人参皂苷的提取与分离 论文
人参皂苷的提取与分离
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摘要
首先认识人参和人参皂苷，了解人参皂苷的详细作用和功效，接着研究了人参茎叶总皂苷含量提取方法，用详细的工艺提取人参皂苷，并且用对显色反应和薄层层析对提取物进行鉴定，为以后的人参茎叶的开发利用奠定基础。
关键词：皂苷；人参茎叶；鉴定。
Abstract
.
The first ginseng and ginseng saponin, understanding the role and efficacy of ginseng saponin in detail, then study the effect of ginseng stem leaf total saponin extraction method, with the detailed process of
extraction of ginseng saponin, and used for color reaction and thin-layer chromatography to extract were identified, for the future of ginseng stem and leaf development lays a foundation.
key words: saponin; ginseng stems and leaves; appraisal;
目录
摘要 (1)
Abstract ................................................................................................ 错误！未定义书签。1绪论 (3)
1.1人参概述 .............................................................................. 错误！未定义书签。
1.2人参的化学成分 (1)
1.2.1人参皂苷 (1)
1.2.2 人参蛋白 (1)
1.2.3 人参多糖 (1)
1.2.4 无机元素 (2)
1.2.5 其他成分 (2)
1.3人参的生理功能及药理活性 (2)
1.3.1增强免疫功能 (2)
1.3.2抗衰老 (2)
1.3.3抗肿瘤 (3)
1.3.4增强学习和记忆能力 (3)
1.3.5保护心血管系统 (3)
2实验部分 (5)
2.1实验材料 (5)
2.2人参皂苷的提取分离 (5)
2.2.1人参皂苷的提取分离原理 (5)
2.2.2人参皂苷提取和苷元分离工艺流程 (5)
2.3人参皂苷的检识 (7)
2.3.1显色反应 (7)
2.3.2薄层层析 (7)
3讨论 (9)
4结论 (10)
参考文献 (11)
1 绪论
1.1 人参概述
人参系五加科植物人参(Panax ginseng C．A．Mey．)的干燥根，人类对人参的利用在《神农本草经》中已有记载，据今已有2000多年的历史，但人们偏向于对人参根的利用，而对人参茎叶的开发从近几年才开始。人参茎叶是人参的地上部分，比根具有更高的人参总皂苷含量，具有补气益肺，祛暑，生津的功能，用于气嘘咳嗽，冒热烦躁，津伤口渴，头目不清，四肢倦乏等症。
我国是人参的故乡，人参是我国的传统名贵中药，具有对多种疾病防治效果和对人体滋补强壮作用，已久为世界上驰名中药。其应用历史相当久远，在我国医药史上具有特殊的地位。人参为五加科人参属植物，通常所说的商品人参是指该植物的干燥根。始载于《神农本草经》，列为上品，享有“中药之王”的美誉，居东北三宝之冠。在我国主产于吉林及其周边的东北三省，我国在世界上也是人参重要的主产国和输出国之一。近年来，无论在人工栽培、采收加工、组织培养，还是有效成分的提取、分离，含量测定，活性成分，生理机能以及新产品的研制开发等方面，都进了较深入的研究工作，也取得了一定进展。
1.2人参的化学成分
人参主要含人参皂苷、人参多糖、人参蛋白等生物活性成分，是人参具有“百草之王”美誉的物质基础。
1.2.1人参皂苷
人参皂苷是人参、西洋参、三七等五加科人参属植物的主要活性成分，主要包括三种类型：达玛烷型四环三萜皂苷（包括原人参二醇型皂苷和原人参三醇型皂苷）、奥克梯隆型四环三萜皂苷和齐墩果酸型五环三萜皂苷。
在人参根中的人参皂苷主要分布在表皮上，但人参植株的不同部位总皂苷含量也不同。
1.2.2人参蛋白
人参蛋白也是人参的主要成分，蛋白质和多肽在人参的生长、发育及生物功能表达等方面都起着重要的作用。主要包括：类RNA酶蛋白、核糖核酸酶、几丁质样蛋白、木聚糖酶、皂苷β-葡萄糖苷酶。
1.2.3人参多糖
人参的化学成分很丰富，除了人参皂苷、人参蛋白外，还含有多种糖类，其总糖含量为4%-6%。包括单糖、低聚糖和多糖。人参含有丰富的人参多糖，多糖中含多肽，结合成糖肽。
低聚糖，又称寡糖，根据寡糖的生物学功能可分为功能性寡糖和普通寡糖两大类。普通寡糖如麦芽糖、蔗糖等可被人体消化吸收，产生能量。而功能性寡糖，因不能被人和动物肠道吸收，决定了它们独特的生理功能。近年来，国内外对功能性寡糖的研究十分活跃，其主要生理功能体现在抑制肠道病原菌的生长繁殖，减少有毒发酵产物及有害细菌酶，预防、治疗便秘、腹泻，清除有害物质、保护肝脏功能，降低血清胆固醇和血压，增强免疫功能，抗衰老作用等。
1.2.4无机元素
人参含有人体必需的铜、锌、铁、钙、镁、锰、纳、钾等无机元素。近几年来很多学者认为中草药无机成分与有机成分具有协调作用，已引起人们的关注。
氨基酸
人参中含有丰富的天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、赖氨酸、精氨酸、酪氨酸、组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、胱氨酸、异亮氨酸等人体必需的氨基酸。
1.2.5其他成分
人参中还富含维生素类、生物碱及核苷类、酮类及黄酮类、聚乙炔醇类、甾醇类、酶类、木质素类、脂肪酸以及挥发性等有效成分。人参含大量的挥发油，是人参的特有香气。红参含有微量的人参麦芽醇，具有抗氧化作用。
1.3 人参的生理功能及药理活性
1.3.1 增强免疫功能
人参具有调节人体免疫功能的作用，包括增强体内吞噬细胞的活性，刺激机体对各种抗原产生相应的抗体，促进T淋巴细胞转化增殖等多种形式。
1.3.2抗衰老
人参抗衰老作用是目前颇受重视的研究课题，这是由于自古以来人们就认为人参具有延年益寿作用[11,12]。另一方面乃由于老龄人口的急剧增加，研究抗衰老药物己是社会和人们的潜在要求，药理学研究证明［13,14]，人参的抗衰老作用是通过增强物质代谢、提高抗体免疫功能、调节内分泌、抗氧化等多种作用形式来实现的。
1.3.3抗肿瘤
虽然人参抗肿瘤作用研究始于60年代初，但近些年来这项研究才受到学者们的重视，中国学者最初发现人参多糖对免疫功能具有促进作用，进一步发现人参多糖对多种动物移植肿瘤有抑制作用[15,16]，这种人参多糖制剂，现己正式用于临床治疗。临床实践证明，人参多糖注射液对胃癌病人有增强免疫功能和延缓病情进展的作用，特别是将其与放疗和化疗合并应用时，可对抗放疗和化疗引起的造血和免疫功能的抑制，使放疗和化疗的疗程延长，从而增强了放疗和化疗的疗效。
人参皂苷对人体骨肉瘤U2OS细胞增殖的抑制作用。研究表明人参皂苷R f - R g1 -
F1、PPT显著地促进了U2 OS细胞的凋亡。其作用通过抑制细胞周期或促进细胞凋亡来阻止U2 OS细胞的增殖[23,25]。
