最新下呼吸道感染细菌学检验操作规范

最新下呼吸道感染细菌学检验操作规范
最新下呼吸道感染细菌学检验操作规范

下呼吸道感染细菌学检验操作规范

一、相关临床知识

临床通常将正常人喉以上部位称之为上呼吸道,上呼吸道定植有大量的正常菌群,而气管以下包括气管、支气管和肺泡称下呼吸道,通常无菌。下呼吸道感染包括急性气管-支气管炎、慢性支气管炎急性发作、支气管扩张继发感染及肺实质感染(肺炎、肺脓肿)等。病原体有细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次体和原虫等。

下呼吸道感染患者可有发热、咳嗽和咳痰,痰呈脓性、粘稠或血性,可伴有胸痛、气急,肺部闻及湿罗音、白细胞总数及嗜中性粒细胞比例明显增高,x线检查提示肺部有炎症性浸润或胸腔积液等体症,严重时可导致感染性休克和呼吸衰竭,因此临床诊断一般不难;细菌学检验能明确感染病原,并提供有关抗菌药物对分离菌的抗菌活性等信息,有助于疾病治疗、流行病学调查研究和医院感染的监测。临床呼吸道标本中常见分离细菌见表1

二、标本采集

本室必须注意生物安全防护。

(一)采集方法

1.自然咳痰法以晨痰为佳,采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁口腔和牙齿,有假牙者应取下假牙。尽可能在用抗菌药物之前采集标本。用力咳出呼吸道深部的痰,痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中,标本量应≥lml。标本应尽快送检,不能及时送检的标本,室温保存≤2h。

2.支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集,但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。

3.小儿取痰法用弯压舌板向后压舌,将拭子伸入咽部,小儿经压舌刺激咳嗽时,可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方,以诱发咳痰。

(二)标本验收

遇有不合格标本,应及时与临床联系,报告不合格标本拒收的具体理由。下呼吸道标本验收与拒收见表2。

三、实验室检查

(一)肉眼观察观察痰液的颜色、粘度、有无血丝和是否呈脓性,如见有颗粒存在,则应注意可能与放线菌属及奴卡菌属感染有关。

(二)显微镜检查下呼吸道细菌学检验的标本均需涂片进行细胞学和细菌学显微镜检查,其目的是判别送检标本是否适合做细菌培养,并初步判定有否病原菌、病原菌的数量及其类别,有助于初步报告、选择培养基(如真菌)和对培养结果的综合分析。合格的标准见表3。

2.细菌涂片染色检查挑取痰液中脓性或带血部份涂成均匀薄片,革兰染色后镜检,油镜下观察细菌形态,排列和染色性,可初步推定菌属(或种),涂片中所见细菌的量及吞噬细胞内是否有细菌等。如发现酵母样菌或菌丝或孢子,应做出相应报告和真菌学检查。

四、分离培养

1.痰标本培养前处理不含或含粘液很少的标本,可直接接种,遇有含大量粘液的标本,应加入等量的液化剂(如pH7.6的10g/L胰酶溶液等),放置35℃待充分液化再行接种。亦可加液化剂后用旋转混匀器搅拌混匀,3000r/rain离心l0min,弃上清液,取沉淀物接种培养基。

2.一般细菌培养

(1)培养基选择

1)血平板适用于分离肺炎链球菌和其他细菌。

最新医院感染监测信息分析报告

医院感染监测信息分析报告 一、医院感染病例的监测 1.元月份全院出院人数283人,上报医院感染病例7例,上呼吸道感染6例, 泌尿系感染1例,医院感染病发率为2.4%; 2.漏报监测内二科出院病历43份,无漏报发生。 二、手术部位感染(切口感染)监测 元月份共上报手术部位感染监测表26份,不符合监测要求的7例(包括急诊手术2例、内镜手术3例、清创缝合2例)。 1.I类切口手术17例,无一例切口感染; 2.I类切口手术≤2h共17例,预防性抗菌药物使用6例,占35%; 3.术后抗菌药物应用4日以内的占13例,4日以上的6例。 三、导尿管相关尿路感染监测 元月份出院患者中留置尿管者共11人,引起泌尿系感染者1例。 四、抗菌药物使用情况监测 元月份出院患者283人,抗菌药物使用人数150人,使用率53%,三联及以上使用人数16人,使用率5.6%。 五、存在问题 1.医院感染发病率相去年有所提高,尤其是上呼吸道感染的发病率相对较多; 2.手术科室抗菌药物应用不规范;

3. 抗菌药物使用联合用药比例较高,尤其是三联及以上使用率高。 六、 改进措施 1. 加强医院感染防控措施的管理,病区内加强通风换气,注意保持环境清洁, 对上呼吸道感染的患者注意佩戴口罩; 2. 医院人员注意加强卫生管理,感冒的医护人员尽量不要接触患者; 3. 各科室要加强《抗菌药物临床应用指导原则》的学习,尤其是手术科室; 4. 医护人员要加强对导尿管相关尿路感染预防措施的学习。 医院感染科 1、最困难的事就是认识自己。20.9.79.7.202009:2709:27:33Sep-2009:27 2、自知之明是最难得的知识。二〇二〇年九月七日2020年9月7日星期一 3、越是无能的人,越喜欢挑剔别人。09:279.7.202009:279.7.202009:2709:27:339.7.202009:279.7.2020 4、与肝胆人共事,无字句处读书。9.7.20209.7.202009:2709:2709:27:3309:27:33 5、三军可夺帅也。Monday, September 7, 2020September 20Monday, September 7, 20209/7/2020 6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。9时27分9时27分7-Sep-209.7.2020 7、人生就是学校。20.9.720.9.720.9.7。2020年9月7日星期一二〇二〇年九月七日 8、你让爱生命吗,那么不要浪费时间。09:2709:27:339.7.2020Monday, September 7, 2020 亲爱的用户: 烟雨江南,画屏如展。在那桃花盛开的地方,在这醉 人芬芳的季节,愿你生活像春天一样阳光,心情像桃花一样美丽,感谢你的阅读。 1、最困难的事就是认识自己。20.9.79.7.202009:2709:27:33Sep-2009:27 2、自知之明是最难得的知识。二〇二〇年九月七日2020年9月7日星期一 3、越是无能的人,越喜欢挑剔别人。09:279.7.202009:279.7.202009:2709:27:339.7.202009:279.7.2020 4、与肝胆人共事,无字句处读书。9.7.20209.7.202009:2709:2709:27:3309:27:33 5、三军可夺帅也。Monday, September 7, 2020September 20Monday, September 7, 20209/7/2020 6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。9时27分9时27分7-Sep-209.7.2020 7、人生就是学校。20.9.720.9.720.9.7。2020年 9月7日星期一二〇二〇年九月七日 8、你让爱生命吗,那么不要浪费时间。09:2709:27:339.7.2020Monday, September 7, 2020 亲爱的用户: 烟雨江南,画屏如展。在那桃花盛开的地方,在这醉人芬芳的季节,愿你生活像春天一样阳光,心情像桃花一 样美丽,感谢你的阅读。

