植物激素 整理

植物激素的检测方法

1. 生物测试

生物测试法是最早采用的植物激素测定方法它是利用植物激素的生理活性通过某些植物的组织和器官对植物激素产生的特异性反应进行测定的。

优点：简便易行也能反映植物激素的生理活性

缺点：专一性较差且植物体内含有生长素类似物~ 拮抗物等影响测定的结果需在前处理中尽可能纯化所要测定的组分过程复

杂此外重复性差工作量大

2. 免疫检测

免疫学技术应用于植物激素的测定有力地促进了激素定量研究的发展它的基本原理是利用抗原和抗体的特异性竞争结合。

优点：了检测灵敏度可检测出10-12 g 的微量物质相应其前处理也得到了简化又改善了测定的专一性。

缺点：抗体的制备较复杂。

3.物理化学方法

物理化学方法分光谱法和色谱法两种

1）分光谱法：主要有紫外吸收光谱~ 红外吸收光谱和荧光法

优点：灵敏度高

缺点：专一性差

2）色谱法：利用物质在不同介质中的分配原理进行测定的，包括纸上层析，薄层层析(TLC) ，气相色谱(GC) ，高效液相色谱(HPLC) 以

及气质联用(GC-MS) 等，将分离和测定结合起来是色谱法的基本特点。

（1）纸上层析和TLC：

优点：设备简单易操作

缺点：分离效率和灵敏度有限制

（2）G C 和HPLC：

是在纸上层析和TLC 的基础上装备了商品化的色谱柱和检测器，保证了检测方法的专一、灵敏和准确

（3）GC 和HPLC 方法:

分析植物激素, 灵敏度和选择性高, 重复性好, 但对前处理要求较高; 又因保留时间的分辨有一定限制, 若达不到所需纯度要求可能会出现多种化合物的保留时间相同或接近而影响测定结果。（4）在植物激素的理化检测中, 仪器联用是当代的发展趋势：最常用的结合系统是气相色谱-质谱联用(GCMSD，技术, 它是目前最为可靠的激素检测方法, 还可验证其它测定方法的可靠性, 而且还可鉴定未知物质的结构，但需经冗长的样品纯化程序, 设备昂贵, 使用和维护成本高。此外有气液相色谱( GLCD 配以火焰热离子检测器(FTDD 快速灵敏地对植物细胞分裂素定量测定[25], 也有薄层色谱与气相色谱结合分析ABA。

内源植物激素：植物体内产生的激素

主要有：、生长素（auxin）、赤霉素（GA3）、细胞分裂素（CTK）、

脱落酸（abscisic acid，ABA）、乙烯（ethyne，ETH）

和油菜素甾醇、吲哚乙酸（IAA）玉米素（Z）、

玉米素核苷（ZR）反玉米素（ZT）复合胺、褪黑

激素秋水仙素吲哚丁酸

外源植物激素：人工合成加到植物中

2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸），吲哚丙酸、、萘乙酸、

4-碘苯氧乙酸乙稀利水杨酸(SA) 茉莉酸b9

（必久）矮壮素(ccc):又叫三西，碌化碌代胆碱青

鲜素(mh) 奈乙酸吲哚丙酸（IPA）吲哚丁酸（IBA）

6-苄基腺嘌呤（BA）激动素（K）

萘乙酸（NAA）

实验仪器

中文：

LC-6A 高效液相色谱仪日本岛津制作所产品

ODS硅胶柱(250mm×5mm) 日本岛津制作所产品

SPD-6AV 紫外-可见光度检测器日本岛津制作所产品

C-R3A数据处理机日本岛津制作所产品

HPLC Waters 公司产

Alliance系列HPLC及Premier LCT MS／MS质谱联用设备加拿大Waters公司

Xterra C18色谱柱(100 mm x2.1 mm x3.5u m，加拿大Waters公司

美国HP-5890II 型气相色谱仪，配备FID检测器，HP-3395积分仪1100型高效液相色谱仪美国Aglent公司

SLC-10A VP 高效液相色谱仪日本岛津公司

英文：

HPLC-UV analysis, an Agilent 1100 series HPLC-UV system (Agilent

Technologies, USA) Both methanol and ethanol(HPLC grade) Merck (Darmstadt, Germany) Acetic acid (analytical reagent grade) Fisher Scientific (Hanover Park,

IL, USA).

