枸杞多糖的提取与鉴定

枸杞多糖的提取与鉴定
枸杞多糖的提取与鉴定

枸杞多糖的提取与鉴定

1242818杨立君实验原理

强酸可以使糖类脱水生成糠醛。生成的糠醛或羟甲基糠醛与蒽酮脱水缩合,形成糠醛的衍生物,呈蓝绿色。颜色的深浅可以作为定量的标准。这一方法具有很高的灵敏度,糖含量在30μg左右就能进行测定,所以可以作为微量测糖之用。

一般样品少的情况下,采用这一方法比较合适]1[。

实验试剂

1.标准葡萄糖试剂:将葡萄糖105℃烘干至恒重(2h),准确称取50mg,无离子水定容至500mL,终浓度为0.1mg/mL.

2.蒽酮-浓硫酸试剂:称取0.1997g蒽酮,溶于100mL浓硫酸,现用现配。

3.葡萄糖,阿拉伯糖,甘露糖]3[],2[

4.硫代硫酸钠溶液,活性炭,正丁醇,无水乙醇,丙酮。三氯甲烷,甲苯胺乙醇溶液

实验器材

分光光度计,超速离心机,电炉,烧杯,试管,干燥器,滤纸,层析缸以及其他相关玻璃仪器

实验流程

(一) 提取

枸杞干果粉碎,氯仿- 甲醇(2∶1)回流脱脂8~10 h 近无色,挥干溶剂以后将脱脂后的枸杞样品放入烧杯中,分3次加15、12、10 倍量的蒸馏水于90 ℃水浴提取,每次2 h;收集3 次的滤液减压浓缩至约200 mL,转移到大烧杯中,加4 倍量的95%乙醇,沉淀12 h 后抽滤,并依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚

洗涤,干燥后便得到枸杞多糖的粗制品。]4[

(二)纯化

多糖粗品加水溶解,4 000 r/min 离心10 min 后取上清液,加30%双氧水适量,40 ℃保温4~6 h 后,加三氯甲烷-正丁醇(4∶1,Sevag 法)溶液沉淀蛋白,取上清液;此步骤反复多次,直到无白色絮状沉淀出现。将除去蛋白的多糖溶液浓缩后,转移到分子排阻为8 000~10 000 Da 的透析袋中,流水透析24 h 后,蒸馏水透析过夜,溶液颜色变淡,浓缩后

真空干燥得枸杞多糖精制品。]4[

(三) 理化性质分析

将枸杞多糖精品分别加入水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和正丁醇中,观察其溶解性。另在浓硫酸存在下观察枸杞多糖与α-萘酚的作用,于界面处观察颜色变化。

(四)蒽酮比色法测定含量

1.制备标准曲线:取六只试管,如下表进行操作:

2. 样品含

量测定 吸取1ml 多糖溶液置试管中,浸于冰浴中冷却,再加入4ml

蒽酮试剂,沸水浴中煮

沸10min ,取出后自来水冷却,620nm 比色,其他条件与做标准曲线相同。测得吸光度值由标准曲线查处出样品液的糖含量。(如果样品管的吸光度值超出标准曲线范围,需将样品进行适当的稀释,再取1mL 进行鉴定)。

3,计算

根据所测的吸光度平均值,根据标准曲线,求得糖含量(微克),记为枸杞多糖C 式中枸杞多糖C 表示1mL 样品测定液的多糖含量(μg );枸杞多糖V 表示多糖提取液的体积(mL );n 表示测定液的稀释倍数;m 表示枸杞的质量。]

1[

(五) 枸杞多糖及单糖鉴定纸层析

1. 以正丙醇-浓氨水-水为展开剂,分别将枸杞多糖粗品和精品溶于水中,点样于层析滤纸上,展层后吹干,以甲苯胺乙醇溶液染色,乙醇漂洗。

2. 将层析滤纸剪成纸条,将多糖样品水解液点样,近旁点已知组分的标准混合液。滤纸条悬挂于层析缸中层析,纸条在显色剂中浸泡一下,悬于空气中,用NaOH-乙醇液喷雾于滤纸上至完全润浸并显出色斑,干燥,浸入硫代硫酸钠溶液中定影。与已知组分的标准单糖混合物所显的色斑对比,就可鉴定多糖样品中单糖的成分。

参考文献

[1]侯新东,盛桂莲,葛台明,李继红.生物化学实验指导书[M].武汉:中国地质大学出版社有限责任公司,2011年12月第一版

[2]苟春林,苟金萍,张艳,王晓菁,姜瑞.枸杞多糖的提取分离及其组成研究[J],宁夏农林科技,2012,53(05):89-90,92

[3]武金霞.生物化学实验教程[M],北京:科学出版社,2012年8月第一版 [4]刘军海, 任惠兰, 李风风, 李广录.响应面分析法优化枸杞多糖提取工艺条件[J],时珍国医国药2008年第19卷第4期 Data Analysis

t/min 17 22 24 35 45 55 85 10.060 10.020 10.010 9.930 9.870 9.785 9.565 12.91 12.87 12.86 12.78 12.72 12.64 12.42

2.558

2.555

2.554

2.548

2.543

2.537

2.519

由图可知,反应的级数是一级.

管号 步骤 0 1 2 3 4 5 标准溶液,ml 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 蒸馏水,ml 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 置冰浴5min 蒽酮试剂,ml 4 4 4 4 4 4 沸水浴中准确煮沸10min,自来水冷却,室温放置10min 后,比色 A 620

半衰期:t=ln2/k=121.06 min.

超声波法提取香菇多糖实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除超声波法提取香菇多糖实验报告 篇一:超声波提取香菇多糖汇报 项目名称: 超声波提取香菇多糖 【工作汇报】 超声波提取香菇多糖 操作者姓名:王岚 班级技术102 专业生物技术 前言 1、实训的背景、目的和意义: 实训背景: 香菇(Lentinulaedodes)是侧耳科的 担子菌,味道鲜美,药食两用,具有较好的保健作用。香菇多糖是香菇中的重要营 养成分和有效药用组分,具有抗病毒、抗 肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能,香菇还

原糖对于人体糖分的补充也起着重要作用 测定蛋白质的方法可分为两大类:一类是利用蛋白质的物理化学性质来推算,如密度、折射率、紫外吸收、荧光性等;另一类是利用化学方法来计算,如定氮、双缩脲反应、染料结合反应、酚试剂反应等 主要测定方法有:双缩脲法、染料结合法、酚试剂法、紫外分光光度法、水扬酸比色法、折光法、旋光法、近红外光谱法. 目前蛋白质测定最常用的方法是凯氏定氮法,是通过测总氮量来确定蛋白质含量的方法。 实训目的及意义: 1、 2、 2、实训要解决的问题: 掌握微量凯氏定氮仪测定蛋白质含量的原理。熟练掌握微量凯氏定氮仪测定蛋白质含量的操作技术。 1、微量凯氏定氮法与常量法的同点? 2、根据08年国标,样品消化完全一小时之后,需要冷却后加20ml水,为什么会有晶体析出,成分是什么,为什么会析出? 3、香菇多糖的主要成分是什么?如何脱蛋白? 3、实训操作关键技能