下呼吸道感染细菌学检验操作规范

下呼吸道感染细菌学检验操作规范 临床通常将正常人喉以上部位称之为上呼吸道,上呼吸道定植有大量的正常菌群,而气管以下包括气管、支气管和肺泡称下呼吸道,通常无菌。下呼吸道感染包括急性气管-支气管炎、慢性支气管炎急性发作、支气管扩张继发感染及肺实质感染(肺炎、肺脓肿)等。病原体有细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次体和原虫等。 社区获得性肺炎常见的病原菌有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、卡他莫拉菌、肺炎克雷伯菌、军团菌、肺炎支原体和肺炎衣原体等。医院获得性肺炎常见的病原有铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌和假丝酵母菌等。 下呼吸道感染患者可有发热、咳嗽和咳痰,痰呈脓性、粘稠或血性,可伴有胸痛、气急,肺部闻及湿罗音、白细胞总数及嗜中性粒细胞比例明显增高,X线检查提示肺部有炎症性浸润或胸腔积液等体症,严重时可导致感染性休克和呼吸衰竭,因此临床诊断一般不难;细菌学检验能明确感染病原及药敏结果,有助于疾病治疗、流行病学调查和医院感染的监测。临床呼吸道标本中常见的分离细菌见表1。 表1呼吸道标本中常见分离菌 革兰阳性菌革兰阴性菌 草绿色链球菌、肺炎链球菌、韦荣球菌 化脓性链球菌脑膜炎奈瑟菌、其他奈瑟菌 表皮葡萄球菌、金黄色葡萄卡他莫拉菌 球菌、其他葡萄球菌肺炎克雷伯菌及其他克雷伯菌 微球菌、消化链球菌、消化沙雷菌、变形杆菌 球菌、肠球菌大肠埃希菌及其他肠杆菌科细菌 真杆菌、丙酸杆菌、乳酸杆菌百日咳鲍特菌、不动杆菌 放线菌、奴卡菌、结核分枝杆菌铜绿假单胞菌及其他假单胞菌属 白喉棒状杆菌、类白喉棒状杆菌细菌、嗜肺军团菌、气单胞菌、流 假丝酵母菌感嗜血杆菌、付流杆嗜血杆菌、梭杆菌 一、送检指征 痰液标本是临床微生物学检验最常见的的标本,但不是下呼吸道感染的最佳标本。 1.咳嗽咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常见的症状,咳嗽的性质与痰的性状如脓或铁锈样痰具有鉴别诊断意义。 2.咯血喉以下的呼吸道出血为咯血,包括泡沫血痰、鲜血和痰中带血等。 3.呼吸困难呼吸急促或哮喘,常伴有胸痛。 4.发热伴白细胞增高尤其是中性粒细胞或CRP明显增高。 5.胸部影像学检查提示有感染可能。 二、标本采集与验收 对可疑烈性呼吸道传染病(如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等)的患者采集检验标本时必须注意生物安全防护。 (一)标本采集方法 1.自然咳痰法以晨痰为佳,采集标本前应用清水、冷开岁漱口或用牙刷清洁口腔和牙齿,有假牙者应取下假牙。尽可能在用抗菌药物之前采集标本。用力咳出呼吸道深部的痰,痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中,标本量应≥1ml。咳痰困难者可用雾化吸入加温至45°C的100g/L NaCl水溶液,使痰液易于排出。对难于自然咳

1医学检验毕业论文 (三种肺炎支原体检测法的临床应用分析)

毕业论文 题目:三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 地市: 学校: 准考证号: 考生姓名: 王莹 指导老师: 二〇一八年八月十四日

三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 摘要 目的探讨肺炎支原体(MP)咽拭子快速液体培养法、咽拭子聚合酶链反应(PCR)法和血清MP被动凝集法(MP-Ab)等方法在儿童MP感染诊断治疗过程中的敏感性方法采用3MP检测法对362例临床拟诊呼吸道(非细菌性)感染的患儿的咽拭子和血清标本进行配对研究,每患儿取咽拭子做快速培养和PCR,同时取血清做MP-Ab检测,对3种方法的检测结果与临床诊断治疗病例进行回顾性分析。结果回顾临床病例诊断MP感染患儿152例。MP快速培养法检出阳性78例,阳性率为51.3%,病程为(4.5±2.6)天;PCR法检测出阳性103例,阳性率为67.8%,病程为(6.2±3.5)天;MP-Ab法检测出阳性127例,阳性率83.5%,病程(8.1±4.5)天。结论 3种MP检测法的敏感性与病程有相关性,临床医生应根据患儿病程选取检测方法,以提高阳性检出率和敏感性。 关键词肺炎支原体,快速培养法,咽拭子聚合酶链反应,血清抗体,配对研究

目录 前言 (4) 第一章文献综述 (5) §1.1 肺炎支原体的定义 (5) §1.2 肺炎支原体的发病机制 (5) §1.3 肺炎支原体的分类 (5) §1.4 肺炎支原体的临床表现 (5) §1.5 肺炎支原体的临床诊断 (5) §1.6 肺炎支原体的实验室检查 (6) 第二章材料和方法 (7) §2.1 样本 (7) §2.2方法概述 (7) §2.3临床诊断MP感染的诊断标准 (7) §2.4实验方法 (7) §2.5统计学方法 .................................................................... .. (8) 第三章结果 (9) 第四章讨论 (10) 结论 (11) 参考文献 (11) 附录 (12) 错误!未定义书签。

