双相酸水解法提取薯蓣皂苷元的研究
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收稿日期:2003205223
双相酸水解法提取薯蓣皂苷元的研究
杨欢,杨克迪,陈钧(江苏大学生物与环境工程学院,江苏镇江212013)
摘要:目的 建立双相酸水解法提取薯蓣皂苷元的最佳条件。方法 以薯蓣皂苷元得率为指标,采用单因素法建立双相酸水解法从穿山龙中提取薯蓣皂苷元的最佳条件。结果 按照穿山龙样品∶浓盐酸∶甲醇∶水∶石油醚(10∶21∶60∶19∶100)的比例加入反应体系,在沸水浴中加热回流提取6h,获得比传统方法更高的得率。结论 双相酸水解法提取薯蓣皂苷元简便易行,周期短,提取率高。
关键词:薯蓣皂苷元;穿山龙;双相酸水解法
中图分类号:T Q467;R977.1 文献标识码:A 文章编号:100727693(2005)0420270203
The research on two2pha se ac i d hydrolysis of extracti n g d i osgen i n
Y ANG Huan,Y ANG Ke2di,CHEN Jun(School of B iological and Environm ental Engineering,J iangsu U niversity,Zhenjiang 212013,China)
ABSTRACT:O BJECT I VE T o establish the op ti m u m conditi ons of t w o2phase acid hydr olysis t o extract di osgenin.M ETHOD U sing single2fact or method,with the yield of di osgenin as the index,we established the op ti m u m conditi ons.RESUL TS Rhizoma D i2 oscoreae ni pponicae extracted with t w o2phase system(sa mp le∶HCl∶Me OH∶H2O∶petr oleu m ether=10∶21∶60∶19∶100)under the boil2 ing water bath for6h could get higher recovery of di osgenin than that of traditi onal methods.CO NCL US I O N This method is conven2 ient,ti m e saving and higher.
KE Y WO R D:di osgenin;Rhizoma D i oscoreae ni pponicae;t w o2phase acid hydr olysis
薯蓣皂苷元(di osgenin)是合成甾体激素的主要中间体原料,传统提取方法分为两种,一种是先提取出薯蓣皂苷,再用酸水解皂苷,最后萃取出苷元[1～3]。另一种是将植物置于酸液中反应,再提取干燥后的滤渣[4～5]。这两种方法操作复杂,周期长,提取率低。
Rozanski[6]用盐酸与二甲苯的混合体系对薯蓣皂苷元提取工艺进行简化,利用皂苷极性大,易溶于极性溶剂,而苷元易溶于非极性溶剂的性质,使水解获得的薯蓣皂苷元快速地由水相转移至二甲苯相,减少了不良反应的发生,此后, W eissenberg[7]将该法用于提取甾体生物碱。笔者以穿山龙为原料,对反应温度、酸和甲醇的浓度、反应时间等因素进行了考察,并与传统方法相比较。
1 仪器与材料
Büchi Rotavapor R2200型旋转蒸发器(瑞士Büchi公
?
7
2
?Chin J MAP,2005August,Vol.22No.4 中国现代应用药学杂志2005年8月第22卷第4期
司),UV22102PCS型紫外可见分光光度计(UN I C O公司)。薯蓣皂苷元标准品(美国Sig ma公司)。浓盐酸、无水甲醇、无水乙醇、石油醚(90～120℃)、醋酸乙酯、高氯酸,均为分析纯;双蒸水,试验室自制。
穿山龙,当年生,采于吉林省,经欧阳臻高级工程师鉴定为D ioscorea nipponica Makino的根茎,烘干后粉碎过36目筛,备用。
2 实验方法
2.1 双相酸水解法
准确称取10.00g样品置于圆底烧瓶中,加入100mL含一定浓度盐酸的甲醇水溶液和100mL石油醚,沸水浴中加热回流提取一定时间。反应完毕后,过滤反应物,滤液收集于分液漏斗中,静置分层,收集上层液,下层再用石油醚萃取,至萃取液用T LC检测,无薯蓣皂苷元特征点。合并石油醚液,回收至干,无水乙醇定容后测定薯蓣皂苷元得率。
2.2 传统1法[1～3]
准确称取样品10.00g,置索氏提取器中,用无水甲醇提取8h,回收甲醇至干,加入2.0mol/L的硫酸溶液100mL,沸水浴中加热回流水解4h,倾出,冷却后用石油醚萃取多次,至萃取液用T LC检测,无薯蓣皂苷元特征点。合并萃取液,回收至干,无水乙醇定容,待测。
2.3 传统2法[4,5]
准确称取样品10.00g,置圆底烧瓶中,加入2.0mol/L 的硫酸溶液80mL,沸水浴中加热回流水解4h,倾出,用饱和石灰水中和,真空抽滤,蒸馏水洗涤滤渣三次,80℃干燥后,用滤纸包裹滤渣,置索氏提取器中,在提取器底部烧瓶中加入200mL石油醚,水浴90℃加热回流8h,回收石油醚至干,无水乙醇定容,待测。
3 实验结果
3.1 标准曲线的绘制
准确称取薯蓣皂苷元标准品4.20mg,无水乙醇定容至25mL,作为0.168mg/mL标准品溶液。准确吸取0.1,0.2, 0.3,0.4,0.5,0.6,0.7mL溶液,挥干溶剂,加入5mL高氯酸,置25℃水浴保温25m in,以高氯酸为空白,在410n m处测定吸光度,得回归方程A=9.7662X+0.0029,r= 0.9994,薯蓣皂苷元含量在3.36～23.52μg/mL内,与吸光度呈良好线性关系[8]。
3.2 最佳提取条件的确定
3.2.1 酸的选择 一般来说,无氧化性酸的催化水解效果好于氧化性酸(如磷酸、硝酸)[9],国内外文献报道常采用盐酸或硫酸,本实验采用盐酸作为催化剂。
3.2.2 有机溶剂的选择 双相酸水解法提取薯蓣皂苷元必须选择合适的轻相和重相溶剂,它要求重相溶剂可以最大程度地从药材中提取薯蓣皂苷类化合物,并使得反应达到一定的温度,以实现薯蓣皂苷的提取和水解完全;同时,对于薯蓣皂苷元,轻相溶剂与重相溶剂应有较大的分配系数,保证其转移完全。薯蓣皂苷类化合物易溶于含水的甲醇溶液,工业上常用石油醚、氯仿萃取薯蓣皂苷元[10]。预实验中发现,使用石油醚(60～90℃)作为萃取相,则水浴温度较高时,反应过程中产生的泡沫时常冲出冷凝管,导致反应中断,且反应体系温度不易提高,不利于薯蓣皂苷元的提取。换用石油醚(90～120℃)后,没有出现上述现象。因此,本实验采用了含水甲醇和石油醚(90～120℃)混合体系提取薯蓣皂苷元。3.2.3 酸的浓度 作为催化剂,盐酸浓度对于水解效果影响很大。本实验比较了含约1,2,2.5,3,4,5,6mol/L等不同盐酸浓度的60%甲醇水溶液在沸水浴下反应5h的水解效果。1～2.5mol/L时薯蓣皂苷元得率变化明显,2.5mol/L 时效果最佳,5～6mol/L时,药材已炭化。故盐酸浓度控制在约2.5mol/L。见图
1。
图1 盐酸的浓度对薯蓣皂苷元收率的影响
F i g1 I nfluence of hydr ochl oric acid concentrati on
3.2.4 甲醇浓度 甲醇浓度与薯蓣皂苷的提取效果及皂苷的水解完全性密切相关,合适的浓度可以最大程度地提取和水解薯蓣皂苷并使皂苷元转移完全。实验比较了含75%, 70%,60%,50%,40%,30%,20%甲醇的2.5mol/L盐酸溶液在沸水浴下反应5h的提取效果,结果发现,甲醇浓度为60%时,
得率最高。见图2。
图2 甲醇浓度对薯蓣皂苷元收率的影响
F i g2 I nfluence of methanol concentrati on
3.2.5 反应温度 根据文献报道,温度越高越有利于薯蓣皂苷元的提取。本实验以反应体系浸入的水浴温度表示反应条件,以含约2.5mol/L盐酸的60%甲醇水溶液和石油醚为反应体系,在不同温度下反应5h,结果表明沸水浴时效果
最佳。见图3。
图3 反应温度对薯蓣皂苷元收率的影响
F i g3 I nfluence of reacti on te mperature
?
