基因工程实验报告 4 1 最终版

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《基因工程》实验报告

一、实验目的

1.学习并掌握基因工程操作技术中最常用的载体质粒DNA的提取方法。

2.学习琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理和方法,检测质粒DNA的浓度与分子量。

3.了解PCR的基本原理,掌握PCR的基本操作技术。

4.学习利用限制性内切酶切割DNA的方法,并通过电泳检测酶切的效果。

5.学习DNA重组技术中的核心步骤,DNA片段之间的体外连接方法。

6.学习制备感受态细胞并将体外重组DNA引入受体细胞的技术。

7.掌握利用蓝白斑筛选出转化子的方法。

二、实验原理

(1)质粒DNA的小量制备

在碱性溶液中,双链DNA氢键断裂,DNA双螺旋结构遭破坏而发生变性,但由于质粒DNA分子量相对较小,且呈环状超螺旋结构,即使在高碱性pH条件下,两条互补链也不会充分分离,当加入中和缓冲液调时,变性质粒DNA又恢复到原来的构型;而线性的大分子量的细菌染色体DNA则不能复性,与细胞碎片、蛋白质、SDS等形成不溶性复合物。通过离心沉淀,细胞碎片、染色体DNA 及大部分蛋白质等可被除去,而质粒DNA及小分子量的RNA则留在上清液中。混杂的RNA可用RNA酶(RNaseA)消除。再用酚/氯仿处理,可去除残留蛋白质。(2)琼脂糖凝胶电泳与凝胶中DNA的检测

琼脂糖是一种天然聚合长链状分子,沸水中溶解,45℃开始形成多孔性刚性滤孔,凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。DNA分子在碱性环境中带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子筛效应。不同DNA,其分子量大小及构型不同,电泳时的泳动率就不同,从而分出不同的区带。琼脂糖凝胶电泳法分离DNA,主要是利用分子筛效应,迁移速度与分子量的对数值成反比关系。

SYBR GoLd 是一种极敏感的染料。其可与DNA分子形成SYBR GoLd -DNA 复合物,在紫外光照射下发射荧光,且荧光强度与DNA的含量成正比。用肉眼观察,可检测到20pg以上的DNA。

(3)PCR扩增功能基因

PCR(聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤: (1) 变性:目的双链DNA片段在94℃下解链; (2) 退火:两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对;(3) 延伸:DNA 模板—引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,目的基因序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。重复循环变性-退火-延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2-4分钟,2-3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

(4)限制性酶切PCR产物及质粒

利用限制性内切酶特异的识别DNA特异的核苷酸序列,并切割DNA,从而产生一定长度的DNA片段。

(5)重组质粒的制备

外源DNA分子是在DNA连接酶的作用下,在接缓冲液系统中,其可以和经酶切的载体分子进行连接。

(6)氯化钙制备和转化大肠杆菌

将细菌置于0O C的CaCl2 低渗溶液中,使细胞膨胀,同时Ca2+使细胞膜磷脂层形成液晶结构,使得位于外膜的与内膜间隙中的部分核酸酶离开所在区域,这就构成了大肠杆菌人工诱导的感受态。此时加入DNA,Ca2+又和DNA结合形成抗脱氧核糖核酸酶的羟基-磷酸钙复合物,并黏附在细菌细胞膜的外表面上。经短暂的42O C热脉冲处理后,细菌细胞膜的液晶结构发生剧烈扰动,随之出现许多间隙,导致通透性增加,DNA分子便乘机进入细胞内。

(7)蓝白斑筛选重组质粒

pUC18 上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列,在这个编码区中插有一个多克隆位点,且不影响正常功能,感受态菌株带有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的编码信息,当puc18载体在正常情况下同感受态菌株融合后,互补表达具有酶活性的蛋白质,可将X-gal水解成蓝色产物,称为α-互补现象。当有外源片段插入多克隆位点后,互补现象消失,无法将X-gal水解成蓝色产物(菌株呈白色),故可通过菌株颜色的差异来鉴别重组质粒。

三、仪器设备

台式离心机、旋涡振荡器、恒温水浴锅、微波炉、电泳仪、电泳槽、凝胶成像检测仪、超净工作台、冰箱、恒温摇床

四、实验用具

离心管、移液枪、枪头、冰盒、加样板、量筒100 ml、三角瓶500 ml 、培养皿、锥形瓶150 ml、烧杯

五、试剂

无菌水、溶液II(现配现用)、溶液III(预冷)、水饱和酚、氯仿、异丙醇、70%乙醇、RNase A、1%的琼脂糖溶液、加样缓冲液、DNA marker、SYBR Gold、电泳缓冲液、loading buffer、DNA聚合酶、PCR缓冲液、Kbuffer、限制性核酸内切酶EcoRI 和BamHI、LB培养基、氨苄青霉素(Amp)、0.1 mol/L CaCl2、X-gal、IPTG 六、实验步骤

第一大组中,我们小组比其他小组少了对PCR产物的酚仿抽提纯化,PCR之后直接进行PCR产物的酶切,我们小组整个实验是流程是:

质粒DNA的小量制备对所提质粒进行琼脂糖凝胶电泳电泳检测,PCR扩增功能基因对PCR产物进行电泳检测限制性酶切PCR产物对酶切产物进行酚仿抽提纯化对纯化后的酶切产物进行电泳检测重组质粒的制备,进行感受态细胞的制备重组质粒导入感受态细胞蓝白斑筛选重组质粒

(1)质粒DNA的小量制备

吸取1.5 ml菌液至1.5 ml离心管中。

离心(12000pm, 2分钟),弃上清液。为了提取多一点DNA,再吸取1.5 ml菌液至同一离心管中,离心,弃上清液。

用移液器尽可能除去上清液。加入200μl无菌水,用涡振荡器充分悬浮菌体。

加入400μl溶液II ,缓慢地上下翻转离心管,温和混匀。

加入300μl预冷的溶液III ,上下轻轻翻转离心管,温和混匀,在冰上放置3-5min。

离心(12000 rpm,15分钟),将上清液转至另一个离心管中。

向上清液中加入10μl的RNase A,37O C水浴90分钟。

向上清夜加入等体积水饱和酚,反复混匀,离心(12000 rpm,10分钟),小心将上清液转至另一个离心管中。

向上清夜中加入等体积的氯仿,反复混匀,离心(12000 rpm,10分钟),小心将上清液转至另一个离心管中。

向上清夜中加入等体积的异丙醇,混匀,冰上放置10分钟。离心(12000 rpm,10分钟),弃掉上清液。

将管口敞开倒置于卫生纸上使所有液体流出并吸干液体。

用1ml70%乙醇洗涤沉淀1次,置于冰水中20分钟,离心(12000 rpm,2分钟),弃掉上清液,将沉淀在室温下彻底晾干。

向离心管中加入20μl的ddH2O,得到质粒DNA。

(2)琼脂糖凝胶电泳与凝胶中DNA的检测

称取1.0 g琼脂糖加入盛有100 ml电泳缓冲液的500 ml三角瓶中,摇匀,在微波炉上加热至琼脂糖完全溶解。冷却到约60℃后,加入5 μl的SYBR Gold。