1.在蒸馏过程中,切勿关闭电炉,否则会引起硼酸液的倒吸。 2.环境中氨气的含量要低。 3.定氮仪各连接处绝对不能漏气。 4.所用橡皮塞、管用前均需处理。其方法是:浸在10%氢氧化钠溶液中煮沸约10min,再经水洗和水煮10min,最后冲洗数次。 材料及方法 1、实训材料及配制、预处理技术 干香菇,蒸馏水; 电热恒温鼓风干燥箱 组织粉碎机 圆底烧瓶,铁架台,温度计 超声波发生器(带加热功能) 真空泵,漏斗,滤纸,滤布,烧杯,量筒,玻璃棒等 微量凯氏定氮蒸馏装置一套、三角烧瓶、酸式滴定管、容量瓶溶液的配制 1.浓硫酸:分析纯,95.5% 2.80%苯酚:80克苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加20克水使之溶解,可置冰箱中避光长期储存。 3.6%苯酚:临用前以80%苯酚配制。(每次测定均需现配)

酶法提取枸杞多糖工艺研究

技术·食品工程>>> C EREALS AN D OILS PROCESSING 酶法提取枸杞多糖工艺研究 梁敏1邹东恢1,2郭建华1,2 (1.齐齐哈尔大学2.黑龙江省普通高校齐齐哈尔大学农产品加工重点实验室) 【摘要】本文研究了酶法提取枸杞多糖的最佳工艺条件以及枸杞中多糖的分离方法。采用木瓜蛋白酶处理,对作用温度、加酶量、最适pH值、作用时间进行正交试验。确定了酶法提取枸 杞多糖的最佳工艺:加酶量0.3%,酶解反应的pH值为7.0,温度为45℃,反应时间为2h,提取 率可达14.9%。 【关键词】枸杞多糖;酶法提取;正交试验;工艺 中图分类号:TS255.7文献标识码:A文章编号:1673-7199(2010)03-0104-03 枸杞子为茄科植物枸杞的成熟果实,是我国传统的滋补中药材。《本草纲目》中记载枸杞子具有坚筋骨、补精气诸不足、明目安神、令人长寿等功效。目前人们对枸杞子多糖进行了较广泛的研究,发现枸杞多糖具有增强机体免疫力、抗肿瘤、抗衰老、降血脂、降血糖、抗疲劳、护肝、防辐射、抗缺氧等功效,且无任何毒副作用,因此枸杞多糖的分离纯化及其药理作用研究已成为一个热点课题。近年来生物酶广泛应用于各个领域,在国内也开始将其应用于药物提取中,枸杞多糖通常被包裹在植物细胞壁内,并且多糖往往和蛋白质结合在一起,以蛋白多糖的形式存在。研究表明中性蛋白酶能有效酶解与多糖结合在一起的蛋白质,从而将多糖释放出来而提高多糖的得率,提高了多糖的纯度,对枸杞多糖的研究开发具有现实意义。 1试验方法与工艺过程 1.1试验原料 从市场中购得新鲜枸杞,清洗干净,去除杂质,之后适当切块放入真空干燥箱干燥,待枸杞恒重,放入粉碎机中粉碎,将粉碎后的枸杞粉依次通过40、60、80、100目的筛,过筛之后把各级枸杞粉分别装到清洁干燥的烧杯中,置于真空干燥箱中待用。 1.2试验试剂与仪器 木瓜蛋白酶,北京世纪时尚科贸有限公司;Sephadex G-75,Pharmacia;苯酚,天津市科密欧化学试剂开发中心;葡萄糖、活性炭,天津市凯通化学试剂有限公司;使用试剂均为分析纯。真空干燥箱,上海益恒试验仪器有限公司;电热恒温水浴锅、离心机、透析袋、THZ-82A台式恒温振荡器,上海跃进医疗器械厂;HL-2S恒流泵,上海青浦沪仪器厂;九阳料理机,山东九阳小家电有限公司;SHZ-D(III)循环水式真空泵、722紫外分光光度计、PB-10pH计,北京赛多利斯仪器系统有限公司;BSZ-100自动部分收集器,上海沪西仪器厂;Lambda-35紫外可见分光光度计,美国PE公司。 1.3试验方法与步骤 称取80目的枸杞粉3g,放入到250mL的三角瓶中,然后加蒸馏水35mL混合均匀后置于40℃水浴锅中,水浴30min,调节pH值,加入一定比例木瓜蛋白酶混合,加入5mL蒸馏水溶解,枸杞溶液放在水浴中预热至酶解温度,将酶液加入到枸杞溶液中,在恒温振荡器上提取,反应结束,将三角瓶放到沸水锅中,10min沸水浴灭酶,灭酶结束,冷却至室温,将酶提取液放入到离心管中,调至5000r/min离心,取上清液,即得到酶提取多糖清液。 1.4葡萄糖标准曲线的制定 以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标作图,绘制标准曲线,获得线性回归方程。直线方程为:Y= 104