1
7
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中国现代应用药学杂志2005年8月第22卷第4期 Chin J MAP,2005August,Vol.22No.4
3.2.6 反应时间 实验中准确称取10.00g 样品,分别加入含2.5mol/L 的60%甲醇水溶液和石油醚各100mL,考察了沸水浴下,反应2～10h 薯蓣皂苷元的提取效果。结果表明,提取6h 最佳。见图4
。
图4 反应时间对薯蓣皂苷元收率的影响
F i g 4 I nfluence of reacti on ti m e
确定最佳提取工艺为:将10g 穿山龙置于浓盐酸∶甲醇∶水∶石油醚(21∶60∶19∶100,体积比)混合体系,在沸水浴中加热回流提取6h,过滤,重相采用石油醚进行多次液2液萃取,直至萃取完全。薯蓣皂苷元得率可达1.629%。
3.3 精密度
按最佳提取工艺条件,对样品进行5次测定,薯蓣皂苷元提取率(%)分别为1.613,1.648,1.609,1.620,1.654,平均提取率为1.629%,RS D 为1.274%。
3.4 双相酸水解法与传统工艺的比较
用双相酸水解法的最佳提取工艺和传统提取方法进行比较,结果显示比传统方法有更高的得率,精密度高,重现性好。
表1 传统方法提取穿山龙中薯蓣皂苷元的分析结果
Tab 1 Traditi onal methods for di osgenin extracti on 传统方法薯蓣皂苷元提取率/%RS D /%
双相酸水解增收率/%
1 1.351 1.17820.582
1.324
1.663
23.04
4 讨论
双相酸水解法的提取条件温和,工艺简单易行,无需高
温高压设备,生产周期大大缩短,薯蓣皂苷元提取率较高。为解决目前我国薯蓣皂苷元生产工艺所带来的能耗高、周期长、维护高温高压设备投资大等一系列问题找到了一个新的思路,对可行性及工艺参数作了初步研究,有待开展更为细致的研究,其大规模的工业化应用也是今后值得研究和探索的问题。参考文献
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收稿日期:2003205223
中毒剂量与治疗剂量克仑特罗在兔体内的药动学研究
陈一农,张吟,郑兴中,颜文祝(福建医科大学附属第二医院,福建 泉州
362000)
摘要:目的 研究克仑特罗在引起不良反应的大剂量下兔体内的药动学,探讨中毒剂量与治疗剂量的药动学参数存在的差异。方法 新西兰兔单剂量灌胃(ig )中毒剂量(150μg ?kg -1)与治疗剂量(5μg ?kg -1)的盐酸克仑特罗溶液,采用酶标免疫分析(E L I S A )测定不同时间的血浆药物浓度。两组试验数据采用3P97程序拟合处理,求得不同剂量的药动学参数。结果
两组剂量的浓度2时间曲线均符合一室开放模型。中毒剂量与治疗剂量的Ke 分别为(0.39±0.08)h -1和(0.18±0.07)h -1;
t 1/2(ke )分别为(1.82±0.34)h 和(4.30±1.61)h;t 1/2(ka )分别为(0.67±0.28)h 和(1.05±0.28)h;t (max )分别为(1.48±0.39)h
和(2.70±0.22)h;C max 分别为(71.37±37.76)ng ?mL -1和(1.56±0.98)ng ?mL -1;AUC 分别为(310.28±115.00)ng ?h ?mL -1和(14.28±7.22)ng ?h ?mL -1;MRT 分别为(3.74±0.51)h 和(8.82±2.78)h 。结论 两组剂量在Ke (P <0.01),
t 1/2(ka )(P <0.05),t 1/2(ke )(P <0.05)、t max (P <0.01),MRT (P <0.01)等存在显著差异;C max ,AUC 随剂量增加而增加,C max /D 0、?
272?Chin J MAP,2005August,Vol .22No .4 中国现代应用药学杂志2005年8月第22卷第4期
脂类酸水解法
酸水解法 适用于各类食品中总脂肪含量的测定，但对含磷脂较多的一类食品，如鱼类、蛋类及其制品，在盐酸溶液中加热时，磷脂几乎完全分解为脂肪酸和碱，使测定结果偏低，多糖类遇强酸易炭化，影响测定结果。测定时间短，在一定程度上可防止之类物质的氧化。 一、实验原理 将试样与盐酸溶液一起加热进行水解，使结合或包埋在组织内的脂肪游离出来，再用有机溶剂提取脂肪，回收溶剂，干燥后称量，提取物的质量即为样品中脂类的含量。 二、仪器和试剂 100ml具塞刻度量筒、95%乙醇、乙醚、石油醚、盐酸。 三、操作步骤 1、样品处理。 固体样品，称取2g样品于50ml大试管中，加8ml水，混匀后加10ml盐酸。 液体样品，称取10g样品于50ml大试管中，加入10ml盐酸。 2、水解。将试管放入70~80℃水浴中，至脂肪游离完全为止，需40~50min。 3、提取。取出试管，加入10ml乙醇，混合，冷却后将混合物移入100ml具塞量筒中，用25ml乙醚分两次洗涤试管，一并倒入具塞量筒中，加塞振摇1min，静置15min，用乙醚-石油醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪，静置10~20min，吸出上清液于已恒重的锥形瓶内，再加5ml乙醚于具塞量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放入锥形瓶内。 4、回收溶剂、烘干、称重。将锥形瓶水浴蒸干，于100~105℃烘箱中干燥2h，取出放入干燥器内冷却后称量，反复以上操作至恒重。 5、计算结果 W湿基=(m2-m1)/m*100% W干基=[(m2-m1)/m(100%-M)]*100% W为脂类质量分数，m1为空锥形瓶的质量，m2锥形瓶和脂肪的质量，m为样品的质量，M为试样水分含量。 四、注意事项
火腿肠(高温蒸煮肠)中淀粉含量的测定酸水解法
实验七火腿肠（高温蒸煮肠）中淀粉含量的测定—酸水解法基本知识点 1、掌握酸水解法测定淀粉的原理、基本过程和操作关键。 2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。 3、淀粉水解、可溶性糖去除的方法和关键环节。 重点： 1、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术 2、酸水解法测定淀粉的原理及注意事项。 难点： 酸水解法测定淀粉的原理和控制要点 复习与提问： 1、检查实验准备情况， （1）实验内容； （2）实验仪器与试剂有哪些？ （3）酸水解法测定淀粉的程序。 2、酸水解法测定淀粉的原理和控制要点 【引入新课】 淀粉在食品工业中用途广泛常用于食品原料或辅料。淀粉是以葡萄糖为基本单位通过糖苷键而构成的多糖类化合物。淀粉是白色、无气味、无味道的粉末状物质，在热水里淀粉颗粒会膨胀破裂，有一部分淀粉溶解在水里，另一部分悬浮在水里，形成胶状淀粉糊，这一过程称为糊化作用。糊化是淀粉食品加热烹制时的基本变化，也就是常说的食物由生变熟。 