将胶框和梳子配置好,将溶解的琼脂糖(约50℃)倒入其中,直至厚度为4~6 mm。

在室温下放置,冷却凝固。

充分凝固后小心垂直向上拔出梳子,以保证点样孔完好。将凝胶置入电泳槽中,加电泳缓冲液至液面覆盖凝胶1~2 mm。

用移液枪吸取实验一的DNA样品5 μl于点样板小孔中,再加入0.5 μl的加样缓冲液,混匀后,小心加入点样孔,蓝色样品混合物将沉入点样孔下部。同时点5μl marker。

打开电源开关,调节电压至50V,进行电泳。

电泳1h后,将凝胶置于凝胶成像检测仪上观察并记录实验结果。

(3) PCR扩增功能基因

1.PCR反应体系:

我们所做的PCR使用的是50μl体系,依次加入下列物质:

33.5μl双蒸水

5.0 μl反应缓冲液

4.0 μl dNTPs (10mol/L)

1.0 μl上游引物

1.0 μl下游引物

1.0μl模板DNA

0.5μlDNA聚合酶

2. PCR反应过程:

94℃,5分钟(预变性)

94℃,30秒

58℃,1分钟35个循环

72℃,45秒

72℃,10分钟

3. PCR产物的检测:

取10 μl PCR产物在琼脂糖凝胶中电泳,然后放在凝胶成像检测仪下观察,记录结果。(4)限制性酶切PCR产物及质粒

酶切的反应体系如下:

组分加样量

PCR产物样品40μl

Kbuffer 5μl

EcoRI 2.5μl

BamHI 2.5μl

37℃水浴过夜

对酶切产物进行氯仿抽提纯化。

(5)重组质粒的制备

第一大组其他小组做的是20μl的反应体系,因为我们酶切后的产物凝胶检测的条带要亮一

点,所以我们小组使用10μl的反应体系,按下述组分和加样量加入各物质:

组分加样量

外源片段7μl

Buffer 1μl

质粒1μl

酶1μl

再将连接反应混合物置于16℃水浴1h,然后在4℃冰箱上放置1h,得到连接产物。(6)氯化钙制备和转化大肠杆菌

1.感受态细胞的制备

吸取1ml培养好的细菌转入一个无菌、预冷的1.5ml离心管中,在冰上放置10分钟,使菌液冷却至0℃。

13000 rpm离心10分钟收集菌体。

弃上清液,将管倒置1min以使培养液流尽。

加1 ml预冷的0.1 mol/L CaCl2,悬浮菌体并离心洗涤两次。

加入2.0ml 预冷的0.1 mol/L CaCl2,小心悬浮细胞沉淀。

2.转化

在1.5 ml无菌离心管中加入100μl上一步制得的感受态细胞,并加入10μl重组质粒,轻轻旋转以混合,在冰上放置30min。

将管子放在42℃水浴中,静置90秒(注意不要摇动管子)。

快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却1-2分钟。

加入800 μl LB液体培养基,水浴将培养基加温至37℃。然后将管转移到摇床中,温45-60min,使细菌复苏并表达质粒编码的抗生素抗性标记基因。

(7)蓝白斑筛选重组质粒

往45℃左右的100m l的LB培养基中加入200μl的X-gal、100μl IPTG(24mg/ml)

、100 μlAmp(100mg/ml),倒平板。

待培养基凝固后,将200 L已经转化的感受态细胞涂布于上述LB-Amp平板上。

将平板置于室温至液体被吸收。

倒置平板,置于37℃培养箱中培养12-16h。

观察转化结果(白色为阳性,蓝色为阴性)

七、实验结果

一、质粒DNA的小量制备的凝胶成像结果如下:

这是我单独对我们小组提取的质粒进行的一次跑胶,凝胶成像检测,第一大组其他小组并无此图。

二:PCR扩增功能基因的凝胶成像结果如下:

三:限制性酶切PCR产物的凝胶成像结果:

当时为了和其他小组做对照,看看不经过酚仿抽提纯化的PCR产物对最后的转化效果有没有明显的差别。因此我们组省去PCR扩增功能基因后面的酚仿抽提纯化,直接利用限制性核酸内切酶EcoRI 和BamHI对PCR产物进行双酶切,再进行酚仿抽提纯化经过酶切后的产物,然后跑电泳并进行凝胶成像观察酶切效果。因为比其他小组少做了一次酚仿抽提纯化,损失的产物要少,故条带要亮一点(此次凝胶成像的图片没有找到,可能是当时忘记保存下来了)。

四:蓝白斑筛选重组质粒结果:

在平板上长满了大量的小菌斑,没有阳性白斑和阴性蓝斑的出现。

八、分析讨论

一、质粒DNA的小量制备

从我们的质粒DNA的小量制备的凝胶成像结果可以看出,质粒条带很暗,说明所提质粒DNA的量很少,而RNA条带非常亮,说明RNase并没有把RNA降解,从而导致质粒DNA中存在大量的RNA。

1.导致上述结果的可能原因:

提取过程中培养物:无菌水:溶液II:溶液III的体积比应为15:1:2:1.5,这样的话才能使离心后的细菌从分悬浮、裂解,并使质粒DNA很好地被提取出来。在实验中,我们加入的无菌水、溶液II、溶液III的体积相对于培养物的体积来说有点少,可能因此影响了质粒DNA提取的量。

可能是由于操作原因,在酚仿抽提纯化过程中质粒DNA损失较多。

实验中,我们加入了10 l的RNase在370C水浴中反应了2h,加入的酶和反应的时间都已经足够,但是RNA的量还是那么多,因此猜测可能是RNase已经失活。

2.在质粒DNA的制备过程中我们还要注意的问题:

加入溶液II、溶液III摇匀时一定要温和,不能剧烈摇动,以免基因组DNA断裂成小片段,从而混入质粒DNA中,影响质粒DNA的提取。

在水饱和酚/氯仿萃取后,吸取上清液时,应注意勿将下层酚/氯仿吸入以免带入杂质。但也不要留下太多上清液,使质粒DNA损失较多。

二:PCR扩增功能基因

从PCR扩增功能基因的凝胶成像结果中可以看出,对功能基因的PCR是成功

的。

1.在PCR扩增功能基因的过程中我们要注意的问题:

加样的时候一定要细心,因为在PCR的反应体系中,少了任何一种组分,或者组分的量加入不正确,都可能会导致PCR的失败。

电泳所用的琼脂糖凝胶中加入了SYBR Gold染料,这种染料可能有致癌性,我们在电泳操作时一定要带上手套。

三、限制性酶切PCR产物的凝胶成像

因为我们小组没有进行PCR后的那次酚仿抽提纯化,损失的产物要少,故酶切后的条带要亮一点。但是要注意的是,虽然条带比进行了两次酚仿抽提纯化后的条带要亮,但是转化效果并不见得一定会好。因为,我们少进行了一次酚仿抽提纯化,酶切后的产物里面的其他杂质就相对会多一点,这可能会影响后面的连接和转化,所以说各有利弊,因此要通过后面的结果来判断少进行一次酚仿抽提纯化是利还是弊。

四:蓝白斑筛选重组质粒

在平板上长满了大量的白色小菌斑,不太可能是阳性白斑(因为长成的小菌斑的量太多了),同时也没有阴性蓝斑的出现。

1. 这可能是由如下原因导致的:

在培养基温度较高时加入Amp,导致其失效,在本次实验中,这个原因的可能性非常小,因为当时我们加入Amp后立即倒平板时,培养基都快要凝固了,说明温度已经不高。

Amp已经变质,我觉得这是最可能的原因。因为实验所用的puc18载体自身带有抗氨苄青霉素基因,这样只有带有puc18的转化子的菌株才能在Amp-平板上存活,而其他没有带有抗氨苄青霉素基因的细菌都无法在Amp-平板上存活。而现在的结果是Amp-平板上长满了白色小菌斑,说明Amp并没有起到其应有的效果。

也有可能是X-gal有问题。puc18载体在正常情况下同感受态细胞融合后,互补表达具有酶活性的蛋白质,可将X-gal水解成蓝色产物,要是X-gal有问题,将无法产生蓝色产物。

对于IPTG,其对最后的实验结果并没有什么大的影响,因为对于puc18载体,

不用加入起诱导物作用的IPTG也是可以的。

另外,我们使用的是双酶切处理PCR产物和质粒,因此两者发生环化的可能性不大。

2.解决方案

我们要做个对照实验来确定Amp是否失效:

在Amp-平板上涂布未经转化的感受态细胞,置于37℃培养箱中培养12-16h,观察有没有菌体在Amp-平板上生长,此时若有菌落生长的话说明Amp失效。因为未经转化的感受态细胞不含有puc18载体,因此不具备抗氨苄青霉素基因,正常来说上无法在Amp-平板上生长,要是能够生长,就可以确定Amp已失效。

网络营销实验报告

网络营销实验报告

网络营销实验报告(一) ——网络营销概念认知实验目的:通过上机操作,了解网络营销的现状、发展及常用手段方法。 实验内容:浏览主要门户网站及专门网络营销网站,总结网络营销的基本现实状况,认识常见的网络营销方式。 过程描述:1、浏览百度、新浪、网易、腾讯、搜狐、凤凰网等国内主要门户网 网站(上图,以新浪网为例)。了解到,A、门户网站是指通向某类综合性互联网信息资源并提供有关信息服务的应用系统。门户网站最初提供搜索引擎、目录服务,后来由于市场竞争日益激烈,门户网站不得不快速地拓展各种新的业务类型,希望通过门类众多的业务来吸引和留住互联网用户,以至于目前门户网站的业务包罗万象,成为网络世界的“百货商场”或“网络超市”。B、门户网站主要提供新闻、搜索引擎、网络接入、聊天室、电子公告牌、免费邮箱、影音资讯、电子商务、网络社区、网络游戏、免费网页空间等服务。C、常见的网络营销方式有:网络站点营销、无网站营销、论坛推广、博客宣传、E-mail营销、友情链接、B2B平台、软件捆绑等。D、对网络营销有以下新认识:网络营销是手段而不是目的,它不是指网上销售,也不等于电子商务。网络营销不是孤立的,无论处于主导地位还是辅助地位,都是互联网时代市场营销中必不可少的内容。

机营销网,中国营销传播网等。

思考与结论: 1、网络营销,是互联网时代的市场营销,借助网络、计算机通信和数字交互或媒体来实现企业的营销目标,但它不仅仅只通过网络进行商品或劳务买卖活动,还涉及到传统市场的方方面面、 2、网络营销具有范围广、可视性强、公平性好、交互性强、能动性强、灵敏度高、易运作等优势。但网络形式的效果至今无法像传统媒体那样容易把握,包括网络广告所影响的区域、对象以及对象的购买力等等,不定因素多。随着计算机技术的迅速发展,企业必须紧跟技术发展步伐,否则很容易丧失营销策略的时效性和竞争优势。 3、网络营销环境包括宏观和微观两个方面。微观即行业环境因素,主要包括企业内部条件和供应商、营销中介、顾客、竞争者、合作者以及公众等企业开展电子商务、网络营销的上下游组织机构。不同行业企业的微观营销环境是不同的。网络营销宏观环境是指对企业网络营销活动影响较为间接的各种因素的总称,主要包括政治法律、人口、经济、社会文化、科学技术、自然地理等环境因素。互联网用户数量保持大幅增长态势,网民的结构发生变化,网上第三方认证 环境普及化,但弊端也是显而易见的,等等。

小学自然实验报告样板.doc

小学自然实验报告模板 教学模式是在一定的教学思想或教学理论的指导下建立起来的,较为稳定的教学活动结构框架和活动程序。“结构框架”意在从宏观把握教学活动整体各要素之间的内部关系;“活动程序”意在突出教学模式的有序性和可行性。 自然学科是人类在认识自然的过程中所积累的知识。它与人的认识过程有较高的一致性,最适用于发现式的学习方法。实验是传授自然科学知识和培养与发展学生各种能力的重要手段。我校的教研组推出的四环节实验课教学模式,以其较完美的操作性、开放性、优效性和灵活性形成了自然实验课的基本框架,较好地揭示课堂教学的一般程序、课堂教学诸因素的内在联系和课堂教学的普遍规律。现就模式谈一下我在教学中的实践与几点体会。 一、教学模式的四个环节在实践中的具体运用 (一)提出问题阶段 提出问题阶段是当研究一个问题时,为了激发学生的求知欲望,引导学生探索并调动他们积极性的阶段。教师可结合要研究的问题,用生动形象的语言恰如其分地提问,让学生在观察和思维中发现问题。 例如,《物体的热胀冷缩》一课,先进行演示实验,在铁架台上放一平底烧瓶,瓶中装满水,用酒精灯加热,水还没烧开,瓶中的水就往外溢。教师接着问大家,你们看了这个现象有什么想法?学生一下子提出许多问题:“为什么水加热后往上溢呢?”

