造血干细胞采样动员书

造血干细胞采样动员书
造血干细胞采样动员书

造血干细胞采样倡议书

公司至今有许多职工记得2008年5月7日在公司礼堂参加无偿捐献造血干细胞采样活动的场面,那次活动共有98人加入到造血干细胞资料库中,同时因参加采样人数大大超过报名人数,使得一部分职工因采样用品用完没有完成自己的心愿······

公司还有许多职工参加了7月12日在东方红广场爱心献血屋的无偿献血,也有一部分职工因当天工作忙没有参加······

发扬互助奉献、团结友爱的社会新风尚是时代对我们的呼唤,是社会文明进步的象征,也是每一位职工应尽的责任,鉴于公司广大职工日渐高涨的爱心热情,为了让更多的公司职工加入到造血干细胞捐献志愿者行列,多氟多公司向所有职工发出倡议:

一、掌握科学知识,积极参与造血干细胞捐献行动。广大职工要正确认识造血干细胞移植方面的基本常识,了解移植的方法、安全性,提高对捐献意义的认识,以科学的态度和自觉的行动参与造血干细胞捐献行动。

二、奉献一片爱心,尽己所能参与建设造血干细胞捐献者资料库。适合捐献造血干细胞的年龄为18-45周岁,广大职工要站在投身公益事业的前列,积极身体力行并带动身边的人加入造血干细胞捐献志愿者行列。

三、开风气之先,让全社会共同倡导时代新风尚。广大职工要积极宣传、支持和参与造血干细胞捐献行动,共同弘扬和塑造“人道、博爱、奉献”的具有时代特征的社会主义道德风尚,开创城市文明新风尚。

广大职工们,让我们积极投身到“捐献造血干细胞志愿者行动”中来,让更多的生命在我们的爱中延续,让爱心之花在造血干细胞志愿捐献者中绽放出绚丽的光芒!

报名时间:从即日起到8月20日止

温馨提示:上一次参加过采样活动的就不要参加。

联系电话及联系人:

生产区:任抗战 6527

办公区:

新能源:

二〇一一年八月十日

捐献造血干细胞的相关知识

中国造血干细胞捐献者资料库亦称“中华骨髓库”,是代表中国唯一国家级开展造血干细胞捐献和用于移植治疗的工作体系,由设在中国红十字会总会的中国造血干细胞捐献者资料库管理中心统一管理和规范全国造血干细胞的捐献工作,包括志愿捐献者的组织、征集、登记、HLA分型、开展为患者搜寻相合的造血干细胞捐献者及移植治疗服务等。捐献者和患者的各项资料通过计算机长期保存和管理。捐献者年龄和健康标准

年龄在18至45岁的健康者均可登记成为捐献造血干细胞的志愿者。采集造血干细胞的最佳年龄为18至55岁,因捐献者登记入库后到寻找到相合患者需要一定时间,登记年龄以不超过45岁为宜。凡在此范围内,身体健康,血液检查丙氨酸氨基转移酶(ALT)〈=40单位,乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、艾滋病病毒抗体、梅毒试验均为阴性者,都可以成为造血干细胞捐献者。怎样捐献造血干细胞

1、填表登记

到中国造血干细胞捐献者资料库河南分库、市血液中心填写志愿捐献者登记表和志愿捐献者健康状况征询表,签署志愿捐献者同意书,抽取5ml血样,实验室将对血样进行HLA分型等检验,并把相关资料数据录入中国造血干细胞捐献者资料库的计算机数据库中,以供渴望移植治疗的患者寻找配对。

2、确认捐献对象

如果捐献造血干细胞志愿者的HLA型别正好与某患者吻合,HLA组织配型实验室将会对患者及捐献造血干细胞志愿者的血样进行HLA分型复检。在确认无误后,分库将通知捐献造血干细胞志愿者作捐献的准备,并详细讲解捐献的具体事项。

3、采集造血干细胞

目前我国提倡从外周血中采集造血干细胞。在采集造血干细胞前,通常会使用一种药物动员剂,使外周血液中的造血干细胞增加20至30倍,以满足移植需要。采集时,从捐献者手臂静脉处采集全血,通过血细胞分离机提取造血干细胞约100毫升,采集用具是无菌密封一次性器具。其他血液成分回输捐献者体内。捐献者应注意哪些事项

1、承诺及联系方式:捐献是崇高的奉献行为,当志愿者或联系人的电话、地址发生变化时,请及时通知登记部门,以保证患者及时得到治疗,实现志愿者救人的愿望。

2、捐献造血干细胞没有补贴:捐献造血干细胞是基于人与人之间生命组成部分的赠与行为,一般不提倡补贴。

3、不能随时改变捐献决定:志愿者登记及捐献都是建立在自愿的基础上,因众多患者的希望和检测资金的昂贵,请志愿者在报名前慎重考虑。但移植前,尤其签署捐献同意书后就不能撤销捐献决定。因为在这个时候,患者为准备移植必须进行大剂量的放疗和化疗,这时患者已经丧失造血能力,此期间若捐献者停止捐献,再临时寻找配型相合者已来不及,患者将会有生命危险。

外周血干细胞采集技术及护理

外周血干细胞采集技术及护理 (一) 采集术前准备及护理 (1) 向供者做必要的解释使之有心理准备;要求供者注意营养摄入,应用高蛋白、 高热量、高维生素饮食,于采集前晚和当日晨改用低脂餐;沐浴清洁皮肤并 更衣,上衣袖应宽松。 (2)应用重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)可以有效地达到骨髓或外周血造血干细 胞的扩增。注意观察应用G-CSF的副作用,常见有低热(一般38C 以下)骨骼 肌肉疼痛、乏力、食欲不振、头痛等,轻者不必做处理,严重的给予对症治 疗。 (二)技术配合及护理 ( 1 ) 外周血干细胞采集技术可根据供者的情况在床边进行。 ( 2 ) 主要设备为血液成分分离机、专用导管,另备抗凝剂、生理盐水、血压计、听诊器、急救器材和药品。治疗盘内盛皮肤消毒物品、无菌棉球和纱布、止血带、胶布。 ( 3 ) 供者清洁静脉穿刺部位皮肤,排空二便,通常采用平卧,测量血压、脉搏及呼吸。 ( 4 ) 选择两处静脉穿刺部位(分别为采血和回输血通道)以肘部粗而直的大静脉最适宜。下肢静脉、颈静脉亦可作为回输通道。 ( 5 ) 经皮肤消毒,用16 号穿刺针头依次进行两处静脉穿刺,首先穿刺的一侧连接回输导管,次之连接采血导管。妥善固定针头,局部覆盖无菌纱布。 ( 6 ) 医生操纵血液成分分离机,将供者身高、体重、红细胞比积等数据输入机器电脑,自动调节采集分离血液成分的速度,匀速加入抗凝剂。 ( 7) 供者采血侧上臂间断使用止血带或血压计袖带打气加压,同时手握海绵芯子,反复一松一紧直到采集完毕。 ( 8 ) 遵医嘱补钙。

