高粱 单宁含量的测定(标准状态：现行)

总酚与单宁的测定

一、单宁 红葡萄酒颜色的稳定很大程度上取决于单宁荷花色素苷发生的缩合反应，由于这种物质的存在，葡萄酒成熟过程中的颜色趋于稳定。单宁也是呈味物质，它与多糖和肽缩合，使酒更为柔和。有氧时缩合为浅黄色，有收敛性;无氧时为棕红色，无收敛性。 1、高锰酸钾氧化法 ①原理：利用酒中的单宁色素和其他非挥发性还原物质，在酸性条件下，能被高锰酸钾所氧化，而酒中的单宁色素又能被活性炭吸附除掉，据此测出酒中单宁色素的含量。 ②试剂 a.0.1mol/L高锰酸钾（1/5KMnO4）标准溶液：称取3.3g高锰酸钾，溶于100mL水中，缓缓煮沸15min，冷却后用水稀释至1000mL，置于暗处保存一周。以4号玻璃漏斗过滤于干燥的棕色瓶中。 标定：准确称取0.2g（准确至0.0002g）于105～110℃烘至恒重的基准草酸钠置入250mL三角瓶中，加100mL（8+92）硫酸溶液溶解，加热至60～70℃，趁热用高锰酸钾溶液滴定至溶液呈粉红色。同时做空白试验。 计算公式如下： 高锰酸钾浓度（1/5KMnO4，mol/L）=m/((V-V0)*0.06700) 式中m-----草酸钠的质量，g V-----测定时消耗高锰酸钾溶液的体积，mL V0----空白试验消耗高锰酸钾溶液的体积，mL 0.06700-----消耗1mL 1mol/L高锰酸钾（1/5KMnO4）标准溶液相当于草酸钠的质量，g/mmol b.0.05mol/L高锰酸钾（1/5KMnO4）溶液：将0.1mol/L高锰酸钾（1/5KMnO4）标准溶液稀释至原浓度的1/2 c.靛红纸试剂（靛蓝二黄酸钠，靛胭脂）：称取靛红1.5g，溶于50mL硫酸中，用水稀释至1000mL。 d.粉末活性炭 ③测定步骤 用容量瓶取酒样100mL，倾入蒸发皿中，置于沸水浴中，除去挥发物（一般蒸发掉一半溶液即可），然后取下冷却至室温，返回原容量瓶中，洗涤蒸发皿3～4次，将洗涤液并入容量瓶中，定容摇匀，得处理液Ⅰ取上述处理后的酒样50mL于100mL烧杯中，加入2g左右粉末活性炭用玻璃棒搅匀，静置5分钟，过滤。滤液收集于50mL容量瓶中，用水定容至刻度，得处理液Ⅱ。要求滤液无色透明。 吸取10mL处理液Ⅰ，置于1000mL三角瓶中，加入水500mL及10mL靛红指示剂，以0.05mol/L(1/5KMnO4）高锰酸钾标准溶液滴定至金黄色即为终点。记下消耗高锰酸钾标准溶液的毫升数V1。 同样取处理液Ⅱ10mL，同上操作，记下消耗的高锰酸钾标准溶液毫升数V2。 ④计算 单宁含量（以没食子单宁酸计，g/L）=（V1-V2）*c*0.04157*（1/V）*1000 式中：V1-----滴定处理液Ⅰ时高锰酸钾标准溶液的体积，mL; V2-----滴定处理液Ⅱ时高锰酸钾标准溶液的体积，mL; c------高锰酸钾（1/5 KMnO4）标准溶液的浓度，mol/L; V-----取样量，mL 0.04157-----消耗1mL1mol/L高锰酸钾（1/5 KMnO4）标准溶液相当于没食子单宁酸的质量，g/mmol ⑤讨论 a.本方法测定为单宁色素的含量，也可称为“高锰酸钾氧化值”。 b.活性炭用量随酒样颜色的深浅适量增减 c.滴定速度不要太快（每秒钟一滴），但要连续，间断滴定会影响反应终点。 d.正在发酵的红葡萄酒需经过过滤后再测定，样品太浑浊会影响终点的判定。

