【高中生物】细胞培养一般方法
【高中生物】细胞培养一般方法
1.玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;
2.首先清洁无菌台，然后用75%酒精擦拭，用紫外线照射40分钟以上；各种培养皿辐照3小时以上；
3.培养基(ph7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内,用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取完全培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天,肉眼见无浑浊或沉淀等异物.分装后置-20度保存;
4.消化液（pH7.8）或其他添加的液体用高压蒸汽灭菌或用一次性无菌过滤器过滤灭菌，然后分装到支架中-20度储存；
5.各种炒娴囊禾甯次率庇ρ咭”呷诨?否则有的液体(特别是培养基)容易产生沉淀.
如果培养箱暴露在紫外线下超过6小时，则至少每月一次，在暴露在紫外线下后用清水擦拭
7.进入操作时应注意先清洗双手及手腕,然后用75%酒精擦拭,操作时注意无菌台内空间层次.手及物品不要在暴露的瓶口上方来往,如果数量较多,培养瓶应放在与酒精灯平行地方便于操作,瓶与瓶之间应相隔一定的距离,开瓶(盖)时应先用75%酒精反复擦拭或用灯烧,开开后应用灯先烧口,然后烧盖.用完后同样操作.整个操作过程尽量在无菌台靠里面一点.
恢复：
1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-37.5度,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化.
2.在无菌台上，将完整的培养基加入50ml的小培养瓶中，约5ml，然后用无菌吸管从冷冻管中取出细胞，放入培养室，轻轻摇动，使细胞均匀，然后放入培养箱中培养
传代:
1.贴壁细胞：
对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱.50ml培养瓶加入消化液约0.6ml,按此比例进行消化,(根据配制强度经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后
高中三年级
,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入完全培养基后继续培养或实验.
2.悬浮细胞：
一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度可先离心500rpm,5min后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养.
2021年高中生物 2.3动物细胞培育和核移植技术 选修3(1)
山东省菏泽一中2021年高中生物 2.3动物细胞培育和核移植技术教案新人教版选 修3 教学过程教学内容教学手段和 方法 预期目标 1、引言 2、学习新课： 一、动物细 胞培养(1)动物细胞培养的定义(2)动物细胞培养的过程(3)动物细胞培养的条件(4)动物细胞培养技术的应用 二、动物细胞核移植技术和克隆动物 1、核移植定义 2、体细胞核师：前面，我们学习了植物细胞工程，今天，我们开 始了解动物细胞工程。首先，请回顾：植物细胞 工程有哪些基本技术？ 生：植物组织培养，植物体细胞杂交。 师：那动物细胞工程又有哪些基本技术呢？ 生：动物细胞培养，动物细胞位移植，动物细胞融合， 生产系克隆等。 师：通过阅读你应注意哪些？ 生：1.动物细胞培养与植物组织培养莫要混淆 2.动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础。 师：请阅读材料，小组讨论解决方案 材料一：对于大面积烧伤的病人，自体健康皮肤非常 有限，使用他人皮肤来源又不足，且会产生排斥 反应。怎样才能获得大量的自体健康皮肤呢？ 材料二：单细胞产生的蛋白质很少，怎样才能获得大 量的分泌蛋白呢？ 生：取相应细胞，大量培养，即通过动物细胞培养。 师：很好！对于细胞培养我们要了解两个问题。第一 个问题：什么是动物细胞培养？ 生：动物细胞培养是从动物机体中取出相关的组织， 将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养其中， 开门见山，复 习引入，形成 对比 学生阅读 P44第一段 学生阅读提 炼 投影展示，学 生阅读和讨 论相结合。 师生一起阅 读教材，学生 自主性归纳， 突出本节课 重点。 学生讨论，思 考并回答 教师总结，进 一步突出重 点 学生讨论、思 承上启下，让 学生将本节内 容与上节内容 形成有机联 系。 提高学生阅读 分析的能力。 自然过渡到本 节学习内容， 加深理解动 物的细胞培养 的使用前提 培养学生提炼 信息，归纳知 识的能力。 了解动物细胞 培养中的操作 原因 自然过渡 明析动物细胞 培养的需环境
高中生物专题2细胞工程2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术学案新人教版选修3
2．2.1 动物细胞培养和核移植技术 [学习目标] 1.归纳动物细胞培养的过程、条件及应用。2.归纳通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景。 方式一2003年，四川少年小林点燃鞭炮，导致面部、四肢被严重烧伤并感染。为了挽救儿子的生命，小林的爸爸、妈妈向医生恳求“割皮救儿”，烧伤整形科主任魏平最终同意进行这场罕见的亲体皮肤移植手术。为了全覆盖孩子身体上被深度烧伤并发生感染的创面，医生把取自父子俩的皮肤全部剪成指甲盖大小的皮块，儿子和爸爸的皮肤相隔相嵌，估计父亲的皮肤至少能在其儿子身上存活半年甚至更长时间，这就给儿子自身皮肤的生长带来了生机，孩子的痊愈指日可待。 思考： 1．小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？ 2．选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？ 3．自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身的皮肤？ 方式二古代神话里孙悟空用自己的汗毛变成无数个小孙悟空的离奇故事，表达了人类对复制自身的幻想。1978年，美国科幻小说家罗维克(D.Rorvick)写了一本名叫《克隆人》(The Cloning of a man)的书，内容是一位富商将自己的体细胞核移植到一枚去核卵中，然后将其在体外卵裂成的胚胎移植到母体子宫中，经过足月的怀孕，最后生下了一个健康的男婴，这个男婴就是一个克隆人。 现在，克隆人已经不是科幻小说里的梦想，而是呼之欲出的现实。由于克隆人可能带来复杂的后果，一些生物技术发达的国家，现在大都对此采取明令禁止或者严加限制的态度。 克隆人，真的如潘多拉盒子里的魔鬼一样可怕吗？我们应该怎样正确看待克隆技术呢？ 一、动物细胞工程和动物细胞的培养 1．动物细胞工程
