酶法提取枸杞多糖工艺研究
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酶法提取枸杞多糖工艺研究
梁敏1邹东恢1，2郭建华1，2
（1．齐齐哈尔大学2．黑龙江省普通高校齐齐哈尔大学农产品加工重点实验室）
【摘要】本文研究了酶法提取枸杞多糖的最佳工艺条件以及枸杞中多糖的分离方法。采用木瓜蛋白酶处理，对作用温度、加酶量、最适pH值、作用时间进行正交试验。确定了酶法提取枸
杞多糖的最佳工艺：加酶量0．3％，酶解反应的pH值为7．0，温度为45℃，反应时间为2h，提取
率可达14．9％。
【关键词】枸杞多糖；酶法提取；正交试验；工艺
中图分类号：TS255．7文献标识码：A文章编号：1673-7199(2010)03-0104-03
枸杞子为茄科植物枸杞的成熟果实，是我国传统的滋补中药材。《本草纲目》中记载枸杞子具有坚筋骨、补精气诸不足、明目安神、令人长寿等功效。目前人们对枸杞子多糖进行了较广泛的研究，发现枸杞多糖具有增强机体免疫力、抗肿瘤、抗衰老、降血脂、降血糖、抗疲劳、护肝、防辐射、抗缺氧等功效，且无任何毒副作用，因此枸杞多糖的分离纯化及其药理作用研究已成为一个热点课题。近年来生物酶广泛应用于各个领域，在国内也开始将其应用于药物提取中，枸杞多糖通常被包裹在植物细胞壁内，并且多糖往往和蛋白质结合在一起，以蛋白多糖的形式存在。研究表明中性蛋白酶能有效酶解与多糖结合在一起的蛋白质，从而将多糖释放出来而提高多糖的得率，提高了多糖的纯度，对枸杞多糖的研究开发具有现实意义。
1试验方法与工艺过程
1．1试验原料
从市场中购得新鲜枸杞，清洗干净，去除杂质，之后适当切块放入真空干燥箱干燥，待枸杞恒重，放入粉碎机中粉碎，将粉碎后的枸杞粉依次通过40、60、80、100目的筛，过筛之后把各级枸杞粉分别装到清洁干燥的烧杯中，置于真空干燥箱中待用。
1．2试验试剂与仪器
木瓜蛋白酶，北京世纪时尚科贸有限公司；Sephadex G－75，Pharmacia；苯酚，天津市科密欧化学试剂开发中心；葡萄糖、活性炭，天津市凯通化学试剂有限公司；使用试剂均为分析纯。真空干燥箱，上海益恒试验仪器有限公司；电热恒温水浴锅、离心机、透析袋、THZ－82A台式恒温振荡器，上海跃进医疗器械厂；HL－2S恒流泵，上海青浦沪仪器厂；九阳料理机，山东九阳小家电有限公司；SHZ－D（III）循环水式真空泵、722紫外分光光度计、PB－10pH计，北京赛多利斯仪器系统有限公司；BSZ－100自动部分收集器，上海沪西仪器厂；Lambda－35紫外可见分光光度计，美国PE公司。
1．3试验方法与步骤
称取80目的枸杞粉3g，放入到250mL的三角瓶中，然后加蒸馏水35mL混合均匀后置于40℃水浴锅中，水浴30min，调节pH值，加入一定比例木瓜蛋白酶混合，加入5mL蒸馏水溶解，枸杞溶液放在水浴中预热至酶解温度，将酶液加入到枸杞溶液中，在恒温振荡器上提取，反应结束，将三角瓶放到沸水锅中，10min沸水浴灭酶，灭酶结束，冷却至室温，将酶提取液放入到离心管中，调至5000r／min离心，取上清液，即得到酶提取多糖清液。
1．4葡萄糖标准曲线的制定
以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，绘制标准曲线，获得线性回归方程。直线方程为：Y＝
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食品工程·技术
表1
酶法提取枸杞多糖正交试验结果
试验号
加酶量
A （％）
温度
B （℃）
pH 值C
时间D （h ）
多糖提取率
（％）
11（0．3）1（35）1（5．0）1（1）12．6212（45）2（6．0）2（2）14．6313（55）3（7．0）3（3）13．742（0．2）12312．35223113．06231213．373（0．1）13213．18321311．09
332110．7
K 140．938．036．936．3K 238．638．637．641．0K 334．837．739．837．0k 113．612．712．312．1k 212．912．912．513．7k 311．612．613．312．3R
2．0
0．3
1．0
1．6
图1粒度对枸杞多糖提取率的影响图2
料液比对枸杞多糖提取率的影响
0．5528X ＋0．0114，回归系数为0．9961，在5～50μg ／mL 范围内呈良好的线性关系。
1．5多糖总量的测定
采用苯酚－硫酸比色法，在490nm 波长处测定吸光
度，再通过已经测定的葡萄糖标准曲线计算求得枸杞中的多糖含量。
1．6蛋白质去除方法
采用Sevag 法去除粗多糖中的蛋白质。1．7
多糖的分离提取
枸杞多糖在NaOH 水溶液中溶解度大，所以先用
0．5％氢氧化钠初步提取，之后取清液，用透析袋透析去除杂离子，透析后去除杂蛋白，2％浓度活性炭脱色
1h ，加入无水乙醇，使溶液中乙醇的浓度达到75％进行醇沉，醇沉过程中要将其保存在4℃冰箱中，保持
24h ，4500r ／min 离心15min ，取沉淀，置于真空干燥箱中干燥，即可得到枸杞粗多糖。
1．8多糖的纯化
枸杞多糖粗品水溶解后用SephadexG－75色谱分
离，干燥获得纯枸杞多糖。
2
结果与讨论
2．1
物料粒度对枸杞多糖提取率的影响
物料粒度对提取率将有较大影响，将粉碎后的枸杞粉依次通过40、60、80、100目的筛，得到40以下、
40～60、60～80、80～100、100目粒度以上的样品，取一定量样品，选择料液比1∶15，温度45℃水浴中浸提1h ，结果如图1所示，80～100目粒度物料多糖提取率最高。
2．2料液比对枸杞多糖提取率的影响
选择料液比1∶l0、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30，分别于
45℃水浴中浸提1h ，枸杞多糖提取率（％）分别为2．4、
3．2、3．5、3．6、3．6，结果如图2所示，当料液比在1∶15～l∶25之间多糖提取率增长较快，继续提高料液比多糖提取率仍有升高，但提高速率减小。对料液比的选择，若加水太少提取不彻底；加水太多，降低了提取液的固形物含量，不利于以后的分离，而且加重了生产中负担，因此试验确定料液比为1∶25。
2．3正交试验结果
影响枸杞多糖的提取因素很多，通过预试验选择
其中的4个因素作为研究的对象：加酶量（对底物）、酶解温度、pH 值、反应时间。每一个因素又包括3个水平，选择四因素三水平正交试验，试验结果见表1。
由表1可知：按极差的大小顺序是A＞D＞C＞B ，以
