适用于共聚焦显微镜的玻片结构的制作技术

适用于共聚焦显微镜的玻片结构的制作技术
适用于共聚焦显微镜的玻片结构的制作技术

本技术公开了一种适用于共聚焦显微镜的玻片结构,包括:中间玻片,所述中间玻片上设有若干第一通孔;盖玻片和载玻片,所述盖玻片、所述中间玻片和所述载玻片依次层叠设置;弹性材料制成的密封圈,设于所述第一通孔内且厚度略大于所述中间玻片的厚度,使得所述盖玻片、所述中间玻片和所述载玻片依次贴合时所述密封圈的上、下侧分别与所述盖玻片、所述载玻片抵接。通过设置密封圈,使用时先把中间玻片放在载玻片上,然后把密封圈放在第一通孔内,然后把观察物置于密封圈内,然后盖上盖玻片,再使用外置的夹紧件夹紧盖玻片、中间玻片和载玻片,由于密封圈的上、下侧分别与所述盖玻片、所述载玻片抵接,透明剂和荧光染料不容易溢出。

权利要求书

1.一种适用于共聚焦显微镜的玻片结构,其特征在于:包括:

中间玻片,设有若干第一通孔;

盖玻片和载玻片,所述盖玻片、所述中间玻片和所述载玻片依次层叠设置;

弹性材料制成的密封圈,设于所述第一通孔内且厚度略大于所述中间玻片的厚度,使得所述盖玻片、所述中间玻片和所述载玻片依次贴合时所述密封圈的上、下侧分别与所述盖玻片、所述载玻片抵接。

2.根据权利要求1所述的适用于共聚焦显微镜的玻片结构,其特征在于:所述第一通孔的内

侧壁与所述密封圈之间设有第一间隙。

3.根据权利要求1所述的适用于共聚焦显微镜的玻片结构,其特征在于:所述密封圈的颜色为黑色。

4.根据权利要求1所述的适用于共聚焦显微镜的玻片结构,其特征在于:所述第一通孔有两个。

5.根据权利要求1所述的适用于共聚焦显微镜的玻片结构,其特征在于:还包括若干夹紧件,所述夹紧件具有上夹持部和下夹持部,所述盖玻片、所述中间玻片和所述载玻片均设于所述上夹持部和所述下夹持部之间,所述上夹持部与所述盖玻片抵接,所述下夹持部与所述载玻片抵接,使得所述盖玻片、所述中间玻片和所述载玻片依次紧贴。

6.根据权利要求5所述的适用于共聚焦显微镜的玻片结构,其特征在于:所述盖玻片呈横向设置的矩形板状,所述夹紧件有两个,两个夹紧件分别设于所述盖玻片的左端、右端。

7.根据权利要求5所述的适用于共聚焦显微镜的玻片结构,其特征在于:所述夹紧件为回形针。

技术说明书

适用于共聚焦显微镜的玻片结构

技术领域

本技术涉及实验器材领域,特别是涉及一种适用于共聚焦显微镜的玻片结构。

背景技术

目前国内许多实验室所使用的激光共聚焦显微镜是倒置式的,一般有两种方式把观察物、透明剂和荧光染料的混合物置于物镜上方;其中一种方式是使用共聚焦专用培养皿,其为塑料的培养皿体底部嵌上厚度约为0.17mm的玻璃片,玻璃片通过一种特殊的透明生物胶与培养皿体底部粘合,直接把共聚焦专用培养皿置于物镜上方即可,但是其难以清洗和灭菌,只能一次性使用,实验成本较高;另一种方式是使用常规的盖玻片与载玻片的组合结构,把观察物置于载玻片上、滴加透明剂和荧光染料,然后盖上盖玻片,然后把整个盖玻片与载玻片的组合结构翻转,再置于物镜上方,由于液体的表面张力作用,盖玻片与载玻片会保持贴合、不会掉落,但这样盖玻片与载玻片之间的空间很小,透明剂和荧光染料容易溢出,而实验中使用的透明剂(如冬青油)和荧光染料(DAPI)等大多具有刺激性气味并具有毒性,经常接触会对人体造成伤害。

技术内容

本技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此,本技术提出一种适用于共聚焦显微镜的玻片结构,所述玻片结构使用时透明剂和荧光染料不容易溢出。

根据本技术实施例的适用于共聚焦显微镜的玻片结构,包括:中间玻片,所述中间玻片上设有若干第一通孔;盖玻片和载玻片,所述盖玻片、所述中间玻片和所述载玻片依次层叠设置;弹性材料制成的密封圈,设于所述第一通孔内且厚度略大于所述中间玻片的厚度,使得所述盖玻片、所述中间玻片和所述载玻片依次贴合时所述密封圈的上、下侧分别与所述盖玻片、所述载玻片抵接。

根据本技术实施例的适用于共聚焦显微镜的玻片结构,至少具有如下技术效果:通过设置密封圈,使用时先把中间玻片放在载玻片上,然后把密封圈放在第一通孔内,然后把观察物置于密封圈内,然后盖上盖玻片,再使用外置的夹紧件夹紧盖玻片、中间玻片和载玻片,由于密封圈的上、下侧分别与所述盖玻片、所述载玻片抵接,透明剂和荧光染料不容易溢出。

根据本技术的一些实施例,所述第一通孔的内侧壁与所述密封圈之间设有第一间隙。

根据本技术的一些实施例,所述密封圈的颜色为黑色。

根据本技术的一些实施例,所述第一通孔有两个。

根据本技术的一些实施例,本技术还包括若干夹紧件,所述夹紧件具有上夹持部和下夹持部,所述盖玻片、所述中间玻片和所述载玻片均设于所述上夹持部和所述下夹持部之间,所述上夹持部与所述盖玻片抵接,所述下夹持部与所述载玻片抵接,使得所述盖玻片、所述中间玻片和所述载玻片依次紧贴。

根据本技术的一些实施例,所述盖玻片呈横向设置的矩形板状,所述夹紧件有两个,两个夹紧件分别设于所述盖玻片的左端、右端。

根据本技术的一些实施例,所述夹紧件为回形针。

本技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本技术的实践了解到。

附图说明

本技术的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解,其中:

图1是本技术实施例的玻片组件的结构主视图;

图2是本技术实施例的玻片组件的结构俯视图;

图3是图2中所示的玻片组件与夹紧件的装配结构示意图。

附图标记:

玻片组件100、盖玻片110、中间玻片120、载玻片130、密封圈140、夹紧件200。

具体实施方式

下面详细描述本技术的实施例,所述实施例的示例在附图中示出,其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的,仅用于解释本技术,而不能理解为对本技术的限制。

在本技术的描述中,需要理解的是,涉及到方位描述,例如上、下、前、后、左、右等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本技术和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本技术的限制。此外,若干的含义是一个或者多个,多个的含义是两个以上,大于、小于、超过等理解为不包括本数,以上、以下、以内等理解为包括本数。如果有描述到第一、第二只是用于区分技术特征为目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量或者隐含指明所指示的技术特征的先后关系。

