外周血正常白细胞形态

可编辑

精品

人外周血白细胞DNA提取标准操作规程(SOP)

人外周血白细胞DNA提取标准操作规程(SOP) （血液/组织/细胞基因组提取试剂盒(DP304)） 1实验原理本法采用血液/组织/细胞基因组提取试剂盒(DP304)，从全血中分离白膜层，去除其中的红细胞及蛋白质，裂解白细胞释放DNA，再通过去除DNA中的杂质使其纯化，得到高纯度的DNA原液，最后使用微量紫外可见分光光度计对DNA 的浓度及纯度进行定量检测。 2实验仪器 EP管微量移液器，10μL、50μL、200μL、1000μL 涡旋振荡器数显恒温搅拌循环水箱吸附柱CB3 收集管离心机涡旋振荡器微量紫外可见分光光度计（Thermo NanoDrop1000） 3实验试剂正常人混合血液，应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。红细胞裂解液（裂解红细胞）缓冲液GA（轻微裂解作用，为蛋白激酶K提供反应环境），若溶液产生沉淀，使用前应在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。蛋白激酶K（裂解蛋白质）缓冲液GB（裂解白细胞，释放DNA），若溶液产生沉淀，使用前应在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。无水乙醇（沉淀DNA，去除杂质）缓冲液GD（去除蛋白质），使用前应按照试剂瓶标签的说明加入无水乙醇。缓冲液PW（去除盐），使用前应按照试剂瓶标签的说明加入无水乙醇。洗脱缓冲液TE（保存DNA） 4实验步骤样品的采集与保存：用装有EDTA的塑料管采集2mL静脉血，2000rpm离心 5min，可见分层，分别为血浆层、白膜层、红细胞，将血浆吸出弃去，再通过点吸的方式将白膜层全部吸出，置于干净的EP管备用。如无法及时提取DNA，则应置于-80℃进行保存。样品预处理：

临检--异常白细胞形态

异常白细胞形态 1.中性粒细胞异常形态（1）毒性变化：严重传染病、化脓性感染、中毒、恶性肿瘤、大面积烧伤等情况。大小不均中毒颗粒空泡形成杜勒小体退行性变 1）大小不均中性粒细胞大小相差悬殊，不均一性增大。 2）中毒颗粒中性粒细胞的胞质中出现比正常中性颗粒粗大、大小不等、分布不均的染色较深黑色或紫黑色颗粒。 3）空泡形成中性粒细胞的胞质或胞核可出现1个或数个空泡。细胞发生脂肪变性或颗粒缺失的结果。 4）杜勒小体（Dohle）：中性粒细胞因毒性变化而在胞质中保留的局部嗜碱性区域（源自RNA），呈圆形、梨形或云雾状，染成灰蓝色，直径1～2μm，亦可见于单核细胞。

5）退行性变：细胞发生胞体肿大、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀和核溶解等。（2）棒状小体（Auer小体）急性白血病类型急粒（M3）数条急单一条急淋无白细胞胞质中出现呈紫红色细杆状物质，长约1～6μm，1条或数条，称为棒状小体。（3）中性粒细胞核象变化 3叶核居多，杆状与分叶核之比1:13 1）核左移：外周血中杆状核粒细胞增多和（或）出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞时（＞5%）。再生性核左移核左移伴白细胞总数高，提示骨髓造血功能旺盛，机体抵抗性强。见于：急性化脓性细菌感染、急性中毒、急性溶血、急性失血。退行性核左移核左移伴白细胞总数正常或减少，提示骨髓释放功能受到抑制，机体抵抗力差。见于再生障碍性贫血、粒细胞减少症、严重感染（如伤寒、败血症等）。 2）核右移中性粒细胞核分叶5叶以上者超过3%，常伴白细胞总数减低，为造血物质缺乏、脱氧核糖核酸减低、骨髓造血功能减退所致。见于营养性巨幼细胞性贫血、恶性贫血、应用抗代谢药物（如阿糖胞苷、6-巯基嘌呤等）、炎症恢复期。

末梢血涂片白细胞形态变化及临床意义

末梢血涂片白细胞形态变化及临床意义 1. 中性粒细胞核左移 2. 外周血中性杆状粒细胞增高，并可见晚幼粒细胞、中幼粒细胞甚至早幼粒细胞时称为中性粒细胞核左移。仅见杆状粒细胞>6%时，称为轻度核左移；杆状粒细胞>10%，伴少量晚幼粒细胞、中幼粒细胞时称为中度核左移；杆状粒细胞>25%，出现更幼稚的粒细胞如早幼粒细胞甚至原粒细胞时称为重度核左移。重度核左移又称为类白血病反应，此时中性粒细胞常伴有明显的中毒性病理改变。中性粒细胞核左移常见于急性化脓性感染、急性中毒、急性溶血等。骨髓增生异常综合征（MDS）患者外周血可见原始、幼稚粒细胞，并出现病态造血，如中性粒细胞核分叶不良等。图-1 图-2

图-1视野可见中性分叶粒细胞、中性杆状粒细胞、中性晚幼和中幼粒细胞。中性粒细胞胞质中可见中毒颗粒。图-2可见中性分叶粒细胞、中性杆状粒细胞、中幼粒细胞和早幼粒细胞。中性粒细胞胞质中可见中毒颗粒。 2. 中性粒细胞核右移正常成熟中性粒细胞胞核以分三叶者为主，如血片中五叶核中性粒细胞>3%，则称为中性粒细胞核右移。核右移常伴有白细胞总数减低和中性粒细胞胞体增大，常见于巨幼细胞性贫血及恶性贫血等。其原因主要是由于缺乏叶酸、VitB12等造血物质，DNA合成减少，影响了细胞的正常分裂。在应用某些抗核酸代谢药物及炎症恢复期等也可见核右移现象。图-3 图-3视野中可见一巨大中性粒细胞，胞核分为10余叶。 3. 中性粒细胞中毒颗粒中毒颗粒(toxic granulation) 中性粒细胞胞质中出现的粗大且分布不均的黑蓝色颗粒，称为中毒颗粒。中毒颗粒是细胞在生成特殊颗粒过程中受到某种阻力或发生颗粒变性所致。常见于严重的化脓菌感染及大面积烧伤等患者中。

