I-型凝集素等。
在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出的寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。
凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而引起细胞凝集。
其反应机制如下图：凝集素在生化、医学等方面有广泛的应用：1.凝集素在实验室中经常被用来分离、纯化蛋白质植物凝集素的功能是结合细胞表面上的糖蛋白，动物凝集素的功能包括结合可溶性的细胞外或细胞内糖蛋白。
凝集素在实验室中经常用来分离、纯化糖蛋白。
这是由于植物凝集素能专一性地、非共价地可逆结合糖蛋白中不同类型的糖链结构，所以首先分别用凝集素亲和层析方法分离富集正常细胞和癌细胞的细胞裂解液中的糖蛋白，从细胞裂解物中高通量的分离出N-糖苷键型糖蛋白之后，再利用双向凝胶电泳技术对于被凝集素吸附的糖蛋白进行分离，最后利用质谱技术进行鉴定。
2.凝集素介导细胞与细胞、细胞与基质的粘附选凝素是一类Ca2+依赖的、能与特异糖基识别并结合的细胞粘附分子，主要介导白细胞与血管内皮细胞或血小板的识别和粘附。
凝集拨片实验报告
一、实验目的1. 了解凝集反应的基本原理和实验方法。
2. 掌握拨片凝集实验的操作步骤。
3. 分析实验结果，验证抗原与抗体之间的特异性结合。
二、实验原理凝集反应是指抗原与相应抗体在一定条件下结合，形成肉眼可见的凝集现象。
拨片凝集实验是一种常用的凝集反应方法，通过观察红细胞在玻片上凝集的程度，判断抗原与抗体之间的特异性结合。
三、实验材料1. 红细胞悬液2. 抗原3. 抗体4. 玻片5. 吸管6. 移液器7. 计时器四、实验步骤1. 准备玻片：将玻片平铺在实验台上，用吸管吸取少量红细胞悬液滴在玻片中央。
2. 添加抗原：用另一支吸管吸取抗原，滴在红细胞悬液上，轻轻混合。
3. 添加抗体：用移液器吸取抗体，滴在红细胞悬液上，轻轻混合。
4. 静置观察：将玻片放置在实验台上，静置数分钟，观察红细胞凝集情况。
5. 记录结果：根据红细胞凝集的程度，记录实验结果。
五、实验结果与分析1. 静置玻片数分钟后，观察红细胞凝集反应结果。
实验结果显示，双凹片右侧的细胞没有发生凝集，说明血浆中的物质不能使细胞发生凝集。
而双凹片左侧的细胞发生了凝集，说明抗原与抗体发生了特异性结合。
2. 分析实验结果：（1）红细胞凝集现象：在实验过程中，红细胞发生了明显的凝集现象，表明抗原与抗体发生了特异性结合。
（2）凝集程度：根据红细胞凝集的程度，可以判断抗体与抗原的结合强度。
在本实验中，红细胞凝集程度较高，说明抗体与抗原的结合较强。
（3）对照实验：双凹片右侧的细胞没有发生凝集，说明血浆中的物质不能使细胞发生凝集，进一步验证了抗原与抗体之间的特异性结合。
六、实验总结通过本次凝集拨片实验，我们掌握了凝集反应的基本原理和实验方法，学会了拨片凝集实验的操作步骤。
实验结果表明，抗原与抗体发生了特异性结合，进一步验证了凝集反应在免疫学中的应用价值。
在实验过程中，应注意以下几点：1. 实验操作要规范，避免污染。
2. 严格控制实验条件，确保实验结果的准确性。
3. 观察实验现象时要细心，及时记录实验结果。
实验4 细胞凝集反应
不同饱和度硫酸胺沉淀蛋白质表
五、实验报告及作业
1.绘图表示血细胞凝集现象，并说明原因。 2.植物细胞凝集素在鸡红细胞凝集过程中起 什么作用？
3.哪些因素影响细胞凝集反应？
（3） 称取韭菜叶片5g，切成小片 5 mL 生理盐水 ↓ 研磨，过滤， 离心（5000r/min）20 min，留上清液 ↓
上清液加相应硫酸铵至60%饱和度（边加入边用玻璃棒搅 拌至完全溶解），离心（5000r/min）20 min，沉淀用1ml 磷酸缓冲液溶解 ↓ 载玻片上滴一滴韭菜凝集素 ↓ 再滴一滴2％红细胞液，充分混匀 ↓ 静置10 min ↓ 低倍显微镜下观察血球凝集现象
仪器与器材：
• 离心机，光学显微镜 • 研钵，药匙，纱布，离心管，带刻度, 滴管， 烧杯，玻璃棒，量桶，载玻片，盖玻片， 滤纸，吸水纸。
四、实验方法
① 2% 鸡红细胞悬液制备
以无菌方法抽取鸡翅下静脉血液（5mL注射器
用1%肝素溶液浸润）1mL，用生理盐水洗3次，