高中生物人教版(2019)选择性必修三学案 2.2.1动物细胞培养
2.2 动物细胞工程 （一）动物细胞培养 学案 学习目标 1. 说明动物细胞培养的条件和动物细胞培养过程中细胞生长的特点；比较动物细胞培养与植物组织培养的不同。 2. 说明干细胞在医学、药物安全性与有效性检测等领域的应用及存在的问题。 一、动物细胞培养的条件 1. 动物细胞培养的概念：动物细胞培养是指从动物体中取出 ，将它分散成 ，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞 和 的技术 2. 动物细胞培养的条件： （1）营养： 无机物： 等 有机物：糖类、 、 、 、 等 （2）无菌、无毒的环境 ①对培养液和所有 进行无菌处理 ②在培养液中添加一定量的 无毒：定期更换培养基，以便 （3）温度和pH 温度：哺乳动物多以 为宜 pH ：多数细胞生存的适宜pH 为 （4）气体环境 O 2：细胞代谢所必需的 CO 2：维持培养液的 二、动物细胞培养的过程 1. 细胞贴壁的概念：细胞往往贴附在 ，这种现象称为细胞贴壁 2. 接触抑制的概念：贴壁细胞在生长增殖时，还会发生接触抑制现象，即当贴壁细胞分裂生长到 时，细胞通常会 3. 原代培养的概念：通常将 的细胞培养，即动物组织经 称 1.通过动物细胞培养获得大量细胞，可以证明动物细胞具有全能性（ ） 二、 干细胞培养及其应用 无菌 95%空气加5%CO 2的混合气体
1.干细胞的种类：干细胞存在于、和等多种组织和器官中，包括和等 2.胚胎干细胞的特点：胚胎干细胞，（简称细胞）存在于中，具有分化成为成年动物体内的的细胞，并进一步形成机体的所有和甚至的潜能 3.成体干细胞的种类：成体干细胞是或内的干细胞，包括骨髓中的、神经系统中的和睾丸中的等 4.成体干细胞的特点：成体干细胞具有，只能分化成特定的或 ，不具有的能力 5.造血干细胞的分布：造血干细胞主要存在于成体的、和中课堂检测 一、单选题 1.提供骨髓造血干细胞并不会对试管婴儿造成损伤，其原因是( ) A.骨髓造血干细胞已高度分化 B.骨髓造血干细胞可以无限再生 C.骨髓造血干细胞完成功能后不再发挥作用 D.骨髓造血干细胞有再生能力，捐献后可刺激骨髓加速造血 2.某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列叙述正确的是( ) A.动物细胞培养过程中，通常要通入5%的CO2刺激细胞呼吸 B.培养液需含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等 C.为了防止细胞培养过程中的细菌污染，可向培养液中加入适量的抗生素 D.甲、乙细胞在持续传代培养过程中，均会出现停止增殖的现象 3.下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A.动物细胞培养技术的原理是细胞的全能性 B.原代培养过程中小部分细胞会发生细胞核型改变而获得不死性 C.传代培养时需要用胃蛋白酶处理贴壁生长的细胞 D.培养过程中细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖 4.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A.传代培养的正常动物细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
动物细胞培养教案
2.2.1动物细胞培养 一、教材分析 《动物细胞培养和核移植》是人教版高中生物选修三《现代生物科技专题》第2章第2节《动物细胞工程》第1节课的教学内容，主要学习叶绿体动物细胞培养这一基础技术和核移植技术的过程和应用。本节内容是本章的重点同时又是近几年的热点，，又是后面学习动物细胞融合和单克隆抗体的基础。 二、教学目标 1．知识目标： （1）简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 （2）简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 兴趣热爱。 2．教学重点难点 重点：（1）动物细胞培养的过程及条件。 （2）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 难点：用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 三、教学方法 1．讲授法：对细胞培养的过程进行疑难讲解。 2．自学法：学生先自学基本知识。 3．学案导学：见后面的学案。 四、教学过程 (一)复习提问：植物组织培养的概念、原理、过程方法、意义？ 植物体细胞杂交技术概念、原理、过程方法、意义？ （二）导入新课：可以培育成植物体，那么，你利用动物细胞能不能大量繁殖动物体，以提高繁殖率呢？这节课我们来学习动物细胞工程 （三）重难点讲解 一、动物细胞工程的常用手段 动物细胞工程的常用技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体生产，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。 二、动物细胞培养 1、概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 2、动物细胞培养的过程： 动物胚胎或幼龄动物的器官、组织→剪碎、胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理→单个细胞（分离细胞）→加培养液稀释，制成细胞悬液→原代培养（消化后的初次培养）→传代培养细胞株→细胞系（遗传物质改变） 3、相关概念： 原代培养：将组织取出，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，散成单个细胞，然后在细胞悬浮液中的初次培养的过程。 传代培养：把原代培养增殖的细胞定期用胰蛋白酶从瓶壁上脱离下来，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养的过程。 细胞株：传代培养的细胞能传到10—50代，这种传代细胞叫做细胞株。 细胞系：50代后，有部分细胞的遗传物质发生了改变，并且有癌变的特点，能无限地传代下
