基础16项生化试剂的种类及意义

基础16项生化试剂的种类及意义
基础16项生化试剂的种类及意义

考核生化试剂的种类及意义

一、血脂类检查项目(4项)

1.总胆固醇(CHO)

参考值:0~5.2mmol/L(90~200mg/dL)

高胆固醇血症与动脉粥样硬化的形成有明确关系,血液胆固醇增高多见于甲状腺功能减低,糖尿病等;胆固醇降低见于营养不良,肝功能严重低下等。

血清胆固醇的测定可用作肝脏功能、胆汁功能、肠吸收功能和冠状动脉疾病的诊断指标。它在高脂蛋白血症的诊断和分类方面也有着重要的意义。血清总胆固醇超过5.70mmol/L可考虑为高胆固醇血症,高胆固醇血症容易引起动脉粥样硬化,造成堵塞性心脑血管疾病,病理性高胆固醇血症见于肾病综合症、糖尿病、甲状腺功能减退。胆固醇降低常见于:贫血、肝硬化、甲亢、营养不良等。

因此,胆固醇的测定对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。

2.甘油三酯(TG)

参考值:0.7~1.7mmol/L

高甘油三酯血症为心血管疾病的危险因素,降低则见于甲状腺功能亢进,肝功能严重低下等。

测定甘油三酯的重要意义在于诊断和处理高脂血症。这些疾病可能是原发性的,或是继发于其它疾病如肾病、糖尿病和内分泌失调。甘油三酯增高常见于:高脂血症、肾病综合症、糖尿病、肝胆疾病、动脉粥样硬化、甲减等。

甘油三酯降低常见于:严重营养不良、脂肪消化吸收障碍、甲亢。甘油三酯升高已被证实是冠状动脉硬化性心脏病的危险因素。因此,甘油三酯的测定是对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。

3.高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)

参考值:0.77~2.25mmol/L(47~65mg/dl)

降低见于急、慢性肝病,糖尿病,慢性贫血等

高密度脂蛋白胆固醇的主要生理功能是转运磷脂和胆固醇,它是一种抗动脉粥样硬化的脂蛋白,是冠心病的保护因子,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。临床上以不同种类脂蛋白比例的分析作为不同类型的高脂蛋白症的鉴别诊断。高密度脂蛋白胆固醇增高常见于:饮酒、长期体力活动等。高密度脂蛋白胆固醇降低常见于:冠心病、脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化等。

4.低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)

参考值:1.27~4.13mmol/L(80~120mg/dl)

低密度脂蛋白胆固醇用于冠心病和动脉粥样硬化的诊断。动脉粥样硬化(AS)斑块中沉淀的脂质主要是低密度脂蛋白(LDL),在各类脂质中,LDL被认为是主要的致病因素,而高密度脂蛋白(HDL)可能起保护作用,血清总胆固醇(TC)大致反映LDL胆固醇(LDL-CHO)水平,但也受HDL-C水平的影响,因此在AS脂类危险因素判别中,TC偏高时,测定LDL-C有重要临床意义。

二、肝功类检查项目(8项)

1.碱性磷酸酶(ALP)

参考值:45~135U/L

是监测胎盘功能状况的指标。

碱性磷酸酶几乎存在于人体的各个组织中,以骨骼、肾脏和肝脏中含量较多。其病理性变化表现在:升高:阻塞性黄疸、急慢性黄疸性肝炎、肝癌、纤维性骨炎、佝偻病、骨转移癌等。降低:呆小症、维生素C缺乏症等。

2.γ-谷氨酰转移酶(GGT)

参考值:男≤47U/L 女≤32U/L

GGT升高是乙醇中毒的敏感指标。

γ-谷氨酰氨基转移酶(γ-GT)存在于肾、胰、肝脏和前列腺、盲肠、脑中,血清中γ-谷氨酰转肽酶主要来源于肝、胆系统,因此,当肝胆发生疾病或损伤时,如:阻塞性黄疸、胆汁性肝硬变、胆管炎、胆囊炎时,其活性显著增高;胰腺癌、乏特壶腹癌时,其活性亦显著增高,同时饮酒、服药等亦可引起γ-谷氨酰转肽酶活性升高。因此,γ-谷氨酰转肽酶的测定对于肝胆疾病的检测具有重要的临床意义。

3.天门冬氨酸氨基转移酶(AST)

参考值:女性<31 U/L 男性<40U/L

临床测定AST主要用于诊断急性心肌梗塞,肝细胞及骨骼肌疾病。

天门冬氨酸氨基转移酶(AST)又称谷草转氨酶(GOT),主要存在于各组织细胞中,肝、骨胳肌和肾脏含有相似的AST量。AST在心肌细胞中较多,当心肌梗塞时,血清中AST活力增高,在发病后6-12h之内显著增高,增高的程度可反映损害的程度,并在发作后48h达到最高值。约3-5d后恢复正常。各种肝病时AST可增高,肝病早期和慢肝增高不明显,AST/ALT比值小于1;严重肝病和肝病后期(活动性慢肝)增高,此时AST/ALT比值大于1。其它如心肌炎、肾炎及肺炎等也可使AST轻度增高。天门冬氨酸氨基转移酶主要用于诊断心肌梗塞、中毒性肝炎、肝癌、骨骼肌疾病等。因此,天门冬氨酸氨基转移酶的测定对心脏、肝脏疾病的检测具有重要意义。

4.丙氨酸氨基转移酶(ALT)

参考值:女性<31 U/L 男性<41U/L

ALT活性增高见于急性病毒性肝炎,骨骼肌等组织坏死等。

丙氨酸氨基转移酶(ALT)又称谷丙转氨酶(GPT),在肝脏中有较高的浓

度,而在肾、心、骨胳肌、胰、脾、肺脏中则含量较少。通常ALT的升高由某些与肝脏有关的疾病引起,包括: 肝硬化、肝癌、病毒性或中毒性肝炎和阻塞性黄疸;ALT升高也见于广泛损伤和肌肉疾病,伴有休克、氧不足的循环衰竭,心肌梗塞和溶血性疾病。丙氨酸氨基转移酶活性的测定对以上疾病的诊断具有重要的价值。

5.总蛋白(TP)

参考值:60~88g/L

浓度升高:各种原因失水所致血液浓缩;多发性骨髓瘤等单克隆性免疫球蛋白病;系统性红斑狼疮等。

浓度降低:体内水分过多,各种渠道的蛋白丢失,如肾病综合症;营养不良消耗增加,如肿瘤;蛋白合成障碍,如肝功能受损等。总蛋白降低,常伴随着白蛋白降低,常见于肝功能严重受损、烧伤、大出血、肾病综合症、溃疡性结肠炎、营养不良等。合成缺陷、营养不良、蛋白质吸收障碍、蛋白质丢失综合症。总蛋白增高常见于多发性骨髓瘤、急性脱水、外伤性休克、慢性肾上腺皮质功能减退等。

6.白蛋白(ALB)

参考值:35~55g/L

高白蛋白血症偶见于脱水所致的血液浓缩;急性降低见于严重烧伤与大量出血;慢性降低见于肝功能受损,结核慢性失血等。

白蛋白降低,常伴随着总蛋白降低,常见于营养不良、慢性胃肠道疾病等,糖尿病、甲状腺功能亢进、高烧、外伤等可造成蛋白消耗过多,高白蛋白血症则常见于脱水或血液浓缩。

7.总胆红素(TBIL)

参考值:新生儿24h内<150μmol/L 成人:0~20.0μmol/L

降低常见于严重肝衰竭病人。

总胆红素增高临床上表现有黄疸,超过20.1μmol/L时有临床意义;增高到

34.2μmol/L表现出黄疸体征。红细胞大量破坏、胆道阻塞、肝脏疾病,均可

导致血中胆红素增高而引起黄疸。因此,总胆红素的测定对有无黄疸及黄疸深度的鉴别、肝细胞损害程度和预后的判断等具有重要的临床意义。血清总胆红素降低见于:再生障碍性贫血、慢性肾炎等。

8.直接胆红素(DBIL)

参考值:0~8.8μmol/L

直接胆红素测定是常用肝功能试验之一,直接胆红素增高临床上多见于肝细胞受损、肝内外胆道阻塞、代偿性肝硬化、急性黄疸肝萎缩等疾病。因此,直接胆红素的测定对于对溶血性黄疸、新生儿黄疸、肝脏疾病的的诊断具有重要的临床意义。

三、肾功检查项目临床意义(3项)

1.尿素(UREA)

参考值:血清/血浆1.7~8.3mmol/L(尿素氮5~23mg/dL)

浓度升高可引起三类氮质血症:肾前性氮质血症,肾性氮质血症,肾后性氮质血症.浓度降低一般见于婴儿,孕妇等,无意义.