A 为主要因素，D 次之，C 再次之，
B 是次要因素。经
比较4个因素的不同水平下的各自的平均值，发现
A 1D 2C 3
B 2在每个因素的4
个水平下对枸杞多糖的提取率
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图3SephadexG－75色谱分离图
图4枸杞多糖紫外吸收图谱
的提高最大，由此确定枸杞多糖的提取率的最优条件为A 1D 2C 3B 2。
通过正交试验得到酶法提取枸杞多糖的最佳工艺条件为：加木瓜蛋白酶0．3％，酶解温度45℃，pH 值
7．0，反应时间2h ，采用酶法工艺优化得到多糖的提取率为14．9％。
2．4色谱分离样品制备
（1）待纯化样液的制备：称取干燥后的粗多糖
50mg ，在100mL 容量瓶中定容。
（2）色谱柱：柱长80cm ，直径2．0cm 。装柱60cm ，填充物为SephadexG－75。洗脱液为0．05moL ／L 的NaCl ，在流速5mL ／h 下平衡72h 。
取粗多糖10mL ，上柱。用恒流泵控制流速（15mL ／h ），自动部分收集器收集，每管收集2．0mL ，用苯酚－硫酸法测定各洗脱液490nm 处吸光度，由吸收曲线得到一个吸收峰，收集其流出液，冷冻干燥得到纯化样品。
2．5枸杞多糖紫外吸收分析
紫外吸收光谱应用很广，可用于有机化合物的结构表征和有机化合物定量分析。由于此法灵敏度高，能检查出10－4～10－5moL ／L 甚至10－6～10－7moL ／L 浓度的化合物，因此在本试验中采用此法测定其中的微量杂质蛋白质，结果如图3所示。
采用美国PE 公司的Lambda－35紫外可见分光光度计，在190．0～1000．0nm 范围内对提取的枸杞多糖进行紫外光谱扫描，从多糖紫外吸收图谱（图4）上可见扫描吸收曲线较为光滑，在280nm 处的曲线未出现峰值，所以蛋白质的含量非常微小。
3结论
（1）本试验采用木瓜蛋白酶处理枸杞，得到优化
试验条件为：加木瓜蛋白酶量为0．3％，酶解反应的温度为45℃，pH 值为7．0，反应时间为2h ，提取率为
14．9％，采用酶法提取枸杞多糖相比于传统工艺提取率提高65．6％。
（2）多糖样品的紫外扫描得到的紫外吸收图谱可以看出在280nm 处的曲线未出现剧烈波动或峰值，所以采用此法提取的枸杞多糖产品中蛋白质的含量微小，为进一步提取制备枸杞多糖的研究提供一定的参考。
参考文献
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［M ］．北京：北京科学技术出版社，
2002．
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京：化学工业出版社，2008．
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［6］念保义，王铮敏，黄河宁．超声提取、超滤分离香菇多糖工艺的
研究［J ］．化学与生物工程，2004，21（4）：16～17．
［7］张民，张声华．枸杞多糖的制备及其结构研究［J ］．食品研究与
开发，2007，28（7）：68．
收稿日期：2009－09－24
作者简介：梁敏（1967—），女，齐齐哈尔人，副教授，主要从事化学分离工程及食品分析方面教学与科研工作。通信地址：
（161006）齐齐哈尔市文化大街42号
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黑果枸杞色素最佳提取工艺研究
黑果枸杞色素最佳提取工艺研究 目的研究黑果枸杞色素的最佳提取工艺条件。方法通过单因素和多因素正交试验，对影响提取物中色素含量的各因素进行了研究。结果影响黑果枸杞色素提取率的因素大小依次为：固液比>溶剂比>浸提温度>浸提时间。黑果枸杞色素的最佳提取工艺条件为5%盐酸和85%乙醇混合溶剂做浸提剂，溶剂比1∶1，提取温度70 ℃，提取时间4 h，固液比1∶20。结论优选的工艺稳定可行。 标签：黑果枸杞；色素；提取；正交试验 黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr）为茄科（Solanaceae）枸杞属（Lycium L.）植物，药用部位为干燥的果实。黑果枸杞分布于我国西北地区，具有补肾益精、养肝明目、补血安神、生津止渴、润肺止咳等功效[1]。黑果枸杞含有人体必须的脂肪酸和8种人体必须的氨基酸，还有一定量的维生素C[2]。其成熟浆果富含紫红色素，是一种珍稀的天然花色苷类色素资源，该色素含量达387.9 mg/100 g[3]，对环境无污染，有望成为化妆品、制药、饮料和食品的着色剂，具有很高的开发利用价值和前景[4]。 现代药物学研究认为，枸杞色素是枸杞中的重要生物活性成分之一，主要包括类胡萝卜素和少量叶黄素及其他有色物质[5]。有关黑果枸杞各因素最佳提取工艺的研究报道较少，本研究通过单因素试验优选了最佳提取溶剂，同时研究了黑果枸杞色素提取过程中温度、时间、溶剂配比、料液配比等多种因子对提取率的影响，旨在选择各个影响因素的最佳提取条件，确定最佳的提取工艺参数，为黑果枸杞色素的开发利用提供理论和技术支撑。 1 仪器与试药 752型紫外可见分光光度计（上海色谱仪器有限公司），粉碎机，电子分析天平，恒温水浴锅，50 mL量筒，25 mL具塞试管，60 mm口径漏斗等。 黑果枸杞（购于兰州复兴厚中药材有限公司，经甘肃农业大学中草药系陈垣教授鉴定为黑果枸杞Lycium ruthenicum Murr）的干燥成熟果皮，粉碎成40目后备用。无水乙醇、正丁醇、浓盐酸、氢氧化钠、乙酸乙酯、丙酮（均为分析纯）。 2 方法 2.1 色素含量测定 黑果枸杞色素的乙醇提取溶液在紫外-可见最大吸收波长545 nm[6]处测定吸光度3次，取平均值，根据比尔定律A=εlC （A为吸光度，ε为吸收系数，C 为样品浓度，l为光程即比色皿厚度）可知吸光度与色素浓度成正比，所以，可用吸光度直接表示色素浓度或含量大小。
酶法提取枸杞多糖工艺研究
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枸杞多糖分离纯化及性质研究