【高中生物】细胞培养一般方法
【高中生物】细胞培养一般方法 1.玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上; 2.首先清洁无菌台，然后用75%酒精擦拭，用紫外线照射40分钟以上；各种培养皿辐照3小时以上； 3.培养基(ph7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内,用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取完全培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天,肉眼见无浑浊或沉淀等异物.分装后置-20度保存; 4.消化液（pH7.8）或其他添加的液体用高压蒸汽灭菌或用一次性无菌过滤器过滤灭菌，然后分装到支架中-20度储存； 5.各种炒娴囊禾甯次率庇ρ咭”呷诨?否则有的液体(特别是培养基)容易产生沉淀. 如果培养箱暴露在紫外线下超过6小时，则至少每月一次，在暴露在紫外线下后用清水擦拭 7.进入操作时应注意先清洗双手及手腕,然后用75%酒精擦拭,操作时注意无菌台内空间层次.手及物品不要在暴露的瓶口上方来往,如果数量较多,培养瓶应放在与酒精灯平行地方便于操作,瓶与瓶之间应相隔一定的距离,开瓶(盖)时应先用75%酒精反复擦拭或用灯烧,开开后应用灯先烧口,然后烧盖.用完后同样操作.整个操作过程尽量在无菌台靠里面一点. 恢复： 1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-37.5度,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化. 2.在无菌台上，将完整的培养基加入50ml的小培养瓶中，约5ml，然后用无菌吸管从冷冻管中取出细胞，放入培养室，轻轻摇动，使细胞均匀，然后放入培养箱中培养 传代: 1.贴壁细胞： 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱.50ml培养瓶加入消化液约0.6ml,按此比例进行消化,(根据配制强度经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后 高中三年级
2020年南师附中生物竞赛辅导讲义设计-生物反应05动植物细胞培养动力学
2020年高中生物学竞赛春季疫情辅导讲义 生物反应 2020.4南京 5 微生物反应器操作 5.1微生物反应器操作基础 5.1.1 微生物反应器操作方式 分批式操作：是指基质一次性加入反应器内，在适宜条件下将微生物菌种接入，反应完成后将全部反应物料取出的操作方式。 连续式操作：是指分批操作进行到一定阶段，一方面将基质连续不断地加入反应器内，另一方面又把反应物料连续不断的取出，使反应条件不随时间变 化的操作方式。 流加式操作：是指先将一定量基质加入反应器内，在适宜条件下将微生物菌种接入反应器中，反应开始，反应过程中将特定的限制性基质按照一定要求 加入到反应器内，以控制限制性基质浓度保持一定，当反应终止时取 出反应物料的操作方式。 V t 图5－1 分批式操作中基质体积变化 V t 图5－2 流加式操作 V
t 图5－3连续式操作 5.1.2 不同操作方式的特点 在分批式操作中，反应液中基质浓度S随反应进行不断降低，菌体浓度X、产物浓度P则不断升高，因此是一个动态变化过程。当微生物反应存在底物抑制时，初期底物浓度高不利于反应。后期底物浓度过低，则反应速度很低。 在流加式操作中，基质浓度控制在一定水平，避免了底物抑制问题。流加过程中反应液体积是变化的。流加式操作可达到拟稳态。 在连续式操作中，反应液体积V、底物浓度S、菌体浓度X、产物浓度P保持恒定，连绵式操作是一个稳态过程。 5.1.3 不同操作方式的优缺点 见教材73页表5-1。 5.2连续式操作 连续式操作有两大类型，即CSTR型和CPFR型，CPFR型多用于酶促反应过程，微生物反应的连续式操作多采用CSTR型。 根据达成稳定状态的方法不同，CSTR型连续操作，大致可分为以下3种： 恒化器法：指连续培养过程中，基质流加速度恒定，以调节微生物细胞的生长速率与恒定流量相适应的方法。 恒浊器法：指预先规定细胞浓度，通过基质流量控制，以适应细胞的既定浓度的方法。 营养物恒定法：指通过流加一定成分，使培养基中的营养成分恒定的方法。 5.2.1 恒化器法单级连续操作 5.2.1.1 数学模型 图5－4所示的单级CSTR培养系统中，流入液中仅一种成分为微生物生长的限制性因子，其他成分在不发生抑制的条件下充分存在。
江苏常熟市高中生物细胞工程植物细胞工程的基本技术3!
细胞工程植物细胞工程的基本技术 一、教学目标 1. 简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。 2. 列举植物细胞工程的实际应用。 3. 尝试进行植物组织培养。 情感态度和价值观 体验植物组织培养技术 能力方面 尝试植物组织培养技术 二、教学重点和难点 1.教学重点 (1) 植物组织培养的原理和过程。 (2) 植物体细胞杂交的原理。 (3) 植物细胞工程应用的实例。 2.教学难点 植物组织培养的实验 三、教学策略 本节教材内容对学生来说，虽说在必修模块中学了一些细胞的知识，但仍然是一个新的领域，学习起来有一定的困难。教师可采用讲授为主结合讨论的方法。 四、教学手段 录像、软件。