粮油检验 高粱中单宁含量测定(编制说明)

《粮油检验高粱单宁含量测定》国家标准编制说明 《高粱单宁含量测定法》 国家标准编制小组 2008年4月20日

1．工作简况（包括任务来源、协作单位、主要工作过程、国家标准主要起草人及其所做的工作等） 1.1 任务来源及协作单位 根据全国粮油标准委员会《2008年国家标准制修订计划》的要求，河南工业大学负责编制国家标准《粮油检验高粱单宁含量测定》(项目编号20063473-T-449)，河南工业大学组成了起草小组。 1.2 主要工作过程 2008年2月，起草组检索和查阅了国际标准化组织和发达国家关于高粱单宁的测定方法，确定采用国际标准。为了保证本标准为最新国际标准的版本，标准起草工作组查阅了国际标准最新的标准目录，通过国际互联网查阅了最近一段时间相关国际标准的修制定情况。 2008年3月，起草组开始对ISO 9648 : 1988(E) Sorghum — Determination of tannin content 进行了全文翻译。2008年4月，完成ISO 9648 : 1988(E)的翻译并形成《粮油检验高粱单宁含量测定(征求意见稿)》，通过正式文件向国内相关高等院校、科研机构、生产企业和个人征求意见。 2. 国家标准编制原则和确定国家标准主要内容（如技术指标、参数、公式、性能要求、实验方法、检验规则等）的论据（包括实验、统计数据），修订国家标准时，应增列新旧国家标准水平的对比 2.1 编制原则 本标准等同翻译ISO 9648 : 1988(E) Sorghum — Determination of tannin content，为我国高粱单宁含量测定提供方法。 2.2 确定国家标准主要内容的依据 根据GB/T 1.1-2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构与编写规则》、GB/T 20000.2-2001《标准化工作指南第2部分：采用国际标准的规则》、GB/T 1.2-2002 《标准化工作导则第2部分：标准中规范性技术要素内容的确定方法》规定的要求, 为了便于使用, 做了下列修改。 a)“本国际标准”一词改为“本标准”。 b) 将原文中的“引用标准”改为“规范性引用文件”，将引用“ISO 950：1979，谷物采样(籽粒)”标准改为引用“GB 5491 粮油、油料检验扦样、分样法”，并增加“凡是不注日期的引用标准，其最新版本适用于本标准”的文字说明。 c) 删除国际标准的前言，增补新的前言。

不同方法测定苹果中单宁的含量(精)

黑龙江东方学院 食品化学综合设计实验 实验题目：不同方法测定苹果中单宁的含量 姓名学号专业班级指导教师学部实验设计 曹智 10202201 食品科学与工程 2010-2/2 姚晶食品与环境工程 2012年6月8日 实验题目果蔬中单宁含量的测定 摘要 单宁是多酚中高度聚合的化合物，广泛存在于自然界中，主要应用于日化、食品、医药、制革等领域。简要介绍了植物单宁的性质、生理活性及应用，综述了单宁含量的经典测定方法以及现代测定方法，并对其发展前景进行了展望化学本质：鞣质是高分子多酚衍生物性质： 1. 有涩味、易氧化 2. 易与金属离子反应生成褐黑色物质 3. 重金属离子与鞣质生成不溶性盐 4. 易溶于水、丙酮、乙醇等，不溶于烃类、氯仿、无水乙醚 关键词： 1. 涩味 2. 氧化 3. 金属离子 4. 吸光值 目录 摘 要 (1)