( 9 )随时观察血压、脉搏、呼吸及其有无不适感,注意不良反应和合并并发症。 (10)采集完毕,静脉穿刺局部以无菌棉球按压5min 以上,用无菌纱布保护。供者静卧,继续观察。 (11)外周血干细胞一次采集量一般200?300ml,由检验人员进行细胞计数 (12)采集后嘱患者多饮水,以促进抗凝剂代谢。 【不良反应与并发症及其处理原则】 (一)空气栓塞其原因为采血管连接不严密或回输管空气未完全排除。无论是怀疑还是确定空气进入静脉,应立即压迫穿刺静脉的近心端,拔除针头扎紧止血带,使该静脉的血液回流完全阻断,取左侧卧头低足高位并给予氧气吸入。 (二)感觉异常和肌肉痉挛其原因为枸橼酸钠抗凝剂的应用,降低了血清钙离子 水平。立即减慢回输速度,口服钙剂或静脉补充钙剂。 (三)头晕、恶心及不适其原因为过度紧张、饥饿、低血糖、低血压、过饱、疲 劳过度、睡眠不足、体质虚弱或采血过快。减慢采血速度,去枕平卧;给予解释消除其顾虑及紧张心理;针刺内关、合谷、涌泉穴,前额冷敷等。 (四)血肿其原因为静脉穿刺穿透血管壁,血溢出于皮下,或拔针后局部针眼处压迫力度不够,压迫面积太小,按压时间太短,或拔针后才松解止血带,或袖口太紧,以致静脉穿刺处血外溢于皮下。终止采集技术操作,先松止血带放松袖口。 针眼处用无菌棉球。多个手指,大面积压紧血肿局部10min 以上。将有血肿的手臂举高至心脏水平以上,促使血液回流、吸收及消散,并可局部做冷敷。 (五)局部感染其原因为静脉穿刺局部皮肤洗涤和消毒不严,采集技术中无菌技术操作规程执行不力或针头污染或采集后针眼处未保护好。局部红、肿、热、痛,感染初期可做热敷或用金黄散湿敷;局部感染破溃者定时换药;按医嘱应用抗生

造血干细胞采样动员书

造血干细胞采样倡议书 公司至今有许多职工记得2008年5月7日在公司礼堂参加无偿捐献造血干细胞采样活动的场面,那次活动共有98人加入到造血干细胞资料库中,同时因参加采样人数大大超过报名人数,使得一部分职工因采样用品用完没有完成自己的心愿······ 公司还有许多职工参加了7月12日在东方红广场爱心献血屋的无偿献血,也有一部分职工因当天工作忙没有参加······ 发扬互助奉献、团结友爱的社会新风尚是时代对我们的呼唤,是社会文明进步的象征,也是每一位职工应尽的责任,鉴于公司广大职工日渐高涨的爱心热情,为了让更多的公司职工加入到造血干细胞捐献志愿者行列,多氟多公司向所有职工发出倡议: 一、掌握科学知识,积极参与造血干细胞捐献行动。广大职工要正确认识造血干细胞移植方面的基本常识,了解移植的方法、安全性,提高对捐献意义的认识,以科学的态度和自觉的行动参与造血干细胞捐献行动。 二、奉献一片爱心,尽己所能参与建设造血干细胞捐献者资料库。适合捐献造血干细胞的年龄为18-45周岁,广大职工要站在投身公益事业的前列,积极身体力行并带动身边的人加入造血干细胞捐献志愿者行列。 三、开风气之先,让全社会共同倡导时代新风尚。广大职工要积极宣传、支持和参与造血干细胞捐献行动,共同弘扬和塑造“人道、博爱、奉献”的具有时代特征的社会主义道德风尚,开创城市文明新风尚。 广大职工们,让我们积极投身到“捐献造血干细胞志愿者行动”中来,让更多的生命在我们的爱中延续,让爱心之花在造血干细胞志愿捐献者中绽放出绚丽的光芒! 报名时间:从即日起到8月20日止 温馨提示:上一次参加过采样活动的就不要参加。 联系电话及联系人: 生产区:任抗战 6527 办公区: 新能源: 二〇一一年八月十日

外周血干细胞及其动员研究进展

外周血干细胞及其动员研究进展 成人骨髓是血细胞再生的场所,也是形成血管的内皮祖细胞,能分化为脂肪细胞、软骨细胞及成骨细胞的间充质干细胞等[1],是干细胞或祖细胞的储存场所。早期的研究显示,化疗康复的患者外周血中造血祖细胞增加,因此认识到造血干细胞和造血祖细胞可从骨髓诱导出来,称之为“干细胞动员”,这些被动员的细胞可以聚集,也可以再返回骨髓行使其造血功能。诱导入血的造血细胞可用于移植。新的干细胞的诱导分离相关研究结果显示,造血干细胞的定量、定性研究及其潜在的作用和外周血造血干细胞移植的疗效是目前研究的热点[2]。 1 粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对外周血干细胞的诱导作用 多种因子均可通过不同的作用诱导外周血干细胞移出,提示在这条导致干细胞移出的通路上具有多种调节机制。多种因子的协同和联合作用下,可以诱导一定性质和(或)数量的干细胞移植。G-CSF是临床干细胞移植的主要诱导剂,其对外周血干细胞的诱导作用比骨髓和脐带血干细胞强,而且使中性粒细胞和血小板恢复更快,需要输注的血小板更少,淋巴细胞重建更快,相关的炎症发生率及病死率更低[3]。与G-CSF相比,应用化学方法诱导外周血干细胞移植(PBSC)后血细胞计数的恢复时间更长,发热等并发症及需要输血的量更多。而且经化学方法摄取的外周血干细胞在进行同种异体移植时已失去活性。PBSC的采集避免了骨髓采集的侵入性操作及常规麻醉相关的风险。为适合移植的配对及HLA的配型,已可以清除其中的1~3种成分,而且可以保证明其单倍同一性。基于G-CSF的干细胞移植耐受性好,尽管偶有脾破裂发生。大部分供者可以完成足够移植干细胞的采集。虽然尚无明确成功移植的PBSC最低移植量的阀值,但输注的CD34+细胞数低于2×106/kg可能与移植失败有关。较高的CD34+细胞剂量可能产生急性或慢性移植物抗宿主病的发生率增加的消极作用,却可能产生整体患者生存率增加的积极作用。细胞亚型,尤其是T细胞及CD14+单核细胞,可影响移植效果。PBSC质量和数量的变化均可明显影响移植的效果。 25%的患者,尤其是淋巴瘤患者、多发性骨髓、急性白血病以及10%~20%的正常人,G-CSF对干细胞的动员作用较差,需要扩大清除成分的范围。此外,这种动员无力还发生在广泛治疗的癌症患者、遗传缺陷如Fanconi贫血患者。新近的研究PBSC动员及自身移植治疗恢复期再生障碍性贫血的结果显示,应用G-CSF收集PBSC只在小部分患者中可行,在供者和患者中,G-CSF的动员作用存在很大的个体差异[4]。扩大同种异体移植的应用,尤其是接受配对移植物移植的重症患者、接受具有耐受原的器官移植患者、非致命性遗传缺陷病患者,需要更大剂量的动员干细胞来克服HLA障碍而获得持久的干细胞植入,促进白细胞活性恢复,减少移植物抗宿主病的发生。虽然G-CSF已成功应用,但要获

