医学遗传学实验指导
医学遗传学
实验指导
内蒙古医学院遗传学教研室
目录
验一人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备实验二小鼠骨髓细胞染色体标本的制备
实验三人类染色体G显带技术
实验四人类染色体C显带技术
实验五核仁形成区银染技术
实验六人类染色体G显带核型分析
实验七X染色质标本的制备
实验八姐妹染色单体交换
实验九微核检测技术
实验十ABO血型的测定及其基因频率的计算
实验十一苯硫脲尝味试验及其基因频率的计算实验十二人类皮纹分析
实验十三遗传咨询
实验十四人类基因组DNA的提取
实验十五聚合酶链式反应（PCR）
实验十六DNA的琼脂糖凝胶电泳
实验十七PCR-RFLP技术
《医学遗传学》实验须知
一、医学遗传学实验目的和要求
医学遗传学实验课是医学遗传学课程的重要内容。实验课有助于加深和巩固基础理论知识，并进一步了解和掌握本学科的基本实验内容和操作技能。在培养学生分析问题、综合问题和解决问题能力方面具有重要作用。为此，要求学生做到以下几点：
1、实验课前做好预习，明确实验目的、实验原理。
2、复习有关理论内容。
3、熟悉实验的主要步骤。
4、初步估计和判定实验的可能结果。
二、实验操作过程中的注意事项
1、认真操作，仔细观察和综合分析实验所出现的现象与结果并及时记录。
2、如果实验结果与理论结果不一致，须及时进行科学分析，判断结果的可靠性，寻找出现误差的原因。
3、各种实验试剂用后放回原处，瓶盖封严，轻拿轻放。
4、使用微量加样器时，一定调整好取用量，按使用要求操作。
5、实验室应保持肃静，注意清洁卫生，实验中用过的废弃物品要及时清理，避免堵塞下水管道。
三、实验后的注意事项
1、实验后，整理清洁所用仪器、设备，注意放回原位，以备下次使用。
2、如有仪器损坏，要及时填写破损报告，并报告老师。
3、离开实验室前，检查并关闭门、窗、水、电。
四、实验室的意外处理
实验室如遇着火、烫伤等意外事件发生，必须镇静做紧急处理，并立即报告老师。
1、着火：如遇酒精灯推倒或其它原因着火，首先将一切易燃品移至远处，然后用水扑灭或者切断电源。
2、火伤：皮肤被火灼伤，用烫伤软膏涂抹，如伤势较重，立即送医院治疗。
3、如有毒药品泼溅到皮肤上，如EB，同位素等，应用大量清水进行清洗，必要时，去医院处理。
4、割伤出血：遇玻璃割伤出血，可用碘酒或红药水消毒后，用纱布包扎。如有玻璃留在伤口，处理前应先取出。
实验一人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备
【目的要求】
1、初步掌握人体外周血淋巴细胞短期培养的基本方法。
2、初步掌握人体外周血淋巴细胞染色体标本制备的技术方法
【实验原理】
人体外周血淋巴细胞培养(人体末梢血、微量全血短期培养)及其染色体标本制备是国内外研究显示染色体最常用和效果最好的方法。此方法取材方便，用血量少，操作简便，现已广泛应用于基础医学、临床医学的研究和染色体病的诊断等。
人体外周血中的小淋巴细胞，是已分化、处于G0期的细胞，几乎不具有分裂增殖能力。在离体血培养细胞中很难找到正在分裂的淋巴细胞，因此，需采用刺激细胞增殖的措施。人们发现从云豆(菜豆)中提取的植物血球凝集素(植物血凝素，PHA)可以刺激小淋巴细胞进行有丝分裂，即在PHA作用下，处在G0期的小淋巴细胞可转化为淋巴母细胞。淋巴母细胞具有分裂能力，重新进入增殖周期进行有丝分裂。在PHA作用下体外培养72小时左右，多数淋巴细胞已处于细胞周期的第二周期。此时，细胞分裂相较多，但都处于分裂的不同时期。一般来说，制作染色体标本主要是显示细胞分裂中期染色体，因中期染色体形态最为典型、最为清晰，最易辨认，是研究染色体的最好阶段。为了获得大量可供分析的中期染色体，需在终止细胞培养前数小时加入适当浓度的有丝分裂阻断剂——秋水仙素(或其衍生物秋水仙胺)。它可特异地抑制纺锤丝的形成、阻抑分裂中期活动而使细胞分裂停滞于中期。借此可获得大量中期分裂相细胞。
在进行染色体标本制备的过程中，首先要进行低渗处理，使细胞体积胀大、染色体松散开而便于观察分析。最常用的低渗液为0.075mol／L的KCl，也可用水或1％枸橼酸钠等。低渗后的细胞需用固定液固定。醋酸固定液具有膨胀、固定作用。它和醇类混合固定，有利于染色体松散，可获得分散好、易于分析的分裂中期染色体标本。现在常用的固定液为甲醇-冰醋酸(3:1)固定液。
【实验准备】
1、试剂
RPMI-1640营养液、小牛血清、0.25％胰蛋白酶、Hanks液、双抗(青霉素、链霉素)、2％碘酒、75％酒精、3.8％NaHC03、520U／mL肝素、40μg／mL秋水仙碱、PHA、0.075mol ／L KCl低渗液、甲醇、冰醋酸、Giemsa染液、二甲苯和香柏油等。
2、器材
超净工作台、光学显微镜(附照相设备)、隔水式恒温培养箱、离心机、冰箱、高压蒸汽消毒锅、鼓风干燥箱、无菌正压滤器、分析天平(感量1／10毫克)、架盘天平、链霉素培养瓶及瓶塞、肝素小瓶及瓶塞(取血用)、10mL吸管、直头小吸管、5mL刻度离心管、2mL或5mL 一次性注射器、量筒、烧杯、搪瓷盆、搪瓷盘、试管架、片盘、片盒、止血带、棉签、大吸球、小吸头、pH试纸、废液缸、解剖剪刀、镊子、记号笔、40C预冷的载玻片、酒精灯、火柴、染色缸或染色玻璃板和擦镜纸等。
【实验材料】
人静脉血
【实验内容、方法】
一、采血
在采血前，对各种用品进行清洗、无菌处理，配制、分装并冻存培养液(5mL／瓶)，用5mL注射器抽取肝素0.1mL，备用。
常规消毒肘部皮肤，用抽取肝素的注射器静脉采2mL，轻轻摇匀，待接种培养。
二、接种培养
将事先配制冻存的装有5mL培养液的链霉素培养瓶或其它培养瓶从冰箱中取出，置室温融化，每瓶滴入约0.3mL肝素抗凝血，轻轻摇匀，置370C培养箱培养72小时。
三、积累分裂中期细胞
在终止培养前2小时，于培养瓶内加入浓度为20μg／mL秋水仙素1滴，终浓度为
0.1-0.15μg/mL，摇匀，置370C温箱继续培养2小时后收集细胞、制片。
四、制片
1、收集细胞：从培养箱中取出培养瓶，用小吸管将培养物吹打均匀，移人5ml刻度离心管内，以2000r／min离心10分钟，吸去上清液，保留底物。
2、低渗：每管加入370C预温的0.075mol／LKCL溶液4ml，用吸管轻轻吹打均匀，置370C水浴锅中低渗30分钟，以达到红细胞破坏、淋巴细胞膨胀和染色体分散之目的。
3、预固定：低渗处理后，每管加入1 mL甲醇：冰醋酸(3:1)固定液，将细胞轻轻吹打均匀，置离心机2000r／min离心10分钟。
4、固定(一)：去上清液，加固定液5mL，吹打均匀，固定30min,2000r／min离心10分钟。
5、固定(二)：去上清液，再加入5mL固定液，吹打均匀，再次固定30min，2000r／min 离心10分钟。
6、滴片：去上清液，留底物，每管加入少许(约0.2mL)固定液，将底物吹打均匀，制成细胞悬液。然后用吸管吸取混匀的细胞悬液，约以20cm或更高的距离滴至预冷的载玻片上，每片约2～3滴，随即将玻片在酒精灯火焰上微烤(一过性微烤数次)，以助细胞、染色体分散，使之均匀平铺于玻片上。将制片放人片盘，空气干燥后，收集于片盒中。
7、染色和观察：待制片晾干后，放入约1:10 Giemsa染液的染色缸中染色15分钟左右，或架在染色用玻璃板上扣染15分钟左右(扣染是指染色时，将染色体制片的细胞面朝下，架在玻璃板上，将染液滴入玻璃板和细胞面之间)，自来水轻轻冲洗，晾干后光镜下观察。先用低倍镜观察后，选择分散好的染色体换为高倍及油镜观察，注意人类核型中近端、亚中和中着丝粒染色体的形态特点。
【注意事项】
1、有关淋巴细胞培养的注意事项同实验十二。
2、PHA的质量是人体外周血淋巴细胞培养成败的关键，不同来源或同一厂家的不同批号、不同的保存时间，PHA的效价可能会有较大的差异，直接影响培养细胞中分裂细胞的数量。故每批PHA正式使用前，须进行一次预实验，摸索PHA的质量和使用量。其使用量不宜过大，否则会导致红细胞凝集。一般，自己直接从菜豆中提取的PHA效果较好。
3、接种的血样标本愈新鲜愈好。肝素用以抗凝，用量不宜过多。
4、秋水仙素用量和作用时间要适当。该药有强烈的毒性作用，用量过大、作用时间过长，可使染色体缩短和发生异常分裂现象，甚至染色体破碎。
5、低渗是制片好坏的重要环节。低渗液用量的多少与作用时间的长短都会影响染色体的制片质量，如染色体分散不好、有胞浆背景，或细胞破损、染色体丢失等。要注意低渗液使用前需370C温箱预温。
6、低渗后的预固定也很重要，预固定时，固定液量不要多，加入固定液后要立即用吸管吹打均匀，用力不要过猛。另外两次固定时，固定液也不要过多，吹打时用力也不要过猛，以免细胞破碎，染色体丢失。固定液要在使用时配制。
7、最后的滴片也是染色体制片好坏的很关键的一步。载玻片上有油污或预冷不够，或滴片时所滴悬液重叠、操作不好，或底物悬液过浓等都直接影响细胞、染色体的分散。底物悬液过稀或酒精灯上烤片时间太长，都可能造成制片中可供分析用的染色体很少，甚至找不到染色体。
【实验报告】
1、血培养中PHA所起的作用是什么?秋水仙素的作用是什么?
2、简述血培养和外周血淋巴细胞染色体标本制备的过程。
实验二小鼠骨髓细胞染色体标本的制备
【目的要求】
1、初步掌握实验动物骨髓细胞染色体标本的一般制备方法(直接法)。
2、了解小白鼠染色体的形态特征及其数目。
【实验原理】
骨髓细胞具有旺盛的分裂增殖能力。在骨髓细胞中，有丝分裂细胞所占的比例比一般细胞大。为了积累更多的有丝分裂中期细胞，可在收集细胞前进行秋水仙素处理。
通过制备的骨髓染色体标本，可以观察毒性物质在体内对细胞染色体的影响。同时，在检测环境致突剂方面，也有其独特的优点。方法简捷、直接，易于掌握，一般实验室均可进行。因此，此法也是用动物实验检测有害物质对机体遗传物质损伤的实验方法之一。
【实验准备】
1、试剂
0.04％秋水仙素、0.075mol／L KCl、甲醇、冰醋酸、Giemsa染液、香柏油、二甲苯等。
2、器材
光学显微镜、恒温培养箱、离心机、架盘天平、酒精纱布及其它一般用品。
【实验材料】
健康小白鼠(体重约20克)
【实验内容、方法】
1、取材和低渗
取材前3～4小时，于小鼠腹腔内注入0.04％秋水仙素0.1mL／10g体重，以积累中期分裂相。断颈髓法处死小鼠，取其股骨，用酒精纱布清除其上粘附的肌肉及结缔组织，并用剪刀剪去股骨两端少许骨骺及骨皮质，暴露骨髓质，用注射器抽取0.075mol／L KCl 5mL 冲洗骨髓腔，将冲洗后的液体收集到5mL离心管中，反复冲洗两次以上，至骨髓腔变白为止，将冲洗液吹打均匀后置370C恒温箱低渗处理20分钟。
2、预固定
取出低渗后的离心管，加入2～3滴预固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)，立即吹打均匀，平衡后用离心机2500r／min离心5分钟，去上清液，留底物。
3、固定一
加固定液5mL于离心管中，吹打均匀，室温固定10分钟后，2500r／min离心5分钟。
去上清液，留底物。
4、固定二
再加固定液5mL于离心管中，吹打均匀，室温固定10分钟后，2500r／min离心5分钟。倾去上清液，加入少许(约0.5mL)固定液。
5、滴片
将沉淀物吹打均匀后，吸于滴管内，滴在预冷的载玻片上，每片2～3滴，酒精灯上烘烤一下，放在片盘上，晾干后装入片盒中。
6、染色和观察
1:10的Giemsa染液染色15分钟后，自来水冲洗。待制片干燥后置显微镜下观察。小鼠染色体形态数目与人类染色体不同，小鼠全部为端着丝粒染色体，2n=40。
【注意事项】
1、在用酒精纱布处理股骨上的软组织时，不要使组织块掉入离心管中。
2、可参照实验十四染色体标本制备过程中的注意事项。
【实验报告】
1、小白鼠腹腔内提前注射秋水仙素的意义是什么?