“水难道会变多吗?” 教学时,为了激发学生探求知识的欲望,应千方百计创造性地运用各种方法,如:做游戏、讲故事、变魔术、猜谜语、出示挂图、运用幻灯等。引起学生要研究问题的兴趣,提出自己的想法。 (二)作出假设阶段 学生提出了问题,但在还没有学习有关的知识时,教师引导学生对自己的问题作出假设的回答。教师再从学生假设中引导学生逐渐进入要研究的问题中去。 例如,《水蒸气的凝结》,教师将还在冒白气的温水杯加盖,过一会儿再揭开盖,请同学们看盖上的水珠,水蒸气碰到什么样的物体在上面结成水珠呢?引导学生作出假设,发表不同意见。有的同学说:“水蒸气遇到热的物体结成水珠。”有的说:“水蒸气遇到冷的物体结成水珠。”教师接着说:“那么我们就一起研究一下,水蒸气在什么条件下能变成水呢?”这样就逐渐地把学生引入要研究的课题。 在这个阶段中,学生根据已有知识的经验,通过演绎、归纳、推理而提出的假设,不少带有猜测的性质。此时教师要引导学生积极作出假设,不应压抑学生的思维,不管是对是错,都不要忙于作出评价。 (三)设计实验阶段

工程材料实验报告模板

工程材料实验报告 专业: 姓名:,学号: 姓名:,学号: 姓名:,学号: 青海大学机械工程学院 年月日

工程材料综合实验 ●金相显微镜的构造及使用 ●铁碳合金平衡组织分析 ●碳钢的热处理 ●金相试样的制备 ●碳钢热处理后的显微组织分析 ●硬度计的原理及应用 ●碳钢热处理后的硬度测试 ●常用工程材料的显微组织观察 实验一金相显微镜的构造和使用 一、实验目的 熟悉金相显微镜的基本原理、构造;了解金相显微镜的使用注意事项,掌握金相显微镜的使用方法。 二、实验设备及材料 三、实验内容 1)金相显微镜的基本原理2)金相显微镜的构造3)显微镜使用注意事项 四、实验步骤 五、实验报告 实验二铁碳合金平衡组织分析 一、实验目的 (1)熟悉铁碳合金在平衡状态下的显微组织。 (2)了解铁碳合金中的相与组织组成物的本质、形态及分布特征。

(3)分析并掌握平衡状态下铁碳合金的组织和性能之间的关系 二、实验设备及材料 三、实验内容 1)铁碳合金的平衡组织 2)各种组成相或组织组成物的特征 3)铁素体与渗碳体的区别 四、实验步骤 五、实验报告 实验三碳钢的热处理 一、实验目的 1)熟悉钢的几种基本热处理操作:退火、正火、淬火、回火 2)了解加热温度、冷却速度、回火温度等主要因素对45钢热处理后性能的影响。 二、实验设备及材料 三、实验内容 1)加热温度的选择 2)保温时间的确定 3)冷却方法 四、实验步骤 五、实验报告 实验四金相试样的制备 一、实验目的 1)了解金相试样的制备过程。 2)学会金相试样的制备技术。

二、实验设备及材料 三、实验内容 1)取样 2)镶样 3)磨制 4)抛光 四、实验步骤 五、实验报告 实验五碳钢热处理后的显微组织分析 一、实验目的 观察碳钢热处理后的显微组织 二、实验设备及材料 三、实验内容 1)钢冷却时所得到的各种组织组成物的形态 2)钢淬火回火后的组织 四、实验步骤 五、实验报告 实验六硬度计的原理及应用 一、实验目的 1)熟悉洛氏硬度计、布氏硬度计、显微硬度计的原理、构造。 2)学会三种硬度计的使用 二、实验设备及材料 三、实验内容 1)洛氏硬度实验原理 2)布氏硬度试验原理 3)显微硬度计的原理 四、实验步骤 五、实验报告 实验七碳钢热处理后的硬度测试

材料学实验报告

仲恺农业工程学院实验报告纸 园艺园林系园林专业124 班园林材料与施工技术实践课 学号201210144415 姓名林思婷实验日期2013.11.28 教师评定 园林材料与施工技术实践报告 一、实习目的 本次材料学的实习目的在于巩固我们在理论课上学习的知识,让我们通过实地考察、触摸材质等方法,对铺装的材料以及设计有一个初步的认识和了解,从这些材质的质地,颜色,规格,特性和性能等方面进行剖析,从而能够更好地结合理论,运用到将来的学习和工作当中,提升自己的专业知识。 二、实习时间 2013年11月28日下午1:30-3:30 三、实习内容 在校园中观察广场铺装、路沿石、砖块、墙体表面、教学楼地面、柱子、石桌石凳和桥梁等实体的形状与颜色,触摸其表面材质,分析其特点用途,延伸出施工技术等一系列相关的知识,并与上理论课时所得知识相结合,通过老师的实时讲解做好相应的笔记,最后经过自己的思考和整理,总结报告。 四、总结报告 本次实习主要是在校园内,围绕着校园内建筑物和广场路面等的

材料进行分析,因此,在老师的讲解介绍下,有以下的总结报告:1.关于材料 黄蜡石:又名龙王玉,因石表层内蜡状质感色感而得名,由于其地质形成过程中渗杂的矿物不同而有黄蜡、白蜡、红蜡、绿蜡、黑蜡、彩蜡等品种。【一栋小花园陈列着一块巨大的黄蜡石;A栋小花园有一块巨大的花岗岩。】 花岗岩:花岗石是火成岩,是火成岩中分布最广的一种岩石,由长石、石英和云母组成,岩质坚硬密实,其成分以二氧化硅为主,约占65%-75%。花岗岩虽然在色彩与花纹上变化较少,但在质感方面有着较灵活的表现,如经过加工可获得更多的工艺表面。另外,花岗岩在整体上给人能庄严、古典的感觉。主要用于室内外地坪、室外墙面等多受外力作用的地方。【比如我们教学楼架空层的石桌石凳,光面 打磨,通常对于这些材质都是用常见名、产品编号或者颜色等来命名。在BC栋之间的小广场,我们看到了芝麻白、芝麻灰、青灰色、荔枝面和火烧面的花岗岩广场砖,有500mmx600mm规格和600mmx600mm规格两种,另外在花坛上还有军绿色的板岩文化石,自然饰面。】 墙面砖:粘土砖的一种,外墙面砖有施釉和不施釉之分,也有陶砖和瓷砖之分。外墙面砖坚固耐用、色彩鲜艳、易清洗、防火、防水、耐磨、耐腐蚀、维修费用低。【教学楼楼下的柱子多贴以此砖。】(1)陶砖:通常采用优质粘土和紫砂陶土及其它原料配比高温