最新下呼吸道感染细菌学检验操作规范

下呼吸道感染细菌学检验操作规范 一、相关临床知识 临床通常将正常人喉以上部位称之为上呼吸道,上呼吸道定植有大量的正常菌群,而气管以下包括气管、支气管和肺泡称下呼吸道,通常无菌。下呼吸道感染包括急性气管-支气管炎、慢性支气管炎急性发作、支气管扩张继发感染及肺实质感染(肺炎、肺脓肿)等。病原体有细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次体和原虫等。 下呼吸道感染患者可有发热、咳嗽和咳痰,痰呈脓性、粘稠或血性,可伴有胸痛、气急,肺部闻及湿罗音、白细胞总数及嗜中性粒细胞比例明显增高,x线检查提示肺部有炎症性浸润或胸腔积液等体症,严重时可导致感染性休克和呼吸衰竭,因此临床诊断一般不难;细菌学检验能明确感染病原,并提供有关抗菌药物对分离菌的抗菌活性等信息,有助于疾病治疗、流行病学调查研究和医院感染的监测。临床呼吸道标本中常见分离细菌见表1 二、标本采集 本室必须注意生物安全防护。 (一)采集方法 1.自然咳痰法以晨痰为佳,采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁口腔和牙齿,有假牙者应取下假牙。尽可能在用抗菌药物之前采集标本。用力咳出呼吸道深部的痰,痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中,标本量应≥lml。标本应尽快送检,不能及时送检的标本,室温保存≤2h。 2.支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集,但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。 3.小儿取痰法用弯压舌板向后压舌,将拭子伸入咽部,小儿经压舌刺激咳嗽时,可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方,以诱发咳痰。 (二)标本验收 遇有不合格标本,应及时与临床联系,报告不合格标本拒收的具体理由。下呼吸道标本验收与拒收见表2。

2015年我院下呼吸道感染病原菌分布及耐药监测分析

2015年我院下呼吸道感染病原菌分布及耐药监测分析 报告如下。 1 材料与方法 1. 1 菌株来源本院2015 年住院治疗的下呼吸道感染患者留取的4808 份痰标本。1. 2 方法按照《全国临床检验操作规程》[2]规定的检测方法对留取的痰标本进行细菌分离培养、鉴定,使用法国梅里埃公司细菌鉴定仪及药敏试验仪、试剂。药敏试验采用纸片扩散法(K-B法)以及最低抑菌浓度(MIC)进行。 2 结果 2. 1 病原菌分离培养鉴定经病原菌分离培养鉴定发现,4808 份送检痰标本中,共培养出菌株277株。其中,培养出革兰阴性菌167 株(60.3%),按照分离到的菌株从多到少排序分别是肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、洛菲不动杆菌、粘质沙雷氏菌、鲍曼不动杆菌、催产克雷伯菌、弗劳地枸橼酸杆菌、稻皮假单胞菌;革兰阳性菌64株(2 3.1%),按照分离到的菌株从多到少排序分别是金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、肺炎链球菌;真菌46株(16.6%),按照分离到的菌株从多到少排序分别是白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、其他酵母菌。 2. 2 病原菌的耐药性 2. 2. 1 革兰阴性菌的耐药率分离到的常见革兰阴性菌的药敏实验结果,肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌对亚胺培南西司他丁钠的耐药率分别为2.0%、0.5%、27.0%,对P/T的耐药率分别为5.0%、2.5%、20.8%,对头孢吡肟的耐药率分别为20.8%、44.9%、24.3%。见表1。

2. 2. 2 革兰阳性球菌的耐药率金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌对青霉素的耐药率最高,分别为85.5%、85.9% ;对左氧氟沙星的耐药率较低,分别为28.9%、28.9%;对万古霉素的耐药率最低,分别为0、0。见表2。 2. 2. 3 真菌的耐药率白色念珠菌对伊曲康唑和氟康唑耐药率最高,分别为 3.1%和 3.1%;光滑念珠菌对伊曲康唑耐药率最高,为40.0%;热带念珠菌对伊曲康唑耐药率最高,为50.0%;其他酵母菌对伊曲康唑耐药率最高,为2 4.5%。见表3。 3 讨论 近年来,抗菌药物越来越广泛的被应用到各种感染性疾病治疗中,这就造成了近年来多重耐药菌的增多。本文数据显示,本院下呼吸道感染患者送检的痰标本中分离到的革兰阴性菌占比较高,为60.3%,革兰阳性菌所占比例为23.1%,本院下呼吸道感染致病菌以革兰阴性菌為主,这与部分国内学者近年来的报道相同[3,4],与本院近3年的下呼吸道感染致病菌的监测[5]也是一致的。从表1中可以看出,在本院革兰阴性菌中前三位的病原菌为肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌,它们对头孢唑林的耐药率29.2%、53.2%、-,对头孢呋辛的耐药率为27.7%、46.8%、-,对亚胺培南西司他丁钠的耐药率为2.0%、0.5%、27.0%,对P/T的耐药率为5.0%、2.5%、20.8%,对头孢吡肟的耐药率为20.8%、44.9%、24.3%。肺炎克雷伯杆菌对左氧氟沙星、亚胺培南西司他丁钠、P/T 较敏感,大肠埃希菌对泰能、P/T较敏感,而铜绿假单胞菌单药耐药率均在20%以上。与尚旭明等[6]学者的监测结果一致。可见,革兰阴性菌对一代、二代头孢菌素的耐药率较高,对碳青霉烯类抗生素耐药率较低[7-10]。在临床工作中,如遇革兰阴性菌感染,可选择三代、四代头孢菌素、半合成广谱青霉素类、碳青霉烯类抗生素,避免选用一、二代头孢菌素,如遇重症感染应尽早应用碳青霉烯类抗生素。产广谱β- 内酰胺酶的细菌的增多,与近年来广泛使用三代头孢素密切相关,工作中应根据药敏结果,选择合适的抗生