2、叙述小鼠骨髓细胞染色体标本的制备过程(直接法)。
实验三人类染色体G显带技术
【目的要求】
初步掌握染色体G显带制备的基本方法。
【实验原理】
自20世纪60年代末以来，染色体显带技术得到了很大的发展。人们用物理、化学的方法处理染色体标本，再用染料对染色体进行分化染色，使其呈现出明暗相间或深浅不同的带纹。这一技术的应用，可以准确识别23对不同类型的染色体，并能识别同一号染色体上的不同区带。从而提高了染色体核型分析的精确度，为临床上某些疾病的诊断提供了有效的手段。
关于G带的形成机理，迄今尚不十分清楚。有人认为，在胰酶的作用下，蛋白质不均匀丢失是G带产生的原因。在染色体上的蛋白质经处理而丢失后，这些区域呈现出浅染(浅带)。染色体上蛋白质和DNA结合牢固的区域，由于蛋白质丢失少而呈现深染(深带)。还有人认为，染色体经蛋白酶消化后，染色体的核蛋白破坏，这些区域裸露的DNA分子的磷酸基团能与吉姆萨染料中的天青和甲基蓝等噻嗪分子结合而使染色体着色。也有人认为，染色体上T—A 和C—G碱基的含量和分布不同，也与染色体上深浅带的形成有关。A—T碱基对较多的区域，易与吉姆萨染料结合而染成深色区带；而G—C碱基对较多的区域则相反，染成浅染区带。总之，目前说法较多，但主要概括了三种观点，即显带是由于:①DNA的作用；②蛋白质的作用；③DNA、染料和蛋白质三者之间相互作用的结果。这些都有待于进一步研究探讨。可以肯定，G显带具有很多优点，如制备方法简便易行，标本可长期保存，带纹清晰，成本低廉，制备周期短，普通光学显微镜即可观察。故已成为当今细胞遗传学与分子细胞遗传学领域中应用广泛的一种技术，并成为研究分析染色体的主要常规方法之一。
【实验准备】
1、试剂：0.85％生理盐水、0.025％胰蛋白酶溶液、吉姆萨染液、3.8％NaHC03、二甲苯、松柏油等。
2、器材：普通光学显微镜、370C水浴箱、普通冰箱、立式染缸、直头小吸管、橡皮吸头、pH试纸、吸水纸(滤纸)、扣染玻璃板、擦镜纸、镊子等。
人类中期染色体标本制备用试剂和器材同实验十四。
【实验材料】
常规方法制备的人类中期染色体标本制片(片龄3～5天最宜)。
【实验内容、方法】
1、首先将配制好的0.025％胰酶溶液装入立式染色缸中,调pH值至7.0～7.2,放人370C 恒温箱中预温。
2、取染色体制片一张置胰酶缸中处理15秒左右，迅速投入0.85％生理盐水缸中漂洗数秒(可准备两缸盐水，做两次漂洗)。
3、用自来水稀释的吉姆萨染液(自来水:吉姆萨原液=8:1)扣染20分钟。
4、将标本用流水冲洗、晾干，必要时封片、镜检。镜检时，先在低倍镜下选择分散好、长度适中的分裂相，然后转换油镜观察其显带情况，选择显带好的标本进行G显带核型分析。
【注意事项】
1、染色体制片胰酶处理前，需370C温箱烤片一天左右。如滴片后当天进行G显带，可在滴片后置800C烤箱烤片两小时。
2、胰酶预温时要注意预温温度，温度过高时胰酶变性失效。
3、胰酶溶液需在使用前配制。染色体在胰酶中的处理时间可因制片质量、片龄而不同。在不同个体的染色体制片中也可有差异。此外，不同厂家生产的胰酶或不同批号的胰酶，在处理时间上都可有差别，故每次进行染色体G显带时，最好先试做一张制片，分段并用不同时间处理，摸索胰酶处理时间，以保证获得最好的染色体G显带标本。
【实验报告】
1、G显带过程中应注意哪些问题?
2、简述染色体G显带标本制备的基本方法。
实验四人类染色体C显带技术
【目的要求】
1、初步掌握染色体C显带的制备方法。
2、熟悉1号、9号、16号和Y染色体C带的带型特征。
【实验原理】
C显带技术是一种染色体局部显带技术。染色体经碱、酸、盐处理后，再经Giemsa染色，呈现出特有的着丝粒、次缢痕区及Y染色体长臂远侧段等的结构异染色质区深染，称为C带。此区域的DNA多为高度重复序列，并仅与组蛋白紧密结合，因而保护了C带区的异染色质免受酸、碱、盐破坏，并易被Giemsa深染。如该区域的DNA一旦发生变性，在改变变
性条件后，即可快速复性，这是高度重复序列DNA所具有的特性。其它部位的DNA一旦被碱破坏变性后，不易发生复性，或复性较慢，因此，不易被Giemsa着色。所以，染色体两臂的常染色质部分仅显示出浅淡的染色体轮廓。优良的C带标本，可使结构异染色质区着色很深。在人类染色体中，染色体的着丝粒区、第1、9、16号染色体的次缢痕区和Y染色体长臂的远侧段明显深染。因此，利用C带，可以准确地识别这些染色体，并可确定着丝粒的位置和数目，还可配合其它显带技术对染色体某些结构异常、Y染色体异常及性别，做出准确的诊断。不同个体、种族，C带的大小和染色的强度不同，呈现出多态性，故C显带技术在多态性研究和鉴别染色体来源等方面具有一定的意义。
【实验准备】
1、试剂：5％～10％饱和Ba(OH)
2、0.1mol／L HCl、蒸馏水、70％、80％、95％酒精和纯酒精、2×SSC溶液、Giemsa染液、香柏油或石蜡油、二甲苯等。
2、器材：光学显微镜、恒温水浴箱、温度计、立式染缸、镊子、扣染用玻璃板、小吸管、50mL量筒、擦镜纸等。
【实验材料】
常规方法制备的人类中期染色体标本制片。
【实验内容、方法】
1、将染色体制片投入580C饱和Ba(OH)2中5分钟。
2、取出标本置0.1mol／L HCl中漂洗。
3、蒸馏水漂洗数次。
4、酒精脱水：70％酒精→80％酒精→95％酒精→纯酒精(每个浓度5分钟)，空气干燥。
5、置650C2×SSC溶液中温育1.5～2小时。
6、Giemsa染色20分钟，自来水冲洗，空气干燥，显微镜下观察。
将干燥后的标本置显微镜低倍镜下观察，找到分散好的、染色体长度适宜的分裂相，换油镜观察。注意观察各染色体的着丝粒区深染，尤其是第1号、9号、16号染色体着丝粒区及次缢痕区深染，两者合在一起形成明显大的C带，Y染色体长臂远侧段约1/2～2/3区段深染，C带明显。第1、9、16号染色体和Y染色体长臂的C带具有多态性。
【注意事项】
1、片龄不宜过长，否则影响C带质量。
2、制片从饱和Ba(OH)2中取出时要迅速投入0.1mol／L HCl中，以免Ba(OH)2的沉淀物粘贴在玻片上影响C带的观察。
3、染色浓度及时间不宜过高过长，以免影响C带的质量。
【实验报告】
1、简述染色体C显带标本制备的基本方法。
2、在C显带标本中，你能辨认第1、9、16号及Y染色体吗?它们的C带特点与其它各号染色体有什么不同?