人参皂苷抗癌抗转移作用,主要基于人参皂苷肠内菌代谢物。人参皂苷肠内菌代谢物及其脂肪酸酯可能是人参皂苷在体内抗癌的真正活性成分[2,4]。人参皂苷R b1被结肠内细菌代谢为M I、M I逐渐水解为20( S) - 原人参二醇皂苷[29,30]。如R b1、R b2、R c由结肠内细菌代谢为M I。M I在肝中进一步生物转化为脂肪酸酯。脂肪酸酯抑制肿瘤作用比M I强, EM I可能是人参皂苷在体内的真正活性成分。EM I的药代动力学和生理学需要进一步深入研究。
1.3.4增强学习和记忆能力
前苏联学者报告人参和五味子都能加速条件反射的建立。近些年来，药理学家们用防御和逃避性条件反射方法证明，人参皂苷对化学药物引起的记忆获得和记忆巩固不良均有明显改善作用，但对记忆再现缺失影响不明显。在各种皂苷中，以人参皂苷的作用最佳，其他皂苷也有一定作用，但药效较差[24,26]。
1.3.5保护心血管系统
对人参活性物质的研究结果表明，人参中对心血管起作用的物质是人参皂苷，它具有明显的强心作用，能增加心肌的收缩力、减慢心率、增加心输出量和冠脉血流量。
人参皂苷对动脉硬化的抑制作用。抑制酪氨酸激酶活性的药物具有抗动脉硬化的活性。据陈英杰报道; 二醇组人参皂苷中R a1、R b1、R d、R0、显示有较强的抑制酪氨酸激酶活性用;人参皂苷R b1、人参皂苷R d最强,而三七参苷- R4、人参皂苷R b3、人参皂苷
R c、人参皂苷R g3、人参皂苷Rh2、竹节参苷- L8、人参皂苷- Ia、20 (R)人参皂苷- R h1、人参二醇及齐墩果酸显示中等强度的抑制作用。人参皂苷抑制酪氨酸激酶活性的构效关系为PPD - 型皂苷- >齐墩果酸皂苷> PPT - 型皂苷。
人参皂苷对脂蛋白脂肪酶的激活作用。高血脂,是因为乳糜微滴和低密度脂蛋白的积累和由于心脏中的脂蛋白脂肪酶活性降低造成的。口服人参皂苷抑制乳糜微滴和低密度脂蛋白的积累。使血浆和心脏中的脂蛋白脂肪酶活性恢复正常。起到降血清甘油三酯和胆固醇的作用[2,7,8]。
2 实验部分
2.1实验材料
人参茎叶(干）无水乙醇天平、布氏漏斗、烧杯(100ml、250ml、500ml)、
量筒(10ml、50ml、100ml、250ml)、滴管、漏斗、铁架台、玻璃棒、
试管、滤纸、剪刀硅胶G 毛细管氨性醇树脂玻璃板浓硫酸等
2.2 人参皂苷的提取分离
2.2.1人参皂苷的提取分离原理
人参皂苷元与多个分子糖结合成苷，具有较强的亲水性，易溶于水和低级醇类，实验室采用热水提取人参皂苷，提取液加碱（CaO）除杂。再用酸调至中性，上大孔树脂柱，先用水洗去色素至无色，再用70％的氨性醇洗至无色，人参皂苷便溶于乙醇洗脱，回收乙醇，便得到人参总皂苷。
人参总皂苷和稀HCl在醇液中进行温和酸水解，可得到三种皂苷元，齐墩果酸、人参二醇和人参三醇。而不能得到原人参二醇和原人参三醇，这是因为在酸水解过程中侧链的20－位碳原子上的羟基（－OH）与该链上的双键（C＝C）易闭环，而形成带有三甲基四氢吡喃环的人参二醇和人参三醇。水解后，除去醇、氯仿萃取物经硅胶柱层析分离即可得到三种单体皂苷元，经重结晶获得纯品，分别与已知皂苷的红外光谱相一致。
2.2.2人参皂苷提取和苷元分离工艺流程
一.人参皂苷提取工艺
人参茎叶粗粉20g
热水提取1小时，粗滤，（棉花）
提取液药渣
加0.6g是会乳沉淀，并调至PH9－10，放置10分钟，抽滤
沉淀物滤液
浓硫酸调PH7，放置10分钟。
中性提取液
回收后，上大孔树脂柱，先用水洗至无色，再用
70％氨性醇洗至绿色。
乙醇洗脱液
回收乙醇
人参总皂苷（黄白色）
二.参皂苷元的水解和苷元的分离流程
人参总皂苷
加含5％HCl的50％乙醇液，
加热回流2小时
沉淀水解液
（酸性皂苷元部分）加水稀释，水浴蒸去醇，氯仿萃取
3次（10，5，5ml）
水层氯仿层
干燥，
无水NaSO
4
回收氯仿
总皂苷元
少量苯溶解，硅胶柱
层析，用苯－乙酸乙脂
（8：2）洗脱
组分Ⅰ组分Ⅱ组分Ⅲ
95％乙醇重95％乙醇重丙酮结晶
结晶3次结晶3次2次
齐墩果酸人参二醇人参三醇
mp299-301℃mp245-250℃mp244-246℃
三.操作方法
人参总皂苷的提取：取人参茎叶粗粉20g，放入烧杯用热水（80℃－90℃）提取1小时，然后用棉花粗滤，在所得滤液中加入0.6g水石灰乳除杂并调PH9－10放置10分钟左右，过滤，再将滤液用浓硫酸（少量）调PH7，放置10分钟左右，回收提取液至少量（5－10ml），再上大孔树脂柱（注：此柱应提前洗好，清洗办法略）先用蒸馏水洗至无色，再用70％的乙醇洗至无色，分别用小瓶接收。便得到了乙醇洗脱液，回收乙醇，便得到了人参总皂苷（黄白色）。
人参皂苷的水解
称取人参皂苷4－5g（不足时由老师提供），加20倍量含5％HCl的50％乙醇溶液，加热回流2小时，放冷，加0.5倍水，水浴去醇，转入分液漏斗中，用氯仿萃取3此（10，5，5ml），合并氯仿层，加少量无水硫酸钠干燥，回收氯仿即得总皂苷元。苷元柱层析分离
称取100－200目硅胶（105℃活化30分钟）50g，用苯做洗脱剂湿法装柱，柱顶放一层脱脂棉，压上数个玻璃球，放出多余的苯（至高于吸附剂1cm），计算保留体积。总皂苷元用少量苯溶解上柱，用苯－乙酸乙脂（8：2）洗脱，薄层检识（与苷元标
准品对照）相同组分合并，回收溶剂。齐墩果酸、人参二醇用95％乙醇重结晶，人参三醇用丙酮重结晶，纯品80℃干燥，收集于小瓶中。
注：由于人参花、叶中人参皂苷含量高且廉价，所以本实验可用人参地上部分作原料进行实验，脱脂3－4次，由绿变棕红即可，其它操作同前。如果用人参根总皂苷元进行柱层析，要求学生精制人参二醇进行红外光谱鉴定。若用人参花、叶总皂苷元进行柱层析分离，则要求学生精制人参三醇进行红外光谱鉴定。
2.3人参皂苷的检识
2.3.1显色反应
醋酐—浓硫酸反应（Liebermamm-Burchand 反应）取人参皂苷样品少许，溶于冰醋酸中，加醋酐—浓硫酸试剂（19：1）数滴，混匀，呈红紫色。
泡沫反应：取人参皂苷样品少许于试管中，加水2－3ml 溶解，密塞，用力振摇1分钟，产生大量持久泡沫。 2.3.2薄层层析 一.人参皂苷TLC ： 吸附剂：硅胶G 板
展开剂：Ⅰ正定醇—乙酸乙脂—水（8：2：10）上层。
Ⅱ氯仿—甲醇—水（13：7：2）下层。
对照品：根x R 、叶x R 、花x R 甲醇液(10mg/ml)
显色剂：10％42SO H 乙醇液（V/V ），110℃加热10分钟，至棕红色斑点出现。 二.人参皂苷元TLC 吸附剂：硅胶G 板
展开剂：苯—乙酸乙脂（1：1）
对照品：人参二醇、人参三醇、齐墩果酸甲醇液 显色剂：同皂苷 三.光谱数据
齐墩果酸：
IR 1
max
-cm L KBr ：3301，1700 NMR(3CDCl )δ：5.30，1.85，1.63，1.24，0.91，0.75 人参二醇：
IR 1max -cm L KBr ：3301，1626
NMR(3CDCl )δ：3.60，3.13，1.88，1.65，1.33，0.90 人参三醇：
IR 1max
-cm L KBr ：3340，1617 NMR(3CDCl )δ：6.32，4.60，3.62，1.95，1.60，1.30，1.16，1.04，0.90，0.82
3讨论
1.萃取操作时，注意振摇不能过于剧烈，以防止产生乳化现象。
2.人参皂苷的含量测定经典的方法是将其提取、分离、再与标准品(人参皂苷标准品)对照进行含量研究。通常用纸层析显色、薄层扫描或HPLC方法，这些方法适合于针对某一个皂苷的含量测定。但皂苷类化合物在结构上或药理活性有相似之处。所以测得某一单个皂苷的含量，有时并不能说明问题。苷药理作用相近，某种程度上，总皂苷是各个皂苷的总和。
3.利用试剂检识皂苷比较灵敏，但专属性较差。
4结论
本实验使用溶剂提取法提取人参皂苷并对提取物进行鉴定。人参茎叶中的总皂苷含量是根中的2-3倍，国内外对人参茎叶皂苷提取工艺的报道很多，但由于制得的人参茎叶皂苷纯度低，农药残毒含量高，致使人参茎叶皂苷的生产和利用受到限制。
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22.