尿素氮增高可见下列三种情况:(1)肾性增高见于急性肾炎、慢性肾炎、中毒性肾炎、严重肾盂肾炎、肾结核、肾血管硬化症、先天性多囊肾和肾肿瘤等引起的肾功能障碍。尤其是对尿毒症的诊断有特殊价值,其增高程度与病情严重性成正比,如氮质血症期UREA超过9mmol/L,至尿毒症期UREA可超过20mmol/L,有助于病情的估计。(2)肾前性增高见于充血性心力衰竭、重度烧伤、休克、消化道大出血、脱水、严重感染、糖尿病酸中毒、肾上腺皮质功能减退、肝肾综合征等。(3)肾后性增高见于因尿路梗阻增加肾组织压力,使肾小球滤过压降低时,如前列腺肥大、肿瘤压迫所致的尿道梗阻或

两侧输尿管结石等。减少:临床意义较小,偶见于急性肝萎缩、中毒性肝炎、类脂质肾病等。尿素浓度降低常见于:严重的肝坏死。

2.尿酸(UA)

参考值:血清/血浆女性140~360μmol/L,男性200~480μmol/L;尿液:≤4.76mmol/24h

浓度升高多见于痛风,白血病等,肾功能受损也会增高,但不作为指标;降低见于剥脱性皮炎等.

尿酸增高:血尿酸测定对痛风诊断最有帮助,痛风患者血清中尿酸常增高。核酸代谢增加:如白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症。肾脏疾病:急性或慢性肾炎时,血中尿酸显著增高,其增高程度较非蛋白氮、尿素氮、肌酐更显著,出现更早。由于肾外因素对尿酸的影响较大,故血尿酸升高程度往往与肾功能损害程度不平行。其他:氯仿中毒、四氯化碳中毒、铅中毒、子痫、妊娠反应、饮食中脂肪过多、肥胖、糖尿病等。尿酸减少:遗传性黄嘌呤尿症和剥脱性皮炎等。

3.肌酐(CR)

参考值:

苦味酸法:血清/血浆女性53~97μmol/L,男性80~115μmol/L;尿液女性97~177μmol/24h,男性124~230μmol/24h

酶法:血清/血浆女性44 - 106umol/L,男性53-123 umol/L;首次晨尿:1530-15320umol/L;24小时尿:6.6-15.0mmol/d;

肌酐浓度反应肾脏损害、尿路通畅性等肾功能,是一项比尿素尿酸更特异的肾功能指标,受饮食等因素的影响较少,与疾病严重性平行.

血浆肌酐浓度反映肾脏损害、肾小球滤过率、尿路通畅性等肾功能,是一项比尿素、尿酸更特异的肾功能指标。因为肌酐浓度受饮食、运动、激素、蛋白质分解代谢等因素的影响较少。肾脏代偿与储备能力强,只有肾功能明

显受损才使肌酐浓度升高。肌酐增高:肾病初期肌酐值常不高,直至肾实质性损害,血肌酐值才升高。其值升高3~5倍提示有尿毒症的可能,升高10倍,常见于尿毒症。如果肌酐和尿素氮同时升高,提示肾严重损害,如果尿素氮升高而肌酐不高常为肾外因素所致。肌酐降低:肾衰晚期、肌萎缩、贫血、白血病、尿崩症等。肌酐含量的测定常用于肾功能的评价。

四、糖代谢检查项目临床意义(1项)

1.葡萄糖(GLU)

参考值:3.9~6.4mmol/L

病理性增高常见于胰岛功能低下,脑震荡,脑溢血等;病理性减低见于呆小症,长期营养不良,酒精中毒等。

生理性高血糖:见于饭后1~2小时;摄入高糖食物后或情绪紧张肾上腺素分泌增加时。病理性高血糖:内分泌腺功能障碍引起高血糖;颅内压增高,颅内压增加刺激血糖中枢使血糖水痘升高;脱水引起高血糖;如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度升高麻醉、感染性疾病、毒血症、抽搐、胰腺炎、胰腺癌等情况下也可出现高血糖。生理性低血糖:见于饥饿和剧烈运动。病理性低血糖:对抗胰岛素的激素分泌不足,如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长素、肾上腺皮质激素分泌减少;严重肝病患者,由于肝脏储存糖原及糖异生等功能低下,肝脏不能有效地调节血糖。血糖测定在临床上具有重要的诊断意义。

生化反应基础知识

(半)自动生化分析仪工作原理 一、基本结构 (一)按照反应装置的结构,自动生化分析仪主要分为流动式(Flow system)、分立式(Discrete system)两大类。 1.流动式指测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应在同一管道流动的过程中完成。这是第一代自动生化分析仪。 2.分立式指各待测样品与试剂混合后的化学反应都是在各自的反应杯中完成。其中有几类分支。 (1)典型分立式自动生化分析仪。此型仪器应用最广。 (2)离心式自动生化分析仪,每个待测样品都是在离心力的作用下,在各自的反应槽内与试剂混合,完成化学反应并测定。由于混合,反应和检测几乎同时完成,它的分析效率较高。3.袋式自动生化分析仪是以试剂袋来代替反应杯和比色杯,每个待测样品在各自的试剂袋内反应并测定。 4.固相试剂自定生化分析仪(亦称干化学式自动分析仪) 是将试剂固相于胶片或滤纸片等载体上,每个待测样品滴加在相应试纸条上进行反应及测定。操作快捷、便于携带是它的优点。 (二)典型分立式自动生化分析仪基本结构 1.样品(Sample)系统 样品包括校准品、质控品和病人样品。系统一般由样品装载、输送和分配等装置组成。 样品装载和输送装置常见的类型有: (1)样品盘(Sample disk),即放置样品的转盘有单圈或内外多圈,单独安置或与试剂转盘或反应转盘相套合,运行中与样品分配臂配合转动。有的采用更换式样品盘,分工作和待命区,其中放置多个弧形样品架(Sector)作转载台,仪器在测定中自动放置更换,均对样品盘上放置的样品杯或试管的高度、直径和深度有一定要求,有的需专用样品杯,有的可直接用采血试管。样品盘的装载数,以及校准品、质控品、常规样品和急诊样品的装载数,一般都是固定的。这些应根据工作需要选择。 (2)传动带式或轨道式进样即试管架(Rack)不连续,常为10个一架,靠步进马达驱动传送带,将试管架依次前移,再单架逐管横移至固定位置,由样品分配臂采样。 (3)链式进样试管固定排列在循环的传动链条上,水平移动到采样位置,有的仪器随后可清洗试管。 分配加样装置大都由注射器、步进马达或传动泵、加样臂和样品探针等组成,①注射器(syrine unit)。根据注射器直径和活塞移动距离的多少,定量吸取样品或试剂。它的精度决定加样的精度,一般可精确到1微升。注射器漏液时,首先考虑是否探针堵塞,其次是注射器活塞磨损等。有的加液系统采用容积型注射泵和数控脉冲步进马达,提高精度。②样品探引(Probe)与加样臂相联,直接吸取样品。探针均设有液面感应器,防止探针损伤和减少携带污染。有的设有阻塞检测报警系统当探针样品中的血凝块等物质阻塞时.仪器会自动报警冲洗探针,并跳过当前样品,对下一样品加样。有的还有智能化防撞装置遇到阻碍探针立即停止运动并报警。即使如此,它仍是非正规操作时的易损件。为了保护探针,除预先需要根据样品容器的高低、最低液面高度等进行设置外、,样品容器的规格、放置以及液面高度等设定条件不得随意改变。在某些仪器上,采样器和加液器组合在一起,加样品和加试剂或稀释液一个探针一次完成。③加样臂。连接探引,在样品杯(试剂瓶)和反应杯之间运动,完成采样和加样(加试剂)。它的运动方式,与仪器工作效率及工作寿命有一定关系。④阀门用以决定液体流动方向。⑤稀释系统。对样品进行预稀释、过后稀释或加倍,对标准原液系列稀释等。不同仪器的稀释方式有所差异,要注意识别。试剂系统亦有稀释功能:

化学试剂的分类

(一) 化学试剂 1. 化学试剂的分类 化学试剂数量繁多,种类复杂,通常根据用途分为一般试剂、基础试剂、高纯试剂、色谱试剂、生化试剂、光谱纯试剂和指示剂等。采用的标准为国家标准(标以“GB”字样)和行业标准(标以“HG”字样)。食品检验常用的试剂主要有一般试剂、基础试剂、高纯试剂和专用试剂等。 化学试剂的分级: 除此之外还有许多特殊规格试剂,如基准试剂、色谱纯试剂、光谱纯试剂、电子纯试剂、生化试剂和生物染色剂等。使用者要根据试剂中所含杂质对检测有无影响选用合适的试剂。 (1) 一般试剂 根据GB 15346-1994《化学试剂的包装及标志》规定,一般试剂分为三个等级,即优级纯、分析纯和化学纯。通常也将实验试剂列入一般试剂。 (2) 基础试剂 可用作基准物质的试剂叫做基准试剂,也可称为标准试剂。基础准试剂可用来直接配制标准溶液,用来校正或标定其他化学试剂。 如在配置标准溶液时用于标定标准溶液用的基准物 (3) 高纯试剂 高纯试剂不是指试剂的主体含量,而是指试剂的某些杂质的

含量而言。高纯试剂等级表达方式有数种,其中之一是以内处“9”表示,如用于9.99%,99.999%等表示。“9”的数目越多表示纯度越高,这种纯度的是由100%减去杂质的质量百分数计算出来的。 (4) 专用试剂 专用试剂是指具有专门用途的试剂。例如仪器分析专用试剂中色谱分析标准试剂、气相色谱载体及固定液、薄层分析试剂等。与高纯试剂相似之处是,专用试剂不仅主体含量较高,而且杂质含量很低。它与高纯试剂的区别是,在特定的用途中有干扰的杂质成分只须控制在不致产生明显干扰的限度 以下。 表1 .1 化学试剂等级对照表 其他级别化学试剂等级对照表

生化试剂的基础知识

生化试剂得基本知识 一、生化试剂得分类 (2) (一).......................................................................... 按照化学性质分类 (2) (二)按照临床应用分类 2 二、反应速度特性 (2) (一).......................................................................... 终点法试剂 2 (二)动力学法试剂 3 三、显色原理 (4) {—) NAD-NADH 与NADP-NADPH 系统 (5) (二)p-NP 与p-NA 系统 (5) (三)H2O2 偶联得指示系统 5 (四).......................................................................... 抗原抗体反应指示系统.. (5) (五).......................................................................... 其它显色反应 6 四、性能评价方法 (6) (一)主要性能指标:6 (二)性能评价方法 (6) 一、生化试剂得分类

(一)按照化学性质分类 1.酶类:包括ALIAST, ALP, ACP, r-GT u —HBDH,LDH,CK,CK—MB, u -AMY, MSO, ADA,ChE 等。 2.底物/代谢产物类:包括TG, TC,HDL-C, LDL-C,UA, UREA, Cr, Glu, TP,Alb,T-Bil,TBA,NH4+, CO2 等. 3.无机离子类:包括Ca, P, Mg, Cl等。 4.特种蛋白类:包括apoAl, apoB,Lp (a), C3,C4,PFB (B 因子)>IgGJgAJgM 等。 (二)按照临床应用分类 1.无机离子:包括Ca, P, Mg, Cl等。 2.肝功能:包括ALL AST, r—GTALRMSOJ-Bil, D—Bil, TBA,TP, Alb 等. 3.肾功能:UA, UREA, Cr 等。 4.心肌酶谱:CK, CK—MB, LDH,a-HBDH,AS「MSO。 5.糖尿病:GLU等。 6.前列腺疾病:ACP, p-ACP等. 7.胰腺炎:? -AMY. 8.血脂:TC,TG, HDL-C,LDL—C,apoAl,apoB, Lp (a)。 9.痛风:UA. 10.有机磷中毒:ChEo 11.免疫性疾病:C3, C4, PFB (B 因子),IgGJgAJgM, Kappa 链,Lambda 链。 二、反应速度特性 按照反应速度,可以分为终点法试剂与动力学试剂。而动力学试剂又可再分为零级动力学法与 一级动力学法。 (-)终点法试剂 终点法,指经过一段时间(一般为几分钟)得反应,反应进行到完全,使全部底物(被测物) 转变成产物,称终点法,更确切地说应称平衡法,这就是最理想得分析类型。如图(1)。 整个反应达到平衡,由于正向反应得平衡常数很大,可认为所有得被测定物已转变为产物,反 应液得吸光度不再增加(或降低),吸光度得增加(或降低)程度与被测定物得浓度成正比. 终点法对反应条件(如酶量、pH、温度)小得改变不敏感,只要这种改变不影响在一左时间内 反应达到平衡即可,就是最理想得反应模型。