1 前 言 . ......................................................................................................................................... 3 1.1 实验目 的 .......................................................................................................................... 3 1.2 实 验原理 .......................................................................................................................... 3 2 材料与方 法 . ............................................................................................................................. 4 2.1 实验材料 .. (4) 2.1.1 实验原料 (4) 2.1.2 实验试剂 (4) 2.2 实验设备 .......................................................................................................................... 5 2.3 实验方 法 .......................................................................................................................... 6 2.3.1 络合滴定法 ............................................................................................................... 6 2.3.2 分光光度法 ............................................................................................................... 6 2.3.3 高锰酸钾滴定法 ....................................................................................................... 7 3 结果与讨论 . ............................................................................................................................. 8 3.1 络合滴定 法 ...................................................................................................................... 8 3.2 分光 光度法 ...................................................................................................................... 9 3.3 高锰酸钾滴定法 (9) 结论 .................................................................................................................................... 11 参考文 献 (12) 致谢 .................................................................................................................................... 13 实验题目果蔬中单宁含量的测定）

单宁酶酶活力检测方法

单宁酶酶活力的检测 1引用文件 2范围 本标准适用于微生物发酵产单宁酶制剂酶活力检测 3.术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1酶活性单位定义 在30℃、pH值为5.0的条件下，每分钟降解没食子酸丙酯（PG）溶液解释放1μmol没食子酸所需的酶量定义为一个酶活力单位（U）。 4.原理 酶活力的测定采用保玉心的绕丹宁法，该法以没食子酸丙酯（PG）作为反应的底物，单宁酶分解PG产生的没食子酸可与绕丹宁在碱性条件下形成红色复合物，该复合物在520nm处有最大吸收，据此可通过测定A520的变化量来计算生成的没食子酸的量，从而计算酶活力。 5.试剂和材料 本标准中所有试剂，在没有注明其它要求时，均指分析纯试剂和符合GB/T6682中规定的二级水。 5.10.1mol/L的磷酸氢二钠： 准确称取十二水合磷酸氢二钠35.814g，加入800ml水溶解，溶解后定容至1000ml。 5.20.05mol/L的柠檬酸： 准确称取一水合柠檬酸10.507g，加入800ml水溶解，溶解后定容至1000ml。 5.1和5.2两者混匀，互调pH为5.0. 5.30.5mol/l的KOH溶液： 准确称取KOH28.055g，加入800ml水溶解，溶解后定容至1000ml。 5.40.667%（W/V）罗丹宁溶液（甲醇绕丹宁）： 准确称取罗丹宁0.667g，加入80ml甲醇溶解，溶解后用甲醇定容至100ml。 5.5没食子酸标准溶液，浓度为10mmol/l 称取没食子酸0.18813g，加磷酸-柠檬酸缓冲溶液溶解，定容至100ml。 5.6没食子酸丙酯（PG）溶液，浓度为10.0mmol/L