人参皂苷的提取教学文稿
人参皂苷的提取
第一章综述 1.1 人参皂苷的简介 人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根，是传统名贵中药，始 载于我国第一部本草专著《神农本草经》。其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢 冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、 心力衰竭、心源性休克等的治疗。 人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。经现代医学和药理研究 证明，人参皂苷为人参的主要有效成分，它具有人参的主要生理活性。 人参皂苷（ginsenoside，GS)是人参的主要有效成分，现已明确结果的GS单体约 有40余种；在人参中的含量在4%左右。其中研究最多且与肿瘤细胞凋亡最为相关的为 Rg3与Rh2。众多研究表明，它具有较高的抗肿瘤活性，对正常细胞无毒副作用，与其 他化疗药物（如顺铂）联合应用有协同作用。人参皂苷通过调控肿瘤细胞增殖周期、诱 导细胞分化和凋亡来发挥抗肿瘤作用。将肿瘤细胞诱导分化成正常细胞有利于控制肿瘤 发展，诱导肿瘤细胞凋亡使细胞解体后形成凋亡小体，不引起周围组织炎症反应。Popovich等研究认为，人参皂苷可以促进人白血病细胞的凋亡，其途径与地塞米松相识，均为受体依赖性。目前我国对人参皂苷的提取分离方法、制剂工艺、抗肿瘤作用机 制以及临床应用等方面做了大量研究，而且已经有人参皂苷的新产品推向市场。 1.2 人参皂苷成分 人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。到目前为止， 文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、- Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50 余种人参皂苷。 Rh2：具有抑制癌细胞向其它器官转移，增强机体免疫力，快速恢复体质的作用。 对癌细胞具有明显的抗转移作用，可配合手术服用增强手术后伤口的愈合及体力的恢复. Rg：具有兴奋中枢神经，抗疲劳、改善记忆与学习能力、促进DNA、RNA合成的作用。 Rg1：可快速缓解疲劳、改善学习记忆、延缓衰老，具有兴奋中枢神经作用、抑制 血小板凝集作用。 Rg2：具有抗休克作用，快速改善心肌缺血和缺氧，治疗和预防冠心病。 Rg3：可作用于细胞生殖周期的G2期，抑制癌细胞有丝分裂前期蛋白质和ATP的 合成，使癌细胞的增殖生长速度减慢，并且具有抑制癌细胞浸润、抗肿瘤细胞转移、促 进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长等作用。 Rb1：西洋参(花旗参)的含量最多，具影响动物睾丸的潜力，亦会影响小鼠的胚胎 发育，具有增强胆碱系统的功能，增加乙酰胆碱的合成和释放以及改善记忆力作用.
人参皂苷的神奇功效
人参皂苷的神奇功效 人参提取物及其衍生物事人参发挥抗致癌作用的物质基础。研究人员对人参皂苷Rh1、Rh2、Rg3、Rg5成分进行了筛选： 1、人参皂苷Rh1预防和抗肿瘤： 人参通过醇类萃取人参总皂苷，再分离人参二醇皂苷和人参三醇皂苷，其中三醇组通过固定话醇素水解分离纯化稀有皂苷Rh1。 单体Rh1具有促进肝细胞增值的作用，治疗和预防肝癌、肝硬化的作用，促进DNA合成。 2、人参皂苷Rh2预防和抗肿瘤： 人参皂苷Rh2是从人参中分离得到的原人参二醇型低糖链皂苷单体。它是生晒参加工红参时,由于某些原人参二醇组人参皂苷受热分解，配基上糖链断裂降解产生的次皂苷人参皂苷Rh2的提取次级人参皂苷，通常只有降解的办法才能得以实现。 人参皂苷 Rh2单体对癌细胞的生长有抑制作用,能诱导肿瘤细 胞凋亡，逆转肿瘤细胞异常分化，抗肿瘤转移，与化疗药物联用能起到增效减毒的作用。 除去抗肿瘤作用外，人参皂苷具有提高机体免疫力、抗菌、改善心脑血管供血不足、调节中枢神经系统、抗疲劳、延缓衰老等作用。
3、人参皂苷单体Rg3预防和抗肿瘤： Rg3对肿瘤细胞的抑制，首先是通过抑制肿瘤新血管生成。此作用在小剂量应用时即可产生，最适合预防肿瘤发生和肿瘤的复发、转移，并且无其他抗癌药物常见的毒副作用，完全可以长期使用。 Rg3在较大计量时还能抑制肿瘤瘤细胞的增殖、浸润，诱导肿瘤细胞凋亡。因此，Rg3常常和放疗、化疗同时使用，可明显增强放疗、化疗效果，大大减轻其毒副作用，提高患者生活质量。 4、人参皂苷单体Rg5预防和抗肿瘤： 人参皂苷单体Rg5是二醇皂苷经过水解的产物。人参皂苷Rg5 可以显著降低肺癌的发生率。被认为是红参中抗癌的活性物质。
提取人参皂苷并且检验以及在过程的一些注意事项
1.人参皂苷提取 人参为五加科植物人参(Panax ginseng)的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。 人参皂甙和稀HCl在醇液中进行温和酸水解，可得到三种皂甙元，齐墩果酸、人参二醇和人参三醇。而不能得到原人参二醇和原人参三醇，这是因为在酸水解过程中侧链的20－位碳原子上的羟基（－OH）与该链上的双键（C＝C）易闭环，而形成带有三甲基四氢吡喃环的人参二醇和人参三醇。水解后，除去醇、氯仿萃取物经硅胶柱层析分离即可得到三种单体皂甙元，经重结晶获得纯品，分别与已知皂甙的红外光谱相一致。 2.人参皂甙提取和甙元分离工艺流程 ①人参皂甙提取工艺： 人参茎叶粗粉20g 热水提取1小时，粗滤，（棉花） 提取液药渣 加0.6g是会乳沉淀，并调至PH9－10，放置10分钟，抽滤 沉淀物滤液 浓硫酸调PH7，放置10分钟。 中性提取液 回收后，上大孔树脂柱，先用水洗至无色，再用 70％氨性醇洗至绿色。 乙醇洗脱液 回收乙醇 人参总皂甙（黄白色） a)人参皂甙元的水解和甙元的分离流程 人参总皂甙 加含5％HCl的50％乙醇液， 加热回流2小时 沉淀水解液 （酸性皂甙元部分）加水稀释，水浴蒸去醇，氯仿萃取 3次（10，5，5ml）
水层氯仿层 干燥， 无水NaSO 4 回收氯仿 总皂甙元 少量苯溶解，硅胶柱 层析，用苯－乙酸乙脂 （8：2）洗脱 组分Ⅰ组分Ⅱ组分Ⅲ95％乙醇重95％乙醇重丙酮结晶 结晶3次结晶3次2次 齐墩果酸人参二醇人参三醇 mp299-301℃mp245-250℃mp244-246℃ 1.操作方法 人参总皂甙的提取：取人参茎叶粗粉20g，放入烧杯用热水（80℃－90℃）提取1小时，然后用棉花粗滤，在所得滤液中加入0.6g水石灰乳除杂并调PH9－10放置10分钟左右，过滤，再将滤液用浓硫酸（少量）调PH7，放置10分钟左右，回收提取液至少量（5－10ml），再上大孔树脂柱（注：此柱应提前洗好，清洗办法略）先用蒸馏水洗至无色，再用70％的乙醇洗至无色，分别用小瓶接收。便得到了乙醇洗脱液，回收乙醇，便得到了人参总皂甙（黄白色）。 人参皂甙的水解 称取人参皂甙（）4－5g（不足时由老师提供），加20倍量含5％HCl的50％乙醇溶液，加热回流2小时，放冷，加倍水，水浴去醇，转入分液漏斗中，用氯仿萃取3此（10，5，5ml），合并氯仿层，加少量无水硫酸钠干燥，回收氯仿即得总皂甙元。 甙元柱层析分离 称取100－200目硅胶（105℃活化30分钟）50g，用苯做洗脱剂湿法装柱，柱顶放一层脱脂棉，压上数个玻璃球，放出多余的苯（至高于吸附剂1cm），计算保留体积。总皂甙元用少量苯溶解上柱，用苯－乙酸乙脂（8：2）洗脱，薄层检识（与甙元标准品对照）相同组分合并，回收溶剂。齐墩果酸、人参二醇用95％乙醇重结晶，人参三醇用丙酮重结晶，纯品80℃干燥，收集于小瓶中。 2.人参皂甙的检验 （一）显色反应