生化试剂的种类及意义

考核生化试剂得种类及意义 一、血脂类检查项目(13项) 1.总胆固醇(CHO) 参考值:0~5、2mmol/L(90~200mg/dL) 高胆固醇血症与动脉粥样硬化得形成有明确关系,血液胆固醇增高多见于甲状腺功能减低,糖尿病等;胆固醇降低见于营养不良,肝功能严重低下等。 血清胆固醇得测定可用作肝脏功能、胆汁功能、肠吸收功能与冠状动脉疾病得诊断指标。它在高脂蛋白血症得诊断与分类方面也有着重要得意义。血清总胆固醇超过 5、70mmol/L可考虑为高胆固醇血症,高胆固醇血症容易引起动脉粥样硬化,造成堵塞性心脑血管疾病,病理性高胆固醇血症见于肾病综合症、糖尿病、甲状腺功能减退。胆固醇降低常见于:贫血、肝硬化、甲亢、营养不良等。 因此,胆固醇得测定对于血脂疾病得诊断具有重要得临床意义。 2.甘油三酯(TG) 参考值:0、7~1、7mmol/L 高甘油三酯血症为心血管疾病得危险因素,降低则见于甲状腺功能亢进,肝功能严重低下等。 测定甘油三酯得重要意义在于诊断与处理高脂血症。这些疾病可能就是原发性得,或就是继发于其它疾病如肾病、糖尿病与内分泌失调。甘油三酯增高常见于:高脂血症、肾病综合症、糖尿病、肝胆疾病、动脉粥样硬化、甲减等。甘油三酯降低常见于:严重营养不良、脂肪消化吸收障碍、甲亢。甘油三酯升高已被证实就是冠状动脉硬化性心脏病得危险因素。因此,甘油三酯得测定就是对于血脂疾病得诊断具有重要得临床意义。 3.高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 参考值:0、77~2、25mmol/L(47~65mg/dl) 降低见于急、慢性肝病,糖尿病,慢性贫血等 高密度脂蛋白胆固醇得主要生理功能就是转运磷脂与胆固醇,它就是一种抗动脉粥样硬化得脂蛋白,就是冠心病得保护因子,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量与动脉管腔狭窄程度呈显著得负相关。临床上以不同种类脂蛋白比例得分析作为不同类型得高脂蛋白症得鉴别诊断。高密度脂蛋白胆固醇增高常见于:饮酒、长期体力活动等。高密度脂蛋白胆固醇降低常见于:冠心病、脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化等。 4.低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) 参考值:1、27~4、13mmol/L(80~120mg/dl) 低密度脂蛋白胆固醇用于冠心病与动脉粥样硬化得诊断。动脉粥样硬化(AS)斑块中沉淀得脂质主要就是低密度脂蛋白(LDL),在各类脂质中,LDL被认为就是主要得致病因素,而高密度脂蛋白(HDL)可能起保护作用,血清总胆固醇(TC)大致反映LDL胆固醇(LDL-CHO)水平,但也受HDL-C水平得影响,因此在AS脂类危险因素判别中,TC偏高时,测定LDL-C有重要临床意义。 5.载脂蛋白A1(ApoA1) 参考值:女性:1、20~1、90g/L 男性:1、20~1、76g/L

常用生化试剂品名

常用生化试剂品名 Tris:Tris(Hydroxymethyl)aminomethane 三羟甲基氨基甲烷分子式: NH2C(CH2OH)3 分子量: 121.14 TRIS 是一种最常用的生物缓冲液,常配成PH 值为 6.8,7.4,8.0,8.8。其PH 值随温度变化很大。一般来说,温度每升高一度,PH 值下降0.03。 EDTA:Ethylene Diamine Tetraacetic Acid 乙二胺四乙酸分子式: C10H16N2O8 分子量: 292.248 EDTA 是化学中一种良好的配合剂,它有六个配位原子,形成的配合物叫做鳌合物,EDTA 在配位滴定中经常用到,一般是测定金属离子的含量。 尿素:(脲碳酰胺; 碳酰二胺脲)尿素:脲; 碳酰胺碳酰二胺脲)Urea (分子式: CH4N2O 分子量: 60.05 尿素易溶于水,在20℃时100 毫升水中可溶解105 克。 SDS:dodecyl sulfate, sodium salt 十二烷基硫酸钠:分子式: C12H25SO4Na 分子量: 288.38 溶解性:溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿、醚。健康危害:对粘膜和上呼吸道有刺激作用,对眼和皮肤有刺激作用。可引起呼吸系统过敏性反应。SDS 是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂。它用于确定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝胶电泳。它也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸:蛋白复合物。在乳液聚合反应中,可充当两相溶液的乳化剂。 DTT:DL-Dithiothreitol二硫苏糖醇分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25 常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。DTT 和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT 的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。DTT 的用途之一是作为巯基化DNA 的还原剂和去保护剂。巯基化DNA 末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA 在生物感应器中的固定)的效率;而在DNA 溶液中加入DTT,反应一段时间后除去,就可以降低DNA 的二聚化。DTT 也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。但DTT 往往无法还原包埋于蛋白质结构内部(溶剂不可及)的二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性(高温。反之,根据DTT 存加热或加入变性剂,如6M 盐酸胍、8M 尿素或1% SDS) 在情况下,二硫键还原速度的不同,可以判断其包埋程度的深浅。1mol/L 二硫苏糖醇(DTT)溶液【配制方法】用20ml 0.01mol/L 乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml 小份贮存于-20℃。DTT 或含有DTT 的溶液不能进行高压处理。 CHAPS:3-[(3-胆固醇氨丙基二甲基氨基:胆固醇氨丙基)二甲基氨基胆固醇氨丙基二甲基氨基]-1-丙磺酸丙磺酸分子式为C32H58N2O7,分子量为614.88 两性表面活性剂,CHAPS 是一种非变性的zwitterionic 去垢剂、蛋白质裂解液,用于增溶膜蛋白和裂解蛋白-蛋白之间的相互作用。CHAPS 是两性离子去垢剂,分子结构中具有一个胆酸和硫代甜菜碱。在紫外区的低吸光性成为用紫外方法检测膜蛋白的首选去垢剂,CMC 值均为8 mM。常用于于双向电泳等实验。原理:CHAPS 保护蛋白质的天然状态,可溶解膜蛋白,从而解除蛋白与蛋白质间的相互作用。透析可除去。

基础16项生化试剂的种类及意义

考核生化试剂的种类及意义 一、血脂类检查项目(4项) 1.总胆固醇(CHO) 参考值:0~5.2mmol/L(90~200mg/dL) 高胆固醇血症与动脉粥样硬化的形成有明确关系,血液胆固醇增高多见于甲状腺功能减低,糖尿病等;胆固醇降低见于营养不良,肝功能严重低下等。 血清胆固醇的测定可用作肝脏功能、胆汁功能、肠吸收功能和冠状动脉疾病的诊断指标。它在高脂蛋白血症的诊断和分类方面也有着重要的意义。血清总胆固醇超过5.70mmol/L可考虑为高胆固醇血症,高胆固醇血症容易引起动脉粥样硬化,造成堵塞性心脑血管疾病,病理性高胆固醇血症见于肾病综合症、糖尿病、甲状腺功能减退。胆固醇降低常见于:贫血、肝硬化、甲亢、营养不良等。 因此,胆固醇的测定对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。 2.甘油三酯(TG) 参考值:0.7~1.7mmol/L 高甘油三酯血症为心血管疾病的危险因素,降低则见于甲状腺功能亢进,肝功能严重低下等。 测定甘油三酯的重要意义在于诊断和处理高脂血症。这些疾病可能是原发性的,或是继发于其它疾病如肾病、糖尿病和内分泌失调。甘油三酯增高常见于:高脂血症、肾病综合症、糖尿病、肝胆疾病、动脉粥样硬化、甲减等。 甘油三酯降低常见于:严重营养不良、脂肪消化吸收障碍、甲亢。甘油三酯升高已被证实是冠状动脉硬化性心脏病的危险因素。因此,甘油三酯的测定是对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。