经典例题剖析 1.下列属于组织培养的是： A.花粉培养成单倍体植株 B.芽发育成枝条 C.根尖分生区发育成成熟区 D.未受精的卵发育成植株 解析]解答此题需从以下几个方面入手：首先，组织培养是指离体的植物器官、组织或细胞经脱分化形成愈伤组织，再经再分化形成具有根、芽结构的胚状体，然后由胚状体发育成完整植物体的过程。花粉粒能培养成单倍体，是在离体条件下培养形成的。第二，芽发育成枝条、根尖分生区发育成成熟区，是体内分化的器官和组织形成了机体的一部分，未受精的卵发育成植物体，这就是自然情况下单倍体的形成过程，是在母体的调控下完成的。 答案] A 2.在细胞工程__原生质体融合育种技术中，其技术的重要一环是将营养细胞的细胞壁除去，通常是采用纤维素酶和果胶酶的酶解破壁法处理。如将去掉了细胞壁的成熟植物细胞置于清水中，细胞将： A.皱缩 B.胀破 C.呈球形 D.保持原状 解析]成熟植物去壁后，置于清水中，由于细胞内外浓度差较大，又无细胞壁保护，细胞会大量吸水，直至细胞破裂。 答案]B
细胞培养1
1、细胞生长方式及类型 体外培养的细胞，按其生长方式可分为贴附型、悬浮型及半贴壁细胞。 （1）贴附生长型细胞：为附着于底物（支持物）表面生长的细胞。①上皮细胞型：扁平的多角形，生长特点为细胞之间紧密相靠、相互衔接，呈铺路石状，具有连接成片的能力。②成纤维细胞型：梭形，不规则三角形或扇形，生长特点为细胞一般并不紧靠相连成片，而是排列为旋涡状、放射状，或似栅栏状。③游走型细胞：外形不规则且不断变化，生长特点为一般不形成群落，经常处于较活跃的变形及游走状态。④多形型细胞：形态不规则。 （2）悬浮生长型细胞：在体外培养是不需要附着于底物，在悬浮状态下即可生长。特点为生存空间大，只需稀释而不需消化处理，具有能够提供繁殖大量细胞、传代繁殖方便、易于收获细胞等优点，但是不如贴附生长型观察方便，而且并非所有的培养的细胞都能悬浮生长。（3）半贴壁细胞：即可贴壁生长，也可以是悬浮培养，条件改变，细胞形态可有变化。2.体外培养细胞的生存和增殖特点 （1）贴附和伸展：使多数体外培养细胞的基本特点。培养细胞在未贴附于底物之前一般均似球状体样；当与底物贴附后，细胞将逐渐伸展而形成一定的形态，呈纤维细胞样或上皮细胞样等。其影响因素有①促细胞附着物质：如基膜素、纤维连接蛋白、层粘连蛋白、血清扩展因子②离子作用：如细胞的伸展需要有钙离子的存在，含低浓度钙的培养液不利于细胞的生长③物理以及机械因素：如底物的表面结构、温度、培养液流动过快等④生物因素 （2）运动的接触抑制：正常的细胞存在不停顿的活动和移动，其外周的细胞膜呈现一些特征褶皱样活动。但当俩个细胞移动而相互靠近时，其中之一或俩个将停止移动并向另一个方向离开，这保证了细胞将不会重叠，当一个细胞被其他细胞围绕至无处可去而保持接触时，细胞不再移动，在接触区域的细胞膜褶皱样活动将停止，此即接触抑制 （3）增殖的密度抑制：当细胞增殖、汇合形成单层时。细胞变得拥挤，与培养液接触的表面区域也相应减少，营养成分消耗，细胞分裂终止。 3、细胞系的生长过程 ①原代培养或初代培养期：为新鲜组织自体内取出在体外培养生长至第一次传代的时期，一般为1—4周。通常为异质性，此期中的细胞移动比较活跃，有细胞分裂但并不旺盛。②传代期：原代培养的细胞生长一定时间后，如贴附型细胞将逐渐融合成片而铺满底物的表面，应及时将原代细胞分开接种至2个或更多新的培养皿中，即传代，大约数天至一周左右即可重复一次，持续数月。③衰退期：一般有限细胞系在此期的细胞开始时虽然仍存活，但增殖已很缓慢并逐渐完全停止，并进而发生衰退，死亡。 4、每代细胞的生长过程 ①滞留期：包括悬浮期及潜伏期，此时细胞的胞质回缩，胞体均呈圆球形，悬浮于培养液中，短时间后，那些尚可能存活的细胞即开始附着于底物，并逐渐伸展，恢复其原来形态②对数生长期：此期细胞增殖旺盛，成倍增长，活力最佳，是传代培养的最佳时期，适用于进行实验研究。③平台期：又称生长停止期，此期可供生长的底物面积已被生长的细胞所占满，细胞虽尚有活力但不再分裂增殖。 5、培养细胞生长的条件 （1）细胞的营养需要：①基本营养物质包括氨基酸、维生素、碳水化合物及一些无机离子。 ②促生长因子等物质（2）细胞的生存环境包括温度（35—37℃）、气相（5%CO2，95%空气）、PH（7.2—7.4）和渗透压（260—320mmol∕L）。（3）无污染及无毒。 6.消毒灭菌方法： 总的来说有物理、化学、抗生素抑菌法三类，常见的集中消毒方法如下： （1）干热消毒：一般在烤箱中进行，主要用于消毒玻璃器皿； （2）湿热消毒：一般使用高压蒸汽灭菌器进行消毒，金属器械、玻璃器皿、布类、橡胶用
2019-2020年高中生物 2.2.1动物细胞培养和核移植技术教案 新人教版选修3
2019-2020年高中生物 2.2.1动物细胞培养和核移植技术教案新人教版 选修3 教学建议 有了植物细胞工程的基础,学生对本节内容易于理解。因此,本节教学采用讲授、自学、讨论等相结合的教学方法。 1.关于动物细胞培养的学习,可以先通过问题引导的方法,帮助学生理解接触抑制、贴壁生长这两个特点,再学习动物细胞培养的过程就相对容易接受,因为培养过程的操作目的都是根据细胞接触抑制的特点设计的。学习了动物细胞培养过程,对其概念、结果、原理等问题就迎刃而解。 2.对于动物细胞培养的条件,则要从学生已有的内环境的知识出发,启发学生自己动脑思考这个问题,以加深对培养条件的理解。 3.教学过程最好根据学生已有知识或经验来设计实施,核移植这节课,学生的知识储备是:克隆羊“多利”已经非常熟悉,并且特别感兴趣,因此本节课可以从克隆羊“多利”的诞生入手,即核移植的过程为切入点,从过程中总结出概念、原理、结果。 4.比较记忆学习是形成知识网络的一种重要手段,在学习完核移植技术的应用之后,与植物个体的克隆、动物细胞克隆、DNA的PCR扩增比较学习,教学效果较好。 参考资料 体细胞核移植技术中的受体细胞 细胞核移植技术中作为受体细胞的通常有MⅡ期卵母细胞和受精卵(合子)。早期核移植技术中常用受精卵,后来基本上用MⅡ期卵母细胞取代了受精卵,主要因为两者的细胞质环境不同。有人认为重组需要的因子存在于MⅡ期卵母细胞的细胞质中,而在原核形成时这些因子已被降解或用光,因此,原核扩张后受精卵去核可引起细胞质中重组因子缺乏。成熟促进因子(MPF)是卵母细胞细胞质中重要的胞质影响因子,MPF的活性在卵母细胞减数分裂的MⅠ期和MⅡ期达到最高,受精或激活后,MPF迅速灭活,因此,MⅡ期卵母细胞中MPF活性高,而受精卵中MPF活性低。MPF水平的高低可影响供体核染色质的状态和复制。MⅡ期卵母细胞的细胞核、细胞质已成熟,而MⅠ期卵母细胞的细胞核、细胞质尚未成熟,其细胞质不能支持胚胎的全程发育,因此,尽管MⅠ期卵母细胞中MPF活性也高,但不能作为受体卵母细胞。 也有人认为用去核受精卵作为受体细胞时,可能由于受精卵去核时一些早期发育必需的因子随原核的去除而被去掉了,而使去核受精卵缺乏发育能力。因此,目前广泛采用MⅡ期卵母细胞作为受体细胞。