绞股蓝总皂苷提取分离及鉴别方法
绞股蓝总皂苷提取分离及鉴别方法 该药是从植物中提取出来的，为七叶树科植物天师栗(Aesculus Wilsonii Rehd.)的干燥成熟果实(娑罗子)提取物得到的皂苷钠盐,是天然植物药，呈白色粉末或结晶性粉末,味苦涩而辣,具引湿性,符合未来用药趋势, 注射用七叶皂苷钠有什么药理作用？ ①抗炎作用。七叶皂苷可消退由卵白蛋白，福尔马林和葡聚糖诱导的大鼠爪肿胀。V ogel 等注意到七叶皂苷对正常大鼠有促进钠排泄作用，但排钾维持正常水平，注射七叶皂苷后，立即显示利尿作用。对于七叶皂苷抗炎作用的机理，一些学者认为抗炎作用在于能使炎症刺激剂所致的炎症初期的毛细血管通透性增大变为正常。另一些学者认为皮质甾类化合物的正常分泌是七叶皂苷抗炎作用所必要。 ②消肿胀作用。七叶皂苷对大鼠脑水肿有保护作用；Siering证实七叶皂苷的抗肿胀作用与改善细胞通透性有关。Mussgnug认为七叶皂苷抗水肿作用机理为：（1）表面张力活性；（2）提高红细胞与水结合的能力，随着边缘血浆流量提高，产生代谢被动钠泵的依赖；（3）使细胞内、外流体交换正常；（4）在结缔组织和细胞膜上有直接作用的位点。 ③抗渗出作用。七叶皂苷对大鼠巴豆油急性渗出和磷酸组织胺引起的小鼠毛细血管通透性增大具有显著的抑制作用，其强度分别约为氢化可的松的7倍和8倍；并能对抗紫外红斑渗出及缓激肽所致家兔后肢淋巴通透性增加。 ④促皮质甾酮作用。七叶皂苷能促进肾上腺皮质分泌皮质醇，抑制组胺所致的毛细血管通透性增加，增加前列腺素F2，减少前列腺素E1的释放量，阻滞细胞的胞苷二磷酸酯的作用，并延缓Na+交换，从而具有抗炎，抗渗出活性，提高静脉张力。 ⑤抗自由基作用。提高血浆过氧化物歧化酶活性，使抗自由基活性增强。 回答者：drinkyle 方法：分别采用无水乙醇回流提取、无水乙醇回流-正丁醇萃取、体积分数为70％乙醇回流提取、体积分数为70％乙醇回流提取-正丁醇萃取、水提取、超声波提取和超临界CO2提取方法，以人参皂苷Re作对照品，比色法测定提取液中山茱萸总皂苷的含量。结果及结论：不同提取方法对皂苷含量有较大的影响，超临界CO2提取技术无溶剂残留，操作温度低，对环境友好，提取效率高，皂苷含量是传统溶剂提取的1．5～2．0倍，有较好的应用前景 可以采用D101大孔吸附树脂用于提取人参皂甙的分离工艺。现生产工艺已成熟完善。 1、人参提取物回收乙醇后加水溶解通经预处理的吸附柱，先用水洗脱除尽游离糖等非皂甙极性成分，以60%乙醇洗脱下总皂甙，残留于柱层析上的非极性成分则用工业乙醇洗净。树脂可再生重复使用。总皂甙再通过一次吸附树脂即得以精制。 2、在PH<6.5，西洋参总皂甙的水解反应随溶液酸度的增大而加快。在PH6.5~9.00，水溶液中西洋参总皂甙几乎不水解而稳定存在。据此，人参皂甙水提液可调PH值至9上柱，将有利于极化色素等难溶于水的杂质不被吸附而被分离。但需注意采碱性溶液上柱，吸附后需强化水洗（最好仅冲一次），彻底将树脂层碱液洗净，不留死角，否则将会影响最终产品质量。
人参皂苷的提取与分离材料
人参皂苷的提取与分离 学生姓名 专业 班级
学院 摘要 首先认识人参和人参皂苷，了解人参皂苷的详细作用和功效，接着研究了人参茎叶总皂苷含量提取方法，用详细的工艺提取人参皂苷，并且用对显色反应和薄层层析对提取物进行鉴定，为以后的人参茎叶的开发利用奠定基础。 关键词：皂苷；人参茎叶；鉴定。 Abstract The first ginseng and ginseng saponin, understanding the role and efficacy of ginseng saponin in detail, then study the effect of ginseng stem leaf total saponin extraction method, with the detailed process of extraction of ginseng saponin, and used for color reaction and thin-layer chromatography to extract were identified, for the future of ginseng stem and leaf development lays a foundation. key words: saponin; ginseng stems and leaves; appraisal;
目录 摘要 (1) Abstract ..................................... 错误!未定义书签。 1 绪论 (3) 1.1 ............................................. 人参概述 错误!未定义书签。 1.2 ........................................ 人参的化学成分 1 1.2.1人参皂苷 (1) 1.2.2人参蛋白 (1) 1.2.3人参多糖 (1) 1.2.4无机元素 (2) 1.2.5其他成分 (2) 1.3 ................................ 人参的生理功能及药理活性 2 1.3.1增强免疫功能 (2) 1.3.2抗衰老 (2) 1.3.3抗肿瘤 (3) 1.3.4增强学习和记忆能力 (3) 1.3.5保护心血管系统 (3) 2 实验部分 (5) 2.1 ............................................ 实验材料 5 2.2 人参皂苷的提取分离 (5) 2.2.1 人参皂苷的提取分离原理 (5) 2.2.2 人参皂苷提取和苷元分离工艺流程 (5) 2.3 ........................................ 人参皂苷的检识 7 2.3.1 显色反应 (7)
保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究
保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究 发表时间：2014-08-26T15:20:35.077Z 来源：《医药前沿》2014年第20期供稿作者：张高飞于玥邬晓鸥李军 [导读] 本文建立的方法简单、便捷，准确性、重复性好，可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。 张高飞于玥邬晓鸥李军 (深圳市药品检验所 518057) 【摘要】目的建立保健食品中人参总皂苷含量的测定方法。方法用水提取人参总皂苷类成分，经水饱和正丁醇萃取、氨试液洗涤除杂后，试样中的人参皂苷类成分在高氯酸的作用下与香草醛反应，产生特征的紫红色，在560nm下测定吸光度。结果人参总皂苷在0.0722～0.2165mg质量范围内与吸光度线呈良好的线性关系，平均回收率为95.9%。结论本文建立的方法简单、便捷，准确性、重复性好，可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。 【关键词】保健食品人参总皂苷分光光度法 【中图分类号】R93 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）20-0217-02 皂苷类成分是参类中的主要活性物质, 具有滋补强壮，增强免疫，抗疲劳的功效[1]，常用的检测方法为紫外分光光度法[2-5]。