(精)仪器分析实验讲义
实验一722 型分光光度计的性能检测
一、目的
1、学会使用分光光度计
2、掌握分光光度计的性能检验方法
二、提要
1、分光光度计的性能好坏，直接影响到测定结果的准确性，因此新购仪器及使用一定时间后，均需进行检验调整。
2、利用KMnO4溶液的最大吸收峰值来检验波长的精度。
3、用同种厚度的比色皿，由于材料及工艺等原因，往往造成透光率的不一致，从而影响测定
结果，故在使用时须加以选择配对。
三、仪器与试剂
1、722 型分光光度计；
2、小烧杯；
3、坐标纸；
4、滴管；
5、擦镜纸；
6、KMnO4溶液；
四、操作步骤
1、吸收池透光率的检查（测定透光率）
吸收池透光面玻璃应无色透明，并应无水、干燥。
检查方法如下：以空气的透光率为100%，则比色皿的透光率应不低于84%，同时在450nm、650nm 处测其透光率，各透吸收池透光率差值应小于5%。
2、吸收池的配对性（测定透光率）
同种厚度的吸收池之间，透光率误差应小于0.5%。
检查方法如下：将蒸馏水分别注入厚度相同的几个吸收池中。以其中任一个比色皿的溶液做空白，在440nm 波长处分别测定其它各比色皿中溶液的透光率，然后选择相差小于0.5% 的吸收池使用。
3、重现性（光度重复性）（测定透光率）
仪器在同一工作条件下，用同种溶液连续测定7 次，其透光率最大读数与最小读数之差（极差）应小于0.5%。
检查方法如下：以蒸馏水的透光率为100%，用同一KMnO4溶液连续测定7 次，求出极差，如小于0.5%，则符合要求。
4、波长精度的检查（测定A）
为了检查分光系统的质量，可用KMnO4溶液的最大吸收波长525nm 为标准，在待检查仪器上测绘KMnO4溶液的吸收曲线。
检查方法如下：取3.0×10-5mol/L 的KMnO4溶液，以蒸馏水为空白，在460nm~580nm 范围内，分别测定460、480、500、510、520、522、524、525、526、528、530、540、550、560、570、580nm 波长处的吸光度，在坐标纸上绘出吸收曲线。若测得的最大吸收波长在525±10nm 以内，说明该仪器符合要求。
五、数据处理
2、吸收池的配对性
以吸收波长为横坐标，吸收度A 为纵坐标绘制吸收曲线。
六、思考题
1、在本实验中共用了几种空白溶液，分别是什么？
2、使用722 或721 型分光光度计时，应注意哪些问题？
1）仪器预热时应将光闸门处于关的位置，可避免光电倍增管照光，延长光电倍增管的使用寿命。
2）如果大幅度改变测试波长时，需要等数分钟，才能正常工作。因波长大幅移动时，光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢。
3）每台仪器上所配套的吸收池不能与其他仪器上的吸收池单个调换。
4）吸收池每次使用完毕后，应立即用蒸馏水洗净，用吸水纸擦干，存于吸收池盒内。
3、同种比色皿透光率的差异对测定有什么影响？
4、检查分光光度计的波长精度及重现性对测定有什么实际意义？
实验二药物中微量铁的测定
一、目的
1、掌握使用分光光度计
2、了解分光光度法测定药物及水中铁含量的操作方法及原理。
3、学会用工作曲线法测定样品含量。
二、提要
铁是药物和水中常见的一种杂质，含量大时易产生特殊气味，因此对药物和水中的铁要进行检查和测定。
亚铁离子与邻二氮菲生成稳定的橙红色配合物。
应用此反应可测定铁，当铁以Fe3+离子形式存在于溶液中时，可预先用还原剂盐酸羟胺将其还原为Fe2+离子。
2 Fe3++2NH2OH·HCl→2 Fe2++N2↑+2H2O+4H++2Cl-
显色时溶液PH 值应在2~9，若酸度过高（PH﹤2）显色缓慢而色浅；若酸度过低，二价铁离子易水解。最大吸收波长为508nm，ε =11100。
三、仪器与试剂
722 型分光光度计；容量瓶25ml 8 只；吸量管1ml，2ml，5ml，10ml 各1 只；吸收池、擦镜纸；洗耳球；小烧杯；万分之一天平；标准铁溶液（10μg.ml-1）；邻二氮菲水溶液（0.075%）；盐酸羟胺5%水溶液（用时配制）；NaAc（0.5mol·L-1）；HCl（6mol·L-1）。
四、操作步骤
1、标准曲线的制作
在 6 只25ml 容量瓶中，用吸量管分别加入0.0，1.0，3.0，5.0，7.0，9.0ml 铁标准液（10μg·ml-1），分别精密加入1ml盐酸羟胺，5ml NaAc溶液，2ml邻二氮菲，用水稀释至刻度后摇匀，放置10分钟。用1cm比色皿，以试剂为空白（即0.0ml铁标液），在508nm波长下，测量各溶液的吸光度。以铁含量为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制标准曲线。2、待测样测定
准确吸取待测样5.00ml，置25ml 容量瓶中。按上述制备标准曲线的方法配制溶液并测定吸光度，根据测得的吸光度求出水中总铁量。
据水样测得的吸光度计算水中铁含量。
以铁含量为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制标准曲线，并根据测得样品的吸光度，计算水中总铁量。
A
0.4
0 10 30 50 70 90 (μg/25mL)
C 未= X/5 = Y μg/ml
四、注意事项
1、测定时由低浓度至高浓度方向测定，可以直接省略蒸馏水润洗过程
2、吸收池中装样高度：至2/3 处即可。
五、思考题
1、本实验中采用的空白溶液为什么?
2、显色反应操作中，加入各标准溶液与样品的含酸量不同，对显色有无影响？
3、根据制备标准曲线测得的数据，判断本次实验所得浓度与吸光度间的线性好不好。分析其原因。
实验三、四紫外吸收曲线和工作曲线的测绘及含量测定
一、目的
1、掌握紫外-可见分光光度计的使用。
2、掌握吸收曲线的绘制方法。
3、学会从吸收曲线找到最大吸收波长。
4、掌握标准曲线的绘制方法及应用。
5、学会用紫外-可见分光度计测定中药有效成分的含量。
二、仪器与试剂
美谱达可见-紫外分光光度计；容量瓶10ml6只（棕色瓶1只）；吸量管1ml，2ml，5ml 各1 只；吸收池、擦镜纸；洗耳球；小烧杯，滴管；95%乙醇；橙皮苷标准液10 μg/ml；待测陈皮母液浓度为60 μg/ml。
三、操作步骤
1、配制溶液
分别精密量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml 标准溶液至10ml 容量瓶，用95%乙醇定容，摇匀备用。
2、吸收曲线的测绘（目的：找出最大吸收波长）
在系统主菜单中选择“光谱扫描”项进行吸收曲线的测绘。
1）基线的建立：取空白溶液（95%乙醇）分别盛装于比色皿后，分别放置在仪器比色架参比池以及样品池位置上。按照仪器使用方法进行操作，完成一系列设定[扫描设置（起点、终点、间隔、速度）、测定模式（吸光度模式）、Y 轴坐标]后，点击100T/0Abs，建立一条系统基线。
2）测定吸收曲线：将3 号橙皮苷标准液放置于样品池位置，点击START/STOP，进行测量。测得吸收曲线后，点击检索，用方向键（上下移动键）查看波峰的波长，记录最大吸收波长（278nm 左右）。
3、工作曲线的测绘
在系统主菜单中选择“定量测量”项进行工作曲线的测绘。
1）基线的建立：取空白溶液（95%乙醇）分别盛装于比色皿后，分别放置在仪器比色
架参比池及样品池位置上。按照仪器使用方法进行操作，完成一系列设定（最大吸收波长、
浓度单位、各标样浓度）后，点击100T/0Abs，机器自动调整到曲线测定波长，并调零。
2）测定工作曲线：将样品按顺序依次放入光路中，点击START/STOP，测得吸光度。测量完成后，点击ESC 返回标准曲线设定界面。在最下方可见到系统给出的曲线方程及方程相关系数。点击曲线查看标准曲线。
4、待测液测定（求出橙皮苷的百分含量）
点击ESC 返回定量测量界面，开始测量未知样品浓度。机器根据测得的吸光度，运用公式，自动计算出浓度。
四、数据处理
1、吸收曲线测绘结果
C = μg/mL；A = ；λmax = nm
回归方程：相关系数：
3、待测液测定结果
C x = μg/mL；A =
4、陈皮中橙皮苷百分含量计算
橙皮苷% = C x/C 陈皮? 100% = C x/C 陈皮? 100% =
五、思考题
如何应用UV-Vis 分光光度法完成中药有效成分的含量测定？
实验五柱色谱法分离净化生物碱
一、目的
1、掌握色谱柱的制备方法。
2、熟悉用柱色谱分离净化生物碱的过程和方法。
二、提要
氧化铝是一种吸附力较强的吸附剂，具有分离能力强、活性可以控制等优点。根据氧化铝
的的特点，采用95%乙醇作为流动相可以起到分离净化生物碱的目的。
三、仪器与试剂
色谱柱（长15cm，内径1.3cm）2 根；带橡皮套的玻璃棒2 根；50ml 量筒1 个；精制棉及圆形滤纸；剪刀；磨口三角瓶30ml 2 个；25ml 容量瓶2 个；铁架台，蝴蝶夹；黄连；95%乙醇；氧化铝。
四、操作步骤
1、色谱柱的制备
准备2根洁净干燥的高15cm、内径1.3cm的色谱管，于管底垫一层精制棉（不要太紧），垂直夹在滴定台上，然后把待测氧化铝通过一干燥小漏斗，仔细装入色谱管中至高达约6cm 处（约6g），用一带橡皮套的玻璃棒轻轻地均匀地敲打只氧化铝的高度达约5cm处，然后在其表面覆以圆形滤纸一层即得。
2、黄连提取液的配制方法
取10g黄连（粉碎），加95%乙醇没过药材，回流15分钟，滤过，滤液补加乙醇定量到50mL 容量瓶中。
3、盐酸小檗碱类生物碱的分离净化
打开活塞，于色谱柱中加入黄连提取液1ml，待溶液全部通过后，立即以95%乙醇20ml 淋洗色谱柱，控制流速为20～30 滴/min。流出液收集于25ml 量瓶中，最后稀释至刻度。观察和记录色谱柱中溶液的颜色。
五、注意事项
1、精制棉用量要少，要平整，但不要塞得太紧，以免流速过慢。