血液中的白细胞有五种

血液中的白细胞有五种，按照体积从小到大是：淋巴细胞，嗜碱性粒细胞，嗜中性粒细胞，嗜酸性粒细胞和单核细胞。白细胞是无色有核的血细胞，在血液中一般呈球形，根据形态差异可分为颗粒和无颗粒两大类。颗粒白细胞（粒细胞）中含有特殊染色颗粒，用瑞氏染料染色可分辨出三种颗粒白细胞即中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。中性粒细胞具有变形运动和吞噬活动的能力，是机体对抗入侵病菌，特别是急性化脓性细菌的最重要的防卫系统。当中性粒细胞数显著减少时，机体发生感染的机会明显增高。嗜酸性粒细胞具有粗大的嗜酸性颗粒，颗粒内含有过氧化物酶和酸性磷酸酶。嗜酸性粒细胞具有趋化性，能吞噬抗原抗体复合物，减轻其对机体的损害，并能对

抗组织胺等致炎因子的作用。嗜碱性粒细胞中有嗜碱性颗粒，内含组织胺、肝素与5-羟色胺等生物活性物质，在抗原－抗体反应时释放出来。在人体的正常粪便中偶尔能见到少许白细胞，所以粪便检查中白细胞的多少可以作为肠道是否有炎症的一种依据，无颗粒白细胞无细胞质颗粒，但有圆形细胞核，包括单核细胞和淋巴细胞。单核细胞是血液中最大的血细胞。目前认为它是巨噬细胞的前身，具有明显的变形运动，能吞噬、清除受伤、衰老的细胞及其碎片。单核细胞还参与免疫反应，在吞噬抗原后将所携带的抗原决定簇转交给淋巴细胞，诱导淋巴细胞的特异性免疫反应。单核细胞也是对付细胞内致病细菌和寄生虫的主要细胞防卫系统，还具有识别和杀伤肿瘤细胞的能力。淋巴细胞则为具有特异性免疫功能

的细胞。T淋巴细胞主要参与细胞免疫反应而B 淋巴细胞参与体液免疫反应。成年人白细胞数为每立方毫米5000～9000单位，其中中性粒细胞占0.50～0.70，嗜酸性粒细胞占0.005～0.05，嗜碱性粒细胞占0.005～0.01，单核细胞占0.03～0.08，淋巴细胞占0.20～0.40。幼儿血液中白细胞数高于成年人。不同生理状态（如妊娠期）会引起白细胞数量的变化。有炎症时，血中的白细胞数明显增加。各类白细胞的防御保护作用各不相同。瑞氏染色外周血五种白细胞形态特征：细胞类型大小（μm）外形细胞核细胞质功能核形染色质着色颗粒中性杆状核粒细胞10～15 圆形弯曲呈腊肠样，两端钝圆深紫红色粗糙淡橘红色量多，细小，均匀布满胞质，浅紫红

小鼠外周血白细胞使用说明

小鼠外周血白细胞小鼠外周血白细胞产品说明：为使能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。派瑞金提供的小鼠外周血白细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。研发的小鼠外周血白细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。小鼠外周血白细胞注意事项： 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。 3. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。 4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。 5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。小鼠外周血白细胞其他相关小鼠原代细胞：小鼠小肠粘膜上皮细胞小鼠大隐静脉平滑肌细胞小鼠肺微血管内皮细胞小鼠冠状动脉平滑肌细胞小鼠肺血管平滑肌细胞小鼠大隐静脉内皮细胞小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞小鼠冠状动脉内皮细胞小鼠气管上皮细胞小鼠骨细胞小鼠气管平滑肌细胞小鼠滑膜细胞小鼠肺成纤维细胞小鼠骨骼肌细胞小鼠支气管上皮细胞小鼠表皮细胞小鼠支气管成纤维细胞小鼠真皮成纤维细胞小鼠肺大静脉平滑肌细胞小鼠破骨细胞小鼠肺大动脉平滑肌细胞小鼠皮肤肥大细胞

白细胞

白细胞科技名词定义中文名称：白细胞英文名称： leukocyte;white blood cell;leucocyte 定义1：淋巴细胞、多形核粒细胞和单核细胞的总称。所属学科：免疫学(一级学科) ；免疫系统(二级学科) ；免疫细胞(三级学科) 定义2：血液中除红细胞和血小板外的各种血细胞。包括淋巴细胞、多形核粒细胞和单核细胞。所属学科：细胞生物学(一级学科) ；总论(二级学科) 本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布百科名片白细胞旧称白血球。血液中的一类细胞。白细胞也通常被称为免疫细胞。人体和动物血液及组织中的无色细胞。有细胞核，能作变形运动。白细胞一般有活跃的移动能力，它们可以从血管内迁移到血管外，或从血管外组织迁移到血管内。因此，白细胞除存在于血液和淋巴中外，也广泛存在于血管、淋巴管以外的组织中。目录[隐藏] 医学术语白细胞的观察白细胞的分类白细胞的功能白细胞减少症白细胞临床意义白细胞计数（WBC）白细胞数量的提高医学术语白细胞的观察白细胞的分类白细胞的功能白细胞减少症白细胞临床意义白细胞计数（WBC）

白细胞数量的提高 [编辑本段] 医学术语【白细胞】 leucocyte 简称WBC（white blood cell）补充介绍：（本资料为非专业资料，适合非专业人员阅读） 1单位：个/升（个/L） 2正常值范围：（单位为*10^9个/L）（1）成人为4.0到10.0 （2）新生儿为15到20 （3）6个月到2岁为11到12 （4）4到14岁为8 3临床意义：（1）增多：常见于急性细菌性感染、严重组织损伤、大出血、中毒和白血病等。 (2)减少：镇痛药、磺胺类药的服用；病毒感染；免疫系统衰弱；放化疗的影响。[编辑本段] 白细胞的观察白细胞无色呈球形，有细胞核，体积比红细胞大，直径在7～20μm之间。正常人白细胞计数在4000～10000个/mm3范围内，平均为7000个/mm3。血涂片中白细胞，经复合染料染色后，可根据其形态差异和细胞质内有无特有的颗粒可分为两大类五种细胞。白细胞观察实验：慢慢移动血片，观察各种白细胞，白细胞数目虽然少，寻找较困难，但胞体大、细胞核明显，极易与红细胞区别开。白细胞描述：数目少，胞体大，细胞核明显凸起。[1] [编辑本段]