WORD实验报告

word基本操作实验报告 一、实验目的与要求 1.掌握word的基本操作; 2.掌握字符格式、段落格式和页面格式等排版技术; 3.掌握图文混排、表格处理和邮件合并技术; 4.熟悉个人名片或毕业论文的设计与制作; 5.学会自己提出问题,并得出解决问题的方法。 二、实验内容与方法 1.word的基本操作,通过上机摸索,并查阅书籍网络了解。 2.word的字符格式,段落格式和页面格式等排版技术,通过上机摸索,并查阅书籍网络了解。 3.word的图文混排、表格处理和邮件合并技术,通过上机摸索,并查阅书籍网络了解。 4. 通过word进行个人名片或毕业论文的设计与制作,通过上机摸索,并查阅书籍网络了解。 三、实验步骤与过程 1.word的基本操作:①启动word软件 (1) 启动“开始”菜单中的microsoft word程序 (2) 双击资源管理器或“我的电脑”中的c:\program files\microsoft office\office11\winword.exe程序 (3) 双击word 文档文件(*.doc) (4) 双击桌面上的word图标 (5)开始-运行-输入“winword”②认识word2003窗口(1)标题栏位于屏幕最顶端的是标题栏,由控制菜单图标、文件名、最小化按钮、最大化(还原)按钮、关闭按钮组成。(2)菜单栏 菜单栏位于标题栏下面。使用菜单栏可以执行word的许多命令。菜单栏共有九个菜单:文件、编辑、视图、插入、格式、工具、表格、窗口、帮助。当鼠标指针移到菜单标题上时,菜单标题就会凸起,单击后弹出下拉菜单。在下拉菜单中移动鼠标指针时,被选中的菜单项就会高亮显示,再单击,就会执行该菜单所代表的命令。如“文件”—“打开”,就会弹出“打开”文件对话框。(3)工具栏 标题栏下面的是工具栏,使用它们可以很方便地进行工作。通常情况下,word会显示【常用】和【格式】两个工具栏。 “常用”工具栏:新建、打开、复制、粘贴、打印、撤消、恢复等“格式”工具栏:字体、字号、下划线、边框、对齐方式等 如果想了解工具栏上按钮的简单功能,只需将鼠标指针移到该按钮上,过一会儿旁边会出现一个小框,显示出按钮的名称或功能。 word窗口中可以有许多工具栏,可以根据需要在“视图”—“工具栏”中增加或减少工具栏。每一个工 具栏都可以用鼠标拖动到屏幕的任意位置,所以又称为浮动工具栏。工具栏内图标按钮体现了“菜单栏”中的一些主要功能。我们可以利用这些按钮进行相应操作。如我要打开一个文件,除了可以使用菜单栏外,还可以使用工具栏上的按钮。 (4)编辑窗口 再往下的空白区域就是word的编辑窗口,输入的文字就显示在这里。文档中闪烁的竖线称为光标,代表文字的当前输入位置。(5)标尺 在编辑窗口的上面和左面有一个标尺,分别为水平标尺和垂直标尺,用来查看正文的高度和宽度,以及图片、文本框、表格的宽度,还可以用来排版正文。( 6)滚动条在编辑窗口的右面和下面有滚动条,分别为垂直滚动条和水平滚动条,用来滚动文档,显示在屏幕中看不到的内容。可以单击滚动条中的按钮或者拖动滚动框来浏览文档。(7)显示方式按钮

基因工程实验报告

基因工程实验报告 、

小麦GAPDH截短体的重组与表达 摘要:本实验通过基因工程(genetic engineering)手段对小麦总RNA进行提取、PCR扩增及与质粒载体的重组构建的操作,并将重组质粒以氯化钙法导入大肠杆菌感受态细胞,诱导目的基因表达,并在蛋白水平进行Western检测。通过本对实验的实践,我们对基因工程技术将会有一个比较全面的认识和了解。 关键字:小麦基因;载体;感受态 前言 基因工程(genetic engineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术。为在分子水平上对基因进行操作的复杂技术,是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来,在离体条件下用适当的工具酶进行切割后,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源物质在其中“安家落户”,进行正常的复制和表达,从而获得新物种的一种崭新技术。它克服了远缘杂交的不亲和障碍。 (一)实验过程

1.实验部分流程:

2.小麦总RNA提取(Trizol法) 2.1 材料 小麦幼苗 2.2 试剂配制及器具处理 ① 0.1%的DEPC H2O(DEPC:焦碳酸二乙酯) ②器具处理:试剂瓶、量筒、研钵、大小枪头和1.5ml和0.2ml 的EP管等用纱布包裹,在 0.1%的DEPC H2O中浸泡过夜(37℃),高压灭菌,80℃烘干备用。剪刀、镊子和药匙等160℃烘烤6h以上。 ③无RNA酶灭菌水(DEPC H2O):用将高温烘烤的玻璃瓶(180℃×2h)装蒸馏水,然后加入 0.1%的DEPC(体积/体积),处理过夜后高压灭菌。 ④Trizol ⑤ 75%乙醇:用新打开的无水乙醇和DEPC处理过的水配制75%乙醇(用高温灭菌器皿配制),然后装入高温烘烤的玻璃瓶中,存放于低温冰箱。 ⑥氯仿(最好用新的)。 ⑦异丙醇(最好用新的)。 2.3 操作步骤: ①先在研钵中加入液氮,再将小麦叶片剪成小段在液氮中磨成粉末,用液氮预冷的药匙取50~100mg组织粉末加入已盛有1ml的Trizol液的EP管中(注意研磨粉末总体积不能超过所用Trizol体积的10%),充分混合均匀。 ②室温放置5min,然后加入200μL的氯仿,盖紧EP管并剧烈摇荡15秒钟。 ③ 12000rpm离心10min,取上层水相于一新的EP管中(千万不要将中间的沉淀层和下层液混入,否则重新离心分离),加入500μL异丙醇,温和颠倒混匀。室温放置10min,12000rpm 离心10min。 ④小心地弃去上清液,加入1ml的75%乙醇,涡旋混匀,4℃下12000rpm离心5min。 ⑤重复步骤④。 ⑥弃去上清液(尽量将残余液体除去),室温或真空干燥5~10min(注意不要干燥过分,否则会降低RNA的溶解度)。用30μL DEPC处理过的水将RNA溶解,必要时可55℃~60℃水浴10min。RNA可进行mRNA分离,或贮存于70%乙醇并保存于-70℃。 3. RT-PCR扩增目的基因cDNA 3.1 试剂 ① RNA模板 ②Olig(dT)18 ③反转录缓冲液 ④dNTP ⑤ M-MULV反转录酶 ⑥ RNA抑制剂(RNasin) ⑦Premix EX Taq DNA聚合酶 ⑧ PCR特异引物 3.2操作步骤: 3.2.1 RNA的反转录 采用Thermo Scientific(Fermentas)RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit Total RNA 6μL(需加入RNA约1μg) OligodT primer 1μL H2O(nuclease-free)5μL 12μL 65℃ 5min,补加下列试剂: 5× Reaction buffer 4μL RibolockRNase Inhibitor 1μL 10mM dNTP Mix 2μL RevertAid M-MuLV Reverse Transcriptase 1μL 20μL 42℃ 60min 70℃,5min,﹣20℃保存