本技术的描述中,除非另有明确的限定,设置、安装、连接等词语应做广义理解,所属技术领域技术人员可以结合技术方案的具体内容合理确定上述词语在本技术中的具体含义。

下面参考图1和图2描述根据本技术实施例的适用于共聚焦显微镜的玻片结构。

如图1和图2所示,根据本技术实施例的适用于共聚焦显微镜的玻片结构,包括盖玻片110、中间玻片120、载玻片130和密封圈140。

中间玻片120上设有若干第一通孔;盖玻片110、中间玻片120和载玻片130依次层叠设置;密封圈140由弹性材料制成,密封圈140设于第一通孔内且厚度略大于中间玻片120的厚度,使得盖玻片110、中间玻片120和载玻片130依次贴合时密封圈140的上、下侧分别与盖玻片110、载玻片130抵接。

例如,如图1和图2所示,盖玻片110、中间玻片120、载玻片130和密封圈140合称为玻片组件100,盖玻片110、中间玻片120和载玻片130可均为横向设置的矩形板状,盖玻片110、中间玻片120和载玻片130由上至下依次层叠设置,密封圈140设于盖玻片110和载玻片130之间且

设于第一通孔内。

使用时,先把中间玻片120放在载玻片130上,然后把密封圈140放在第一通孔内,然后把观察物、透明剂和荧光染料的混合物置于密封圈140内,然后盖上盖玻片110,再使用外置的夹紧件200夹紧盖玻片110、中间玻片120和载玻片130,即可整体翻转然后置于物镜上方,由于密封圈140的上、下侧分别与盖玻片110、载玻片130抵接,观察物中的透明剂和荧光染料不容易溢出,密封圈140和载玻片130之间可通过热熔胶贴合,使得添加透明剂和荧光染料时透明剂和荧光染料不会从密封圈140和载玻片130之间流出;同时,使用完毕后可拆分盖玻片110、中间玻片120、载玻片130和密封圈140分别进行清洗和灭菌,可重复使用,实验成本较低。

此外,盖玻片110、载玻片130和密封圈140都可直接购买获得,中间玻片120可由另外一块载玻片130使用玻璃开孔器开孔制成,结构简单,制作简便,便于进行推广使用。

在本技术的一些实施例中,第一通孔的内侧壁与密封圈140之间设有第一间隙。加工中间玻片120时可把第一通孔的直径加工成比密封圈140的外径大,这样把密封圈140放在第一通孔内第一通孔的内侧壁与密封圈140之间即有第一间隙,当然也可先在中间玻片120上加工出第一通孔,再购买外径比第一通孔的直径小的密封圈140。这样把观察物置于密封圈140内时,透明剂和荧光染料的量能加至稍微溢出密封圈140,再盖上盖玻片110,排出密封圈140内的空气,出去空气的干扰,而溢出的透明剂和荧光染料会留置在第一间隙内,载玻片130、中间玻片120、盖玻片110紧贴时透明剂和荧光染料不会被挤出,实验员翻转、挪动本技术时不会接触到透明剂和荧光染料。

根据本技术的一些实施例,密封圈140的颜色为黑色。当第一通孔有两个以上时,黑色的密封圈140能避免共聚焦显微镜拍照时孔间荧光的影响。

根据本技术的一些实施例,第一通孔有两个。如图1和图2所示,中间玻片120具有两个第一通孔,载玻片130、中间玻片120和盖玻片110均呈横向设置的矩形板状,两个第一通孔左右间隔设置,这样能一次观察两个样品,简化实验操作。需要说明的是,第一通孔的数量为至少一个即可,当为一个时附图中未示出,第一通孔可设于经常中间玻片120的中部。

根据本技术的一些实施例,本技术还包括若干夹紧件200,夹紧件200具有上夹持部和下夹持部,盖玻片110、中间玻片120和载玻片130均设于上夹持部和下夹持部之间,上夹持部与盖玻片110抵接,下夹持部与载玻片130抵接,使得盖玻片110、中间玻片120和载玻片130依次紧贴。参照图3,盖玻片110呈横向设置的矩形板状,夹紧件200有两个,两个夹紧件200分别设于盖玻片110的左端、右端,夹紧盖玻片110、中间玻片120和载玻片130,则密封圈140保持与盖玻片110和载玻片130抵接,即使翻转挪动本技术,透明剂和荧光染料也不会溢出;而且两个夹紧件200分别设于盖玻片110的左端、右端能使本技术更牢固。需要说明的是,夹紧件200的数量为至少一个即可,当为一个时附图中未示出,夹紧件200可置于两个第一通孔之间,同样能达到夹紧盖玻片110、中间玻片120和载玻片130的目的。

根据本技术的一些实施例,夹紧件200为回形针。回形针成本低廉,可通过购买直接获得,使用简便;而且,回形针呈偏平状、体积较小,使用回形针夹紧盖玻片110、中间玻片120和载玻片130对整个玻片结构的厚度和体积影响较小,使玻片结构能灵活设置在需要的位置。

以上对本技术的较佳实施方式进行了具体说明,但本技术并不限于所述实施例,熟悉本领域的技术人员在不违背本技术精神的前提下还可作出种种的等同变型或替换,这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

显微镜使用及观察永久装片

课时教学设计 年级:高一学科:生物 课题:显微镜使用及观察永久装片 课时:第 1 课时 课型:实验课(指:新授课、复习课、作文课等) 一、课程分析: 正确使用高倍显微镜和制作临时装片是重要的实验室操作技能。本节课观察所用的装片都是现成的,不需要进行临时装片的制作,重点在于掌握如何正确使用高倍显微镜及利用高倍显微镜观察比较几种细胞的异同。使用显微镜观察各种细胞是手段,认识细胞的多样性和统一性是目标,观察之后要及时进行总结,此外高倍显微镜在后续的观察实验中还要用到,因此这节课掌握高倍显微镜使用的方法显得尤为重要。 二、学情分析: 初中时学生已经使用过低倍显微镜,对于操作步骤有一定了解,学生积极性很高,但由于时间间隔较长,加上学生动手能力较差,可能找不到所要观察的细胞。因此,需要教师详细示范和指导。关于高倍显微镜使用的操作步骤不但需要学生掌握,而且教师需要在操作前设置问题引导学生思考,以便使其真正理解这些操作步骤,更好的完成观察细胞的任务。 三、设计思路: 首先介绍显微镜的结构及各部分的作用,再介绍显微镜的使用方

法,同时设置相关问题引导学生思考进行这些操作的原因,并进行示范和指导,然后对于显微镜使用时应注意的相关问题也进行说明,最后学生动手操作,教师巡视并适时进行示范和指导,学生观察细胞并进行比较归纳。 四、学习目标: 1.说出使用高倍显微镜的步骤和操作要点 2.能够正确使用高倍显微镜观察几种细胞 五、教学流程: 一.初步观察整体感知 (一)显微镜的结构 请结合课本和自己已有的知识,观察显微镜的各个组成部分,明确其各部分作用,可以同桌交流也可询问老师。 二亲自操作了解实质 (一)显微镜的使用方法 请同学们仔细观察显微镜中的物镜及目镜并参照显微镜的使用流程动手操作,独立完成下列表格,提出自己的疑问,同桌交流之后自由发言。