外周血造血干细胞动员及采集术常规程序

中国医学科学院血液病医院 第 页 1 外周血造血干细胞动员及采集术常规程序 1.移植前供者检查常规 2.详问病史(女性供者询问孕产史),如有动脉粥样硬化、静脉血栓、自身免 疫病史者慎用G-CSF ,防止疾病加重,如必须应用,需仔细观察病情变化。脑血管疾病是动员的禁忌征。 3.PBSC 采集时机应于疾病早期,骨髓尚未损伤前;反复接受化疗者,尤其 用过烷化剂者动员效果差。 4.采集外周血干细胞的会诊单必须提前一周(开始用G-CSF 动员时)送血库, 细胞治疗室。 5.用G-CSF 动员前外周血查CD34,淋巴细胞亚群,细胞因子。 6.请护士长提前查看手术者血管情况,预计血管穿刺不良者,请会诊行股静 脉插管。 7.患者PBSC 动员方案:化疗+G-CSF 5ug/kg/d(一般为300ug,IH,qd,停化疗后 第8天开始)最佳采集时机为WBC>5×109/l,CD34+>1%. 8.供者PBSC 动员方案:G-CSF10ug/kg/d,分两次用(一般为300ug,IH,Bid,-4 天开始),在用药第5~6天采集,不应早于第3天或晚于第7天 9.用G-CSF 后勤查血常规,尤其是WBC>1.0×109/l,后每日查血常规,及时追 查结果,当WBC>5.0×109/l 时开始采集。 10. 供者plt<70×109/l,不得采集干细胞。 11. 供者WBC>70×109/l,G-CSF 应减量。 12. 采集当日6am 查血常规及分类,G-CSF 注射时间以6-7am 为宜,G-CSF 应用3小时后CD34+细胞峰值上升,故应于G-CSF 应用3小时后采集 PBSC. 13. 采集当日查CD34、淋巴细胞亚群、细胞因子;单采物查CD34、淋巴 细胞亚群(自身动员者查干细胞培养)(如采集两天则两次单采物均行上述检查)。 14. 采集前准备糖水饮用,采集当日不得进食油性食物,准备钙片一瓶/ 葡萄糖酸钙8支,采集前口服4支,备用4支,另葡萄糖溶液及生理盐水备用。 15. 采集过程中应有医师在场,可能出现口唇、四肢麻木(枸橼酸中毒、 低钙血症),恶心、呕吐、眩晕(紧张或一过性血循环量减少所致)。 16. 采集量:Allo-PBSCT 需MNC 5~8×108/kg ,CD34+ 2~5×106/kg , CFU-GM 2~5×104/k g, Auto-PBSCT 需MNC 2~3×108/kg,CD34+>2×106/kg. 17. 如第一天采集量不够,第2天需重复采集,G-CSF 第一天晚上和第二天6 点应继续应用,用量视采集量而定。 18. 采集结束后每2-3天复查血象直至正常。

造血干细胞分离培养方法

一造血干细胞分离 (一)小鼠骨髓采集与单个核细胞悬液的制备 1 HES(羟乙基淀粉)沉淀法 抽取髓液500 m L按4∶1比例加入HES,自然沉降红细胞后,分离上清。4℃400 g离心10 min得细胞沉淀物,以1 %白蛋白盐水液洗涤细胞2次。 2 percoll液密度梯度离心法 ①按体积比为(1.5~2)∶1在骨髓液中加入淋巴细胞分离液。4℃,1 5 00 r / min,离心20 min。取单个核细胞层,以1%白蛋白盐水液洗涤3次。 ②取鼠股骨和胫骨, 在两头关节处切开骨骼, 反复用培养基冲洗骨髓腔, 随后小心地逐滴将细胞悬液加在淋巴细胞分离液上, 2 000 r / min 离心20 min。吸取离心后相交液面处的白色细胞层即为单个核细胞。 3 Ficoll分离法 方法一在15ml分离管中加7.5ml比重为1.017的Ficoll液,缓慢移入等量骨髓细胞悬液,整体平衡后低温离心2000r/min×20min,吸取白细胞层,用RPMI1640液亲清洗后离心2000r/min×10min,取白细胞层加RPMI1640液到10ml制成造血干细胞悬液样本。 方法二取无菌离心管1支,预先添加3mlFicoll(与骨髓细胞悬液体积1:1),用滴管取单细胞悬液3ml,沿离心管壁小心缓慢叠加于分离液面上,注意保持清楚的界面,室温下水平离心2000rpm×20分钟,(后续在冰上进行)用毛细吸管插到云雾层,小心吸取单个核细胞,置入另一短中管中,加入5倍以上体积的磷酸缓冲液PBS,1500rpm×10分钟,L-DMEM 洗涤细胞两次,每次以1000r/min离心10min,去上清液。(除第一步的室温离心外,其余为低温离心)。 取骨髓细胞悬液的方法是:取出大鼠腿骨将肌肉尽可能剔除,并用PBS缓冲液冲洗干净。在超净台中腿骨浸泡在PBS缓冲液中5min,之后在两头关节处切开骨骼, 反复用PBS 缓冲液冲洗骨髓腔,从而得到骨髓细胞悬液。 (二)Linc-- kit+造血干细胞的分离纯化。 去除Lin+细胞( 负筛选) : 带有生物素的混合抗体标记成熟细胞; 抗生物素的磁珠吸附抗体标记的成熟细胞, 包括T , B淋巴细胞、粒细胞、巨噬细胞以及它们的定向前体细胞; 细胞通过磁场不被柱子吸附的包括造血干细胞和骨髓间质干细胞。收集CD117+细胞( 正筛选):带有CD117抗体的磁珠吸附CD117+细胞, 细胞通过磁场被柱子吸附的CD117+细胞(具体操作步骤参照M iltenyi公司MACS手册)。 (三)根据细胞表面CD34+抗原进行分离纯化 流式细胞仪检测骨髓CD34+细胞:取50μL细胞悬液, 加入2.5μL CD45- FITC和10μL CD34- PE充分混合, 避光孵育15 min。以PBS液洗涤并加多聚甲醛固定液450μL固定, 上机检测。