2、色谱柱必须具有均匀的紧密度，表面应力求水平，样品应小心地加入，勿使氧化铝表面受到扰动。
实验六铺板
硅胶Ｇ薄层板的制备
称取硅胶Ｇ1.5g、蒸馏水4.5ml，在研钵中沿同一方向研磨混匀，去除表面的气泡后，立即倒在玻璃板上，用研钵研头稍加涂匀，然后用左手持玻璃板，用右手中指在背面轻轻敲击玻璃板，使铺成平坦均匀的薄板。于室温下，置水平台上晾干，于110℃烘30 分钟，冷却后即使用或放入干燥器备用。
同学们下次实验请带尺子和铅笔！！
七生物碱的薄层色谱鉴定
一、目的
1、掌握薄层硬板的制备方法。
2、掌握薄层色谱的一般操作方法。
3、了解薄层色谱在中药分析中的应用。
二、提要
奎宁、辛可宁属于生物碱类成分，利用薄层色谱可将二者分离，用对照品加以对照，可起到
鉴别奎宁、辛可宁的作用。
三、仪器与试剂
层析缸；玻璃板5×15cm ；点样毛细管2μl ；研钵；喷雾瓶50ml，皮老虎；电吹风；台秤；量筒10ml；烘箱；磨口小三角瓶；硅胶G（薄层层析用）；奎宁，辛可宁对照品；氯仿；乙酸
乙酯：无水乙醇：二乙胺（7：1：1）；改良碘化铋钾试液。
四、操作步骤
1、点样
一般用点样器或定量毛细管点样于薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0~1.5cm，
点样直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注
意勿损伤薄层表面。
分别取奎宁和辛可宁对照品，分别加氯仿制成每1ml 含2mg 的溶液，作为对照品溶液。
另取吸取奎宁和辛可宁对照品溶液混合，作为供试品溶液，吸取上述三种溶液各10μl ，分别
点于同一硅胶G 薄层板上。
2、展开
点好样的薄层板放入装有展开剂的展开缸中，乙酸乙酯：无水乙醇：二乙胺（7：1：1）为展开剂，浸入展开剂的深度为距原点5mm 为宜，密封，待展开至规定距离，一般为8~15cm，取出薄层板，用电吹风吹干（吹背面）。
展开缸如需预先用展开剂预平衡，可在缸中加入适量的展开剂，必要时并在壁上贴两条与
缸一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，盖严，使展开缸平衡或按规定操作。
3、显色
在薄层板上喷以改良碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相
同颜色的斑点。
4、定性
分别测定R f值，鉴别待测样品，是奎宁还是辛可宁。
五、思考题
1、影响吸附薄层色谱R f值的因素有哪些？
2、薄层板的主要显色方法有哪些？
实验八中药黄连的测定
一、目的
1、了解薄层色谱在中药分析中的应用。
2、了解薄层色谱的原理及应用。
二、提要
中药黄连中的主要成分为盐酸小檗碱，使用对照药材和对照品进行对照，可起到鉴别黄连的作用。
三、仪器与试剂
层析缸；玻璃板5×15cm；毛细管；研钵；喷雾瓶50ml；电吹风；天平（0.1mg）；水浴锅，冷凝器；离心管，离心管架；黄连药材；盐酸小檗碱对照品；乙酸乙酯：氯仿：甲醇：氨水：二乙胺（8：2：2：1：0.5）
四、操作步骤
1、对照品溶液的制备
精密称取盐酸小檗碱对照品,加无水乙醇制成每1ml 含0.5mg 的溶液,即得.
2、供试品溶液的制备
取实验五中黄连过氧化铝的溶液即可。学生留存。
3、点样
用毛细管吸取对照品溶液和供试品溶液各2 l，分别点于同一硅胶薄层板上,点样基线距底边1.0~1.5cm，样品直径一般不大于2mm。
4、展开
以乙酸乙酯：氯仿：甲醇：氨水：二乙胺（8：2：2：1：0.5）为展开剂，将展开剂倒入层析缸内，预平衡15~30 分钟后，将点好样的薄层板放入展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜，密封，待展开至规定距离（8~15cm），取出，吹干。
5、检视
将吹干后的薄层板在紫外灯下看，供试品色谱中，在对照品色谱相应的位置上，显相同颜
色的斑点。
五、思考题
产生边缘效应的原因是什么?
一、目的
1、练习气相色谱仪的使用。
2、学会气相色谱定性分析。
二、提要
气相色谱是一种强有力的分离手段，但在定性鉴定上则是软弱无力的，实际工作中，有时遇到的样品其成分大体上是已知的，这时得到的气相色谱图可以借助纯的标样加以对照，利用保留值进行定性，这样的定性鉴定是相当简单的。
三、仪器与试剂
气相色谱仪（FID）；1μl微量近样器（气相用）；磨口小三角瓶5个；培养皿，滤纸；25ml 容量瓶2 个，10ml 容量瓶3 个；水杨酸甲酯；醋酸乙酯；龙脑对照品；合成冰片。
四、操作步骤
仪器条件以聚乙二醇（PEG）-20M 为固定相，涂布浓度为10%，柱温110℃.理论塔板数按龙脑峰计算不低于1900。
校正因子的测定取水杨酸甲酯适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml 含5mg 的溶液，作为内标溶液。另取龙脑对照品5mg，精密称定，置10ml 量瓶中，加内标溶液溶解，并稀释至刻度，摇匀，吸取1μl，注入气相色谱仪中，计算校正因子。
测定取合成冰片约50mg，精密称定，置10ml 量瓶中，用内标溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取1μl，注入气相色谱仪，测定。将保留时间列成表格，确定混合物中各封、峰为何物。
五、注意事项
1、实验前，对色谱仪整个气路系统必须进行检漏。如有漏气点，应进行排除。
2、为了防止热丝烧断，开机前应先通气，后通桥电流。关机时应先关桥电流，后断气最高允许桥电流不得超过（仪器说明书）。
3、微量注射器应小心使用，用力不可过猛，芯子不可折弯，也不要全部拉出套外。若有不清楚之处，应立即报告指导老师妥善处理，样品溶液中如有难挥发溶质，使用完毕立即使用乙醇或丙醇多次清洗，以免芯子受污而卡死。
六、思考题
1、保留时间，调整保留时间和相对保留值如何定义？它们各自的特点和适用范围如何？
2、根据色谱原理，试推测在实验中水杨酸甲酯、乙酸乙酯、龙脑出峰的先后顺序。
3、GC 法定性的原理是什么？
一、目的
1、掌握气相色谱仪的使用。
2、学会内标法定量分析。
二、提要
内标法是选择样品中不含有的纯物质作为对照物质加入待测样品溶液中，以待测组分和对照物质的响应信号对比，测定待测组分的含量。
三、仪器与试剂
气相色谱仪（FID）；1μl微量近样器（气相用）；磨口小三角瓶5个；培养皿，滤纸；25ml 容量瓶2 个，10ml 容量瓶3 个；水杨酸甲酯；醋酸乙酯；龙脑对照品；合成冰片。
四、操作步骤
仪器条件以聚乙二醇（PEG）-20M 为固定相，涂布浓度为10%，柱温110℃.理论塔板数按龙脑峰计算不低于1900。
校正因子的测定取水杨酸甲酯适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml 含5mg 的溶液，作为内标溶液。另取龙脑对照品5mg，精密称定，置10ml 量瓶中，加内标溶液溶解，并稀释至刻度，摇匀，吸取1μl，注入气相色谱仪中，计算校正因子。
测定取合成冰片约50mg，精密称定，置10ml 量瓶中，用内标溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取1μl，注入气相色谱仪，测定，并计算含量。
五、思考题
1、内标法的优、缺点各是什么？
2、实验中为什么选用水杨酸甲酯作为内标液？
实验十一高效液相色谱法定性分析
一、目的
1、掌握高效液相色谱仪的使用方法
2、学会应用高效液相色谱仪的定性方法
二、提要
利用高效液相色谱仪对已知组分的复方药物分析，比较方便。本实验是采用已知物对照, 即根据同一物质在同一根层析色谱柱上保留时间相同的定性分析法。
三、仪器与试样
高效液相色谱仪（紫外检测器）；微量进样器；C18反相色谱柱（Hypersil ODS2, 250mmn×4.6mmID,5μm）；
一次性注射器，0.45μm 微孔滤膜；容量瓶50ml，100ml；移液管，洗耳球；具塞三角瓶（50ml）；超声仪；天平；滤纸，培养皿；离心管，离心管架；
陈皮药材；橙皮苷对照品；
甲醇（分析纯）；甲醇（色谱纯），纯净水。
四、操作步骤
1、色谱条件
1）色谱柱：Hypersil ODS2, 250mmn×4.6mmID, 5 μm
2）泵：Waters 515 pump
2）流动相：MeOH-H2O (43:57)
3）柱温：室温4）
流速：1mL/min
5）检测器：Waters 2487 Dual Absorbance Detector 6）
检测波长：270nm
7）进样量：10μL
8）理论塔板数：按橙皮苷计算不低于3000
2、实验用溶液的配制
1）橙皮苷对照品溶液的制备
精密称取橙皮苷对照品1.6mg，置100ml 棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（C 橙= 16μg/mL ）。
2）供试品溶液的制备：
取陈皮粉末（过50 目筛）0.3g，精密称定，置具锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声15 分钟，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，精密吸取5ml 到100ml 容量瓶，用甲醇稀释至刻度，经0.45μm 微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。
3、定性分析
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl ，注入液相色谱仪，供试品色谱与对照品色谱中相同的位置相比较，保留时间相同。
五、思考题
1、利用高效液相色谱仪定性的方法有几种?分别在什么情况下适用?