第25卷 第3期 2008年6月 黑龙江大学自然科学学报JOURNAL OF NAT URAL SC I E NCE OF HE I L ONGJ I A NG UN I V ERSI TY Vol 125No 13 June,2008 枸杞多糖分离纯化及性质研究 张 晶1,2, 韩喜江1, 李艳波2 (1.哈尔滨工业大学化学系,哈尔滨150001;2.哈尔滨学院生化学院,哈尔滨150080) 摘 要:对东北枸杞中提取的多糖,通过DEAE -cellul ose (OH -)色谱柱和Sephadex G -100 凝胶色谱柱进行了分离纯化,通过凝胶色谱和液相色谱对其纯度进行了鉴定,并通过红外光谱初步分析了其基团构成。 关键词:枸杞多糖;分离纯化;纯度鉴定 中图分类号:R28412,TS244文献标志码:A 文章编号:1001-7011(2008)03-0377-04 收稿日期:2008-01-16 作者简介:张 晶(1973-),女,实验师,硕士,主要研究方向:应用化学、食品化学 0 引 言 枸杞是一种食药两用植物,具有多种药理作用和生理功能。枸杞多糖是枸杞中的主要活性成分之一,其中有关枸杞多糖的化学、药理与临床研究十分瞩目,已有不少研究报道枸杞多糖具有增强免疫力、抗癌、防衰 老、抗疲劳、降血压、降血糖、抑制肿瘤生长和细胞突变等作用[1-2]。鉴于枸杞多糖具有多种药理作用和生理 功能,因此,对其提取分离方法及纯化的研究显得尤为重要[3]。本文重点对牡丹江地区枸杞多糖的分离纯 化及组成结构作了初步探讨。 1 实验材料和方法 111 材料与仪器 牡丹江地区枸杞子;其它试剂均为分析纯。自动部分收集器,台式干燥箱,紫外分光光度计,Perkin -El 2mer 红外光谱仪,Aglilent 1100液相色谱仪等。 112 枸杞多糖提取 称取100g 枸杞子60℃烘干,放置干燥器18h 后粉碎,称取10g 干燥的枸杞粉,用氯仿-甲醇(2∶1)300mL,用索氏回流装置于60℃回流脱脂。残渣风干后,加入适量水,在100℃,料水比1∶15条件下水浴提取4h,抽滤,将滤液蒸发浓缩为原体积的1/4后,将浓缩液滴入3倍体积的95%乙醇中,静置,抽滤,固形物 分别用95%乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤,水浴加热干燥得枸杞粗多糖[4]。 113 枸杞多糖分离纯化 11311 DEAE -cellul ose (OH -)色谱柱层析 将分离提取的枸杞粗多糖110g 溶于水,上DEAE -cellul ose (OH -)色谱柱,梯度洗脱法洗脱各级分,洗 脱液分别为蒸馏水、011mo1?L -1,0125mol ?L -1和015mol ?L -1NaCl,011mol ?L -1Na OH 各100mL,流 速为30滴每分钟,自动部分收集器收集洗脱液,将收集到的样品溶液分别在280nm 波长下比色,然后用硫 酸一蒽酮法测定总糖含量。以试管数目为横坐标,以吸光度为纵坐标作DE AE -cellul ose (OH -)色谱柱洗脱 曲线图。分别合并各主峰溶液,浓缩,流水透析,冷冻干燥,得LBP -1,LBP -2,LBP -3和LBP -4.11312 Sephadex G -100凝胶色谱柱。 收集多糖含量最多的组分,进行凝胶色谱分离。流速为013mL ?m in -1,每支试管接收3mL 洗脱液,硫 酸一蒽酮法检测多糖洗脱状况。以洗脱管数为横坐标,吸光值为纵坐标作流出曲线,合并主峰溶液,浓缩,流水透析,冷冻干燥。
枸杞多糖提取工艺
目录 摘要 (1) 英文摘要 (2) 1 引言 (3) 2 材料与方法 (4) 2.1 实验材料与仪器设备 (4) 2.2.1 葡萄糖标准溶液的配制与曲线的绘制 (4) 2.2.2 枸杞多糖溶液的提取方法 (5) 2.2.3 苯酚-硫酸法测定多糖含量 (6) 3 实验结果与分析 (6) 3.1 单因素选择试验 (6) 3.2提取率与浸提温度之间的关系 (6) 3.3 提取率与料水比之间的关系 (7) 3.4 提取率与浸提时间之间的关系 (8) 3.5 正交试验优化工艺条件 (9) 4 结论 (10) 参考文献 (11) 致谢 (12)
枸杞子多糖提取工艺的探索 化学化工学院应用化学专业 摘要：利用正交分析法对枸杞多糖的提取工艺进行优化。以枸杞为主要原料，先采用单因素试验法分别对影响枸杞多糖提取率的主要因素进行分析研究，最后再利用正交试验法优化选取一个最佳的工艺条件。试验结果表明，枸杞多糖的热水浸提法最佳工艺条件为浸提温度90℃，料水比1:20，浸提时间2h。 关键词:枸杞多糖;水浸提取;单因素试验；正交试验
Exploration of Lycium Barbarum Polysaccharides Extraction Technology College of Chemistry and Chemical Engineering Applied Chemistry Specialty Chen Fei (20907031003)Director: Xu Han (Lecture) Abstract: To optizime the extraction technology of lycium barbarum polysaccharides by orthogonal methodoloy. The main factors were studied effecting the extraction of lycium barbarum polysaccharides by single factor experiments. And then, the optimum extraction conditions of lycium barbarum polysaccharides was studied by orthogonal experiment. The optimized conditions for the extraction of polysaccharides was obtained as follows: extraction temperature 90℃, material to water1∶35(W∶V) , extraction time 2 h. Keywords:lycium barbarum polysaccharides; flooding extraction; single factor experiments; orthogonal experiment
枸杞子中多糖含量的测定(1)