3.高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 参考值:0.77~2.25mmol/L(47~65mg/dl) 降低见于急、慢性肝病,糖尿病,慢性贫血等 高密度脂蛋白胆固醇的主要生理功能是转运磷脂和胆固醇,它是一种抗动脉粥样硬化的脂蛋白,是冠心病的保护因子,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。临床上以不同种类脂蛋白比例的分析作为不同类型的高脂蛋白症的鉴别诊断。高密度脂蛋白胆固醇增高常见于:饮酒、长期体力活动等。高密度脂蛋白胆固醇降低常见于:冠心病、脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化等。 4.低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) 参考值:1.27~4.13mmol/L(80~120mg/dl) 低密度脂蛋白胆固醇用于冠心病和动脉粥样硬化的诊断。动脉粥样硬化(AS)斑块中沉淀的脂质主要是低密度脂蛋白(LDL),在各类脂质中,LDL被认为是主要的致病因素,而高密度脂蛋白(HDL)可能起保护作用,血清总胆固醇(TC)大致反映LDL胆固醇(LDL-CHO)水平,但也受HDL-C水平的影响,因此在AS脂类危险因素判别中,TC偏高时,测定LDL-C有重要临床意义。 二、肝功类检查项目(8项) 1.碱性磷酸酶(ALP) 参考值:45~135U/L 是监测胎盘功能状况的指标。 碱性磷酸酶几乎存在于人体的各个组织中,以骨骼、肾脏和肝脏中含量较多。其病理性变化表现在:升高:阻塞性黄疸、急慢性黄疸性肝炎、肝癌、纤维性骨炎、佝偻病、骨转移癌等。降低:呆小症、维生素C缺乏症等。

生化试剂的种类及意义

生化试剂的种类及意义

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考核生化试剂的种类及意义 一、血脂类检查项目(13项) 1.总胆固醇(CHO) 参考值:0~5.2mmol/L(90~200mg/dL) 高胆固醇血症与动脉粥样硬化的形成有明确关系,血液胆固醇增高多见于甲状腺功能减低,糖尿病等;胆固醇降低见于营养不良,肝功能严重低下等。 血清胆固醇的测定可用作肝脏功能、胆汁功能、肠吸收功能和冠状动脉疾病的诊断指标。它在高脂蛋白血症的诊断和分类方面也有着重要的意义。血清总胆固醇超过5.70mmol/L可考虑为高胆固醇血症,高胆固醇血症容易引起动脉粥样硬化,造成堵塞性心脑血管疾病,病理性高胆固醇血症见于肾病综合症、糖尿病、甲状腺功能减退。胆固醇降低常见于:贫血、肝硬化、甲亢、营养不良等。 因此,胆固醇的测定对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。 2.甘油三酯(TG) 参考值:0.7~1.7mmol/L 高甘油三酯血症为心血管疾病的危险因素,降低则见于甲状腺功能亢进,肝功能严重低下等。 测定甘油三酯的重要意义在于诊断和处理高脂血症。这些疾病可能是原发性的,或是继发于其它疾病如肾病、糖尿病和内分泌失调。甘油三酯增高常见于:高脂血症、肾病综合症、糖尿病、肝胆疾病、动脉粥样硬化、甲减等。甘油三酯降低常见于:严重营养不良、脂肪消化吸收障碍、甲亢。甘油三酯升高已被证实是冠状动脉硬化性心脏病的危险因素。因此,甘油三酯的测定是对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。 3.高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 参考值:0.77~2.25mmol/L(47~65mg/dl) 降低见于急、慢性肝病,糖尿病,慢性贫血等 高密度脂蛋白胆固醇的主要生理功能是转运磷脂和胆固醇,它是一种抗动脉粥样硬化的脂蛋白,是冠心病的保护因子,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。临床上以不同种类脂蛋白比例的分析作为不同类型的高脂蛋白症的鉴别诊断。高密度脂蛋白胆固醇增高常见于:饮酒、长期体力活动等。高密度脂蛋白胆固醇降低常见于:冠心病、脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化等。 4.低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) 参考值:1.27~4.13mmol/L(80~120mg/dl) 低密度脂蛋白胆固醇用于冠心病和动脉粥样硬化的诊断。动脉粥样硬化(AS)斑块中沉淀的脂质主要是低密度脂蛋白(LDL),在各类脂质中,LDL被认为是主要的致病因素,而高密度脂蛋白(HDL)可能起保护作用,血清总胆固醇(TC)大致反映LDL胆固醇(LDL-CHO)水平,但也受HDL-C水平的影响,因此在AS脂类危险因素判别中,TC偏高时,测定LDL-C有重要临床意义。

常用生化试剂作用

常用生化试剂作用: 1、蛋白酶K:能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,在尿素和SDS中稳定。一般工作浓度是50—100μg/ml,推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。 2、SDS:十二烷基硫酸钠,溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀。 3、IPTG:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,常用于蓝白斑筛选及IPTG 诱导的细菌内的蛋白表达等。IPTG和乳糖的结构相似,所以它和乳糖一样,可以与乳糖操纵元的阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白的空间构像变化,四聚体解聚成单体,失去与操纵子特异性结合的能力,从而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以转录合成利用乳糖的酶类。与乳糖不同的是,IPTG不被β-半乳糖苷酶水解。常与X-GAL一起用于蓝白斑筛选。作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定。 4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的显色试剂,在IPTG的催化下显蓝色。常跟IPTG一起用与蓝白斑筛选。 5、G418:一种抗生素,对几乎所有的细胞都有毒性,是稳定转染最常用的选择试剂。当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。G418的这一选择特性,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。

6、DMSO:二甲基亚砜。实验室常用于作液体层析溶剂,同时用作测试物质紫外消光值上时用作参照物。能溶于所有烷烃和烯烃。 7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的细胞裂解液成分之一,在保护蛋白活性方面有一定作用,能力介于NP40和SDS之间,偏向于NP40。 8、NP-40:很温和的去垢剂,1%浓度的基本可以破坏掉胞膜,而对核膜破坏的作用弱,结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。 9、BSA:牛血清白蛋白,主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。常用于蛋白定量中的内参和抗体稀释液。 10、甲酰胺:甲酰胺被用作凝胶电泳中RNA的稳定剂,也用于稳定毛细管电泳中的变性单股DNA。 11、TEMED:四甲基乙二胺。促凝剂。在中性及碱性pH条件下,加入TEMED可加速凝胶聚合。 12、巯基乙醇:一种强还原剂。可还原蛋白二硫键,从而使蛋白保持溶解状态,有利于与SDS的结合。使蛋白解离成单个亚基。 13、甲叉双丙烯酰胺:N,N'-甲叉双丙烯酰胺,别名MBA,又叫亚甲基双丙烯酰胺,次甲基双丙烯酰胺,N,N'-甲撑双丙烯酰胺。作交联剂与丙烯酰胺聚合而制备聚丙烯酰胺凝胶。 14、过硫酸铵:过硫酸铵(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝剂TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。

生化试剂的基础知识

生化试剂的基本知识 一、生化试剂的分类 (2) (一) 按照化学性质分类 (2) (二) 按照临床应用分类 (2) 二、反应速度特性 (2) (一) 终点法试剂 (2) (二) 动力学法试剂 (3) 三、显色原理 (4) (一) NAD-NADH和NADP-NADPH系统 (5) (二) p-NP和p-NA系统 (5) (三) H2O2偶联的指示系统 (5) (四) 抗原抗体反应指示系统 (5) (五) 其它显色反应 (6) 四、性能评价方法 (6) (一) 主要性能指标: (6) (二) 性能评价方法 (6)