淀粉不溶于冷水，也不溶于乙醇、乙醚或石油醚等有机溶剂，故可用这些溶剂淋洗、浸泡除去淀粉的水溶性糖或脂肪等杂质。 淀粉不显还原性，但它在酶（或酸）存在和加热条件下可以逐步水解，生成一系列比淀粉分子小的化合物，最后生成还原性单糖——葡萄糖。 淀粉酶的专一性高，但只能将淀粉逐步水解至麦芽糖阶段； 盐酸溶液对淀粉的专一性较差，但它能将淀粉水解至最终产物葡萄糖。故在测定淀粉时，使酶——稀盐酸分解法。 GB 20712-2006《火腿肠（Ham sausage）》规定： 火腿肠（高温蒸煮肠）Ham sausage(Autoclaved ham sauasge)以鲜或冻畜、禽、鱼肉为主要原料，经腌制、搅拌、斩拌（或乳化）、罐入塑料肠衣，经高温杀菌，制成的肉类灌肠制品。 感官要求应符合表1的规定。 表1.感官要求 项目指标 外观肠衣均匀饱满，无损伤，表面干净，良好，扎结牢固，肠衣的扎结部位无内容物渗出。 色泽具有产品固有的色泽。 质地组织紧密，有弹性，切片良好，无软骨及其它杂物，无气孔。 风味咸淡适中，鲜香可口，具固有风味，无异味。 理化要求应符合表2的规定。 表2.火腿肠理化要求 项目 指标 特级优级普通级无淀粉产品
脂肪的测定
脂肪的测定概述 脂类主要包括脂肪（甘油三酸脂）和类脂化合物（脂肪酸、糖脂、甾醇）。脂肪是食物中具有最高能量的营养素，也是中三大营养素之一，食品中脂肪含量是衡量食品营养价值高低的指标之一。在食品加工生产过程中，原料、半成品、成品的脂类含量对产品的风味、组织结构、品质、外观、口感等都有直接的影响，故食品中脂类含量是食品质量管理中的一向重要指标。 一、脂类的分类、组成、性质 1、分类（classification） 包括简单脂类（有两种组分组成的如脂肪酸和醇生成脂）、复合脂类（除以上两种组分外还含有其他组分的成分）、衍生脂（只含单一组分，由其他脂类水解得到，如脂肪酸（饱和的、不饱和的）、醇（丙三醇、长链醇、甾醇）、脂溶性物料（包括脂溶性维生素A、D、E和K）） 2、组成（composition） 脂肪是由一分子甘油和三分子高级脂肪酸脱水生成的。 甘油+脂肪酸脂肪+水
油脂的结构与类型取决于脂肪酸，如果三个脂肪酸的R烃基相同，就称简单脂，即醇与脂肪酸组成。如果脂肪酸的R烃基不同，则为复合脂。 3、性质（proporty） （1）物理性质（physical property） 脂类一般为无色，无臭、无味，呈中性，比重小于1，固体脂类比重约为0.8，液体脂类比重为0.915-0.940，脂肪不溶于水，而溶于有机溶剂，根据这点我们一般采用低沸点的有机溶剂萃取脂类。 （2）化学性质（chemical property） a) 水解与皂化（一切脂肪都能在酸、碱或酶的作用下水解为脂肪酸及甘油） b) 氢化与卤化（利用氢化将液体油氢化成半固体脂肪，人造猪油）。 c) 氧化与酸败 天然油脂暴露在空气中与氧会自发进行氧化作用，产生酸味，也就是我们所说的酸败统称哈败。例如油炸方便面，在夏季容易发哈。还有一些富含油的食品，长时间都容易发哈，哈败是由于脂肪中不饱和链被空气中的氧所氧化，生成过氧化物，过氧化物继续水解，产生低级的醛和羧酸，这些物质使脂肪产生不愉快的嗅感和味感。油脂酸败的另一个原因是微生物的作用下，脂肪分解成醇和脂肪酸，脂肪酸经过氧化后生
各种氨基酸的生产工艺
各种氨基酸的生产工艺 1、谷氨酸 (1)等电离交工艺方法——从发酵液中提取谷氨酸，即将谷氨酸发酵液降温并用硫酸调PH值至谷氨酸等电点(pH3.0- 3.2)，温度降到10 以下沉淀，离心分离谷氨酸，再将上清液用硫酸调pH至1.5上732强酸性阳离子交换树脂，用氨水调上清液pH10进行洗脱，洗脱下来的高流分再用硫酸调pH1.0返回等电车间加入发酵液进行等电提取，离交车间的上柱后的上清液及洗柱水送去环保车间进行废水处理。 该工艺方法的缺点是：废水量大，治理成本高，酸碱用量大。 (2)连续等电工艺——将谷氨酸发酵液适当浓缩后控制40℃左右，连续加入有晶种的等电罐中，同时加入硫酸，控制等电罐中PH值维持在3.2左右，温度40℃进行结晶。 该工艺方法废的优点是：水量相对较少；缺点是：氨酸提取率及产品质量较差。 (3)发酵法生产谷氨酸的谷氨酸提取工艺——谷氨酸发酵液经灭菌后进入超滤膜进行超滤，澄清的谷氨酸发酵液在第一调酸罐中被调整pH值为3.20～3.25，然后进入常温的等电点连续蒸发降温结晶装置进行结晶，分离、洗涤，得到谷氨酸晶体和母液，将一部分母液进入脱盐装置，脱盐后的谷氨酸母液一部分与超滤后澄清的谷氨酸发酵液合并；另一部分在第二调酸罐中被调整pH值至4.5～7，蒸发、浓缩、再在第三调酸罐中调pH值至3.20～3.25后，进入低温的等电点连续蒸发降温结晶装置，使母液中的谷氨酸充分结晶出来，低温的等电点连续蒸发降温结晶装置排出的晶浆被分离、洗涤，得到谷氨酸晶体和二次母液。(4)水解等电点法 发酵液-----浓缩（78.9kPa，0.15MPa蒸汽）----盐酸水解（130 ℃，4h ）----过滤-----滤液脱色-----浓缩-----中和，调pH至3.0-3.2（NaOH或发酵液） -----低温放置，析晶-------谷氨酸晶体 此工艺的优点：设备简单、废水量减少、生产成本低、酸碱用量省 (5)低温等电点法 发酵液-----边冷却边加硫酸调节pH4.0-4.5-----加晶种，育晶2h-----边冷却边加硫酸调至pH3.0-3.2------冷却降温------搅拌16h------4 ℃静置4h------离心分离 --------谷氨酸晶体 此工艺的优点：设备简单、废水量减少、生产成本低、酸碱用量省 (6)直接常温等电点法 发酵液-----加硫酸调节pH4.0-4.5-----育晶2-4h-----加硫酸调至pH3.5-3.8------育晶2h------加硫酸调至pH3.0-3.2------育晶2h------冷却降温------搅拌16-20h------沉淀2-4h-------谷氨酸晶体 此工艺的优点：设备简单、操作容易、生产周期短、酸碱用量省。 2、L-亮氨酸 （1）浓缩段 原料：蒸汽 将一次母液通入浓缩罐内，通入蒸汽，温度120度，气压-0.09Mpa，浓缩时间6h，结晶。终点产物：结晶液（去一次中和段） （2）一次中和段 辅料：硫酸，纯水 结晶液进入一次中和罐，通入硫酸，纯水，温度80，中和时间4h，过滤 终点产物：1，滤液（回收利用）2，滤渣（去氨解段）
食品中脂肪的测定