白细胞五分类原理和散点图特征

血细胞仪白细胞五分类法原理和散点图特征2008-12-14来源:检验世界网浏览:5747次转发至：我要评论【字号：大中小】核心提示：本文主要介绍全自动血细胞分析仪在白细胞五分类上的原理和散点图分布特点。此类仪器在红细胞、血红蛋白、血小板和计算参数上一般会采用类似的测定原理和计算方法，此类仪器的进展和其功能特点可参考作者撰写的其它文章。赞北京协和医院检验科张时民检验地带网血细胞分析技术已经进入自动化时代，而具有白细胞五分类或更多分析参数的仪器也普遍的应用于国内各级医院实验室中，为临床诊断和治疗服务。而具有18项参数带有白细胞三分群功能的血细胞分析仪也已经普及进入到基层医院和社区医疗中心，在许多大型医院中已不占主流位置，因此可以说目前在较大医院的检验科，常规血细胞分析仪已经进入全自动化和白细胞五分类的时代。本文主要介绍全自动血细胞分析仪在白细胞五分类上的原理和散点图分布特点。此类仪器在红细胞、血红蛋白、血小板和计算参数上一般会采用类似的测定原理和计算方法，此类仪器的进展和其功能特点可参考作者撰写的其它文章（见参考文献）。具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器是指通过各种物理和化学技术对白细胞进行分析，以获得外周血液中白细胞的五种常见类型，嗜中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞，淋巴细胞和单核细胞的百分率和绝对值的测定结果，此外还应该具有对出现异常白细胞的提示或初步分类功能。目前国内外具有开发研制白细胞五分类法仪器的主要为欧美和日本生产厂商，比较着名的欧美厂家有Beckman-Coulter；ABBOTT；Siemens（Bayer）；ABX；日本有Sysmex 和NihonKohdon。在国内已经有迈瑞（MINDRAY）公司生产几个型号的五分类血细胞分析仪器投入医疗市场。检验地带网一简要发展史 1974年，一种名为HEMALOGD的具有初步白细胞分类功能的白细胞分析仪问世。1982年，Technicon公司生产了H6000型血液细胞分析仪器，应该是首款具有白细胞五分类能力的仪器。同时代日本日立公司推出图像分析法的白细胞分析仪HITACHI8200型，仅仅是用于完成白细胞血片分类的仪器，没有其他血细胞计数分析能力。Technicon公司1985年开发了比较成熟的具有白细胞五分类功能的TechniconH1型血液细胞分析仪，随后升级为H2型和H3型。 COULTER公司在1987年开发研制其经典VCS技术，并推出持续具有多年影响力的、具有白细胞五分类功能的血液细胞分析仪MAXM型。 1990年前后，欧洲和日本许多厂家都陆续推出了各种类型的具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器。各厂家设计生产的此类血细胞分析仪，其在白细胞分类技术上原理各不相同，分析测定项目略有不同，且形式多样，结构复杂，试剂种类和成分也趋于复杂。不断改进和升级的新产品使得仪器在白细胞分类技术上更加成熟和可靠。而技术的提高也带来了仪器和消耗品（试剂）价格的增加。检验地带网二仪器原理和散点图特点 1体积、电导和激光散射原理这是Beckman－Coulter公司生产的血细胞分析仪所采用的经典分析方法，他集三种物理学检测技术于一体，在细胞处于自然原始的状态下对其进行多参数分析。该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术采用在标本中首先加入红细胞溶血

人外周血白细胞分离液使用说明

人外周血白细胞分离液使用说明货号:P8670 规格：200ml/kit 保存：18℃-25℃避光保存，有效期两年。启封后置4℃保存，有效期一周。一、分离方法说明及图例 A．取1ml新鲜抗凝血，与全血及组织稀释液1:1混匀后小心加于1份本分离液之液面上； B.以500g（约1800转/分）离心25分钟(半径15cm水平转子)。此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层；为血浆层。第二层；为环状乳白色的白细胞层。第三层；为略带混浊的分离液层（富集一定量的白细胞）。第四层；为红细胞层。弃去第一层血浆层，收集第二层细胞、第三层分离液层和第四层红细胞层，放入含细胞洗涤液10ml的试管中，充分混匀后，以500g 约（1800转/分）离心30分钟。沉淀经1次洗涤后用红细胞裂解液裂解红细胞，再经3次洗涤去除红细胞内溶物和碎片后取沉淀细胞即为所需白细胞。注：提取率约为80%。二、红细胞裂解液使用说明红细胞裂解液用于从血液或组织细胞样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。不适用于禽类等有细胞核红细胞的裂解。本裂解液经过无菌处理，分离的细胞可以用于后续的原代培养、

细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。使用说明： A.对于组织细胞样品： a.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 b.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。如细胞沉淀的体积为1ml，则加入3-5ml的红细胞裂解液。 c.400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 d.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 e.洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。 f.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。注：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。 B.对于血液样品： a.取新鲜抗凝血，400-500g离心5分钟，离心弃上清。 b.加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入6-10ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解1-2分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4-5分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。