2、本实验的色谱原理属于哪一类?
实验十二高效液相色谱法定量分析
一、目的
1、练习高效液相色谱仪的使用
2、学会外标法定量分析
二、提要
外标法可分为外标一点法、外标两点法及标准曲线法。当标准曲线截距为零时，可用外标一点法定量。在药物分析中，为了减少实验条件波动对分析结果的影响，采用随行外标一点法，即每次测定都同时进对照品与样品溶液。
三、实验条件
高效液相色谱仪（紫外检测器）；微量进样器；C18反相色谱柱（Hypersil ODS2, 250mmn×4.6mmID,5μm）；
一次性注射器，0.45μm 微孔滤膜；容量瓶50ml，100ml；移液管，洗耳球；具塞三角瓶（50ml）；超声仪；天平；滤纸，培养皿；离心管，离心管架；
陈皮药材；橙皮苷对照品；
甲醇（分析纯）；甲醇（色谱纯），纯净水。
四、操作步骤
1、色谱条件
1）色谱柱：Hypersil ODS2, 250mmn×4.6mmID, 5 μm
2）泵：Waters 515 pump
2）流动相：MeOH-H2O (43:57)
3）柱温：室温4）
流速：1mL/min
5）检测器：Waters 2487 Dual Absorbance Detector 6）
检测波长：270nm
7）进样量：10μL
8）理论塔板数：按橙皮苷计算不低于3000
2、实验用溶液的配制
1）橙皮苷对照品溶液的制备
精密称取橙皮苷对照品1.6mg，置100ml 棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（C 橙= 16μg/mL ）。
2）供试品溶液的制备
取陈皮粉末（过50 目筛）0.3g，精密称定，置具锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声15 分钟，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，精密吸取5ml 到100ml 容量瓶，用甲醇稀释至刻度，经0.45μm 微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。
3、测定
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl ，注入液相色谱仪，测定，并计算含量。
五、数据处理
外标一点法计算陈皮中橙皮苷的百分含量（保留两位有效数字）根据 A 供/A 标= C 供/C 标
则 C 供= (A 供*C 标)/A 标
橙皮苷% = (C 供* D)/m * 100%
六、思考题
1、外标一点法主要误差来源是什么？
2、紫外检测器的优缺点是什么？
高效液相色谱仪的使用
一、流动相的预处理：
1、过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。
2、对过滤后的流动相进行超声脱气 10-20 分钟。
二、安装色谱柱
三、液相色谱仪的使用方法
1、启动液相色谱仪：
1)检查仪器的电源线是否已连接。
2)打开仪器的电源开关。
3)打开输液泵电源。
4)打开检测器电源。（在平衡和冲洗色谱柱时请将检测器关闭）
2、排除管道内空气：
1)将吸滤头放入经过处理后的溶剂内。
2)将输液泵阀打开（逆时针旋转180o）。
3)按下pump on/off 键，开启输液泵。4)
按下purge 键，开始排管道内气泡。
5)仔细观察管路，至无气泡流出时，再次按下 purge 键，暂停排液。
6)按下pump on/off 键，关闭输液泵。
7)顺时针旋紧输液泵阀。
3、泵流速的设定：
1)按下manual 键。
2)按下 1 键，按ent 键确认。
3)输入需要的流速，按ent 键确认。
4、检测器波长的设定：
按下wl 键，输入需要的波长，按ent 键确认。
5、打开T2000P 色谱工作站：
1)选择实时进样通道 1，进入样品信号采集界面。
2)鼠标左键点击“方法”，修改或者新建分析方法。
3)鼠标左键点击“谱图”，设置谱图显示。
4)在“停止时间” 项下输入采集停止时间。
5)在“路径及文件名规则” 项下输入文件保存路径。
6)鼠标右键点击“使用方法”项下分析方法，选择分析方法。
6、色谱柱预平衡：
按下pump on/off 键，开启输液泵。至基线平稳时可开始进样。7、
进样：
1)进样前按A/Z 键将基线调零。
2)将进样阀逆时针旋至于load 位，插入进样针，进样。
3)进样后立即将进样阀顺时针旋至inject 位。工作站开始采集信息。
8、数据采集完毕后，点击停止进样。
9、点击“再处理”和“报告”图标对图谱进行再处理，出报告图。
10、实验完毕后冲洗色谱柱。
11、关闭工作站，关闭输液泵电源，关闭检测器电源、关闭仪器电源。
液相色谱使用过程的注意事项
1、泵耐压：4000PSI
2、安装柱方向
3、不要开空泵
4、实验条件以及参数的选择
1）色谱柱（固定相）：ODS、C8、C2、氨基柱、氰基柱
2）流动相：流动相系统（互溶、澄清、首选）、过滤、脱气、可使用缓冲盐溶液、不能使用含盐酸盐的流动相（腐蚀不锈钢柱套）
3）pH：弱酸弱碱的分离；大极性酸、碱的分离
4）测定波长的选择： max
5）流速：
6）温度：
5、样品的处理
6、进样时取样量保存
7、色谱柱的保存
《仪器分析》实验讲义,
《仪器分析》实验讲义 中国矿业大学环境与测绘学院环境科学系 2010年9月
前言 仪器分析实验课是化学类各专业本科生的基础课之一，也是非化学类各专业本科生的选修课之一。仪器分析实验课教学应该使学生尽量涉及较新和较多的仪器分析方法、尽量有效地利用每个实验单元的时间和尽量做一些设计性实验。教学过程中不仅要巩固和提高学生仪器分析方法的理论知识水平和实验操作技能，而且要着重培养学生分析问题和解决问题的能力。通过仪器分析实验课的教学，应基本达到： (1)巩固和加深对各类常用仪器分析方法基本原理的理解 (2)了解各类常用仪器的基本结构、测试原理与重要部件的功能 (3)学会各类常用仪器使用方法和定性、定量测试方法 (4)掌握与各类常用仪器分析方法相关联的实验操作技术 (5)了解各类常用仪器分析方法的分析对象、应用与检测范围 (6)培养对实验中所产生的各种误差的分析与判断能力 (7)掌握实验数据的正确处理方法与各类图谱的解析方法。
实验一水中氟化物的测定（氟离子选择电极法） 一、实验目的 （1）掌握电位法的基本原理。 （2）学会使用离子选择电极的测量方法和数据处理方法 一、原理 将氟离子选择电极和参比电极（如甘汞电极）浸入预测含氟溶液，构成原电池。该原电池的电动势与氟离子活度的对数呈线形关系，故通过测量电极与已知氟离子浓度溶液组成的原电池电动势和电极与待测氟离子浓度溶液组成的原电池电动势，即可计算出待测水样中氟离子浓度。常用定量方法是标准曲线法和标准加入法。 对于污染严重的生活污水和工业废水，以及含氟硼酸盐的水样均要进行预蒸馏。 三、仪器 1. 氟离子选择性电极。 2. 饱和甘汞电极或银—氯化银电极。 3. 离子活度计或pH计，精确到0.1mV。 4. 磁力搅拌器、聚乙烯或聚四氟乙烯包裹的搅拌子。 5. 聚乙烯杯：100 mL，150 mL。 6. 其他通常用的实验室设备。 四、试剂 所用水为去离子水或无氟蒸馏水。 1. 氟化物标准储备液：称取0.2210g标准氟化钠（NaF）（预先于105—110℃烘干2h，或者于500—650℃烘干约40min，冷却），用水溶解后转入1000mL容量瓶中，稀释至标线，摇匀。贮存在聚乙烯瓶中。此溶液每毫升含氟离子100μg。 2. 氟化物标准溶液：用无分度吸管吸取氯化钠标准储备液10.00mL，注入1000mL容量瓶中，稀释至标线，摇匀。此溶液每毫升含氟离子10μg。 3. 乙酸钠溶液：称取15g乙酸钠（CH3COONa）溶于水，并稀释至100mL。 4. 总离子强度调节缓冲溶液（TISAB）：称取58.8g二水合柠檬酸钠和85g硝酸
仪器分析实验思考题答案合集汇编