目前市售含参类的保健食品有片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液等，均是以总皂苷含量来评价其产品的质量和功效。其测定方法大多都是按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的方法检测[6]，在实际应用中，主要存在以下问题：1、固定的树脂柱载样量与不确定的样品总皂苷含量之间的矛盾，部分样品存在柱容量超载的情况，测定结果偏差严重。2、部分样品经过大孔树脂柱除杂后，仍存在干扰比色测定的杂质。3、操作步骤欠规范，导致测定结果重现性差。本文针对总皂苷的提取方式、以及测定过程中的参数进行研究，建立了保健食品中人参总皂苷的测定方法。 1 仪器、材料与试药 岛津UV2450紫外分光光度计；瑞士梅特勒XS105DU电子天平；上海一恒电热恒温水浴锅；人参皂苷Re(中检所，批号110754-200822，含量88.8%)；儿童装高丽红参液，舒灵胶囊，舒慰快牌胃肠液均购自市场；水为蒸馏水，其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1供试品溶液的制备 固体试样：称取1 g样品，置100 mL容量瓶中，加水80 mL，超声提取30 min，放冷至室温，用水定容至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25 mL，进行萃取。 液体试样：吸取试样10 mL至分液漏斗中(含乙醇的保健食品，水浴挥尽乙醇)，加水至约25 mL，进行萃取。 在已处理好的试样中加入20 mL水饱和正丁醇，振摇萃取3次，取正丁醇层(必要时可离心)，合并提取液，用20 mL氨试液洗涤3次，置蒸发皿中100℃水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至25 mL量瓶中，甲醇定容，即得。 2.2 标准曲线的绘制 分别精密吸取人参皂苷Re标准溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL于10 mL具塞比色管中，水浴挥干溶剂，加入0.2 mL 5%香草醛冰乙酸溶液，再加入0.8 mL高氯酸，使残渣溶解，于60℃水浴加热10 min，冰浴冷却后，精密加入冰乙酸5 mL，摇匀，于560 nm波长处测定吸光度。取供试品溶液1 mL于10 mL具塞比色管中，自“水浴挥干溶剂”起操作。 3 方法学考察 3.1线性关系 取人参皂苷Re对照品0.01804 g，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，作为标准溶液，精密量取标准溶液0.4、0.6、0.8、 1.0、1.2 mL分别置10 mL比色管中，水浴蒸干，显色，以对照品的质量(mg)为横坐标，吸光度为纵坐标，得回归方程：y=4.4807x－ 0.0886，r=0.9997。结果表明，人参皂苷Re对照品质量在0.0722～0.2165 mg之间与吸光度呈良好的线性关系。 3.2 萃取次数 取舒灵胶囊、儿童装高丽红参液，按2.1制备样品水提取液，用水饱和正丁醇分别萃取3、4、5次，结果表明，萃取3次可将人参总皂苷提取完全(表1)。 表1 萃取次数比较结果 3.3热稳定性考察 由于正丁醇沸点较高，为此对人参皂苷的热稳定性进行考察，以便选取合适的水浴温度。取人参皂苷Re标准溶液0.6 mL，分别按60℃、100℃水浴蒸干、100℃水浴蒸干后继续放置30 min处理，测定结果分别为0.663、0.658、0.653，表明人参皂苷的热稳定性良好，因此水浴温度选为100℃。 3.4显色稳定性 取人参皂苷Re标准溶液0.3 mL，显色后每隔10 min测定其吸光度，结果表明，显色后的紫红色溶液不稳定，吸光度呈下降趋势，因此显色完成后需在10 min内完成测定。 3.5重复性试验 取舒灵胶囊按2.1下方法制备6份供试品溶液，分别测定，结果表明本方法重复性良好(表2)。
甾体皂苷类成分提取分离方法
甾体皂苷提取分离方法 甾体皂苷( steroidal saponins) 是天然产物中一类重要的化学成分,大多 都具有一定的生理活性,在天然产物化学研究中日趋活跃。据不完全统计,超过90 个科的植物含有甾体皂苷,尤以单子叶植物的百合科、石蒜科、薯蓣科和龙舌兰科等植物报道最多。由于含甾体皂苷成分的动植物药有相当的疗效。所以,人们在应用和研究方面越来越广泛。例如: Dracaena draco 被用于抗腹泻和止血[1],蒺藜用于治疗眼病、浮肿、腹胀、高血压、皮癣和气管炎[2], Chlorophytum malayense 对肿瘤有潜在的细胞毒活性[3], A gave americana有通便和利尿的作用[4], Solanum nigrum 在中国和日本用于对各种癌症的治疗[5],白首乌民间用于滋补药膳,是一种有前途的抗衰老药物[6],虎眼万年青民间用于抗肿瘤[7],西陵知 母用于治疗烦热消渴,骨蒸劳热,肺热咳嗽等[8]。本文就甾体皂苷的提取分离方法做一简单综述。 甾体皂苷类化合物由于连有糖残基, 一般有较强的极性, 易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶剂, 不易溶于氯仿、乙醚等非极性溶剂。甾体皂苷不易形成结晶（苷元例外）,且有时结构相似，给分离带来一定困难。甾体皂苷提取分离基本步骤为粗提、除杂、分离。 1、提取 目前, 实验室最常用不同浓度的工业乙醇或甲醇提取。也有用水作为溶剂的, 如:Jianying zhang 等用80 - 85℃的水从Anemarrhena asphodeloides 的根状茎中提取到六种甾体皂苷[9]。也可以先用氯仿、石油醚等强亲脂性溶剂处理中草药原料, 然后用乙醇为溶剂加热提取, 冷却提取液, 多数甾体皂苷由于难溶于 冷乙醇而作为沉淀析出[10]。 2、除杂方法 无论是用水还是醇作为溶剂提取所得到的皂苷,多还包含许多杂质, 如无机盐、糖类、鞣质、色素等, 尚需要进一步精制。 2.1 液液萃取法 这是一种最普遍的皂苷除杂方法, 利用皂苷一般极性较大, 易溶于水而其 中的一些杂质极性较小易溶于非极性溶剂的性质来去除一些脂溶性的杂质。一般的操作是将醇提取液减压浓缩得到的浸膏, 悬浮于水中, 依次用石油醚、乙酸乙
实验六 人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定 人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。 人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。经现代医学和药理研究证明，人参皂苷为人参的主要有效成分，它具有人参的主要生理活性。人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。到目前为止，文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。 根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型：①人参二醇型-A 型，②人参三醇型-B型，③齐墩果酸型-C型。A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷，其皂苷元为达马烷型四环三萜，A型皂甙元称为20(S)-原人参二醇[20（S）-protopanaxadiol]。B型皂甙元称为20(S)-原人参三醇[20（S）-protopanaxatriol]。C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物，其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid)。