白细胞计数和白细胞分类

实用标准文案白细胞计数和白细胞分类显微镜下计数一定体积内将全血用稀酸溶液稀释一定倍数并破坏红细胞后充入血细胞计数池内，原理一) ( 的白细胞数，经换算求出每升血液内的白细胞数。显微镜计数法)方法 (二参考值(三) 白细胞计数 109/L ×成人 4~10 109/L ×新生儿 15~20 白细胞分类 1%~5% 中性杆状核粒细胞 50%~70% 中性分叶核粒细胞 0.5%~5% 嗜酸性粒细胞 0%~1% 嗜碱性粒细胞 20%~40% 淋巴细胞 3%~8% 单核细胞临床意义(四) ，因此它的数由于中性粒细胞在白细胞中所占百分率最高 (50%~70%)1.中性粒细胞增多、减少的临床意义值增减是影响白细胞总数的关键。 (1)中性粒细胞增多，分娩时疼痛和产伤可使其 109/L15×个月以上白细胞增多可达①生理性增多见于胎儿、新生儿，妊娠5 剧烈运动、严寒、暴热等刺激也可见白细胞增多。2症于产后周左右恢复正常;10进一步增高，如无合并系边缘池内的白细胞过多地进入循环池所致，以上一过性白细胞增多在去除影响因素后不久则可恢复正常，而持续时间较长的白细胞增多则与贮备池加快释放等有关。精彩文档．实用标准文案 ②病理性增多反应性增多A. 最常见于急性化脓菌感染，如金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌等。其白细胞总数的增高视感染范围、严重程中度轻度感染时白细胞总数可正常，分类时可见中性粒细胞百分率增高;.度及机体反应性如何而有所不同并出现个/L并可伴轻度核象左移；重度感染时白细胞明显增高常>20×109感染时白细胞多>l0×109个/L明显的核象左移。感染过于严重如感染中毒性休克或机体反应性较差时白细胞可不增高反而减低但伴有严重的核象左移。严重的组织损伤如严重的烧伤、机械性损伤、较大手术后、心肌梗塞等均可见白细胞增高，并可借此来区别心梗与心绞痛。，×109/L)破裂或宫外孕破裂所致大出血，此时白细胞可迅速增高，达20大量血细胞破坏内脏(如肝、脾且可出现于血红蛋白降低之前。尿毒症等也代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒、急性中毒见于急性化学药物中毒如安眠药、有机磷等中毒；增多。(中性粒细胞)常见白细胞

人体白细胞的种类和功能精编版

人体白细胞的种类和功能人体内白细胞为无色有核细胞，在血液中呈球形，它能以变形运动穿过毛细血管壁，进入结缔组织。正常5000—10000/mm3。一、种类及特点根据细胞质和细胞核的染色特点，可把白细胞分为两大类：有颗粒白细胞：嗜中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞无颗粒白细胞：淋巴细胞，单核细胞正常时各种白细胞数目保持一定比例，称为白细胞分类计数，正常情况下数目如下：疾病状况下，白细胞总数和分类计数都可发生改变。二、白细胞的功能 ①中性粒细胞白细胞: 吞噬和消化侵入微生物和机体本身的各种坏死细胞,包括衰老和受损红细胞.是机体防御功能重要组成部分。细胞内溶酶体丰富，并做变形运动。中性粒细胞可通过变形运动渗出毛细血管壁进入组织液,在组织液内游走(趋化性)。如果白细胞的的溶酶体释放的酶量过多，不仅能杀死和溶解细菌，本身也将致死，死亡的白细胞连同细菌分解物一起成为浓液组成部分。 ②嗜酸性粒细胞：能限制嗜碱性粒细胞和肥大细胞中的活性物质的合成和释放；当机体患某些过敏性疾病时，嗜酸性粒细胞数量增多，有人认为她和机体的过敏性反应有关。 ③嗜碱性粒细胞：含有多种生物活性物质，与肥大细胞相似，细胞颗粒中能合成组织胺和过敏性慢作用物质。

组织胺：使小动脉和毛细血管扩张，并使毛细血管和微静脉通透性增加，与人过敏反应有关。过敏性慢作用物质：可使血管通透性增加，并使平滑肌收缩，特别是使支气管和细支气管的平滑肌收缩，从而引起哮喘。总括起来嗜碱性粒细胞所释放的活性物质可引起哮喘，寻麻疹，食物过敏等各种反应，同时又引起嗜碱性粒细胞聚集这一局部。 ④淋巴细胞：具有免疫功能 T细胞：骨髓中生成的淋巴系干细胞在胸腺中发育成熟，参与细胞免疫。血液中80-90% 淋巴细胞属于T淋巴细胞。 B细胞：造血干细胞在骨髓中分裂分化成B细胞，多集中在淋巴结等淋巴器官中。参与体液免疫—抗体免疫。 ⑤单核细胞：从血管进入组织后，便分化成巨噬细胞，吞噬细菌和病毒等三、白细胞测定临床意义（一）白细胞增加：外周血液中白细胞数超过10×109/L称为白细胞增多症。白细胞增多可以是中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞增多。临床常见为淋巴细胞增多症。 1、中性粒细胞增多症生理性：如饭后和剧烈运动后；冷水浴后及极度恐惧和疼痛后等、妇女经期及妊娠等。病理性：（1）急性感染：某些细菌（葡萄球菌、肺炎球菌等）病毒（水痘病毒、狂犬病毒）引起的感染；（2）非感染性炎症，如急性风湿热、少年型类风湿关节炎等（3）组织坏死：严重外伤、手术创伤、烧伤等。（4）急性失血及贫血（5）急性中毒：如化学毒物及药物中毒、尿毒症等。（6）粒细胞异常增生：急性粒细胞白血病，骨髓增生性疾病（7）其他：如脾脏切除后。 2、嗜酸性粒细胞增多症外周血中嗜酸性粒细胞绝对值超过0.45×109/L,称为嗜酸性粒细胞增多症. 嗜酸性粒细胞增多常与许多疾病有关，特别是寄生虫感染和过敏性疾病。３、白血病是骨髓和其他造血组织中原始和幼稚细胞异常增生的一种恶性疾病。临床表现贫血、出血、感染及白血病细胞侵润机体各组织、器官所产生的相应表现。 ⑴病因：病毒：人类T细胞白血病，已肯定是由人T细胞病毒-Ⅰ引起的放射性核素：其致白血病的作用是肯定的，其作用与照射剂量的大小和部位有关化学因素：（如烷化剂、细胞毒药物）及化学毒物（苯）可诱发遗传因素：家族性白血病约占7%。其他血液病：骨髓增生性疾病、淋巴瘤等最终可发展为急性白血病。 ⑵分类：按病程缓急及白细胞分化程度可分为急性白血病：起病急，自然病程约半年以内。骨髓中以原始和早期幼稚细胞增生为主，正常造血受到抑制的恶性疾病。成人以急性粒细胞白血病多见，儿童以急性淋巴细胞较多见。临床表现主要为贫血、出血、继发感染发热及白血病细胞侵润