一、离子选择性电极法测定水中微量氟 1、总离子强度调节剂(TISAB)是由那些组分组成，各组分的作用是什么？ 答：氯化钠，柠檬酸钠，冰醋酸，氢氧化钠，氯化钠是提高离子强度，柠檬酸钠是掩蔽一些干扰离子，冰醋和氢氧化钠形成缓冲溶液，维持体系PH值稳定！2、测量氟离子标准系列溶液的电动势时,为什么测定顺序要从低含量到高含量? 答：测什么一般都是从低到高，每测一个你都冲洗电极吗，不冲洗的话，从低到高，比从高到低，影响小。还有就是防止测到高浓度的溶液使电极超出使用范围。 3、测定F-浓度时为什么要控制在测定F-离子时,为什么要控制酸度,pH值过高或过低有何影响? 答：因为在酸性溶液中，H+离子与部分F-离子形成HF或HF2-，会降低F-离子的浓度；在碱性溶液中，LaF3 薄膜与OH-离子发生反应而使溶液中F-离子浓度增加。因此溶液的酸度对测定有影响。氟电极的适用酸度范围为pH=5～6，测定浓度在10^0～10^-6 mol/L范围内，△φM与lgC F-呈线性响应，电极的检测下限在10-7 mol/L左右。 二、醇系物的气相色谱分析 1、如何进行纯物质色谱的定性分析？ 色谱无法对未知纯物质定性分析（这里所谓未知就是你对它的分子组成、结构一无所知），除非你已经知道它可能是某种物质或某几种物质之一，那么你可以用这几种物质的标准品和待分析的纯物质样品在相同色谱条件下对照，保留时间相同，则证明是同种物质。 为色谱峰面积； A i 为相对重量校正因子，f(甲醇)=1.62、f(乙醇)=1.65、f(正丙醇)=1.05、f(正f i 丁醇)=0.87 三、邻二氮菲分光光度法测定铁 1、 2、制作标准曲线和进行其他条件试验时，加入还原剂、缓冲溶液、显色剂等试 剂的顺序能否任意改变？为什么？
仪器分析--实验报告
仪器分析方法在食品分析中的应用综合实验 摘要：本文分别采用了气质联用技术检测食品中的塑化剂，用高效液相色谱检测食品中的防腐剂，原子吸收光谱检测食品中的金属元素。并对检测结果进行了分析。 关键词：气质联用技术，高效液相色谱，原子吸收光谱 前言 现代食品的显著特点是食品的营养化、功能化、方便化，并保证食品质量与安全,这就要求食品加工从原理的选择、加工过程到最终产品及保藏整个链条中对食品的成分及成分的变化有全面的把握和认识。传统的分析手段和分析方法尽管能从宏观上了解和掌握成分及其变化，但已不能完全适应现代食品加工业的要求，现代仪器分析技术已经成为食品分析中不可缺少的重要分析手段。 实验内容 一．气-质联用技术检测食品中塑化剂的实验 （一）方法[1] 对于食品中邻苯二甲酸酯类化合物的检测，GB/T21911-2008《食品中邻苯二甲酸酯的测定》中规定了GC-MS作为检测方法。 1仪器： 气相色谱-质谱联用仪，凝胶渗透色谱分离系统，分析天平，离心机，旋转蒸发器，振动器，涡旋混合器，粉碎机，玻璃器皿。 2试剂： 正己烷，乙酸乙酯，环己烷，石油醚，丙酮，无水硫酸钠，16种邻苯二甲酸酯标准品，标准储备液，标准使用液。 3步骤： （1）试样制备：取同一批次3个完整独立包装样品（固体样品不少于500g、液体样品不少于500mL），置于硬质玻璃器皿中，固体或半固体样品粉 碎混匀，液体样品混合均匀，待用。 （2）试样处理（不含油脂液体试样）：量取混合均匀液体试样5.0mL，加入正己烷2.0mL，振荡1min，静置分层，取上层清液进行GC-MS分析。 （3）空白试验：实验使用的试剂都按试样处理的方法进行处理后，进行GC-MS分析。 （4）色谱条件： 色谱柱：HP-5MS石英毛细管柱[30m×0.25mm（内径）×0.25μm]； 进样口温度：250℃； 升温程序：初始柱温60℃，保持1min，以20℃/min升温至220℃， 保持1min，再以5℃/min升温至280℃，保持4min； 载气：氦气，流速1mL/min； 进样方式：不分流进样； 进样量：1μL。 （5）质谱条件： 色谱与质谱接口温度：280℃； 电离方式：电子轰击源； 检测方式：选择离子扫描模式； 电离能量：70eV；
仪器分析实验室建设汇总
仪器分析实验室建设 一仪器分析实验室原有条件 仪器分析实验室在过去多年建设的基础上，98年按教育厅合格实验室的要求，开展了合格实验室建设，在原有基础上，充实了部分仪器设备，改善实验条件，增加实验项目和增加仪器设备配套台数，改善学生实验能力培养的条件，同时通过加强管理，实现管理规范化，取得了良好效果，特别是对药品、仪器的管理得到进一步加强，生均实验面积达 2.4m2、/人。能开出教学计划要求的全部实验。此外，还可以对外进行分析检测服务，开展相关科研项目。实验室具有实验仪器84台套，实验面积517平方米，设备总值约22万元。 原有仪器分析实验室情况 二、仪器分析实验室近期建设情况 我校环境工程专业已有20年的办学历史。经二十年的建设，环境工程专业已具有较强的办学实力，师资队伍职称结构合理，双师型比例达60%。在教学改革，科研及对外技术服务，教材编写，实验室建设及校内外实训基地建设等方面都取得了一定成果，培养了大量的毕业生，他们在我省基层环保单位，已成为技术和管理骨干，受到广泛好评。
我校环境工程专业目前为国家级专业教学改革试点专业，为建设试点专业，教育部资助125万元专项经费。上述资金到位后，环境工程实验室在原有的基础上，结合本专业的特点，加强了校内实训基地建设，以化学实验室获省教育厅高校“双基合格实验室”为契机，学校加大了对实验实训基地建设的投入力度，扩展实验室面积，并拨出专项资金约13万元进行维修。现专业实验室面积约1200平方米，新增仪器设备已于2002年5月到位并投入使用。 仪器分析实验室新增仪器设备如下表 日本岛津AA—6800原子吸收分光光度仪，是当今世界上技术先进，性能优良的大型仪器。氢化物发生器的配置更扩大了检测的范围，可检测浓度为PPb 级的包括Na、Mg、Zn、Fe、Al、Cu、Pb、Cd、As等各种金属元素。 TRACE GC2000气相色谱是由Thermo Finnigan生产的新一代产品，该仪器配置了FID、ECD、NPD三个检测器可分析烷烃、苯、含氯有机物、农残等多种物质的含量。 日本岛津UV-2401紫外分光光度仪采用了双光速技术，该仪器使用范围广，稳定性好，可检测吸收峰在110-900纳米内的各种无机物和有机物，通过对扫描
仪器分析实验整理讲义
仪器分析实验讲义 2016年3月
实验目录 实验一、核磁共振氢谱确定有机物结构 实验二、X射线衍射的物相分析 实验三、电感耦合等离子体发射光谱法测定茶叶中的金属元素火焰原子吸收法测定自来水中的钙、镁硬度 实验四、常规样品的红外光谱分析 实验五、苯丙氨酸和酪氨酸的紫外可见光谱分析 实验六、苯丙氨酸和酪氨酸的分子荧光光谱分析 实验七、内标法测定奶茶中的香兰素含量 实验八、毛细管电泳仪分离测定雪碧、芬达中的苯甲酸钠 实验九、液相色谱仪分离测定奶茶、可乐中的咖啡因 实验十、循环伏安法观察Fe(CN)6及抗坏血酸的电极反应过程实验十一、氟离子选择性电极法测定湖水中F-含量 实验十二、差热与热重分析研究Cu2SO4.5H2O脱水过程
实验1 根据1HNMR推出有机化合物C9H10O2的分子结构式 一、实验目的 (1)了解核磁共振谱的发展过程，仪器特点和流程。 (2)了解核磁共振波谱法的基本原理及脉冲傅里叶变换核磁共振谱仪的工作原理。 (3)掌握A V300MHz核磁共振谱仪的操作技术。 (4)熟练掌握液体脉冲傅里叶变换核磁共振谱仪的制样技术。 (5) 学会用1HNMR谱图鉴定有机化合物的结构。 二、实验原理 1HNMR的基本原理遵循的是核磁共振波谱法的基本原理。化学位移是核磁共振波谱法直接获取的首要信息。由于受到诱导效应、磁各向异性效应、共轭效应、范德华效应、浓度、温度以及溶剂效应等影响，化合物分子中各种基团都有各自的化学位移值的范围，因此可以根据化学位移值粗略判断谱峰所属的基团。1HNMR中各峰的面积比与所含的氢的原子个数成正比，因此可以推断各基团所对应氢原子的相对数目，还可以作为核磁共振定量分析的依据。偶合常数与峰形也是核磁共振波谱法可以直接得到的另外两个重要的信息。它们可以提供分子内各基团之间的位置和相互连接的信息。根据以上的信息和已知的化合物分子式就可推出化合物的分子结。图1是1H-NMR所用的脉冲序列。 图1：zg脉冲序列 三、仪器与试剂 1. 仪器 瑞士bruker公司生产的A V ANCE300NMR谱仪；?5mm的标准样品管1支。滴管1个。 2. 试剂 TMS（内标）；CDCL3（氘代氯）仿；未知样品:C9H10O2。 四、操作步骤 1. 样品的配制 取2mg的:C9H10O2）放入? 5mm核磁共振标准样品管中，再将0.5ml氘代氯仿也加入此样品管中（溶液高度最好在3.5—4.0cm之间），轻轻摇匀，等完全溶解后，方可测试。若样品无法完全溶解，也可适当加热或用微波震荡等致其完全溶解。 2. 测谱 (1)样品管外部用天然真丝布擦拭干净后再插入转子中，放在深度规中量好高度。 严格按照操作规程（此处操作失误有可能摔碎样品管损害探头！）。按下“Lift on/off”键，