一、生化试剂的分类 (一)按照化学性质分类 1.酶类:包括ALT,AST,ALP,ACP,r-GT,α-HBDH,LDH,CK,CK-MB,α-AMY,MSO,ADA,ChE等。 2.底物/代产物类:包括 TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA,UREA,Cr,Glu,TP,Alb,T-Bil,TBA,NH4+,CO2等。 3.无机离子类:包括Ca,P,Mg,Cl等。 4.特种蛋白类:包括apoAl,apoB,Lp(a),C3,C4,PFB(B因子),IgG,IgA,IgM等。 (二)按照临床应用分类 1.无机离子:包括Ca,P,Mg,Cl等。 2.肝功能:包括ALT,AST,r-GT,ALP,MSO,T-Bil,D-Bil,TBA,TP,Alb等。 3.肾功能:UA,UREA,Cr等。 4.心肌酶谱:CK,CK-MB,LDH,α-HBDH,AST,MSO。 5.糖尿病:GLU等。 6.前列腺疾病:ACP,p-ACP等。 7.胰腺炎:α-AMY。 8.血脂:TC,TG,HDL-C,LDL-C,apoA1,apoB,Lp(a)。 9.痛风:UA。 10.有机磷中毒:ChE。 11.免疫性疾病:C3,C4,PFB(B因子), IgG,IgA,IgM,Kappa链,Lambda链。 二、反应速度特性 按照反应速度,可以分为终点法试剂和动力学试剂。而动力学试剂又可再分为零级动力学法和一级动力学法。 (一)终点法试剂 终点法,指经过一段时间(一般为几分钟)的反应,反应进行到完全,使全部底物(被测物)转变成产物,称终点法,更确切地说应称平衡法,这是最理想的分析类型。如图(1)。 整个反应达到平衡,由于正向反应的平衡常数很大,可认为所有的被测定物已转变为产物,反应液的吸光度不再增加(或降低),吸光度的增加(或降低)程度与被测定物的浓度成正比。 终点法对反应条件(如酶量、pH、温度)小的改变不敏感,只要这种改变不影响在一定时间反应达到平衡即可,是最理想的反应模型。

检验科基础知识培训

检验科基础知识培训 一,检验科室组成 生化室、临床检验室、免疫室、细菌室(微生物室) 二,生化室仪器与试剂 生化室是检验科开展生化检验的实验室。其设备主要有 721/722分光光度计、半自动生化分析仪、全自动生化分析仪、电解质分析仪、血凝分析仪、血气分析仪、水浴锅、离心机。 耗材主要有试管、注射器、真空采血管、采血针、样品杯、试 剂。 全自动生化分析仪 全自动生化分析仪按测定速度分小型、中型、大型、超大型四 种,这是我们自己划分的,以方便记忆和区别。 测试速度是以单位时间生化分析仪能够完成测试的生化项目数 以200左右测试速度为小型机 小型机适用县级中医院、妇保院、乡镇卫生院 以400左右测试速度为中型机 中型机适用县医院、地市级中医院妇保院 以800左右测试速度为大型机 大型机适用县医院、地市级医院中医院妇保院 800以上至翻倍速度为超大型机 超大型机适用地市级以上医院中医院妇保院 全自动生化分析仪有国产和进口之分,多数医院喜欢进口仪器。

进口仪器品牌有: 罗氏、日立、奥林巴斯、贝克曼、东芝、雅培、西门子、日本电子(BM6010)、希森美康,其中奥林巴斯生化仪被贝克曼收购,成为一个公司两个品牌,西门子生化仪是贴牌日本电子。 国产仪器品牌主要有: 上海科华、南京英诺华、深圳迈瑞、长春迪瑞(四川新成) 全自动生化分析仪又有湿化学和干化学两类机器。 上面讲的进口和国产都是湿化学生化分析仪。 湿化学和干化学的本质区别是试剂的物理性状。 湿化学的试剂是液体的,干化学的试剂是以干片形式存在。 两种试剂价格比较,干片试剂价格较高, 目前市场上以强生的干片机为主,其它品牌有希森美康、罗氏等,较少见。还没有国产干片生化仪。 全自动生化分析仪耗材有: 试剂、标准品、质控品、清洗液、样品杯、采血管等。 标本类型:血清、血浆、尿液、胸腹水等。 生化分析仪测定项目: 生化分析仪的测定项目与人体脏器功能、人体内环境、营养状况等密切相关。 AST——谷草转氨酶(天门冬氨酸氨基转移酶)/ALT——谷丙转氨酶(丙氨酸氨基转移酶)在人体广泛存在,在心肌、肝脏活性最高,因此,AST/ALT可用于心肌炎、心肌梗塞、急性肝炎、

生化试剂的划分标准

生化试剂的划分标准 生物化学试剂的纯度目前在我国划分为以下几种,此外,还有特种试剂,生产量极小,几乎是按需定产,此类试剂其数量和质量一般为用户所指定。 国标试剂:该类试剂为我国国家标准所规定,适用于检验、鉴定、检测 基准试剂(JZ,绿标签):作为基准物质,标定标准溶液。 优级纯(GR,绿标签)(一级品):主成分含量很高、纯度很高,适用于精确分析和研究工作,有的可作为基准物质。 分析纯(AR,红标签)(二级品):主成分含量很高、纯度较高,干扰杂质很低,适用于工业分析及化学实验。 化学纯(CP,蓝标签)(三级品):主成分含量高、纯度较高,存在干扰杂质,适用于化学实验和合成制备。 实验纯(LR,黄标签):主成分含量高,纯度较差,杂质含量不做选择,只适用于一般化学实验和合成制备。 教学试剂:可以满足学生教学目的,不至于造成化学反应现象偏差的一类试剂。 指定级(ZD),该类试剂是按照用户要求的质量控制指标,为特定用户订做的化学试剂。 高纯试剂(EP):包括超纯、特纯、高纯、光谱纯,配制标准溶液。此类试剂质量注重的是:在特定方法分析过程中可能引起分析结果偏差,对成分分析或含量分析干扰的杂质含量,但对主含量不做很高要求。 色谱纯(LC):液相色谱分析标准物质。质量指标注重干扰液相色谱峰的杂质。主成分含量高 色谱纯(GC):气相色谱分析专用。质量指标注重干扰气相色谱峰的杂质。主成分含量高。

指示剂(ID):配制指示溶液用。质量指标为变色范围和变色敏感程度。可替代CP,也适用于有机合成用。 生化试剂(BR):配制生物化学检验试液和生化合成。质量指标注重生物活性杂质。可替代指示剂,可用于有机合成 生物染色剂(BS):配制微生物标本染色液。质量指标注重生物活性杂质。可替代指示剂,可用于有机合成 电子纯(MOS):适用于电子产品生产中,电性杂质含量极低。 光谱纯(SP):用于光谱分析。分别适用于分光光度计标准品、原子吸收光谱标准品、原子发射光谱标准品 当量试剂(3N、4N、5N):主成分含量分别为99.9%、99.99%、99.999%以上。 电泳试剂:质量指标注重电性杂质含量控制。 分析纯比化学纯的纯度要略高一些,但也不是分析纯就一定到多少个九,依据不同的试剂,按国标来划分。 本文由广州深华实验室仪器设备整合发布

生化试剂的基础知识

生化试剂的基础知识

生化试剂的基本知识

一、生化试剂的分类 (一)按照化学性质分类 1.酶类:包括ALT,AST,ALP,ACP,r-GT,α -HBDH,LDH,CK,CK-MB,α-AMY,MSO,ADA,ChE 等。 2.底物/代谢产物类:包括 TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA,UREA,Cr,Glu,TP,Alb ,T-Bil,TBA,NH4+,CO2等。 3.无机离子类:包括Ca,P,Mg,Cl等。 4.特种蛋白类:包括 apoAl,apoB,Lp(a),C3,C4,PFB(B因子),IgG,IgA,IgM等。 (二)按照临床应用分类 1.无机离子:包括Ca,P,Mg,Cl等。 2.肝功能:包括ALT,AST,r-GT,ALP,MSO, T-Bil,D-Bil,TBA,TP,Alb等。 3.肾功能:UA,UREA,Cr等。 4.心肌酶谱:CK,CK-MB,LDH,α-HBDH,AST, MSO。 5.糖尿病:GLU等。 6.前列腺疾病:ACP,p-ACP等。