人外周血白细胞分离液试剂盒

人外周血白细胞分离液试剂盒规格：200mL/kit 保存：本产品对光敏感，应该室温避光储存，保质期2年。无菌开封后，保存于室温。试剂盒组成：各种动物外周血白细胞分离液 200mL 细胞洗涤液 200mL 红细胞裂解液100mL 操作步骤： 1.取新鲜抗凝全血（EDTA 、枸橼酸钠或肝素抗凝均可）或者去纤维蛋白血液。 2.在离心管中加入适量分离液（血液体积小于5mL 时，加入5mL 分离液；大于等于5mL ，加入等体积分离液。但二者的总体积不能超过离心管的三分之二，否则会影响分离效果），将血液平铺到分离液液面上方，注意保持两液面界面清晰。（可以使用巴氏德吸管吸取血液，然后将血液小心的平铺于分离液上，因为两者的密度差异，将形成明显的分层界面。如果样品较多，加样的时间较长，在离心之前出现红细胞成团下沉属正常现象。） 3.室温，水平转子500~1000g ，离心20~30min （血液的体积越大所需的离心力越大，离心时间越长，最佳的分离条件需摸索，离心转速最大不超过1200g ）。 4.离心后将出现明显的分层：最上层是稀释的血浆层；血浆与分离液之间是淋巴细胞层；分离液中为粒细胞层（个体差异或者是分离条件不同，粒细胞层可能分离不明显）；最下层为红细胞层。 5.小心的吸取淋巴细胞层及分离液层细胞到15mL 洁净的离心管中，10mL PBS 或细胞洗涤液洗涤细胞。250g ，离心10min （如有红细胞混杂则加入适量红细胞裂解液） 6.弃上清，5mL 的PBS 或细胞清洗液重悬细胞，250g ，离心10min 。 7.重复步骤6 8.弃上清，细胞重悬备用。注意事项： A.开封前颠倒混匀，本分离液为无菌产品，为延长分离液保存时间，请在无菌条件下启封，避免微生物污染。。 B.分离液使用时应始终保持室温（18℃~25℃），如室内温度较低，可将分离液预热。4℃或者是温度较低的条件下离心，可能会导致白膜层中红细胞污染加重。 C.血液样本最好为新鲜抗凝血（采血2h 以内），为保持淋巴细胞的活性，应避免冷冻和冷藏。 D.血液样本不需稀释，直接进行分离即可。 E.稀释血液或洗涤细胞，不可使用含Ca 、Mg 离子的缓冲液及培养液，其成分会导致血细胞凝集，分离示意图血浆层红细胞层淋巴细胞粒细胞分离液层

血细胞仪白细胞五分类法原理和散点图特征

北京协和医院检验科张时民血细胞分析技术已经进入自动化时代，而具有白细胞五分类或更多分析参数的仪器也普遍的应用于国内各级医院实验室中，为临床诊断和治疗服务。而具有18项参数带有白细胞三分群功能的血细胞分析仪也已经普及进入到基层医院和社区医疗中心，在许多大型医院中已不占主流位置，因此可以说目前在较大医院的检验科，常规血细胞分析仪已经进入全自动化和白细胞五分类的时代。本文主要介绍全自动血细胞分析仪在白细胞五分类上的原理和散点图分布特点。此类仪器在红细胞、血红蛋白、血小板和计算参数上一般会采用类似的测定原理和计算方法，此类仪器的进展和其功能特点可参考作者撰写的其它文章（见参考文献）。具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器是指通过各种物理和化学技术对白细胞进行分析，以获得外周血液中白细胞的五种常见类型，嗜中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞，淋巴细胞和单核细胞的百分率和绝对值的测定结果，此外还应该具有对出现异常白细胞的提示或初步分类功能。目前国内外具有开发研制白细胞五分类法仪器的主要为欧美和日本生产厂商，比较著名的欧美厂家有Beckman-Coulter；ABBOTT；Siemens（Bayer）；ABX；日本有Sysmex和Nihon Kohdon。在国内已经有迈瑞（MINDRAY）公司生产几个型号的五分类血细胞分析仪器投入医疗市场。一简要发展史 1974年，一种名为HEMALOG D的具有初步白细胞分类功能的白细胞分析仪问世。 1982年，Technicon公司生产了H6000型血液细胞分析仪器，应该是首款具有白细胞五分类能力的仪器。同时代日本日立公司推出图像分析法的白细胞分析仪HITACHI 8200型，仅仅是用于完成白细胞血片分类的仪器，没有其他血细胞计数分析能力。 Technicon 公司1985 年开发了比较成熟的具有白细胞五分类功能的Technicon H1 型血液细胞分析仪，随后升级为H2型和H3型。 COULTER公司在1987 年开发研制其经典VCS技术，并推出持续具有多年影响力的、具有白细胞五分类功能的血液细胞分析仪MAXM 型。 1990年前后，欧洲和日本许多厂家都陆续推出了各种类型的具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器。各厂家设计生产的此类血细胞分析仪，其在白细胞分类技术上原理各不相同，分析测定项目略有不同，且形式多样，结构复杂，试剂种类和成分也趋于复杂。不断改进和升级的新产品使得仪器在白细胞分类技术上更加成熟和可靠。而技术的提高也带来了仪器和消耗品（试剂）价格的增加。二仪器原理和散点图特点 1 体积、电导和激光散射原理这是Beckman－Coulter公司生产的血细胞分析仪所采用的经典分析方法，他集三种物