全国不明原因肺炎病例监测实施方案-中国疾病预防控制中心

全国不明原因肺炎病例监测实施方案(试行) 为筛查可能的SARS病例和人禽流感病例及其它传染性呼吸道疾病,早期发出预警并采取相应的防控措施,从而防范SARS5情的扩散蔓延和可能出现的人禽流感疫情,特制定本方案。 一、监测目的 1.及时发现、控制SARS人禽流感及其它传染性呼吸道疾病疫情。 2.了解不明原因肺炎报告病例数的动态变化。 二、监测内容 (一)监测医院县及县以上各级各类医疗机构均要开展不明原因肺炎病例的监测报告。 (二)监测对象及病例定义 1 .不明原因肺炎病例 同时具备以下 4 条不能作出明确诊断的肺炎病例:(1)发热(》38C); (2)具有肺炎或急性呼吸窘迫综合征(ARDS的影像学特征; (3)发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计数减少; (4)经抗生素规范治疗3-5 天,病情无明显改善。 2.SARS预警指标 符合以下情况之一的不明原因肺炎病例可定为SARS预警病例: (1)地市级专家组会诊不能排除SARS勺不明原因肺炎病例;

(2)两例或以上有可疑流行病学联系的不明原因肺炎病例; (3)重点人群发生不明原因肺炎病例: ①医疗机构工作人员中出现勺不明原因肺炎病例; ②可能暴露于SARS病毒或潜在感染性材料的人员中出现的不明原因 肺炎病例(如从事SARS^研、检测、试剂和疫苗生产等相关工作人员); ③接触野生动物的人员发生的不明原因肺炎病例; (4)不明原因的肺炎死亡病例。 3.人禽流感预警病例:符合以下情况之一的不明原因肺炎病例可定为人 禽流感预警病例: (1)接触禽类人员(饲养、贩卖、屠宰、加工禽类的人员、兽医、以及捕杀、处理病、死禽及进行疫点消毒的人员等)中发生的不明原因肺炎病例; (2)可能暴露于禽流感病毒或潜在感染性材料的人员中出现不明原因肺炎病例。 (3)已排除SARS的不明原因的肺炎死亡病例。 三、不明原因肺炎病例的报告 医疗机构的临床医务人员发现符合不明原因肺炎定义的病例后(乡镇、社区基层医疗机构发现不明原因肺炎病例后,必须立即将其转至县级以上医院进行诊治),应立即报告医院相关部门,由医院组织本医院专家组进行会诊和排查,仍不能明确诊断的,应立即填写传染病报告卡(空

医院感染监测信息分析报告

2013年元月份医院感染监测信息分析报告 一、医院感染病例的监测 1.元月份全院出院人数283人,上报医院感染病例7例,上呼吸道感染6例, 泌尿系感染1例,医院感染病发率为2.4%; 2.漏报监测内二科出院病历43份,无漏报发生。 二、手术部位感染(切口感染)监测 元月份共上报手术部位感染监测表26份,不符合监测要求的7例(包括急诊手术2例、内镜手术3例、清创缝合2例)。 1.I类切口手术17例,无一例切口感染; 2.I类切口手术≤2h共17例,预防性抗菌药物使用6例,占35%; 3.术后抗菌药物应用4日以内的占13例,4日以上的6例。 三、导尿管相关尿路感染监测 元月份出院患者中留置尿管者共11人,引起泌尿系感染者1例。 四、抗菌药物使用情况监测 元月份出院患者283人,抗菌药物使用人数150人,使用率53%,三联及以上使用人数16人,使用率5.6%。 五、存在问题 1.医院感染发病率相去年有所提高,尤其是上呼吸道感染的发病率相对较多;

2.手术科室抗菌药物应用不规范; 3.抗菌药物使用联合用药比例较高,尤其是三联及以上使用率高。 六、改进措施 1.加强医院感染防控措施的管理,病区内加强通风换气,注意保持环境清洁, 对上呼吸道感染的患者注意佩戴口罩; 2.医院人员注意加强卫生管理,感冒的医护人员尽量不要接触患者; 3.各科室要加强《抗菌药物临床应用指导原则》的学习,尤其是手术科室; 4.医护人员要加强对导尿管相关尿路感染预防措施的学习。 医院感染科 2013年1月30号 (注:专业文档是经验性极强的领域,无法思考和涵盖全面,素材和资料部分来自网络,供参考。可复制、编制,期待你的好评与关注)

全国不明原因肺炎病例监测实施方案-中国疾病预防控制中心

全国不明原因肺炎病例监测实施方案-中国疾病预防控制中心

全国不明原因肺炎病例监测实施方案(试行) 为筛查可能的SARS病例和人禽流感病例及其它传染性呼吸道疾病,早期发出预警并采取相应的防控措施,从而防范SARS疫情的扩散蔓延和可能出现的人禽流感疫情,特制定本方案。 一、监测目的 1.及时发现、控制SARS、人禽流感及其它传染性呼吸道疾病疫情。 2.了解不明原因肺炎报告病例数的动态变化。 二、监测内容 (一)监测医院 县及县以上各级各类医疗机构均要开展不明原因肺炎病例的监测报告。 (二)监测对象及病例定义 1.不明原因肺炎病例 同时具备以下4条不能作出明确诊断的肺炎病例: (1)发热(≥38℃); (2)具有肺炎或急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的影像学特征; (3)发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计数减少; (4)经抗生素规范治疗3-5天,病情无明显改善。 2.SARS预警指标 符合以下情况之一的不明原因肺炎病例可定为SARS预警病例:

(1)地市级专家组会诊不能排除SARS的不明原因肺炎病例; (2)两例或以上有可疑流行病学联系的不明原因肺炎病例;(3)重点人群发生不明原因肺炎病例: ①医疗机构工作人员中出现的不明原因肺炎病例; ②可能暴露于SARS病毒或潜在感染性材料的人员中出现的不明原因肺炎病例(如从事SARS科研、检测、试剂和疫苗生产等相关工作人员); ③接触野生动物的人员发生的不明原因肺炎病例; (4)不明原因的肺炎死亡病例。 3.人禽流感预警病例: 符合以下情况之一的不明原因肺炎病例可定为人禽流感预警病例:(1)接触禽类人员(饲养、贩卖、屠宰、加工禽类的人员、兽医、以及捕杀、处理病、死禽及进行疫点消毒的人员等)中发生的不明原因肺炎病例; (2)可能暴露于禽流感病毒或潜在感染性材料的人员中出现不明原因肺炎病例。 (3)已排除SARS的不明原因的肺炎死亡病例。 三、不明原因肺炎病例的报告 医疗机构的临床医务人员发现符合不明原因肺炎定义的病例后(乡镇、社区基层医疗机构发现不明原因肺炎病例后,必须立即将其转至县级以上医院进行诊治),应立即报告医院相关部门,由医院组织本医院专