实验五核仁形成区银染技术
【目的要求】
1、初步掌握人类染色体核仁形成区银染标本的制备方法。
2、熟悉核仁形成区的所在部位。
【实验原理】
人类D组和G组染色体的随机柄部次缢痕区，称为核仁形成区(NOR)，与核仁形成有关。硝酸银染色技术，使具有活性的核仁形成区特异地染成黑色。这种银染色阳性的NOR称为Ag—NOR，是具有转录活性的rDNA部位。现已证明，这里是具有转录活性的18SrRNA和28SrRNA基因的所在部位。此处常伴有丰富的酸性蛋白质，而这种蛋白含有较多的—SH基团和二硫键，易使硝酸银中Ag+还原为Ag颗粒，从而使有转录活性的核仁形成区镀上银颗粒而呈现出黑色区域，故被银染的不是rDNA本身而是酸性蛋白质。没有转录活性的NOR则不着色。对Ag—NOR出现频率进行计数，可以了解有活性的rRNA基因(rDNA)的动态变化，估计rDNA的转录活性。人类细胞中的Ag—NOR数目及其在染色体上的位置都是比较稳定的，如发生改变，说明细胞内rRNA基因活性发生变化。现认为，该技术是研究18SrRNA和28SrRNA 基因分布和转录活性的一种简易有效的方法，并已广泛地用于肿瘤细胞遗传学、体细胞遗传学、进化遗传学和临床细胞遗传学等领域。
【实验准备】
1、试剂：50％硝酸银、明胶—甲酸液、Giemsa染液、蒸馏水。
2、器材：光学显微镜、恒温水浴箱、小吸管、小吸头、盖玻片、擦镜纸。
【实验材料】
人外周血淋巴细胞染色体标本制片(片龄在一周以内)。
【实验内容、方法】
1、先吸取50％AgN03两滴滴在染色体标本制片上，然后加入明胶—甲酸液3滴，轻轻来回摇晃混匀，盖上盖玻片。
2、将玻片平置于沸水水浴箱的铁板上1～2分钟，待玻片变金黄色，立即用自来水冲洗，以冲掉盖玻片。
3、以5％Giemsa染液复染10分钟，自来水冲洗，空气干燥，显微镜下观察。
Ag—NOR计数：选择分散好、数目全的中期分裂相染色体，计数D组6个和G组4个近端着丝粒染色体Ag-NOR的数目。凡有银染点的近端着丝粒染色体，不论单侧或双侧的，都计数为一个银染的染色体。
【注意事项】
1、硝酸银溶液应在临用前配制。配制及使用时，注意不要溅到四周，以免形成很难除掉的黑色污点。
2、掌握好银染温度，温度越高，反应速度越快。
【实验报告】
1、仔细观察Ag—NOR形态、数目及其在染色体上的位置。
2、了解NOR银染的原理。
实验六人类染色体G显带核型分析
【目的要求】
1、通过G显带核型分析，掌握G显带核型分析方法并初步掌握各号染色体的带型特征。
2、与非显带核型分析进行比较，认识G显带核型分析，能准确的识别每一条染色体。
【实验原理】
染色体标本用适当浓度的胰蛋白酶溶液处理，再用Giemsa染液染色，在染色体上显出深浅交替的横纹，为G带。通过显示G带，不仅可以准确区分每一条染色体，还可检测出染色体的微小结构异常。人类G显带染色体核型分析是染色体研究中最重要和最常用的方法。它可根据染色体的数目、结构进行核型分析，而对染色体病患者做出准确的诊断。可在显微镜下直接进行分析，也可进行显微照相，经冲洗、放大后，根据照片进行分析。根据丹佛(Denver)及伦敦(London)会议提出的标准，按照每条染色体的特异带型，将照片上的染色体按其轮廓剪下，进行配对、分组、排列，并贴在报告纸上。人体细胞含有46条染色体，即23对，其中22对为常染色体，男、女相同，编为1～22号。另一对为性染色体，男、女有别，男性为XY，女性为XX。X染色体编入C组，Y染色体编入G组。在剪接粘贴时，性染色体可单独排列。核型分析后，将其分析结果按国际标准进行描述。
【实验准备】
剪刀、镊子、核型分析纸、直尺、胶水、铅笔和橡皮。
【实验材料】
正常人外周血淋巴细胞G显带中期分裂相照片。
【实验内容、方法】
一、正常人类染色体G带带型识别的主要特征
A组染色体
包括第1～3号染色体，其长度最长。1号和3号染色体的着丝粒均在1／2处，2号染色体的着丝粒约在3/8处。
1号染色体
短臂：在分裂中期显示的320条带左右的分裂相上，近侧段有二条深带，第2条深带稍宽，在处理较好的标本上，远侧段可显示3～4条淡染的深带。此臂分为三个区，近侧的第1条深带为2区1带，第2条深带为3区1带。
长臂：副缢痕紧贴着丝粒，着色深度大小不一，其远侧为一宽的浅带。近中段与远侧段各有两条深带，中段两条深带稍靠近，其中第2条深带染色较浓。此臂分为4个区，副缢痕远侧的浅带为2区1带，中段第2条深带为3区1带，远侧段第1深带为4区1带。
2号染色体
短臂：可见4条深带，中段的两条深带稍靠近。此臂分为2个区，中段两条带之间的浅带为2区1带。
长臂：有4～7条深带，第3和第4深带有时融合。此臂分为3个区；第2和第3深带之间的浅带为2区1带，第4和第5深带之间的浅带为3区1带。
3号染色体
着丝粒染色较浓。在长臂和短臂的近中段各具有一条明显而宽的深带。
短臂：一般在近侧段可见一条较宽的深带，远侧段可见两条深带，其中一条较窄，且着色淡，这是区别3号染色体短臂的显著特征。在处理较好的标本上，近侧段的深带可分为两条深带。此臂分为2个区，中段浅带为2区1带。
长臂：一般在近侧和远侧各有一条较宽的深带，在显带较好的标本上，近侧段的深带可分为两条深带，远侧段的深带可分为三条深带。此臂分为2个区，中段浅带为2区1带。
B组染色体
包括第4、5号染色体，长度次于A组，着丝粒均在1/4处。
4号染色体
短臂：可见两条深带，近侧深带染色较浅，短臂只有一个区。
长臂：可见四条均匀分布的深带，在显带较好的标本上，远侧段的二条深带可各自分为二条较宽的深带。此臂分为3个区，近侧段的第1和第2深带之间的浅带为2区1带，远侧段二深带之间的浅带为3区1带。
5号染色体
短臂：可见两条深带，其远侧的深带宽而浓染，此臂只有一个区。
长臂：近侧段有二条深带，染色较淡，有时不明显；中段可见三条深带，染色较浓，有时融合成一条宽阔的深带。远侧段可见二条深带，近末端的一条着色较浓。此臂分为3个区，中段第2深带为2区1带，中段深带与远侧段之间的宽阔的浅带为3区1带。
C组染色体
包括第6～12号和X染色体，中等长度。11号和X染色体的着丝粒在3/8处，其它各号染色体的着丝粒约在1/4处。
6号染色体
短臂：中段有一条明显而宽阔的浅带，近侧段和远侧段各有一条深带。近侧深带紧贴着丝粒。在显带较好的标本上，远侧段的深带可分为二条深带。此臂分为2个区，中段的明显而宽阔的浅带为2区1带。
长臂：可见五条深带，近侧的一条紧贴着丝粒。远侧段的末端一条深带着色较浅。此臂分为2个区，第2和第3深带之间的浅带为2区1带。
7号染色体
着丝粒着色浓。
短臂：有三条深带，中段深带着色较淡，有时不明显。远侧深带着色浓，状如“瓶盖”。此臂分为2个区，远侧段的浅带为2区1带。
长臂：有三条明显的深带，远侧近末端一条着色较淡，第2和第3深带稍靠近。此臂分为3个区，近侧第1条深带为2区1带，中段的第2深带为3区1带。
8号染色体
短臂：有两条深带，中段有一较明显的浅带，这是与10号染色体鉴别的主要特征。此臂分为2个区，中段的浅带为2区1带。
长臂：可见三条分界极不明显的深带，有时不明显，远侧的深带着色较浓。此臂分为2个区，中段的深带为2区1带。
9号染色体
着丝粒着色浓。
短臂：近侧段和中段各有一条深带。在显带较好的标本上，中段可见二条窄的深带。此臂分为2个区，中段深带为2区1带。
长臂：可见明显的二条深带，副缢痕一般不着色，在有些标本上呈现出特有的狭长颈部区。此臂分为3个区，近侧的一条深带为2区1带，远侧的一条深带为3区1带。
10号染色体
着丝粒着色浓。
短臂：近侧段和中段各有一条深带，在有些标本上，近中段可见二条深带，但与8号染色体短臂比较，其深带的分界欠清晰。此臂只有1个区。
长臂：可见明显的三条深带，远侧段的二条深带稍靠近。近侧的一条深带着色最深，这是与8号染色体相鉴别的主要特征。此臂分为2个区，近侧段的一条深带为2区1带。
11号染色体
短臂：近中段可见一条深带，在显带较好的标本上，这条深带可分为二条较窄的深带。此臂只有一个区。
长臂：近侧有一条深带，紧贴着丝粒。远侧段可见一条明显的较宽的深带，这条深带与近侧的深带之间是一条宽阔的浅带，这是与12号染色体相鉴别的一个明显特征。在显带较好的标本上，远侧段的这条较宽的深带，可分成两条较窄的深带，两深带之间有一条很窄的浅带，一般较难辨认，但它是分区的一个界标。在有些标本上，近末端处可见一条窄的浅色深带。此臂分为两个区，上述两条深带之间很窄的浅带为2区1带。
12号染色体
短臂：中段可见一条深带，此臂只有一个区。
长臂：近侧有一条深带，紧贴着丝粒。中段有一条宽的深带，这条深带与近侧深带之间有一条明显的浅带，但与11号染色体相比，这条浅带较窄，这是鉴别11号与12号染色体的主要特征。在显带较好的标本上，中段这条较宽的深带可分为三条深带，其正中的一条着色较浓，在有些标本上，远侧段的近端还可见1～2条染色较深的深带。此臂分为2个区，中段正中的深带为2区1带。
X染色体
其长度介于7号和8号染色体之间。
短臂：中段有一明显的深带，如竹节状。在有些标本上，远侧段还可见到一条窄的、着色淡的深带。此臂分为二个区，中段的深带为2区1带。
长臂：可见4～5条深带，近中段的一条最明显。此臂分为2个区，近侧端的深带为2区1带。
D组染色体
包括13—15号染色体，具有近端着丝粒和随体。
13号染色体
着丝粒区深染。
长臂：可见4条深带，第1和第4深带较窄，染色较淡；第2和第3深带较宽，染色较浓。此臂分为3个区，第2深带为2区1带，第3深带为3区1带。
14号染色体
着丝粒区深染。
长臂：近侧和远侧各有一条较明显的深带。在处理较好的标本上，中段尚可见一条着色较浅的深带。此臂分为3个区，近侧深带为2区1带，远侧深带为3区1带。
15号染色体
着丝粒区深染。
长臂：中段有一条明显的深带，染色较浓，有的标本上，近侧段可见有1～2条染色浅的深带。此臂分为2个区，中段深带为2区1带。
E组染色体
包括第16～18号染色体。16号染色体为中央着丝粒染色体，17和18号染色体为亚中央着丝粒染色体，着丝粒约在1/4处。
16号染色体
短臂：中段有一条深带，显带较好的标本上可见二条深带。此臂只有一个区。
长臂：中段和远侧各有一条深带，有时远侧的一条不明显，副缢痕着色浓。此臂分为两个区，中段深带为2区1带。
17号染色体
短臂：有一条深带，紧贴着丝粒，此臂只有一个区。
长臂：远侧段可见一条深带，这条带与着丝粒之间为一明显而宽的浅带。此臂分为2个区，这条明显而宽的浅带为2区1带。
18号染色体
短臂：有一条窄的深带，此臂只有一个区。
长臂：近侧和远侧各有一条明显的深带。此臂分为2个区，两深带之间的浅带为2区1带。
F组染色体
包括19、20号染色体，均为中央着丝粒染色体。
19号染色体
着丝粒及其周围为深带，其余均为浅带。短臂与长臂均只有1个区。
20号染色体
着丝粒区深染。
短臂：有一条明显的深带。此臂只有一个区。
长臂：在中段和远侧段可见1—2条染色较淡的深带，有时全为浅带。此臂只有一个区。
G组染色体
包括第21、22染色体和Y染色体。是染色体中最小的、具近端着丝粒的染色体。21、22号染色体可具有随体。
21号染色体
着丝粒区着色淡。
与22号染色体比较，其长度比22号短，其长臂近侧有一明显而宽的深带。此臂分为2个区，其深带为2区1带。
22号染色体
着丝粒区着色浓。
与21号染色体相比，其长度比21号长。在长臂上可见二条深带。近侧的一条着色较浓，而且紧贴着丝粒。近中段一条着色淡，在有的标本上不显现。此臂只有一个区。
Y染色体
长度变化较大，有时整个长臂被染成深带。在显带较好的标本上可见二条深带。此臂只有一个区。
二、正常人G显带核型分析