实验试剂

中文：

，α-萘乙酸（NAA）,吲哚乙酸（IAA）,６-苄基嘌呤(BA),K,GA(上海伯奥生物科技公司)

ZT (上海丽珠东风生物技术有限公司)

IBA(英国产,上海化学试剂分装站),

IPA(Sigma公司)

褪黑激素、吲哚乙酸(IAA)和复合胺(Sigma Chemical公司

甲醇和乙腈(HPLC级，加拿大VWR Scientific 公司

甲酸(分析纯，Sigma公司

IAA,GA3，Z（玉米素）和ABA Fluka公司

GA3和ABA Sigma公司

IAA,ABA,GA 中国药品生物制品检定所

甲醇、三氯甲烷和乙酸乙酯

分析纯

赤霉素GA3、生长素、IAA和ABA（纯度大于97%，Sigma公司）冰醋酸（AR，上海化学试剂公司）

玉米素核苷(zR) Sigma 公司

玉米素(z) 中国科学院上海生物化学研究所

玉米素、赤霉素、生长素、脱落酸Sigma，纯度≥99% 腺素、激动素、6-苄氨基嘌呤、秋水仙素、吲哚-3-丁酸（科

密欧，纯度≥95%）色谱纯甲醇德国MERCK公司

分析纯乙酸、甲醇、乙酸乙酯、石油醚西安化学试剂厂英文：

GA3, IAA, ABA（脱落酸）, JA, IBA, NAA, 2,4-D(2，4-二氯苯酚代乙酚), 1-ethyl-3-(3-

dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC) and sodium dodecyl sulphate (SDS) Sigma–Aldrich (St. Louis, MO,USA).

Z, BA, GA, ABA and IBA Sigma–Aldrich（Steinheim, Germany) IAA,NAAand 2,4-D PhytoT echnology

Laboratories(Shawnee Mission, USA)

植物激素的危害

矮壮素：毒理学的研究表明:即使在低于日允许摄入量浓度水平

下,矮壮素对动物的繁殖能力仍有不良影响。美国国家职业安全和健康研究所发布的化学物质毒性数据库已将矮壮素列为疑似内分泌干扰物质。

赤霉素：赤霉素可能干扰人体正常的内分泌系统袁长期食用会在人体中蓄积袁造成器官的慢性中毒袁并可能引起癌变袁严重危及消费者的身心健康。可影响机体的内分泌系统, 受试动物的甲状腺、卵巢、肾上腺等内分泌腺重量明显增加,使得动物某些激素水平发生改变, 影响动物的生长发育, 甚至发生癌变。

乙烯利：具有一定的神经毒性、致突变性和弱的激素样作用。对小鼠的免疫功能具有一定的抑制作用能导致小鼠体细胞、生殖细胞遗传损伤, 使小鼠骨髓细胞微核率和雄性生殖细胞畸形率提高, 干扰精子正常生成和成熟过程, 导致小鼠体细胞染色体畸变和生殖细胞基

因突变。乙烯利对人类具有潜在的诱癌、致畸及其他多方面的危险。

萘乙酸：有一定抑制睾丸细胞增殖活性、诱发睾丸细胞凋亡的作用。

2, 4 – D：小鼠长期暴露在2, 4 - D的环境中会造成骨骼畸形, 致病率和死亡率增加; 2, 4 - D具有急性神经毒性, 对皮肤和眼睛有刺激作用, 吸入或接触后, 其急性毒性作用主要表现为神经性毒性; 慢性毒性作用表现为对血液、肝、肾的毒性及抑制某些酶的活力, 抑制某些蛋白质的合成。

NAA：属于低毒农药, 大白鼠急性口服LD50为1 000～5 900 mg·kg- 1。对人的眼睛、皮肤、粘膜和上呼吸道有刺激作用, 吸入后

可引起咳嗽、喘息、喉炎、气短、头痛、恶心、呕吐; 通过食道引起中毒, 对肝、肾造成损害。

青鲜素：可能是致癌物, 因为它能引起老鼠的染色体断裂和畸变。

多效唑：高剂量的多效唑对动物雄性生殖器官有损伤, 子代体重和繁殖指数降低、肝脏受损, 可能是致癌物质, 应慎用; 多效唑粉剂对皮肤和眼睛有轻微至中等的刺激作用。

厂家：上海喜润化学工业有限公司

植物组培及激素-上海世泽生物科技有限公司（比较全）