造血干细胞

造血干细胞 一定义 造血干细胞是骨髓中的干细胞,具有自我更新能力并能分化为各种血细胞前体细胞,最终生 成各种血细胞成分,包括红细胞、白细胞和血小板。也是存在于造血组织中的一群原始多能 干细胞。可分化成各种血细胞,也可转分化成神经元、少突胶质细胞、星形细胞、骨骼肌细 胞、心肌细胞和肝细胞等。 干细胞可以救助很多患有血液病的人们,最常见的就是白血病。虽其配型成功率相对较低, 且费用高昂,但其治疗效果好且捐献造血干细胞对捐献者的身体并无很大伤害。 二特征 人体内所有的血细胞都来自造血干细胞(hematopoieticstemcells,HSC)的定向分化。HSC又称多能干细胞,是存在于造血组织中的一群原始造血细胞,有两个重要特性: (1)高度的自我更新或自我复制能力; (2)可定向分化、增殖为不同的血细胞系,并进一步生成血细胞。造血干细胞采用不对称的分裂方式:由一个细胞分裂为两个细胞。其中一个细胞仍然保持干细胞的一切生物特性,从而保持身体内干细胞数量相对稳定,这就是干细胞自我更新。而另一个则进一步增殖分化为各类血细胞、前体细胞和成熟血细胞,释放到外周血中,执行各自任务,直至衰老死亡,这一过程是不停地进行着的。 三造血干细胞的造血原理 1 造血干细胞具有多潜能性,即具有自身复制和分化两种功能。在胚胎和迅速再生的骨髓中, HSC多处于增殖周期之中;而在正常骨髓中,则多数处于静止期,当机体需要时,其中一部分分化为成熟血细胞,另一部分进行分裂增殖,以维持HSC的数量相对稳定。人类HSC首先出现于胚龄第2~3周的卵黄囊,在胚胎早期(第2~3个月)迁至肝、脾,第5个月又从肝、脾迁至骨髓。从胚胎末期一直到出生后,骨髓成为HSC的主要来源。造血干细胞进一步分化发育成不同血细胞系的定向干细胞。定向干细胞多数处于增殖周期之中,并进一步分化为各系统的血细胞系,如红细胞系、粒细胞系、单核-吞噬细胞系、巨核细胞系以及淋巴细胞系。 2由造血干细胞分化出来的淋巴细胞有两个发育途径,一个受胸腺的作用,在胸腺素的催化下分化成熟为胸腺依赖性淋巴细胞,即T细胞;另一个不受胸腺,而受腔上囊(鸟类)或类囊器官(哺乳动物)的影响,分化成熟为囊依赖性淋巴细胞或骨髓依赖性淋巴细胞,即B细胞。并分别由T、B细胞引起细胞免疫及体液免疫。如机体内造血干细胞缺陷,则可引起严重的免疫缺陷病。 四HSC的表面标志和定向分化过程 1 HSC的表面标志 HSC是第一种被认识的组织特异性干细胞,目前主要是通过表面标志来分离纯化HSC, 其中有一种方法是用抗体来检测干细胞相关的表面分子c-kit,Sca-1,Thy1.1和造血谱系标志如B220,CD3和Mac-1。通过这种方法得到的HSC只占所有骨髓细

在捐献造血干细胞动员仪式上的讲话

在捐献造血干细胞动员仪式上的讲话 各位同事、战友们: 今天下午,我们医院联合市红十字会在这里隆重举行捐献造血干细胞仪式。首先,对积极参加这项公益活动的同事们、战友们无私奉献、救死扶伤的精神表示崇高的敬意!同时,也要感谢在座的各位对造血干细胞捐献工作的关注以及对公益事业的支持。 造血干细胞库的建立和发展,是红十字会积极扩大和延伸人道主义救助工作领域和服务对象,在人道救助服务领域打造的一项公益品牌。今天,造血干细胞库正在成为惠及患者,造福人类的生命希望之库。 在我国,白血病患者的数量以每年新增4万人的速度快速增长着,其中少年儿童占50%以上。由于现在大多数青少年都是独生子女,这意味着他们很难在亲缘关系中找到供者,只能依靠社会上的捐献者为他们提供HLA配型相合的造血干细胞。而人类非血缘关系的HLA 相合率是千分之一或以上,在较为罕见的HLA型别中,相合的几率只有几万甚至几十万分之一。可是我们的“中华骨髓库”目前的库存仅有65万份,远远不能满足我国400多万患者的需要。 各位年轻的同事、战友们,强大的社会责任感召唤我们,伸出手臂,奉献爱心,用可以再生的造血干细胞,来挽救不可再生的鲜活生命,用自己的一份爱心加一点点勇气,来给另一个家庭驱除病痛,送去幸福。

真诚希望通过今天我们的活动,进一步唤起全社会青年朋友关注、支持和参与红十字事业的积极性,使更多的人加入到志愿捐献造血干细胞者队伍中来。希望我们医院每一个适龄健康具有社会责任感的青年都立即行动起来,积极参加捐献造血干细胞志愿活动,用人道的精神弥补昨天的缺憾,用博爱的胸襟浇铸今天的真情,用奉献的行动创造明天的奇迹,一起点燃生命的希望! 同事们、战友们,让我们举起手臂,行动起来吧! 谢谢!