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用 一、激光扫描共聚焦显微镜的原理 传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)采用点光源照射样本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜搜集,并沿原照射光路回送到由双色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点被挡在探测针孔之外不能成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学切面,避免了非焦平面上杂散光线的干扰,克服了普通显微镜图像模糊的缺点,因此能得到整个焦平面上清晰的共聚焦图像。 原理图 二、激光扫描共聚焦显微镜组成特点 LSCM由显微镜光学系统,激光光源,扫描装置和检测系统构成,整套仪器由计算机控制,各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活地

进行。显微镜是LSCM的主要组件,它关系到系统的成像质量。通常有倒置和正置两种形式,前者在切片、活细胞检测等生物医学应用中使用更广泛。 三、激光扫描共聚焦显微镜的应用 (一)细胞的三维重建 普通荧光显微镜分辨率低,显示的图像结构为多层面的图像叠加,结构不够清晰。LSCM能以0.1μm的步距沿轴向对细胞进行分层扫描,得到一组光学切片,经A/D转换后作为二维数组贮存。这些数组通过计算机进行不同的三维重建算法,可作单色或双色图像处理,组合成细胞真实的三维结构。旋转不同角度可观察各侧面的表面形态,也可从不同的断面观察细胞内部结构,测量细胞的长宽高、体积和断层面积等形态学参数。通过模拟荧光处理算法,可以产生在不同照明角度形成的阴影效果,突出立体感。通过角度旋转和细胞位置变化可产生三维动画效果。LSCM的三维重建广泛用于各类细胞骨架和形态学分析、染色体分析、细胞程序化死亡的观察、细胞内细胞质和细胞器的结构变化的分析和探测等方面。(二)静态结构检测 1.细胞原位检测核酸 用于细胞核定位及其形态学观察、检测细胞内DNA的复制及断裂情况以及染色体定位观察。 2.原位检测蛋白质、抗体及其他分子 原位检测蛋白质、抗体及其他分子 免疫荧光标记技术 检测荧光蛋白 3.检测细胞凋亡 检测细胞凋亡不同时期细胞形态、细胞凋亡相关蛋白

生物人教版七年级上册使用显微镜观察人的口腔上皮细胞永久装片并画图

使用显微镜观察人的口腔上皮细胞 永久装片并画图 柳泉铺一初中杨国健 2017年6月14日

使用显微镜观察人的口腔上皮细胞永久 装片并画图 教学目标:1会使用显微镜 2能画出人的口腔上皮细胞结构示意图 3培养学生的动手操作能力 教学重点:使用显微镜并画出人的口腔上皮细胞结构示意图 教学难点:使用显微镜 教学方法:实验 教学用具:显微镜.擦镜纸. 人的口腔上皮细胞永久装片. 白纸. 橡皮. 铅笔。 教学过程: 1复习导入 上节课我们学习了显微镜的结构,我们已经对显微镜有了初步的认识,现在我提问一下.显微镜的各部分结构? 学生答.认识显微镜的目的是更好的利用显微镜,那么我们这节课就来共同研究怎样使用显微镜? 2授新课 现在请大家预习课本37页至39页,先了解一下使用显微镜的方法步骤?分几步?分别是

哪几步?你认为这几步中,哪一步是关键?哪一步感觉有点难?(学生四人一组讨论) 3 教师细讲 无论是关键步骤,还是比较难的步骤,下面我带着大家分步来完成? 第一步:取镜与安放。这一步比较容易,指名让学生来完成.其他学生找出不足点,教师再演示。强调左手托,右手握。第二步,对光这一步是实验成功最关键的一步,让学生先讨论画出关键:1.低倍物镜2.最大光圈3.反光镜4.视野明亮。教师在演示的时候.强调一定要用低倍物镜(一般情况下指又粗又短的物镜)正对着通光孔,光圈要选用最大光圈,保证物镜.通光孔,最大光圈成一条直线。反光镜如何选要根据光线而定,光线暗时用凹面镜,光线强时用平面镜。第三步:安放玻片。这一步要强调玻片的正面朝上,标本中心正对着通光孔,然后用压片夹固定住玻片。第四步:调焦观察。本步骤比较难,首先顺时针旋转粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,使物镜距离玻片大约2厘米,强调在镜筒下降的同时,眼睛从一侧观看,以防物镜压碎玻片,然后再逆时针旋转细准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到视野里出现清晰的物象为止,再缓慢移动细准焦螺旋,使视野更为清楚。这一步要强调,调焦的速度不要过快,另外要告诉学生,视野里看到的是物体的倒像,所以在物象出观偏离视野中心时,要会正确移

激光扫描共聚焦显微镜

激光共聚焦显微镜的原理与应用范围 激光扫描共聚焦显微镜是采用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。把光学成像的分辨率提高了30%~40%,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察生理信号及细胞形态的变化,成为形态学,分子生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代的研究工具。 1激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)的原理 从基本原理上讲,共聚焦显微镜是一种现代化的光学显微镜,它对普通光镜从技术上作了以下几点改进: 1.1用激光做光源因为激光的单色性非常好,光源波束的波长相同,从根本上消除了色差。1.2采用共聚焦技术在物镜的焦平面上放置了一个当中带有小孔的挡板,将焦平面以外的杂散光挡住,消除了球差;并进一步消除了色差 1.3采用点扫描技术将样品分解成二维或三维空间上的无数点,用十分细小的激光束(点光源)逐点逐行扫描成像,再通过微机组合成一个整体平面的或立体的像。而传统的光镜是在场光源下一次成像的,标本上每一点的图像都会受到相邻点的衍射光和散射光的干扰。这两种图像的清晰度和精密度是无法相比的。 1.4用计算机采集和处理光信号,并利用光电倍增管放大信号图 在共聚焦显微镜中,计算机代替了人眼或照相机进行观察、摄像,得到的图像是数字化的,可以在电脑中进行处理,再一次提高图像的清晰度。而且利用了光电倍增管,可以将很微弱的信号放大,灵敏度大大提高。由于综合利用了以上技术。可以说LSCM是显微镜制作技术、光电技术、计算机技术的完美结合,是现代技术发展的必然产物。 2LSCM在生物医学研究中的应用 目前,一台配置完备的LSCM在功能上已经完全能够取代以往的任何一种光学显微镜,它相当于多种制作精良的常用光学显微镜的有机组合,如倒置光学显微镜、紫外线显微镜、荧光显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜(PH)、微分干涉差显微镜(DIC)等,因此被称为万能显微镜,通过它所得到的精细图像可使其他的显微镜图像无比逊色。

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用-17954讲解

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用 Tina(2007-10-23 09:40:17 一、激光扫描共聚焦显微镜的原理 传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM采用点光源照射样本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜搜集,并沿原照射光路回送到由双色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点被挡在探测针孔之外不能成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学切面,避免了非焦平面上杂散光线的干扰,克服了普通显微镜图像模糊的缺点,因此能得到整个焦平面上清晰的共聚焦图像。 原理图