食品中脂肪的测定 【实验目的】： 1.掌握食品中脂肪存在状态的相关概念和知识； 2.熟练地掌握乙醚、石油醚、乙醇等有机溶剂的安全使用方法，有机溶剂提取、萃取、回流、回收及分离技术。 3.了解各类食品中的脂肪测定方法，掌握索氏提取法的检测技能。 食品中脂肪是重要的营养成分之一，脂肪是人体组织细胞的一个重要成分，量种富含热能的营养素，也是脂肪溶性维生素的良好溶剂，有助于脂溶性维生素的吸收。脂肪与蛋白质结合生成的脂蛋白，在调节人本生理机能、完全生化反应方面具有重要的作用。因此，各种食品中脂肪的含量是重要的质量指标之一。食品中的脂肪有两种存在形式，即游离脂肪和结合脂肪。测定食品中脂肪含量的方法有索氏提取法、酸水解法、碱水解法、皂化法等。 一、标准方法（GB 5009.6-85） （一）索氏抽提法（第一法） 1.原理 样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后，蒸去溶剂所得的物质，在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外，还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。 2.试剂 （1）无水乙醚或石油醚； （2）海沙；同GB5009.3食品水分的测定方法。 3.仪器 索氏脂肪抽提器。 4.操作方法 （1）样品处理 ①固体样品。精密称取2 -5g （可取测定水分后的样品），必要时拌以海沙，全部移入滤纸筒内。（干样粉碎后过40目筛，肉绞两次，一般样品用组织捣碎机。） ②液体或半固体样品：称取5.0-10.0g ，置于蒸发皿中，加入海沙约20g 于沸水浴上蒸干后，再于95---105℃干燥，研细，全部移入滤纸筒内。蒸发皿及附有样品的玻棒，均用沾有乙醚的脱脂棉擦净，并将棉花放入滤纸筒内。 （2）抽提 将滤纸筒放入抽提管内，连接已干燥至恒量的接受瓶，由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处，于水浴上加热，使乙醚或石油醚不断回流抽提，一般抽提6-12h 。 （3）称量 取下接受瓶，回收乙醚或石油醚，待接受瓶内乙醚剩1-2mL 时在水浴上蒸干，再于95--105℃干燥2h ，放干燥器内冷却0.5h ，称量。 5.计算10020 1?-=m m m X …………………………（3-11） 式中：X---样品中脂肪的含量， % m 1---接受瓶和脂肪的质量，g; m 0---接受瓶的质量，g; m 2---样品的质量（如是测定水分后的样品中，按测定水分前的质量计），g 。 6.说明 （1）本法为索氏（SoxhLet ）提取法，为经典方法，测定准确，但费时、费试剂。 （2）本法要求必须干燥无水，水分有碍有机溶剂对样品的浸润。 （3）本法测得的脂肪中，还含有少量的可溶于脂肪的有机酸、色素、香精、醛、酮等，故只可称为粗脂肪。 （4）索氏提取器如图3-7所示。有机溶剂在接受瓶中受热蒸发至冷凝管中，冷凝后于盛装
酸水解法测定脂肪
酸水解法测定脂肪 内容摘要：酸水解法适用于各类食品中脂肪的测定，对固体、半固体、黏稠液体或液体食品，特别是加工后的混合食品，容易吸湿、结块，不易烘干的食品，不能采用索氏提取法时，用此法效果较好。 1．酸水解法原理 强酸与样品一同加热进行水解，结合或包藏在组织里的脂肪可游离出来，然后用乙醚和石油醚提取脂肪，回收溶剂，除去溶剂后即为脂肪含量。 2．仪器 ①100 mL具塞刻度量筒。 ②烘箱。 3．试剂 ①95％乙醇。 ②乙醚(不含过氧化物)。 ③石油醚(30~60℃沸程)。 ④浓盐酸。 4．测定步骤 ①样品处理 a．固体样品：准确称取约2．0 g，置于50 mL试管中，加8 mL水，混匀后再加10 mL浓盐酸。 b．液体样品：准确称取10.0 g置于50mL试管中，加10 mL，浓盐酸。 ②水解：将试管放入70~80℃水浴中，每隔5～10 min用玻璃棒搅拌一次，至样品脂肪游离消化完全为止，时间约需40~50 rain。水解过程中，如水分蒸发，应适当补加水，保持溶液总体积不变，以避免酸浓度升高。 ③提取：取出试管，加入10 mL乙醇，混合。冷却后将混合物移人100 mL具塞量筒中，用25 mL乙醚分次洗试管，洗液一并倒人量筒中。加塞振摇1 rain，小
心开塞放出气体，再塞好，静置12 min，小心开塞，用石油醚一乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10~20min，待上部液体澄清，吸出上清液于已恒重的烧瓶内，再加5 mL石油醚一乙醚等量混合液于具塞量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放人原烧瓶内。 ④回收溶剂、烘干、称重：回收烧瓶内乙醚后，将烧瓶于水浴上蒸干后，置100~105℃烘箱中干燥2 h，取出放进干燥器内，冷却30 min后称重，反复干燥冷却操作至恒重。 5.说明 ①测定的样品需充分磨细，液体样品需充分混合均匀，以使消化完全。 ②水解后加的乙醇可使蛋白质沉淀，促进脂肪球聚合，同时溶解一些碳水化合物、有机酸等。后面用乙醚提取，因乙醇可溶于乙醚，故需加入石油醚，降低乙醇在醚中的溶解度，使乙醇溶解物残留在水层，并使分层清晰。 ③挥干溶剂后，残留物中若有黑色焦油状杂质，是分解物与水一同混入所致，会使测定值增大，造成误差，可用等量的乙醚及石油醚溶解后过滤，再次进行挥干溶剂的操作。 ④因磷脂在酸水解条件下分解为脂肪酸和碱，故本法不宜用于测定含有大量磷脂的食品如鱼类、贝类和蛋品。此法也不适于含糖高的食品，因糖类遇强酸易碳化而影响测定结果。
浓酸水解技术的原理及其工艺简述
目录 1．浓酸水解方法简介 (2) 2．生产工艺流程 (2) 2.1水解反应系统 (3) 2.2稀酸洗调系统 (3) 2.3碱中和系统 (4) 2.4水煮系统 (4) 2.5氯化氢处理系统 (4) 2.6碳酸钠溶液系统 (4) 2.7放空系统 (5) 3.操作方法 (5) 3.1开车操作 (5) 3.1.1反应系统开车操作： (5) 3.1.2稀酸水洗系统操作： (7) 3.1.3碱洗系统操作： (7) 3.1.4三级水洗系统操作： (8) 3.1.5氯化氢处理系统操作： (8) 3.2停车操作 (9)
3.2.1正常停车操作 (9) 3.2.2水解反应系统停车操作： (10) 3.2.3稀酸水洗系统停车操作： (10) 3.2.4碱洗系统停车： (11) 3.2.5三级水洗系统停车操作： (12) 3.3紧急停车操作： (12) 3.4停车操作步骤操作 (12) 4.机泵操作 (14) 4.1机泵启动 (14) 4.2泵的停运操作： (15) 5设备的维护及保养 (15) 6安全技术及注意事项 (16) 7.总结 (16) 8.致谢 (17) 9.参考文献 (18)
浓酸水解技术的原理及其工艺简述 李y （黄石理工学院，应用化工技术， 435000） 摘要： 关键词：氯化氢；二甲基二氯硅烷：浓酸：水解工艺;硅氧烷；第二环路Concentrated acid hydrolysis technology, principles and processes outlined Liao Jun （Huangshi institute of technology，Application chemical technology， 435000） Abstract： Keywords：Hydrogen chloride; Dichlorodimethylsilane: concentrated acid: hydrolysis process; siloxane; Second Circle 引言 有机氯硅烷是整个有机硅化学的支柱，大部分的有机硅产品(如硅油、硅橡胶、硅树脂)是由二甲基二氯硅烷水解制得的聚二甲基硅氧烷(基础聚合物)，再与调节剂、交联剂、封头剂等加工制成，被认为是有机硅的正规产品。聚硅氧烷具有很多优异的物理、化学性能，如耐高低温性能、耐辐射性、耐氧化性、高透气性、耐候