多糖提取工艺流程

第一部分:野生灵芝菌种的分离、扶壮、保藏和培养 前言 采集吉林长白山野生灵芝,经过菌种分离,鉴定为GANODERMA(英文名称)多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.) Karst.的菌种。经过纯化扶壮培养,成为一支优良的灵芝菌种,为灵芝菌丝体发酵培养和灵芝多糖的提取奠定了基础。 实验室流程:(百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种(恒温培养箱)菌种培养扶壮(恒温恒湿冷藏柜)优良菌种保藏(百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种(摇床)发酵菌种摇瓶培养(用于接种菌种罐) 第二部分:灵芝菌丝体液体发酵培养 前言 液体发酵培养不同于灵芝子实体栽培,周期短,产量高,无污染,灵芝多糖含量高,节省木材和耕地。是一种灵芝多糖理想的工厂化现代科技生产方式。经过摇瓶培养的灵芝菌种接种于种子罐,待生长良好,在接种于扩大的发酵罐中,通过通气恒温培养,长成成年灵芝菌丝体,生长完全后,进行离心分离喷雾干燥,就得到相当于灵芝子实体的灵芝菌丝体粉,多糖含量达到15%左右。进一步提取加工得到高含量的灵芝多糖。 灵芝菌丝体发酵工艺流程:(配料罐)培养液的配制(菌种罐)菌种的发酵培养 (发酵罐)灵芝菌丝体发酵培养(离心机)灵芝菌丝体固液分离(浓缩液配制罐)灵芝菌丝体配制成浓缩液(喷雾干燥塔)浓缩液喷雾干燥,得到灵芝菌丝体粉 第三部分:灵芝菌丝体多糖的提取分离 前言 灵芝菌丝体粉,是大部分不溶解于水,食用以后象灵芝子实体一样,只有少部分成分被吸收,通过现代提取手段,将灵芝菌丝体经过提取罐的水提取,经过真空浓缩,在经过醇沉工艺,加工成可以全部被人体吸收,灵芝多糖含量提高到30-40%灵芝菌丝体提取物。极大的提高了功效,减少了服用量。 灵芝多糖提取工艺流程:(提取罐)灵芝菌丝体粉水提取(外循环真空浓缩罐)提取液真空浓缩(醇沉罐)浓缩液乙醇沉淀多糖(离心机)沉淀多糖分离 (浓缩液储罐)沉淀物配制成多糖浓缩液(喷雾干燥塔)灵芝多糖喷雾干燥 (粉碎机)灵芝多糖粉碎到100目(混合机)灵芝多糖粉批量混合(真空包装机)食品塑袋真空包装。灵芝多糖原料成品

论文实验工艺流程

学士学位论文开题报告 学院食品与轻工学院 学科、专业食品科学与工程 姓名卢凌武 导师姚丽丽 入学时间2011年9月 开题报告日期2015年1月8日 论文题目薛荔果胶提取与纯化工艺优化的研究 食品与轻工学院

开题报告填写要求 1.开题报告(含“文献综述”)作为毕业设计(论文)答辩委员会对学生答辩资格审查的依据材料之一。此报告应在指导教师指导下,由学生在毕业设计(论文)工作前期内完成,经指导教师签署意见及所在专业审查后生效; 2.开题报告内容必须用黑墨水笔工整书写或按教务处统一设计的电子文档标准格式(可从教务处网页上下载)打印,禁止打印在其它纸上后剪贴,完成后应及时交给指导教师签署意见; 3.“文献综述”应按论文的格式成文,并直接书写(或打印)在本开题报告第一栏目内,学生写文献综述的参考文献应不少于15篇(不包括辞典、手册); 4.有关年月日等日期的填写,应当按照国标GB/T 7408—94《数据元和交换格式、信息交换、日期和时间表示法》规定的要求,一律用阿拉伯数字书写。如“2004年4月26日”或“2004-04-26”。

毕业设计(论文)开题报告

文献综述1薛荔的有效成分和功能特性 1.1薛荔的植物学属性 薜荔( Ficus pumi la L. )属桑科榕属植物,常绿攀缘或匍匐灌木, 主要分布在我国云南、广西、湖南、四川、湖北等地【1-1】。别名水馒头、鬼馒头、蔓头萝、爬墙果、爬壁果、王不留行、馒头米壳、凉粉果、文头果、文头榔、糖馒头、木锋、桔把、馒头郎、鬼球、木莲果、凉粉树果、馒头果、牛奶子、牛奶柚、程邦子、木果蒲、薛荔果、凉粉子、木瓜、膀膀子、膨泡、乌鸦馒头、烹泡子 1.2薛荔的化学成分 范明松等人对薛荔地上除过部分外的化学成分进行了研究,共分离出了16种化合物,其中5,7,4'一三甲氧基黄烷一3-醇等8个化合物为首次分离出来【3】。种子含三萜皂甙,称为王不留行皂甙的有A、B、C、D4种,均为由棉根皂甙元衍生的多糖甙。王不留行皂甙B及C的结构已经确定,甙A的糖部分有D-葡萄糖醛酸,D-半乳糖,L-阿拉伯糖,D-木糖,D-岩藻糖,L-鼠李糖,甙D的糖部分有D-葡萄糖醛酸,D-半乳糖,D-木糖,D-岩藻糖,L-鼠李糖和D-葡萄糖。四种皂甙水解均得同一的王不留行次皂甙,即是棉根皂甙元-3-β-D-葡萄糖醛酸甙。又含黄酮甙:王不留行黄酮甙,异肥皂草甙。还含植酸钙镁,磷脂,豆甾醇等。全革中还含吨酮成分:王不留行吨酮,麦蓝菜吨酮,1,8-二羟基-3,5-二甲氧基9-吨酮。 1.3薛荔的营养物质 薛荔果中还含有其他丰富的营养物质。吴文珊等人进行的有关实验表明,薛荔含有较其他植物更多的果胶:薛荔花被中的果胶含量高达32.70%,其种子种的果胶含量也有15.15%。花被中的黄酮类物质、蛋白质、脂肪等物质含量也相当可观,分别高达15.14%、15.70%、30.13%。而且,在其含有的脂肪中,超过八成的脂肪是不饱和脂肪酸,具有抗氧化等特殊的生理功效【4】。 1.4薛荔的药用价值 薛荔以花序托,即果实——薛荔果入药。据《神农本草经》、《蜀本草》等多种医药古籍记载,薛荔的根、茎、叶、花、果等各个部分都能入药。薛荔主要有活血止血、下乳等功效。 薜荔中还有有抗菌、增强免疫、抗肿瘤、抗诱导、抗炎镇痛和驱蛔虫等活性成分。空军汉口医院肿瘤防治小组通过动物试验, 研究了薜荔果多糖抗肿瘤的作用。结果表明, 薜荔籽的水洗黏液对多种小白鼠移植性肿瘤的生长有较明显的抑制作用。鄂少廷等人研究表明, 薜荔果多糖对化疗所致的免疫抑制现象似有纠正作用, 且对放疗和 化疗后的骨髓有一定的保护作用【1】。吴文珊等人对薜荔的水提液和乙醇提取液进行抑菌药敏试验。结果显示, 薜荔的水提液对大肠杆菌抑菌效果明显; 薜荔的乙醇提取液对枯草芽孢杆菌的抑菌效果较为显著, 对啤酒酵母、橘青霉和黑曲霉等真菌均无抑菌作用。此外, 薜荔亦可用于治疗其他恶性肿瘤【2】。 2薛荔的开发利用 2.1薛荔的开发利用的传统历史 薛荔种子和薛荔花被中含有丰富的果胶,在中国南方,民间传统将薛荔瘦果中的薛荔籽加工成凉粉作为传统的消暑佳品【15】。 2.2薛荔开发利用的典型特例 爱玉子是薜荔的变种(主要分布于我国台湾省),台湾省对其进行了系统和全面 的研究, 并已大面积人工栽培和管理, 形成了规范产业化; 由爱玉子制成的爱玉冻,