二、激光扫描共聚焦显微镜组成特点 LSCM由显微镜光学系统,激光光源,扫描装置和检测系统构成,整套仪器由计算机控制,各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活地进行。显微镜是LSCM的主要组件,它关系到系统的成像质量。通常有倒置和正置两种形式,前者在切片、活细胞检测等生物医学应用中使用更广泛。 三、激光扫描共聚焦显微镜的应用 一)细胞的三维重建

普通荧光显微镜分辨率低,显示的图像结构为多层面的图像叠加,结构不够清晰。LSCM 能以0.1μm的步距沿轴向对细胞进行分层扫描,得到一组光学切片,经A/D转换后作为二维数组贮存。这些数组通过计算机进行不同的三维重建算法,可作单色或双色图像处理,组合成细胞真实的三维结构。旋转不同角度可观察各侧面的表面形态,也可从不同的断面观察细胞内部结构,测量细胞的长宽高、体积和断层面积等形态学参数。通过模拟荧光处理算法,可以产生在不同照明角度形成的阴影效果,突出立体感。通过角度旋转和细胞位置变化可产生三维动画效果。LSCM 的三维重建广泛用于各类细胞骨架和形态学分析、染色体分析、细胞程序化死亡的观察、细胞内细胞质和细胞器的结构变化的分析和探测等方面。 二)静态结构检测:原位鉴定细胞或组织内生物大分子、观察细胞及亚细胞形态结构 1.细胞原位检测核酸 用于细胞核定位及其形态学观察、检测细胞内DNA的复制及断裂情况以及染色体定位观察。 2.原位检测蛋白质、抗体及其他分子 原位检测蛋白质、抗体及其他分子 免疫荧光标记技术 检测荧光蛋白 3.检测细胞凋亡

激光共聚焦显微镜技术1讲解

激光共聚焦显微镜技术 The techniques and applications of Confocal Laser Scanning Microscopy 激光共聚焦显微镜(LSCM)的发展简史 1957年,Marvin Minsky提出了共聚焦显微镜技术的某些基本原理,获得了美国的专利。1978年,阿姆斯特丹大学的G.J.Brakenhoff首次展示了改善了分辨率的共焦显微镜。 1985年,Wijnaendtsvan Resandt推出了第一台对荧光标记的材料进行光切的共焦显微镜 激光共聚焦显微镜(LSCM)的发展简史 ?80年代末,各家公司都推出了商品化的共焦显微镜,英国的Bio-Rad公司的MRC系列,德国Leica公司的TCS系列,Zeiss公司的LSM系列等。 ?近二十年来,从滤片型到光谱型,人们对共焦高分辨率,采集图像快速,技术的改进及应用开发不断进行,出现了很多新的技术。如双光子,FCS,FLIM ,STED等。 共焦显微镜的优点 人眼分辨率:0.2mm 光学显微镜分辨率:0.25μm 电子显微镜分辨率:0.2nm 共焦显微镜分辨率:μm 共焦显微镜的优点 ?电子显微镜的缺陷: 1.只能观察固定样品 2.样品制备过程(固定、包埋、切片)造成的假象 ?荧光显微镜的缺陷: 1.可以观察活细胞或组织,但细胞或组织内结构高度重叠。 2.荧光具有强散射性,造成图像实际清晰度的大大下降。 3.荧光漂白很快,使荧光图像的拍照有困难。 4.如果荧光滤片选配不当,多荧光标记样品图像的采集很困难,且很难抑制光谱交叉。 共焦显微镜的优点 ?共焦显微镜与传统显微镜的区别 1.抑制图像的模糊,获得清晰的图像 激光扫描共焦显微镜技术 ?共焦显微镜与传统显微镜的区别

教科版六年级科学下 5.用显微镜观察身边的生命世界(一)同步练习(含答案)

5.用显微镜观察身边的生命世界(一) 1.填空题。 (1)拿显微镜时,一只手握住,另一只手托着,将显微镜向 着光摆放在平坦的桌面上。 (2)在显微镜下观察物体时,必须把物体制成。 (3)使用显微镜时,我们一般用眼进行观察。 (4)在使用显微镜时,慢慢地移动载玻片,观察标本的各个部分,注意移动的方向 和从目镜里看到的方向正好。 2.填图题。 标出显微镜各个部分的名称并回答问题。 3.排序题。 请将正确使用显微镜的方法和步骤进行排序。 ( )上片:将标本的载玻片放在载物台上。 ( )安放:将显微镜向着光摆放在桌面上。 ( )观察:慢慢移动载玻片,观察标本的各个位置。 ( )调焦:调节准焦螺旋,将镜筒慢慢地抬升到标本出现在视野里为止。 ( )对光:调节载物台下的反光镜,从目镜往下看,能看到一个亮的光圈。4.判断题。 (1)要想观察植物的细胞结构,可以直接将植物放在显微镜下进行观察。 ( ) (2)使用显微镜观察植物细胞装片时,如果将低倍物镜转换成高倍物镜,看到的情 况是视野范围变大,细胞变小。 ( ) (3)在显微镜下看到的洋葱表皮细胞中的小黑点是细胞核。 ( )

5.选择题。 (1)1663年,( )用自制的复合显微镜观察一块软木薄片结构,他将观察到的“小房间”命名为细胞。 A.詹森父子 B.伽利略 C.罗伯特·胡克 (2)下列说法中不正确的是( )。 A.细胞学说的建立是19世纪自然科学的重大发现之一 B.植物体是由细胞构成的,但是动物体不具有细胞结构 C.橡树树皮的细胞是长方形的 (3)在显微镜下观察到的洋葱表皮细胞是近似( )的。 A.圆形 B.正方形 C.长方形 6.连线题。 请将制作洋葱表皮切片装置的工具与其用途进行连线。 镊子盛放多余的洋葱片 滴管夹取实验材料 载玻片吸取少量液体 培养皿放置切片标本 烧杯吸取多余的水分 裁纸刀盛放液体 吸水纸切割洋葱 7.画图题。 画出在显微镜下观察到的洋葱表皮结构,并说说与肉眼观察到的洋葱表皮结构有什么不同。 不同点:

《实验报告》北师大版七年级生物(下册)活动二十三 用显微镜观察蛔虫卵

活动二十三用显微镜观察蛔虫卵 日期:____年____月____日小组成员:_____________ 实验准备 一、实验目的 1.认识病原体——蛔虫卵。 2.学会检查蛔虫卵的方法。 二、实验材料 显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、牙签、0.9%生理盐水、蛔虫卵永久装片、新鲜的粪便少许。 实验过程 一、方法步骤 1.在低倍显微镜下观察蛔虫卵永久装片,呈圆形或椭圆形、棕黄色、外面有一层波状膜的小体就是蛔虫卵。 2.取洁净的载玻片一块,在载玻片的中央滴一滴0.9%生理盐水。 3.用干净的牙签挑取一点粪便,均匀地涂在载玻片上的生理盐水中,盖好盖玻片。 4.在低倍镜下观察,看能否找到蛔虫卵。 二、注意事项 1.观察时光圈要略小一些,使视野不要太亮,这样观察的效果较好。 2.实验完毕要洗手。 3.盖玻片、载玻片均放入教师提供的消毒液中浸泡半小时,再用清水冲洗干净。 4.牙签和剩余污物要投放在污染桶内统一处理。 三、实验记录 将实验过程中观察到的现象记录下来: 。 四、实验结论 通过实验记录的结果,你得到的结论是: 。