土木工程材料实验报告

广西科技大学鹿山学院 实验报告 课程名称:土木工程材料 指导教师: 班级: 姓名: 学号: 成绩评定: 指导教师签字: 年月日

土木工程材料实验课的要求 一、实验室的纪律要求 1.进入实验室后,要听从教师的安排,不得大声说笑和打闹。 2.进入实验室后,对本组所用的仪器设备进行检查,如有缺损或失灵应立即报告,由教师修理或调换,不得私自拆卸。实验结束时,应将所用仪器设备按原位放好,经检查后方可离开实验室。 3.要爱护实验仪器设备,严格按照实验操作规程进行实验,同时注意人身安全,非本次实验所用的室内其他仪器,不得随便乱动。 4.在实验过程中,当仪器设备被损坏时,当事者应立即向实验室教师报告,由其根据学校的规定给予检查或赔偿等处理。 5.实验结束后,每组学生对所用的仪器设备及桌面、地面应加以清理,并由各实验小组轮流做全室的卫生整理。 6.完成实验后,经教师同意后方可离开实验室。 二、实验与实验报告的要求 1.每次做实验以前,要认真阅读实验指导书,熟悉实验内容和实验方法步骤。 2.要以严肃的科学态度、严格的作风、严密的方法进行实验,认真记录好实验数据。 3.在实验课进行中要认真回答教师提出的问题,回答问题的情况作为实验课考核成绩的一部分。 4.要认真填写、整理实验报告,不得潦草,不得缺项、漏项,报告中的计算部分必须完成,同时要保持实验报告的整洁。 5.实验报告应及时完成,并按老师规定的时间上交。

实验一土木工程材料的基本性质实验报告 一、实验内容 二、主要仪器设备及规格型号 三、实验记录 (一) 材料的表观密度测试 试样名称: _____________________ 实验日期: ____________________ 气温/室温: _____________________ 湿度:____________________

网络营销实验报告一

哈尔滨工程大学 实验报告 实验名称:网络营销信息的检索与处理 班级:2011 学号: 姓名: 实验时间:2014.6.20 成绩:________________________________ 指导教师: 实验室名称:______综合实验三______________________ 哈尔滨工程大学实验室与资产管理处

实验报告 一、实验名称:网络营销信息的检索与处理 二、实验目的: 了解用户通过企业网站、搜索引擎、电子邮件等常用网络营销工具获取商品/服务信息的特征,认识各网络营销工具的作用及其信息传递的特点,为接下来的实验内容的顺利完成提供有力保证。 三、实验设备: 综合实验室(三)计算机设备,通过百度、谷歌、搜狗浏览器、360浏览器、腾讯搜搜等引擎,各类商品的官方企业网站进行信息搜集。 四、实验内容: (1)从备选商品/服务名称中选择三种,假设你希望购买这种产品/服务,或者希望了解更多相关信息; 电备选商品/服务名称如下:网络营销类书籍,强化地板,5-10万元轿车,瑞士手表,热水器,实木家具 我选择瑞士手表、电热水器、网络营销类书籍作为对象进行分析。 (2)利用该关键词分别在3-5个常用搜索引擎进行检索,观察检索结果第一页的信息差异情况; (3)从检索结果中选择一个你感兴趣的网页,点击进入该网站; (4)对比该网页在搜索引擎检索结果中的信息,是否可以在企业网站上立即发现这些相关信息更为详细的内容。

实验具体分为A、B、C三个实验,如下所示: A、瑞士手表实验分析 一、搜索引擎对比分析 1.百度搜索关键词——瑞士手表 点击置顶链接进入: 2.搜狗搜索关键词——瑞士手表

材料的拉伸试验实验报告

材料的拉伸试验 实验内容及目的 (1)测定低碳钢材料在常温、静载条件下的屈服强度s σ、抗拉强度b σ、伸长率δ和断面收缩率ψ。 (2)掌握万能材料试验机的工作原理和使用方法。 实验材料及设备 低碳钢、游标卡尺、万能试验机。 试样的制备 按照国家标准GB6397—86《金属拉伸试验试样》,金属拉伸试样的形状随着产品的品种、规格以及试验目的的不同而分为圆形截面试样、矩形截面试样、异形截面试样和不经机加工的全截面形状试样四种。其中最常用的是圆形截面试样和矩形截面试样。 如图1所示,圆形截面试样和矩形截面试样均由平行、过渡和夹持三部分组成。平行部分的试验段长度l 称为试样的标距,按试样的标距l 与横截面面积A 之间的关系,分为比例试样和定标距试样。圆形截面比例试样通常取d l 10=或 d l 5=,矩形截面比例试样通常取A l 3.11=或A l 65.5=,其中,前者称为长比例 试样(简称长试样),后者称为短比例试样(简称短试样)。定标距试样的l 与A 之间无上述比例关系。过渡部分以圆弧与平行部分光滑地连接,以保证试样断裂时的断口在平行部分。夹持部分稍大,其形状和尺寸根据试样大小、材料特性、试验目的以及万能试验机的夹具结构进行设计。 对试样的形状、尺寸和加工的技术要求参见国家标准GB6397—86。

(a ) (b ) 图1 拉伸试样 (a )圆形截面试样;(b )矩形截面试样 实验原理 进行拉伸试验时,外力必须通过试样轴线,以确保材料处于单向应力状态。低碳钢具有良好的塑性,低碳钢断裂前明显地分成四个阶段: 弹性阶段:试件的变形是弹性的。在这个范围内卸载,试样仍恢复原来的尺寸,没有任何残余变形。 屈服(流动)阶段:应力应变曲线上出现明显的屈服点。这表明材料暂时丧失抵抗继续变形的能力。这时,应力基本上不变化,而变形快速增长。通常把下屈服点作为材料屈服极限(又称屈服强度),即A F s s = σ,是材料开始进入塑性的标志。结构、零件的应力一旦超过屈服极限,材料就会屈服,零件就会因为过量变形而失效。因此强度设计时常以屈服极限作为确定许可应力的基础。 强化阶段:屈服阶段结束后,应力应变曲线又开始上升,材料恢复了对继续变形的抵抗能力,载荷就必须不断增长。D 点是应力应变曲线的最高点,定义为材料的强度极限又称作材料的抗拉强度,即A F b b = σ。对低碳钢来说抗拉强度是材料均匀塑性变形的最大抗力,是材料进入颈缩阶段的标志。 颈缩阶段:应力达到强度极限后,塑性变形开始在局部进行。局部截面急剧收缩,承载面积迅速减少,试样承受的载荷很快下降,直到断裂。断裂时,试样的弹性变形消失,塑性变形则遗留在破断的试样上。 材料的塑性通常用试样断裂后的残余变形来衡量,单拉时的塑性指标用断后伸长率δ和断面收缩率ψ来表示。即 %1001?-= l l l δ