1、每位同学发两张正常人外周血淋巴细胞G显带中期分裂相照片。其中一张将染色体按其轮廓逐个剪下，根据其大小、带型特点和着丝粒位置，依次分组、配对，排放在核型分析纸上。摆放时短臂向上，长臂向下，着丝粒位于铅笔画的横线上，多次调整检查无误后，方可进行粘贴。
2、将另一张照片适当剪小，粘贴在核型分析纸上方正中间。
3、写出分析结果。
【注意事项】
1、实验操作时，不宜面对剪下的染色体大声说话、咳嗽和打喷嚏，以免染色体吹跑遗失。
2、剪贴时应注意一对染色体要排列紧密，不要有间隔，而每对之间要有间隔。着丝粒都要排列在横线上。上下线染色体要求对齐排列。
3.、X染色体排列在C组旁，Y染色体排列在G组旁。
4、按染色体轮廓剪成长方形，以便排列、配对和粘贴。
【实验报告】
1、每人剪贴分析一张正常人体细胞G显带中期分裂相染色体照片。
2、简单说出G显带各号染色体带型的特点。
3、进行性别诊断并写出核型。
实验七X染色质标本的制备
【目的要求】
1、初步掌握X染色质标本的制备方法。
2、观察熟悉人类间期细胞X染色质的形态特征、数目及所在部位。
3、了解性染色质检查的临床意义。
【实验原理】
X染色质检查的重要临床意义在于性别的鉴定。在正常女性间期细胞核膜边缘常常可以观察到一个被碱性染料浓染的、直径1微米左右的小体。这一小体，是由女性一条“失活”的X染色体形成的，是不具有转录活性并呈异固缩状态的X染色质，也称X小体或巴氏小体。女性另一条X染色体与其它染色体一样呈解螺旋状态，并具有转录活性。X小体的数目在女性中是性染色体数目减1。正常女性细胞中有两条X染色体，所以仅有一个X小体，而具有三条X染色体的不正常女性，则有两个X小体。男性个体因只有一条X染色体，而不发生异固缩，因而没有X小体。但先天性睾丸发育不全症患者(核型：47，XXY)，在细胞核中也可见到X染色质。因此，可以通过X染色质数目的检查，鉴定胎儿的性别和性别畸形。
X染色质大多位于核膜内侧缘，1微米左右，深染。形状不一，有球状、扁凸状、三角形和半圆形等。正常女性间期细胞中，X染色质阳性检出率为20％～70％，大多为30％～50％，高时可达70％以上，男性细胞中则平均低于1％。可采用口腔粘膜细胞、绒毛细胞、羊水细胞等进行检查。
【实验准备】
1、试剂：0.85％生理盐水、甲醇、冰醋酸、95％乙醇、硫堇染液、香柏油、二甲苯、加拿大树胶。
2、器材：光学显微镜、离心机、小吸管、载玻片、烧杯(50mL)、量筒(50mL)、小吸头、牙签、片盘、镊子、擦镜纸。
【实验材料】
人口腔粘膜细胞
【实验内容、方法】
1、取5mL离心管，加入5mL0.85％生理盐水。
2、受试者嗽口后，用牙签刮取口腔颊部粘膜，置离心管中生理盐水中涮洗，弃掉牙签。
用吸管轻轻吹打涮洗下来的细胞，以1500r／min离心10分钟。
3、弃上清液，加入新鲜配制的固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)5mL，轻轻吹打均匀，室温固定10分钟。
4、1500r／min离心10分钟，弃上清液，留底物，加固定液0.3～0.5mL(加入量视底物量而定)，轻轻吹匀后，将细胞悬液滴在清洁的载玻片上，每片约2滴，空气干燥。
5、硫堇染色法：
(1)将空气干燥后的制片放入蒸馏水中漂洗数分钟。
(2)用5mol／L HCl水解10分钟。
(3)蒸馏水中漂洗数分钟(中间可更换一次蒸馏水)，充分洗掉HCl。
(4)将制片置人硫堇染液中浸染30分钟。
(5)蒸馏水漂洗，晾干。
(6)加50％酒精漂洗一次。
(7)70％酒精分色半分钟。
(8)95％、100％酒精脱水各1-2分钟。
(9)二甲苯透明两次(1～2分钟)，加拿大树胶封片。
6、镜检100个细胞，统计含有X染色质细胞所占的百分率。正常值：男性为10％以下或没有，女性为40％以上。
【注意事项】
1、口腔颊部刮片时，用力要适当、均匀，以求刮下的细胞可以观察到X染色质。
2、掌握好盐酸水解的时间和温度。
【实验报告】
1、绘出一个所观察的含有X染色质的口腔粘膜上皮细胞。
2、镜检100个细胞，统计含有X染色质细胞的百分比。
实验八姐妹染色单体交换
【目的要求】
1、初步掌握人体外周血淋巴细胞染色体姐妹染色单体分化染色技术。
2、初步掌握SCE的观察及分析方法。
3、了解SCE频率变化的意义。
【实验原理】
姐妹染色单体分化染色技术可使中期染色体的两条染色单体着色深浅不同，能借以观察姐妹染色单体交换(SCE)现象。姐妹染色单体交换，是指在染色体复制过程中，同一条染色体上的两条姐妹染色单体在相同位置上发生的等位对称的片段交换，即两条姐妹染色单体在DNA合成中核苷酸序列发生互相交换的现象。
当细胞在含有BrdU(5—溴脱氧尿嘧啶核苷)的营养液中增殖分裂时，由于BrdU是与脱氧胸腺嘧啶核苷相类似的核苷，所以在DNA复制过程中BrdU可取代胸腺嘧啶核苷而参入到新复制的DNA子链中。根据DAN半保留复制的规律，细胞在含有BrdU的营养液中进行第一次DNA复制时，每个DNA双链中的一条单链为BrdU参入链(TB型链)。当第二次复制时DNA 双链又经过一次半保留复制，其中一个DNA双链仍为TB型链，而另一个DNA分子的双链都
含有BrdU(称BB型链)。因此，第二周期中的每条染色体的两条姐妹染色单体中DNA分子，一个为TB型DNA分子，一个为BB型DNA分子。由于双链都含有BrdU的DNA双链螺旋化程度较低而降低了与某些染色剂的亲和力，所以经Giemsa染色后含有BB型DNA分子的染色单体比含有TB型DNA分子的染色单体染色浅而出现色差。在普通光学显微镜下即可观察到第二周期中一条中期染色体的两条染色单体，显示出深浅不同的颜色。如果在某些因素的作用下两条染色单体间发生了等位片段的交换，则可以很容易观察到。这种交换的多少即为交换率。现已证明，许多诱变剂、致癌剂和致畸剂可诱发染色体畸变和SCE频率增高，但SCE 频率的改变比染色体畸变灵敏得多，而且有害物质毒性越强，SCE频率就越高，表现出很好的剂量—效应关系。因此，SCE技术已成为检测致突变物和致癌物的一种常用手段。SCE分析可作为DNA损伤修复研究中一项有意义的指标。
【实验准备】
1、试剂：2×SSC溶液、Giemsa染液、香柏油、二甲苯、BrdU(500μg／mL)。
2、器材：光学显微镜、恒温水浴锅、黑光灯(20W)、饭盒盖、擦镜纸、小吸管、小吸头、黑布和扣染用玻璃板等。
【实验材料】
加BrdU营养液培养的外周血淋巴细胞染色体标本制片。
【实验内容、方法】
一、血培养和染色体标本制备
在进行外周血淋巴细胞培养时，5mL培养液中加入BrdU(500μg／mL)0.1mL，使培养液中BrdU的最终浓度为10μg／mL，加入抗凝血后用黑布包裹，避光培养72小时，按常规进行染色体的标本制备。
二、姐妹染色单体差别染色
（一）方法一
1、常规方法制片后，空气干燥，将标本制片置370C温箱中烤24小时。
2、将染色体制片放在培养皿内牙签上，细胞面朝下，盖一张擦镜纸，滴加适量2×SSC 溶液，以浸透擦镜纸，充分覆盖细胞面。
3、将培养皿置于55℃恒温水浴锅的水面上，。
4、用30瓦紫外灯垂直照射标本30分钟，照射距离10cm。
5、照射完毕，用自来水冲洗标本，空气干燥。
6、用10%的Giemsa染液扣染10分钟。
7、自来水冲片，空气干燥，镜下观察。
（二）方法二：
1、将新制片置370C温箱中三天。
2、依次浸入0.4M NaCl溶液、0.004M KCl溶液和0.01M PBS溶液中各5分钟。
3、用Hoechst-33258荧光染液染色20分钟，然后用0.01M PBS液冲洗2次。
4、见方法一之2～3。
5、用黑光灯照射30-40分钟。
6、见方法一之5～8。
三、SCE的观察与计数
在显微镜下，选择染色体分散良好、数目完整、染色体长度适宜的分裂相观察。首先应区别第一、二、三周期中期分裂相染色体Giemsa染色的特点。第一周期两条染色单体全部
深染；第二周期，一条染色单体浅染，另一条染色单体深染；第三周期，可出现两条染色单体均为浅染的分裂相，只要有一条染色体的两条染色单体相同位置都浅染，就可判定为第三周期。
SCE计数：凡在染色体端部出现的交换，记为一个SCE；在染色体的长臂或短臂中间出现交换，记为两个SCE；在着丝粒部位发生交换，排除着丝粒部扭转，记为一个SCE。观察记数20个中期分裂相，计算出每个细胞的SCE平均值，即为该个体的SCE交换频率。由于BrdU本身可致畸，如浓度过高可引起自身SCE频率本底的增高，因此应设正常对照组。
【实验报告】
1、在自己的制片中找到三个不同周期的中期分裂相。
2、简述姐妹染色单体差别染色的原理。
3、观察计数20个分裂相，并计算出每个细胞SCE的平均值。
实验九微核检测技术
【目的要求】
1、掌握人体外周血淋巴细胞微核检测技术(有丝分裂阻断法微核检测技术)。
2、熟悉微核的形态特征。
3、了解微核检测的实际意义和应用范围。
【实验原理】
微核是游离于细胞质中的核物质小体。其大小一般是主核的1/3～1/4。微核是染色体畸变的一种特殊表现形式，是由细胞分裂后期滞留的染色体断片或整条染色体在子代细胞分裂间期的细胞质中形成的游离团块物。由于染色体受化学诱变剂和辐射损伤而断裂成一些无着丝粒的染色体断片或受到纺锤体的毒物作用，纺锤体受到损伤，当细胞进入分裂后期时，不受纺锤丝牵引而滞留在赤道板附近，在末期以后，单独形成一个或几个规则的次核，包含在子细胞的胞质内，由于比主核小得多，故称微核。微核同主核一样，是由DNA物质所组成。现已证实，微核率同外界作用因子的剂量呈线性正比关系。因此，微核检测技术已广泛应用在辐射防护、损伤，化学诱变剂研究和新药、保健食品的毒理实验中。
微核的形成需要经过一次细胞分裂。有丝分裂阻断法微核检测技术是利用一定浓度的细胞松弛素B阻断淋巴细胞细胞质的分裂而不影响细胞核的分裂，故在淋巴细胞培养过程中加入细胞松弛素B，使经过一次分裂的淋巴细胞呈双核，选择这部分细胞进行微核计数而提高了实验的敏感性。同时也成为检测致突变、致癌、致畸物质对机体遗传效应的一种重要手段。
【实验准备】
1、试剂：已配好的营养液(20％小牛血清+80％RPMI—1640+PHA)、100μg／mL浓度的细胞松弛素B、0.075moL／L KCl、甲醇—冰醋酸固定液(3:1)、Gierma染液、香柏油、二甲苯。
2、器材：超净工作台、光学显微镜(附照相设备)、隔水式恒温培养箱、离心机、冰箱、高压蒸汽消毒锅、鼓风干燥箱、无菌正压滤器、分析天平(感量1／10毫克)、架盘天平、链霉素培养瓶及瓶塞、肝素小瓶及瓶塞(取血用)、10mL吸管、直头小吸管、5mL刻度离心管、2mL或5mL一次性注射器、量筒、烧杯、搪瓷盆、搪瓷盘、试管架、片盘、片盒、止血带、棉签、大吸球、小吸头、pH试纸、废液缸、解剖剪刀、镊子、记号笔、40C预冷的载玻片、酒精灯、火柴、染色缸或染色玻璃板和擦镜纸等。
肝素抗凝的正常人静脉血。
【实验内容、方法】
一、血培养
1、取静脉血0.5mL～lmL注入两个含5mL培养液的培养瓶中，置370C温箱培养。为了增加微核率便于实验观察，在血培养前正常人静脉血可经60Co照射。
2、细胞培养至40～42小时，培养瓶中加入100μg／mL的细胞松弛素B 0.3mL/瓶(终浓度：6μg/mL)，继续培养30小时。即培养至70～72小时收获细胞。
二、制片
1、将培养物移至5mL离心管，以1000r／min离心10分钟，弃上清液，留底物，加入3mL预温(370C)的0.075mol／L KCl和2mL固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)混匀。