2007~2012年儿童急性下呼吸道感染细菌病原学监测分析

2007~2012年儿童急性下呼吸道感染细菌病原学监测分 析 摘要:目的了解儿童急性下呼吸道感染病原菌的流行特征。方法采用ATB Expression ID-32细菌鉴定仪进行菌株鉴定。结果2007~2012年共分离细菌1570株,阳性率26.7%。金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌居前5位;鲍氏不动杆菌有增加趋势(χ2=19.43,P关键词:急性下呼吸道感染;病原菌;儿童 儿童急性下呼吸道感染包括支气管炎、毛细支气管炎、支气管肺炎等疾病,是我国儿童住院的最常见原因。在发展中国家,儿童急性下呼吸道感染病原体以细菌多见,而不同区域、不同年代病原菌的种类分布不同。现将本区域2007年1月~2012年12月急性下呼吸道感染住院患儿细菌病原学监测结果报道如下。 1 资料与方法 1.1一般资料2007年1月~2012年12月在我科住院、年龄1月~14岁、无营养不良及先天性心脏病等基础疾病的所有急性下呼吸道感染患儿。 1.2方法 1.2.1痰液标本采集患儿于入院后应用抗生素前,使用上海上医康鸽医用器材有限责任公司生产的一次性吸痰管配痰液收集器,在无菌操作下经气管负压抽取痰液标本进行细菌培养。 1.2.2菌株鉴定采用法国生物-梅里埃公司ATB Expression ID-32细菌鉴定仪进行菌株鉴定,同一患儿同一痰液标本分离到2种或以上细菌时只采用优势菌,流感嗜血杆菌未做菌株鉴定,不收集厌氧菌、真菌。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC 25923、肺炎链球菌ATCC

49619、大肠埃希菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC 27853。 1.3统计学处理应用SPSS 11.5统计软件,率的比较采用χ2检验,P2 结果 2.1基本情况2007年1月~2012年12月共收治急性下呼吸道感染5889例,男性3994例,女性1895例;3岁467例。1570例细菌培养阳性,阳性率26.7%。 2.2病原菌种类、构成1570株细菌中革兰氏阳性菌726株,占46.2%;革兰氏阴性菌844株,占5 3.8%。居前5位的细菌依次为金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍氏不动杆菌。 2.3主要病原菌年份分布各年份比较,肺炎链球菌和大肠埃希菌分离率差异无统计学意义(χ2=4.71和10.01,P>0.05),金黄色葡萄球菌分离率2008年和2009年较低(χ2=17.67,P2.4主要病原菌季节分布各月份比较,肺炎链球菌和大肠埃希菌分离率差异无统计学意义(χ2=11.19和10.60,P>0.05),金黄色葡萄球菌分离率7~10月份较低(χ2=2 3.56,P0.05),3 讨论 本次监测结果显示,居前5位的病原菌依次为金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍氏不动杆菌。这种病原菌的分布和构成与华春珍等报道的主要病原菌为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌以及张秀红等报道的主要病原菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌有所不同。金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌不同年份分离率有所不同,鲍氏不动杆菌感染有增加趋势。说明儿童急性下呼吸道感染病原菌的分布和构成因不同地区、不同时期、不同经济生活条件而存在差异,在选择治疗药物时应充分考虑本区域主要病原菌的流行情况。季节分布显示,主要病原菌散在分布于各月份,但金黄色葡萄球菌分离率11月~4月较高,肺炎克雷伯菌分离率7~10月份较高,鲍氏不动杆菌分离率6~10月份较高,说明儿童在寒冷季节较易受金黄色葡萄球菌感染,而在炎热环境中较易受肺炎克雷伯菌和鲍氏不动

肺炎支原体检测方法的选择

肺炎支原体检测方法选择的几个注意点 肺炎支原体(MP ),主要引起咽炎及支气管炎,少数累及肺。以其顶端结构与宿主细胞上受体结合粘附于上皮细胞上,一般为表面感染,除穿透支原体外(艾滋病人感染)大多不侵入血液。产生有毒代谢产物如外毒素或过氧化氢等引起发热及局部细胞损伤。 选择检测方法的注意事项: 1.临床常用全血(指尖血)或血清(橘黄管)检测IgM 来判定肺炎支原体的感染,但是,抗体检测只是各种实验室方法的一种,尚有其他方法可用,如培养及DNA 检测,每种方法各有利弊,对不同病程各有针对性。 2.每一种实验结果都需要另外一种实验结果来验证,正常人咽部或支气管可携带MP ,所以不能用一种实验数据来下诊断。 3.初次感染时, IgM 、IgG 都会产生,再次感染时,有时IgM 不产生。 4.儿童由于初次感染几率大,常能产生IgM ,成人由于机体可能感染过多次,常不产生IgM 。 5. 检测方法的选择需要根据病程确定: <6个月 6-12个月 1-9岁 IgM + IgM — 年龄对IgM 抗体产生的影响

抗体 抗原 MP感染不同时段产物的比较 由此图可以看出: a.感染早期,7天之内以检测抗原为主,宜培养或DNA检测: 培养为“金标准”,据国内文献显示,快速培养法阳性率为24%;PCR--DNA检测为96%。美国一篇文献显示,培养阳性率为5%,DNA为57%。 b.早期未产生抗体,导致延误治疗,后期抗体阳性,病原体消失,导致过用抗生素。 c.7天之后可检测IgM抗体; d.IgM可持续较长时间,感染后三个月抗体浓度依然较高,有的可以终生阳性,如果短时间内检测抗体,常不能分辨是否为MP现症感染或其他感染。 e.感染早期宜病原体筛查,此时抗体尚未产生,可导致延误治疗;中后期适宜抗体检测,主要用于回顾性验证试验,此时病原体消失,可导致过用抗生素。