造血干细胞匹配成功率

造血干细胞匹配成功率 文章目录*一、造血干细胞匹配成功率*二、造血干细胞的来源*三、造血干细胞的细胞特性 造血干细胞匹配成功率1、造血干细胞匹配成功率同卵(同基因)双生兄弟姐妹为100%;非同卵(异基因)双生或亲生兄弟姐妹是1/4;人类非血缘关系的HLA型别中,相合几率是四百分之一到万分之一;在较为罕见的HLA型别中,相合几率只有几十万分之一。由于独生子女家庭的普遍性,高相合率人群减少,今后移植主要在非血缘关系供者中寻找相合者。 2、造血干细胞采集量标准 成年人( 18 ~ 45 岁)的骨髓量一般在 3000 克左右,大部存于骨髓腔。 成人一例采集量为 50 — 200ml 造血细胞悬液,采集次数不超过 2 次。一般循环处理血量不少于 10000ml 。 CD34+ 2 × 106/kg 、 MNC 5 × 108/kg 。每天检测 CD34+ 量,在最高峰时间采集,对捐献者本身无不良影响。 3、造血干细胞的用途 造血干细胞是血液成分之一,是生成各种血细胞的最起始细胞,又称造血多能干细胞,存在于骨髓、胚胎肝、外周血及脐带血中。它既具有高度自我更新能力,又具有进一步分化各系统祖细胞的能力。近代输血就利用这两种能力,对受血者用放射或大剂

量化学药物使其免疫系统受抑再输入献血者的造血干细胞,让它在受血者骨髓内“定居下来,分化增殖”,这即是造血干细胞移植。造血干细胞移植包括骨髓移植(BMT),胎肝造血细胞移植,外周血干细胞(PBSC)移植及脐带血造血细胞移植。 造血干细胞的来源造血干细胞,目前有三个来源渠道:骨髓、外周血、脐带血。其中脐带血造血干细胞相比较前两者来说,采集更方便,同时来源丰富,是一种宝贵的生命资源。 脐带血造血干细胞用于临床治疗已20多年了,临床上明确 可重建造血系统和免疫系统,治疗多种疾病。而且自存脐带血在自体移植上有着更好的治疗效果。自存脐带血在使用上,无需配型,随用随取。因为是自存自用并无排斥反应,治疗成功率高。同时一般自存脐带血会附送医疗保险,在赢得治疗时间的同时,还 减轻了经济上的压力。 造血干细胞的细胞特性血液系统中的成熟细胞寿命极短,因此在人的一生中,造血干细胞需要根据机体的生理需求适时的补充血液系统各个成熟细胞组分。同时在损伤、炎症等应激状态下,造血干细胞也扮演着调节和维持体内血液系统各个细胞组分的 生理平衡的角色。1961年Till JE, McCulloch EA用小鼠体内脾结节方法第一次证实了造血干细胞的存在。

高压氧动员干细胞(审译稿)

高压氧使干细胞释放 STEM CELL MOBILIZATION BY HYPERBARIC OXYGEN 翻译郑成刚审校刘青乐尤景春* Stephen R. Thom, Veena M. Bhopale, Omaida C. Velazquez, Lee J. Goldstein, Lynne H. Thom, Donald G. Buerk Institute for Environmental Medicine, Department of Emergency Medicine, Surgery and Physiology, University of Pennsylvania Medical Center, Philadelphia, Pennsylvania 19104-6068 摘要:我们设想高压氧暴露会通过NO依赖的途径使骨髓中干/祖细胞动员。一次2ATA的HBO暴露2小时,外周血中CD34+细胞总数增加一倍。20次HBO暴露后,尽管外周血白细胞总数没有显著升高,但CD34+细胞数量增加8倍。每100,000单核细胞中克隆形成细胞(CFCs)数从16士2上升到26士3。增加的CFCs都是CD34+亚群,但只在治疗后立即采集的标本中出现细胞增加。后裔细胞的血管内皮生长因子-2受体和基质来源生长因子受体高比例表达。在小鼠试验中,高压氧使外周血干细胞因子上升50%,表达干细胞抗原-1和CD34的细胞升高3.4倍,克隆形成细胞升高1倍。高压氧暴露后骨髓中NO浓度上升1008士255nM。内皮NO合成酶基因敲除的小鼠高压氧暴露后没有观察到干细胞的动员。另外,治疗前使用NO合成酶抑制剂的野生型小鼠,经HBO暴露后干细胞因子和循环干细胞数量没有变化。我们得出结论,HBO是通过刺激NO合成使干/祖细胞动员的。 ---------------------------------------------------------------------------------------------------------第二军医大学高压氧医学中心,上海,200433 *武汉同济大学医学院康复科

非血缘造血干细胞采集技术管理规范

非血缘造血干细胞采集技术管理规范 为规范非血缘造血干细胞采集技术的临床应用,保证医疗质量和医疗安全,制定本规范。本规范适用于非血缘外周血造血干细胞(以下简称造血干细胞)的采集。 一、医疗机构基本要求 采集造血干细胞的医疗机构应当保证造血干细胞来源合法。 (一)有卫生行政部门核准登记的血液内科专业诊疗科目。 (二)三级甲等医院或者血液专科医院。 (三)采集条件 1、采集室:有20m2以上的造血干细胞采集工作区;有相应的造血干细胞采集设备,采集床/椅等。 2、有动员剂注射室。 3、能为捐献者提供常规体检服务。 4、应急处理区:有相应的抢救设备,能够进行急症处理。 5、有资料保存与传输设备。 6、临床实验室有流式细胞仪检测CD34+;能够进行有核细胞计数。有质量控制和质量评价措施,相关检验项目参加卫生部指定的室间质量评价机构的室间质量评价并合格。

(四)有2名以上符合造血干细胞采集技术人员要求的执业医师,并有满足工作需要的其他相关专业技术人员。 二、人员基本要求 (一)医师 1、取得《医师执业证书》,执业范围为内科。 2、有主治医师以上专业技术职务任职资格。 3、有3年以上血液内科工作经验和造血干细胞采集经验。 负责造血干细胞采集工作的医师有副主任医师以上专业技术职务任职资格,有5年以上血液内科工作经验和造血干细胞采集经验。 (二)其他相关专业技术人员 能够胜任造血干细胞采集相关工作,能熟练掌握血细胞分离机的操作、相关仪器设备使用和电脑操作。 三、技术基本要求 (一)严格遵守相关技术操作规范和诊疗指南。 (二)采集部位:浅静脉,必要时深静脉。 (三)外周血动员剂用量:粒细胞集落刺激因子(G-CSF)5μg/kg/日,4—6天。 (四)采集方式:细胞分离机采集。 (五)采集量:造血干细胞悬液50—200ml/人/次,采集次数不超过2次,每次循环处理血量不多于15000ml。当