外周血细胞形态检验

外周血细胞形态检验 1.外周血涂片检查步骤：（1）肉眼观察：涂片面膜大小、厚薄是否适中，染色好坏。（2）低倍镜观察全貌： ①涂片及染色好坏； ②了解白细胞数（可大体校对WBC直接计数是否正确）； ③了解白细胞大致分布及其各阶段大致比例，特别要注意由于涂片过力，把WBC及成熟粒细胞大多推于片尾部位，造成分类比值误差。片尾有无异常细胞。 ④选择具有代表性的细胞镜检区域。（3）油镜观察：进行WBC分类计数，观察细胞形态、比例、有无巨大或异常细胞。 ①血涂片对WBC总数准确性估计：从低倍及油镜中估计WBC数及其分布。医|学教育网搜集整理一般区分WBC数几个等级（油镜视野中WBC密度、分散无重叠）。参见WBC形态诊断技巧节段。 ②白细胞分类计数：血中主要两大比例的中性成熟粒细胞与淋巴细胞及其他小比例细胞是否属正常范围及形态有无异常。

③注意片尾端有无巨大或出现不成熟或异常细胞（如中晚幼粒、中晚幼红细胞、异常淋巴细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等）。 ④红细胞形态（群体、个体）、排列（重叠、缗钱状）。 ⑤血小板数量、形态及聚集性。⑥寄生虫。 ●注意事项 1．血膜呈舌状，头、体、尾分明 2.空气中晃动，尽快干燥；37℃恒温箱中促干 3．涂片的厚薄、长度与血滴大小（10~20μl）与血片质量4．1h内染色或在1h内甲醇固定 5.正确清洁玻片 6．抗凝血或毛细血管血涂片；EDTA能阻止PLT聚集 7．抗凝血液4h内涂片，先在低倍镜下浏览全片，了解染色好坏和细胞分布情况，观察有无异常细胞。选择涂片体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。 8.分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛状迂回移动，计数使不能重复和遗漏。

白细胞形态观察教案教学设计

教学活动设计方案模块二：白细胞检验授课对象：医学检验技术1003班学习任务：白细胞形态观察学时：1学时授课类型：教学做一体化授课时间：2011年9月25日教学要求教学目标学会正确使用显微镜，能在显微镜下识别五种白细胞的正常形态，认识到镜下形态辨认功夫的重要性，增强责任感。教学重难点重点：白细胞的形态特征鉴别要点。难点：镜下识别五种白细胞的正常形态。教学地点集多媒体、实训一体化教室教学方法讨论法、练习法教学手段十人共览显微镜、高倍数码显微镜、自制血涂片教学程序教师提出问题—学生自学—教师理论讲解并演示—学生操作，教师指导—学生讨论并总结—教师点评—教学效果检测—教师总结教学实施学生活动教师活动时间思考讨论教师提问，带着问题进入新课内容——“白细胞形态”的学习导言：发烧就诊，首先要查血，为什么？引起发烧最常见的原因是感染，查血可确定是否为感染，是细菌性还是病毒性，主要依据血液中白细胞的数量。引入新课内容——白细胞的形态（核心：形态学鉴别） 2min 在显微镜下浏览视野，了解背景细胞，观察到有核细胞和无核细胞两大类，在教师指导下，认识了红细胞和血小板，看到了形态各异的白细胞。结合前述白细胞的种类，思考如何辨认出不同种类的细胞。指导学生浏览视野，利用十人共览显微镜，对照屏幕，对背景细胞进行讲解，引出白细胞。按照白细胞胞质有无特异性颗粒，将其分为有粒白细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞）和无粒白细胞（淋巴细胞、单核细胞）两大类。 5min 回顾细胞的基本结构：细胞膜、细胞质、细胞核思考：如何鉴别五种白细胞的形态？细胞形态的鉴别要点： 1、细胞外观：（1）形状（2）大小 2、细胞质：（1）量；（2）颜色； 4min

白细胞分类

白细胞分类是在进行血液显微镜检察时，将白细胞分类计数的一种医学检测法。血液中的白细胞共有五种，即中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。它们各有其生理功能。长期接触铅、汞、苯、放射线等可引起白细胞总数及白细胞分类的改变. 血液中的白细胞有五种，按照体积从小到大是：淋巴细胞，嗜碱性粒细胞，嗜中性粒细胞，嗜酸性粒细胞和单核细胞。白细胞是无色有核的血细胞，在血液中一般呈球形，根据形态差异可分为颗粒和无颗粒两大类。颗粒白细胞颗粒白细胞（粒细胞）中含有特殊染色颗粒，用瑞氏染料染色可分辨出三种颗粒白细胞即中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。中性粒细胞具有变形运动和吞噬活动的能力，是机体对抗入侵病菌，特别是急性化脓性细菌的最重要的防卫系统。当中性粒细胞数显著减少时，机体发生感染的机会明显增高。嗜酸性粒细胞具有粗大的嗜酸性颗粒，颗粒内含有过氧化物酶和酸性磷酸酶。嗜酸性粒细胞具有趋化性，能吞噬抗原抗体复合物，减轻其对机体的损害，并能对抗组织胺等致炎因子的作用。嗜碱性粒细胞中有嗜碱性颗粒，内含组织胺、肝素与5-羟色胺等生物活性物质，在抗原－抗体反应时释放出来。在人体的正常粪便中偶尔能见到少许白细胞，所以粪便检查中白细胞的多少可以作为肠道是否有炎症的一种依据，无颗粒白细胞无颗粒白细胞无细胞质颗粒，但有圆形细胞核，包括单核细胞和淋巴细胞。单核细胞是血液中最大的血细胞。目前认为它是巨噬细胞的前身，具有明显的变形运动，能吞噬、清除受伤、衰老的细胞及其碎片。单核细胞还参与免疫反应，在吞噬抗原后将所携带的抗原决定簇转交给淋巴细胞，诱导淋巴细胞的特异性免疫反应。单核细胞也是对付细胞内致病细菌和寄生虫的主要细胞防卫系统，还具有识别和杀伤肿瘤细胞的能力。淋巴细胞则为具有特异性免疫功能的细胞。T淋巴细胞主要参与细胞免疫反应而B淋巴细胞参与体液免疫反应。成年人白细胞数为每立方毫米5000～9000单位，其中中性粒细胞占0.50～0.70，嗜酸性粒细胞占0.005～0.05，嗜碱性粒细胞占0.005～0.01，单核细胞占0.03～0.08，淋巴细胞占0.20～0.40。幼儿血液中白细胞数高于成年人。不同生理状态（如妊娠期）会引起白细胞数量的变化。有炎症时，血中的白细胞数明显增加。各类白细胞的防御保护作用各不相同。正常值：（1）嗜中性粒细胞（N）：成人：0.40到0.75