每次1500 r/min，离心5 min，最后按沉淀压积的
实验4 细胞凝集反应
一、实验目的
1、学习研究细胞凝集反应的方法
2、了解细胞发生凝集反应的原因
二、实验原理
凝集素 :一类可逆结合特异糖基的蛋白质，与糖的 运输、储存物质的积累、细胞间的互作以及细胞 分裂的调控有关。 细胞凝集：凝集素与细胞表面的糖分子连接，在细 胞间形成“桥”，加入与凝集素互补的糖分子可 以抑制细胞间的凝集反应
性质：
为糖蛋白(少数例外) 凝集反应所必需的金属离子：Ca2+和Mg2+ 所含糖种类在动物、植物和微生物中不同
特异性：
一种凝集素具有对某一种特异性糖基专一性结合
2021年细胞凝集反应实验报告
【试验题目】细胞凝集反应【试验目】1、了解细胞表面结构。
2、掌握细胞凝集原理。
3、掌握细胞凝集试验操作方法。
【试验材料与用具】1. 试剂: PBS缓冲溶液、 0.9%氯化钠溶液（生理盐水）2. 器具: 酒精棉球、双凹片、载玻片、一般光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管3. 材料: 兔子静脉血【试验原理】1.凝集素凝集素（lectin）是一类含糖（少数例外）并能与糖专一结合蛋白质, 它含有凝集细胞和刺激细胞分裂作用。
现在已发觉近千种植物中含有凝集素, 在多种真菌、无脊椎动物、脊椎动物、人体多种组织和器官中及一些病毒体内也含有凝集素。
常见为植物凝集素, 通常以其被提取植物命名, 凝集素为它们总称。
在细胞表面, 组成细胞膜糖脂和糖蛋白伸出寡糖链, 形成细胞外被（糖萼）。
凝集素使细胞凝集是因为它与细胞表面糖分子连接, 在细胞间形成“桥”结果, 加入与凝集素互补糖能够抑制细胞凝集。
2.细胞凝集细胞凝集是指细胞相互聚集在一起, 成为一簇不规则细胞团, 现在认为, 细胞间联络、细胞生长和分化、肿瘤发生与免疫反应都与细胞表面分枝状糖分子相关。
3.细胞凝集反应技术（1）直接凝集反应技术颗粒性抗原与对应抗体血清混合后, 在电解质参与下, 经过一定时间, 抗原抗体凝集成肉眼可见凝集块, 这种现象称为凝集反应。
血清中抗体称为凝集素。
抗原称为凝集原。
细菌或其她凝集原都带有相同电荷（阴电荷）, 在悬液中相互排斥而呈均匀分散状态。
抗原和抗体相遇后, 因为抗原和抗体分子表面存在相互对应化学基团, 所以发生特异性结合, 称为抗原抗体复合物, 因为抗体与抗原结合, 降低了抗原分子间排斥力, 抗原表面亲水基团降低, 此时已经有凝集趋势, 在电解质参与下, 中和了抗原抗体复合物大部分电荷, 使之失去了经典排斥力, 分子间相互吸引, 凝集成较大颗粒。
出现了肉眼可见凝集反应。
（2）间接凝集反应技术可溶性抗原（或抗体）吸附于免疫学反应无关颗粒表面上, 当这些致敏颗粒与对应抗体（或抗原）相遇时, 就会产生特异性结合, 在电解质参与下, 这些颗粒就会发生凝集现象。
凝集实验报告实验讨论
一、实验目的与原理本次实验旨在通过凝集实验了解抗原与抗体之间的特异性结合关系，验证抗原抗体反应的原理。
凝集实验是免疫学研究中常用的一种方法，主要用于检测血清中的抗体或抗原。
实验原理：抗原与抗体结合后，在一定条件下，可形成肉眼可见的凝集现象。
本实验采用直接凝集实验，即抗原与抗体直接结合形成凝集现象。
二、实验对象与材料实验对象：鸡红细胞。
实验材料：鸡红细胞悬液、鸡抗鸡红细胞抗体、生理盐水、试管、滴管等。
三、实验步骤与观察项目1. 将鸡红细胞悬液用生理盐水稀释至一定浓度。
2. 分别取3支试管，编号为1、2、3。
3. 向第1支试管中加入鸡红细胞悬液，第2支试管中加入鸡抗鸡红细胞抗体，第3支试管中加入生理盐水。
4. 混匀各试管中的溶液，观察凝集现象。
四、实验结果1. 第1支试管：鸡红细胞悬液，未出现凝集现象。
2. 第2支试管：鸡抗鸡红细胞抗体，出现明显的凝集现象。
3. 第3支试管：生理盐水，未出现凝集现象。
五、讨论1. 实验结果分析通过实验结果可以看出，鸡红细胞悬液在加入鸡抗鸡红细胞抗体后，出现了明显的凝集现象，而加入生理盐水或鸡红细胞悬液时，未出现凝集现象。
这表明抗原与抗体之间存在特异性结合关系，符合凝集实验的原理。
2. 影响凝集实验的因素（1）抗原与抗体的浓度：抗原与抗体浓度过高或过低均可能影响凝集实验的结果。