植物单宁的含量测定方法

植物单宁的含量测定方法 1 植物单宁 单宁（Tannins）又称单宁酸、鞣质、鞣酸。按Bategnt的定义，指相对分子质量为500~3000的能沉淀蛋白质、生物碱的水溶性多酚化合物。主要应用于[1]医药、食品、制革、日用化学品、水处理等领域。单宁在传统医药上内服可治胃肠道出血和止痢，外用于局部止血和创面保护防止感染发炎；近年研究发现单宁还具有抑菌抗病毒、抗过敏、抗氧化和延缓衰老、预防心血管疾病、抗肿瘤和促进免疫等作用。单宁在食品行业中可作为功能性成分用于制作保健品，生产食品添加剂、风味剂等；在化妆品中主要起收敛、防晒、美白、抗皱、保湿、防腐等作用；在制革工业中，单宁是栲胶的主要成分。 2 单宁的含量测定 经典的有皮粉法、干酪素法、氧化滴定法、分光光度法等；现阶段涌现出许多新型的测定方法，如高效液相色谱法、流动注射分析法、原子分光光度法等。 2.1 经典测定方法 2.1.1 皮粉法 皮粉法是国际上公认的单宁含量测定方法，从 20 世纪 60 年代至今，原苏联、日本、印度和中国都采用此法作为国家标准测试方法。皮粉的主要成分是蛋白质，单宁是多元酚类，分子中的酚羟基与蛋白质的酰胺键以氢键结合形成不溶于水的沉淀，以此使单宁沉淀下来，用重量法测定其含量。根据皮粉与单宁溶液接触方式不同，可将其分为震荡法和过滤法。震荡法是皮粉与单宁溶液一起震荡来脱去溶液中的单宁；过滤法是将单宁溶液流过皮粉柱层以脱去单宁。通常，过滤法所测的单宁含量比震荡法高5%～7%。皮粉法所测的是单宁的绝对含量，并且不需要标样，操作简单，可用其测定中药水提液中鞣质的含量[2]。但皮粉法的缺点是，用重量法测定样品时，须经过过滤、干燥、称重，样品耗用量大，测定时间较长，一般样品分析需20 h 左右，不适合大批量样品的快速测定；没有选择性，对低相对分子质量的多酚也具有一定的吸附能力，往往使测定结果偏高；适用于单宁含量高的样品，不适合低含量和微量测定；另外皮粉试剂的供应和质量都较难保证。针对以上缺点，现在大多采用皮粉- 分光光度法[3]、磷钼钨酸- 皮粉比色法[4]等，具有操作简单、快速、精密度高的优点。 2.1.2 干酪素法 干酪素的主要成分是酪蛋白，为含磷蛋白。利用其能选择性地结合具有生理活性的鞣质，从而测定具有疗效鞣质的含量。干酪素法一般与分光光度法结合，鞣质在一定的pH 条件下与Folin 试剂反应，并且鞣质含量与吸光度成正比。很多人利用干酪素法测定了金樱子、侧伯叶、大黄、旋覆花[5- 8]等药材中单宁的含量，此法样品取量少、简单、灵敏、快速、准确，可作为检测植物药材质量标准的可靠分析手段。 2.1.3 胶体滴定法 胶体滴定法，又称聚电解质滴定法，是利用一些电荷密度已知且性能比较稳定的阴、阳离子

不同方法测定苹果中单宁的含量

黑龙江东方学院 食品化学综合设计实验实验题目：不同方法测定苹果中单宁的含量 姓名曹智 学号10202201 专业食品科学与工程 班级2010-2/2 指导教师姚晶 学部食品与环境工程 实验设计2012年6月8日

实验题目果蔬中单宁含量的测定 摘要 单宁是多酚中高度聚合的化合物，广泛存在于自然界中，主要应用于日化、食品、医药、制革等领域。简要介绍了植物单宁的性质、生理活性及应用，综述了单宁含量的经典测定方法以及现代测定方法，并对其发展前景进行了展望 化学本质：鞣质是高分子多酚衍生物 性质： 1.有涩味、易氧化 2.易与金属离子反应生成褐黑色物质 3.重金属离子与鞣质生成不溶性盐 4.易溶于水、丙酮、乙醇等，不溶于烃类、氯仿、无水乙醚 关键词： 1.涩味 2.氧化 3.金属离子 4.吸光值

目录 摘要 (1) 1前言 (3) 1.1实验目的 (3) 1.2实验原理 (3) 2材料与方法 (4) 2.1实验材料 (4) 2.1.1实验原料 (4) 2.1.2实验试剂 (4) 2.2实验设备 (5) 2.3实验方法 (6) 2.3.1络合滴定法 (6) 2.3.2分光光度法 (6) 2.3.3高锰酸钾滴定法 (7) 3结果与讨论 (8) 3.1络合滴定法 (8) 3.2分光光度法 (9) 3.3高锰酸钾滴定法 (9) 结论 (11) 参考文献 (12) 致谢 (13)