五、疑惑与讨论 1.实验中是如何检查蛔虫卵的? 2.小组内讨论:传染病是如何引起的? 跟踪训练 一、填空题 1.传染病是指由引起的,能够在与之间或之间传播的疾病。传染病与非传染病不同,它具有和等特点。 2.用显微镜观察蛔虫卵,在视野中看到的蛔虫卵形状是,颜色是,外面有一层。 二、选择题 1.下列不属于病原体的是() A.感冒病毒 B.破伤风杆菌 C.蛔虫 D.苍蝇 2.传染病的传染源是指() A.传播疾病的生物或生物媒介 B.能散播病原体的人或动物 C.病原体就是传染源 D.病人的排泄物和分泌物 3.下列不属于传染病的是() A.肺结核 B.病毒性肝炎 C.疟疾 D.心脏病 4.正在患病毒性肝炎的人属于() A.病原体 B.易感人群

激光扫描共聚焦显微镜

突破衍射的束缚 ——激光扫描共聚焦显微镜 探索微观世界的神奇奥秘,必须要使用一些非常先进的“利器”。例如原子力显微镜,扫描隧道显微镜等。激光扫描共聚焦显微镜也是显微镜中的一种。它,诞生于20世纪80年代。它的出现是显微镜发展史上的一次巨大跨越,是一项具有划时代意义的高科技新产品,是当今 世界最先进的细胞生物学分析仪器。它可以使图像更为清晰,与计算机及相应软件技术结合,可以时时监控。与传统光学显微镜相比,它具有更高的分辨率,并可形成清晰的三维图像等优点。所以它问世以来在生物学的研究领域中得到了广泛应用。希望通过本专题,能够让大家了解微观世界,亲身鉴赏到显微技术发展所带来的视觉震撼。 激光扫描共聚焦显微镜是近十年发 展起来的医学图像分析仪器,现已广泛应用于荧光定量测量、共焦图像分析、三维图像重建等方面。其性能为普遍光学显微镜质的飞跃,是电子显微镜的一个补充。 传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共聚焦显微镜采用点光源照射样本, 在焦平面上形 激光扫描共聚焦显微镜 共聚焦显微镜原理

成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜搜集,并沿原照射光路回送到由双色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点被挡在探测针孔之外不能成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学切面,避免了非焦平面上杂 散光线的干扰,克服了普通显微镜图像模糊的缺点,因此能得到整个焦平面上清晰的共聚焦图像。 激光共聚焦显微镜作为光学显微镜的重大改进,与传统照明显微镜相比有许多独特的优势: 它可以控制焦深、照明强度、降低了非焦平面上光线噪音干扰, 观察到非常清晰的高质 传统显微镜和激光扫描共聚焦显微镜所拍摄图片(https://www.360docs.net/doc/3c5459235.html,/153/1537457.html ) 共聚焦原理图(https://www.360docs.net/doc/3c5459235.html, )

实验1 显微镜的使用实验报告

实验1 显微镜的使用实验报告 班级:10生科二班/星期三上午第二大节课/第二小组 姓名:杨袁予童组员:杨方、朱树生 实验时间2113年 3月 6日 一、实验名称 显微镜的使用方法 二、实验目的: 1、掌握显微镜的构造,熟练使用显微镜进行试验观察。 2、能够分析显微镜常见故障的原因,并作适当处理。 三、实验内容: 1、利用高、低倍显微镜和油镜观察一些永久装片。 2、将所观察到的镜像绘制成图片。 三、实验器材: 显微镜、装片或切片等。 四、实验原理: 1、显微镜的用途 显微镜是一种精密的放大仪器,是研究生物学不可缺少的工具。在学习生物学的过程中,要研究许多细微的结构,必须借助显微镜进行观察。 2、显微镜的构造 光学显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成,其中光学系统主要包括物镜、目镜、遮光器和光源等。 3、显微镜的成像原理 光学显微镜的光学系统两由大部分组成。由目镜和物镜组成成像系统,由反光镜和旋转光样构成照明系统。

五、实验步骤: 1、低倍镜的使用 (1)取镜和放置:右手握住镜臂,左手托住镜座。把显微镜轻轻地放在实验桌上略偏左、离实验桌边缘5cm为宜。 (2)对光:转动转换器:使低倍物镜正对通光孔(镜端与孔保持2厘米距离)。转动遮光器,使大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内,右眼睁开同时用手转动反光镜对向光源。直到目镜里看到白亮的视野。(3)放置玻片标本:把要观察的装片放在载物台上,有标本的一面向上 使标本正对通光孔的中心,然后用压片夹压住。 (4)调节焦距:下降镜筒,侧目注视物镜头,用手旋转粗准焦螺旋直到物镜头接近装片为止。上升镜筒,左眼注视目镜内,用手旋转粗准焦螺旋使镜筒缓缓上升,直到从目镜内看清物像为止。再轻微来回转动细焦螺旋,使物像更清晰。 2、高倍镜的使用 (1)选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时把物像调节最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察。 (2)转动转换器:调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作。 (3)调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察。调节细准焦螺旋。如果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节。

激光扫描共聚焦显微镜_LSCM_及其生物学应用

第8卷第4期激 光 生 物 学 报V o l.8 N o.4 1999年12月A CTA LA SER B I OLO GY S I N I CA D ec.1999 激光扫描共聚焦显微镜(L SCM) 及其生物学应用 肖艳梅 付道林 李安生 (中国科学院遗传研究所,北京 100101) 摘 要 激光扫描共聚焦显微镜(L SC M)有效地排除了非焦平面信息,提高了分辨率及对比度,使图像更为精确清晰;与计算机及相应的软件技术组合,L SC M实现了连续光学切片,广泛应用于生物三维结构重组及动态分析。目前,激光共聚焦显微技术已成功应用于生物芯片技术、激光显微操作系统、细胞骨架研究、生理生化及胚胎学研究、基因定位等领域。多光子技术的发展,进一步改善了L SC M成像清晰度,拓宽了L SC M在生物学领域中的应用。本文叙述了L SC M的基本原理及其在生物学研究中的应用。 关键词 激光共聚焦显微镜(L SC M);光学切片;三维成像;多光子技术,应用 中图分类号 Q336 文献标识码 A 文章编号 1007-7146(1999)04-0305-07 La ser Scann i ng Confoca l M icroscope(L SC M)and Its Appl ica tion i n B iology X IA O Y an m ei FU D ao lin L I A n sheng (Institute of Genetics,Ch inese A cadem y of Sciences,Beijing 100101) Abstract L aser Scann ing Confocal M icro scop e(L SC M)excludes the ou t-of-focu s signals effectively and enhances its reso lu ti on and con trast and p rovides clearer i m https://www.360docs.net/doc/3c5459235.html, b in ing w ith com p u ter and co rresponding softw are,L SC M realizes series op tical secti on ing and is app lied in3 di m en si onal recon structi on and dynam ic assay of b i o logical speci m en s w idely.A t p resen t,L SC M has been app lied successfu lly in Gene ch i p,laser m icro m an i p u lati on system,studies on cyto skeleton, p hysi o logy and b i ochem istry research,em b ryo logy research,gene locati on and o ther b i o logy fields. Ow ing to the p resen t of the m u lti p ho ton techn ique,h igher i m aging defin iti on and m o re ex ten sive app licati on cou ld be ach ieved.In th is review,w e exp lain the basic p rinci p le of the L aser Scann ing Confocal M icro scop e(L SC M)and discu ss its app licati on in b i o logy research. Key words L SC M;Op tical secti on;M u lti p ho ton techn ique;3D i m aging;A pp licati on 长期以来,普通光学显微镜对于我们理解生物结构,揭示生命现象发挥了很大作用。然而,受光波衍射效应的限制,普通光学显微镜的分辨率已接近理论极限。因此,人们考虑通过增加物象与背景的反差来改善成像质量,提高图像清晰度,间接提高显微镜成像分辨率。激光扫描共聚焦显微镜(L aser Scann ing Confocal M icro scop e, L SC M)的诞生,在一定程度上实现了这一目的。 激光扫描共聚焦显微镜是随着光学、视频、计算机等技术的迅速发展而诞生的高科技产品,为现代分子生物学研究提供了有力的工具。早在1957年,M arvin M in sky就提出了共聚焦显微镜技术的某些基本原理。随后二十多年中,著名学者Egger、Petran、牛津和阿姆斯特丹等人就此项工作进行了积极的探索。1984年B i o R ad公司首次推出世界第一台商品化共聚焦显微镜。随后Zeiss、M eridian等多家公司相继开发出各种型号的共聚焦显微镜产品。目前,激光扫描共聚焦显微 收稿日期:1999-05-18