多糖的提取分离方法

1.多糖的提取方法 生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3 大类。多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位,决定在提取之前是否做预处理。动物多糖和微生物多糖多有脂质包围,一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂,释放多糖。植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类,在提取前,应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理,目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等。 1.1溶剂法 1.1.1水提醇沉法 水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法。多糖是极性大分子化合物,提取时应选择水、醇等极性强的溶剂。用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提渗滤,然后将提取液浓缩后,在浓缩液中加乙醇,使其最终体积分数达到70 %左右,利用多糖不溶于乙醇的性质,使多糖从提取液中沉淀出来,室温静置5 h,多糖的质量分数和得率均较高。影响多糖提取率的因素有:水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。 水提醇沉法提取多糖不需特殊设备,生产工艺成本低,安全,适合工业化大生产,是一种可取的提取方法。但由于水的极性大,容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来,从而使提取液存放时腐败变质,为后续的分离带来困难,且该法提取比较耗时,提取率也不高。1.1.2酸提法 为了提高多糖的提取率,在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH 值下难以溶解,可用乙酸或盐酸使提取液成酸性,再加乙醇使多糖沉淀析出,也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出。 由于H+的存在抑制了酸性杂质的溶出,稀酸提取法提取得到的多糖产品纯度相对较高,但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂,且酸会对容器造成腐蚀,除弱酸外,一般不宜采用。因此酸提法也存在一定的不足之处。 1.1.3碱提法 多糖在碱性溶液中稳定,碱有利于酸性多糖的浸出,可提高多糖的收率,缩短提取时间,但提取液中含有其它杂质,使粘度过大,过滤困难,且浸提液有较浓的碱味,溶液颜色呈黄色,这样会影响成品的风味和色泽。 1.1.4超临界流体萃取法 超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新的提取分离技术。超临界流 体是指物质处于临界温度和临界压力以上时的状态,这种流体兼有液体和气体的特点,密度大,粘稠度小,有极高的溶解,渗透到提取材料的基质中,发挥非常有效的萃取功能。而且这种溶解能力随着压力的升高而增大,提取结束后,再通过减压将其释放出来,具有保持有效成分的活性和无溶剂残留等优点。由于CO2的超临界条件(TC=304.6 ℃,Tp=7.38 MPa)容易达到,常用于超临界萃取的溶剂,在压力为8~40 MPa 时的超临界CO2足以溶解任何非极性、中极性化合物,在加入改性剂后则可溶解极性化物。 该法的缺点是设备复杂,运行成本高,提取范围有限。 1.2酶解法 1.2.1单一酶解法 单一酶解法指的是使用一种酶来提取多糖,从而提高提取率的生物技术。其中经常使用的酶有蛋白酶、纤维素酶等。蛋白酶对植物细胞中游离的蛋白质具有分解作用,使其结构变得松散;蛋白酶还会使糖蛋白和蛋白聚糖中游离的蛋白质水解,降低它们对原料的结合

枸杞多糖提取工艺

目录 摘要 (1) 英文摘要 (2) 1 引言 (3) 2 材料与方法 (4) 2.1 实验材料与仪器设备 (4) 2.2.1 葡萄糖标准溶液的配制与曲线的绘制 (4) 2.2.2 枸杞多糖溶液的提取方法 (5) 2.2.3 苯酚-硫酸法测定多糖含量 (6) 3 实验结果与分析 (6) 3.1 单因素选择试验 (6) 3.2提取率与浸提温度之间的关系 (6) 3.3 提取率与料水比之间的关系 (7) 3.4 提取率与浸提时间之间的关系 (8) 3.5 正交试验优化工艺条件 (9) 4 结论 (10) 参考文献 (11) 致谢 (12)

枸杞子多糖提取工艺的探索 化学化工学院应用化学专业 摘要:利用正交分析法对枸杞多糖的提取工艺进行优化。以枸杞为主要原料,先采用单因素试验法分别对影响枸杞多糖提取率的主要因素进行分析研究,最后再利用正交试验法优化选取一个最佳的工艺条件。试验结果表明,枸杞多糖的热水浸提法最佳工艺条件为浸提温度90℃,料水比1:20,浸提时间2h。 关键词:枸杞多糖;水浸提取;单因素试验;正交试验

Exploration of Lycium Barbarum Polysaccharides Extraction Technology College of Chemistry and Chemical Engineering Applied Chemistry Specialty Chen Fei (20907031003)Director: Xu Han (Lecture) Abstract: To optizime the extraction technology of lycium barbarum polysaccharides by orthogonal methodoloy. The main factors were studied effecting the extraction of lycium barbarum polysaccharides by single factor experiments. And then, the optimum extraction conditions of lycium barbarum polysaccharides was studied by orthogonal experiment. The optimized conditions for the extraction of polysaccharides was obtained as follows: extraction temperature 90℃, material to water1∶35(W∶V) , extraction time 2 h. Keywords:lycium barbarum polysaccharides; flooding extraction; single factor experiments; orthogonal experiment