细胞生物学实验指导
细胞生物学实验技术 实验医学研究中心编订 2013-08
实验一实验准备 【目的】 了解组织培养中实验器材的处理过程。 【概述】 目前多数的实验室还达不到用后即弃的条件，常要反复使用一些器皿，在组织细胞培养中器材的清洗、消毒灭菌仍是重要环节，是一项繁重而艰苦的工作,而且工作量很大, 其主要目的是去除器皿上杂质及其对细胞生长有影响的物质及各种微生物。 【材料】 1.玻璃器皿：培养瓶，血清瓶，试管，吸管 2.塑料器皿：枪头，EP管 【操作步骤】 （一）玻璃器皿的处理 玻璃器皿用于培养细胞、细胞冻存、培养用液的存放等。提供细胞生长的玻璃表面不但要清洁干净，而且要带适当电荷。苛性碱清洗剂会使玻璃表面带的电荷不适于细胞附着，需以HCL或H2SO4中和。清洗玻璃器皿不仅要求干净透明、无油迹，且不能残留任何毒性物质。为了保证清洗的质量，一般玻璃器皿的处理分为六个个步骤。 1.浸泡：新的玻璃器皿首先用自来水初步刷洗，5％稀盐酸溶液中浸泡过夜。使用过的玻璃器皿用1‰ 的新洁尔灭或清水浸泡。泡时应将器皿完全浸入水中，使水进入器皿内而无气泡空隙遗留。 2.刷洗：一般多用毛刷和洗涤剂或洗衣粉进行洗涤，以去除器皿内外表面的杂质。 3.浸酸：酸就是清洁液，由浓硫酸、重铬酸钾及蒸馏水桉一定比例配制而成,具有很强的氧化作用，去 污能力很强，对玻璃器皿无腐蚀作用。经清洁液浸泡后，玻璃器皿残留的未刷洗掉的微量杂质可被 4. 流水灌满、倒掉，须重复十次以上，然后，再用蒸馏水漂洗2～3次，最后用三蒸水漂洗一次。烤箱内烘干备用。 5.包装：包装的目的是防止消毒灭菌后再次受到污染，所以经清洗烤干的器材应严格包装后再进行消 毒灭菌处理。 6.消毒灭菌：包括干热消毒和湿热消毒。干热消毒一般在烤箱中进行，主要用于消毒玻璃器皿，需加 温到160℃，保持90～120min方能杀死芽孢。湿热消毒是一种有效的消毒方法,一般使用高压蒸汽灭菌器进行消毒。因物品不同，其有效灭菌压力和时间不同，一般物品（如布类、金属器械、玻璃器皿等）消毒的要求是101.33kpa（相当于15磅,121℃）20min，某些培养用液、橡胶制品、塑料器皿等要求为67.55kpa (相当于10磅,115℃)10min。 （二）塑料器皿的处理 1.组织培养常用的塑料器皿包括各种培养板、培养皿及培养瓶等。这些产品主要为进口的一次性物品，供应商提供给用户时已消毒灭菌并密封包装，打开包装即可使用。 2.一些不是无菌包装的塑料器皿，只要包装高压灭菌消毒就可以使用了。
高中生物教案分享：动物细胞培养实验中的细胞数量计数方法
高中生物教案分享：动物细胞培养实验中的细胞数量计数方法 为了深入理解动物细胞的结构和功能，许多生物学教师会在其课程中让学生参与动物细胞培养实验。在此过程中，培养物中的细胞通常是需要计数的一个重要参数，以便进行后续的研究。本文旨在分享在动物细胞培养实验中计数细胞数量的几种方法，并讨论这些方法的优缺点以及适用范围。 一、视觉计数法 视觉计数法是最基础的细胞计数方法之一，它通过显微镜直接数出视野中的细胞数量。这个方法简单易懂，不需要任何特殊设备，对于初学者来说是非常有吸引力的。但是，这种方法的缺点也是显而易见的：视觉计数法的准确性非常依赖于实验者的经验和技术水平。因为在视觉计数法中，实验者不仅需要能辨认出真正的细胞，还要能够判断细胞是否已经被计算过，以及必须像数色块一样覆盖所有的视野，这在实践中是非常困难的。视觉计数法适合于初学者或对于数量要求不高的实验。 二、伽玛计数法 伽玛计数器是一种流量细胞计数器，是一种通过流体力学原理统计流体中粒子数量的仪器。在这个方法中，培养物通过一个流通的计数器，在计数器中加入一个丙酮和伽玛线的混合剂，伽玛线能够捕获到细胞中的核物质，通过对不同颗粒刺激伽玛线发射的特殊方式计数细胞。伽玛计数器的优点是速度非常快，准确度非常高，适合于需要准确计数的实验。然而，伽玛计数器也有其缺点：首先是需要耗费较高的成本；对设备的严格要求会对实验产生一定的限制。 三、明胶滤膜计数法 明胶滤膜计数法是一种将培养物滤过一种特殊的纱布或滤膜，将滤膜放在载玻片上，通过染色或直接计数的方法计算细胞数量的方法。这种方法的优点是比视觉计数法更加准确，也比伽玛计数法便宜，因此，很多实验室通常都会采用这种方法。明胶滤膜计数法的缺点也是显而易见的：它需要大量时间和劳动力，而且不适用于所有类型的细胞。由于某些不适合培养的细胞无法在滤膜上形成群集，就无法计算细胞的数量。 四、显微图像分析法 显微图像分析法是最新的一种计数细胞数量的技术。它基于数字图像处理的原理，通过计算机软件将显微镜观察中的图像数字化，并进行图像分析和自动计数。这种方法的优点是准确性和速度都非常高，不需要对实验者的技术要求高，减少了上述各种方法的不足，同时也保证了结果的可靠性。不过该方法成本较高，设备要求较为严格，不适合所有实验室。
高中生物：常见生物体的实验室培养
高中生物：常见生物体的实验室培养 引言 实验室培养是生物学实践中常用的一种方法，它可以帮助我们更好地了解生物体的特征和行为。本文将介绍常见生物体在实验室中的培养方法和注意事项。 常见生物体的实验室培养 以下是几种常见生物体的实验室培养方法： 1. 细菌培养 - 细菌是微生物中最常见的一类，它们可以在实验室中进行培养并观察其生长和繁殖情况。常用的细菌培养基包括琼脂平板和液体培养基。 - 实验室中培养细菌时，应注意消毒操作和无菌技术的使用，以防止细菌污染。 2. 真菌培养
- 真菌是另一类常见的生物体，它们可以培养在琼脂平板或液 体培养基上进行观察。常见的真菌培养基包括马铃薯葡萄糖琼脂平 板和地地蛋白葡萄糖琼脂平板。 - 培养真菌时，应注意控制培养环境的湿度和温度，以促进其 生长和繁殖。 3. 细胞培养 - 细胞培养是研究细胞生长和功能的重要方法。常见的细胞培 养基包括DMEM和RPMI-1640等。 - 在细胞培养过程中，应注意使用无菌技术、控制培养环境的 温度和二氧化碳浓度，并定期更换培养基。 4. 实验动物培养 - 实验动物培养是研究动物生物学行为和生理特征的重要途径。常见的实验动物包括小鼠、果蝇和斑马鱼等。 - 培养实验动物时，应注意提供合适的饲养环境，包括适宜的 温度、湿度和饲料。 注意事项 在实验室中进行生物体的培养时，需要注意以下事项：