食品中淀粉的测定-酸水解法讲解学习
食品中淀粉的测定-酸 水解法
淀粉的测定----酸水解法 【内容摘要】样品经乙醚除去脂肪，乙醇除去可溶性糖类后，用酸水解淀粉为葡萄糖，按还原糖测定方法测定还原糖含量，再折算为淀粉含量。 淀粉的测定 淀粉是由多个葡萄糖缩合而成的多糖，测定淀粉的方法有酸水解法、酶水解法和旋光法等。 酸水解法 此法操作简单，但选择性和准确性不够高。适用于淀粉含量较高，而半纤维素和多缩戊糖等其他多糖含量较少的样品。对富含半纤维素、多缩戊糖及果胶质的样品，因水解时它们也被水解为木糖、阿拉伯糖等还原糖，测定结果会偏高。 1．原理 样品经乙醚除去脂肪，乙醇除去可溶性糖类后，用酸水解淀粉为葡萄糖，按还原糖测定方法测定还原糖含量，再折算为淀粉含量。 2．仪器 ①回流冷凝管。 ②水浴锅。 ③高速组织捣碎机。 ④回流装置。 3．试剂
①乙醚。 ②85％乙醇。 ③6 tool·L叫盐酸溶液。 ④10 tool·L叫氢氧化钠。 ⑤2．5 tool·L-i氢氧化钠。 ⑥甲基红指示剂：称取2 g甲基红，用乙醇溶解稀释至100 mL。 ⑦精密pH试纸。 ⑧20％中性醋酸铅溶液。 ⑨lO％硫酸钠溶液。其余试剂同“还原糖的测定”中高锰酸钾法或直接滴定法中的试剂。 4．测定步骤 ①样品提取 a·粮食、豆类、糕点、饼干、代乳粉等较干燥、易研细的样品：称取2．O～5．0 g(含淀粉0．5 g左右)磨碎过40目筛的样品，置于铺有慢速滤纸的漏斗中，用30 mL乙醚分三次洗去样品中的脂肪，再用150 mL 85％乙醇分数次洗涤残渣以除去可溶性糖类。以100 mL水把漏斗中残渣全部转移至250 mL锥形瓶中。 b-蔬菜、水果、粉皮、凉粉等水分较多，不易研细、分散的样品：先按1：1加水在组织捣碎机中捣成匀浆(蔬菜、水果需先洗净、晾干，取可食部分)。称取5～10 g(含淀粉0．5 g左右)匀浆于250 mL锥形瓶中，加30 mL乙
《水解酸化反应器污水处理工程技术规范》
附件3 水解酸化反应器污水处理工程技术规范（征求意见稿）编制说明
项目名称：水解酸化反应器污水处理工程技术规范 项目统一编号：247-1392 项目承担单位：中国环境保护产业协会 编制组主要成员：王凯军，燕中凯，王焕升，尚光旭，刘媛，薛念涛，高志永，朱民，刘晓剑 标准所技术管理负责人：姚芝茂 技术处项目管理人：姜宏
目次 1 任务来源 (1) 2 标准制定必要性 (1) 3 主要工作过程 (1) 4 国内相关标准研究 (2) 5 同类工程现状调研 (4) 5.1 水解酸化法的反应器类型 (4) 5.2 水解酸化法应用现状 (6) 5.3 水解酸化法存在的问题 (8) 5.4 水解酸化法的发展趋势 (9) 6 主要技术内容及说明 (9) 6.1 水解酸化法的机理 (9) 6.2 水解酸化法的适用性 (10) 6.3 水量和水质 (11) 6.4 污染物去除率 (11) 6.5水解酸化法污水处理工艺流程 (12) 6.6 预处理 (12) 6.7 升流式水解反应器 (13) 6.8 复合式水解反应器 (16) 6.9 完全混合式水解反应器 (16) 6.10 后续处理 (17) 6.11 剩余污泥及处理 (17) 6.12 检测与控制 (17) 6.13 运行与维护 (18) 7 标准实施的环境效益与经济技术分析 (19) 8 标准实施建议 (19)
《水解酸化反应器污水处理工程技术规范》编制说明 1 任务来源 2009年，环境保护部下达了“关于开展2009年度国家环境保护标准制修订项目工作的通知”（环办函【2009】221号），其中提出了制定《污水厌氧生物处理工程技术规范水解酸化法》（项目编号247-1392号）行业标准的任务。 本标准主要起草单位：中国环境保护产业协会、清华大学、北京市环境保护科学研究院。 2 标准制定必要性 环境保护标准化是我国环境保护的一项重要的发展战略，建立与国际接轨的环境工程服务技术标准体系和环境技术评估体系，是当前加快环境保护标准化步伐的一项重要任务。它对于提升我国环境工程服务业的国际竞争能力，规范环境工程服务业市场，保证环境工程建设和运行管理质量，为环境管理提供技术支撑和保障具有重要意义。 环境工程服务技术标准包括工程类技术标准和产品类技术标准两大类，是环境工程立项、科研、招投标、设计、建设施工、验收、运行全过程服务的技术依据。 水解酸化法作为有效改善水质可生化性的工艺在我国污水处理工程实践中已得到广泛应用。很多管理部门、设计部门和技术研究单位，在从事水解酸化法污水处理工程的设计及运行管理工作中已经积累了一些实践经验，但是国内尚缺乏可操作的技术规范指导水解酸化法污水处理设施的建设与运行。为贯彻《中华人民共和国环境保护法》、《中华人民共和国水污染防治法》、和国家其他有关污水处理领域的法规，规范水解酸化反应器污水处理工程的规划、设计、施工、验收和运行管理，需要制定《污水厌氧生物处理工程技术规范水解酸化法》作为污水水解酸化法污水处理技术工程设计工作的指导性文件，为水解酸化法设备的施工、验收和运行管理提出相关要求。使水解酸化法污水处理设施从建设到运行全过程能有一个技术规范进行指导，对于保证水解酸化法污水处理工程的建设质量和稳定运行，以及保证环境保护主管部门的有序监管都具有重要意义。 因此，《污水厌氧生物处理工程技术规范水解酸化法》的编制是十分必要和及时的。 3 主要工作过程 2009年3月，环境保护部下达《污水厌氧生物处理工程技术规范水解酸化法》编制任务后，中国环境保护产业协会组织成立了标准编制组，编制组由中国环境保护产业协会、清华大学、北京市环境保护科学研究院等相关单位的人员组成。
酸水解法
浓酸水解法 浓酸水解法一般情况下指的是酸浓度为70%的硫酸、40%的盐酸或80%的硝酸等无机酸作为酸催化剂水解纤维素的方法，该方法的原理主要是纤维素在酸性条件下的水解是均相反应，纤维素在浓酸中溶胀或溶解后，通过与酸形成复合物后，再降解生成聚合度较低的可溶性寡聚糖（以纤维四糖为主）和葡萄糖。而后加水稀释，一定温度下加热一段时间后可溶性糖即可水解为葡萄糖。用此方法转化纤维素到葡萄糖的产率较高（最高可达90%以上）。但是浓酸水解法所需的反应时间较长，对设备的腐蚀相当严重，对生态环境污染也比较大，且所用的酸必须回收，因此限制了浓酸水解的广泛的工业应用。 稀酸水解 在较高温度下，纤维素的复杂网络状结构使其在稀酸(通常指的是浓度低于10%的盐酸或硫酸等无机酸)中发生于固相纤维素和稀酸溶液之间的多相水解反应，其中此过程分为两个阶段：一是纤维素的非结晶区的水解，由于非结晶区结构松散，氢离子较易进入，因而水解较快, 非结晶区水解的同时，也会发生结晶区的溶胀，在非结晶区水解完全后，结晶区的水解产物会从表面逐渐分离。纤维素的稀酸水解，H3O+与氧原子结合，打破纤维素链中的糖苷键和葡萄糖分子中的C-O-C键，纤维素长链断裂，生成可溶性低聚糖和葡萄糖的同时又将氢离子释放出来。 稀酸水解纤维素的可能机理为，稀酸水溶液中的氢离子对β-1,4糖苷键的氧原子进行质子化，然后水分子进攻α-C原子而使β-1,4糖苷键断裂，从而使纤维素分解为小分子糖类。但是，所得到的糖类在酸性条件下还会进一步的分解产生甲酸，乙酸及乙酰丙酸等副产物。 稀酸水解法的缺点是水解反应所需的温度较高，副产物较多，容易使生成的产物葡萄糖继续分解为5-HMF、乙酰丙酸和甲酸、乳酸等小分子物质，而且影响反应的因素也较多，比如：无机酸的种类及浓度、反应的温度及时间、原料粉碎的程度及反应的固液比等。该方法所得到的糖类产率(大约为50% -70%)也较低。 稀酸水解纤维素的方法是目前研究最广泛的方法，稀酸水解一般采用硫酸，盐酸和磷酸等无机酸，但稀酸水解和浓酸水解一样面临着具有对设备腐蚀和生态环境污染等严重的缺点，酸液的回收及其后处理同样面临着困难和麻烦。