下呼吸道感染患者痰菌的临床检验分析

下呼吸道感染患者痰菌的临床检验分析 【摘要】目的了解感染患者病原性细菌分布情况,为临床防治下呼吸道感染提供依据。方法对我院收治的390例下呼吸道感染患者的临床检验资料进行分析,分析病原性细菌的种类及耐药性情况。结果本组患者中病原菌检测结果390例痰液标本中最常见感染菌株为铜绿假单胞菌、耐甲氧西林表皮葡萄球菌及产气肠杆菌。药敏试验结果显示,G+杆菌耐药率十分高,只有复方新诺明呈现部分耐药,其余药物均表现为完全耐药;G-杆菌中氨苄西林、头孢唑林完全耐药,其余药物也呈现不同程度的耐药性;真菌耐药性较低,为部分耐药和敏感。结论当前临床上耐药菌株较为常见,应加强抗菌药物的合理使用管理、提高临床用药水平,以缓解当前临床多重耐药性的危机。 【关键词】下呼吸道感染;病原菌;抗菌药物 【中图分类号】R446.5 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949(2015)02-0250-020 下呼吸道感染是临床常见感染性疾病之一,也是多种病原微生物均可引起呼吸系统感染,根据当前全球疾病死亡率调查分析,急性呼吸道感染造成的死亡人数居世界第三位,仅次于心、脑血管痢疾。由下呼吸道感染可能造成患者脏器功能衰竭,相应的也使患者的死亡率增高,因此,对下

呼吸道感染病原菌进行临床检验分析,对临床合理治疗用药有重要的参考作用。为了解我院下呼吸道感染病原菌分布及其耐药性,帮助临床合理选择抗菌药物,对我院2010年9 月-2011年9月选择了450例下呼吸道感染患者的临床检验资料,分析其原性细菌的临床检验结果,现报告如下: 1 临床资料与方法 1.1一般资料对我院2013年9月-2014年9月选择了390例下呼吸道感染患者的临床检验进行分析,其中男240例,女150例,年龄46~84岁,平均67.4岁,住院时间6~38d,平均16.8d。 1.2标本采集采集前要求患者先用清水漱口数次,应用无菌生理盐水进行口腔部位的清洁,以去除口腔内大量杂菌,然后取深部痰液盛放于无菌容器中送检验;相比痰量过少或无痰的患者可采用雾化吸入预温至45℃左右的氯化钠 水溶液,使痰液易于排出。采用涂片检查和细菌培养法,并做药物敏感试验,测定病原菌种类及药物敏感性,包管检查结果的准确。 1.3 统计方法 采用SPSS 15.0软件包对数据进行统计分析,计数资料采用χ2检验。 2 结果 2.1病原菌分布本组390例患者总计分离出菌株687株,

下呼吸道感染的病菌检测与耐药性的相关解析

下呼吸道感染的病菌检测与耐药性的相关解析 发表时间:2016-05-23T14:44:38.567Z 来源:《医药前沿》2016年2月第6期作者:张吉李泉张晓芹张浩 [导读] 重庆市长寿区人民医院检验科医院感染中,院内获得性下呼吸道感染为最为主要的一种感染,所有致死性医院感染中。 张吉李泉张晓芹张浩 (重庆市长寿区人民医院检验科重庆长寿 401220) 【摘要】目的:对下呼吸道感染的病菌检测与耐药性进行分析探讨,为今后的临床工作提供有价值的参考信息。方法:选择2013年6月~2015年6月间我院收治的获得临床明确诊断的下呼吸道感染患者98例作为研究对象,对其痰液标本进行病原菌培养、分离、鉴定,并开展药敏试验,对实验结果进行统计分析。结果:经统计发现,分离出的病原菌中以革兰阴性菌所占比较高;革兰阴性菌中以大肠埃希菌最为常见;大肠杆菌、阴沟肠杆菌以及肺炎克雷伯菌对阿莫西林、氨苄青霉素具有明显的耐药性。结论:临床上下呼吸道感染的发病率依旧相对较高,因此应严格对科室内导致感染的致病菌实施监控、合理应用抗生素,避免发生病原菌耐药性,增加临床治疗有效率。 【关键词】下呼吸道感染;致病菌;耐药性;监测 【中图分类号】R515 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)06-0177-02 临床上医院感染为患者在住院期间在医院内获得性的一种感染,不包括患者在入院之前便已经存在的感染或者是在入院之前处在潜伏状态的感染。医院感染中,院内获得性下呼吸道感染为最为主要的一种感染,所有致死性医院感染中,下呼吸道感染居第一位。流行病学调查结果显示[1],我国医院感染的发病率在3.3%左右,随着致病菌耐药性越来越严峻,使得临床抗感染治疗效果受到了严重影响,因此促进临床合理用药的意义重大。本次研究中出于对下呼吸道感染的病菌检测与耐药性进行分析探讨,为今后的临床工作提供有价值的参考信息的目的,对我院收治的符合临床诊断标准下呼吸道感染患者的痰液标本展开了病原菌培养、分离、鉴定,并开展药敏试验,对实验结果进行统计分析,结果汇报如下。 1.资料与方法 1.1 一般资料 研究中资料来源于我院收治的获得临床明确诊断的下呼吸道感染患者,共计选择其中的98例作为研究对象,包括有男54例,女44例,年龄34~73岁,平均(55.4±13.4)岁,患者所患疾病包括有慢性支气管炎、肺炎、COPD、肺源性心脏病、支气管哮喘等,患者临床症状主要为呼吸困难、咳痰、咳嗽、疲乏无力、发热以及肌肉酸痛等。所有患者均符合《医院感染诊断标准》[2],自愿接受临床检测,并签署了知情同意书。剔除合并其他部位感染、患有严重的肝肾功能不全、年龄超过75岁、患有自身免疫性疾病患者。 1.2 方法 1.2.1研究方法我院收治的获得临床明确诊断的下呼吸道感染患者痰液标本展开病原菌培养、分离、鉴定,并开展药敏试验,对实验结果进行统计分析。 1.2.2试验方法菌株分离:经无菌集痰器采集受试者气道分泌物或者是灌洗液,标本收集完成后2小时内送往检验科,经涂片阅片判断为合格痰标本,并请专门人员展开细菌培养、药敏试验。本次研究中98例患者痰液标本共分离出致病菌98株。 致病菌鉴定:分离得到的病原菌株全部经珠海迪尔全自动微生物分析仪进行菌种鉴定。 药敏试验:研究中用珠海迪尔全自动鉴定药敏仪进行药敏试验。 1.3 数据处理 研究中相关计量资料采用均数加减标准差(x-±s)形式表示,对比中采取t检验,计数资料的对比则是采取χ2检验,在P<0.05时,视为差异存在统计学意义。 2.结果 2.1 菌株分离情况 本次研究中98例患者痰液标本共分离致病菌98株,其中包括有革兰阴性菌48株(48.98%),革兰阳性菌34株(34.69%),真菌16株(16.33%)。显然革兰阴性菌所占比例最高(P<0.05)。革兰阴性菌中包括铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟菌等,其中大肠埃希菌所占比例最高。革兰阳性菌中包括金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、肺炎链球菌等。真菌包括有白色念珠菌、光滑念珠菌等。 2.2 药敏试验结果 经统计发现,大肠杆菌、阴沟肠杆菌以及肺炎克雷伯菌对阿莫西林、氨苄青霉素的耐药率为100%,大肠埃希菌、阴沟肠杆菌对哌拉西林的耐药率均达100%,阴沟肠杆菌对庆大霉素、头孢噻肟的耐药率为100%;各种肠杆科细菌对亚胺培南均敏感。 3.讨论 临床上下呼吸道感染属于医院内高发性感染,危险因素较多,包括有大剂量光谱抗生素的应用,其中最具有代表性的就是抗菌药物中碳青霉烯类,近几年的调查结果显示,随着这一类抗生素的广泛大量应用,使得多重耐药性日益严峻。目前耐药性问题已经成为下呼吸道感染防治的关键问题,并且对临床治疗以及患者的生活质量产生了严重的干扰[3]。本次研究中出于对下呼吸道感染的病菌检测与耐药性进行分析探讨,为今后的临床工作提供有价值的参考信息的目的,对我院收治的符合临床诊断标准下呼吸道感染患者的痰液标本展开了病原菌培养、分离、鉴定,并开展药敏试验,对实验结果进行统计分析,结果发现,分离出的病原菌中以革兰阴性菌所占比例最高;革兰阴性菌中以铜绿假单胞菌最为常见;大肠杆菌、阴沟肠杆菌以及肺炎克雷伯菌对阿莫西林、氨苄青霉素具有明显的耐药性。这一结果与相关文献[4]报道结果相似,由此证实,临床上下呼吸道感染的发病率依旧相对较高,因此应严格对科室内导致感染的致病菌实施监控、合理应用抗生素,避免发生病原菌耐药性,增加临床治疗有效率。 【参考文献】 [1]金晨慈,蒋欢欢,蒋龙翔.2004-2008 年下呼吸道医院感染病原菌分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2010,20(07):1028-1030. [2]文细毛,任南,吴安华等.全国医院感染监控网医院感染病原菌分布及变化趋势[J].中华医院感染学杂志,2011,21(02):350-355. [3]雷鸿斌,范文,黄娥等.ICU下呼吸道感染的革兰阴性杆菌耐药性调查分析[J].中华医院感染学杂志,2011,21(04):806-807. [4]杨玉霞,栾斌,马丽娜.2000-2010年下呼吸道感染病原菌构成变迁及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2011,21(16):3509-3511.

