微生物标本采集送检及处理原则

微生物标本采集、送检及处理原则

一、标本采集的一般原则：

1、病程早期、急性期或症状典型时,使用抗生素前;

2、无菌采集应无污染,严格进行无菌操作;

3、根据目的菌的特性用不同的方法采集适量标本,采集量不应过少;

4、注意在不同病程采集不同部位标本;

5、采集标本时要防止传播和自身感染;

二、标本的处理：

1、标本保存在4℃环境中,在2h之内送检;脑脊液则要在25 ℃保存,用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h;对环境敏感的细菌应保温并立即送检;

2、标本中可能含有致病菌,必须注意安全防护;切勿污染环境;对于烈性传染病标本运送时更要

由专人运送,严格按规定包装;

3、厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送,有时可直接用抽取标本的注射器运送;

Ⅰ血液及骨髓标本：

血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血症的基本方法;如从患者血液中检出细菌,一般应视为

病原菌;

常见的病原菌主要有金黄色或表皮葡萄球菌、链球菌A、B群、肺炎链球菌等、肠球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、伤寒及副伤寒沙门菌和厌氧菌等;

1、采血时间及次数

2、抽血部位及抽血量

3、报告方式：培养5d无菌生长者报告“培养5d无菌生长”;

查见细菌报告菌名和药敏结果;

4、菌血症、败血症的诊断标准：1两次培养均出现同一种细菌可排除污染；

2发病星期后血中抗体滴度上升;

Ⅱ脑脊液标本：

脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的诊断有重要价值;正常人的脑脊液是无菌的,检出细菌

提示有细菌性急性化脓性、结核性等脑膜炎;

常见的病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、链球菌A、B群和肺炎链球菌、葡萄球菌、产单核细胞李斯特菌、结核分枝杆菌等;

1、涂片检查：

1 一般细菌涂片检查：例如：革兰阴性、凹面相对的球菌,可能是脑膜炎奈瑟菌；链状排列的革兰阳性球菌；长丝状等多形态性的革兰阴性杆菌,可能是流感嗜血杆菌;

2结核分枝杆菌涂片检查

3新生隐球菌涂片检查

2、分离培养

3、报告方式：培养48小时,仍无菌生长者报告“培养2天无细菌生长”;

查见细菌报告细菌,报告菌名和药敏结果;

Ⅲ呼吸系统标本：

一痰标本

下呼吸道的痰液是无细菌的,而经口腔咳出的痰带有多种上呼吸道的正常寄生菌如草绿色链球菌;若从患者痰标本中查见致病菌或条件致病菌,提示有上呼吸道感染;

常见的病原菌主要有肺炎链球菌、A群链球菌、金黄色葡萄球菌、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌和军团菌;

1、标本的采集时间

2、标本采集方法：1 自然咳痰法 2 气管镜下采集法 3 气管穿刺法 4 结核分枝杆菌标本收集法：收集24h痰液以提高阳性检出率;

3、涂片检查：

1一般细菌涂片

2结核分枝杆菌涂片

3放线菌及诺卡菌涂片

4、培养：

1培养标本的选择：应选择粘液痰作涂片;

2痰标本培养前处理：用无菌盐水将痰洗涤3次,加入等量的1%胰酶溶液,37oC水浴90min,使痰液均质化后备用;

3分离培养

5、报告方式：痰标本培养24小时后仅有草绿色链球菌生长而无致病菌生长,报告“正常菌群”;

查出的致病菌,报告菌名和药敏结果,同时报告细菌的量化指标;

二咽拭标本

正常咽拭有多种上呼吸道的正常菌群如草绿色链球菌;若从患者标本中查出致病菌提示上呼吸道有细菌感染如急、慢性扁桃体炎,咽炎,喉炎等

常见的病原菌主要有金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌、微球菌和棒状杆菌等;

1、涂片检查先培养后涂片;

2、分离培养

3、报告方式：同痰标本检查;

Ⅳ穿刺液标本

穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等;正常穿刺液是无菌的,若从患者穿刺液中查见致病菌或条件致病菌提示该部位有细菌感染;

胸腔感染的病原菌以结核分枝杆菌多见；腹腔感染的病原菌以肠道细菌如大肠挨希菌、粪肠球菌,以及结核分枝杆菌多见；心包炎和关节腔液以金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌多见;

1、涂片检查先接种后涂片

2、分离培养：1普通培养 2厌氧培养 3结核菌培养

3、报告方式：培养24h无细菌生长,报告“培养24h无细菌生长”;

查见细菌,报告菌名和药敏结果;

Ⅴ泌尿、生殖道标本

一尿液标本

中段尿培养加计数对于泌尿道感染的诊断有重要价值;细菌培养必须结合菌落计数辨别是否为病原菌;

有致病菌或条件致病菌生长,菌落计数>105/ml,提示感染膀胱炎,肾盂肾炎、肾或膀胱结核等;

常见病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌和伤寒沙门菌等;

1、中段尿标本采集法

2、涂片检查：

1一般细菌及淋病奈瑟菌

2念珠菌

3结核分枝杆菌

3、一般细菌培养：如培养2d无细菌生长,即可弃去;

1倾注平板法

2平板接种环法

3标准接种环法：若定量接种环含量为.001ml,则整个平板菌落数超过100个,可报告“菌落数>105/ml”;

4、特殊培养：

1淋病奈瑟菌培养

2厌氧菌培养

3结核分枝杆菌培养

5、报告方式：培养24h细菌生长,报告“24h无细菌生长”;

查见细菌,报告菌名及其菌落计数菌落数/ml和药敏结果;

二生殖道标本

正常的内生殖器是无菌的,而外生殖器包括男性尿道口和女性阴道有多种细菌寄生;查见病原菌提示有细菌感染;

常见的病原菌主要有葡萄球菌、肠球菌、链球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃细菌、变形杆菌等;

1、涂片检查：革兰染色镜检

2、分离培养：

1普通培养

2淋病奈瑟菌培养

3阴道加特纳菌培养

4报告方式：如查见淋病奈瑟菌、阴道加特纳菌等病原菌,报告菌名和药敏结果;

Ⅵ粪便标本

正常情况下肠道中有多种细菌;

引起感染性腹泻的病原微生物有：1细菌性：产毒素型腹泻、侵袭型腹泻、食物中毒、慢性腹泻；2真菌性；3病毒性;

1、标本采集：1自然排便采集；2直肠试子;

2、涂片检查：粪便标本因各种正常菌群含量甚多,仅以染色性和形态无法分辩是否为病原菌;因此,粪便标本一般不作涂片检查;

3、培养：

1沙门-志贺菌培养

2致病性大肠埃细菌培养

3霍乱弧菌培养

4副溶血弧菌培养

5小肠结肠炎耶尔森菌培养

6真菌培养

7菌群失调的细菌学检验

4、报告方式：

Ⅶ脓液及创伤感染分泌物标本

化脓性感染可由单种或多种细菌引起;

常见病原菌主要有金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌和结核分枝杆菌、诺卡菌,以及梭杆菌和拟杆菌等;

1、标本采集：1开放性脓肿和脓性分泌物；2大面积烧伤的创面分泌物；3封闭性脓肿

2、涂片检查：根据形态和染色特点,可报告“查见革兰×性细菌,形似××菌”或报告“未查见细菌”;

3、培养：

1普通培养

2厌氧菌培养

3嗜血杆菌及奈瑟菌培养

4结核分枝杆菌培养

5真菌培养

4、报告方式：查见致病菌,报告菌名和药敏结果;