氨基酸的分离提纯
氨基酸的分离提纯 刘艳梅周关华(东华大学环境科学与工程学院上海200051) 摘要国内外氨基酸分离与提纯的发展研究现状及其在生产实践中的应用。关键词氨基酸分离提纯应用 氨基酸及其衍生物是组成蛋白质的基本单元， 广泛用于医药、食品、饲料、化妆品工业等领域。例 如，在食品加工和饲料工业，L-谷氨酸一钠可作为 增鲜剂，L一天冬氨酸、甘氨酸和DI，-丙氨酸等也用 作食品风味改良剂，另外，L一天冬酰苯丙氨酸甲酯 作为低热量甜味剂fAspartame)，在国外已广泛应用 于饮料等食品。L-赖氨酸和DL蛋氨酸广泛应用于 改进饲料成份的营养价值。I，-赖氨酸还用于强化面 粉和强化米的生产。在医药卫生方面，除了大量应 用结晶氨基酸输液外，某些氨基酸及其类似物也被 用于治疗某些疾病。例如L-多巴[L一3一(3，4一二轻 基苯基)丙氨酸】是治疗帕金森氏病的重要药物，而 仅一甲基一多巴为有用的降压药物。L一谷酰胺及衍 生物用于治疗胃溃疡，L_色氨酸和5一羟基一L一色 氨酸是有效的抗抑郁剂。另外某些氨基酸衍生物具 有抗肿瘤的作用。一些肽类例如催产素，血管紧张 肽和促胃液激素等，它们具有医疗效果的激素效 应。氨基酸聚合物，例如聚一一甲基一谷氨酸已 被用作人造革的原料。总之，氨基酸及其衍生物将 会随着科学研究和工业生产的发展，而被更加广泛 地应用【l】。然而，国内氨基酸的生产远不能满足其需 求。 1氨基酸的性质 氨基酸是一种具有两性官能团的物质。氨基酸 分子既含有氨基又含有羧基，在溶液中主要以 一NH，，一COO一形式存在。氨基和羧基的电离取决于 溶液的pH值和氨基酸的等电点PI：在pH低于等 电点P1时，羧基的电离被抑制，氨基酸带正电荷； 在pH值高于等电点Pl时，氨基的电离被抑制而带 负电荷。在等电点时，氨基酸的溶解度最小，最易从 溶液中析出。按照侧链基团的不同，氨基酸可以分 为3类：酸性氨基酸，中性氨基酸，和碱性氨基酸。 而各种氨基酸的等电点不同，酸性氨基酸<中性氨 基酸<碱性氨基酸。利用这个性质，可以把它们进 行分离提纯圆。 2氨基酸的分离与提纯 氨基酸的分离提纯可采用沉淀、离子交换、溶 剂萃取法、反向微胶团萃取、液膜萃取和电渗析等 方法。最常用的是离子交换法。近年来，新的氨基酸 分离提纯方法的研究十分活跃，报道最多的是反应
粗脂肪含量的测定
粗脂肪含量的测定-索氏抽提法 摘要：测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标.脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等.目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法是公认的经典方法,也是我国粮油分折首选的标准方法.通过本实验的学习,掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理和操作方法. 一、目的 脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标.脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等.目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是公认的经典方法,也是我国粮油分折首选的标准方法.通过本实验的学习,掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理和操作方法. 二、原理 本实验采用索氏抽提法中的残余法,即用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提,除去样品中的粗脂肪,以样品与残渣重量之差,计算粗脂肪含量.由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外,还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质,因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪. 三、实验材料、主要仪器和试剂 1、实验材料
油料作物种子、中速滤纸 2、仪器： 1）索氏脂肪抽提器（图1）或YG-Ⅱ型油分测定器2）干燥器（直径15-18cm,盛变色硅胶） 3）不锈钢镊子（长20cm） 4）培养皿 5）分析天平（感量0.001g） 6）称量瓶 7）恒温水浴 8）烘箱
9）样品筛（60 目） 3、试剂 无水乙醚或低沸点石油醚（A.R.） 四、操作步骤 1、准备工作 将滤纸切成8cm×8cm,叠成一边不封口的纸包,用硬铅笔编写顺序号,按顺序排列在培养皿中.将盛有滤纸包的培养皿移入105±2℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中,冷却至室温.按顺序将各滤纸包放人同一称量瓶中称重（记作a）、称量时室内相对湿度必须低于70%. 2、包装和干燥 在上述已称重的滤纸包中装入3g 左右研细的样品,封好包口,放入105±2℃的烘箱中干燥3h,移至干燥器中冷却至室温.按顺序号依次放入称量瓶中称重（记作b）. 3、抽提 将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中,注入一次虹吸量的1.67 倍的无水乙醚,使样品包完全浸没在乙醚中.连接好抽提器各部分,接通冷凝水水流,在恒温水浴中进行抽提,调节水温在70-80℃之间,使冷凝下滴的乙醚成连珠状（120-150 滴/min 或回流7次/h 以上）,抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约需6-12h）.抽提完毕后,用长镊子取出滤纸包,在通风处使乙醚挥发（抽提室温以12-25℃为宜）.提取瓶中的乙醚另行回收. 4、称重
双相酸水解法提取薯蓣皂苷元的研究