银耳多糖的提取工艺

银耳多糖的提取工艺 李帅涛 摘要:国内常用的银耳多糖提取方法有热水提取法,酸碱提取法和酶解提取法等,其中酶解提取法具有提取时间短,条件温和等优点。本试验选取了酶解时间和提取时间作为研究对象,探讨了不同条件下银耳多糖的收率,由试验结果表明,解法提取银耳多糖的最适条件为:银耳与水的比例为1g:50ml,加入果胶酶浓度为1%,酶解时间45min,提取时间60min。 关键词:银耳多糖;酶解法;提取工艺 引言:我国银耳资源丰富,为开发应用银耳多糖提供了有利条件。近年来,有关银耳多糖的研究越来越多,但这些研究多为银耳多糖的化学特性和药理作用方面的研究,少有关于银耳中提取银耳多糖的研究。目前银耳多糖的提取方法多为热水浸提法或酸碱法提取,但热水浸提法耗时过长,且收率较底,费时费力,因此不适合大规模的工业生产,而酸碱法提取虽然提取时间较短,却会破坏银耳多糖立的生物活性,使提取到的银耳多糖药用效果大大下降。本试验主要研究使用果胶酶酶解银耳,热水提取的技术来提取银耳多糖的方法。而如今生物工程工艺发展迅速,生物制品价格不断下降,这为用酶解法提取银耳多糖提供了可行性。用酶解法提取银耳多糖不仅能缩短单纯用热水法提取的时间,还不会像酸碱法那样破坏银耳多糖的生物活性。 材料与设备: ①实验材料:银耳;葡萄糖(分析纯):取1g葡萄糖加入1000ml容量瓶中,定容至1000ml;果胶酶:按100ml:1g加入果胶酶;苯酚(分析纯);精确量取6ml苯酚放入100ml容量瓶中,定容至100ml;浓硫酸(发烟硫酸) ②实验设备:101型电热鼓风干燥;YP202N型电子天平;HH系列恒温水浴锅;电子万用炉;TDZ5-WS型台式低俗离心机;722E型可见分光光度计 分离与纯化:取市售银耳适量,洗净,70℃烘干后,破碎成粉末状,称取粉末0.5g(2%),果胶酶0.25g(1%),同时加入蒸馏水25mL,迅速置于45℃水浴锅中酶解,3个样品为一组,第一组酶解30min,第二组酶解45min,第三组酶解60min。酶解后迅速升温至98℃将酶灭活,然后每组样品分别于98℃水浴中保温浸提30min,45min,60min,浸提完成后置于冷水中冷却至室温,然后于4500rpm离心分离10min,最后取上清液待用。 含糖量测定:银耳浸提液离心后,分别取上清液1ml,加水19ml,即稀释20倍,取银耳浸提稀释液1mL于一洁净试管中,再加入苯酚试液1.0mL,浓硫酸5mL,混匀,室温放置30min,冷却后,于490nm处测定吸光度。 结果与分析:本试验采用果胶酶酶解银耳的方法提取银耳多糖。试验讨论了不同酶解时间与不同提取时间对提取效果的影响,最终确定最佳提取工艺为:在45℃下,用1%果胶酶酶解,水与银耳比例为100ml:1g,酶解时间为45min,然后于98℃热水浴中浸提60min。用此法提取银耳多糖,提取率可达40% ,远高于传统的银耳多糖提取工艺。相比传统工艺,果胶酶提取银耳多糖不仅有较高的提取率,还可以明显缩短提取的时间。银耳多糖的生物活性在长时间高温环境和酸碱性条件下容易受到破坏,酶解法提取环境温和,且提取时间较短,能较好的保留银耳多糖的生物活性。固定酶解时间时,提高提取时间可显著提高提取效果,改变酶解时间时,提取效果有提高,但不大,且从45min 增加到60min增加不显著。

多糖分离纯化的基本原则和方法

多糖分离纯化的基本原则和方法 多聚糖(polysaccharide),简称多糖,常由一百个以上甚至几千个单糖基通过糖苷键连接而成的,其性质已大不同于单糖,如甜味和强的还原性已经消失,广泛存在于动物细胞膜和植物、微生物的细胞壁中,是构成生命的四大基本物质之一,与生命功能的维持密切相关。近年来,大量研究表明多糖除了有增强免疫功能、抗肿瘤作用、抗氧化、抗衰老、消化系统保护作用的生物学效应外,还有抗菌、抗病毒、降血糖、降血脂、抗辐射、抗凝血等作用。 1、基本原则 在不破坏多糖活性的前提下进行多糖的分离纯化。尽量不引入新的杂质,或引入的新杂志易于除去,如小分子盐类可经过透析作用除去,铵根离子可通过加热挥发除去等[1]。 2、分离纯化方法 多糖的生物活性倍受关注,但不少多糖的提取方法和工艺尚未成熟,基于效率、成本多方面的考虑,各种方法的开发、比较、分析是研究工作的焦点之一。目前多糖提取方法主要有溶剂提取法、酸提法、碱提法、酶解法、超滤法、超声法、微波法、超临界流体萃取法。首先要根据多糖的存在形式及提取部位不同,决定在提取之前是否做预处理:提取时需注意对一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类,在用水提取前,应先加入甲醇或l:l的乙醇乙醚混合溶液或石油醚进行脱脂,而对含色素较高的根、茎、叶、果实类,需进行脱色处理。 2.1多糖的提取与分离方法 由于各类多糖的性质及来源不同,所以提取方法也各有所异,主要归纳为以下几类: 第一类难溶于水,可溶于稀碱液的主要是胶类,如木聚糖及半乳糖等。原料粉碎后用0.5mol/L NaOH水溶液提取,提取液经中和及浓缩等步骤,最后加入乙醇,即得粗糖沉淀物。 第二类易溶于温水,难溶于冷水的多糖,可用70~80℃热水提取,提取液用氯仿:正丁醇(4:1)混合除去蛋白质,经透析、浓缩后再加入乙醇即得粗多糖产物[2]。 第三类粘多糖的提取。在组织中,粘多糖与蛋白质以共价键结合,故提取

多糖提取使用料液比参考文献

多糖提取使用“料液比”参考文献 说明:在中文文献期刊检索中共检索到43篇,选取前10篇供参考 1、巴西菇多糖提取方法研究 【作者】叶怀义. 于浩. 哈尔滨商业大学食品学院 【刊名】江苏食品与发酵 2004年01期 【摘要】本文探讨了巴西菇多糖的提取工艺,分别作了热水提取和酶法提取的正交试验,并对多糖提取率进行了比较分析。结果显示,热水提取巴西菇多糖的最佳工艺参数是:提取温度110℃,提取时间1.5h,料液比1:25,其多糖最高提取率5.80%。而采用酶法提取巴西菇多糖的最佳工艺参数分别是:木瓜蛋白酶酶用量0.20%,酶解温度55℃,酶解时间2h,作用pH值6.5;纤维素酶酶用量0.15%,酶解温度45℃,酶解时间3h,作用pH值4.5;果胶酶酶用量0.20%,酶解温度40℃,酶解时间3h,作用pH值4.0。其中木瓜蛋白酶提取巴西菇多糖提取率最高,可达到15.08%。 2、茶籽多糖提取工艺的研究 【作者】田洪舟. 裘爱泳. 史小华. 江南大学食品学院 【刊名】中国油脂 2004年06期 【摘要】以乙醇为溶剂对影响茶籽粕中多糖的提取因素进行了实验分析,在单因素实验的基础上,通过正交实验得出优化后的提取工艺条件为:料液比为 1∶12 ,乙醇浓度为55 %,提取温度为55℃,提取时间为3.0h,茶籽多糖的得率和纯度分别为6.92 %和78.74%。 3、榛蘑粗多糖提取工艺的研究 【作者】李巧云. 翟春. 居红芳. 葛粉凤. 常熟高等专科学校化学系 【刊名】化学世界 2004年07期 【摘要】对榛蘑中可溶性粗多糖的提取工艺进行了研究,通过单因素试验和L9(33)正交试验,研究了料液比、温度、时间对多糖提取率的影响,结果显示温度和料液比是影响多糖提取率的主要因素,最佳工艺为料液比1:25,温度100℃,时间4h,在最佳提取工艺时,榛蘑的多糖提取率为4.37%。对常用的醇析方法进行改进,在传统Sevag法除蛋白的基础上采用Sevag法结合酶法除蛋白,大大缩短了除蛋白时间,又用改良的蒽酮—硫酸法测定多糖含量。 4、异枝麒麟菜活性硫酸粗多糖的提取工艺优化 【作者】王庆荣. 岑颖洲. 马夏军. 陈润智. 许少玉. 暨南大学化学系 【刊名】暨南大学学报 2004年03期 【摘要】采用能有效保护抗病毒活性基团的直接水提法提取异枝麒麟菜活性硫酸多糖,通过正交试验研究了影响多糖得率的工艺参数:KCl质量分数、温度、时间、料液比;通过均匀试验研究了其中影响最大的因素的最佳水平.结果表明,温度和KCl质量分数为多糖得率的最大影响因素,其最佳水平分别为125℃和0 93%.结合实际情况,最佳提取工艺条件可为:浸提温度95~100℃、浸提时间6h、料液质量比1∶90、KCl质量分数0 93%. 5、五味子粗多糖提取工艺的研究 【作者】李巧云. 居红芳. 翟春. 常熟高等专科学校化学系 【刊名】食品科学 2004年05期 【摘要】本文对五味子中可溶性粗多糖的提取工艺进行了研究,通过单因素试验和L9(33)正交试验,研究了料液比、温度、时间对多糖提取率的影响,结果显