2、混匀后，以1000r／min离心10分钟，弃上清液，加4Ll固定液吹匀，室温固定10分钟，离心。再重复一次。
3、弃上清液，留底物，加0.5mL固定液，吹打均匀，滴片，空气干燥。
4、Giemsa染液扣染20分钟，自来水冲片，空气干燥，显微镜观察。
三、微核观察、分析及计数
首先用低倍镜观察选择染色和细胞分散好的区域，换高倍镜或油镜观察计数。一般情况下，计数1000个胞浆完整的双核淋巴细胞(每瓶计数500个)，经60Co照射过的淋巴细胞微核率明显高于未照射过的细胞。所计数的微核要求与主核完全脱离，多呈圆形，边缘光滑，着色与主核一致，小于主核的1/3。一个细胞中，不论出现几个微核，均按一个细胞计数。
【注意事项】
在微核标本的制备过程中，动作要轻，离心速度要准确，以免细胞破碎，微核丢失。
【实验报告】
1、随机观察500～1000个细胞并计算微核细胞率。
2、简单叙述微核的形成机理及微核检测的实用价值。
实验十ABO血型的测定及其基因频率的计算
【目的要求】
了解ABO血型的测定方法，熟悉ABO血型基因频率的计算方法。
【实验原理】
根据红细胞抗原的有无和血清中抗体的存在情况，是否发生凝集反应来确定血型。
血型红细胞抗原血清中的凝集素
A型 A 抗B
B型 B 抗A
AB型 A、B 无
O型无抗A抗B
载玻片、一次性采血针、酒精棉球、干棉球、A、B标准血清、显微镜。
【实验材料】
耳垂血或手指血
【实验内容、方法】
(一)ABO血型的测定：
1、一张清洁的载玻片，于左半部加一滴A型标准血清(含抗B凝集素)，于右半部加一滴B型标准血清(含抗A凝集素)。
2、用酒精棉球消毒耳垂，用一次性采血针刺耳垂。待出血后用一次性采血针的一端沾血少许，搅拌在A型标准血清中，拌匀后再用一次性采血针的另一端沾血少许，搅拌在B 型标准血清中。切记不能使A、B血清相混。
静置1分钟后，观察凝集现象。凡红细胞分散者为不凝集，而红细胞成群且有粘连者为凝集。不明显的用显微镜观察。按下表判定血型。
A型血清 B型血清血型
- - O型
+ - B型
- + A型
+ + AB型
(凝集者画“+”，不凝集者记“-”)
(二)ABO血型基因频率的计算法：
根据检查血型的结果，计算出各血型(表现型)的频率，假设其为遗传平衡群体，根据下列公式算出基因频率。
表现型 A型 B型 O型 AB型
基因型 I A I A+I A i I B I B+I B i ii I A I B
频率 p2+2pr(或A) q2+2qr(或B) r2(或O) 2pq(或AB)
i的频率r=√O
I A的频率p=1-√B+A
I B的频率q=1-√A+O
【实验报告】
计算出本班或本年级ABO血型的基因频率。
医学遗传学实验课程改革的实践与探索
医学遗传学实验课程改革的实践与探索 医学遗传学是医学与遗传相互结合、相互渗透的一门交叉学科，主要研究人类遗传性疾病的发病机制、传递规律、诊断方法以及治疗与预防措施，为改善人类健康素质作出贡献。医学遗传学是一门实验性很强的学科，在现代医学中占据着重要地位，是医学院校的重要专业基础课程。如何上好大学的遗传学实验课程，最大限度地使学生在遗传学实验过程中获取知识以达到良好的教学效果是所有医学遗传学教师和学生共同关心的问题。经过多年教学实践，认真总结在实验课堂上学生存在的主要问题，对实验教学过程和实验内容进行合理优化可以达到教学效果的提高。 一、医学遗传学实验课改革的具体措施 1.重编实验指导，筛选实验内容 实验课教学目的是培养学生动手操作能力、实践和创新能力，但在实际教学中发现学生普遍存在“重理论轻实验、重原理轻操作、重实验报告轻实验过程”的思想。针对这一问题，我院及时重编实验指导，结合理论教学，精选实验教学内容，将《医学细胞生物学》和《医学遗传学》实验指导书合二为一，出版了《医学细胞生物学》与《医学遗传学》实验指导。在《医学遗传学》实验指导这一部分内容中，共有7个实验，实验内容保留了遗传学中经典的实验项目，例如正常人G显带染色体核型分析，通过动手操作配对染色体和分组，学生能较好的理解并记忆核型及核型分析的概念和意义；人类皮纹分析也是学生非常感兴趣的实验项目，借助印泥在实验报告上清晰的印出指纹和掌纹并加以分析，学生掌握了皮纹的类型及人类皮纹的多态性。与此同时又增加了能培养学生解决分析问题能力和实践能力的设计性实验，例如以4～6人为一个实验小组，自主选择一个实验内容，例如人类单基因遗传性状的群体分析、人类遗传病分析（单基因病、多基因病、染色体病）等，完成实验设计方案并进行文献查阅及案例查找，最终制作幻灯片汇报。在学生完成实验报告過程中增强学生的科研意识和解决实际问题的能力。 2.改革教学方法，突出学生主体 随着多媒体辅助教学的不断推广应用和完善，在医学遗传学实验课上通过PPT演示、播放动画短片的形式将实验操作的具体过程和步骤展示出来，可以增强学生的学习兴趣，但仍然没有走出“以教师为中心”的教学模式。通过不断地实践与探索，在实际授课过程中，选择合适的实验内容，例如系谱分析和人类21三体综合征患者染色体分析这两个实验，让学生自由、大胆地走上讲台，参与、探索和相互交流，不断地激发学生的学习主动性和积极性，突出以学生为主体的理念。 3.量化实验考核，规范学生操作
医学遗传学作业4-2及答案
B080 医学遗传学作业4-2及答案 1. 对于常染色体显性遗传病，患者的基因型主要为（） A)AA B)Aa C)aa D)XAXa 2. 下列哪一点不符合数量性状的变异的特点（） A)相对性状存在着一系列中间过渡类型 B)在一个群体是连续的 C)相对性状间差异明显 D)分布近似于正态曲线 3. 在一个随机杂交的群体中，多基因遗传的变异范围广泛，大多数个体接近于中间类型，极端变异的个体很少。这些变异产生是由（） A)多基因遗传基础和环境因素共同作用的结果 B)遗传基础的作用大小决定的 C)环境因素的作用大小决定的 D)群体大小决定的 4. 多基因病的群体易患性阈值与平均值距离越远，则（） A)群体易患性平均值越高，群体发病率越高 B)群体易患性平均值越低，群体发病率越低 C)群体易患性平均值越高，群体发病率越低 D)群体易患性平均值越低，群体发病率越高群体易患性平均值越低，而与群体发病率无关 5. 父母都是A血型，生育了一个O血型的孩子，这对夫妇再生育孩子的血型可能是（）
A)只能是A血型 B)只能是O血型 C)A型或O型 D)AB型 6. 下列哪一条不符合常染色体显性遗传的特征（） A)男女发病机会均等 B)系谱中呈连续传递现象 C)患者都是纯合体（AA），杂合体（Aa）是携带者 D)双亲无病时，子女一般不会发病 7. 一个男孩是甲型血友病（XR）的患者，其父母和祖父母均正常，其亲属中不可能患此病的人是（） A)外祖父或舅父 B)姨表兄弟 C)姑姑 D)同胞兄弟 8. 外耳道多毛症属于（） A)Y连锁遗传 B)X连锁隐性遗传 C)X连锁显性遗传 D)常染色体隐性遗传 9. 遗传性恶性肿瘤的遗传方式常为（） A)常染色体显性遗传 B)常染色体隐性遗传
医学遗传学总结
KEY WORD：分子技术。 1.基因工程 PCR-引物设计；限制性酶切；连接，转化，筛选，质粒提取 2.如何构建报告基因 3.基因的表达如何调控，检测方式？ DNA/RNA manipulate 以Huntington disease举例： （Huntington disease Caused by expansion of a triplet encoding Glu in the 5’ end. Normal allele. 11-34 repeats; Abnormal, triplets expanded.） 【疾病研究如何着手】 查阅文献→选择模式动物 （eg. 选择果蝇。 原因：发育周期短个体小便于饲养成本低，由于研究历史长基因工具系统健全。 研究结果适用于人<13000个基因中有10000个与人同源，人类60%以上的疾病可以在果蝇中找到对应基因>） →构建报告基因 （eg. 使人的Huntington基因能在模式生物中表现出疾病表型） ①在表达基因的coding region的3’端加上GFP，作为基因表达的预告。尽量包括调控序列。通过数据库（例如BioLabs）鉴定确保序列中有promoter和核糖体结合。 ②为PCR设计引物： 大致原则： 5’端：在5’端选择约为20bp的序列，GC个数与AT个数大致相等。在之前加6bp左右的酶切位点，以及在酶切位点之前加上1~2bp的用于提高限制性内切酶效率的碱基。 3’端：大致相同，只是注意DNA序列需要【反向互补】 →连接后转化→克隆筛选→基因提取 【限制性内切酶使用注意】 DNA甲基化、star activity（用量、时间）、enzymes producing compatible ends. （star activity：指由于反应条件不同而产生的切断与原来认识序列不同的位点的现象，也就是说产生Star 活性后，不但可以切断特异性的识别位点，还可以切断非特异性的位点。产生Star活性的结果是酶切条带增多。） 【vector】 用于扩增的cloning vector和用于表达的expression vector 特点见课件。 【Inverse PCR】：用于克隆基因两侧的侧翼序列。
医学遗传学
多选： 1. 遗传病的特征： A.疾病垂直传递 B.出生时就表现出症状 C.有特定的发病年龄 D.有特定的病程 E.伴有基因突变或染色体畸变 2. 家族性疾病具有的特征： A.有家族聚集现象 B.有相同的环境因素 C.有相同的遗传环境 D.一定是遗传病 3. 哪些疾病属于单基因疾病： A.体细胞遗传病 B.线粒体遗传病 C.X连锁显性遗传病 D.性染色体病 4. 在猫中，基因BB是黑色，Bb是玳瑁色，bb是黄色，这个基因位于X染色体上，一只玳瑁雌猫与一只黑色雄猫的后代可以是： A.雌猫中黑色与玳瑁色各占一半 B.雄猫中黑色与黄色各占一半 C.雌猫只会有玳瑁色 D.雄猫只会有玳瑁色 5. 不完全连锁指的是： A.二对基因位于同一对染色体上 B.由于互换，这二对基因的位置可以有变化 C.这二对基因位置变化的频率决定于它们之间距离的远近 D.由于互换，这二对基因也可以移到另一对染色体上 6. 一个B型血的母亲生了B型血男孩和O型血女孩，父亲的血型是： A. A型 B.B型 C.AB型 D.O型 7. 父亲血型为AB型，母亲为O型，子女中基本不可能出现的血型是： A.AB型 B.B型 C.O型 D.A型
8. 父亲血型是AB型，母亲是O型，子代中的血型可能是： A.A型 B.O型 C.B型 D.AB型 9. 父亲血型是B型，母亲血型是A型，他们生了一个A型血的女儿，这种婚配型是： A.IBIB×IAIA B.IBi×IAIA C.IBIB×IAi D.IBi×IAi 10. 父亲血型为AB型，母亲血型为AB型，子女中可能有的血型是： A.A型 B.AB型 C.B型 D.O型 11. 常染色体隐性遗传病系谱的特点是： A.患者双亲一定是无病的 B.患者同胞中可能有患病的 C.患者的其他亲属中不可能有患病的 D.患者双亲可能是近亲 12. 常染色体隐性遗传病系谱的特点是： A.患者双亲常无病，但有时为近亲婚配 B.患者同胞中可能有同病患者 C.不连续传递 D.女性患者多于男性患者 13. 常染色体显性遗传病系谱的特征是： A.患者双亲中常常有一方是同病患者 B.双亲常为近亲婚配 C.同胞中的发病比例约为1/2 D.患者子女必然发病 14. X连锁隐性遗传病系谱的特点是： A.男性患者多于女性患者 B.男性患者病重，女性患者病轻 C.交叉遗传 D.男性患者的外祖父一定患病