本实验中，鸡抗鸡红细胞抗体与鸡红细胞悬液的比例适中，有利于观察凝集现象。
（2）温度：温度对凝集实验有一定影响。
过高或过低的温度均可能影响抗原与抗体的结合。
本实验在室温下进行，有利于观察凝集现象。
（3）pH值：pH值对凝集实验有一定影响。
过酸或过碱的环境可能影响抗原与抗体的结合。
本实验在生理盐水中进行，有利于保持pH值的稳定。
3. 实验结论本次实验通过直接凝集实验验证了抗原与抗体之间的特异性结合关系。
实验结果表明，在一定条件下，抗原与抗体结合后，可形成肉眼可见的凝集现象。
本实验为后续免疫学研究和临床诊断提供了实验依据。
实验二细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察报告（1）
实验二细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察报告（1）实验二细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察一、实验目的1、了解细胞糖被的特点和功能，了解植物凝集素的作用2、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度二、实验原理1、细胞膜表面的有分支状糖外被，细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支状糖分子有关。
凝集素（lectin）是一类含糖并能与糖分子专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。
凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞表面间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
2、细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的结构。
可选择性地让某些物质进出细胞，各种物质出入细胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，以至于在高渗环境中，动物细胞会失水而收缩；在低渗环境中，动物细胞会吸水膨胀直至破裂。
本实验将红细胞分别放于各种等渗溶液中，由于红细胞膜对不同溶质的通透性不同，使得不同溶质透入细胞的速度相差很大，有些溶质甚至不能透入细胞。
当溶质分子进入细胞后可引起渗透压升高，水分子随即进入细胞，使细胞膨胀，当膨胀到一定程度时，红细胞膜会发生破裂，血红素溢出，此时，原来不透明的红细胞悬液突然变成红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为红细胞溶血。
由于各种溶质进入细胞的速度不同，所以不同的溶质诱导红细胞溶血的时间不同，相反可通过测量溶血时间来估计细胞膜对各种物质通透性的大小。
三、实验材料、器具和试剂1、器材与仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、直管、5ml量筒、滴管、天平、离心管2、材料与试剂：土豆块茎，鸡（采血）、5mmol/LNaCl、65 mmol/LNaCl、0.15 mol/LNaCl、0.8 mol/L甲醇、0.8 mol/L丙三醇、2% Triton X-100、氯仿、PBS缓冲液、生理盐水四、实验步骤（一）细胞凝集反应1、2%鸡血红细胞悬液制备：以无菌方法抽取鸡静脉血液（加抗凝剂），用生理盐水洗5次，每次2000rpm离心5 min，最后按沉淀压积的红细胞体积，用生理盐水配成2％红细胞悬液待用。
实验十一细胞凝集反应
三、实验用品
1. 材料
土豆块茎、家兔。
2. 器具:
显微镜、离心机、托盘天平、研钵、剪刀、离心管、细滴管、
载片、盖片。
3. 试剂:
PBS缓冲液：NaCl 7.2 g、Na2HPO4 1.48 g、KH2PO4 0.43 g，加蒸馏水，定容至1 L，调pH至7.2。 1%肝素液：0.1 g肝素溶解于10 mL 0.9%氯化钠溶液中。
1. 绘图简图表示血细胞凝集过程，并说明原因。
2. 哪些因素影响细胞凝集反应?