枸杞多糖提取论文

第一章综述 1前言 1.1枸杞 1.1.1枸杞的自然属性 枸杞(Lycium barbarum)别名苟起子、甜菜子、地骨子等,是茄科植物枸杞(Lycium chinense Miller)的成熟果实。是我国重要的药用植物资源,是我国受原产地保护的药食两用的药材和传统出口创汇产品。早在2000多年前,人们已经开始了对枸杞的利用。《诗经》记载“陟彼北山,言采其杞”。宋?苏轼《小圃?五咏》赞枸杞曰“根茎与花实,收拾无弃物”。《本草纲目》中记:“久服杞子,坚筋骨,轻身不老,耐寒暑”。《本草汇言》记“枸杞能使气可充,血可补,阳可生,阴可长,火可降,风湿可去,有十全之妙焉”。《保寿堂方》载“春枸杞叶,名天精草;夏采花,名长生草;秋采子,名枸杞子;冬采根,名地骨皮”。根据《郭案驼种树书》记载,大约在1200多年前,我国就开始栽种枸杞了。此外,《神农本草经》、《食疗本草》、《本草纲目》和《本草备要》等古书中都有关于枸杞的记载。 枸杞具有滋补肝肾,益精明目的作用。作为我国常用中药,枸杞被广泛应用于临床,主治肝肾阴亏,头晕目眩,腰膝酸软,消渴遗精,目昏多泪,虚劳咳嗽。枸杞子又作为“药食同源”的植物性平补保健食品,被广泛用于泡酒、泡茶、泡水、煲汤、煮粥等。大量研究表明枸杞中含有多种可被利用的生物活性成分,其中最具有提取利用价值的是枸杞多糖,其次是枸杞色素和枸杞籽油。 枸杞的生长状况 枸杞属约有80个种,多数分布在南、北美洲。以美国的亚利桑娜州和阿根廷形成两个分布中心,南美洲种类最多。欧亚大陆约有10个种。约在17世纪中叶引到法国,后来在欧洲,地中海国家,韩国以及北美洲国家都有栽种。我国有7个种和3个变种,多数分布在西北和华北。目前我国人工栽培的构祀有宁夏枸杞及北方枸杞。枸杞原产我国北方,河北、内蒙古、山西、陕西、甘肃、宁夏、新疆和青海等省都有野生,而中心分布区域在甘肃河西走廊、青海柴达木盆地以及青海至山西的黄河沿岸地带。常生于土层深厚的沟岸、山坡、田埂和宅旁。据统计我国枸杞种植区面积已经由1996年的45万亩迅速增加到100万亩,年产量达3000万公斤以上,其中新疆、宁夏、内蒙古、河北等省地区的枸杞种植面积和产量居全国前列。有500多年栽培历史的宁夏,所产枸杞以粒大、皮薄、肉厚、营养丰富、药用价值高而享誉国内外,远销港澳、东南亚、西欧及北美等地区和国家。2001年,宁夏省枸杞种植面积达25万亩,占全国枸杞种植面积的17%,年产量达115.5万公斤,全区枸杞干果产量和出口量分别占全

植物多糖及其提取方法

植物多糖及其提取方法 1 前言 多糖是自然界和生物体中广泛存在的物质,它是生物体内除蛋白质和核酸以外的又一类重要的信息分子。它具有多种生物活性,与生物机能的维持密切相关,与蛋白质、脂类形成的糖蛋白、脂多糖在细胞的识别、分泌以及在蛋白质的加工、转移方面起着不容忽视的作用。近年来,植物、海洋生物及菌类等来源的多糖已作为有生物活性的天然产物中的一个重要类型出现,各种多糖所具有的抗肿瘤、免疫、抗凝血、降血糖和抗病毒活性已相继被发现。我国对多糖研究始于20世纪70年代,植物多糖由于它们独特的功能和低毒性,作为新药发展的方向具有广阔的应用前景,越来越多的研究人员将目光投向植物多糖。 2 植物多糖的结构 植物多糖是由许多相同或不同的单糖以a或p一糖苷键所组成的化合物,普遍存在于自然界植物体中,包括淀粉、纤维素、多聚糖、果胶等。多糖有复杂的四级结构,一级结构指糖基的组成、排列顺序、相邻糖基的连接方式、异头碳构型及糖链有无分支、分支的位置与长短等;二级结构指多糖主链以氢键为主要次级键而形成的有规则构象;三、四级结构是指以二级结构为基础,糖单位之间的非共价相互作用,导致二级结构在有序地空间产生规则构象。植物多糖的

主链与支链形成了特殊的构型一凹形槽。凹形槽是一级结构与构象的体现。凹形槽的支链与活性关系为:支链度越大,凹形槽越多,生物活性越大。近年来,人们对多糖的结构和活性的研究不断深入,进一步阐明了多糖作用机制与结构的关系,其多样性的生理活性更加受到重视。 3 植物多糖的功能 多糖与蛋白质一样,具有生物大分子的复杂结构,具有一定的生理和生物学活性,概括起来多糖的生物活性包括:免疫调节性、抗肿瘤活性、降血糖活性、降血脂活性、抗病毒活性、抗衰老活性(抗氧化活性)、抗疲劳、抗突变活性,除此之外,还具有其他生物活性,包括抗凝血、抗炎、抗菌、抗惊厥、镇静、止喘及降血压等作用。 (1)免疫调节功能。由于现代医学、细胞生物学及分子生物学快速发展,人们对免疫系统的认识越来越深入。免疫系统紊乱,会导致人体衰老和多种疾病的发生。植物多糖是一种免疫调节剂。多糖对肌体的免疫调节作用,包括激活巨噬细胞,激活网状内皮系统,激活T和B细胞,激活补体,进干扰素的生成,促进白细胞介素的生成,诱生肿瘤坏死因子等。 2)抗肿瘤活性植物多糖主要是通过增强机体的免疫功能来达到杀伤肿瘤细胞的目的,许多高等植物中都含有抗肿瘤活性的多糖,如芦荟多糖、香菇多糖提取物、人参多糖具有