医学遗传学及答案
医学遗传学试卷 姓名 __________ 分数 _______________ 一、名词解释（每题3分，共18分） 1. 核型： 2. 断裂基因： 3. 遗传异质性： 4. 遗传率： 5. 嵌合体； 6. 外显率和表现度： 二、填空题（每空1分，共22分） 1. 人类近端着丝粒染色体的随体柄部次缢痕与（ ）形成有关，称为（ ） ）表示，近亲婚配后代基因纯合的可能性用 ）和（ ）两类。 ）。核型为46, XX, deL （2）（q35）的个体表明其体内 ）或（ ）变化。 6.细胞分裂早中期、前中期、晚前期或更早时期染色体的带纹，称为（ 2. 近亲的两个个体的亲缘程度用（ （ ）表示。 3. 血红蛋白病分为（ 4. Xq27 代表（ 的染色体发生了（ ）。 )-
）和（ ）的变化。 ）造成的（ ）结构或合成量异常所引起的疾病。 ）异常或缺失，使（ ）的合成受到抑制而引起 的溶血性贫血。 10. 在基因的置换突变中同类碱基卩密喘与卩密喘、瞟吟与瞟吟）的替换称（ ）-不同类型 碱基（P 密喘与瞟吟）间的替换称为（ ）＜. 11. 如果一条X 染色体XQ27 — Xq28之间呈细丝样结构，并使其所连接的长臂末端形似随体, 则这条X 染色体被称为（ ）。 12. 多基因遗传病的再发风险与家庭中患者（ ）以及（ ）呈正相关。 三、选择题（单选题，每题1分，共25分） 1. 人类1号染色体长臂分为4个区，靠近着丝粒的为（）。 A. O 区 B. 1区 C. 2区 D. 3区 E. 4区 2. DNA 分于中碱基配对原则是指（ ）A. A 配丁，G 配C B. A 配G, G 配T C. A 配 U, G 配 C D. A 配 C, G 配 T E. A 配 T, C 配 U 3. 人类次级精母细胞中有23个（）＜, A.单价体 B.二价体 C.单分体 D.二分体 E.四分体 4. 46, XY, t （2； 5）（Q21; q31）表示（ ）＜,A —女性体内发生了染色体的插入B. 一男性体 内发生了染色体的易位 C 一男性带有等臂染色体 D. 一女性个体带有易位型的畸变染 色体 E. 一男性个体含有缺失型的畸变染色体 5. MN 基因座位上，M 出现的概率为o. 38,指的是（）- A 基因库 B.基因频率 C 基因型频率 D 亲缘系数E.近婚系数 6. 真核细胞中的RNA 来源于（ ）＜,A. DNA 复制 B. DNA 裂解 C. DNA 转化 D. DNA 转录 E .DNA 翻译 7. 脆性X 综合征的临床表现有（）。A 智力低下伴眼距宽、鼻梁塌陷、通贯手、趾间距宽 B 智力低下伴头皮缺损、多指、严重唇裂及膊裂C .智力低下伴肌张力亢进。特殊握拳姿势、 摇椅足 D.智力低下伴长脸、大耳朵、大下颁、大睾丸E.智力正常、身材矮小、肘外 翻、乳腺发育差、乳间距宽、颈蹊 8. 基因型为P '邙'的个体表现为（ ）。A 重型9地中海贫血 B.中间型地中海贫血 C 轻型地中海贫血 D 静止型。地中海贫血E.正常 9. 慢性进行性舞蹈病属常染色体显性遗传病，如果外显率为90%, —个杂合型患者与正常人 结婚生下患者的概率为（）＜■ A. 50% B. 45% C. 75% D. 25% E. 100% 7. 染色体数日畸变包括（ 8. 分子病是指由于（ 9. 地中海贫血，是因（
医学遗传学知识总结
1.医学遗传学是用遗传学的理论和方法来研究人类病理性状的遗传规律及物质基础的学科 2.遗传病的类型：单基因病多基因病染色体病体细胞遗传病线粒体遗传病 3.遗传因素主导的遗传病单基因病和染色体病 4.遗传和环境因素共同作用的疾病多基因病和体细胞遗传病 5.环境因素主导的疾病非遗传性疾病 6.遗传病由遗传因素参与引起的疾病，生殖细胞或受精卵的遗传物质（染色体或基因）异常所引起的疾病，具有垂直传递的特点 7.染色质和染色体是同一物质在细胞周期不同时期的不同形态结构 8.染色体的化学组成DNA 组蛋白RNA 非组蛋白 9.染色体的基本结构单位是核小体 10.染色质的类型：常染色质异染色质 11.常染色质是间期核纤维折叠盘曲程度小，分散度大，能活跃的进行转录的染色质特点是多位于细胞核中央，不易着色，折光性强12.异染色质是间期核纤维折叠盘曲紧密，呈凝集状态，一般无转录活性的染色质特点：着色较深，位于细胞核边缘和核仁周围。13.结构性异染色质是各类细胞的整个发育过程中都处于凝集状态的染色质 14.兼性异染色质是特定细胞的某一发育阶段由原来的常染色质失去转录活性，转变成凝集状态的异染色质 15.染色体的四级结构：一级结构：核小体；二级结构：螺线管；三
级结构：超螺线管；四级结构：染色单体 16.性别决定基因成为睾丸决定因子；Y染色体上有性别决定基因：SRY 17.基因突变是指基因在结构上发生碱基对组成或排列顺序的改变 18.点突变是基因（DNA链）中一个或一对碱基改变 19.基因突变的分子机制：碱基替换移码突变动态突变 20.碱基替换方式有两种：转换和颠换 21.碱基替换可引起四种不同的效应：同义突变、错义突变、无义突变、终止密码突变 22.移码突变：在DNA编码顺序中插入或缺失一个或几个碱基对从而使自插入或缺失的那一点以下的三联体密码的组合发生改变进而使其编码的氨基酸种类和序列发生改变 23.整码突变：DNA链的密码子之间插入或缺失一个或几个密码子则合成肽链将增加或减少一个或几个氨基酸，但插入或丢失部位的前后氨基酸顺序不变动态突变：DNA分子中碱基重复序列或拷贝数发生扩增而导致的突变（脆性X综合症） 24.系谱是指某种遗传病患者与家庭各成员相互关系的图解 25.系谱分析法是通过对性状在家族后代的分离或传递方式来推断基因的性质和该性状向某些家系成员传递的概率 26.先证者是指家系中被医生或研究者发现的第一个患病个体或具有某种性状的成员 27.单基因遗传病：疾病的发生主要由一对等位基因控制，传递方式
医学遗传学试题及答案大全(一)
《医学遗传学》答案 第1章绪论 一、填空题 1、染色体病单基因遗传病多基因遗传病线粒体遗传病体细胞遗传病 2、突变基因遗传素质环境因素细胞质 二、名词解释 1、遗传因素而罹患的疾病成为遗传性疾病或遗传病，遗传因素可以是生殖细胞或受精卵 内遗传物质结构和功能的改变，也可以是体细胞内遗传物质结构和功能的改变。 2、主要受一对等位基因所控制的疾病，即由于一对染色体（同源染色体）上单个基因或 一对等位基因发生突变所引起的疾病。呈孟德尔式遗传。 3、染色体数目或结构异常（畸变）所导致的疾病。 4、在体细胞中遗传物质的改变（体细胞突变）所引起的疾病。 第2章遗传的分子基础 一、填空题 1、碱基替换同义突变错义突变无义突变 2、核苷酸切除修复 二、选择题1、A 三、简答题 1、⑴分离律 生殖细胞形成过程中，同源染色体分离，每个生殖细胞中只有亲代成对的同源染 色体中的一条；位于同源染色体上的等位基因也随之分离，生殖细胞中只含有两 个等位基因中的一个；对于亲代，其某一遗传性状在子代中有分离现象；这就是 分离律。 ⑵自由组合律 生殖细胞形成过程中，非同源染色体之间是完全独立的分和随机，即自由组合 定律。 ⑶连锁和交换律 同一条染色体上的基因彼此间连锁在一起的，构成一个连锁群；同源染色体上 的基因连锁群并非固定不变，在生殖细胞形成过程中，同源染色体在配对联会 时发生交换，使基因连锁群发生重新组合；这就是连锁和交换律。 第3章单基因遗传病
一、填空题： 1、常染色体显性遗传、常染色体隐性遗传、X连锁隐性遗传、X连锁显性遗传 2、系谱分析法 3、具有某种性状、患有某种疾病、家族的正常成员 4、高 5、常染色体、无关 6、1/4、2/3、正常、1/2 7、半合子 8、Y伴性遗传9、环境因素10、基因多效性 11、发病年龄提前、病情严重程度增加12、表现型、基因型 二、选择题——A型题 1、B 2、A 3、C 4、D 5、D 6、A 7、D 8、B B型题 1、A 2、D 3、B 4、C 5、D 6、C 7、B 8、C 三、名词解释： 1、所谓系谱（或系谱图）是从先证者入手，追溯调查其所有家族成员（直系亲属和 旁系亲属）的数目、亲属关系及某种遗传病（或性状）的分布资料绘制而成的图解。 2、先证者是指某个家族中第一个被医生或遗传学研究者发现的罹患某种遗传病的患 者或具有某种性状的成员。 3、表现度是基因在个体中的表现程度，或者说具有同一基因型的不同个体或同一个体 的不同部位，由于各自遗传背景的不同，所表现的程度可有显著的差异。 4、外显率是某一显性基因（在杂合状态下）或纯合隐性基因在一个群体中得以表现的 百分率。 5、由于环境因素的作用使个体的表型恰好与某一特定基因所产生的表型相同或相似， 这种由于环境因素引起的表型称为拟表型。 6、遗传异质性指一种性状可由多个不同的基因控制。 7、一个个体的同源染色体（或相应的一对等位基因）因分别来自其父放或母方，而表 现出功能上的差异，因此所形成的表型也有不同，这种现象称为遗传印记或基因组印记、亲代印记。 8、杂合子在生命的早期，因致病基因并不表达或虽表达但尚不足以引起明显的临床症 状，只有达到一定年龄后才才表现出疾病，这一显性形式称为延迟显性。 9、也称为半显性遗传，指杂合子Dd的表现介于显性纯合子和隐性纯合子dd的表现 型之间，即在杂合子Dd中显性基因D和隐性基因d的作用均得到一定程度的表现。
《医学遗传学》期末重点复习题
2．与苯丙酮尿症不符的临床特征是（1）。 A 患者尿液有大量的苯丙氨酸 B 患者尿液有苯丙酮酸 C 患者尿液和汗液有特殊臭味 D 患者智力发育低下 E 患者的毛发和肤色较浅 3．细胞在含BrdU的培养液中经过一个复制周期，制片后经特殊染色的中期染色体（）两条姊妹染色单体均深染 4．DNA分子中脱氧核糖核苷酸之间连接的化学键是（）磷酸二酯键 5．HbH病患者的可能基因型是（5）。 A ――/―― B －a/－a C ――/aa D －a/aa E aacs/―― 6．下列不符合常染色体隐性遗传特征的是（4）。 A．致病基因的遗传与性别无关，男女发病机会均等 B．系谱中看不到连续遗传现象，常为散发 C．患者的双亲往往是携带者 D．近亲婚配与随机婚配的发病率均等 E．患者的同胞中，是患者的概率为1/4，正常个体的概率约为3/4 7．人类a珠蛋白基因簇定位于（5）。 A 11p13 B 11p15 C 11q15 D 16q15 E 16p13 8．四倍体的形成可能是由于（3）。
A 双雄受精 B 双雌受精 C 核内复制 D 不等交换 E 部分重复9．在蛋白质合成中，mRNA的功能是（3）。 A 串联核糖体 B 激活tRNA C 合成模板 D 识别氨基酸 E 延伸肽链10．在一个群体中，BB为64％，Bb为32％，bb为4％，B基因的频率为（4）。 A B C D E 11．一个个体中含有不同染色体数目的三种细胞系，这种情况称为（3）。 A 多倍体 B 非整倍体 C 嵌合体 D 三倍体 E 三体型 12．某基因表达的多肽中，发现一个氨基酸异常，该基因突变的方式是（5）。 A 移码突变 B 整码突变 C 无义突变 D 同义突变 E 错义突变13．一种多基因遗传病的群体易患性平均值与阈值相距越近（1）。 A 群体易患性平均值越高，群体发病率也越高 B 群体易患性平均值越低，群体发病率也越低 C 群体易患性平均值越高，群体发病率越低 D 群体易患性平均值越低，群体发病率迅速降低 E 群体易患性平均值越低，群体发病率越高 14．染色质和染色体是（4）。
05级医学遗传学试卷及答案