枸杞子中多糖含量的测定 柳婷，胡浩斌 (陇东学院化学化工学院，甘肃庆阳745000) 摘要：本文是用分光光度法测定枸杞子中的含糖量[1]。先用80%乙醇提取以除去单糖、低聚糖、生物碱等干扰成分，然后用蒸馏水提取其中所含的多糖类成分。多糖在硫酸作用下，水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，与苯酚缩合成有色化合物。用紫外分光光度法[2]测定其枸杞子多糖含量，本法简便，显色稳定，灵敏度高重现性好。 关键词:枸杞子；多糖；紫外分光光度计 Detection of Polysaccharide in Lycium barbarum Liu Ting, Hu Hao-Bin (College of Chemistry & Chemical Engineering, Longdong University, Qingyang 74500, China) Abstract:This paper is utilized spectrophotometry to detect Polysaccharide in Lycium barbarum..First,use 80% ethanol to remove simple sugars, oligosaccharides, alkaloids etc interference ingredients, and then extracted the ingredients. Of polysaccharose with distilled water. In Sulfuric acid condition, polysaccharide hydrolysis into monosaccharides, and rapidly dehydrated to furfural derivatives, then condense with phenol into colored compounds. Using spectrophotometry to detect polysaccharide in Lycium barbarum,the method is simple, color stability, high sensitivity and good reproducibility. Key words:Lycium barbarum; polysaccharose; spectrophotometry 枸杞子（Lycium barbarum是我国传统的中药材和重要经济作物，性状呈类纺锤形，略扁，长6～21 mm,直径3～10 mm。表面鲜红色或暗红色，顶端有小凸起状的花柱痕，基部有白色的果梗痕，果皮柔韧，皱缩，果肉肉质，柔润而有粘性，种子多数，类肾形，无臭，味甜，微酸，具有滋肾补肝、润肺明目等功能。 近年来，人们对枸杞子的药理作用进行了深人研究，发现枸杞子能增强机体免疫力[3]、抗肿瘤、抗辐射[4]、抗疲劳[5]、防衰老、增加造血功能等。临床医学研究还表明，枸杞子对糖尿病[6]、高血压[7]、视神经萎缩、肾炎、肝炎[8]等有显著疗效。对于枸杞子的上述功能的重要作用因子，一般认为与枸杞子中存在的枸杞多糖有关。因此，开始研究枸杞多糖，测定枸杞多糖的含量就显的非常重要。 鉴于枸杞多糖的分离纯化[9]困难,有关结构性质方面的研究报道甚少,枸杞多糖的生理活性,还必需从分离纯化、结构特征及药理作用3方面展开深入研究。这样,医学临床应用与保健型枸杞饮品[10]的开发才有坚实的理论基础。本试验主要完成枸杞多糖的分离与提纯，并对
枸杞子多糖含量的测定实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除枸杞子多糖含量的测定实验报告 篇一：实验三多糖含量的测定 实验三多糖含量的测定 一、实验目的 1、分光光度法测多糖的原理和方法 2、用officeexcel作标准曲线 二、仪器与试剂 1、仪器：7200分光光度计、水浴锅、电子天平 2、试剂：1水葡萄糖、5%苯酚溶液、浓h2so4、dh2o 3、器皿：50ml容量瓶、10ml量筒、玻棒、洗耳球、烧杯、试管 三、步骤 1、标准曲线的绘制 ①取1水葡萄糖0.551g于50ml容量瓶，加入蒸馏水溶解并小心稀释至刻度，再取5ml于50ml容量瓶，加蒸馏水稀释,即1.0mg/ml。 ②分别量取0.25ml,0.5ml,1.0ml,1.5ml,2.0ml,2.5ml
分别置于已编号的50ml容量瓶，加蒸馏水定容。 ③分别吸取上述溶液各2.0ml,再加入5%苯酚1ml,摇匀后迅速加入5ml浓h2so4，摇匀后，室温5min，90oc水浴15min，冷却至室温。 空白对照：2ml蒸馏水+1ml5%苯酚+5ml浓硫酸 吸光度A得浓度c与吸光度的线性方程y=ax+b ④准确量取多糖溶液（待测）2.0ml于50ml容量瓶中，加蒸馏水定容，方法同上述。 四结果 ①计算浓度（待测液） 本组所测得多糖溶液（待测）的吸光度为的0.385，代入根据吸光度A得浓度c与吸光度的线性方程 y=14.255x+0.0309，可得待测液的浓度为 0.025*25=0.625mg/ml.。②实验主要步骤（记录） 步骤记录： Ⅰ首先配制浓度分别为0.005mg/ml、0.01mg/ml、 0.02mg/ml、0.03mg/ml、0.04mg/ml、0.05mg/ml的葡萄糖溶液；然后取配好的溶液各2.0ml,再加入5%苯酚1ml,摇匀后迅速加入5ml浓h2so4，；不断震荡，溶液逐渐变为褐色，放出热量，且随着葡萄糖浓度的增加，溶液的颜色也不断变深；室温5min，90oc水浴15min，反应更为充分，溶液颜色有稍微加深，冷却至室温；最后用7200分光光度计一一测量其
枸杞多糖提取论文
第一章综述 1前言 1.1枸杞 1.1.1枸杞的自然属性 枸杞(Lycium barbarum)别名苟起子、甜菜子、地骨子等，是茄科植物枸杞(Lycium chinense Miller)的成熟果实。是我国重要的药用植物资源，是我国受原产地保护的药食两用的药材和传统出口创汇产品。早在2000多年前，人们已经开始了对枸杞的利用。《诗经》记载“陟彼北山，言采其杞”。宋?苏轼《小圃?五咏》赞枸杞曰“根茎与花实，收拾无弃物”。《本草纲目》中记：“久服杞子，坚筋骨，轻身不老，耐寒暑”。《本草汇言》记“枸杞能使气可充，血可补，阳可生，阴可长，火可降，风湿可去，有十全之妙焉”。《保寿堂方》载“春枸杞叶，名天精草；夏采花，名长生草；秋采子，名枸杞子；冬采根，名地骨皮”。根据《郭案驼种树书》记载，大约在1200多年前，我国就开始栽种枸杞了。此外，《神农本草经》、《食疗本草》、《本草纲目》和《本草备要》等古书中都有关于枸杞的记载。 枸杞具有滋补肝肾,益精明目的作用。作为我国常用中药，枸杞被广泛应用于临床，主治肝肾阴亏，头晕目眩，腰膝酸软，消渴遗精，目昏多泪，虚劳咳嗽。枸杞子又作为“药食同源”的植物性平补保健食品，被广泛用于泡酒、泡茶、泡水、煲汤、煮粥等。