实验题目果蔬中单宁含量的测定） 1 前言 1.1 实验目的 了解单宁性质及熟练掌握单宁含量的测定方法 1.2 实验原理 方法一：EDTA络合滴定法 本方法操作简便，实验条件容易控制，适合于单宁含量较少的植物样品的测定，测定相对误差一般不超过2%。 根据单宁可与重金属离子形成络合物沉淀的性质，在样品提取液中加入过量的标准醋酸锌溶液，待反应完全后，再用EDTA标准溶液滴定剩余的醋酸锌，根据EDTA标准溶液的消耗量，可计算出样品中单宁的含量 方法二：分光光度法 分光光度法是通过测定被测物质在特定波长或一定波长范围内光的吸收度，以此对该物质进行定性和定量分析的方法。分光光度法的应用光区包括紫外光区、可见光区、红外光区，其中常用的是紫外光区和可见光区，两者的波长范围分别为200～400 nm 和400～760 nm。分光光度法的基本原理是朗伯- 比尔定律，即当一束平行的单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比。 方法三：高锰酸钾滴定法 作为多酚，单宁是一种强还原剂，极易被氧化剂氧化，还可被活性碳吸附。本测定以高锰酸钾为氧化剂，根据样品中单宁可以被活性碳吸附的特点，测定样品液在用活性碳吸附前后的氧化值之差，计算单宁物质的含量。

单宁含量的测定

（一）单宁含量的测定 1． 原理 单宁具有较强的还原性，可将Fe3+还原为Fe2+。利用邻二氮菲与Fe2+反应生成橙红色配合物，用分光光度计在λ=510nm 处测吸光度并与标准比较而测定单宁。 2． 仪器 可见光分光光度计，研钵，250ml 容量瓶，50ml 容量瓶，100ml 容量瓶，天平，1ml ，2ml ，5ml ，10ml 移液管，100ml 量筒 3． 试剂 （1）单宁标准溶液：取标准单宁酸(C76H52O46)100 mg 溶于1000mL 蒸馏水中，再取适量溶液稀释10 倍，配成10 μg/mL 的溶液. （2）EDTA 溶液：取EDTA 二钠盐0.25 g 溶于500 mL 水中配成0.05 mol/L 。 （3）铁（Ⅲ）溶液：取硫酸铁铵（NH4Fe (SO4)2·12H2O ）2.41 g 溶于500 mL 蒸馏水，并加入0.5 mL 浓硫酸，配成0.01 mol/L 的溶液。 （4） 邻二氮菲溶液：取1，10-邻二氮菲1.485 g 于500 mL 蒸馏水中，配成0.015 mol/L 的溶液。 （5） 缓冲溶液：取冰醋酸15 g 和醋酸钠20 g 溶于250 mL 蒸馏水中，配成pH 为4.4 的缓冲溶液。 4．标准曲线的绘制 取单宁标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL 于6 只25 mL 容量瓶中，分别加入铁（Ⅲ）1.5mL ，置于80 ℃水浴25 min 。冷却至室温后分别依次加入缓冲溶液2.0 mL 、邻二氮菲3.0 mL 、EDTA 溶液0.5 mL ，用蒸馏水定容至刻度后摇匀，静置10 min ，在510 nm 波长下以试剂空白作对照测量吸光度。以单宁质量浓度（依次为0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0，单位μg/mL ）为横坐标，吸光度为纵坐标作图。 5．样品的提取 称取0. 300～0. 500 g 叶片于60 mL 水中,在沸水浴中煮1 h,冷却至室温过滤,将滤液稀释至100 mL 。取稀释液0. 4～0. 6 mL 于25 mL 容量瓶中,按上述方法测定吸光度,鞣酸含量按下式计算: 鞣酸含量(% ) =%100v 10m 10025C 6????? 式中: C ———由工作曲线查出的鞣酸浓度,μg /mL;