呼吸机相关肺炎目标性监测方案

呼吸机相关肺炎目标性监测方案 一、监测目的 1、了解使用呼吸机患者发生肺部感染等医院感染发生率; 2、发现危险因素,积极进行干预; 使用呼吸机超过48h的患者,咳嗽、咳痰或原有下呼吸道感染患者出现咳嗽。咳痰明显加重或痰液性状显著改变,并有下列情况之一者: 1、发热; 2白细胞总数及嗜中性粒细胞比例增高;

3、痰呈脓性; 4、肺部罗音或与入院时比,有明显恶化; 5、X线显示肺部有炎症性病变或与入院时比较出现新病变,并排除非感染性原因如肺栓塞、心力衰竭、肺水肿、肺癌等。 详 掌握呼吸机使用指征及VAP的预防控制措施,每日评估使用呼吸机患者撤机指征,如有异常及时做培养;若病人发生医院感染时填写“医院感染病例报告卡”。做好VAP宣教和指导。 2、病房护士

落实VAP预防控制措施;做好VAP宣教和指导。 3、医院感染监控专职人员 每天了解、登记被监测使用呼吸机患者的情况,与经管医生确定患者有无呼吸系统感染情况,督促医生及时完成标本送检及相关检查,及时追查送检结果并要求合理应用抗菌药物。 (三)痰培养标本采集方法 协助患者取适当卧位,友下向上叩击病人背部,戴好无菌手套,无菌积痰器分别连接负压吸引器和无菌吸痰管。按吸痰法将痰吸入无菌积痰器内,加盖送检。注意无菌操作;无菌吸痰器开口高的一端接吸引器,低的一端接吸痰管。 六、有关指标的计算 呼吸机相关肺炎感染发病率=×1000‰ 七、数据的整理、分析、比较及反馈 1、专人负责,认真填写,避免遗漏,及时整理完善数据。 2、如发现数据缺失,及时查找和分析原因(人的因素、概念、流程、方法),并采取改善措施。 3、每月汇总每季度总结分析,不断提高监测数据收集的准确性,将调查数据向相关科室、人员反馈。