大量研究表明枸杞中含有多种可被利用的生物活性成分，其中最具有提取利用价值的是枸杞多糖，其次是枸杞色素和枸杞籽油。 枸杞的生长状况 枸杞属约有80个种，多数分布在南、北美洲。以美国的亚利桑娜州和阿根廷形成两个分布中心，南美洲种类最多。欧亚大陆约有10个种。约在17世纪中叶引到法国，后来在欧洲，地中海国家，韩国以及北美洲国家都有栽种。我国有7个种和3个变种，多数分布在西北和华北。目前我国人工栽培的构祀有宁夏枸杞及北方枸杞。枸杞原产我国北方，河北、内蒙古、山西、陕西、甘肃、宁夏、新疆和青海等省都有野生，而中心分布区域在甘肃河西走廊、青海柴达木盆地以及青海至山西的黄河沿岸地带。常生于土层深厚的沟岸、山坡、田埂和宅旁。据统计我国枸杞种植区面积已经由1996年的45万亩迅速增加到100万亩，年产量达3000万公斤以上，其中新疆、宁夏、内蒙古、河北等省地区的枸杞种植面积和产量居全国前列。有500多年栽培历史的宁夏，所产枸杞以粒大、皮薄、肉厚、营养丰富、药用价值高而享誉国内外，远销港澳、东南亚、西欧及北美等地区和国家。2001年，宁夏省枸杞种植面积达25万亩，占全国枸杞种植面积的17%，年产量达115.5万公斤，全区枸杞干果产量和出口量分别占全
枸杞多糖的提取工艺研究
枸杞多糖的提取工艺研究 [摘要]枸杞为茄科植物枸杞的干燥成熟果实，主产于河北与宁夏，是一种食药两用植物，味甘、性平、入甘、肾经，具有多种药理作用和生物功能。枸杞多糖是枸杞中的主要活性成分之一。其中有关枸杞多糖的化学、药理与临床研究十分瞩目，已有不少研究报道枸杞多糖具有增强免疫力、抗癌、防衰老、增强造血功能、防止遗传损伤、抑制肿瘤生长和细胞突变等作用。鉴于枸杞多糖具有多种药理作用和生理功能，引起了人们的广泛关注。本试验研究超声辅助提取法在枸杞多糖提取中的应用，采用正交实验的方法筛选出提取枸杞多糖的最佳提取条件。当加水量为20倍，提取时间为40min，提取温度为80℃，超声功率为250W 时枸杞多糖得率最高，可达到3.06%。 [关键词]枸杞多糖；超声辅助提取；正交实验 多糖（Polysaccharide）又称多聚糖，由是由十个以上的单糖基通过普键连接而成的一类结构复杂的大分子化合物。多糖类一般不溶于水，无甜味，不能形成结晶，无还原性和变旋现象。多糖可以水解，最终水解得到单糖。枸杞多糖是枸杞的有效成分之一，经研究发现，枸杞多糖既是保健功能因子，又是一种非特异性免疫增强剂，具有调节免疫功能、降血糖、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤、增加造血功能、防止遗传损伤等作用。 本实验采用正交试验方法研究超声辅助提取法在枸杞多糖提取中的应用，并筛选出提取的最佳工艺条件。 1 实验材料与仪器 2实验步骤与方法 2.1 多糖含量标准曲线的绘制：采用H2SO4苯酚法对其加以改良。精密称取无水葡萄糖标准品25.0mg，置于25ml容量瓶中，以蒸馏水定容至刻度，配成1mg/ml的储备液，分别精密吸取储备0、0.5，1.0，1.5，2.0，2.5ml，置25ml 容量瓶中，加5%苯酚溶液1.0ml，摇匀，用移液管迅速垂直滴加浓硫酸各5.0ml，再用蒸馏水稀释至刻度，沸水浴中煮沸15min；冷却后用分光光度计在490nm波长处测定其吸光度值；以试样糖含量C（mg/ml）为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，并计算回归方程。 2.2 枸杞多糖得率计算：多糖得率=枸杞粗多糖质量（g）÷枸杞原料质量（g）×100% （公式2-1） 2.3 超声辅助提取枸杞多糖 2.3.1 枸杞多糖提取工艺流程：枸杞→粉碎→石油醚回流脱脂（水浴温度60℃）→过滤→滤渣风干→样品称重（预处理样）→超声波法提取→抽滤→粗
枸杞多糖的生化和降血糖活性讲解
枸杞多糖的生化分析和降血糖活性 摘要：本实验研究了枸杞多糖的纯化，表性特征和降血糖活性。通过超滤膜分离获得水溶性多糖（LBP），并通过DEAE纤维素柱和Sephadex的色谱法进一步纯化G-150得到LBP3a和LBP3b。分析表明LBP3b的平均分子量（Mw）为4.92kDa。单糖组成分析显示，LBP3b由摩尔比为5.52：5.11：28.06：1.00：1.70的甘露糖，鼠李糖，葡萄糖，半乳糖和木糖组成。并通过UV，FTIR，NMR和SEM研究了LBP3b的初步结构特征。体外细胞实验显示，LBP3b以剂量依赖的方式显著抑制葡萄糖的吸收。研究表明LBP3b具有作为抗糖尿病药物的潜在用途。 1.引言 糖尿病（DM）是指具有异常高水平的血糖的慢性代谢病，已经成为世界上主要的健康问题。它是由胰岛素分泌缺乏或器官对胰岛素的反应减弱引起的。包括1型和2型在内的DM在全球发病率急剧增加，到2030年估计超过4亿。许多口服降糖药，如双胍类和磺酰脲类可用于治疗糖尿病，但这些药物是化学合成的，缺乏多剂量方案，且高成本，具有不良副作用和毒性。因此，研究和发现新型更安全和更有效的替代品是至关重要的，其中传统的食用和药用资源已成为研究低血糖活性的焦点]。 枸杞，属于茄科，是中国著名的草药，已使用了2300多年。目前，枸杞受欢迎的功能食品已被广泛使用，其具有很大功效，如减少血糖和血清脂质，滋养眼睛，肾脏和肝脏，抗辐射，提高免疫力，抗衰老，抗癌，抗疲劳，增强血细胞生成，改善男性不育。据报道，枸杞果干中有胡萝卜素，氨基酸，微量矿物质，维生素，脂肪酸，多糖和甜菜碱与健康相关的生物活性成分。 在枸杞的这些化学成分中，最好研究的组分是水溶性的多糖（LBP）估计占干果的5-8％。许多关于药理学和光化学的研究已经证明LBP是以上的生物活性的主要成分之一[15-17]。然而，由于LBP的结构复杂性，不同的提取和纯化方法得到的LBP具有不同组分，结构和功能。而每种LBP的结构和功能从未进行过全面和深入的讨论。
枸杞多糖的提取与鉴定