实用仪器分析实验报告xrf
实用仪器分析实验报告X射线荧光光谱分析实验 学号： 学生姓名： 指导老师： 学院： 专业班级： 实验日期： 中南大学冶环学院实验中心
图1 X射线荧光光谱仪（岛津XRF-1800） 四、实验步骤 （1）仪器准备 使用仪器前务必检查外部冷却水系统水压是否在，X-射线荧光光谱仪主机板面是否有error灯亮或电脑界面是否显示报错。 仪器的运行环境：室温：23±5℃ 湿度＜70% ，室内无明显的震动，无灰尘。
（2）样品准备 使用压样机压制样品，样品要求： a 不受理有可能污染仪器的样品（有机样品，高挥发性物质、低熔点材料和有掉落的粉末等）和磁性样品。 b仪器元素检测范围O~U，若样品含O之前的元素（譬如C、B等），建议改用其他检测手段。 c若样品中可能含有少量贵金属，譬如Ag、Pd等，送样时需明确标注。 d粉末样品过筛200目，务必彻底干燥，送样量2g左右。 e粉末样品若出现质轻，粘样品袋等特征，需混合均匀一定比例分析纯硼酸后再送样，同时明确备注样品与硼酸的质量比。 f无需预制样的样品表面必须平整、光滑、没有瑕疵。 （3）软件操作 打开电脑桌面的“PCXRF”软件。点击“初始化”，点击主菜单上的“Maintenance”项，点击“Component Control”栏中的“X-ray Generator”。“Control”选“Normal”，“Xray”选“ON”，输入“Voltage”20KV、“Current”5MA，点击“Start”。X光指示灯和控制面板上”X-RAY”指示灯同时亮。此时可以日常分析了！ （4）样品测试 点击“analysis”，“analytical”设置检测条件，输入对应样品序号。点击仪器上“START”按钮,进行样品测试。 （5）结束操作 测试完毕后，需将X光管及时降至20kV，5mA的低能耗状态。点击主菜单上的“Maintenance”项，点击“Component Control”栏中的“X-ray Generator”。“Control”选“Normal”，“Xray”选“ON”，输入“Voltage”20kV、“Current”5mA，点击“Start”。
各类仪器分析实验室要求
各类仪器分析实验室要求 气相色谱分析室主要是对容易转化为气态而不分解的液态有机化合物及气态样品的分析。仪器设备主要有气相色谱仪，具有计算机控制系统及数据处理系统，自动化程度很高，对有机化合物具有高效的分离能力，所用载气主要有：H2、N2、Ar、He、CO2等。但对高沸点化合物，难挥发的及热不稳定的化合物、离子化合物、高聚物的分离却无能为力。要求局部排风及避免阳光直射在仪器上，避免影响电路系统正常工作的电场及磁场存在，一般设计：仪器台（应离墙以便仪器维修）、万向排气罩、电脑台（一般在仪器台旁配置）、边台、洗涤台、试剂柜等 液相色谱分析室主要体现在高效率分离，对复杂的有机化合物分离制取纯净化合物，定量分析和定性分析，仪器设备主要有：高效液相色谱仪，适宜于高沸点化合物、难挥发化合物、热不稳定化合物、离子化合物、高聚物等，弥补气相色谱仪的不足。环境和实验室基础装备设计要求与气相色谙室相近。 质谱分析室主要是对纯有机物的定性分析，实现对有机化合物的分子量、分子式、分子结构的测定，分析样品可以是气体、液体、固体，主要设备有质谱仪、气-质联用仪。质谱仪是利用电磁学的原理，使物质的离子按照基特征的质荷比（即质量m与电荷e之比—m/e）来进行分离并进行质谱分析的仪器，缺点是对复杂有机混合物的分离无能为力。气相色谱分离效率高，定量分析简便的特点，结合质谱仪灵敏度高，定性分析能力强的特点，两种仪器联用为气-质联用仪。可以取长补短，提高分析质量和效率。质谱仪可能有汞蒸汽逸出，要考虑局部排风。 光谱分析室主要是根据物质对光具有吸收、散射的物理特征及发射光的物理特性，在分析化学领域建立化学分析。主要的仪器是原子发射光谱仪、原子吸收光谱仪，分光光度计、原子荧光光谱仪、荧光分光光度计、X射线荧光仪、红外光光谱仪、电感耦合等离子体（LCP）
仪器分析实验讲义
1. 阳极溶出伏安法测定水中微量镉 1.1 实验目的 1. 了解阳极溶出伏安法的基本原理。 2. 掌握汞膜电极的制备方法。 3. 学习阳极溶出伏安法测定镉的实验技术。 1.2 基本原理 溶出伏安法是一种灵敏度高的电化学分析方法，一般可达10-8~10-9 mol/L，有时可达10-12mol/L，因此在痕量成分分析中相当重要。 溶出伏安法的操作分两步。第一步是预电解过程，第二步是溶出过程。预电解是在恒电位和溶液搅拌的条件下进行，其目的是富集痕量组分。富集后，让溶液静止30s 或1min，再用各种极谱分析方法(如单扫描极谱法) 溶出。 阳极溶出伏安法，通常用小体积悬汞电极或汞膜电极作为工作电极，使能生成汞齐的被测金属离子电解还原，富集在电极汞中，然后将电压从负电位扫描到较正的电位，使汞齐中的金属重新氧化溶出，产生比富集时的还原电流大得多的氧化峰电流。 本实验采用镀一薄层汞的玻碳电极作汞膜电极，由于电极面积大而体积小，有利于富集。先在-1.0 V (vs.SCE) 电解富集镉，然后使电极电位由-1.0 V 线性地扫描至-0.2 V，当电位达到镉的氧化电位时，镉氧化溶出，产生氧化电流，电流迅速增加。当电位继续正移时，由于富集在电极上的镉已大部分溶出，汞齐浓度迅速降低，电流减小，因此得到尖峰形的溶出曲线。 此峰电流与溶液中金属离子的浓度、电解富集时间、富集时的搅拌速度、电极的面积和扫描速度等因素有关。当其它条件一定时，峰电流i p只与溶液中金属离子的浓度c 成正比： i p=Kc 用标准曲线法或标准加入法均可进行定量测定。标准加入法的计算公式为： 式中c x、Vx、h 分别为试液中被测组分的浓度、试液的体积和溶出峰的峰高；c s、Vs 为加入标准溶液的浓度和体积；H 为试液中加入标准溶液后溶出峰
仪器分析石墨炉原子吸收实验报告
原子吸收法测定水中的铅含量 课程名称：仪器分析实验实验项目:原子吸收法测定水中的铅含量 原子吸收法测定水中的铅含量 一、实验目的 1。加深理解石墨炉原子吸收光谱法的原理 2。了解石墨炉原子吸收光谱法的操作技术 3. 熟悉石墨炉原子吸收光谱法的应用 二、方法原理 石墨炉原子吸收光谱法，采用石墨炉使石墨管升至2０00℃以上的高温,让管内试样中的待测元素分解形成气态基态原子,由于气态基态原子吸收其共振线,且吸收强度与含量成正比,故可进行定量分析。它是一种非火焰原子吸收光谱法。 石墨炉原子吸收法具有试样用量小的特点，方法的绝对灵敏度较火焰法高几个数量级，可达10－14g，并可直接测定固体试样．但仪器较复杂、背景吸收干扰较大。在石墨炉中的工作步骤可分为干燥、灰化、原子化和除残渣4个阶段。在选择最佳测定条件下,通过背景扣除，测定试液中铅的吸光度。 三、仪器与试剂 (1)仪器石墨炉原子吸收分光光度计、石墨管、氩气钢瓶、铅空心阴极灯（2) 试剂铅标准溶液(0。5ｍｇ/mＬ）、水样 四、实验步骤 1。设置仪器测量条件 （１)分析线波长 21７．0 nm (2）灯电流90(%） (３）通带 0.５ｎm (4）干燥温度和时间 10０℃,３0 ｓ （5)灰化温度和时间 1000℃,20 s （6）原子化温度和时间2200℃，3s (7)清洗温度和时间 28００℃,3s (8）氮气或氩气流量１０0 mL/min 2. 分别取铅标准溶液B，用二次蒸馏水稀释至刻度,摇匀,配制1.00 ，10.０0, 2０．00, 和50.０0 ug/mL铅标准溶液,备用。 ３. 微量注射器分别吸取试液注入石墨管中,并测出其吸收值． ４．结果处理 (1)以吸光度值为纵坐标，铅含量为横坐标制作标准曲线. (2)从标准曲线中,用水样的吸光度查出相应的铅含量。 （3）计算水样中铅的质量浓度(μg/mＬ)