科技实验报告.doc

科技实验报告 一、定义与作用 实验报告,就是在某项科研活动或专业学习中,实验者把实验的目的、方法。步骤、结果等,用简洁的语言写成书面报告。 实验报告必须在科学实验的基础上进行。成功的或失败的实验结果的记载,有利于不断积累研究资料,总结研究成果,提高实验者的观察能力。分析问题和解决问题的能力,培养理论联系实际的学风和实事求是的科学态度。 二、写作要求 实验报告的种类繁多,其格式大同小异,比较固定。实验报告,一般根据实验的先后顺序来写,主要内容有: 1.实验名称名称,要用最简练的语言反映实验的内容。如验证某定律,可写成“验证×××”;如测量的实验报告,可写成 “×××的测定。” 2.实验目的实验目的要明确,要抓住重点,可以从理论和实践两个方面考虑。在理论上,验证定理定律,并使实验者获得深刻和系统的理解,在实践上,掌握使用仪器或器材的技能技巧。 3.实验用的仪器和材料如玻璃器皿。金属用具、溶液、颜料、粉剂、燃料等。 4.实验的步骤和方法这是实验报告极其重要的内容。这部分要写明依据何种原理。定律或操作方法进行实验,要写明经过哪儿个

步骤。还应该画出实验装置的结构示意图,再配以相应的文字说明,这样既可以节省许多文字说明,又能使实验报告简明扼要。清楚明白。 5.数据记录和计算指从实验中测到的数据以及计算结果。 6.结果即根据实验过程中所见到的现象和测得的数据,作出结论。 7.备注或说明可写上实验成功或失败的原因,实验后的心得体会、建议等。 有的实验报告采用事先设计好的表格,使用时只要逐项填写即可。 三、撰写时应注意事项 写实验报告是一件非常严肃。认真的工作,要讲究科学性、准确性。求实性。在撰写过程中,常见错误有以下几种情况:1.观察不细致,没有及时、准确、如实记录。 在实验时,由于观察不细致,不认真,没有及时记录,结果不能准确地写出所发生的各种现象,不能恰如其分。实事求是地分析各种现象发生的原因。故在记录中,一定要看到什么,就记录什么,不能弄虚作假。为了印证一些实验现象而修改数据,假造实验现象等做法,都是不允许的。 2.说明不准确,或层次不清晰。 比如,在化学实验中,出现了沉淀物,但没有准确他说明是“晶体沉淀”,还是“无定形沉淀”。说明步骤,有的说明没有按照操作顺序分条列出,结果出现层次不清晰。凌乱等问题。

基因工程实验报告

基因工程实验报告

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基因工程实验报告 、

小麦GAPDH截短体的重组与表达 摘要:本实验通过基因工程(genetic engineering)手段对小麦总RNA进行提取、PCR扩增及与质粒载体的重组构建的操作,并将重组质粒以氯化钙法导入大肠杆菌感受态细胞,诱导目的基因表达,并在蛋白水平进行Western检测。通过本对实验的实践,我们对基因工程技术将会有一个比较全面的认识和了解。 关键字:小麦基因;载体;感受态 前言 基因工程(genetic engineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术。为在分子水平上对基因进行操作的复杂技术,是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来,在离体条件下用适当的工具酶进行切割后,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源物质在其中“安家落户”,进行正常的复制和表达,从而获得新物种的一种崭新技术。它克服了远缘杂交的不亲和障碍。 (一)实验过程

1.实验部分流程: 片段胶 小麦幼苗小麦总RNA RT-PCR扩增小麦pGEX-4T-1 表达载体 表达菌株 目的蛋白 目的蛋白 Western

2.小麦总RNA提取(Trizol法) 2.1 材料 小麦幼苗 2.2 试剂配制及器具处理 ① 0.1%的DEPC H2O(DEPC:焦碳酸二乙酯) ②器具处理:试剂瓶、量筒、研钵、大小枪头和1.5ml和0.2ml 的EP管等用纱布包裹,在 0.1%的DEPC H2O中浸泡过夜(37℃),高压灭菌,80℃烘干备用。剪刀、镊子和药匙等160℃烘烤6h以上。 ③无RNA酶灭菌水(DEPC H2O):用将高温烘烤的玻璃瓶(180℃×2h)装蒸馏水,然后加入 0.1%的DEPC(体积/体积),处理过夜后高压灭菌。 ④Trizol ⑤ 75%乙醇:用新打开的无水乙醇和DEPC处理过的水配制75%乙醇(用高温灭菌器皿配制),然后装入高温烘烤的玻璃瓶中,存放于低温冰箱。 ⑥氯仿(最好用新的)。 ⑦异丙醇(最好用新的)。 2.3 操作步骤: ①先在研钵中加入液氮,再将小麦叶片剪成小段在液氮中磨成粉末,用液氮预冷的药匙取50~100mg组织粉末加入已盛有1ml的Trizol液的EP管中(注意研磨粉末总体积不能超过所用Trizol体积的10%),充分混合均匀。 ②室温放置5min,然后加入200μL的氯仿,盖紧EP管并剧烈摇荡15秒钟。 ③ 12000rpm离心10min,取上层水相于一新的EP管中(千万不要将中间的沉淀层和下层液混入,否则重新离心分离),加入500μL异丙醇,温和颠倒混匀。室温放置10min,12000rpm 离心10min。 ④小心地弃去上清液,加入1ml的75%乙醇,涡旋混匀,4℃下12000rpm离心5min。 ⑤重复步骤④。 ⑥弃去上清液(尽量将残余液体除去),室温或真空干燥5~10min(注意不要干燥过分,否则会降低RNA的溶解度)。用30μL DEPC处理过的水将RNA溶解,必要时可55℃~60℃水浴10min。RNA可进行mRNA分离,或贮存于70%乙醇并保存于-70℃。 3. RT-PCR扩增目的基因cDNA 3.1 试剂 ① RNA模板 ②Olig(dT)18 ③反转录缓冲液 ④dNTP ⑤ M-MULV反转录酶 ⑥ RNA抑制剂(RNasin) ⑦Premix EX Taq DNA聚合酶 ⑧ PCR特异引物 3.2操作步骤: 3.2.1 RNA的反转录 采用Thermo Scientific(Fermentas)RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit Total RNA 6μL(需加入RNA约1μg) OligodT primer 1μL H2O(nuclease-free)5μL 12μL 65℃ 5min,补加下列试剂: 5× Reaction buffer4μL RibolockRNase Inhibitor 1μL 10mM dNTP Mix 2μL RevertAid M-MuLV Reverse Transcriptase 1μL 20μL 42℃ 60min 70℃,5min,﹣20℃保存

工程材料实验报告

工 程 材 料 实 验 报 告 院系:机械工程学院 班级:10届机电一班 组员:魏仕宏 1000407008 崔继文 1000407010 丁元辉 1000407021 郑鹏涛 10004070