新乡医学院05级临床等专业2007—2008学年第一学期医学遗传学考试卷（A）一、单选题（每题1分，共30分）1.研究基因表达与蛋白质(酶)的合成，基因突变所致蛋白质(酶)合成异常与遗传病关系的医学遗传学的一个支柱学科为：A.人类细胞遗传学B ．人类生化遗传学 C.医学分子生物学D.医学分子遗传学E ．医学生物化学2.等位基因的分离是由于A ．着丝粒的分裂B ．遗传性状的分离C ．同源染色体的分离D ．姐妹染色单体的分离E ．细胞分裂中染色体的分离3.常染色质是间期细胞核中：A ．螺旋化程度高，有转录活性的染色质B ．螺旋化程度低，有转录活性的染色质C ．螺旋化程度高，无转录活性的染色质D ．螺旋化程度低，无转录活性的染色质E ．螺旋化程度低，很少有转录活性的染色质4.根据ISCN ，人类C 组染色体数目为：A ．7对B ．6对C ．7对+X 染色体D ．6对+X 染色体E ．以上都不是5.经检测发现，某个体的细胞核中有2个X 小体，表明该个体一个体细胞中有几个X 染色体。A ．1B ．2C ．3D ．4E ．56.G 显带与Q 显带所得到的带型：A.完全无关系B ．完全一致 C.正好相反D .基本相同E ．有时一样，有时不一样7.染色体臂上作为界标的带，在计算上属于下列哪一种叙述? A ．属于后一个区(着丝粒远端的区) B ．属于前一个区(着丝粒近端的区) C.分成两半，各归一个区D ．不属于任何区 E.前一个区和后一个区重复计算 8.正常人次级精母细胞中的染色体数目是： A ．23 B ．44 C ．46 D ．48 E ．92题号一二三四五六七八总分合计人分数 分数阅卷人
医学遗传学教学大纲(详细)
《医学遗传学》教学大纲 （讨论稿） 2013年11月修订 一、课程简介 本课程在医学生学习了细胞生物学、组织胚胎学、解剖学、生理学、生物化学等课程的基础上，从个体、细胞和分子水平阐释遗传性疾病的遗传规律、发病机制、诊断、治疗和遗传保健等基本理论、基本知识和基本技能，是一门从基础医学到临床医学的桥梁课程。 二、基本学习内容和教学要求 本课程的主要学习内容包括医学遗传学基本知识、医学遗传学基础理论和人类遗传学疾病。通过本课程的教学，学生既应掌握五大类遗传性疾病的基本特点，也应掌握常见的遗传性疾病的发病机制、主要临床特征、遗传学改变和遗传病再显危险率的估计，以达到理论联系实际的目的。 按要求程度的不同，将学习内容分为三级：第一级为“掌握”，要求理解和熟记所学内容，并能脱离书本进行简明扼要的口头与书面叙述；第二级为“熟悉”，要求理解所学内容，并记住内容提要；第三级为“了解”，要求基本理解所学内容。 三、教学方法 理论联系实际，基础结合临床，遗传病案例贯穿全程；课堂讲授与课外练习并重，文献检索与英文阅读并进，知识面拓展贯穿全程。。 四、建议教材 《医学遗传学》（第三版），顾鸣敏、王铸钢主编。上海科学技术文献出版社，2013年8月 五、参考书目 1. 陈竺主编，《医学遗传学》（第二版），人民卫生出版社，2010年7月 2. 左伋主编，顾鸣敏、张咸宁副主编，《医学遗传学》（第六版），人民卫生出版社，2013年3月 3. Robert Nussbaum, Roderick R. McInnes, Huntington F. Willard. Thompson & Thompson Genetics in Medicine, 7th edition, Saunders Elsevier, 2007 六、主要参考网址 1. 上海市精品课程——医学遗传学： https://www.360docs.net/doc/3115341943.html,/jpkc/med_heredity/index.asp， 2.人类基因突变数据库：https://www.360docs.net/doc/3115341943.html, 3. 美国生物技术信息中心：https://www.360docs.net/doc/3115341943.html, 4. 人类孟德尔遗传数据库：https://www.360docs.net/doc/3115341943.html, 5. 人类基因组委员会：https://www.360docs.net/doc/3115341943.html, 七、本大纲的编写基础和适用对象及考核方法
《医学遗传学》试题及答案
2016级专科、高起本《医学遗传学》试题及答案2016级专科、高起本《医学遗传学》试题 1、下列哪一核型是猫叫综合征的核型( ) A(46，XX，del(5)(p15) B(46，XY，del(1)(q21) C(47，XY，，21 D(45，X E(47，XXY 2、一个遗传平衡的群体随机婚配，代代保持不变的是( ) A(表现型频率 B(基因型频率 C(基因频率和表现型频率 D(发病率和死亡率 E(基因频率和基因型频率 3、一些先天性代谢病的患儿周身或汗尿中会散发出特殊的异味，周身散发出鼠臭 (腐臭味)的患者可能是( ) A(胱氨酸尿症 B(苯丙酮尿症 C(半乳糖血症 D(枫糖尿症 E(尿黑酸尿症 4、杂合子的表型介于纯合子显性和纯合子隐性表型之间，这种遗传方式称为( )
A(共显性遗传 B(外显不全 C(完全显性遗传 D(不完全显性遗传 E(拟显性遗传 5、下列哪种情况不是产前诊断的指征( ) A(夫妇一方为染色体平衡易位携带者的孕妇 B(35岁以上高龄孕妇 C(因社会习俗要求预测胎儿性别者 D(羊水过多或过少的孕妇 E(有原因不明的多次流产史或死胎史的孕妇 6、羊水取样用于产前诊断的最适合的时间是妊娠的( ) A(16,20周 B(9,11周 C(10,12周 D(10,20周 E(20,24周 7、同源染色体分离、非同源染色体自由组合( ) A(同时发生于后期? B(同时发生于后期? C(后期?和后期?都出现 D(在中期? E(在M期 8、在遗传咨询中，如父母表型正常，但均是某AR遗传病基因的携带者，则他们 的子女中发生该遗传病的概率是( ) A(1/2 B(1/3
医学遗传学实验指导
医学遗传学 实验指导 内蒙古医学院遗传学教研室
目录 验一人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备实验二小鼠骨髓细胞染色体标本的制备 实验三人类染色体G显带技术 实验四人类染色体C显带技术 实验五核仁形成区银染技术 实验六人类染色体G显带核型分析 实验七X染色质标本的制备 实验八姐妹染色单体交换 实验九微核检测技术 实验十ABO血型的测定及其基因频率的计算 实验十一苯硫脲尝味试验及其基因频率的计算实验十二人类皮纹分析 实验十三遗传咨询 实验十四人类基因组DNA的提取 实验十五聚合酶链式反应（PCR） 实验十六DNA的琼脂糖凝胶电泳 实验十七PCR-RFLP技术
《医学遗传学》实验须知 一、医学遗传学实验目的和要求 医学遗传学实验课是医学遗传学课程的重要内容。实验课有助于加深和巩固基础理论知识，并进一步了解和掌握本学科的基本实验内容和操作技能。在培养学生分析问题、综合问题和解决问题能力方面具有重要作用。为此，要求学生做到以下几点： 1、实验课前做好预习，明确实验目的、实验原理。 2、复习有关理论内容。 3、熟悉实验的主要步骤。 4、初步估计和判定实验的可能结果。 二、实验操作过程中的注意事项 1、认真操作，仔细观察和综合分析实验所出现的现象与结果并及时记录。 2、如果实验结果与理论结果不一致，须及时进行科学分析，判断结果的可靠性，寻找出现误差的原因。 3、各种实验试剂用后放回原处，瓶盖封严，轻拿轻放。 4、使用微量加样器时，一定调整好取用量，按使用要求操作。 5、实验室应保持肃静，注意清洁卫生，实验中用过的废弃物品要及时清理，避免堵塞下水管道。 三、实验后的注意事项 1、实验后，整理清洁所用仪器、设备，注意放回原位，以备下次使用。 2、如有仪器损坏，要及时填写破损报告，并报告老师。 3、离开实验室前，检查并关闭门、窗、水、电。 四、实验室的意外处理 实验室如遇着火、烫伤等意外事件发生，必须镇静做紧急处理，并立即报告老师。 1、着火：如遇酒精灯推倒或其它原因着火，首先将一切易燃品移至远处，然后用水扑灭或者切断电源。 2、火伤：皮肤被火灼伤，用烫伤软膏涂抹，如伤势较重，立即送医院治疗。 3、如有毒药品泼溅到皮肤上，如EB，同位素等，应用大量清水进行清洗，必要时，去医院处理。 4、割伤出血：遇玻璃割伤出血，可用碘酒或红药水消毒后，用纱布包扎。如有玻璃留在伤口，处理前应先取出。
(完整word版)医学遗传学重点归纳
第一章人类基因与基因组 第一节、人类基因组的组成 1、基因是遗传信息的结构和功能单位。 2、基因组是是细胞内一套完整遗传信息的总和，人类基因组包含核基因组和线粒体基因组 单拷贝序列串联重复序列 按DNA序列的拷贝数不同，人类基因组高度重复序列 反向重复序列 重复序列短分散核元件 中度重复序列 长分散核元件 3、多基因家族是指由某一祖先经过重复和所变异产生的一组基因。 4、假基因是基因组中存在的一段与正常基因相似但不能表达的DNA序列。 第二节、人类基因的结构与功能 1、基因的结构包括：（1）蛋白质或功能RNA的基因编码序列。（2）是表达这些结构基因所需要的启动子、增强子等调控区序列。 2、割裂基因：大多数真核细胞的蛋白质编码基因是不连续的编码序列，由非编码序列将编码序列隔开，形成割裂基因。 3、基因主要由外显子、内含子、启动子、增强子、沉默子、终止子、隔离子组成。 4、外显子大多为结构内的编码序列，内含子则是非编码序列。 5、每个内含子5端的两个核苷酸都是GT，3端的两个核苷酸都是AG，这种连接方式称为GT--AG法则。 6、外显子的数目等于内含子数目加1。 7、启动子分为1类启动子（富含GC碱基对，调控rRNA基因的编码）、2类启动子（具有TATA 盒特征结构）、3类启动子（包括A、B、C盒）。 第三节、人类基因组的多态性 1、人类基因组DNA多态性有多种类型，包括单核苷酸多态性、插入\缺失多态性、拷贝数多态性。 第二章、基因突变 突变是指生物体在一定内外环境因素的作用和影响下，遗传物质发生某些变化。基因突变即可发生在生殖细胞，也可发生在体细胞。 第一节、基因突变的类型
医学遗传学及答案