小学六年级科学用显微镜观察研究身

最新资料推… 用显微镜观察研究身边的生命世界 教学目标: 1.发现并提出有关生命世界的问题,产生对生命世界更多了解的愿望。 2.带着感兴趣的问题制定简单的研究计划,并按计划进行研究,在老师或家长的帮助下探索微小世界,培养科学探究的能力。 3.能对观察过程和结果进行整理,写出简单的符合要求的观察报告,在班上和大家交流。 教学准备: 1.教师预先准备好一些资料卡片或相关的书籍,这些资料卡片主要是操作方面的。比如如何培养和观察霉菌、如何培养手上细菌的菌落、如何获得生活在水里的微生物等。 2.根据学校的条件,准备一些显微镜和在显微镜下观察的标本、工具和材料。 教学过程: 一、引入 1. 对话:詹森发明了世界上第一架显微镜只看到了跳蚤,列文虎克用自制的显微镜发现了什么? 2. 为什么列文虎克会有这么多精彩的发现? 3. 我们的许多同学也用显微镜发现了生物世界的许多有趣的问题,大家读读我们教材上的事例。 4. 学生阅读教材第15 页“宝石花耐旱的秘密”等内容。

5. 讲解:“宝石花耐旱的秘密”的作者善于观察,从自己的生活中发现问题,提出问题,最后又通过自己的观察和研究解决了问题,得出了宝石花耐旱的答案。我们在平时观察中,对周围的生命世界也一定有许多问题,让我们也来自己寻求答案。 二、提出问题 1. 我们对生命世界有哪些问题呢?可以从自己的家、校园、我们的身体等方面好好想想。自学课文第12 页,然后分组讨论,互相启发,然后归纳出几个可以探究的问题。如: 2. 鱼缸里的水变绿了,是不是水里有什么微生物? 3. 厨房里的砧板上有没有肉眼看不见的微生物? 4. 土壤中有没有微生物? 5. 我们的头发在显微镜下是什么样的? 6. 大组交流。各组提出本组的问题,由学生或老师把这些问题都记录下来,并进行整理、归类和筛选。 三、教师指导学生使用显微镜和准备观察材料 1. 说明显微镜下观察的要求,讲解观察标本的制作和培养。 2. 出示显微镜,讲解显微镜的使用方法。 3. 进行安全教育和环境教育。 四、确定研究课题,制订研究计划 1. 各组从这些问题中选择一个感兴趣的问题,作为本组的研究课题。 2. 根据问题制订观察研究的计划。 3. 大组交流计划

激光共聚焦显微镜原理

激光共聚焦显微镜原理 激光共聚焦扫描显微技术(Confocal laser scanning microscopy)是一种高分辨率的显微成像技术。普通的荧光光学显微镜在对较厚的标本(例如细胞)进行观察时,来自观察点邻近区域的荧光会对结构的分辨率形成较大的干扰。共聚焦显微技术的关键点在于,每次只对空间上的一个点(焦点)进行成像,再通过计算机控制的一点一点的扫描形成标本的二维或者三维图象。在此过程中,来自焦点以外的光信号不会对图像形成干扰,从而大大提高了显微图象的清晰度和细节分辨能力。 图1. 共聚焦显微镜简化原理图 图1是一般共聚焦显微镜的工作原理示意图。用于激发荧光的激光束(Laser)透过入射小孔(light source pinhole)被二向色镜(Dichroic mirror)反射,通过显微物镜(Objective lens)汇聚后入射于待观察的标本(specimen)内部焦点(focal point)处。激光照射所产生的荧光(fluorescence light)和少量反射激光一起,被物镜重新收集后送往二向色镜。其中携带图像信息的荧光由于波长比较长,直接通过二向色镜并透过出射小孔(Detection pinhole)到达光电探测器(Detector)(通常是光电倍增管(PMT)或是雪崩光电二极管(APD)),变成电信号后送入计算机。而由于二向色镜的分光作用,残余的激光则被二向色镜反射,不会被探测到。

图2. 探测针孔的作用示意图 图2解释了出射小孔所起到的作用:只有焦平面上的点所发出的光才能透过出射小孔;焦平面以外的点所发出的光线在出射小孔平面是离焦的,绝大部分无法通过中心的小孔。因此,焦平面上的观察目标点呈现亮色,而非观察点则作为背景呈现黑色,反差增加,图像清晰。在成像过程中,出射小孔的位置始终与显微物镜的焦点(focal point)是一一对应的关系(共轭conjugate),因而被称为共聚焦(con-focal)显微技术。共聚焦显微技术是由美国科学家马文?闵斯基(Marvin Minsky)发明的;他于1957年就为该技术申请了专利。但是直到八十年代后期,由于激光研究的长足进步,才使得激光共聚焦扫描显微技术(CLSM)成为了一种成熟的技术。 图3. 激光共聚焦显微镜原理框图 当今的激光共聚焦显微镜已经发展为一种结合了激光技术,显微光学,自动控制和图像处理等多种尖端科研成果的高技术工具。是现代微观研究领域不可缺少的利器之一。Nikon秉承“信赖与创造”的一贯企业理念,正在为业界提供世界领先水平的共聚焦显微镜系统产品。

共聚焦显微镜使用规章(暂行)