1991;1:43. [4]王永实,范治全.阿胶复脉汤对大鼠内毒素血症血小板血液 凝固性与脂质过氧化变化的影响[J].第二军医大学学报, 1993;14(1):55. [5]郑筱祥,杨勇,叶剑峰,等.东阿阿胶的升白作用及机制研究 [J].中国现代应用药学杂志,2005,22(2):102. [6]王志海,何秀敏.阿胶补血作用机理初探[J].山东中医杂 志,1992,11(3):35. [7]郭成浩,金毅.阿胶药理作用的结构学说[J].中国中药杂 志,1999,24(1):54. [8]Ryffel B,M ihatsch MJ.I m munosupp ressi on and cancer:the cicl os porin case[J].D rug Che m Toxicol,1992;15(2):95. [9]Luo JS,Ka mmerer R.Modulati ons of the effect or functi on and cy2 t okine p r oducti on of human ly mphocytes by secreted fact ors de2 rived fr om col orectal2carcinoma cells[J].I nt J Cancer,1997,72 (1):142.[10]Buggins AG,M il ojkovic D.M icr oenvir onment p r oduced by acute myel oid leuke m ia cells p revents T cell activati on and p r oliferati on by inhibiti on of NF2kappa B,c2Myc,and pRb pathways[J].J I m munol,2001,167(10):6021. [11]杨业金,陈兆聪.白血病细胞产生的免疫抑制因子对I L2作 用的影响[J].癌症,1994,13(1):4. [12]Kels o A,Tr outt AB.Heter ogenerity in ly mphokine p r ofiles of CD4+and CD8+T cells and cl ones activated in vivo and vitr o [J].I m munol Rev,1991,123:85. [13]Seder RA,Paul W E.Acquisiti on of ly mphokine2p r oducing phe2 notype by CD4+T cells[J].Annu Rev I m munol,1994,12: 635. [14]Rohrer J W,Coggin J M J r.CD8T cell cl ones inhibit antitumor T cell functi on by secreting I L210[J].J I m munol,1995,155(12): 5719. 收稿日期:2003205223 双相酸水解法提取薯蓣皂苷元的研究 杨欢,杨克迪,陈钧(江苏大学生物与环境工程学院,江苏镇江212013) 摘要:目的 建立双相酸水解法提取薯蓣皂苷元的最佳条件。方法 以薯蓣皂苷元得率为指标,采用单因素法建立双相酸水解法从穿山龙中提取薯蓣皂苷元的最佳条件。结果 按照穿山龙样品∶浓盐酸∶甲醇∶水∶石油醚(10∶21∶60∶19∶100)的比例加入反应体系,在沸水浴中加热回流提取6h,获得比传统方法更高的得率。结论 双相酸水解法提取薯蓣皂苷元简便易行,周期短,提取率高。 关键词:薯蓣皂苷元;穿山龙;双相酸水解法 中图分类号:T Q467;R977.1 文献标识码:A 文章编号:100727693(2005)0420270203 The research on two2pha se ac i d hydrolysis of extracti n g d i osgen i n Y ANG Huan,Y ANG Ke2di,CHEN Jun(School of B iological and Environm ental Engineering,J iangsu U niversity,Zhenjiang 212013,China) ABSTRACT:O BJECT I VE T o establish the op ti m u m conditi ons of t w o2phase acid hydr olysis t o extract di osgenin.M ETHOD U sing single2fact or method,with the yield of di osgenin as the index,we established the op ti m u m conditi ons.RESUL TS Rhizoma D i2 oscoreae ni pponicae extracted with t w o2phase system(sa mp le∶HCl∶Me OH∶H2O∶petr oleu m ether=10∶21∶60∶19∶100)under the boil2 ing water bath for6h could get higher recovery of di osgenin than that of traditi onal methods.CO NCL US I O N This method is conven2 ient,ti m e saving and higher. KE Y WO R D:di osgenin;Rhizoma D i oscoreae ni pponicae;t w o2phase acid hydr olysis 薯蓣皂苷元(di osgenin)是合成甾体激素的主要中间体原料,传统提取方法分为两种,一种是先提取出薯蓣皂苷,再用酸水解皂苷,最后萃取出苷元[1～3]。另一种是将植物置于酸液中反应,再提取干燥后的滤渣[4～5]。这两种方法操作复杂,周期长,提取率低。 Rozanski[6]用盐酸与二甲苯的混合体系对薯蓣皂苷元提取工艺进行简化,利用皂苷极性大,易溶于极性溶剂,而苷元易溶于非极性溶剂的性质,使水解获得的薯蓣皂苷元快速地由水相转移至二甲苯相,减少了不良反应的发生,此后, W eissenberg[7]将该法用于提取甾体生物碱。笔者以穿山龙为原料,对反应温度、酸和甲醇的浓度、反应时间等因素进行了考察,并与传统方法相比较。 1 仪器与材料 Büchi Rotavapor R2200型旋转蒸发器(瑞士Büchi公 ? 7 2 ?Chin J MAP,2005August,Vol.22No.4 中国现代应用药学杂志2005年8月第22卷第4期
酸水解法测定高粱中的淀粉含量