[目的要求] 1.通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。 2.学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能。 [实验原理] 人参的主要成分为人参皂苷，总皂苷含量约4％，人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶，味微甘苦，具有吸湿性。人参皂苷易溶于水，甲醇、乙醇，可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯，不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。水溶液经振摇后可产生大量的泡沫。人参总皂苷无溶血作用，分离后，B型和c型人参皂苷有显著的溶血作用，而A型人参皂苷有抗溶血作用。 人参中除含有皂苷外，还含有脂溶性成分如挥发油，脂肪、甾体
人参皂苷的提取
第一章综述 人参皂苷的简介 人参为五加科植物人参(Panax ginseng)的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。 人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。经现代医学和药理研究证明，人参皂苷为人参的主要有效成分，它具有人参的主要生理活性。 人参皂苷（ginsenoside，GS)是人参的主要有效成分，现已明确结果的GS单体约有40余种；在人参中的含量在4%左右。其中研究最多且与肿瘤细胞凋亡最为相关的为Rg3与Rh2。众多研究表明，它具有较高的抗肿瘤活性，对正常细胞无毒副作用，与其他化疗药物（如顺铂）联合应用有协同作用。人参皂苷通过调控肿瘤细胞增殖周期、诱导细胞分化和凋亡来发挥抗肿瘤作用。将肿瘤细胞诱导分化成正常细胞有利于控制肿瘤发展，诱导肿瘤细胞凋亡使细胞解体后形成凋亡小体，不引起周围组织炎症反应。Popovich等研究认为，人参皂苷可以促进人白血病细胞的凋亡，其途径与地塞米松相识，均为受体依赖性。目前我国对人参皂苷的提取分离方法、制剂工艺、抗肿瘤作用机制以及临床应用等方面做了大量研究，而且已经有人参皂苷的新产品推向市场。 人参皂苷成分 人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。到目前为止，文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。 Rh2：具有抑制癌细胞向其它器官转移，增强机体免疫力，快速恢复体质的作用。对癌细胞具有明显的抗转移作用，可配合手术服用增强手术后伤口的愈合及体力的恢复. Rg：具有兴奋中枢神经，抗疲劳、改善记忆与学习能力、促进DNA、RNA合成的作用。 Rg1：可快速缓解疲劳、改善学习记忆、延缓衰老，具有兴奋中枢神经作用、抑制血小板凝集作用。 Rg2：具有抗休克作用，快速改善心肌缺血和缺氧，治疗和预防冠心病。 Rg3：可作用于细胞生殖周期的G2期，抑制癌细胞有丝分裂前期蛋白质和ATP的合成，使癌细胞的增殖生长速度减慢，并且具有抑制癌细胞浸润、抗肿瘤细胞转移、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长等作用。
人参总皂苷
人参总皂苷 Renshen Zongzaogan TOTAL GINSENOSIDE GINSENG ROOT 本品为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根及根茎经加工制成的总皂苷。 【制法】取人参，切成厚片，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，煎液滤过，合并滤液，通过D101型大孔吸附树脂柱，水洗脱至无色，再用60％乙醇洗脱，收集60％乙醇洗脱液，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.08(80℃)的清膏，干燥，粉碎，即得。 【性状】本品为黄白色或淡黄色的粉末；微臭，味苦；具吸湿性。 本品在甲醇或乙醇中易溶，在水中溶解，在乙醚或石油醚中几乎不溶。 【鉴别】(1)取本品0.1g，置试管中，加水2ml，用力振摇，产生持久性泡沫。 (2)取本品0.1g，加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液；另取人参对照药材1g，加水100ml煎煮2小时，滤过，滤液通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1cm，柱高为15cm)，用水洗至无色，弃去水液，再用60％乙醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇10ml 使溶解，作为对照药材溶液。再取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品与人参皂苷Re 对照品，加甲醇溶解制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15：40：22：10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。 【检查】粒度依法检查(附录ⅪB第二法)，能通过120目筛的粉末不少于95％。 干燥失重取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过5.0％(附录ⅨG)。 总灰分不得过6.0％(附录ⅨK)。 炽灼残渣不得过6.0％(附录ⅨJ)。 重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法(附录ⅨB)测定，铅不得过百万分之三；镉不得过千万分之二；砷不得过百万分之二；汞不得过千万分之二；铜不得过百万分之二十。 有机氯农药残留量照农药残留量测定法(附录ⅨQ有机氯农药残留测定)测定：六六六(总BHC)不得过千万分之一；滴滴涕(总DDT)不得过百万分之一；五氯硝基苯(PCNB)不得过千万分之一。 【特征图谱】照高效液相色谱法（附录VI D)测定。 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm，载碳量11％)；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温为30℃；流速为每分钟1.3ml；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷’Re峰计算应不低于6000，按人参皂苷Rd峰计算应不低于200 000。 时间（分钟）流动相A(%) 流动相B(%) 0～30 30～35 35～60 19 19→24 24→40 81 81→76 76→60 参照物溶液的制备取人参皂苷Rg l对照品、人参皂苷Re对照品和人参皂苷Rd对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg10.3mg、人参皂苷Re 0.5mg和人参皂苷Rd 0.2mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备取本品30mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇超声处理使溶解