医学遗传学试卷 姓名_______＿＿＿分数＿__＿＿___＿_＿_ 一、名词解释(每题3分,共18分) 1、核型: 2.断裂基因: 3.遗传异质性: 4。遗传率: 5.嵌合体; ６。外显率与表现度: 二、填空题(每空1分,共2２分) 1.人类近端着丝粒染色体得随体柄部次缢痕与()形成有关,称为( ) 2。近亲得两个个体得亲缘程度用( )表示,近亲婚配后代基因纯合得可能性用()表示。 3.血红蛋白病分为( )与()两类。 4、Xq２7代表( )。核型为46,XX,dｅL(2)(q35)得个体表明其体内得染色体发生了( )。 5.基因突变可导致蛋白质发生()或( )变化。 ６。细胞分裂早中期、前中期、晚前期或更早时期染色体得带纹,称为( )、 7、染色体数日畸变包括( )与( )得变化。 8.分子病就是指由于()造成得( )结构或合成量异常所引起得疾病。 9.地中海贫血,就是因()异常或缺失,使( )得合成受到抑制而引起得溶血性贫血。 10、在基因得置换突变中同类碱基(嘧啶与嘧啶、嘌呤与嘌呤)得替换称()。不同类型碱基(嘧啶与嘌呤)间得替换称为( )。 1１.如果一条Ｘ染色体XQ27一Xq2８之间呈细丝样结构,并使其所连接得长臂末端形似随体,则这条Ｘ染色体被称为( )。 12.多基因遗传病得再发风险与家庭中患者( )以及()呈正相关、 三、选择题(单选题,每题１分,共２5分) １.人类l号染色体长臂分为4个区,靠近着丝粒得为( )。 Ａ。Ｏ区 B.1区Ｃ、2区Ｄ.3区Ｅ.４区 ２。DNA分于中碱基配对原则就是指( ) Ａ.A配丁,G配ＣＢ.A配G,G配Ｔ C、A配U,Ｇ配C D。Ａ配Ｃ,Ｇ配T E、A配T,C配U 3、人类次级精母细胞中有23个( )。A、单价体Ｂ.二价体C。单分体D、二分体 E.四分体 ４.46,XY,t(2;5)(Ｑ21;q31)表示( )。A一女性体内发生了染色体得插入 B.一男性体内发生了染色体得易位C一男性带有等臂染色体Ｄ。一女性个体带有易位型得畸变染色体E、一男性个体含有缺失型得畸变染色体 ５.MN基因座位上,Ｍ出现得概率为o.38,指得就是()。 A基因库B、基因频率Ｃ基因型频率Ｄ亲缘系数E。近婚系数 6。真核细胞中得ＲＮA来源于( )。Ａ、ＤNA复制Ｂ。ＤNA裂解C。ＤNA转化Ｄ.DNA转录 E 。DNＡ翻译 7。脆性X综合征得临床表现有( )、A智力低下伴眼距宽、鼻梁塌陷、通贯手、趾间距宽B智力低下伴头皮缺损、多指、严重唇裂及膊裂 C.智力低下伴肌张力亢进、特殊握拳姿势、摇椅足D、智力低下伴长脸、大耳朵、大下颁、大睾丸Ｅ.智力正常、身材矮小、肘外翻、乳腺发育差、乳间距宽、颈蹼 8.基因型为p‘邝‘得个体表现为( )。Ａ重型9地中海贫血B。中间型地中海贫血 C 轻型地中海贫血D静止型、地中海贫血 E.正常 9.慢性进行性舞蹈病属常染色体显性遗传病,如果外显率为90％,一个杂合型患者与正常人结婚生下患者得概率为( )、 Ａ.50％ B.45％ C.７5％D。25％ E.100% 1０.嵌合体形成得原因可能就是( )。A卵裂过程中发生了同源染色体得错误配对B卵裂过程中发生了联会得同源染色体不分离C生殖细胞形成过程中发生了染色体得丢失D.生殖细胞形成过程中发生了染色体得不分离Ｅ.卵裂过程中发生了染色体丢失 1１.人类成人期红细胞中得主要血红蛋白就是HbA,其分子组成就是( )、 A、nzp2 B.02n C.az～ｚD、028２E.ｔ222 12.生殖细胞发生过程中染色体数目减半发生在( )。Ａ、增殖期 B.生长期 C、第一次成熟分裂期 D、第二次成熟分裂期Ｅ。变形期 1３。关于X连锁臆性遗传,下列错误得说法就是( )Ａ。系谱中往往只有男性患者 B.女儿有病,父亲也一定就是同病患者 C.双亲无病时,子女均不会患病Ｄ.有交叉遗传现象 E.母亲有病,父亲正常,儿子都就是患者,女儿都就是携带者 １４.引起镰形细胞贫血症得ｐ珠蛋白基因突变类型就是()、 Ａ.移码突变B,错义突变 C.无义突变 D.整码突变E。终止密码突变 15。如果在某体细胞中染色体得数目在二倍体得基础上增加一条可形成( )。 A单倍体 B.三倍体C单体型 D.三体型Ｅ。部分三体型 １6.基因表达时,遗传信息得流动方向与主要过程就是( )。 ＡRＮA+ＤNＡ+蛋白质B、hｎRNA+mRＮA一蛋白质C.ＤＮＡ~tRNA一蛋白质Ｄ.DNA—mRＮA＋蛋白质 E.DNA-ＲNＡ一蛋白质 17。１４／21易位型异常染色体携带者得核型就是( )、A、46,XＸ,dｅl(15)(q1４q２1)
案例教学模式在医学遗传学教学中的实施与探索
案例教学模式在医学遗传学教学中的实施与探索 ［摘要］根据医学遗传学的学科特点，我们尝试了案例教学模式并加以实施，以寻求基础医学与临床医学的契合点，并探讨了案例教学模式的优势及案例教学中师生的角色和责任。 ［关键词］案例教学医学遗传学教学实施 医学遗传学是横跨基础医学与临床医学的桥梁。案例教学模式应用于医学遗传学教学中，就是在传授教学内容前以临床实践中的真实遗传病例或经典遗传学实验操作过程来抛“锚”，让学生通过分析思考以及相互间讨论争辩来解决问题。这与传统的教学习惯不同，大大缩短了教学情境和专业、临床实践、社会生活情境的差距，找到了基础医学与临床医学的契合点，使学生产生了极大的学习兴趣，获得了成功的喜悦，即让学生学有所乐、学有所获，并逐渐形成一种好学、乐学的学习状态。 一、医学遗传学案例教学实例 1.讲授遗传病的传递方式。在讲授各类遗传病的传递方式时，首先是一个临床真实病例记录，如一个患家族性多发性结肠息肉且已恶变为结肠癌的男性患者的临床病例报告，其中包括病史过程、临床症状、家族史，根据这些资料：（1）要求学生：绘制系谱图。（2）讨论交流：系谱特点。（3）归纳总结：常染色体显性遗传病的传递规律。（4）分析计算：患者同胞、子女的再发风险。（5）查阅资料：如何早期诊断？学生们课前查找资料已了解到本病早期可无症状，以后出现腹部不适，便次增多，腹泻、黏液血便等结肠炎样症状。早期诊断方法：一是钡灌肠检查。若见结肠多处或广泛充盈缺损则为结肠息肉。二是结肠镜检查。若见大量息肉布满结肠粘膜，活检即可确诊。（6）遗传咨询能力培养：如何对患者及亲属进行遗传咨询？作为优秀的医生，假如收治了结肠息肉或结肠癌患者，除了对病人进行治疗外，还应主动对病人进行遗传咨询，告诉病人患者的同胞及每个子女均有50%的概率得到致病基因。此外，对患者的其他亲属，如姨、舅、外甥等，也应进行“扩大的家庭遗传咨询”。再者，对这样的家系应该进行长期随访。这样的教学再现了遗传病的分析和诊治过程，培养了学生主动探究和自主学习的能力，更促使学生同情关爱病人，感受到作为“临床医师”和“遗传咨询师”的神圣感和责任感。 2.介绍遗传学的技术和方法。对一些遗传学技术和方法的介绍也是将相关
协和医学遗传学基础考试总结(个人整理)
1.医学遗传学(Medical Genetics)：是遗传学与医学相结合而产生的一门研究人类病理性状的遗传规 律和物质基础的一门学科。其研究对象为人类遗传病，研究遗传病发生机理、传递方式、诊断、治疗、预后、再发风险和预防方法，从而控制遗传病在一个家庭中的再发，降低它在人群中的危害，提高人口素质。 2.遗传病（inherited disease）：由于遗传物质改变导致的人类疾病 3.基因（Gene）:是位于染色体上具有遗传效应的DNA片段 4.基因型（Genotype）:个体一定基因位点上等位基因的组成 5.表现型（phenotype）:一定基因型的生物体所表现的形态、机能、行为和生化等表现 6.遗传病的分类： 根据在疾病形成过程中遗传因素和环境因素所起作用的大小，将人类疾病分为四大类： 1.遗传因素决定发病，看不到特定环境因素的作用，如短指（趾） 2.基本由遗传因素决定发病，但需要一定的环境因素诱发，如苯丙酮尿症等 3.遗传因素和环境因素都起作用 4.基本上是环境因素决定发病，与遗传因素无关。 7.遗传病的特征： （1）家族聚集性：遗传病往往表现为家族聚集性，但家族聚集的疾病并非都为遗传病，如坏血病等。 （2）先天性：遗传病多数为先天性疾病，但先天疾病并非都为遗传病，如由于母亲感染风疹病毒引起的胎儿白内障。 （3）遗传物质突变。 （4）垂直传递。 （5）终生性。 细胞分裂周期：连续分裂的细胞，从一次细胞分裂结束开始，到下次细胞分裂结束为止所经历的全过程，叫做一个细胞分裂周期，一个细胞分裂周期所需要的时间叫做细胞周期时间。细胞周期可分为间期和有丝分裂期。 突变Mutation致病突变Disease-causing mutation Exon外显子Intron内含子 核型：一个体细胞中全部染色体系统排列所构成的图像 核型分析：将一个细胞的全部染色体按照染色体的大小、着丝粒位置及其他特征配对、排列，以确认其是否具有正常的核型组成的过程。 染色体组(chromosome set)：人类等二倍体生物的每一个正常的精子或卵子的全部染色体。 亚二倍体(hypodiploid): 染色体数目少于二倍体数。缺失一条染色体的那对染色体将构成单体型(monosomy)。典型病例为45,X的女性性腺发育不全(Turner综合征）。 相互易位（平衡易位）(reciprocal translocation)：两条染色体发生断裂后形成的两个断片，相互交换连接而形成两条衍生的染色体。 罗伯逊易位(robertsonian translocation)：近端着丝粒染色体着丝粒处发生断裂，在着丝粒处重接，也称着丝粒融合(centric fusion)。 1. 三倍体形成的原因？ 1）双雄受精（dindry):受精时同时有两个精子入卵受精，可形成69，XXX；69，XXY；69XYY。 2）双雌受精（digyny):卵子发生第二次减数分裂时，次级卵母细胞由于某种原因，其第二极体的那一染色体组没有排出卵外，而仍留在卵内这样的与一个正常的精子受精后，即可形成核型为69，XXX或69，XXY 的受精卵。 2. 四倍体形成的原因？ 1）核内复制（endoreduplication): 在一次细胞分裂时，染色体不是复制一次，而是复制两次。每个染色体形成4条，染色体两两平行排列在一起，经过正常的分裂中期、后期和末期后，形成的两个子细胞均为四倍体细胞。 核内复制与四倍体形成是癌细胞较常见的染色体异常特征之一。 2)核内有丝分裂（endomitosis)： 是在进行细胞分裂时，染色体正常地复制一次，但至分裂中期时，核膜仍未破裂、消失，也无纺锤丝
2018医学遗传学_考试重点整理知识点复习考点归纳总结
单基因遗传病：简称单基因病，指由一对等位基因控制而发生的遗传性疾病，这对等位基因称为主基因。上下代传递遵循孟德尔遗传定律。分为核基因遗传和线粒体基因遗传。 常染色体显性（AD）遗传病：遗传病致病基因位于1-22号常染色体上，与正常基因组成杂合子导致个体发病，即致病基因决定的是显性性状。 常染色体完全显性遗传的特征 ⑴由于致病基因位于常染色体上，因而致病基因的遗传与性别无关即 男女患病的机会均等 ⑵患者的双亲中必有一个为患者，致病基因由患病的亲代传来；双亲 无病时，子女一般不会患病（除非发生新的基因突变） ⑶患者的同胞和后代有1/2的发病可能 ⑷系谱中通常连续几代都可以看到患者，即存在连续传递的现象 一种遗传病的致病基因位于1～22号常染色体上，其遗传方式是隐性的，只有隐性致病基因的纯合子才会发病，称为常染色体隐性（AR）遗传病。 带有隐性致病基因的杂合子本身不发病，但可将隐性致病基因遗传给后代，称为携带者。 常染色体隐性遗传的遗传特征 ⑴由于致病基因位于常染色体上，因而致病基因的遗传与性别无关， 即男女患病的机会均等 ⑵患者的双亲表型往往正常，但都是致病基因的携带者 ⑶患者的同胞有1/4的发病风险，患者表型正常的同胞中有2/3的可能 为携带者；患者的子女一般不发病，但肯定都是携带者 ⑷系谱中患者的分布往往是散发的，通常看不到连续传递现象，有时 在整个系谱中甚至只有先证者一个患者 ⑸近亲婚配时，后代的发病风险比随机婚配明显增高。这是由于他们 有共同的祖先，可能会携带某种共同的基因 由性染色体的基因所决定的性状在群体分布上存在着明显的性别差异。如果决定一种遗传病的致病基因位于X染色体上，带有致病基因的女性杂合子即可发病，称为X连锁显性（XD）遗传病 男性只有一条X染色体，其X染色体上的基因不是成对存在的，在Y染色体上缺少相对应的等位基因，故称为半合子，其X染色体上的基因都可表现出相应的性状或疾病。 男性的X染色体及其连锁的基因只能从母亲传来，又只能传递给女儿，不存在男性→男性的传递，这种传递方式称为交叉遗传。 X连锁显性遗传的遗传特征 ⑴人群中女性患者数目约为男性患者的2倍，前者病情通常较轻 ⑵患者双亲中一方患病；如果双亲无病，则来源于新生突变 ⑶由于交叉遗传，男性患者的女儿全部都为患者，儿子全部正常；女 性杂合子患者的子女中各有50%的可能性发病 ⑷系谱中常可看到连续传递现象，这点与常染色体显性遗传一致 如果决定一种遗传病的致病基因位于X染色体上，且为隐性基因，即带有致病基因的女性杂合子不发病，称为X连锁隐性（XR）遗传病。（血友病A）X连锁隐性遗传的遗传特征 ⑴人群中男性患者远较女性患者多，在一些罕见的XR遗传病中，往往