酸水解法测定高粱中的淀粉含量 一、原理： 样品经乙醚除去脂肪及乙醇除去可溶性糖类后，其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖，然后按还原糖测定，并折算成淀粉。 二、试剂配制： 2.1甲基红指示剂（2g/L):称取0.20g甲基红，用少量乙醇溶解后，加水定容到100ml 2.2氢氧化钠溶液(400g/L):称取40g氢氧化钠溶解后，冷却至室温，加水稀释至100ml 2.3乙酸铅溶液(200g/L)：称取20g乙酸铅，加水溶解并稀释至100ml（为防止乙酸铅结晶，先加入5ml冰醋酸） 2.4硫酸钠溶液(100g/L)：称取10g硫酸钠，加水溶解并稀释至100ml 2.5盐酸溶液（1+1）：量取50ml盐酸与50ml水混合 2.6乙醇（85%v/v):量取85ml无水乙醇，加水定容至100ml混匀 2.7葡萄糖标准溶液：准确称取2.5g经过105℃干燥2h的无水葡萄糖，加水溶解后，加入5ml盐酸，并加水定容到1000ml 三、操作方法： 3.1、样品处理 称取2.0-5.0克磨碎过40目筛的样品，置于放有慢速滤纸的漏斗中，用50毫升石油醚分五次洗去样品中的脂肪，弃去石油醚。再用150毫升85％乙醇溶液分数次洗涤残渣，除去可溶性糖类物质。并滤干乙醇溶液，以100毫升水洗涤漏斗中残渣并转移至250毫升锥形瓶中，加入30毫升盐酸（1+1），接好冷凝管，置沸水浴中回流2小时。回流完毕后，立即置流水中冷却。待样品水解液冷却后，加入2滴甲基红指示液，先以40％氢氧化钠溶液调至黄色，再以盐酸（1+1）校正至水解液刚变红色为宜。若水解液颜色较深，可用精密PH试纸测试，使样
品水解液的PH约为7。然后加20毫升20％乙酸铅溶液，摇匀，放置10分钟。再加20毫升10％硫酸钠溶液，以除去过多的铅。摇匀后将全部溶液及残渣转入500毫升容量瓶中，用水洗涤锥形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀释至刻度。过滤，弃去初滤液20毫升，滤液供测定用。 3.2空白试液 加100毫升水至250毫升锥形瓶中，加入30毫升盐酸（1+1），接好冷凝管，置沸水浴中回流2小时。回流完毕后，立即置流水中冷却。待样品水解液冷却后，加入2滴甲基红指示液，先以40％氢氧化钠溶液调至黄色，再以盐酸（1+1）校正至水解液刚变红色为宜。若水解液颜色较深，可用精密PH试纸测试，使样品水解液的PH约为7。然后加20毫升20％乙酸铅溶液，摇匀，放置10分钟。再加20毫升10％硫酸钠溶液，以除去过多的铅。摇匀后将全部溶液及残渣转入500毫升容量瓶中，用水洗涤锥形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀释至刻度。过滤，弃去初滤液20毫升，滤液供测定用。 3.3、测定： 标定葡萄糖溶液：吸取事先加入斐林试剂甲、乙液各5ml、蒸馏水10ml的混合液，放电炉子上加热至沸腾，将标准葡萄糖液放至16ml左右，加2滴次甲基蓝指示剂，进行预滴定，待其再次沸腾用标准葡萄糖溶液滴定至砖红色沉淀，即终点，记录其消耗的体积（v）。 滴定空白溶液：吸取5ml滤液，放入事先加入斐林试剂甲、乙液各5ml、蒸馏水10ml的混合液中，放电炉子上加热至沸腾，将标准葡萄糖液放至16ml左右，加2滴次甲基蓝指示剂，进行预滴定，待其再次沸腾用标准葡萄糖溶液滴定至砖红色沉淀，即终点，记录其消耗的体积（v）。 滴定试液：酸式滴定管中加入滤液进行反滴定，吸取斐林试剂甲液、乙液各5ml，蒸馏水10ml于100ml三角瓶中，加入沸石，置于电炉上加热至沸腾，将滤液放至14ml左右，加入2滴次甲基蓝指示剂，待溶液沸腾，再以滤液进行滴定，直至溶液呈现鲜红色即为终点，记录消耗滤液的体积V。自加热开始到滴定终点不得超过3分钟。 计算：x2={(Vs*C/V1)-(Vs-Vo)*C/10}*500*0.9*100/（m*1000） 式中：
20150422 实验三 食品中粗脂肪的测定——酸水解法
食品中粗脂肪的测定——酸水解法 实验目的： 1. 熟悉掌握粗脂肪的测定方法 2. 熟悉和掌握重量分析的基本操作，包括样品的处理，烘干，恒重等。 实验原理： 酸水解法的原理是利用强酸在加热的条件下将试样成分水解，使结合或包藏在组织内的脂肪游离出来，再用有机溶剂提取，经回收溶剂并干燥后，称量提取物质量即为试样中所含脂类。 实验材料与设备： 仪器：① 恒温水浴50~80℃，② 100ml 具塞量筒，③ 锥形瓶。 试剂材料：①乙醇（95%体积分数），② 乙醚（不含过氧化物），③石油醚（30~600C 沸腾），④ 盐酸。⑤ 鲜肉，⑥ 饮料 实验步骤： ① 水解：准确称取固体样品2g 于50ml 大试管中，加入8mL 水，用玻璃棒充分混合，加10ml 盐酸；或 称取液体样品10g 于50mL 大试管中，加10mL 盐酸。混匀后于70~800C 的水浴中，每隔5~10min 用玻璃棒搅拌一次至脂肪游离为止，约须40~50min ，取出静置，冷却。 ② 提取：取出试管加入10mL 乙醇，混合。冷却后将混合物移入100mL 具塞量筒中，用25mL 乙醚分次冲洗试管，洗液一并倒入具塞量筒内。加塞振摇1min ，将塞子慢慢转动放出气体，再塞好，静置15min ，小心开塞，用石油醚-乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10~20min ，待上部液体清晰，吸出上层清液于已恒量的锥形瓶内，再加入5ml 乙醚于具塞量筒内振摇，静置后仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内。将锥形瓶于水浴上蒸干，置95~105℃烘箱中干燥2h ，取出放干燥器中冷却30min 后称量。 ③结果计算 式中： ------脂类质量分数，% m-------试样质量，g m 1------空锥形瓶质量，g m 2-------锥形瓶与样品脂类质量，g %10012×?=m m m ωω
粗纤维含量检测(酸碱水解法)
酸碱水解法—粗纤维测定 实验原理 用浓度准确的酸和碱，在特定条件下将样品持续煮沸30分钟，将蛋白质、脂肪等成分水解去除，然后用乙醇除去可溶物质，经过高温灼烧后减去矿物质的量，所余量为粗粗纤维。 实验仪器及器材 实验室粉碎机、电子分析天平、马弗炉、干锅、电热鼓风干燥箱、尼龙筛绢(200目)、抽滤瓶、抽滤瓶、电磁炉、干锅、石棉网、大烧杯、不锈钢漏斗、锥形瓶、酒精灯、循环水式真空泵、烧水壶、玻璃棒、移液管、三脚架、橡胶手套等 实验材料与试剂 材料：低盐秀珍菇风味饼干干粉 试剂；1.25％硫酸溶液、1.25％氢氧化钠溶液、95％乙醇、无水乙醚、蒸馏水、沸水、 试剂配置 1.25%硫酸溶液：每100ml溶液中含有1.25g硫酸，溶液浓度须经准确标定。 1.25%氢氧化钠溶液：每100ml溶液中含有1.25g 氢氧化钠，溶液浓度须经准确标定。95％乙醇：分析纯。 无水乙醚：分析纯。 实验步骤 称取试样4g左右，放入三角烧瓶中。向三角烧瓶中加入200ml煮沸的1.25%硫酸和一滴助泡剂，连接回流冷凝管，立即加热使之沸腾，沸腾时间为30min，停止加热后立即以200目尼龙布折叠滤后，用沸水洗涤至洗液不呈酸性。再用200ml煮沸的氢氧化钠溶液，将尼龙布上的存留物洗入原烧瓶内加热微沸30min后，取下烧瓶，立即以尼龙布过滤，以沸水洗涤2~3次，至洗液不呈碱性后，再用95%的乙醇洗涤2次，每次15ml。将残渣置于干锅内，进行抽滤，105℃烘箱中烘干后称重。计算。 粗纤维含量CF%=[(a-b)/W]*100% a—在105℃下经过干燥后称得的恒重(g) b—起始重量(g) w—称取样品总量(g)