(精)仪器分析实验讲义
实验一722 型分光光度计的性能检测 一、目的 1、学会使用分光光度计 2、掌握分光光度计的性能检验方法 二、提要 1、分光光度计的性能好坏，直接影响到测定结果的准确性，因此新购仪器及使用一定时间后，均需进行检验调整。 2、利用KMnO4溶液的最大吸收峰值来检验波长的精度。 3、用同种厚度的比色皿，由于材料及工艺等原因，往往造成透光率的不一致，从而影响测定 结果，故在使用时须加以选择配对。 三、仪器与试剂 1、722 型分光光度计； 2、小烧杯； 3、坐标纸； 4、滴管； 5、擦镜纸； 6、KMnO4溶液； 四、操作步骤 1、吸收池透光率的检查（测定透光率） 吸收池透光面玻璃应无色透明，并应无水、干燥。 检查方法如下：以空气的透光率为100%，则比色皿的透光率应不低于84%，同时在450nm、650nm 处测其透光率，各透吸收池透光率差值应小于5%。 2、吸收池的配对性（测定透光率） 同种厚度的吸收池之间，透光率误差应小于0.5%。 检查方法如下：将蒸馏水分别注入厚度相同的几个吸收池中。以其中任一个比色皿的溶液做空白，在440nm 波长处分别测定其它各比色皿中溶液的透光率，然后选择相差小于0.5% 的吸收池使用。 3、重现性（光度重复性）（测定透光率） 仪器在同一工作条件下，用同种溶液连续测定7 次，其透光率最大读数与最小读数之差（极差）应小于0.5%。 检查方法如下：以蒸馏水的透光率为100%，用同一KMnO4溶液连续测定7 次，求出极差，如小于0.5%，则符合要求。 4、波长精度的检查（测定A） 为了检查分光系统的质量，可用KMnO4溶液的最大吸收波长525nm 为标准，在待检查仪器上测绘KMnO4溶液的吸收曲线。 检查方法如下：取3.0×10-5mol/L 的KMnO4溶液，以蒸馏水为空白，在460nm~580nm 范围内，分别测定460、480、500、510、520、522、524、525、526、528、530、540、550、560、570、580nm 波长处的吸光度，在坐标纸上绘出吸收曲线。若测得的最大吸收波长在525±10nm 以内，说明该仪器符合要求。
仪器分析色谱实验报告
高效液相色谱法测定食醋和酱油中苯甲酸钠和山梨 酸钾含量 HPLC in soy sauce and vingar sodium benzoate potassium sorber content 指导老师：张志清教授 学生姓名：敬亚娟 摘要：[目的]用高效液相色谱法测定食醋和酱油中苯甲酸钠和山梨酸钾含量。【方法】采用RP-HPLC法以Hyperclone BDS C18 柱（150×4.60 nm,5um,phenomenex）为色谱柱；流动相：甲醇：0.02mol/l 乙醇胺（20 :80）；柱温25℃，流速0.8mol/min ，检测波长230nm，进样量(标准进样量：2.5 ，5 ，7.5 ，10 ，15 ul ；样品进样量:5 ul)。【结果】：食醋中的苯甲酸钠含量为127.15899ug/mol，酱油中的苯甲酸钠含量为723.60033ug/mol，未见则出山梨酸钾。 Abstract: [purpose] with high-performance liquid chromatography (HPLC) in soy sauce and vinegar and sodium benzoate sorbic acid potassium content.【 methods 】 the RP-HPLC method with Hyperclone BDS using C18 column (150 x 4.60 nm, 5 um, phenomenex) for chromatographic column; Mobile phase: methanol: 0.02 mol/l ethanol amine (20:80); The column temperature 25 ℃, velocity 0.8 mol/min, detected wavelength 230 nm, into the sample weight (standard sample quantity: 2.5, 5, 10, 15, 7.5; the samples into the sample weight ul: 5 ul). 【 results 】 : the content of sodium benzoate feed vinegar 127.15899 ug/mol, soy sauce, sodium benzoate content of
仪器分析实验内容(一)-推荐下载
邻二氮菲分光光度法测定试样中的微量铁 一、实验目的 1．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理2．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长3．学会制作标准曲线的方法 4．通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，掌握721型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 邻二氮菲（phen ）和Fe 2+在pH3~9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) ，其lg K =21.3，ε508=1.1×104 L·mol -1·cm -1，铁含量在0.1~6μg·mL -1范围内遵守比尔定律。显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe 3+全部还原为Fe 2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶 液酸度至适宜的显色酸度范围。有关反应如下： ==== ↑+ 2H 2O + 4H + + 2Cl -HCl OH NH 2Fe 223?++22N Fe 2++N N Fe 2+ + 3 Fe 3 2+ 用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度A ，以溶液的浓度C 为横坐标，相应的吸光度A 为纵坐标，绘制标准曲线。在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度Ax ，根据测得吸光度值Ax 从标准曲线上查出相应的浓度值Cx ，即可计算试样中被测物质的质量浓度。 三、仪器和试剂 1．仪器 721型分光光度计，1 cm 比色皿。2．试剂 （1）100 μg·mL -1铁标准储备溶液。 （2）100 g·L -1盐酸羟胺水溶液。用时现配。 （3）0.1% 邻二氮菲水溶液。避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。（4）pH=5.0的乙酸-乙酸钠溶液。四、实验步骤 1．显色标准溶液的配制 在序号为1~6的6只50 mL 容量瓶中，用吸量管分别加入0，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0 mL 铁标准使用液（含铁约100μg·mL -1），分别加入1.00 mL 100 g·L -1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min ，再各加入5.0 mL 乙酸-乙酸钠溶液，3.00 mL 0.1% 邻二氮菲溶液，以水稀释至刻度，摇匀。 2．吸收曲线的绘制 在分光光度计上，用1 cm 吸收池，以试剂空白溶液（1号）为参比，在480~540 nm 之间进行扫描，测定待测溶液（如5号）的吸光度A ，得到以波长为横坐标，吸光度为纵坐标的吸收曲线，从而选择测定铁的最大吸收波长λmax。 3．标准曲线的测绘 以步骤1中试剂空白溶液（1号）为参比，用1 cm 吸收池，在 严等问题，合理调试工作并且保护装置调试技