- 使用无菌技术，保证培养环境的无菌状态。 - 控制环境因素，如温度、湿度和光照，以促进生物体的生长和繁殖。 - 定期观察和记录生物体的生长情况，并根据需要调整培养条件。 - 注意安全防护，遵守实验室操作规程，以防止生物体对人员和环境的伤害。 结论 实验室培养是了解和研究生物体特征和行为的重要途径。通过掌握常见生物体的培养方法和注意事项，我们可以更好地进行生物学实践，并推动科学研究的发展。 以上就是关于常见生物体的实验室培养的简要介绍。
「高中生物」细胞工程知识点归纳
「高中生物」细胞工程知识点归纳 专题2 细胞工程 2.1植物细胞工程 2.1.1植物细胞工程的基本技术 1.理论基础（原理）：细胞全能性 细胞的全能性：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能，也就是说，每个生物细胞都具有全能性的特点。 全能性表达的难易程度： 受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞 再分化脱分化2.植物组织培养技术 （1）过程：离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽 植物体 植物组织培养：就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整植株的过程。 3..植物体细胞杂交技术 （1）过程： 去壁：利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获取有细胞活性的原
生质体。 细胞的脱分化：就是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成为分化的细胞的过程。 （2）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。 （3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。 2.1.2植物细胞工程的实际应用 用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、作物新品种的培育、细胞产物的工厂化生产。 1.植物繁殖的新途径 （1）微型繁殖：不仅可以保持优良品种的遗传特性，可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。 （2）作物脱毒：采用茎尖组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒极少或没有） （3）人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经人工薄膜包装得到的种子。 优点：完全保持优良品种的遗传特性，不受季节的限制；方便储藏和运输 2.作物新品种培育 （1）单倍体育种： a过程：植株（AaBb）通过减数分裂得到花粉（AB、Ab、aB、ab四种类型）；对花粉进行花药离体培养（技术是植物组织培养）；得到单倍体植株；对其幼苗时期进行秋水仙素处理；得到了正常的纯合二倍体植株（AABB、AAbb、aaBB、aabb四种类型）。 b 优点：明显缩短育种年限 （2）突变体利用： 在组织培养中会出现突变体，通过从有用的突变体中选育出新品种（如筛选抗病、抗盐、含高蛋白的突变体） （3）细胞产物的生产：通过能够产生对人们有利的产物的细胞进行组织培养，从而让它们能够产生大量的细胞产物。
高三生物培养基知识点
高三生物培养基知识点 高三生物学科是高中阶段的最后一门生物学课程，也是很多学 生备考高考的重中之重。其中，生物培养基是生物学中的重要知 识点之一。本文将对高三生物培养基相关的知识点进行探讨和解析。 一、培养基的定义和作用 培养基是指培养和繁殖细胞、组织和微生物的基质，其作用是 为细胞提供必需的养分、气体和理想的环境条件，为细胞的生长、分裂、分化和繁殖提供合适的环境。 二、培养基的种类 1. 基本培养基：基本培养基是指含有维持细胞正常生长必需成 分的培养基，如维生素、氨基酸、能量源等。它提供了细胞所需 的最基本的营养物质。
2. 选择性培养基：选择性培养基是指含有一定物质，可以选择 性地促进某种特定微生物生长，而抑制其他微生物的生长。通常 用于分离和鉴定特定微生物群落。 3. 差异性培养基：差异性培养基是指通过添加不同化合物，使 得不同细菌悬浮液在培养基中呈现出不同的生长特征，从而可以 根据这些差异来判定不同细菌的类型。 三、培养基的组成 一般来说，培养基含有以下几个主要组成部分： 1. 碳源：包括葡萄糖、乳糖等，提供细胞所需的能量。 2. 氮源：包括氨基酸、尿素等，提供细胞合成蛋白质和其他氮 化合物的原料。 3. 磷源：提供细胞合成核酸和三磷酸腺苷等磷化合物所需的磷。 4. 硫源：提供合成胱氨酸、半胱氨酸等硫氨基酸所需的硫。
5. 矿质元素：包括铁、钾、镁等，提供细胞所需的微量元素。 四、培养基的制备方法 1. 固体培养基的制备：首先，将所需的培养基成分按比例配制，然后加入适量的琼脂或明胶，并在加热条件下溶解。然后，将溶 液分装至培养皿中，并加盖。最后，加热高温灭菌，使培养基凝固。 2. 液体培养基的制备：将所需的培养基成分按比例配制，并加 入适量的蒸馏水。然后，将混合溶液分装至试管、培养瓶等容器中。最后，加热高温灭菌，以杀灭其中的微生物。 五、常见的培养基 1. 营养琼脂培养基：适用于常见的细菌培养和鉴定，如营养琼 脂平皿培养基、营养琼脂管培养基等。
高中生物第章细胞工程.1动物细胞培养学案选择性3
动物细胞培养 必备知识·素养奠基 一、动物细胞培养概念 从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 二、动物细胞培养的条件 1。营养条件: (1)合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成。 （2)天然成分：血清等. （3）一般使用液体培养基,即培养液。 2。无菌、无毒的环境： (1）培养液和培养用具灭菌处理。 (2）无菌环境下操作. （3）培养液定期更换的目的：清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 3。温度、pH和渗透压: (1)适宜的温度：哺乳动物多以36。5±0。5℃为宜。 (2）适宜的pH:多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