3. 结合凝集素的特性，简述凝集素在生物学中有何应用？
研究凝集素有何意义？
等均与细胞外被有关。
二、实验原理
凝集素（lectin）是一类可逆结合特异糖基的蛋白
质，具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已 发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊 椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某 些病毒体内也含有凝集素。常用的有植物凝集素 （phytohemagglutinin, PNA），通常一起被提取 的植物命名，如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花
浸泡2 h，浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。
3. 细胞凝集反应 土豆凝集素1滴、2%兔血红细胞液1滴，在载玻片上混匀，静置20
min；以PBS缓冲液加2%血细胞悬液作为对照，低倍镜下观察。
五、结果观察
低倍镜下可以看到对照组红细胞分布均一，无凝集；实验
组中红细胞凝集在一起。
对照
阳性
六、实验报告及思考题
生凝集素和大豆凝集素等，凝集素是他们的总称。
二、实验原理
细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起，成为一簇不规则 的细胞团。
பைடு நூலகம் 凝集素使细胞凝集的原理是：它可以与细胞表面的糖
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细胞生物学实验报告
一． 实验名称：细胞凝集反应
二． 实验原理：
细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表
面的分支状糖外被。目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反
应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。
凝集素（lectin）是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，
它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞
表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可
以抑制细胞的凝集。
凝集素是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结
合糖的蛋白，因其能凝集红血球(含血型物质)，故名凝集素。常用的为植物
凝集素(Phytoagglutin, PNA)，通常以其被提取的植物命名，如刀豆素
A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin, WGA)、花生凝集素
(Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin, SBA)等，凝集素是它
们的总称。凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，它们具有的某些“亲合”
特性，能被免疫细胞化学技术方法所应用。
血型鉴别实验，也是凝集反应的一种。
三． 实验用品：
土豆块茎
显微镜，粗天平，载玻片，滴管2支，离心管2支
PBS缓冲液：称取NaCl7.2g，Na2HPO41.48g,KH2PO40.43g,加蒸馏水，定容至
1000ml，调pH值到7.2.
4.2%的红细胞
四． 实验步骤：
1. 称取土豆去皮块茎2g，加10mlPBS缓冲液，浸泡2h，浸出的粗提液中含
有可溶性土豆凝集素。
2. 以无菌方法抽取兔子静脉血液（加抗凝剂），加生理盐水3ml，在
1000r/min，离心5min，重复3次离心，最后按压积红细胞体积用生理盐
水配成1%红细胞液。
3. 分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴，置双凹片左孔内，充
分混匀。
4. 同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴，置双凹片右
孔内，充分混匀，做对照实验。
5. 摇晃5—10min后，观察有无发生细胞凝集并置显微镜下观察。
五． 实验结果：
试剂 土豆凝集素 PBS缓冲液
现象 在振荡过程中，溶液中的红细胞渐渐凝集成颗粒状，逐渐聚拢，最后在液滴中形成一大块血红色血块。 在振荡过程中，红细胞不断向中间靠拢，最终形成中间颜色较深，边
缘颜色较浅的红细胞浑
浊溶液。
结果 红细胞发生凝集 红细胞未发生凝集
说明结论
土豆凝集素可使血液发生凝集，PBS缓冲液不能使
血液发生凝集。
图左为PBS缓冲液对照 图右为土豆凝集素
图一 图二 土豆凝集素（*4）
图一中为在振荡了11min后，细胞凝集的现象，中间凝结成血块，周围
叫澄清，边缘为干涸的红细胞凝结成的颗粒附着在玻片上。在低倍镜（*4）
下观察，可以看到红细胞凝结成块状，周围液体近乎透明，说明红细胞发生
了凝集。
图三 图四 PBS缓冲液（*4）
图三中为在振荡了之后，红细胞并没有聚集成颗粒状，只是由于向心力
左右而聚拢在一起呈透明凝胶状。在低倍镜（*4）下观察可见到均匀的透明
液体，没有红细胞凝结而成的颗粒。
六． 实验分析：
实验所得结果可见，红细胞并没有如预期那般在中央凝结成大血块，而周
围近乎透明，分析其原因可能为：
（1） 在滴加土豆凝集素时，没有加入半滴，而是加入了一滴，反而导致了
细胞凝集效果下降。
（2） 在晃动过程中，速度过慢，且晃晃停停，导致红细胞凝结成的颗粒状
在玻片上凝固。
（3） 血浆浓度的影响，血浆浓度不合适导致细胞凝集作用减弱。