一、什么是造血干细胞它能再生吗

一、什么是造血干细胞?它能再生吗? 造血干细胞是一类可以产生各种类型血细胞的细胞,它具有自我更新和很强的再生与分化发育能力,它来源于红骨髓,可以经血流迁移到外周血液循环中,适量的造血干细胞就能维持正常的血液成份平衡。 二、什么是造血干细胞移植? 患者因疾病或其它原因导致造血或免疫功能异常时,将他人的正常造血干细胞移植到患者体内,重建患者的正常造血等相关功能,达到治疗某些疾病的目的。 三、造血干细胞移植的分类? 根据造血干细胞来源可分为骨髓移植、外周血造血干细胞移植、脐带血造血干细胞移植及胎肝造血干细胞移植。 四、造血干细胞移植能治疗哪些疾病? 造血干细胞移植是治疗白血病、再生障碍性贫血、重症免疫缺陷症、地中海贫血、急性放射病、某些恶性实体瘤、淋巴瘤等造血及免疫系统功能障碍性疾病的成熟技术和重要手段,对有些疾病有根治性疗效。 五、健康者在多大年龄适合捐献造血干细胞? 年龄在18-40岁的健康者均可登记成为捐献造血干细胞的志愿者18-55岁健康者可采集造血干细胞。 六、捐献造血干细胞影响身体健康吗? 人体内的造血干细胞具有很强的再生能力。正常情况下,人体各种细胞每天都在不断新陈代谢,进行着生成、衰老、死亡的循环往复,当指出部分造血干细胞后,造血干细胞会很快增殖,一般健康者在十天左右即可补足所捐的细胞量。因此,捐献造血干细胞不仅不会影响自身的造血功能反而使自身的造血系统得到了锻炼,增强了生命的活力。 七、从外周血采集造血干细胞,对捐献者有危险、痛苦吗? 至今没有因采集外周血造血干细胞引起对指献者伤害的报道,在采集完成后,一些轻微疼痛感和不适将会消失,所用的器材都经严格消毒并一次性使用,所在的采集医院都是由卫生部认定、在中华骨髓库备案的有移植和采集资质的三甲医院,安全是有保障的。 八、捐献造血干细胞需多长时间?捐献者大约需采集多少造血干细胞?捐献期间正常工作怎么办? 约1个星期,注射动员剂4天(皮下注射,2次/日),第5天采集,大约需采集100ml~200ml 含1%左右浓度造血干细胞的混悬液。一旦确定捐献,我们红会工作人员将会为您请假,并尽量帮您解决捐献期间的生活问题。 九、在采集造血干细胞前,为什么要对捐献者使用动员剂?对人体有副作用吗?有什么样的不适症状? 在正常生理条件下,外用血的造血干细胞量极少,不能满足移植的需要,药物动员之后,加速骨髓造血干细胞的生成并释放到外周血中,可使外用血造血干细胞增加20-30倍,以满足移植需要。据多年的临床观察和目前国际上的报道,动员剂(国际上公认的G-CSF)对人体健康没有副作用。 注射动员剂期间可能会有腰酸背痛、食欲;减退、低热等不适症状,因人而异,停药后这些不适症状就会消失。 十、捐献造血干细胞后会影响生育吗? 不会影响。志愿者指完造血干细胞后可正常怀孕生育。 十一、怎样加入中国造血干细胞捐献者资料库江苏省分库,成为一名捐献造血干细胞志愿者? 如果您适龄、身体健康、有过无偿献血经历、家人支持、在当地有比较固定的工作或住

什么是造血干细胞

什么是造血干细胞 近三十年来,血细胞生成的研究发展很快,现已证明人类骨髓中存在造血多能干细胞,它们具有高度自我更新的能力,并且能分化为各血细胞系统的祖细胞(如淋巴系干细胞、粒系干细胞),再大量分化、增殖为各种原始和成熟血细胞,最后这些成熟的血细胞通过骨髓进入血液中,发挥各自的生理作用。人体造血干细胞的一半存在于干细胞池,是人体造血细胞的储备库,以适应和满足各种状态下造血的需要;另一半存在于增殖池,这些造血干细胞不断增殖、自我复制,以弥补因细胞衰老或丢失所致的血细胞不足,维持人体血细胞的平衡。 人体的造血组织有很强的代偿功能,当抽取部分造血干细胞后,会很快增殖,一般健康者在1-2周左右即可补足所捐的造血干细胞量。因此,捐献者不仅不会影响自身的造血功能,反而使自身的造血系统得到了锻炼,更具备了生命的活力。 什么是骨髓 骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨骺和扁平骨(如髂骨)的骨髓腔中,是一种海绵状的组织。能产生血细胞的骨髓呈红色,称为红骨髓。人出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪填充了所有的长骨的骨髓腔(呈

淡黄色,称黄骨髓),最后几乎只有扁平骨和长骨骨骺中才有红骨髓。此种变化可能是由于成人不需要全部骨髓腔造血,部分骨髓腔造血已足够补充所需血细胞。当机体严重缺血时,部分黄骨髓可转化为红骨髓,骨髓的造血能力可显著提高。骨髓的造血功能极强,骨髓最高的造血能力可达到正常造血情况的9倍,如果只保留骨髓的1/10,就能完成正常的造血功能,所以少量骨髓捐献对身体没有什么影响。 造血干细胞移植的过程是怎样的 常规的移植前,只需HLA—A、B、DR三个座位六个基因相同即可。由于HLA—A、B的多样性最明显,所以上海分库原先是对志愿者先做HLA—A、B分型,待检索后供、受者HLA —A、B相配后,再对供者作HLA—DR分型检测,看是否相配?现在已采用基因检测法,不分一、二类了。如果供、受者HLA 完全相配,同时供者健康检查合格,就可以着手准备移植手术。先用化学药物和放射治疗摧毁患者身上癌细胞,这时患者的正常造血干细胞也会被杀死,人体的免疫力下降,易发生感染,必须在无菌病房(层流室)中接受移植。移植方法如同输血,植入的造血干细胞在患者体内繁殖,重建造血和免疫系统,患者逐渐恢复健康。造血干细胞移植对白血病的有效治愈率可达到70%左右。 造血干细胞采集的方式是什么

3.2 造血干细胞的采集,冻存,及回输

造血干细胞的采集原理、冻存及回输 山东省立医院 姜玉杰

造血干细胞移植的原理 造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation, HSCT))是经过大剂量放、化疗或其他免疫抑制预处理,清除受体体内的肿瘤细胞、异常克隆细胞、阻断发病机制,然后把自体或异体造血干细胞通过静脉回输给受体,以替代原有的病理性造血干细胞,从而使患者正常的造血及免疫系统得以重建,从而达到治疗的目的的一种治疗手段。

HSCT的基本流程 ?Injection:供者注射动员剂(G-CSF)?Mobilization:干细胞动员 ?Collection:干细胞采集 ?Storage (Cryopreservation):干细胞分装储存(冻存)?Conditioning:预处理 ?Transfusion:干细胞回输 ?Engraftment & recovery:植入和恢复

HSCT基本流程

造血干细胞的表面标志 ?CD34 造血细胞的一种重要标志,CD34+细胞占骨髓细胞的1%~4%?CD117 是干细胞生长因子受体,IgSF(免疫球蛋白超家族)成员,CD117+约细胞占骨髓细胞的1%~4% ?50%~70%的CD117+骨髓细胞表达CD34