(3)适宜的渗透压。 动物细胞培养能否体现动物体细胞的全能性？说明你的理由。提示:不能。动物细胞培养只是细胞的增殖，没有体现细胞的全能性。 4.气体环境：95％空气和5%CO2。 （1)O2作用：细胞代谢所必需的。 (2）CO2的主要作用：维持培养液的pH。 三、动物细胞培养的过程 填一填：基于动物细胞培养的过程，完成下面的问题: （1)过程①处理方法有:机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法. (2）过程②为原代培养,培养的动物细胞有两类: ①悬浮在培养液中生长增殖; ②贴附于某些基质表面生长增殖。
(3）进行过程③时,悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴壁细胞需要使用胰蛋白酶等处理，然后用离心法收集. （4)过程③为传代培养，进行过程③的原因主要有:细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏和接触抑制等。 四、干细胞培养及其应用 1。干细胞分布：早期胚胎、骨髓和脐带等。 2.种类：胚胎干细胞和成体干细胞。 3.判一判：基于干细胞的类型和应用,判断下列说法的正误。(1)胚胎干细胞和成体干细胞都具有形成机体的所有组织和器官,甚至个体的潜能. (×) 提示:成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。 （2)造血干细胞是发现最早、研究最多、应用最为成熟的一种成体干细胞. (√） （3）iPS细胞称为诱导多能干细胞，与胚胎干细胞类似,也需从胚胎中获取。（×） 提示：iPS细胞来源于自身的体细胞诱导,无须从胚胎中获取。 (4)不同类型的干细胞分化能力不同,胚胎干细胞的分化能力最强. (√) (5)干细胞将在再生医学、药物安全性、有效性检测、疾病治疗等领域发挥重要作用. (√） 关键能力·素养形成 知识点动物细胞培养过程
细胞培养操作流程
【实验原理】 细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作，避免微生物及其他有害因素的影响。一般标准的细胞培养室应包括配液室、准备室和培养室。三室既相互连接又相对独立，各自完成培养过程中的不同操作。 【实验目的】 ①了解培养室的设置和设备。 ②学习无菌概念和无菌操作要领。 【操作步骤】 1．实验室设置 （1）配液室 （2）准备室 （3）培养室 培养室内要完全密闭，保持恒定的温度，在设计上要注意以下几点： ①培养室的位置最好设在阴面，阳光不能直接照射的地方，防止室内温度增高。 ②天花板的高度不要超过2米，以保证紫外灯的有效杀菌效应， ③门一般用拉门，以防止空气流动。 ④天花板、地板和四周墙壁要光滑无死角，要镶瓷砖或涂油漆，这样设计，一是便于清洗和消毒，另外也不易在墙角堆积灰尘。 2．实验室常用设备
（1）准备室的设备 ①双蒸馏水蒸馏器：制备双蒸水。 ②酸缸：盛洗液，浸泡玻璃器具。 ③烤箱：洗涤完的玻璃器皿用烤箱烘干。 ④高压锅：玻璃器皿、解剖用具、部分液体、塑料器具等灭菌。不同物品其有效灭菌压力和时间不同。 ⑤储品柜1：放置未消毒物品。 ⑥储品柜2：放置已消毒物品。 ⑦包装台：灭菌前的包装用。 准备室注意事项： ①预防蒸馏器被烤干。 ②放置水池中的水渗出。 ③勿将酸液溅到衣物或地面。 ④勿将高压锅排气阀和安全阀堵塞。 ⑤已消毒物品应与未消毒物品分柜存放。 （2）配液室的设备 ①天平（扭力天平和电子天平）：称量用 ②pH计： ③磁力搅拌器： （3）细胞培养室的设备 ①超净工作台： 超净工作台的种类很多，有单面单人、单面双人、双面双人或双面四人等，其工作原理是利用鼓风机，使通过高效滤气的空气，徐徐通过台面，这样使工作环境中具无菌而均匀的空气。根据层流方式的不同，超净工作台主要分为水平层流式和垂直层流式两种，基本原理大致相同，都是将室内空气经粗过滤器初滤，由离心风机压入静压箱，再经高效空气过滤器，由此送
高中生物 新人教版 选择性必修3 动物细胞培养 教案
第1课时动物细胞培养 新课标核心素养 1.概述动物细胞培养需要的基本条件。 2.简述动物细胞培养的基本操作过程。 3.说出干细胞的分类及作用。1.生命观念：构建动物细胞培养的流程图，认同动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2.社会责任：理性客观地分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险。 知识点(一)动物细胞培养的条件 1．概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 2．条件 (1)营养条件 ①常用培养基的类型：液体培养基。 ②成分：糖类、氨基酸、无机盐、维生素、血清等。 (2)无菌无毒的环境 ①需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。 ②培养液还需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 (3)温度、pH和渗透压 ①哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5_℃为宜。 ②多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。 ③渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数。 (4)气体环境：动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2 ①O2是细胞代谢所必需的。 ②CO2的主要作用是维持培养液的pH。 (1)动物细胞培养是一个在适宜的条件下，细胞增殖和分化的过程(×) (2)将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基(√) (3)在进行细胞培养时，通常采用培养皿或打开培养瓶盖的方式以获取新陈代谢所必需的O2(×) (4)将动物细胞置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养(×)