多糖的提取和纯化

多糖的提取和纯化目前,真菌多糖的提取可从子实体和采用深层培养发酵液的菌丝中分离获得,但以从子实体中提取多糖为主。首先是将子实体粉碎,加入甲醇或乙醇乙醚1:1混合液,水浴加热搅拌1一3小时除去表面脂肪。其次是用残渣提取多糖,常用的方法有不同温度下的水提法、稀酸提法、冷热稀碱提法。水提法采用的较多,适合于提取水溶性多糖。稀酸提取法适用于提取酸溶性多糖、时间宜短,温度不超过50℃,以防止糖昔键断裂。稀碱法适合于提取碱溶性糖。然后除去小分子杂质,常采用透析法,将多糖提取液置于半透膜透析袋中,逆向流水透析1一3天。第四步是沉淀多糖。大部分多糖在有机溶剂中的溶解度极小,所以可用有机溶剂来沉淀。常用4一5倍低级醇、丙酮,一般在pH=7.0左右沉淀多糖,制得粗多糖。最后是除去蛋白质。除去多糖中的蛋白质常用的方法是三氯醋酸法。得到的溶液基本上是没有蛋白质与小分子杂质的多糖混合物或单一多糖。 多糖的纯化是将多糖混合物分离为单一的多糖。纯化方法很多,主要纯化方法有:(l)分步沉淀法根据不同多糖在不同浓度的低级醇或酮中具有不同溶解度的性质,逐次按比例由小而大加入这些醇或酮分步沉淀。此法适用于分离各种溶解度相差较大的多糖。(2)盐析法根据不同多糖在不同浓度盐中具有不同溶解度而分离。 纯度鉴定和分子量测定多糖纯度标准不能用通常化合物纯度标准来衡量,因为我们所说的多糖纯品实质上是一定分子量范围内的均一组成。因此,测得的分子量一般为平均分子量。过去常用粘度法、蒸气压渗透计法、沉降法、超速离心法、光散射法等测定高分子化合物分子量的方法测定真菌多糖的分子量,但由于这些方法测定起来比较麻烦,且误差较大,现多数已不采用。目前实验室常用的方法为凝胶过滤法和高压液相色谱法,对于分子量小于1百万的多糖用高压液相法为最好。 1.2.1发酵、提取 取香菇465菌株斜面菌种接人摇瓶培养基中振荡培养,逐级扩大培养至10O0L,25℃下通 气培养72h,压滤,得香菇深层培养菌丝体。 上述菌丝体经水洗涤后,用3倍量热水(90一100℃)浸取3h,浸取液经浓缩加3倍量95肠乙 醇,离心得乙醇沉淀物一Le[‘’。 1.2。2分离、纯化 取Le上样于DEAE一纤维素柱上,用O。Olmol/L pH 6.95 Tris-HCI缓冲液洗脱,洗脱液分 部收集,分别用UV(280nm)和酚硫酸法测定其吸收值(A值),合并吸收峰重叠的洗脱液,经浓 缩、透析、冻干得淡黄色絮状物Le一2· Le一2进一步用DEAE一纤维素(DE52型)分离,先用pH7.8的0.oosmol/L硼酸缓冲液洗脱, 后用含lmol/L NaCI的o.Zmol/L硼酸缓冲液洗脱.各洗脱液按上法用UV230nm和酚硫酸法 检测,分别收集既含肤又含糖的洗脱液.用o.005mol/L硼酸缓冲液洗脱的组分为Le一2一1,用含 lmol/L NaCI的硼酸缓冲液洗脱的组分称Le一2一2o 1.2.3鉴定 1.2.3.1纯度 (l)HPLC法将样品配成1%浓度后进样.进样量20召L。流动相:0.002mol/L NaAc;

枸杞多糖的提取工艺研究

枸杞多糖的提取工艺研究 [摘要]枸杞为茄科植物枸杞的干燥成熟果实,主产于河北与宁夏,是一种食药两用植物,味甘、性平、入甘、肾经,具有多种药理作用和生物功能。枸杞多糖是枸杞中的主要活性成分之一。其中有关枸杞多糖的化学、药理与临床研究十分瞩目,已有不少研究报道枸杞多糖具有增强免疫力、抗癌、防衰老、增强造血功能、防止遗传损伤、抑制肿瘤生长和细胞突变等作用。鉴于枸杞多糖具有多种药理作用和生理功能,引起了人们的广泛关注。本试验研究超声辅助提取法在枸杞多糖提取中的应用,采用正交实验的方法筛选出提取枸杞多糖的最佳提取条件。当加水量为20倍,提取时间为40min,提取温度为80℃,超声功率为250W 时枸杞多糖得率最高,可达到3.06%。 [关键词]枸杞多糖;超声辅助提取;正交实验 多糖(Polysaccharide)又称多聚糖,由是由十个以上的单糖基通过普键连接而成的一类结构复杂的大分子化合物。多糖类一般不溶于水,无甜味,不能形成结晶,无还原性和变旋现象。多糖可以水解,最终水解得到单糖。枸杞多糖是枸杞的有效成分之一,经研究发现,枸杞多糖既是保健功能因子,又是一种非特异性免疫增强剂,具有调节免疫功能、降血糖、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤、增加造血功能、防止遗传损伤等作用。 本实验采用正交试验方法研究超声辅助提取法在枸杞多糖提取中的应用,并筛选出提取的最佳工艺条件。 1 实验材料与仪器 2实验步骤与方法 2.1 多糖含量标准曲线的绘制:采用H2SO4苯酚法对其加以改良。精密称取无水葡萄糖标准品25.0mg,置于25ml容量瓶中,以蒸馏水定容至刻度,配成1mg/ml的储备液,分别精密吸取储备0、0.5,1.0,1.5,2.0,2.5ml,置25ml 容量瓶中,加5%苯酚溶液1.0ml,摇匀,用移液管迅速垂直滴加浓硫酸各5.0ml,再用蒸馏水稀释至刻度,沸水浴中煮沸15min;冷却后用分光光度计在490nm波长处测定其吸光度值;以试样糖含量C(mg/ml)为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线,并计算回归方程。 2.2 枸杞多糖得率计算:多糖得率=枸杞粗多糖质量(g)÷枸杞原料质量(g)×100% (公式2-1) 2.3 超声辅助提取枸杞多糖 2.3.1 枸杞多糖提取工艺流程:枸杞→粉碎→石油醚回流脱脂(水浴温度60℃)→过滤→滤渣风干→样品称重(预处理样)→超声波法提取→抽滤→粗