供体造血干细胞采集标准 ?选择合适的方式,通过外周血或骨髓采集供体的造血干细胞。 ?造血干细胞需要采集到一定的数量: ?单个核细胞须达到4-6 ×108/; ?CD34+细胞(造血干细胞)在HLA半相合时,应达到达到2 ~4 ×106/kg 和1 ×107/kg,全相合和自体造血干细胞移植患者可适当放宽标准;?如有HLA抗原理想的脐带血,也是儿童患者合适的干细胞来源。

最新干细胞技术临床应用常见的不良反应

干细胞技术临床应用常见的不良反应:1.干细胞本身可能引起的反应: 1.1 发热:常常是由于细胞碎片吸收造成,通常体温不超过38.5℃。可以对症处理、严密观察。如果体温超过38.5℃,就要考虑感染的可能,急查各项化验,并早期应用抗生素。 1.2 过敏反应:又称为变态反应(Allergy),多在1~10分钟后出现,但也有在几日后出现的。主要表现为平滑肌收缩,毛细血管通透性增加,粘膜腺体分泌增多,在症状上常可见到皮肤红肿、皮疹、荨麻疹、搔痒、斑块,或喉部、气管、支气管和胃肠痉挛或水肿。全身症状可导致血压下降、心率加快、皮肤苍白、水肿脉弱;严重者可出现休克,甚至死亡。应对方法:传统抗过敏药多为抗组胺药和激素类药,对症治疗。 1.3致瘤性:有文献报道干细胞治疗有致瘤性情况的存在,但一般见于胚胎干细胞,且多代培养,本研究所所用的细胞均为成体干细胞而且传代较少,不容易出现致瘤性。 2.临床操作可能引起的反应: 脑脊液循环途径,在临床操作中有可能引起以下不良反应。 2.1 头痛:其原因常是由于滴放脑脊液较多或脑脊液由蛛网膜及硬脑膜穿刺针孔外漏造成脑脊液减少、颅内压降低,使支配脑膜的三叉神经感觉支及血管组织牵拉移位引起头痛。通常发生在腰椎穿刺后1-7天内,最长可延续致2周。 应对方法:可口服大量盐水、饮料,以补充液体,或静脉滴注0.9%盐水或5%葡萄糖液500---1000ml。 2.2 复视:腰椎穿刺术后,如脑脊液持续由硬脑膜穿刺孔外漏,则可使脑脊液减少,颅内压降低,展神经在颞骨的岩脊上被牵拉或移位,造成单侧或双侧展神经麻痹,眼球运动障碍,出现复视,可同时伴有腰椎穿刺术后头痛,经数日或数周后部分或完全恢复正

造血干细胞采集宣传知识

造血干细胞采集宣传知识 1、什么是造血干细胞 造血干细胞是所有造血细胞和免疫细胞的原始细胞。所有的血细胞都是由造血干细胞定向分化、增殖而成。它是体内各种血细胞的唯一来源,主要存在于骨髓、外周血、脐带血中。具有自我更新,不断复制、分化的特征。就是这些特征使我们捐献造血干细胞后1-2周即可恢复到原先水平,无损健康。 2、为什么要捐献造血干细胞? 造血干细胞移植是治疗肿瘤性疾病如:白血病、某些恶性实体瘤非肿瘤性疾病如:再生障碍性贫血、重症免疫缺陷病、急性放射病、地中海贫血等75种致死性疾病最有效的方法。 3、什么是造血干细胞移植? 将正常的造血干细胞输入到原已衰竭或摧毁骨髓的患者内,重建患者的造血功能和免疫功能,达到治疗某些疾病的目的,此一过程称为造血干细胞移植。 4、造血干细胞移植是否就是骨髓移植? 造血干细胞移植的原理与骨髓移植完全相同,只是采集方式不同,它只需从志愿者的静脉中采集。 5、为什么要建立中国造血干细胞捐献者资料库? 1)要成功地进行造血干细胞移植治疗,捐献者与患者之间的HLA 型别(人类白细胞组织相容性抗原)要相合,HLA相合几率低。2)虽然世界很多国家建立了资料库,但是不同种族间遗传差异

很大,不同个体的差异更大,因此,必须建立中国人自己的资料库。 3)参加的志愿者越多,库容量越大,患者找到相合捐献者的机会就越多,“生机”就越大. 4)我国大多数青少年都是独生子女,一旦患病,很难在亲属间找到合适的供者。 6、配型成功的几率。 血缘关系HLA相合率: 同卵(同基因)双生兄弟姐妹为100%, 非同卵(异基因)双生或亲生兄弟姐妹是25% 非血缘关系的HLA分型相合率: 常见的分型:1/400——1/10000 罕见的分型:1/100000甚至以上 7、为什么需要大量志愿者加入? ①HLA分型相同的几率很低;②造血干细胞是白血病患者得到根治的唯一希望;③HLA分型相同是移植的重要条件;④白血病恶性程度很高;⑤独生子女的普遍性,在兄弟姐妹中找到配型相合者是不可能的。⑥据中华骨髓库统计,截至2013年9月30日止我国共有1704377人加入了中华骨髓库,成功捐献造血干细胞的却只有3750例。但是在我国,有上百万的白血病患者,并以每年7万人的速度增加,其中大多数为儿童,每年因白血病死亡的人数达5万以上。

造血干细胞采集活动策划书

造血干细胞采集活动策划书 一、活动主题:血脉相连,真情永在 二、活动背景及目的: 我国等待造血干细胞移植的患者近百万人,仅白血病患者每年就新增4万人以上,要成功地进行造血干细胞移植治疗,捐献者与患者之间的HLA型就要相合,如果不合,移之后就会产生严重的移植物抗宿主反应,甚至危及患者生命。因此,必须建立中国人的造血干细胞捐献者资料库,并且是参加中华骨髓库的志愿者越多,库容量越大,患者找到相合捐献者的机会就越多,“生机”就越大。 三、活动时间: 四、活动地点: 五、活动对象: 六、承办单位: 七、前期准备: (一)宣传工作 1、宣传海报:(负责部门:宣传部) 工作内容:两张海报 工作要求:一张报名期间贴,一张活动开展期间贴。 2、网络宣传:(负责部门:信息部) 在人人网、微博上进行活动宣传工作 (二)内部事宜 1、内部通知:(负责部门:秘书处) 工作内容:发短信通知各部部员,让其通知 2、内部培训:(负责部门:培训部) 工作内容:办讲座,让权威人士讲解,宣传造血干细胞活动