1．(生命观念)为什么探究动物细胞培养时，要在培养基中加入血清、血浆等天然成分？ 提示：血清和血浆中含有多种维持细胞正常代谢和生长的物质，如蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等，人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚。 2．(科学思维)动物细胞培养需要控制什么样的气体环境？各自起什么作用？ 提示：95%空气加5%CO2。空气中的O2维持细胞代谢，CO2维持培养液的pH。 3．(生命观念)动物细胞培养液的主要成分与植物组织培养基相比有何独特之处？ 提示：独特之处有：(1)液体培养基；(2)成分中有动物血清等。 1．一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件() ①无毒的环境 ②无菌的环境 ③使用合成培养基，但通常需加入血浆、血清等天然成分 ④温度与动物的体温相近 ⑤因在二氧化碳培养箱中培养，故不需要O2 ⑥适宜的pH A．①②③④⑤⑥B．①②③④ C．①②④⑤⑥D．①②③④⑥ 解析：选D动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，①②正确；用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，③正确；动物细胞培养需要适宜的温度和pH，其中温度要与动物体温相近，④⑥正确；动物细胞培养需要一定的气体环境，为95%空气和5%的CO2，⑤错误。故选D。 2．用动、植物体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是() A．都需用CO2培养箱 B．都需用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行 D．都可体现细胞的全能性 解析：选C动、植物体的体细胞进行离体培养都要在无菌条件下进行；动物体的体细胞离体培养用液体培养基，需要使用CO2培养箱，不能体现细胞的全能性；植物体的体细
人教版(新教材)高中生物选择性必修3精品学案：1 2 1 微生物的基本培养技术(1)
第2节 微生物的培养技术及应用 第1课时 微生物的基本培养技术 〖学习目标〗 1.概述培养基的成分和配制方法。2.区分消毒和灭菌，掌握不同物品的灭菌方法。3.概述微生物纯培养的基本操作要求。 一、培养基的配制 1．培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2．作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 3．培养基种类⎩⎪⎨⎪ ⎧ 液体培养基 ↓加入凝固剂(如琼脂)固体培养基 特别提醒 (1)固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物生长提供能量和碳源。 (2)病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前不能利用人工培养基来培养。 4．培养基的营养构成 (1)主要营养物质：水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。 (2)某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 组分 含量 提供的主要营养 牛肉膏 5 g 碳源、磷酸盐和维生素等 蛋白胨 10 g 氮源和维生素等 NaCl 5 g 无机盐 H 2O 定容至1 000 mL 水 (3)还需满足微生物对pH 、特殊营养物质以及O 2的需求。例如：在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。 判断正误 (1)用于发酵的微生物主要指细菌和真菌( ) (2)培养基中加入琼脂的目的是提供碳源( ) (3)所有微生物在培养时，培养基中都需加入氮源( )
(4)培养不同微生物的培养基成分完全一样() 〖答案〗(1)√(2)×(3)×(4)× 探讨点概述培养基的种类和营养构成 资料一：配制培养酵母菌的培养基： 称取去皮的马铃薯200 g，切成小块，加水1 000 mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15～20 g琼脂，用蒸馏水定容至1 000 mL。 资料二：100 g马铃薯中含有80 g水、2 g蛋白质、16 g碳水化合物，还有维生素、无机盐等。结合提供的资料和教材中的“表1－1 1 000 mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成”，分析并回答下列问题： 1．按物理性质划分上述两种培养微生物的培养基的种类。 〖提示〗由于琼脂是凝固剂，所以培养酵母菌的培养基是固体培养基，而牛肉膏蛋白胨培养基未加凝固剂，是液体培养基。 2．分析上述两种培养微生物的培养基的营养构成。 〖提示〗都含有水、碳源、氮源、无机盐和维生素等，其中培养酵母菌的培养基中主要由糖类提供碳源，蛋白质提供氮源，牛肉膏蛋白胨培养基中主要由牛肉膏提供碳源，主要由蛋白胨提供氮源。 3．为什么培养基需要氮源？ 〖提示〗培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。 4．下表是某微生物培养基的成分，请分析该培养基可用来培养哪种微生物？若除去①，此培养基可用来培养圆褐固氮菌吗？ 编号①②③④⑤ 成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O 含量/g 0.4 4.0 0.5 0.5 100 mL 〖提示〗此培养基可用来培养自养型微生物。圆褐固氮菌虽可以固氮，但其同化作用类型为异养型，培养基中必须提供含碳有机物，所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌。 核心归纳 1．培养基的成分及功能 营养要素来源功能 碳源无机 碳源 CO2、CO2－3、HCO－3等含碳无 机物 ①构成细胞物质和一些代谢 产物；