多糖各种提取方法

一、植物多糖的提取 1 溶剂提取法 1.1 水提法 水对植物组织的穿透力强,提取效率高,在生产上使用安全、经济。用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提。一般植物多糖提取采用热水浸提法,该法所得多糖提取液可直接或离心除去小溶物;或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质,沉淀提纯多糖;但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同,它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离;还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离;其中,以乙醇沉淀最为普遍。但以根茎为主的植物体,细胞壁多糖含量高,热水直接提取率不高。此时为破坏细胞壁,增加多糖的溶出,有两种处理方法:一为酶解,二为弱碱溶解。 1.2酸碱提法 有些多糖适合用稀酸提取,并且能得到更高的提取率。但酸提法只在一些特定的植物多糖提取中占有优势,目前报道的并不多。而且即使有优势,在操作上还应严格控制酸度,因为酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂。 有些多糖在碱液中有更高的提取率,尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。采用的稀碱多位为0.1mol/L氢氧化钠、氢氧化钾,为防止多糖降解,常通以氮气或加入硼氢化钠或硼氢化钾。同样,碱提优势也是因多糖类的不同而异。与

酸提类似,碱提中碱的浓度也应得到有效控制,因为有些多糖在碱性较强时会水解。另外,稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅速透析,浓缩与醇析而获得多糖沉淀。

1.4 生物酶提取法 酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术,在多糖的提取过程中,使用酶可降低提取条件,在比较温和的条件中分解植物组织,加速多糖的释放或提取。此外,使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物,常用的酶有蛋白酶,纤维素酶,果胶酶等。 1.5 超声提取法 超声波是一种高频率的机械波,其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏,有利用植物有效成分的释放,而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流,有效地减小、消除与水相之间的阻滞层,加大了传质效率,有助于溶质的扩散。另外,超声波的热效应使水温基本在57℃,对原料有水浴作用。超声波提取与传统的提取方法相比,有提取效率高、时间短、耗能低等优点。超声提取的影响因素有:超声时间、超声频率(一般低频中提取效率高,但也有例外)、料液比和温度等。 1.6 微波提取 微波是频率介于300MHz和300GHz之间的非电离电磁波,微波提取的原理是微射线辐射于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部,由于溶剂及细胞液吸收微波能细胞内部温度升高,压力增大,当压力超过细胞壁的承受能力时,细胞壁破裂,位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来,传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。微波技术应用于植物细胞破壁,有效地提高了收率。具有穿透力强、选择性高、加

粗多糖提取

** 学院
本科生毕业论文
龙葵粗多糖提取工艺条件的优化
院(部)、专 业 生命科学学院 生物科学 研 究 学 生 学 方 向 姓 名 号 生物化学
指导教师姓名 指导教师职称 讲师
2014 年 06 月 01 日

大庆师范学院本科生毕业论文


本实验以龙葵为实验材料 ,通过单因素和正交法相结合的实验方法对龙葵粗 多糖提取工艺进行优化, 考察因素分别是料液比、 冲泡时间、 水浴时间和水浴温度, 最终确定最优工艺条件为料液比 1:25、冲泡时间 50℃、水浴时间 25min、水浴温 度 90℃,粗多糖的提取率为 0.1%。 关键词:龙葵;粗多糖;条件优化
I

大庆师范学院本科生毕业论文
Abstract
This experiment by morel as experiment material, using single factor and orthogonal method, experimental method of solanum nigrum polysaccharide extraction process was optimized, examine factors are respectively and solid-liquid ratio, brewing time, water bath time and water bath temperature, and ultimately determine the optimal process conditions for the material liquid ratio, the brewing time 50℃ , and water bath time 25min, water bath temperature 90℃ , the coarse polysaccharide extraction yield of 0.1%. Key words:morel;crude polysaccharide;condition optimization
II

枸杞多糖的提取与鉴定

枸杞多糖的提取与鉴定 1242818杨立君实验原理 强酸可以使糖类脱水生成糠醛。生成的糠醛或羟甲基糠醛与蒽酮脱水缩合,形成糠醛的衍生物,呈蓝绿色。颜色的深浅可以作为定量的标准。这一方法具有很高的灵敏度,糖含量在30μg左右就能进行测定,所以可以作为微量测糖之用。 一般样品少的情况下,采用这一方法比较合适]1[。 实验试剂 1.标准葡萄糖试剂:将葡萄糖105℃烘干至恒重(2h),准确称取50mg,无离子水定容至500mL,终浓度为0.1mg/mL. 2.蒽酮-浓硫酸试剂:称取0.1997g蒽酮,溶于100mL浓硫酸,现用现配。 3.葡萄糖,阿拉伯糖,甘露糖]3[],2[ 4.硫代硫酸钠溶液,活性炭,正丁醇,无水乙醇,丙酮。三氯甲烷,甲苯胺乙醇溶液 实验器材 分光光度计,超速离心机,电炉,烧杯,试管,干燥器,滤纸,层析缸以及其他相关玻璃仪器 实验流程 (一) 提取 枸杞干果粉碎,氯仿- 甲醇(2∶1)回流脱脂8~10 h 近无色,挥干溶剂以后将脱脂后的枸杞样品放入烧杯中,分3次加15、12、10 倍量的蒸馏水于90 ℃水浴提取,每次2 h;收集3 次的滤液减压浓缩至约200 mL,转移到大烧杯中,加4 倍量的95%乙醇,沉淀12 h 后抽滤,并依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚 洗涤,干燥后便得到枸杞多糖的粗制品。]4[ (二)纯化 多糖粗品加水溶解,4 000 r/min 离心10 min 后取上清液,加30%双氧水适量,40 ℃保温4~6 h 后,加三氯甲烷-正丁醇(4∶1,Sevag 法)溶液沉淀蛋白,取上清液;此步骤反复多次,直到无白色絮状沉淀出现。将除去蛋白的多糖溶液浓缩后,转移到分子排阻为8 000~10 000 Da 的透析袋中,流水透析24 h 后,蒸馏水透析过夜,溶液颜色变淡,浓缩后 真空干燥得枸杞多糖精制品。]4[ (三) 理化性质分析 将枸杞多糖精品分别加入水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和正丁醇中,观察其溶解性。另在浓硫酸存在下观察枸杞多糖与α-萘酚的作用,于界面处观察颜色变化。 (四)蒽酮比色法测定含量

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