重症监护病房下呼吸道真菌感染率调查分析

重症监护病房下呼吸道真菌感染率调查分析 目的:调查分析ICU下呼吸道真菌感染情况。方法:将近年来ICU下呼吸道标本分离培养的细菌经全自动微生物鉴定仪确诊的真菌情况进行统计分析,并对抗生素的使用情况进行了统计。结果:ICU病房下呼吸道真菌感染率呈逐年上升趋势,其中以白色念珠菌、热带念珠菌感染为主。结论:真菌为条件致病菌,当机体免疫力下降,菌群失调时引起感染。近年来,ICU真菌感染率逐年升高与广谱抗生素的应用、侵入性操作较多有较大关系。 标签:重症监护病房;真菌;感染率 因为重症监护病房(ICU)的患者多为危重患者,且气道侵入性手术者多见,同时广谱抗生素的大量使用,使肺部真菌感染问题特别突出,为了掌握ICU真菌感染情况,现将笔者所在医院2009年1月-2012年11月真菌检出情况进行统计分析,为临床救治危重患者提供依据。 1 资料与方法 1.1 一般资料 2009年1月-2012年11月ICU住院送检痰液标本768例。768例中,男421例,女347例。年龄8~89岁,平均65.8岁。本组病例中脑血管意外68例,手术后192例,呼呼吸衰竭120例,有机磷中毒18例,外伤247例,肿瘤26例,尿毒症44例,其他严重疾病53例。其中2009年171例,2010年154例,2011年206例,2012年237例。 1.2 抗生素和免疫抑制剂使用情况 本组患者有768例,因疾病需要应用激素者231例(30.0%),应用免疫抑制剂、化疗者26例(3.4%),100%使用抗生素,均病情严重或侵入性操作预防性应用抗生素。抗生素应用:≤2种抗生素者536例,占69.8%;≥2种抗生素者232例,占30.2%。 1.3 方法 1.3.1 标本采集气管切开或插管患者用一次性吸痰管吸取后,置于无菌痰杯中送检;意识清醒,有自主能力者,嘱其用生理盐水漱口后咳深部痰液一口于无菌痰杯中送检。 1.3.2 菌株鉴定分离菌株鉴定仪器用法国梅里埃公司VITEK32微生物鉴定系统。鉴定用法国梅里埃YBC(商品编号为V1303)酵母菌鉴定卡。 1.3.3 阳性指标将送检标本经常规分离培养后,用YBC鉴定卡进行鉴定。

下呼吸道感染大肠埃希菌的检测及耐药性分析

下呼吸道感染大肠埃希菌的检测及耐药性分析 【中图分类号】R664.6【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2011)10-0214-02大肠埃希 菌是呼吸内科下呼吸道感染的常见菌,由于各种抗生素的广泛使用,甚至滥用,使大肠埃希 菌对各种抗生素的敏感性不断下降,这些耐药的产生与大肠埃希菌产生的超广谱β-内酰胺酶(Exten- ded-Spectrumβ-lactamase,ESBLs)、AmpC酶有关[1,2]。文献报道,大肠埃希菌对头孢他啶、头孢噻肟、哌拉西林等应用广泛的抗生素敏感性逐年下降。为此,我们对本院呼吸内科住院 尘肺患者分离的256株大肠埃希菌进行耐药谱及ESBLs、AmpC酶检测,指导临床抗感染用药。 1材料与方法 1.1 实验菌株:2006年7月~2010年7月呼吸内科住院下呼吸道感染患者临床送检的痰 液标本。病人早晨漱口,深咳,取痰液送检,连续3日。用SENSITITRE荧光法全自动快速微 生物鉴定仪(Aris)进行菌株鉴定。大肠埃希菌ATCC25922为标准菌株。 1.2药敏试验:将大肠埃希菌在LB液体培养基(OXOID)中于37℃培养过夜,用LB培养 液调整浊度至0.5麦氏浓度。 采用Kirby-Bauer法。Mueller-Hinton琼脂(英国Oxoid公司),受试抗菌药物共18种,分 别是:哌拉西林(齐鲁制药公司)、哌拉西林/三唑巴坦(美国Wyeth-Ayerst公司)、头孢西丁(海南海药公司海口制药厂)、头孢他啶(Galaxo-Smithkline苏州公司)、头孢噻肟(华北制药凯瑞 特公司)、头孢曲松(中诺药业公司)、头孢吡肟(中美上海施贵宝制药公司)、美罗培南(日本住 友制药株式会社)、阿米卡星(上海旭东海普药业公司)、环丙沙星(广州南新制药有限公司)、 左氧氟沙星(江苏豪森药业股份有限公司)。取0.1ml菌液点于平板中央,用涂布棒均匀涂布整个平板,制成含菌平板。将抗生素药敏纸片贴至含菌平板表面,35℃孵育24小时,测量抑 菌圈直径。 1.3 大肠埃希菌ESBLs检测:按照1.2方法进行菌液涂布琼脂平板及贴药敏纸片,35℃孵 育24小时,测量抑菌圈直径。药敏纸片为头孢他啶、头孢噻肟、头孢他啶+克拉维酸和头孢 噻肟+克拉维酸。按照临床实验室标准化协会(CLSR)制定的标准鉴别敏感菌株和耐药菌株,用WHONET软件分析耐药率[3]。按照CLSR的标准,当头孢他啶或头孢噻肟+克拉维酸的 抑菌圈直径减去头孢他啶或头孢噻肟的抑菌圈直径大于等于5mm时为产耐药酶ESBLs的菌株。 1.4AmpC酶检测: 待检菌酶粗提物的制备按NCCLS纸片扩散法的标准对所有菌株测定对头孢 西丁的敏感性。对其不敏感的菌株(抑菌圈直径≤17 mm)进行酶的粗提。将受试菌菌落制成0.5麦氏单位菌液,取50 ul菌液加入12 ml胰酶消化大豆肉汤于35℃孵育4~6 h,于4℃4000 r /min离心20 min,弃上清液,将沉淀经-20℃与37℃水浴反复冻融6次后过滤,滤液经MH 琼脂平板ATCC25922菌液接种于MH琼脂平板上常规细菌培养阴性后于-20℃保存待检测。 大肠埃希菌AmpC检测三维试验参照参考文献[3]方法进行,在水解酪蛋白胨(MH)琼 脂平板上均匀涂布0.5麦氏单位的大肠埃希菌(ATCC 25922)菌液,将FOX纸片贴于平板中央,用无菌刀片沿FOX纸片边缘5mm处放射状切一裂缝,裂缝里加入25ul酶粗提物,35℃孵箱 培养16~18h后,观察抑菌圈的形状,如果平皿上出现一个沿槽周围生长指向FOX纸片的矢 状菌苔,即为三维试验阳性。 1.5 数据统计:利用SPSS11.5软件对实验结果进行t检验及x2检验,以P<0.05为差异有 统计学意义。 2 结果

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