3、通知分会长造血干细胞活动即将开始,请他们帮忙统计名单,并于4月18 日前反馈 4、4月19日,将名单发给老师。请秘书处拟短信,确定活动期间的后勤人员, 并反馈。 5、4月20日,与老师沟通,确定地点。商议确定后勤人员的具体工作。 八、活动流程: 1、打扫卫生(所有已到红会成员) 工作内容:在11:40-12:30之间将会场打扫整洁。 2、布置现场 工作内容:贴海报,挂旗子,放纪录片,写黑板,安排工作,等待专业人士到来。 3、所需物品: 海报、宣传片、旗子、黑板、粉笔、糖水、桌椅、纸笔等。 4、人员安排: 5、活动结束: 工作人员留下清理现场并合影,向已参加的同学表示感谢。(15:00) 总时长:150分钟

造血干细胞研究进展

造血干细胞研究进展 摘要:造血干细胞是具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体,在人体造血系统中起着至关重要的作用。本文介绍了造血干细胞的生物学特征、表面标志以血干细胞在干细胞移植、细胞治疗和基因治疗等方面的临床应用和前景。 造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)又称多能干细胞,是存在于造血组织中的一群原始造血细胞。也可以说它是一切血细胞的原始细胞,即由造血干细胞定向分化、增殖为不同的血细胞系,并进一步生成血细胞。人类造血干细胞首先出现于胚龄第2~ 3周的卵黄囊,在胚胎早期(第2~ 3月)迁至肝、脾,第5个月又从肝、脾迁至骨髓。在胚胎末期一直到出生后,骨髓成为造血干细胞的主要来源。造血干细胞是干细胞中研究最早、最多、最深入的一种,近年来在造血干细胞的多个研究领域均取得了重要进展。 1 造血干细胞的发现 造血干细胞的发现源于第二次世界大战后放射医学的研究, Jacobson 等[1-3]发现小鼠与豚鼠的脾脏与骨髓中存在有一类细胞,即造血干细胞,能够重建经致死剂量射线照射过的小鼠与豚鼠的造血系统。随着单克隆抗体技术与流式细胞分选技术的出现,人们利用多种针对细胞表面抗原的抗体组合,分离到相对较纯的小鼠与人骨髓与胚胎组织中的造血干细胞与造血前体细胞群(hematopoietic progenitorcell)。其中,美国斯坦福大学 Weissman 实验室在分离与鉴定小鼠与人的造干细胞方面所做的工作最为杰出[4-9]。长期以来,对于造血干细胞是由多种不同的、可以分化成不同种类成熟细胞所组成,还是由一类可以分化成所有造血系统成熟细胞所组成,人们存有争论。直到 1996 年,Osawa 等[10]通过单个细胞移植的方法,验证了一个造血干细胞就可以重建机体整个的造血系统,才结束了对于这一问题的争论。 2 对小鼠造血干细胞的早期发生的研究 造血干细胞的发生到目前为止,人们对于小鼠造血干细胞的早期发生研究得相对较多。小鼠胚胎在完成原肠运动(gastrulation)后不久,一群中胚层的细胞

CD34造血干细胞计数

CD34+细胞计数  外周血现已被广泛地被用作骨髓移植、癌症患者接受大剂量化疗或放疗后骨髓重建造所需血干细胞(Hemotopoietic Progenitor Cells HPC)的来源。外周血源性干细胞现主要被运用自体移植,其应用面也逐步拓展至异基因骨髓移植中。使用外周血替代骨髓作为造血干细胞的来源有着以下优点:1,易采集;2,对供者无需全身麻醉;3,减少了采集后并发症的发生;4,受者造血系统重建快;5,费用低;6,住院时间缩短或可部分或全部在门诊处完成操作。 相对于骨髓,外周血中的造血干细胞一般只出现一次高峰,其数量取决于供者血体积和/或单个核细胞的数量。由于外周血中造血干细胞含量很低,固常规中运用多极分离技术来收集这些细胞。在早期临床研究中,收集的干细胞作为移植物数量是否足够很不清楚。因为要检测这些细胞数量需要使用集落形成实验,但此法明显不适用于临床,因其大致需要12-15天时间出结果,故无法满足临床中当天出报告决定移植是否继续的要求。此问题自发现CD34抗体可鉴别造血干细胞,并成功地被运用流式细胞仪定量检测造血干细胞后被圆满解决了。 CD34+造血干细胞植活最低数量要求是2-5 x 106/公斤体重。然而正常人外周血中干细胞数量只占所有有核细胞的0.1%。很明显这些数量的干细胞是不足够运用于移植的,除非使用恰当技术增加外周血干细胞的含量供采集。此技术可通过给予供者集落刺激因子(通常是粒或粒-单集落刺激因子),同时可联合骨髓抑制剂(如环磷酰胺)的方法动员造血干细胞进入循环外周血中。联合使用化疗药物与集落刺激因子造成短暂的循环血中髓系细胞抑制,随后使骨髓代偿性地释放髓祖细胞、造血干细胞至外周血,从而达到动员干细胞的目的。联合使用细胞毒药物与集落刺激因子可延长抑制时间,相对于单独使用集落刺激因子可增加动员至外周血中的干细胞。对于正常人供者不可使用化疗药物来抑制外周血,常使用G或GM-CSF、血小板刺激因子来动员。关于如何使用动员药物请参见其他相关文献。 早期外周干细胞计数 在尚未应用流式细胞仪定量检测CD34+细胞时,外周血干细胞计数常运用单位-粒/巨噬细胞集落形成实验间接求得。这项检测技术通过直接计数干细胞形所的集落来反映干细胞的数量,故被认为是检测是否存干细胞的金标准。但也有学者置疑此检测是否与移植成活率有很好的相关性。因为在这项技术中,各研究单位缺乏统一的检测标准;刺激因子不同的处理方法和不同的配伍使用;集落形成后不同的计数方法都造成了统计数据具有很大的变异性。常规体外集落形成实验主要检测髓系祖细胞并要求大约14天取得结果,使得该项检测无法来确定临床何时采集干细胞;所以以前只根据循环血中的最大集落数(CFU而非CFU-GM)来确定采集多少细胞。 使用CD34识别造血干细胞 自从发现、纯化、标记抗CD34单克隆抗体开始,使流式细胞定量检测在外周血或骨髓中的CD34阳性造血干细胞成为了可能。CD34抗原存在于各种祖细胞上,其中包括多能干细胞和间质干细胞。在某些组织的上皮细胞上也有表达。CD34抗原的分子量为105-120KD,具有一个高度糖基化的类粘蛋白的结构。内皮细胞的CD34抗原与L选择素结合,然而造血干细胞上的CD34抗原的配体至今还未发现,有学者认为此抗原在细胞粘附中起作用。通过 技术支持:https://www.360docs.net/doc/3e15771075.html, 电子邮件:service@https://www.360docs.net/doc/3e15771075.html,

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