7.胰腺炎:α-AMY。 8.血脂:TC,TG,HDL-C,LDL-C,apoA1,apoB, Lp(a)。 9.痛风:UA。 10.有机磷中毒:ChE。 11.免疫性疾病:C3,C4,PFB(B因子), IgG, IgA,IgM,Kappa链,Lambda链。 二、反应速度特性 按照反应速度,可以分为终点法试剂和动力学试剂。而动力学试剂又可再分为零级动力学法和一级动力学法。 (一)终点法试剂 终点法,指经过一段时间(一般为几分钟)的反应,反应进行到完全,使全部底物(被测物)转变成产物,称终点法,更确切地说应称平衡法,这是最理想的分析类型。如图(1)。 整个反应达到平衡,由于正向反应的平衡常数很大,可认为所有的被测定物已转变为产物,反应液的吸光度不再增加(或降低),吸光度的增加(或降低)程度与被测定物的浓度成正比。

生化试剂

一、生化试剂概况 生化试剂(Biochemical reagent)是指有关生命科学研究的生物材料或有机化合物,以及临床诊断、医学研究用的试剂。生物学的研究已从细胞水平发展到分子水平,可以上说是50年代以来发展最快的学科之一。用生物化学和分子生物学的方法与技术研究生命现象本身,已经应用于生物学的各个领域。生化试剂可以定义为:生命科学中所用的化学试剂。 自20世纪50年代以来,分子生物学是生物学的前沿与生长点,生物大分子,特别是蛋白质和核酸结构功能的研究,是分子生物学的基础。 1. 以核酸为实验对象的所用的试剂习惯上称为分子生物学试剂,主要包括克隆与表达试剂(感受态细胞、载体、模板、转化试剂、转染试剂)、PCR试剂(dNTP 溶液、内切酶、聚合酶等)、反转录试剂、核酸提取与纯化试剂(DNA提取纯化、质粒提取纯化、RNA提取纯化.)、核酸电泳试剂(琼脂糖凝胶、核酸分子量标准、上样缓冲液和电泳缓冲液)。 2. 以蛋白质为实验对象所用的试剂成为蛋白质研究相关试剂。主要包括:蛋白质分析与检测(蛋白质定量,蛋白质标记以及蛋白质印迹)、蛋白质电泳试剂(聚丙烯酰胺凝胶-预制胶、蛋白质分子量标准、凝胶染色液和脱色液、上样缓冲液和电泳缓冲液)、蛋白质分离纯化试剂(电泳和离子交换层析、亲和层析、分子筛)。 3. 免疫试剂是指提供作为抗原或抗体的试剂。如人体和不同动物(如兔、羊、鼠、马、猴、鸡、犬等)的血清标志物、抗血清和标记的抗血清。免疫试剂因其高特异性,是诊断试剂的重要原料。免疫学诊断试剂正逐步取代临床生化试剂用于临床诊断。

4. 诊断试剂 按照医学检验项目,临床诊断试剂大致可分为临床化学检验试剂、免疫学和血清学检测试剂、血液学及细胞遗传学检测试剂、微生物学检测试剂、体液排泄物及脱落细胞的检测试剂、基因诊断试剂等种类。其中以临床化学所占市场份额最大,接近34%;其次为免疫学市场,约占29%。新型免疫诊断试剂和基因诊断试剂是20世纪80年代后期发展起来的,无论技术还是市场,都是目前所有诊断试剂产品中发展最快的。 4.1 免疫诊断试剂 免疫诊断试剂在诊断试剂盒中品种最多,根据诊断类别,可分为传染性疾病、内分泌、肿瘤、药物检测、血型鉴定等。从结果判断的方法学上又可分为EIA、胶体金、化学发光、同位素等不同类型试剂,其中同位素放射免疫的试剂由于对环境污染比较在,目前在国际市场上已经被淘汰,国内还有少量使用。 4.2分子诊断试剂 分子诊断试剂主要有临床已经使用的核酸扩增技术(PCR)产品和当前国内外正在大力研究开发的基因芯片产品。PCR产品灵敏度高、特异性强、诊断窗口期短,可进行定性、定量检测,曾广泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等的检测,但由于市场混乱和交叉污染等原因,卫生部严令禁止了荧光电泳定性类PCR试剂在临床的应用,目前国家食品药品监督管理局已经批准了少量已解决了交叉污染的杂交半定量和定量试剂盒。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶,综合了多种现代高精尖技术,被专家誉为诊断行业的终极产品,但成本高、开发难度大,目前产品种类很少,只用于科研和药物筛选等用途。

化验员基础知识大全

化验员基础知识大全 ?化学试剂 ?溶液的配制 ?玻璃器皿的使用和洗涤 ?实验误差及其来源 (一) 化学试剂 1. 化学试剂的分类 化学试剂数量繁多,种类复杂,通常根据用途分为一般试剂、基础试剂、高纯试剂、色谱试剂、生化试剂、光谱纯试剂和指示剂等。采用的标准为国家标准(标以“GB”字样)和行业标准(标以“HG”字样)。食品检验常用的试剂主要有一般试剂、基础试剂、高纯试剂和专用试剂等。 (一)化学试剂: 化学试剂的分级: 除此之外还有许多特殊规格试剂,如基准试剂、色谱纯试剂、光谱纯试剂、电子纯试剂、生化试剂和生物染色剂等。使用者要根据试剂中所含杂质对检测有无影响选用合适的试剂。 (1) 一般试剂 根据GB 15346-1994《化学试剂的包装及标志》规定,一般试剂分为三个等级,即优级纯、分析纯和化学纯。通常也将实验试剂列入一般试剂。 (2) 基础试剂 可用作基准物质的试剂叫做基准试剂,也可称为标准试剂。基础准试剂可用来直接配制标准溶液,用来校正或标定其他化学试剂。 如在配置标准溶液时用于标定标准溶液用的基准物。 (3) 高纯试剂 高纯试剂不是指试剂的主体含量,而是指试剂的某些杂质的含量而言。高纯试剂等级表达方式有数种,其中之一是以处“9”表示,如用于9.99%,99.999%等表示。“9”的数目越多表示纯度越高,这种纯度的是由100%减去杂质的质量百分数计算出来的。 (4) 专用试剂 专用试剂是指具有专门用途的试剂。例如仪器分析专用试剂中色谱分析标准试剂、气相色谱载体及固定液、薄层分析试剂等。与高纯试剂相似之处是,专用试剂不仅主体含量较高,而且杂质含量很低。它与高纯试剂的区别是,在特定的用途中有干扰的杂质成分只须控制在不致产生明显干扰的限度以下。