外周血中中性粒细胞变化的临床意义

1、外周血中中性粒细胞变化的临床意义（二）中性粒细胞减少白细胞总数低于4×109／L称为白细胞减少（leukopenia），其中主要是中性粒细胞减少。当中性粒细胞绝对值低于1.5×109／L，称为粒细胞减少症（granulocytopenia）；低于0.5×109／L时称为粒细胞缺乏症（agranulocytosis；granulocytopenia），其白细胞计数大多低于1×109／L 引起中性粒细胞减少的病因可归纳为以下几个方面。（1）感染性疾病：病毒感染是感染引起粒细胞减少的常见原因，如流感、麻疹、病毒性肝炎、水痘、风疹、巨细胞病毒等。细菌性感染如伤寒杆菌感染也是引起粒细胞减少的常见原因，少数甚至可以发生粒细胞缺乏症。在某些严重细菌性感染如粟粒性结核、脓毒血症等，以及年老体弱、慢性消耗性疾病或晚期恶性肿瘤患者严重感染时，白细胞非但不增高，反而呈减少，但中性粒细胞百分数增高，核左移明显，并有明显的中毒性改变，常提示预后较差。（2）血液系统疾病：有粒细胞减少者常见于再生障碍性贫血、粒细胞减少症、粒细胞缺乏症、部分急性白血病（非白血性白血病aleukemic leukemia）、恶性组织细胞病等疾病。有时也可见于部分恶性贫血、严重缺铁性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿、骨髓转移癌等。（3）物理、化学因素：放射线、放射性核素、化学物品及化学药物均可引起粒细胞减少。化学药物如退热镇痛药、抗生素（如氯霉素）、磺胺类药、抗肿瘤药、抗甲状腺药、抗糖尿病药以及免疫抑制剂等均可引起中性粒细胞减少，必须慎用。（4）单核-吞噬细胞系统功能亢进：如脾功能亢进、某些恶性肿瘤、类脂质沉积病如Gaucher 病、Niemann-Pick病等。（5）其他：系统性红斑狼疮、某些自身免疫性疾病、过敏性休克等也可有粒细胞减少。2、血液分析仪参数及临床意义 (1) MCV,NCH,MCHC检测临床价值此三项指标是仪器经过Hb,RBC,Hct三项检测后,经计算机计算后所得的指标,气主要临床意义是根据三项结果,可能有下表四个组合,每一组合可能是由于不同病因引起病人红细胞相应的形态变化,借此,可辅助临床医生对贫血作出鉴别诊断. 2 由于上述指标是平均指标(mean),只反应;平均大小,并不能反应个体形态本质变化,比如,MCV是90fl,可能有两种情况,一种为89fl+91fl/2= 90fl, 另一种可为害0fl+110fl/2=90fl,MCV同为90fl,显示头者为生理性大小不等,而后者明显为病理性.因此,在八十年代就设计了一项反应红细胞大小不等的客观指标.即: RDW. RDW 是Red Blood Cell Volume Distribution width的缩写,释为红细胞体积分布宽度,是通过自动血液分析仪测量获得的,用所测红细胞体积大小的变异系数表示(也有的仪器用SD表示),其主要临床意义为血小板计数及MPV检查 MPV(mean platelet volume)表示血小板平均体积,其对止血及血栓性疾病的诊断及治疗有一定临床意义.但MPV与血小板数(PLT)关系非常密切,无论是正常参考值还是病理标本,MPV应结合PLT变化综合分析. 1 MPV正常参考范围:Bassman测量68例正常人PLT和MPV,发现正常群体中,MPV是随血小板数不同,MPV而不同,两者呈负相关关系(见图1)

白细胞

白细胞（英文名：leukocyte，white blood cell，简称：WBC），旧称白血球。血液中的一类细胞。根据白细胞的细胞质内有无特殊颗粒，可将其分为有粒白细胞和无粒白细胞。前者常简称为粒细胞，根据其特殊颗粒的染色特性，又分为中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞。白细胞也通常被称为免疫细胞。在显微镜下可以看到，血细胞中体积比较大、数量比较少。具有细胞核。其主要作用是吞噬细菌、防御疾病。白细胞是人体与疾病斗争的“卫士”。当病菌侵入人体体内时，白细胞能通过变形而穿过毛细血管壁，集中到病菌入侵部位，将病菌包围﹑吞噬。如果体内的白细胞的数量高于正常值，很可能是身体有了炎症。正常成人血液中的白细胞数目为4.0×10的九次方到10×10的九次方每升。婴幼儿稍高于成人。医学术语编辑【白细胞】血常规(2张)

补充介绍：（本资料为非专业资料，适合非专业人员阅读）临床意义： ⑴增多：常见于急性细菌性感染、严重组织损伤、大出血、中毒和白血病等。 ⑵减少：镇痛药、磺胺类药的服用；病毒感染；免疫系统衰弱；放化疗的影响。 2详细介绍编辑白细胞是一个很大众化的话题，因为到医院看病经常会做化验检查，而最常做的是血常规检查，血常规检查中最多用途的就是白细胞计数和分类。因此公众有必要对其进行初步的了解，储备相关的基础知识。白细胞俗称白血球，是人体血液中非常重要的一类血细胞。白细胞在人体中担负许多重任，它具有吞噬异物并产生抗体的作用，机体伤病的损伤治愈能力，抗御病原体入侵的能力，对疾病的免疫抵抗力等。人身体有不适时，经常会通过白细胞数量的显著变化而表现出来。因此到医院看病很多情况下需要化验血常规，现在医院血常规化验多采用仪器，常有20多项指标，在很多时候医师往往首先关注的是白细胞（WBC）是否改变。白细胞是一种非常特殊且重要的细胞，因此了解其相关的知识非常重要。说到白细胞的变化首先是数量的变化。正常人白细胞总数在（4.0~10.0）×10^9/L。其实在这个数值上下0.5×10^9/L，也可考虑大致正常，因为这和人们的个体差异有一定关系。成年男女一般都在这个范围内，且性别之间没有太大不同，但是儿童和婴幼儿则完全不同。新生儿出生时白细胞数量可达到（15~20）×10^9/L，在随后的一周中可降至15×10^9/L