实验室设计规范(20200523203207)
实验室规划设计 实验室的建设，无论是新建、扩建、或是改建项目，它不单纯是选购合理的仪器设备，还要综 合考虑实验室的总体规划、合理布局和平面设计，以及供电、供水、供气、通风、空气净化、安全措施、 环境保护等基础设施和基本条件。因此实验室的建设是一项复杂的系统工程，在现代实验室里，先进的 科学仪器和优越完善的实验室是提升现代化科技水平，促进科研成果增长的必备条件。“以人为本，人 与环境”己成为人们高度关注的课题。本着“安全、环保、实用、耐久、美观、经济、卓越、领先”， 的规划设计理念。规划设计主要分为七个方面：化验室设计要求、平面设计系统、单台结构功能设计系 统、供排水设计系统、电控系统、特殊气体配送系统、有害气体输出系统等六个方面。下面就按上述六 方面依次讲解。 一、化验室设计要求 根据化验任务需要，化验室有贵重的精密仪器和各种化学药品，其中包括易燃及腐蚀性药品。另 外，在操作过程中常产生有害的气体或蒸气。因此，对化验室的房屋结构、环境、室内设施等有其特殊 的要求，在筹建新化验室或改建原有化验室时都应考虑。 化验室用房大致分为三类：精密仪器实验室、化学分析实验室、辅助室（办公室、储藏室、钢瓶 室等）。 化验室要求远离灰尘、烟雾、噪音和震动源的环境中，因此化验室不应建在交通要道、锅炉房、 机房及生产车间近旁（车间化验室除外）。为保持良好的气象条件，一般应为南北方向。 1. 精密仪器室 精密仪器室要求具有防火、防震、防电磁干扰、防噪音、防潮、防腐蚀、防尘、防有害气体侵入 的功能，室温尽可能保持恒定。为保持一般仪器良好的使用性能，温度应在15~30℃，有条件的最好控制在18~25℃。湿度在60％-70％，需要恒温的仪器室可装双层门窗及空调装置。 仪器室可用水磨石地或防静电地板，不推荐使用地毯，因地毯易积聚灰尘，还会产生静电、大型 精密仪器室的供电电压应稳定，一般允许电压波动范围为±10％。必要时要配备附属设备（如稳压电源等）。为保证供电不间断，可采用双电源供电。应设计有专用地线，接地极电阻小于4Ω。 气相色谱室及原子吸收分析室因要用到高压钢瓶，最好设在就近室为能建钢瓶室（方向朝北）的 位置。放仪器用的实验台与墙距离500mm，以便于操作与维修，室内有有良好的通风，原子吸收仪器上方 设局部排气罩。 微型计算机和微机控制的精密仪器对供电电压和频率有一定要求。为防止电压瞬变、瞬时停电、 电压不足等影响仪器动作，可根据需要选用不间断电源（UPS）。 在设计专用的仪器分析室的同时，就近配套设计相应的化学处理室，这在保护仪器和加强管理上 是非常必要的。 2. 化学分析室 在化学分析室中进行样品的化学处理和分析测定，工作中常使用一些小型的电器设备及各种化学 试剂，如操作不慎也具有一定的危险性，针对这些使用特点，在化学分析室设计上应注意以下要求：（1）建筑要求化验室的建筑应耐火或用不易燃的材料建成，隔断和顶棚也要考虑到防火性能。可采用水磨石地面，窗户要能防尘，室内采光要好，门应向外开，大实验室应设两个出口，以利于发生 意外时人员的撤离。 （2）供水和排水供水要保证必须的水压、水质、和水量以满足仪器设备正常运行的需要，室内 总阀门应设在易操作的显著位置，下水道应采用耐酸碱腐蚀的材料，地面应有地漏。 （3）通风设施由于化验工作中常常会产生有毒或易燃的气体，因此化验室要有良好的通风条 件，通风设施一般有3种： ①全室通风采用排气扇或通风竖井，换气次数一般为5次/时。 ②局部排气罩一般安装在大型仪器发生有害气体部位的上方。在教学实验室中产生有害气体的上方，设置局部排气罩以减少室内空气的污染。 ③通风柜这是实验室常用的一种局部排风设备。内有加热源、水源、照明等装置。可采用防
仪器分析实验目录和讲义(2015)
实验讲义 实验65火焰原子吸收光谱法测定钙 实验目的 掌握原子吸收分光光度法的基本原理，了解原子吸收分光光度计的基本结构；了解原子吸收分光光度法实验条件的优化方法，了解与火焰性质有关的一些条件参数及其对钙测定灵敏度的影响；掌握火焰原子吸收光谱分析的基本操作；加深对灵敏度、准确度、空白等概念的认识。 实验原理 原子吸收光谱法是基于被测元素基态原子在蒸气状态对其原子共振辐射的吸收进行元素定量分析的方法。每种元素有不同的核外电子能级，因而有不同的特征吸收波长，其中吸收强度最大的一般为共振线，如Ca的共振线位于422.7 nm。溶液中的钙离子在火焰温度下变成钙原子，由空心阴极灯辐射出的钙原子光谱锐线在通过钙原子蒸汽时被强烈吸收，其吸收的程度与火焰中钙原子蒸汽浓度符合郎伯-比耳定律，即：A=log(1/T)=KNL（其中：A—吸光度，T —透光度，L—钙原子蒸汽的厚度，K—吸光系数，N—单位体积钙原子蒸汽中吸收辐射共振线的基态原子数）。在一定条件下，基态原子数N与待测溶液中钙离子的浓度成正比，通过测定一系列不同钙离子含量标准溶液的A值，可获得标准曲线，再根据未知溶液的吸光度值，即可求出未知液中钙离子的含量。 原子化效率是指原子化器中被测元素的基态原子数目与被测元素所有可能存在状态的原子总数之比，它直接影响到原子化器中被测元素的基态原子数目，进而对吸光度产生影响。测定条件的变化（如燃助比、测光高度或者称燃烧器高度）和基体干扰等因素都会严重影响钙在火焰中的原子化效率，从而影响钙测定灵敏度。因此在测定样品之前都应对测定条件进行优化，基体干扰则通常采用标准加入法来消除。 仪器和试剂 AA-300型原子吸收分光光度计（美国PE公司）；比色管（10 mL 6支）；比色管(25 mL 1支)；容量瓶(100 mL 1个)；移液管(5 mL 2支)。 钙标准溶液(100 μg·mL-1)；镧溶液：（10 mg·mL-1）。 本实验以乙炔气为燃气，空气为助燃气。 实验内容 1. 测试溶液的制备 （1）条件试验溶液的配制：将100 μg·mL-1的Ca2＋标液稀释成浓度约为2-3 μg·mL-1的Ca2＋试液100 mL，摇匀。此溶液用于分析条件选择实验。
仪器分析实验试题及答案
一、填空题 1、液相色谱中常使用甲醇、乙腈和四氢呋喃作为流动相，这三种溶剂在反相液相色谱中的洗脱能力大小顺序为甲醇<乙腈<四氢呋喃。 2、库仑分析法的基本依据是法拉第电解定律。 3、气相色谱实验中，当柱温增大时，溶质的保留时间将减小；当载气的流速增大时，溶质的保留时间将减小。 二、选择题、 1、、色谱法分离混合物的可能性决定于试样混合物在固定相中___D___的差别。 A. 沸点差 B. 温度差 C. 吸光度 D. 分配系数。 2、气相色谱选择固定液时，一般根据___C__原则。 A. 沸点高低 B. 熔点高低 C. 相似相溶 D. 化学稳定性。 3、在气相色谱法中，若使用非极性固定相SE-30分离乙烷、环己烷和甲苯混合物时，它们的流出顺序为（C ） A. 环己烷、乙烷、甲苯； B. 甲苯、环己烷、乙烷； C. 乙烷、环己烷、甲苯； D. 乙烷、甲苯、环己烷 4、使用反相高效液相色谱法分离葛根素、对羟基苯甲醛和联苯的混合物时，它们的流出顺序为（A ） A. 葛根素、对羟基苯甲醛、联苯； B. 葛根素、联苯、对羟基苯甲醛； C. 对羟基苯甲醛、葛根素、联苯； D. 联苯、葛根素、对羟基苯甲醛 5、库仑滴定法滴定终点的判断方式为（B ） A. 指示剂变色法； B. 电位法； C. 电流法 D. 都可以 三、判断题 1、液相色谱的流动相又称为淋洗液，改变淋洗液的组成、极性可显著改变组分的分离效果。（√） 2、电位滴定测定食醋含量实验中电位突越点与使用酸碱滴定法指示剂的变色点不一致（×） 四、简答题 1、气相色谱有哪几种定量分析方法？ 答：气相色谱一般有如下定量分析方法：内标法、外标法、归一法、标准曲线法、标准加入法。 2、归一化法在什么情况下才能应用？
现代仪器分析实验报告.