(完整版)化学试剂的一般性质及分级分类

1化学试剂的一般性质及分级分类 1.1化学试剂的一般性质 有机溶剂常具有熔、沸点低、易燃、易挥发、难溶于水而易溶于有机溶剂等特点。很多是危险试剂,在保管和使用过程中要关注他们的危险性。无机试剂中要关注的是具有强腐蚀性的酸碱和有强氧化还原性的试剂。 化学试剂按纯度分为四级:(1)一级试剂,又称保证试剂,代号 gr(guaranteereagent),也称优级纯。基准试剂也属于一级试剂。瓶签以绿色为标记;(2)二级试剂,又称为分析纯,代号ar(analyticalreagent)。瓶签为红色标记;(3)三级试剂,又称化学纯cp,代号(chemicalpure),瓶签为蓝色标记:(4)四级试剂,又称实验试剂,代号lr(laboratoryreagent),也称工业试剂,标签以棕色为标记。此外,还有色谱纯试剂(色相色谱gc,液相色谱lc),生化试剂br、生物染色剂bs、国家标准物质gbw等规格标记。这些试剂在纯度上虽然不同,但化学性质上确是相同的,在安全使用与保管上有一致的要求。 1.2化学试剂的分类 按安全管理之需,化学试剂传统上分为六类:爆炸品、易燃品、强氧化剂、强腐蚀剂、剧毒/品及放射性试剂。此外,随着用途需要的变化,某些本来安全的试剂,会成为一定时期的管制品,如醋酐,本无危险,但成为毒/品制造原料后,就成为安全管理中的管制品了。 易燃液体分三个等级:一级易燃液体,闪点在-4℃如汽油、丙酮、环氧乙烷、环氧丙烷等;二级易燃液体,闪点在-4℃至21℃之间的液体,如酒精、甲醇、吡啶、甲苯、二甲苯、正丙醇、异丙醇、乙酸戊酯、丙酸乙酯等:三级易燃液体,闪点在21℃至45℃之间的液体,如煤油、柴油、松节油等。上述是易燃液体试剂的传统分类,近年又推出《全球化学品统一分类和标签制度》(简称“ghs”)对分类作了新的规定修正。ghs体系中易燃液体分类的判定要素为闪点和初始沸点两个指标(表1),其中又以闪点为关键点。因为闪点是一个安全指标,用于鉴定油品及其他可燃液体发生火灾的危险性。 2化学试剂的储存 实验室需要用到各种化学试剂。除供日常使用外,还需要储存一定量的化学试剂,大部分化学试剂都具有一定的毒性,有的是易燃易爆危险品,因此必须由专人保管。储藏室最好设在朝北的房间及易于处理意外事故的地方。室内应设有温度计、湿度计、灭火装置,避免阳光照射室温过高及试剂见光变质。室内应干燥通风、严禁明火,危险物品应按国家公安部门的相关规定管理执行。储藏室尽量保持保管室内的通风低温、干燥状况。

生化试剂问题

生化试剂应用常见问题的探讨 试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一,但不能反映试剂质量的全部。试剂成份、纯度、用量及稳定性,才是保证试剂质量的关键所在。目前市售的一些试剂具有抗干扰作用,主要是通过加入抗干扰物质或使用新的色素原以避免内源性物质的干扰。但值得注意的是:一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时,会带来样品含量真实性的变化。 1 试剂空白 试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一。每种试剂都有一定的空白吸光度范围,试剂空白吸光度的改变往往提示该试剂的变质;如利用Trinder反应为原理的检测试剂会因含酚类物质被氧化为醌而变为红色。碱性磷酸酶、r一谷氨酰转肽酶、淀粉酶等检测试剂会因基质分解出硝基酚或酚基苯胺而变黄。有些试剂久置后变浑浊。这些情况均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶等负反应,在放置过程中其试剂空白吸光度会因NADH自行氧化为NAD+而下降。原则上,吸光度上升的反应,其试剂空白吸光度越低越好,不能超过一个高限;相反,吸光度下降的反应,其试剂空白吸光度不能低于一个低限。因此,试剂空白吸光度限值,常作为程序参数输入仪器,如经核查超限,仪器会自动报警,提示更换试剂。需要指出的是,还原型辅酶I(或II)等投料量不足或劣质的原料,往往需要加大用量,才使“表观”吸光度上升,凑合过试剂空白核对的“关”,其后果为如下情况:1.1 线性范围变窄现象:高值测不高。原因:生产试剂时有效成分投料量不足;试剂成份稳定性较差。 1.2 灵敏度变低现象:酶促反应速度曲线斜率下降,测定结果有严重系统误差。原因:试剂底物浓度不足。 1.3 低值偏高现象:试剂空白的变化曲线(吸光度VS时间)明显波动。原因:试剂自身不稳定,自行分解;工具酶纯度 不够,杂酶含量超限,导致干扰作用。 2 样品信息 样品的溶血、脂血、黄疸等会对测定结果产生非化学反应的干扰。因此,应根据溶血、脂浊、黄疸的光谱吸收特性,采用双波长或多波长的检测模式,并在结果计算中扣除因溶血、脂血、黄疸引起的影响,减少干扰程度。 3 测定范围 每种待测物都有一个可测定的浓度或活性范围,样品结果若超过此范围,分析仪将显示结果超过范围的提示。表示试剂已经变质,应更换合格试剂。 4 底物耗尽 使用连续监测法、两点法测定酶活性时,若酶活性非常高,底物接近被耗尽,吸光度上升或下降会超过某一吸光度变化范围,监测期的吸光度将偏离线性,使测定结果不可靠。 5 酶的预活化 测定血清中的某些酶,如CK,离体(采血)后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巯基(一SH)被氧化造成的。只有通过适当的还原作用才能重新激活。如CK—NAC试剂盒即含有CK活化剂,名为N一乙酰半胱氨酸。实验研究证明,NAC对血清中已失活的CK 活化过程约需180 S。这就是CK测定为什么要延迟时间较长的理论依据。在AST,ALT

生化试剂的基础知识详解

生化试剂的基础知识——详解 一、生化试剂的分类 (一)按照化学性质分类 1.酶类:包括ALT,AST,ALP,ACP,r-GT,α-HBDH,LDH,CK,CK-MB,α-AMY,MSO,ADA,ChE等。 2.底物/代谢产物类:包括TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA,UREA,Cr,Glu,TP,Alb,T-Bil,TBA,NH4+,CO2等。 3.无机离子类:包括Ca,P,Mg,Cl等。 4.特种蛋白类:包括apoAl,apoB,Lp(a),C3,C4,PFB(B因子),IgG,IgA,IgM等。 (二)按照临床应用分类 1.无机离子:包括Ca,P,Mg,Cl等。 2.肝功能:包括ALT,AST,r-GT,ALP,MSO,T-Bil,D-Bil,TBA,TP,Alb等。 3.肾功能:UA,UREA,Cr等。 4.心肌酶谱:CK,CK-MB,LDH,α-HBDH,AST,MSO。 5.糖尿病:GLU等。 6.前列腺疾病:ACP,p-ACP等。 7.胰腺炎:α-AMY。 8.血脂:TC,TG,HDL-C,LDL-C,apoA1,apoB,Lp(a)。 9.痛风:UA。 10.有机磷中毒:ChE。 11.免疫性疾病:C3,C4,PFB(B因子),IgG,IgA,IgM,Kappa链,Lambda链。 二、反应速度特性 按照反应速度,可以分为终点法试剂和动力学试剂。而动力学试剂又可再分为零级动力学法和一级动力学法。 (一)终点法试剂 终点法,指经过一段时间(一般为几分钟)的反应,反应进行到完全,使全部底物(被测物)转变成产物,称终点法,更确切地说应称平衡法,这是最理想的分析类型。如图(1)。 整个反应达到平衡,由于正向反应的平衡常数很大,可认为所有的被测定物已转变为产物,反应液的吸光度不再增加(或降低),吸光度的增加(或降低)程度与被测定物的浓度成正比。 终点法对反应条件(如酶量、pH、温度)小的改变不敏感,只要这种改变不影响在一定时间内反应达到平衡即可,是最理想的反应模型。 属于终点法的试剂主要有: TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA,Glu,TP,Alb,T-Bil,D-Bil,Cr(氧化酶法),NH4+,CO2 ,Ca,P,Mg,Cl ,apoA1,apoB,Lp(a),C3,C4,PFB(B因子),IgG,IgA,IgM等。 (二)动力学法试剂 1.零级动力学法 零级动力学法,指反应过程中反应速度维持不变,达到最大,与底物浓度无关,因此,在整个反应过程中,反应物可以匀速地生成某个产物,导至被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地减小或增加,减小或增加的速度(△A/min)与被测物的活性或浓度成正比,主要用于酶活性的测定。如图(2)。

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