共聚焦显微镜使用规章(暂行) 为保证共聚焦显微镜正常和充分的利用,维护好使用秩序,更好的为各位服务,特制订本规则,请切实严格遵守。 一、简介: 共聚焦显微镜为蔡司LSM710,位于生科楼D511室,该显微镜有优异的灵敏度、反差度和稳定性,可广泛用于细胞与组织的免疫荧光染色实验、活细胞成像实验、以及光漂白实验等,结合软件的强大功能,可对图片做各种后期处理,如进行组织切片的3D重构,荧光强度的定量检测以及共定位系数的测定等。本显微镜配备物镜倍数为10×、20×、40×和63×,激发光源为405 nm、458 nm、488 nm、514 nm、543 nm和633 nm。 二、预约规则: 1、对外开放时间暂定为每周一、三下午14点至17点,其他时段需与管理员 沟通协调。预约仅限2周之内,并至少提前24小时。由管理员按预约先

后安排实验。如预约取消或更改,需至少提前24小时告知,若预约无更改,管理员一律按预约起始时间开机待用,开机时间自此算起。开机待用时间超过1小时按取消处理,管理员将关闭系统,预约实验者须支付1小时费用。 2、每次预约上机时间不得超过三小时,活细胞成像实验可酌情延时,但最长 不得超过6小时。每次预约仅限一个时段,请勿一次连续预约多个时段。 3、开放对象:不对非本校人员开放,仅本校人员的课题方可使用该仪器,对 外合作课题必须是本校人员承担部分,一经发现非本校人员利用本校人员名义使用该仪器者,取消该实验室全体人员使用资格半年。 4、收费标准:按实际使用时间(即从开机到用毕关机的时间)收费300元/ 小时,不足1小时者,按1小时计。费用结算方式另行通知。 5、预约方式:请通过网上预约平台进行预约,等待管理员审核通过。预约时 请务必提交以下详细信息:姓名(限两人以内)、所属实验室、联系方式、预约时段、样品性质(细胞贴片、组织切片或活细胞)、实验所用荧光染料的种类。其他未尽事宜请及时与管理员沟通。 6、实验前建议自备阳性对照(单独准备一张样品专门用于校调拍摄条件)和 阴性对照(不加一抗),并在普通荧光显微镜下确认染色正常。 三、使用规则: 1、严禁在显微镜室中吃东西、喝饮料,进入前请换好拖鞋/鞋套,以保持精 密仪器的干燥清洁环境。 2、使用者必须在管理人员的监督下开机进行操作,由管理员协助拍摄。除在 镜下观察时调焦和选取视野之外,未经管理员允许,请勿自行调节共聚焦系统的其他部件。 3、取、放样品之前,务必降下物镜,放置样品时不要用手强行挪动载物台, 以免损坏载物台中的电动马达。 4、调焦时,首先应该是在目视下让物镜尽可能贴近样本,然后在通过目镜观 察的同时尽可能贴近样本, 然后在通过目镜观察的同时向远离样品的方向调节,充分保证物镜安全。 5、由于该显微镜为倒置镜,物镜上残留的镜油会腐蚀镜头并进入镜头内部,

用显微镜观察人血细胞涂片的实验教案

用显微镜观察人血细胞涂片的实验教案 教师:李芸 教学目标 1.知识目标: 1)学会用显微镜观察人血的永久涂片和临时装片。 2)通过观察人血的永久涂片和临时装片、认识红细胞和白细胞 2.能力目标: 1)通过教师导学培养学生动手观察能力。 2)通过观察实验培养学生发现问题和解决问题的能力。 3)通过看血常规化验单,培养学生的综合分析能力及理论联系实际的能力。 3.情感态度与价值观目标: 1)通过对血液成分及各部分功能的认识,形成正确的血液观。 2)培养学生乐于探索生命的奥秘的精神和实事求是的科学态度。 教学重点与难点 1.教学重点:使用显微镜观察人血的永久涂片和临时装片,掌握血液的组成成分。 2.教学难点:使用显微镜观察人血的永久涂片和临时装片,掌握血液的组成成分。 教学准备:人血的永久涂片,显微镜 教学课时:1课时 教学过程

一、情境导入 首先,播放有关血液的图片,利用图像激发学生学习兴趣,对所学内容初步感知。紧接着教师通过提问,温故显微镜的使用方法引新,导出本节实验目的和实验器材,进一步提出实验要求。 二、实验步骤 (一)观察:将人血的永久涂片放在低倍显微镜下进行观察。 讨论:A.你所观察的人血永久涂片中数量最多的是哪种细胞? B.你是如何分辨红细胞和白细胞的?(可从数量,形态结构等方面考虑) C.在普通光学显微镜下能不能直接找到血小板?猜一猜 这是什么原因? 进行思路引导: 血液的其他组成部分又分别起什么作用?血细胞很“微小”,用什么来“明察秋毫”?(学生表达出“显微镜”一词),简单回顾显微镜使用步骤后,我巡视、指导学生进行分组实验(培养自主学习、局部合作的精神)。实验结束后,学生描述观察结果(我通过幻灯片展示人血涂片,引导学生进一步明辨红细胞和白细胞,并解释血小板在光学显微镜下看不见的原因) 1.红细胞 展示电镜下的红细胞图片并指导学生阅读课本相应内容,找出红细胞的形态特点及功能。之后通过发问:“红细胞为什么能运输氧?”引导学生描述血红蛋白的特性。

超高分辨率共聚焦显微镜

北京大学生命科学院 “超高分辨率共聚焦显微镜”招标采购项目 招标文件 编号:2013[017] 北京大学实验室与设备管理部 二〇一三年七月四日

目录 第一部分投标邀请 (2) 第二部分招标说明 (4) 第三部分货物需求一览表及技术规格 (7) 第四部分设备明细表 (12) 第五部分技术规格偏离表 (13) 第六部分原厂授权书 (14) 开标一览表 (15)

第一部分投标邀请 公告日期:2013年7月4日 项目名称:北京大学生命科学院“超高分辨率共聚焦显微镜”招标采购项目 招标编号: 2013[017] 招标机构名称: 北京大学实验室与设备管理部 地址:北京市海淀区颐和园路5号北京大学红5楼邮编:100871 电话: 62758587 62751412;传真:62751411 联系人:张宇波石铄 北京大学实验室与设备管理部(以下简称“招标机构”)具体承办北京大学生命科学院“超高分辨率共聚焦显微镜”招标采购项目的招标采购事宜,邀请合格投标人就下列货物和有关服务提交密封投标。合格投标人均可在招标机构得到进一步的信息和查阅招标文件。 1.招标内容 1.1招标货物名称:超高分辨率共聚焦显微镜 1.2数量及技术规格要求:数量壹套,技术规格要求详见标书 1.3交货地点:北京首都机场 2.合格投标人必须符合《中华人民共和国政府采购法》第二十二条之规定。 3.招标文件购买时间和办法:2013年7月4日—2013年7月24日(工作日)9:00至16:30时在招标机构(北京大学西门内红1楼、红2楼之间横楼二层5216室)购买招标文件。标书售价200元人民币,售后不退。 4.投标人可从北京大学招标公告栏或实验室与设备管理部网站下载本次招标的电子版标书(https://www.360docs.net/doc/3c5459235.html,/more2.asp),以供参考。 5.接受投标时间、投标截止时间及开标时间 5.1接受投标及投标截止时间:所有投标书应于2013年7月25日8:30前递交到上述购买标书地址, 逾期恕不接受。 5.2开标时间:兹定于2013年7月25日8:30整在北京大学实验室与设备管理部后院会议室进行开标、 评标工作。 6.投标细则 6.1 投标内容 6.1.1最终用户:北京大学生命科学院