枸杞多糖的提取与鉴定 1242818杨立君实验原理 强酸可以使糖类脱水生成糠醛。生成的糠醛或羟甲基糠醛与蒽酮脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色。颜色的深浅可以作为定量的标准。这一方法具有很高的灵敏度，糖含量在30μg左右就能进行测定，所以可以作为微量测糖之用。 一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适]1[。 实验试剂 1.标准葡萄糖试剂：将葡萄糖105℃烘干至恒重（2h），准确称取50mg,无离子水定容至500mL,终浓度为0.1mg/mL. 2.蒽酮-浓硫酸试剂：称取0.1997g蒽酮，溶于100mL浓硫酸，现用现配。 3.葡萄糖，阿拉伯糖，甘露糖]3[],2[ 4.硫代硫酸钠溶液，活性炭，正丁醇，无水乙醇，丙酮。三氯甲烷，甲苯胺乙醇溶液 实验器材 分光光度计，超速离心机，电炉，烧杯，试管，干燥器，滤纸，层析缸以及其他相关玻璃仪器 实验流程 (一) 提取 枸杞干果粉碎，氯仿- 甲醇（2∶1）回流脱脂8~10 h 近无色，挥干溶剂以后将脱脂后的枸杞样品放入烧杯中，分3次加15、12、10 倍量的蒸馏水于90 ℃水浴提取，每次2 h；收集3 次的滤液减压浓缩至约200 mL，转移到大烧杯中，加4 倍量的95%乙醇，沉淀12 h 后抽滤，并依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚 洗涤，干燥后便得到枸杞多糖的粗制品。]4[ （二）纯化 多糖粗品加水溶解，4 000 r/min 离心10 min 后取上清液，加30%双氧水适量，40 ℃保温4～6 h 后，加三氯甲烷-正丁醇（4∶1，Sevag 法）溶液沉淀蛋白，取上清液；此步骤反复多次，直到无白色絮状沉淀出现。将除去蛋白的多糖溶液浓缩后，转移到分子排阻为8 000～10 000 Da 的透析袋中，流水透析24 h 后，蒸馏水透析过夜，溶液颜色变淡，浓缩后 真空干燥得枸杞多糖精制品。]4[ (三) 理化性质分析 将枸杞多糖精品分别加入水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和正丁醇中，观察其溶解性。另在浓硫酸存在下观察枸杞多糖与α-萘酚的作用，于界面处观察颜色变化。 （四）蒽酮比色法测定含量
枸杞多糖含量的准确检测
申请科研资助项目申报书 项目或课题名称：枸杞多糖含量的准确检测 申请单位：宁夏瑞碧枸杞产业有限公司 联系者姓名： 联系者电话： 宁夏瑞碧枸杞产业有限公司 二00八年二月
一、申请单位的基本情况： 宁夏瑞碧枸杞产业有限公司是由陕西方舟健康产业集团投资，以枸杞汁﹑枸杞干果﹑枸杞冻干粉﹑枸杞提取物等枸杞系列产品为主的专业供应商。目前，公司在宁夏枸杞原汁产业中属龙头企业。公司注册资本1800万，员工63人，与南梁农场等通过有机认证的基地建立了稳定的鲜果原料供应关系，并建成目前国内最大的枸杞原汁加工线，每榨季产量可达2000吨以上。公司严抓质量管理，已通过ISO 认证﹑HACCP认证及Kosher认证。 为加强公司技术力量，我们先后与中国科学院上海有机化学研究所、陕西师范大学生命科学院﹑北京食品研究所、西北大学生命科学学院、西安理工大学理学院、第四军医大学等建立了密切的合作关系，在科研开发上不断精进，以增强公司核心竞争力。 二、课题研究的目的及意义： 国内一些大专院校科研单位的科技工作者近几年来从事宁夏枸杞有效成份分析，认为枸杞多糖是宁夏枸杞最主要的生物活性物质。科学试验证明，枸杞里的一种特有成份能使P—24抗体测值增加，促进T淋巴细胞增高。所谓的一种特有成份就是指枸杞多糖(LBP)。研究表明，枸杞多糖是由阿拉伯糖、鼠李糖、术糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖及半乳糖醛酸组成的酸性杂多糖的糖链与蛋白质的肽链以共价键的形式结合的含肽链多糖，分子量均大于1万。 北京医科大学、华中农业大学和中科院上海有机化学研究所等单位对枸杞多糖进行了分离纯化，并且对分子量、结构、基本性质进行
枸杞多糖提取工艺比较及体外抗氧化性研究
不同工艺的枸杞多糖提取率比较及其体外抗氧化性研究 枸杞多糖是一种优质的水溶性植物多糖，提取自宁夏枸杞的果实。现代药理研究已表明，枸杞多糖能够改善老年人易疲劳、食欲不振、视力模糊等症状，同时还是枸杞子中调节人体免疫、延缓衰老的主要活性成分。 枸杞多糖作为西安源森生物公司的主打产品，已被广泛应用于食品饮料以及保健品领域。为向客户提供更高品质的产品，日前，西安源森生物实验室就枸杞多糖的不同提取工艺进行对比研究，并对枸杞多糖体外抗氧化性进行了测定。 实验概述: 1. 西安源森生物实验室分别用三种提取方法：浸泡提取法、超声波提取法和微波提取法提取枸杞多糖；然后采用硫酸- 苯酚法对多糖含量进行定性定量分析，得出不同提取方法所得的枸杞多糖含量及提取率； 2. 根据枸杞粗多糖对自由基的清除率以及对超氧阴离子的清除作用的测定，比较同浓度条件下的VC 与枸杞多糖对抗氧化活性。枸杞多糖体外抗氧化性结论。 一、三种提取方法提取枸杞多糖的提取率研究 （一）实验材料与试剂 1. 材料 宁夏枸杞西安源森生物实验室自产地直接采购； 2. 试剂 （1）5% 苯酚； （2）8mmol/L HCl；25mmol/L 邻苯三酚溶液； （3）0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH8.2)；10%三氯乙酸； （4）邻苯三酚(焦性没食子酸，分析纯)； （5）三羟基甲基氨基甲烷(Tris)(分析纯)； （6）1,1-二苯基-2-苦基苯肼(1,1-dipheny1-2-picryl-hydrazyl, DPPH)。 （二）仪器与设备 （1）索氏提取装置，HH-S 数显恒温水浴锅； （2）YHW-102 型远红外干燥箱； （3）KQ3200 型超声波清洗仪； （4）WFJ-7200 型可见光分光光度计； （5）LDZ5-2 低速自动平衡离心机； （6）WP700 型微波炉； （7）TU-1900 双光束紫外可见分光光度计； （8）DL-1 万用电炉规格(单联电压220V，功率：LX/KW)； （9）ZDHW 型调温电热套(规格250ml，功率150W)； （10）JA2003 型电子天平。 （三）实验步骤 1.枸杞预处理 将宁夏枸杞放于60℃恒温箱中恒温干燥24h→称量→剪碎→回流脱脂（回流两次，每次3 h）→弃去溶剂，残渣风干，残渣即为经过预处理的枸杞。 2. 利用三种方法进行枸杞多糖的提取 （1）浸泡法提枸杞多糖 用电子天平称取等量经预处理后的枸杞，浸泡3h，然后用90℃的水浴提取1.5h，用脱脂棉过滤，重复提取3 次，弃去残渣，合并滤液，浓缩，离心(3000r/min，30min)，弃去残
多糖各种提取方法