实验一双波长分光光度法测定混合样品溶液中 苯甲酸钠的含量 一、目的 1 ?熟悉双波长分光光度法测定二元混合物中待测组分含量的原理和方法。 2 ?掌握选择测定波长（入1）和参比波长（& ）的方法。 二、原理 混合样品溶液由苯酚和苯甲酸钠组成，在0.04mol/LHCI溶液中测得其吸收光谱，苯甲酸钠的吸收峰 在229nm处，苯酚的吸收峰在210nm处。若测定苯甲酸钠，从光谱上可知干扰组分（苯酚）在229和 251 nm处的吸光度相等，则AA= KC A A仅与苯甲酸钠浓度成正比，而与苯酚浓度无关，从而测得苯甲酸钠的浓度。 三、仪器与试剂紫外分光光度计苯酚苯甲酸钠蒸馏水盐酸 四、操作步骤及主要结果 1 ?样品的制备 （1）标准储备液的配制精密称取苯甲酸钠0.1013g和苯酚0.1115g,分别用蒸馏水溶解，定量转 移至500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得浓度为200卩g/ml的储备液，置于冰箱中保存。 （2）标准溶液的配制分别吸取标准苯酚储备液 5.00ml和标准苯甲酸钠储备液 5.00ml至100ml容 量瓶中，用0.04mol/LHCI溶液稀释至刻度，摇匀，即得浓度为10卩g/ml的标准溶液。 2 ?样品的测定（1 ）波长组合的选择于可见-紫外分光光度计上分别测定苯酚和苯甲酸钠标准溶 液的吸收光谱（检测波长200~320nm），确定双波长法测定苯甲酸钠含量时的参比波长（入s=257.5nm） 和测定波长（入m=231.2nm）。（2）苯甲酸钠工作曲线的绘制配制不同浓度的I苯甲酸钠/0.04MHCl 溶液。以0.04mol/L HCl溶液为参比溶液，测定系列浓度的苯甲酸钠/0.04M HCl溶液在入m和入s处的吸 光度差值（见表1），计算其回归方程Y=0.0652X+0.0311（R 2=0.999）。（3）测定以0.04mol/L HCl溶液为参比溶液，测定混和溶液的吸光度值（n=3 ），根据回归方程计算混和溶液中苯甲酸钠的含量（X , RSD%）。见表2 表1双波长法测定不同浓度下苯甲酸钠标准溶液的吸光度 标准溶液浓度（ug/ml ）231.2 nm 吸光度257.5nm吸光度吸光度差值 20.1630.0120.151 40.3240.0210.303 60.4550.0340.421 80.6050.0460.559 100.7350.0540.681 120.8710.0620.809 表2 混合溶液不同波 长下的吸光度 测量次数231.2 nm 吸光度257.5nm吸光度吸光度差值10.6120.1100.502 20.6140.1130.501 30.613 ,0.1120.501 平均值0.6120.1120.500 RSD 均小于0.1%将Y=0.500 代入回归方程Y=0.0652X+0.0311 得X=7.2 ,则样品浓度为：7.2936ug/ml 则其含量为：7.3*100/1000=0.73mg 五讨论：本试验采用双波长法测定苯酚和苯甲酸钠的混合液中苯甲酸钠的含量，关键是两个波长 的选择，同时应使两波长下苯甲酸钠的吸光度值足够大，以减小测量误差。
仪器分析实验讲义-2013
分析科学与分析技术实验(二)
试用教程
（第二版）
华东师范大学化学系 仪器分析实验室
2013 年 1 月
目 录
实验一 实验二 实验三 实验四 实验五 实验六 实验七 实验八 实验九 实验十 盐酸与醋酸混合液的电导滴定（实验楼 D-304）……….………..…… 3 电位法测定水中氯离子的含量（实验楼 D-304）…………………….. 7 氟离子选择性电极测定水中微量氟（实验楼 D-304）……………….. 12 阳极溶出伏安法测定镉（实验楼 D-304）………………………………15 荧光法测定维生素 B2 的含量（实验楼 D-310）.....……………..…..… 19 紫外分光光度法定性及定量分析（实验楼 D-320）………………….. 23 高效液相色谱基本参数设定及定量分析（实验楼 D-318）…..……… 26 气相色谱法基本参数测定及定量分析（实验楼 D-312）…………….. 30 原子吸收法（石墨炉法）测定废水中的铜（实验楼 D-308）……..…. 33 样品的红外吸收光谱的测绘（实验楼 D-208）…………………...…… 37
实验十一 核磁共振波谱测定化学位移及自旋耦合常数（实验楼 D-316）……...41
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实验一
盐酸与醋酸混合液的电导滴定
一、实验目的与要求 1、了解溶液电导（率）的基本概念，电导（率）测定的原理及其应用。 2、掌握 DDS-11AT 数字电导率仪的使用方法。
二、实验原理 在电解质溶液中， 带电的离子在电场作用下做有规则的移动， 从而传递电荷， 使溶液具有导电作用。 其导电能力的强弱称为电导 G， 单位为西门子， 以 S 表示。 因为电导是电阻的倒数，所以，只要测出溶液的电阻值，便可知道其电导。 故采用两个电极插入溶液中，以测出两极间的电阻值 R。当温度一定时，根据欧 姆定律，R 与两极间距离 L（cm）成正比，与电极的截面积 A（cm2）成反比： R = 1/G = ρL/A ρ——电阻率，Ω·cm 当电极固定不变，A 与 L 也固定不变时，L/A 为常数，以 J 表示： 即 J = L /A J——电极常数，cm-1 由(1)、(2)式得： G = l/(ρJ) ……………………（3） ……………………（2） ……………………（1）
因为电导是电阻的倒数，电导率是电阻率的倒数，所以 K = 1/ρ K——电导率，S/cm 由（3） 、 （4）式得： K = G·J …………………… （5） …………………… （4）
当电极常数已知，则通过（5）式，可以将测得的电导值换算为电导率，这 也就是电导率仪的工作原理。 单位换算关系：1 S/cm = 103 mS/cm = 106 μS/cm 本实验以标准 NaOH 溶液滴定盐酸和醋酸的混合溶液。在滴定过程中，因 为溶液中迁移率较大的 H+被加入的 OH-中和，而代替它的是迁移率较小的 Na+ 离子和难以电离的水，因此溶液的电导（率）不断降低，直到 HCl 完全被中和
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大一仪器分析实验讲义(2014修订)
实验65火焰原子吸收光谱法测定钙 实验目的 掌握原子吸收分光光度法的基本原理，了解原子吸收分光光度计的基本结构；了解原子吸收分光光度法实验条件的优化方法，了解与火焰性质有关的一些条件参数及其对钙测定灵敏度的影响；掌握火焰原子吸收光谱分析的基本操作；加深对灵敏度、准确度、空白等概念的认识。 实验原理 原子吸收光谱法是基于被测元素基态原子在蒸气状态对其原子共振辐射的吸收进行元素定量分析的方法。每种元素有不同的核外电子能级，因而有不同的特征吸收波长，其中吸收强度最大的一般为共振线，如Ca的共振线位于422.7 nm。溶液中的钙离子在火焰温度下变成钙原子，由空心阴极灯辐射出的钙原子光谱锐线在通过钙原子蒸汽时被强烈吸收，其吸收的程度与火焰中钙原子蒸汽浓度符合郎伯-比耳定律，即：A=log(1/T)=KNL（其中：A—吸光度，T —透光度，L—钙原子蒸汽的厚度，K—吸光系数，N—单位体积钙原子蒸汽中吸收辐射共振线的基态原子数）。在一定条件下，基态原子数N与待测溶液中钙离子的浓度成正比，通过测定一系列不同钙离子含量标准溶液的A值，可获得标准曲线，再根据未知溶液的吸光度值，即可求出未知液中钙离子的含量。 原子化效率是指原子化器中被测元素的基态原子数目与被测元素所有可能存在状态的原子总数之比，它直接影响到原子化器中被测元素的基态原子数目，进而对吸光度产生影响。测定条件的变化（如燃助比、测光高度或者称燃烧器高度）和基体干扰等因素都会严重影响钙在火焰中的原子化效率，从而影响钙测定灵敏度。因此在测定样品之前都应对测定条件进行优化，基体干扰则通常采用标准加入法来消除。 仪器和试剂 AA-300型原子吸收分光光度计（美国PE公司）；比色管（10 mL 6支）；比色管(25 mL 1支)；容量瓶(100 mL 1个)；移液管(5 mL 2支)。 钙标准溶液(100 μg·mL-1)；镧溶液：（10 mg·mL-1）。 本实验以乙炔气为燃气，空气为助燃气。 实验内容 1. 测试溶液的制备 （1）条件试验溶液的配制：将100 μg·mL-1的Ca2＋标液稀释成浓度约为2-3 μg·mL-1的Ca2＋试液100 mL，摇匀。此溶液用于分析条件选择实验。 （2）标准溶液的配制：用分度吸量管取一定体积的100 μg·mL-1 Ca2＋标液于25 mL比色管中，用去离子水稀释至25 mL刻度处(若去离子水的水质不好，会影响钙的测定灵敏度和校