人参皂苷提取和分离纯化方法的研究进展
湖南农业大学课程论文 学院：班级： 姓名：学号： 课程论文题目：人参皂苷提取和分离纯化方法的研究进展课程名称： 评阅成绩： 成绩评定教师签名： 日期：年月日
人参皂苷提取和分离纯化方法的研究进展 学生： (湖南农业大学园艺园林学院，长沙) 摘要：人参皂苷是人参的主要活性成分之一，具有提高免疫力，抗氧化，抗疲劳，抗肿瘤等多种药理活性作用，如何提高效率得到高质量的人参皂苷现已成为研究热点。因此，本文综述了人参皂苷提取、分离纯化方法，旨在为人参皂苷开发和利用提供一定的科学依据。 关键词：人参皂苷提取工艺分离纯化 1前言 人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey)的干燥根，主产于我国吉林长白山脉、辽宁、黑龙江、河北、山西等地，是我国传统名贵的中药材。现代研究表明，人参中已经分离鉴定40余种人参皂苷单体，其次还含有人参多糖、氨基酸、蛋白质、人参二醇、人参三醇等有效成分，其中人参皂苷为人参中的主要活性成分之一，具有保护心功能，降血糖，抗氧化，抗疲劳，抗肿瘤等药理活性作用[1-2]，选用合理的提取分离方法得到高质量的人参皂苷已成为研究热点。据文献报道[3-4]，传统提取分离方法，如煎煮法、渗漉法、索氏提取法、柱层析法等均在中药制药业发展过程中发挥了重大作用。但是，这些方法均不同程度的存在提取周期长，有效成分流失多，提取效率低等问题。随着现代科学技术的不断发展，出现了许多新型的提取分离技术，如超临界二氧化碳萃取技术等，运用这些技术不仅降低了生产成本，又能提高其得率，对人参产业化、确化、自动化提供了技术指导。 2提取工艺研究 2.1微波提取法 微波提取具有设备简单，节省时间，萃取率高，投资少，节省溶剂，污染小等优点。刘永练[5]等采用微波提取法对西洋参干燥根中的人参皂苷进行提取，结果发现人参皂苷得率高达5.53%，比乙醇回流提取率提高29%，提取时间是乙醇回流的2%。另有实验证实了微波提取人参皂苷的提取
10、皂苷类成分的提取分离技术
中药化学技术周 次 第 15、16 周 授课 班级 13中药1班 13中药2班 13中药大参林班 授课 教师 刘惠俊 皂苷类的提取分离技术计划 课时 4 1、掌握与皂苷类成分提取分离有关的理化性质和重要的提取分离方法原理； 2、熟悉皂苷类成分的结构特点、性质和检识； 3、了解皂苷类成分的结构类型、分布情况和生物活性。 重点：兴趣培养，引导方向 难点：知识框架构成图 讲授图例见教学内容教 具 粉笔，彩图 教室 兴趣引导―――――――——————————――20分钟 课程主要内容框架讲解―――――――——――――120分钟 学生自由提问——————————————―――15分钟 总结、点评、回顾———————————————15分钟 本节课将开始讲中药化学成分--生皂苷类成分的分离技术理论，教学中结合学生的原有认识水平、心理情况的特点进行教学设计。开课由老师讲述各种原理与仪器，阐述课程学习内容与目标，调动起学生的情绪使他们身心能尽快进入学习状态。以“皂苷成分”为重点展开对课程的介绍，以相关思考提高学习兴趣。并且让学生在自我思考及提问后，让学生用自己的语言形容对中药化学认识，并给予科学的阐述。课后布置500字的上课感想及对教学的建议及愿望表达来了解学生的心理和知识水平，以便日后更好的开展课程教学，因材施教。
第一节认识皂苷 一、结构与分类 甾体皂苷 三萜皂苷 二、理化性质及溶血性 三、检识反应 第二节提取分离 第三节工作任务 任务一：人参中皂苷成分的提取分离任务二：甘草中人参皂苷的提取分离任务三：柴胡中皂苷类成分的提取分离
整个教学过程学生基本按预先的教学设计意图有效的完成了教学内容，对知识点的掌握都达到了预期目标。但部分女生则胆小羞涩，迟迟不愿举起手，但以“平时成绩分”做诱饵，则大有改善。有时学生对板书不是很在意，不能做到及时记好笔记。在以后的教学中除了需不断强调学生自主学习意识，避免被动填鸭式教学外，还需要在教学手段、方法上完善。
人参茎叶总皂苷片
人参茎叶总皂苷片 【药品名称】 通用名称：人参茎叶总皂苷片 英文名称：Rensenjinyezongzaogan Pian 【成份】 本品主要成份为：人参茎叶皂苷。 【适应症】 本品用于冠心病、年期综合更征、隐性糖尿病、慢性肝炎和肿瘤的辅助治疗。【用法用量】 口服，一次2～3片，一日3次。 【不良反应】 尚未见有关不良反应报道。 【禁忌】 对本品过敏者禁用。 【注意事项】 1.忌与藜芦，五灵脂同用。 2.当药品性状发生改变时禁止使用。 【特殊人群用药】 儿童注意事项： 尚无系统临床研究资料。 妊娠与哺乳期注意事项： 尚无系统临床研究资料。 老人注意事项：
尚无系统临床研究资料。 【药物相互作用】 尚无本品与其他药物相互作用的信息。 【药理作用】 实验表明人参茎叶皂苷具有多方面的药理作用。对神经系统具有调节作用，中枢抑制作用可能与ATP酶的抑制有关。人参茎叶皂苷具有雄性激素样作用，可调节内分泌。有抗低氧作用，可能与其他提高大脑皮层的耐低氧作用有关。对心血管系统其强心作用与增加心肌细胞内ATP有关。通过长期作用，可逐渐由阻断肿瘤细胞G1期向S期过渡到阻断S期向G2期过渡。可改变肿瘤细胞RNA含量，造成S-180肉瘤细胞特性发生改变，从而抑制肿瘤细胞的生长，对实验性肝损伤的保护作用可能是通过诱导肝微粒体中P-450含量的增加，调整肝脏代谢，抗炎等对多种生化过程的影响，对特异性炎症具有对抗和抑制作用。 【贮藏】 密封保存。 【有效期】 24个月 【批准文号】 国药准字H21023720 【说明书修订日期】 核准日期：2007年01月05日 【生产企业】 企业名称：丹东医创药业有限责任公司 生产地址：丹东市振兴区兴七路64号
人参皂苷Re的提取
人参皂苷Re的提取研究方法综述 康乐 摘要：人参作为我国传统的中药广泛被人们开发，然而并未完全分析透彻其内的全部活性物质。因此，文章从人参皂苷Re的提取方法进行综述，并根据当前开发的情况进行了总结并提出今后的研究方向。 关键词：人参皂苷Re；提取方法；展望 Review about Ginseng saponins of extration methods Re Kangle Abstract As the traditional Chinese medicine ginseng widely developed, however, not fully analyzed thoroughly all of its active substances. Therefore, this article from the ginseng saponins Re were reviewed in this article, and according to the current development of the paper and put forward the direction of future research. Keyword Ginseng saponins Re Extraction method Research direction 人参是一味被广泛用于养身治病的传统中药，与貂皮、鹿茸并称为中国东北三宝。人参皂苷是人参的主要有效成分。根据皂苷元的不同，人参皂苷被分为原人参二醇类皂苷、原人参三醇类皂苷及齐墩果酸类皂苷。人参皂苷在人参中的含量很低，在人参的各个组织器官中的含量都有所不同，这无形中又增加了我们对人参皂苷的分离提取的难度。在实际生产中，我们一方面要保证皂苷的产率，另一方面又要保证它的生物活性。 1.人参皂苷单体Re的提取方法 人们对人参的提取多以人参皂苷Re的含量作为其质量指标，且常用的提取方法有醇回流法、超声提取法、微波处理、紫外可见分光光度法、层析法（硅胶柱层析法、薄层层析法）、高速逆流色谱法（HSCCC）、湿法粉碎提取法、煎煮法、薄层扫描法、HPLC法等。 1.1层析法 在层析法中，采用硅胶柱层析法对人参叶三醇皂苷进行分离，TLC点板后收集单点Re 产品，通过结晶法精制，从而得到较纯的人参皂苷Re。硅胶层析法制胶简单，操作过程容易，但人参总皂苷经硅胶柱分离后，各组分间并没有完全分离，还存在互相混合的部分。