单宁含量试剂盒说明书

货号：QS1516 规格：50管/48样 单宁含量试剂盒说明书 可见分光光度法 注意：正式测定前取2-3 个预期差异较大的样本做预测定 测定意义： 单宁是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物，又称植物多酚。具有独特的化学性质和多种生理活性，如能与蛋白质、生物碱、多糖结合；能与多种金属离子发生络合或静电作用；具有止血、抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性。 测定原理： 单宁在碱性环境下与磷钼酸反应，生成蓝色化合物，在760nm处有最大吸收峰。 自备实验用品及仪器： 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。 试剂的组成和配制： 试剂一：液体10 mL× 1瓶，4℃保存； 试剂二：液体8 mL × 1瓶，4℃保存； 单宁的提取： 按照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 蒸馏水），充分匀浆后转移到EP管中，80℃水浴提取30min， 8000 g，25℃离心10 min，取上清液待测。 测定步骤： 1、分光光度计预热30min以上，调节波长至760nm，蒸馏水调零；试剂一和试剂二37℃预热10min以上； 单宁含量计算： 1、标准条件下测定的回归方程为y = 1.6418x +0.0134；x为标准品浓度(mg/mL)，y为ΔA(A 测定-A对照)。 2、按样本鲜重计算： 单宁含量（mg /g鲜重）= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷（W×V1÷V2）=0.609×(ΔA-0.0134) ÷W。 3、按样本蛋白浓度计算： 单宁含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(V1×Cpr)=0.609×(ΔA-0.0134) 第1页，共2页

和田石榴皮中单宁的提取及其含量测定

新疆农业大学 专业文献综述 题目: 和田石榴皮中单宁的提取及其含量测定姓名: 古丽尼沙汗.艾山 学院: 化学工程学院 专业: 应用化学 班级: 081班 学号: 095131115 指导教师: 阿不都热依木职称: 副教授 2012年10月15日 新疆农业大学教务处制

和田石榴皮中单宁的提取及其含量测定 作者：古丽尼沙汗.艾山指导老师：阿不都热依木 摘要：单宁是多酚中高度聚合的化合物，广泛存在于自然界中，主要应用于日化，食品，医药，制革等领域。本文综述分别介绍了石榴皮，单宁，及其提取和测定方法。还综述了单宁含量的经典测定方法以及现代测定方法，并对其发展前景进行了展望。 关键词：石榴皮；单宁；提取；含量测定； 前言：石榴是落叶灌木或小乔木，在热带则变为常绿树。树冠丛状自然圆头形。树根黄褐色,生长强健，根际易生根蘖。石榴皮为石榴科植物石榴的果皮，秋季石榴果实成熟，顶端开裂时采摘，除去种子及隔瓤，切瓣晒干，或微火烘干。干燥的果皮呈不规则形或半圆形的碎片状，厚2～3毫米。外表面暗红色或棕红色，粗糙，具白色小凸点，顶端具残存的宿萼，基部有果柄。石榴果实各部位( 包括石榴皮、汁、籽) 均有含有丰富的单宁类物质，含量达10% ～ 21%，可以作为单宁提取的天然资源加以开发。 石榴皮是维吾尔医的重要天然药材，它具有对急慢性菌痢，胃肠炎，内痔，复泻，烧虫病，烧烫伤，牛皮癣，稻田性皮炎等疾病的治疗功效。石榴在我国各地尤其是在新疆资源非常丰富，因此，本石榴的营养特别丰富，含有多种人体所需的营养成分，果实中含有维生素C及B族维生素，有机酸，糖类，蛋白质，脂肪，以及钙，磷，钾等矿物质。据分析，石榴果实中含碳水化合物17％，水份79％，糖13～17％，其中维生素C的含量比苹果高1～2倍，而脂肪，蛋白质的含量较少，果实以鲜吃为主。石榴可谓全身是宝，果皮，根，花皆可入药。其果皮中含有苹果酸，鞣质，生物碱等成分，据有关实验表明，石榴皮有明显的抑菌和收敛功能，能使肠黏膜收敛，使肠黏腊的分泌物减少，所以能有效地治疗腹泻，痢疾等症，对痢疾杆菌，大肠杆菌有较好的抑制作用。 单宁是一种复杂多元酚衍生物，是栲胶的主要成分，可使生皮转变为革，所以又叫做植物鞣质[1]。单宁广泛存在于植物的根,茎,叶中，作为一种天然可再生资源，具有品种多,分布广,数量大的优点，是继纤维素,木质素,半纤维素之后在植物中含量较多的一种物质，可与蛋白质,生物碱,多糖等反应[2]。近年来，随着对单宁生理活性研究的深入，它在化学,医学,生物等方面得到了广泛应用[3,4]。单宁酸，又称单宁或丹宁,是植物中的一种化学成分。单宁酸主要可以分为可水解的单宁酸与聚合的单宁酸两种。异名：鞣酸，单宁，五倍子单宁酸。性状：淡黄色至浅棕色粉末，有特殊气味，味极涩。溶于1份的水或乙醇，溶于丙酮,不溶于氯仿或乙醚。 单宁酸, 是一种存在于植物中的水溶性多酚类物质, 其相对分子质量在500～3000,由于其自身的多酚羟基结构, 因而具有较强的生理活性。近年来, 国内外大量研究表明, 石榴皮单宁不仅具有显著的抗氧化和清除自由基作用,还具有抑制低密度脂蛋白胆固醇的氧化，防止动脉粥样硬化, 降血脂,抑制血管紧张素转换酶活性，降血压, 抑制乳腺癌，前列腺癌和口腔癌等癌细胞的增生,保护