一、植物多糖的提取 1 溶剂提取法 1．1 水提法 水对植物组织的穿透力强，提取效率高，在生产上使用安全、经济。用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提。一般植物多糖提取采用热水浸提法，该法所得多糖提取液可直接或离心除去小溶物；或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，沉淀提纯多糖；但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离；还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离；其中，以乙醇沉淀最为普遍。但以根茎为主的植物体,细胞壁多糖含量高,热水直接提取率不高。此时为破坏细胞壁,增加多糖的溶出，有两种处理方法:一为酶解,二为弱碱溶解。 1．2酸碱提法 有些多糖适合用稀酸提取，并且能得到更高的提取率。但酸提法只在一些特定的植物多糖提取中占有优势，目前报道的并不多。而且即使有优势，在操作上还应严格控制酸度，因为酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂。 有些多糖在碱液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。采用的稀碱多位为0．1mol／L氢氧化钠、氢氧化钾，为防止多糖降解，常通以氮气或加入硼氢化钠或硼氢化钾。同样，碱提优势也是因多糖类的不同而异。与酸提类似，碱提中碱的浓度也应得到有效控制，因为有些多糖在碱性较强时会水解。另外，稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅速透析，浓缩与醇析而获得多糖沉淀。 1．4 生物酶提取法 酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶，纤维素酶，果胶酶等。 1．5 超声提取法 超声波是一种高频率的机械波，其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏，有利用植物有效成分的释放，而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流，有效地减小、消除与水相之间的阻滞层，加大了传质效率，有助于溶质的扩散。另外，超声波的热效应使水温基本在57℃，对原料有水浴作用。超声
枸杞多糖测定
枸杞多糖测定 稀释至刻度，备用。 2.6 样品中多糖的测定 吸取适量样品液，加蒸馏水至2 ml，按标准曲线下的方法测吸光度A为0.2343，查标准曲线得样品液中葡萄糖含量4.69（μg/ml）。 2.7 结果计算 多糖含量%=p?D?F?100 m 式中：p：样液葡萄糖浓度（μg/ml）； D：样品液稀释因素； F：换算因素； m：样品质量（μg）。 测量结果代入得：多糖含量%=12.51% 3 实验讨论 （1）苯酚-硫酸比色法测定枸杞多糖的原理是枸杞多糖成分在H2SO4的作用下，水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，与苯酚缩合成有色化合物，再用分光光度法测定其枸杞多糖含量。本法操作简单，显色稳定，灵敏度高，重现性好，可作为枸杞及其它多糖含量的测定方法。（2）枸杞子水提物中含有单糖、低聚糖等杂质, 且呈红色, 因此在测定之前要先用乙醇除去单糖、低聚糖等杂质并以
丙酮-石油醚脱脂脱色, 才不至于对测定产生干扰。 （3）试验中发现，浓硫酸的加入方式对实验的结果影响较大，采取移液管悬空，垂直加入浓硫酸，立即摇匀的方式，显色反应充分，且显色结果稳定。 （4）各种单糖的标准曲线均只在0～30 μg含量范围内呈较好的线形关系，因此制作标准曲线时，单糖浓度不宜太大。 （5）本法采用精制的枸杞多糖作为对照品，计算出枸杞多糖与葡萄糖的换算因子，再乘以用硫酸-苯酚法显色测出多糖相当于葡萄糖的含量，这样可避免直接用葡萄糖作为标准引起的系统误差，结果更准确。 (6) 多糖提取工艺以及分离、纯化方法决定了产品的纯度, 另外枸杞子产地的不同也可能对研究结果有影响。由于目前市场枸杞多糖产品主要作为保健产品,需较高的收率和较低的成本。而采用乙醇沉淀法提取的枸杞多糖含量较高,收率可达8%左右,并且乙醇可回收,既使成本进一步降低,又减少了对环境的污染，且取得了很好的经济效益。本实验所测得枸杞含糖量高，实验材料为上好的宁夏枸杞。
枸杞中枸杞多糖的提取及其含量测定
枸 杞 多 糖 的 提 取 与 含 量 测 定 2011级药学班 A6组 丁艺兰，冯霞
枸杞中枸杞多糖的提取及其含量测定 一、实验目的： 1、解中药品种品质研究的思路和方法 2、熟悉枸杞多糖的了化学性质和提取方法 3、掌握查阅文献和数据处理的方法 二、实验原理: 枸杞为茄科植物枸杞的成熟果实，它既可以作为药材，又可以作为保健食品。经研究发现其主要活性成分之一就是枸杞多糖。枸杞多糖是一种水溶性糖系蛋白多糖，主要由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖6种单糖成分组成。现代医学研究证明：它具有抗氧化、抗肿瘤、调节免疫力、降血脂等作用，能改善老年人易疲劳、食欲缺乏和视力模糊等症状。 萃取是有机化学实验室中用来提取和纯化化合物的手段之一。通过萃取，能从固体或液体混合物提取出所需的化合物。它的基本原理是利用化合物在两种不相溶（或微溶）的溶剂中溶解度或分配系数的不同，使化合物从一种溶剂内转移到另一种溶剂中。经过反复的多次萃取，将绝大部分的化合物提取出来。萃取常见的有液-液萃取和液-固萃取。在本次实验中，是利用水溶液从枸杞子粉末中提取出多糖类化合物，属于液-固萃取。本实验使用水提醇沉法提取宁夏枸杞的枸杞多糖。 三、实验步骤
1、枸杞多糖的提取 称取干燥的枸杞80g，用研钵研成粉末状，放入烧杯内，加入一定料液比(1：8、1：10、1：12)的水溶液，放入微波搅拌器中放置30min，温度70-100摄氏度之间，功率300w，过滤，得滤渣，再加入一定料液比(1：8、1：10、1：12)的水溶液，放入微波搅拌器中放置30min，温度70-100摄氏度之间，功率300w，合并滤液，采用旋转蒸发器真空浓缩，得到的浓缩物用乙醇(乙醇终浓度大于80%)沉淀，滤布过滤，得滤渣用丙酮。石油醚混合液(体积比1：1)于50～60℃回流0.5h，滤布过滤，得沉淀，烘干，得到枸杞粗多糖。 2、Sevage法脱蛋白 取一定量的粗多糖，加蒸馏水完全溶解，使其浓度约为100mg/m L，用Sevage法脱蛋白，按枸杞多糖水溶液体积的20%加入三氯甲烷，再加入三氯甲烷体积的20%的正丁醇，剧烈振摇20min，使其充分混匀，1000r/min离心，倾出上清液，除去中间变性蛋白和下层三氯甲烷，重复以上操作直至中间层无变性蛋白，得到脱蛋白多糖。 3、含量测定 （1）对照品溶液制备精密称取105 ℃干燥至恒重的葡萄糖对照品50 mg，置500 mL 量瓶中，用适量水溶解后，稀释至刻度，摇匀，即得0．1 mg·mL （2）样品溶液的制备枸杞子样品粉碎，备用。取各种枸杞子粗粉约0．5 g，精密称定。加乙醚100 mL，加热回流1 h，静置，放