总皂苷的功效与作用
总皂苷的功效与作用 现实生活中，人口步入老龄化，越来越多的老年人患上心脑血管疾病，而且心脑血管疾病也成了全国死亡率最高的疾病，超越了癌症。对于现代医学也出现很多的药物元素来治疗这方面，提高人体的免疫力，免疫力增强人生病的几率就会下降，总皂苷就是这类元素，那总皂苷的功效有哪些，对身体有什么作用？ 总皂甙的功效与作用 1、总皂甙能祛痰止咳 祛痰止咳是总皂甙的重要作用之一，特别是那些中药材中含有的总皂甙，这种作用最为明显，像桔梗和远志就都是总皂甙含量特别高的存在，它们的止咳化痰功效也特别出色。 2、总皂甙能解热安神 总皂甙还是一种能直接作用于人类神经系统的天然的物质，它能解热，也能安神，对你类的发烧和多种热病都有一定的缓解功效，另外它对人类的神经衰弱和焦虑等不良症状也有明显的调理作用。 3、总皂甙能提高人体免疫力 总皂甙在进入人体以后可以促进人体内DHA和蛋白质的合成，可以促进免疫细胞再生，也能提高免疫细胞活性，能让人体免疫力明显提高，人参总皂甙的这种功效最为出色。
4、总皂甙还能调节肾上腺皮质素分泌 中药甘草中也有一些总皂甙存在，它进入人体以后可以促进人体肾上腺皮质素分泌，能在起到止咳的重要作，另外这种总皂甙还能促进溃疡现愈合，也能缓解疼痛，它对人类的胃溃疡也有一定的治疗功效。 人参果总皂苷怎么吃 人参果总皂苷营养丰富，在中医学当中是不可多得上好药品。人参果总皂苷搭配其他食物来吃也是可以的妈妈百科这就为您介绍人参果总皂苷怎么吃。 1、人参果总皂苷土鸡汤 食材：人参果总皂苷、母鸡、花生、姜片、枸杞、红枣、盐做法：（1）将鸡肉洗净切成块。 （2）把花生用清水浸泡大约一个小时，并准备好红枣和人参果总皂苷。姜切片。 （3）洗净人参果总皂苷和红枣。鸡肉焯水，去浮沫。 （4）把准备好的原料都放到炖锅里，浇入适量的清水，炖煮。 （5）用清水泡发后的枸杞加入到锅里，加上适量的盐和花生，煮大约两个小时。 （6）带所有原料都煮熟之后即可。 2、人参果总皂苷瘦肉汤食材：人参果总皂苷、猪肉、盐做法： （1）把人参果总皂苷洗干净，再把猪肉洗净后切成碎末。 （2）在锅里倒入适量的清水，把火候调到大火。 （3）等锅里的水煮沸之后放入人参果总皂苷，过一会再把剁碎的猪肉倒入锅里，把火候调到小火慢炖，加入适量的盐。
绞股蓝皂苷的提取分离及鉴定
绞股蓝总皂苷提取分离及鉴定该药是从植物中提取出来的，为七叶树科植物天师栗(Aesculus Wilsonii Rehd.)的干燥成熟果实(娑罗子)提取物得到的皂苷钠盐,是天然植物药，呈白色粉末或结晶性粉末,味苦涩而辣,具引湿性,符合未来用药趋势, 注射用七叶皂苷钠有什么药理作用？ ①抗炎作用。七叶皂苷可消退由卵白蛋白，福尔马林和葡聚糖诱导的大鼠爪肿胀。V ogel等注意到七叶皂苷对正常大鼠有促进钠排泄作用，但排钾维持正常水平，注射七叶皂苷后，立即显示利尿作用。对于七叶皂苷抗炎作用的机理，一些学者认为抗炎作用在于能使炎症刺激剂所致的炎症初期的毛细血管通透性增大变为正常。另一些学者认为皮质甾类化合物的正常分泌是七叶皂苷抗炎作用所必要。 ②消肿胀作用。七叶皂苷对大鼠脑水肿有保护作用；Siering证实七叶皂苷的抗肿胀作用与改善细胞通透性有关。Mussgnug认为七叶皂苷抗水肿作用机理为：（1）表面张力活性；（2）提高红细胞与水结合的能力，随着边缘血浆流量提高，产生代谢被动钠泵的依赖；（3）使细胞内、外流体交换正常；（4）在结缔组织和细胞膜上有直接作用的位点。 ③抗渗出作用。七叶皂苷对大鼠巴豆油急性渗出和磷酸组织胺引起的小鼠毛细血管通透性增大具有显著的抑制作用，其强度分别约为氢化可的松的7倍和8倍；并能对抗紫外红斑渗出及缓激肽所致家兔后肢淋巴通透性增加。 ④促皮质甾酮作用。七叶皂苷能促进肾上腺皮质分泌皮质醇，抑制组胺所致的毛细血管通透性增加，增加前列腺素F2，减少前列腺素E1的释放量，阻滞细胞的胞苷二磷酸酯的作用，并延缓Na+交换，从而具有抗炎，抗渗出活性，提高静脉张力。 ⑤抗自由基作用。提高血浆过氧化物歧化酶活性，使抗自由基活性增强。 回答者：drinkyle 方法：分别采用无水乙醇回流提取、无水乙醇回流-正丁醇萃取、体积分数为70％乙醇回流提取、体积分数为70％乙醇回流提取-正丁醇萃取、水提取、超声波提取和超临界CO2提取方法，以人参皂苷Re作对照品，比色法测定提取液中山茱萸总皂苷的含量。结果及结论：不同提取方法对皂苷含量有较大的影响，超临界CO2提取技术无溶剂残留，操作温度低，对环境友好，提取效率高，皂苷含量是传统溶剂提取的1．5～2．0倍，有较好的应用前景 可以采用D101大孔吸附树脂用于提取人参皂甙的分离工艺。现生产工艺已成熟完善。 1、人参提取物回收乙醇后加水溶解通经预处理的吸附柱，先用水洗脱除尽游离糖等非皂甙极性成分，以60%乙醇洗脱下总皂甙，残留于柱层析上的非极性成分则用工业乙醇洗净。树脂可再生重复使用。总皂甙再通过一次吸附树脂即得以精制。 2、在PH<6.5，西洋参总皂甙的水解反应随溶液酸度的增大而加快。在PH6.5~9.00，水溶液中西洋参总皂甙几乎不水解而稳定存在。据此，人参皂甙
人参皂苷的神奇功效
人参提取物及其衍生物事人参发挥抗致癌作用的物质基础。研究人员对人参皂苷Rh 1、Rh 2、Rg 3、Rg5成分进行了筛选： 1、人参皂苷Rh1预防和抗肿瘤： 人参通过醇类萃取人参总皂苷，再分离人参二醇皂苷和人参三醇皂苷，其中三醇组通过固定话醇素水解分离纯化稀有皂苷Rh1。 单体Rh1具有促进肝细胞增值的作用，治疗和预防肝癌、肝硬化的作用，促进DNA合成。 2、人参皂苷Rh2预防和抗肿瘤： 人参皂苷Rh2是从人参中分离得到的原人参二醇型低糖链皂苷单体。它是生晒参加工红参时,由于某些原人参二醇组人参皂苷受热分解，配基上糖链断裂降解产生的次皂苷人参皂苷Rh2的提取次级人参皂苷，通常只有降解的办法才能得以实现。 人参皂苷Rh2单体对癌细胞的生长有抑制作用,能诱导肿瘤细胞凋亡，逆转肿瘤细胞异常分化，抗肿瘤转移，与化疗药物联用能起到增效减毒的作用。 除去抗肿瘤作用外，人参皂苷具有提高机体免疫力、抗菌、改善心脑血管供血不足、调节中枢神经系统、抗疲劳、延缓衰老等作用。 3、人参皂苷单体Rg3预防和抗肿瘤： Rg3对肿瘤细胞的抑制，首先是通过抑制肿瘤新血管生成。此作用在小剂量应用时即可产生，最适合预防肿瘤发生和肿瘤的复发、转移，并且无其他抗癌药物常见的毒副作用，完全可以长期使用。
Rg3在较大计量时还能抑制肿瘤瘤细胞的增殖、浸润，诱导肿瘤细胞凋亡。因此，Rg3常常和放疗、化疗同时使用，可明显增强放疗、化疗效果，大大减轻其毒副作用，提高患者生活质量。 4、人参皂苷单体Rg5预防和抗肿瘤： 人参皂苷单体Rg5是二醇皂苷经过水解的产物。人参皂苷Rg5可以显著降低肺癌的发生率。被认为是红参中抗癌的活性物质。