白细胞计数实验报告

白细胞计数和分类目的：掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、原理：各种白细胞必须经过染色，才易于区分其类别。常用者为瑞氏（Wright’s）染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。测定外周血液中各种白细胞的相对比值，以观察其数量、形态和质量变化，通过显微镜观察染色血涂片，计算血液中各类白细胞的百分率，称为白细胞分类计数。利用白细胞总数和各类白细胞的百分率，即可计算每mm3血液中各类白细胞的绝对值。实验器材：香柏油、盖玻片、推片、采血针或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞氏染液、pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液、蒸馏水、计数板及专用盖片、针1ml 刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。20ul刻度移液管、推片实验步骤白细胞分类 1．血片制作：取一滴血，滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片，右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方，然后向后拉，当与血滴接触后，血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端。推时角度要一致，用力应均匀，即推出均匀的血膜（血膜不可过厚、过薄）。将制好的血涂片晾干，不可加热。注：（1）良好涂片标准：１) 呈头、体、尾舌形２) 血膜厚薄适宜３) 两边留有空隙（2）涂片好坏与下列因素有关：1）血滴大小 2）推片与玻片之间角度 3）推片速度 2、血涂片的染色步骤：（1）用蜡笔在血膜两端各划一道线，以免染料外溢，置涂片于染色架上。（2）滴加瑞氏染液，共计七八滴数，以盖满血膜为度，静置1分钟。（3）再滴加等量的磷酸缓冲盐溶液，轻轻摇动，并轻吹液体使染色液与缓冲液混合均匀，静置15分钟。（4）用清水冲洗。切勿先倾去染液再冲洗，否则沉淀物附于血膜上不宜出去。冲洗后斜置血涂片于空气中干燥。或先用滤纸吸取水分迅速干燥，即可镜检。 3、白细胞分类计数：先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。然后加一滴香柏油于血膜厚薄均匀处（一般在体尾交界处），在油镜下由此处开始按其形态特征进行分类计数，计数移动时避免重复。根据所见到的100个白细胞，记录各种白细胞所占的百分数。

白细胞分类计数方法

实验五白细胞分类计数（DC）教学目的：掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、白细胞分类技术教学重点：血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点教学内容【原理】将血液制成血涂片，用瑞氏染液染色，根据各种白细胞形态特征分类计数100个白细胞，即可求出各种白细胞的相对比值（百分率）。【器材】 1．显微镜 2．采血用具 3．载玻片、推片、蜡笔 4．分类计数器【试剂】 1．瑞氏染液或瑞氏-姬姆萨染液 2．PH6.4 - 6.8磷酸盐缓冲液【操作】 1．血片制作：（示教）（1）良好涂片标准：１) 呈头、体、尾舌形２) 血膜厚薄适宜３) 两边留有空隙（2）涂片好坏与下列因素有关： 1）血滴大小 2）推片与玻片之间角度 3）推片速度 2．染色（1）染色方法：用蜡笔在血膜两头划线，将血片平放在染色架，上瑞氏染液3～5滴染１分钟，加等量缓冲液混匀染５～１０分钟，流水冲去染液，干燥后油镜检查。（2）染色结果判断： 1）正常：外观呈粉红色；镜下红细胞染粉红色，可见有碟状感白细胞浆中的颗粒能显示各种细胞的特有色彩；核染紫红色，染色质清楚，粗细松紧可辨。 2）偏酸：红细胞和嗜酸性颗粒偏红，白细胞核呈浅兰色或不着色。太酸则只见一片红染，白细胞除嗜酸性颗粒外，均不着色。 3）偏碱：细胞呈灰兰色，白细胞颗粒深暗，嗜酸性颗粒变成暗褐色，甚至黑色。中性颗粒也偏粗偏碱（紫黑色），血片过厚的地方呈绿色。

3．分类方法：（1）低倍镜观察：选择细胞分布均匀、染色好的部位转油镜下计数100～200个白细胞,求出各种白细胞所占百分比。（2）细胞分布: 头体部以淋巴细胞较多尾部和两侧以中性粒、单核细胞较多,片尾部,异常、大的细胞较多. 一般选择片头至片尾的2/3区域计数较好,即体尾交界处,按一定方式,有规律的移动视野。 4．外周血正常白细胞形态：（图略）【注意事项】：（1）未干透血膜，染色时易脱落，故血膜应干透再染色。（2）冲洗前，先在低倍镜下观察有核细胞是否着色，否则适当延长染色时间。（3）染液不能过少，以防蒸发，染料沉着在血膜上不易冲掉，影响观察。（4）以流水冲去染液，防染料沉着。（5）染色应注意保存血片尾部，不能用蜡笔划去，因体积大的细胞常在此出现。（6）有时病人白细胞极少（一张片<100个WBC），可数50个细胞，再算出百分数，同时应注明，或数2张片子，并注明。（7）发现幼稚或异常白细胞，应分类报告，包括在分类百分率中。（8）如遇到不能确认的细胞，应另列入分类不明一项，如实报告，并保留血片。（9）发现有核红细胞，应报告分类100个白细胞所见有核红细胞数。（10）按一定顺序移动视野。（11）白细胞总数×各种白细胞的百分率，即得各种白细胞的绝对值。【方法学评价】显微镜法白细胞分类是经典、传统的血细胞分类方法目前还无任何仪器可以取代。【参考值】 DC： Nst 1％～5％ Nsg 50％～70％ E 0.5％～5％ B 0％～1％ L 20％～40％ M 3％～8％【思考题】 1．嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞形态区别是什么？ 2．白细胞核不着色可能是因为操作中那种误差引起的？