枸杞中总黄酮的分析方法及提取工艺研究
龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/3a15665112.html, 枸杞中总黄酮的分析方法及提取工艺研究 作者：李铭芳, 李淑芳,汪小强,阮红强 来源：《天津农业科学》2011年第01期 摘要：以乙醇为溶剂，采用回流提取法提取宁夏枸杞中的总黄酮。通过正交试验，对影响提取效果的主要因素包括提取温度、提取时间、乙醇浓度和固液比进行优化。通过试验研究发现最优提取条件为：提取温度70 ℃,提取时间2.0 h,乙醇浓度70%,固液比为1∶20。此法为枸杞中黄酮类化合物的提取提供了参考。 关键词：宁夏枸杞；总黄酮；正交设计；回流提取 中图分类号：R931.7文献标识码：ADOI编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2011.01.012 Analysis and Extractions of Bio-Flavonoid from Lycium Barbarum LI Ming-fang1, LI Shu-fang2, WANG Xiao-qiang1, RUAN Hong-qiang1 （1. College of Science, Jiangxi Aricultural University, Nanchang, Jiangxi 330045, China; 2. Chemistry Group, Jiangxi Dongxiang No.1 Middle School, Dong xiang, Jiangxi 330018, China） Abstract：In this paper, ethanol as solvent，refluxing extraction method used to extract total flavonoids of Ningxia Lycium barbarum. Optimize the impact of extraction of the major factors by orthogonal experiments, included extraction temperature, extraction time, ethanol concentration and the ratio of solid to liquid. The experiment found that the optimal extraction conditions were as follows: extraction temperature 70 ℃, extraction time 2.0 h, the concentration of 70% ethanol, the solid-liquid ratio of 1∶20. This method for extraction of flavonoid compounds to provide a reference. Key words: Ningxia lycium barbarum; total flavonoids; orthogonal design; reflux extraction 植物宁夏枸杞(Lycium barbarum L. )的成熟干燥果实,具有滋补肝肾、益精明目之功效,现代临床上广泛用于调节免疫功能、降血脂、降血糖、保肝、抗肿瘤及抗衰老等[1]。枸杞之所以 具有上述功能,一般认为与其所含黄酮类化合物、枸杞多糖、类胡萝卜素和甜菜碱等活性成分 有关,特别是与枸杞中黄酮类化合物密切相关[2]。随着黄酮类化合物研究开发的热潮,宁夏枸杞中黄酮类化合物的抗氧化活性开始得到关注[3-5]。 黄酮类化合物( Flavonoids) 是植物经光合作用产生的一大类化合物, 其结构母核是以C6- C3- C6 为骨架的2-苯基色原酮。它的存在形式有两种, 一种是游离的苷元, 另一种是与糖等结
紫外分光光度法测定枸杞中多糖含量
紫外分光光度法测定枸杞中多糖含量 摘要:目的：提供一种测定枸杞制品中功效成分多糖的方法，同时合理筛选枸杞品种。方法：运用苯酚-硫酸紫外分光光度法测定3种枸杞品种中多糖的含量。结果：宁夏枸杞中的多糖含量为4.01%，新疆枸杞中的多糖含量为3.85%，青海枸杞中的多糖含量为4.01%；同时发现使用紫外分光光度法测定精密度好、重复性好、方法简便。结论：宁夏枸杞中多糖含量明显高于新疆枸杞和青海枸杞，差异达到显著水平；紫外分光光度法是一种测定枸杞多糖质量分数的理想方法，亦可为其它类多糖质量分数的测定提供依据。 关键词：苯酚-硫酸；紫外分光光度法；枸杞；多糖 枸杞(Lycium Barbrum L.)属茄科枸杞，为落叶灌木植物干燥成熟果实。近年的医学研究表明，枸杞含有多种营养成分和微量元素，其有效成分枸杞多糖(LBP)具有广泛的药理学作用，可促进造血、降血脂、保肝及治疗神经衰弱等。枸杞多糖(LBP)是由多个单糖或衍生物聚合而成的大分子活性化合物，是枸杞生物学作用的主要有效成分之一，其结构按LBP-Ⅰ、LBP-Ⅱ、LBP-Ⅲ、LBP-Ⅳ的顺序水溶性依次递减，不溶于乙醇、丙酮等有机溶剂。枸杞多糖对机体具有非特异性免疫调解功能，可调节机体免疫力、抑制肿瘤生长和细胞突变、延缓衰老、提高适应能力，并具有抗疲劳和加速消除疲劳的作用，已成为保健食品中的一种重要功能性添加剂，显示出良好的应用前景。为了进一步开发新疆黑枸杞的药用价值，本文采用紫外分光光度法测定了几种枸杞叶中的多糖含量。 1 材料与方法 1.1 原理 多糖在80%乙醇溶液中沉淀，与单糖和低聚糖及甙类物质分离。沉淀用水溶解后，再用碱性二阶铜试剂选择性地从其它高分子物质中沉淀出具有葡聚糖结构的多糖。苯酚-硫酸可与其中的多糖起显色反应，生成橙黄色化合物，可于485nm 处比色，定量。 1.2 材料与仪器 TU-1901型紫外-可见分光光度计(北京普析通用)、岛津CS-9301PC薄层扫描仪、定量毛细管(美国Dummond)、手动点样仪(CAMAGIII型)、硅胶G(青岛海洋化工集团公司)自制板；D-无水葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所生产，批号110833200302)；试剂：所用试剂均为分析纯。3种枸杞子分别购于药店、药材集市等，经药品检验所侯惠婵主任药师鉴定，分别编号为枸杞1、枸杞2、枸杞3。 1.3 标准曲线的绘制