课时6:使用光学显微镜观察各种各样的细胞

课时六:使用光学显微镜观察各种各样的细胞 一、光学显微镜的使用 (一)实验目的:正确使用光学显微镜,学会使用高倍镜观察。 (二)实验原理:在观察玻片标本时,被观察的物象通过______和______的两次放大,显微镜最终观察到的物体的放大倍数是_________与_________的____。 (三)实验用具及材料:固定装片、菠菜叶、显微镜、、载玻片、盖 玻片、镊子、吸管、牙签、吸水纸等。 通过阅读教材P29页图3-1认识光学显微镜的各部分结构。 1___目镜__; 2___镜筒__; 3__转换器__; 4___物镜__; 5__载物台__; 6__通光孔__; 7__遮光器__; 8__压片夹__; 9__反光镜__; 10__镜座__; 11__粗准焦螺旋__ 12__细准焦螺旋__;13__镜臂__ (四)实验试剂:生理盐水(0.9%的氯化钠溶液)、碘液、清水等 (五)实验步骤:通过阅读教材P30-P31页,学习正确使用显微镜的 方法。 1.显微镜的安放: 2.低倍镜观察 ①对光:将_____镜对准_____,根据光线选择适当的_____和_____,获得明亮 的圆形视野。 ②固定装片:把玻片标本放在载物台上,用压片夹固定,使标本正对_____的中央 ③寻像:从侧面观察,转动_______将镜筒下降到低倍物镜_________。 调节_________使镜筒缓慢上升,当在视野中看到像时,再调节________,直到物象清晰为止。 3.高倍镜观察:首先在低倍镜下______,将要观察的目标移至_______,再转动_____ _____,此时只能调节________使物像更清晰。若视野较暗,可调节______或增大______以增加视野亮度。 4.整理显微镜: 二、使用光学显微镜观察各种各样的细胞 通过阅读教材P33-34页,学习制作临时装片,并进行显微观察。 1.观察菠菜叶下表皮细胞: ⑴.取一洁净的载玻片,在载玻片中央滴一滴清水。 ⑵.用镊子撕取菠菜叶下表皮,将其浸入水滴中并展平,以防止由于细胞的重叠而影响观察效果。 ⑶.用镊子加起盖玻片,使它的一端先接触载玻片中央的水滴边缘,然后轻轻盖在菠菜叶下表皮上,避免产生气泡,用吸水纸吸去多余的水分。 ⑷.将制作好的玻片标本放在显微镜下观察,记录所观察到的现象。 2.制作人口腔上皮细胞的临时装片 ⑴.用牙签轻轻刮取自己口腔内侧,牙签上会附着部分口腔上皮细胞。 ⑵.将牙签上的刮取物涂布在质量分数为0.9%的生理盐水中。 ⑶.染色——在盖玻片的一侧滴一滴碘液,在另一侧用吸水纸吸引,重复2-3次。 ⑷.将制作好的玻片标本放在显微镜下观察,记录所观察到的现象。

激光共聚焦显微镜与普通显微镜成像原理及区别

激光扫描共聚焦显微镜采用激光作为光源, 有效地除去了非聚焦平面的信息, 提高了微观形貌的清晰度和分辨率。其与计算机软件结合可以实现深度方向的光学切片观察, 再将这些扫描得到的信息通过软件算法以及叠加和重组, 可以获得材料的微观三维形貌, 因此激光共聚焦显微镜具有快速、无损、制样简单等优点。那么激光共聚焦显微镜的原理又是怎样的呢? 它采用激光点光源照射样品, 从发射器发出的光经过光路后在聚焦平面上形成一个大小分明的光点,它沿着原照射光路到达分光镜并且该点发出的光被物镜收集,分光镜将收集来的光直接反馈给探测器。光点通过前方探测器设有的探测针孔等一系列的透镜, 最终同时聚焦于探测针孔, 这样来自聚焦平面的光可以会聚在探测孔之内, 而来自聚焦平面上方或下方的散射光都被挡在探测孔之外而不能成像, 从而提高了焦平面的分辨率。激光共聚焦显微镜逐点扫描样品, 探测针孔后的光电倍增管也逐点获得对应光点的共聚焦图像, 转为数字信号传输到计算机上, 最终在屏幕上聚合成清晰的整个焦平面的共聚焦图像。转为数字信号传输到计算机上, 最终在屏幕上聚合成清晰的整个焦平面的共聚焦图像。此外激光共聚焦显微镜还可以对样品进行逐层光学切片扫描, 得到高度方向每一层的图像信息, 传回计算机软件叠加处理后可以得到三维形貌图。它成像清晰、精确、最大的优点在于能对材料进行深层形貌的观察。可以对样品进行断层扫描观察和成像, 进行无损观察和三维形貌分析。 激光共聚焦显微镜可用来观察样品表面亚微米级别的三维轮廓形貌, 也可以测量多种微几何尺寸, 像晶粒度、体积、膜深、膜厚、深度、长宽、线粗糙度、面粗糙度等。激光共

聚焦相比于其他测量手段有其独特的优势, 它提高了图片的清晰度, 有很好的景深, 提高了分辨率, 可以进行无接触的三维轮廓测试。在金属材料研发方面还经常用到光学显微镜和扫描电子显微镜。光学显微镜是一种二维的形态学工具, 有效分辨率较低, 分辨率的景深较小, 也不能观察纵向方向的三维形态。而扫描电镜在样品的制备方面比较复杂, 有时还会引起样品的破坏, 对于扫描的面积和材料的表面高度都有所限制, 同时它也不能测量面积、体积、深度等信息。在钢铁材料的生产和开发过程中, 众多的环节需要关注表面形貌, 采用激光共聚焦显微镜技术进行相应检测, 不仅可以获得媲美SEM的显微图像, 同时还能够进行快速、无损测量, 加之其较低的引入和维护成本,更符合目前行业成本控制的需求。本文将举例说明激光共聚焦显微镜在金属研究领域的典型应用。 激光共聚焦显微镜由于其优于光学显微镜的清晰度和分辨率, 使其在金相组织观察方面有独特的优势。试验样品为海洋平台用钢, 将样品进行磨制、抛光处理, 并用腐蚀溶液腐蚀, 要求观察并测量基体上粒状贝氏体的形态和尺寸。相比于普通光学显微镜, 激光共聚焦显微镜清晰度好, 分辨率高。激光作为光源, 它的单色性非常好, 光束的波长相同, 从根本上消除了色差。共聚焦显微镜中在物镜的焦平面上放置了一个带有针孔的挡板, 将焦平面以外的杂散光挡住, 从而消除了球差。同时激光共聚焦显微镜采取的点扫描技术和计算机采集和处理信号也进一步提高了图像的清晰度。

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