单宁简单测定方法

单宁简单测定方法 一、原理 单宁物质作为多酚，为强还原剂，极易被氧化还可被活性碳吸附。样品加水浸提出单宁后，用高锰酸钾滴定，以靛红为指示剂。试样中除了单宁，还有其它物质以及靛红均可被高锰酸钾氧化，故要做空白滴定。空白试验可用活性炭吸收单宁后，再用高锰酸钾滴定，从试样与空白液所消耗的高锰酸钾溶液体积之差求得样品中单宁的含量。靛红被高锰酸钾氧化，从蓝色变为黄色，从而指示终点。 二.试剂与工具 试剂： 1. 0.01mol/L标准高锰酸钾溶液：称取AR纯高锰酸钾1.588克，蒸馏水定容1000ml，棕色瓶内暗处保存。 2. 0.1％靛红: 称取0.5克靛红，加25ml浓硫酸(98%) ，放置4小时后，慢慢加入内装200ml蒸馏水的500ml容量瓶，冷却后定容至500ml。 3. 粉状活性炭 工具： 研钵漏斗三角瓶刻度吸管量筒25 ml酸式滴定管容量瓶滤纸 三. 测定步骤: 1. 样品处理: A. 固体样品: 称取样品5-10克(视材料含单宁量多少而定) ，研磨碎或打碎，全部移入100ml容量瓶中，摇匀，振荡提取30分钟至2小

时。用干燥滤纸过滤或离心，得样液。 B. 液体样品: 直接吸原汁10ml，用蒸馏水定容至100ml，用干燥滤纸过滤或离心，得样液。 2. 测定: 吸取5ml样液，加5ml靛红溶液，100ml蒸馏水，用0.01mol/L KMnO4溶液快速滴定至黄绿色，再缓慢滴定至明亮的金黄色为终点。记下消耗的KMnO4的毫升数。 3. 空白测定: A. 取样液5ml, 加活性炭2克，置水浴上加热搅拌约10min，过滤至三角瓶，用热水再洗涤数次。于滤液中准确加入靛红溶液5ml，补足100ml水，用上法滴定至金黄色。 B.取样液5ml ，同上法滴定至金黄色。 四. 计算: 单宁％＝M(V1-V2) ×b×0.00416×100/(W×B) 式中: M--高锰酸钾标准溶液的摩尔浓度 V1--样品滴定消耗高锰酸钾溶液的量(ml) V2--空白滴定消耗高锰酸钾溶液的量(ml) B--样品提取液定容总体积（ml） b--测定时取样品液的体积（ml） W-- 样品的重量(克) 0.0416--1mmol高锰酸钾溶液氧化单宁的克数