实验项目名称:金相试样的制备及铁碳合金平衡组织观察与分析 一、实验目的和要求 1.通过观察和分析,熟悉铁碳合金在平衡状态下的显微组织,熟悉金相显微镜的使用; 2.了解铁碳合金中的相及组织组成物的本质、形态及分布特征; 3.分析并掌握平衡状态下铁碳合金的组织和性能之间的关系。 二、实验内容和原理 1 概述 碳钢和铸铁是工业上应用最广的金属材料,它们的性能与组织有密切的联系,因此熟悉掌握它们的组织,对于合理使用钢铁材料具有十分重要的实际指导意义。 ⑴碳钢和白口铸铁的平衡组织 平衡组织一般是指合金在极为缓慢冷却的条件下(如退火状态)所得到的组织。铁碳合金在平衡状态下的显微组织可以根据Fe—Fe3C相图来分析。从相图可知,所有碳钢和白口铸铁在室温时的显微组织均由铁素体(F)和渗碳体(Fe3C)所组成。但是,由于碳含量的不同,结晶条件的差别,铁素体和渗碳体的相对数量、形态,分布和混合情况均不一样,因而呈现各种不同特征的组织组成物。碳钢和白口铸铁在室温下的平衡组织见表1。 a)工业纯铁——室温时的平衡组织为铁素体(F),F为白色块状(如图1所示); b)亚共析钢——室温时的平衡组织为铁素体(F)+珠光体(P),F呈白色块状,P呈层片 状,放大倍数不高时呈黑色块状(如图2所示)。碳质量分数大于0.6%的亚共析 钢,室温平衡组织中的F呈白色网状包围在P周围(如图3所示); c)共析钢——室温时的平衡组织是珠光体(P),其组成相是F和Fe3C(如图4、5所示); d)过共析钢——室温时的平衡组织为Fe3CⅡ+P。在显微镜下,Fe3CⅡ呈网状分布在层片 状P周围(如图6所示); e)亚共晶白口铸铁——室温时的平衡组织为P+Fe3CⅡ+ Ld'。Fe3CⅡ网状分布在粗大块 状的P的周围,Ld'则由条状或粒状P和Fe3C基体组成(如图7所示);

材料实验报告

钢的热处理实验报告 一、实验目的 1、了解碳钢的基本热处理(淬火、回火)工艺方法。 2、研究冷却条件对碳钢性能的影响。 3、分析淬火及回火温度对碳钢性能的影响。 二、实验设备及材料 1、箱式电炉及控温仪表; 2、洛氏硬度机; 3、冷却介质:水; 4、试样材料:45钢。 三、实验原理 1、钢的淬火 所谓淬火是用来提高工件的硬度和强度等,方法是把工件加热到临界温度以上(即稍高于AC3),然后以最快的速度冷却(在水中或油中以及在其它溶液中进行冷却),由于冷却速度太快,使得含碳量较多的γ铁(即奥氏体)来不及分解却形成非平衡状态的马氏体和残余奥氏体,形成马氏体的过程可写成为: A→M 正常的淬火(在水中冷却)组织为马氏体,高碳钢的马氏体是针状,这些针状物之间彼此相交成60°、90°、120°的角度,低碳钢的马氏体是板条状的。所谓马氏体就是碳在α铁中的过饱和固溶体,它可分为正方形和立方形,前者由淬火而得,后者由低温回火而得。马氏体针状的粗细决定于加热至高温时奥氏体晶粒的大小,奥氏体晶粒愈大,所产生的马氏体针状物就愈粗。正常淬火时,马氏体组织应该是细针状,若淬火时钢的加热过高,就会得到粗针状马体,这种钢在很大的脆性。 为了正确地进行钢的淬火,必须考虑下列三个重要因素:淬火加热的温度、保温时间和冷却速度。 (1)淬火温度的选择 选定正确的加热温度是保证淬火质量的重要环节。淬火时的具体加热温度主要取决于钢的含碳量,可根据相图确定(如图4所示)。对亚共析钢,其加热温度为+30~50℃,若加热温度不足(低于),则淬火组织中将出现铁素体而造成强度及硬度的降低。对过共析钢,加热温度为+30~50℃,淬火后可得到细小的马氏体与粒状渗碳体。后者的存在可提高钢的硬度和耐磨性。 (2)保温时间的确定

基因工程大实验报告

基因工程综合实验报告 A型产气荚膜梭菌α毒素基因克隆及表达 班级生物工程081班 姓名盖雪 学号08771029 指导教师高凤山 实验时间2011.10.10-10.14 成绩

一、实验原理 二、主要试剂 DNA Ligation Kit Ver.2.0; Eco RI、Bam HI限制性内切酶;含15%甘油的 0.1mol/L CaCl2,20-30mL。无菌;0.1mol/L CaCl2 , 20-30mL ;50%甘油(无菌,保存菌种用,50mL)4×25mL LB液体培养基(现配现用),卡那霉素(Kan)100mg/mL配2mL(过滤),X-gal 二甲基甲酰胺配成20mg/mL 配2mL; IPTG 24mg/mL, 配2mL(需过滤);蛋白Marker; 0.5M EDTA,pH8.0; 溴化乙锭溶液(EB) (贮存浓度:10mg/mL,使用浓度0.5μg/mL)

三、仪器设备 紫外成像系统,高速冷冻离心机,恒温震荡培养箱,高压灭菌锅,冰箱,水浴锅,微波炉,电炉子,试管架,tube 架,试管,瓶塞,锥形瓶,胶板,电泳槽(包括琼脂糖凝胶和SDS-PAGE),电泳仪,培养皿,移液枪,枪头(各种规格),玻璃涂棒,记号笔,标签纸,卫生纸,水漂(水浴用),试纸,称量纸,一次性手套,酒精灯,火柴,药勺,搅拌子,量筒,烧杯,镊子,tip, tube(1.5mL, 2mL) 五、实验步骤 (一)准备工作 LB培养基配制;LB固体培养基配置;接菌(制备感受态用) 1)LB固体配制 配制固体培养基100mL 加入蒸馏水100mL溶解,用2mol/L NaOH调pH值至7.4,121℃灭菌20min。 灭菌结束后,待温度降至80℃以下时,方能取出,在超净台上,当培养基凉至50-60℃时,迅速加入Kan 30μL(若氨苄,加100ul),摇匀,倒板(4个)。凝固后放入4℃冰箱。 2)LB液体配制 配制100mL液体LB培养基 加入蒸馏水100mL溶解,用2mol/L NaOH调pH值至7.4。 然后分装,每管5mL,每人分装2管,一共12管;另外分装30mL LB与三角瓶中,余下的LB在原三角瓶中与试管等一起高压,121℃,20min。高压后,将剩余三角瓶中的LB分装至1.5mL tube中,每管800μL LB (共10个)。在时间允许的情况下,将高压后的LB试管加入卡那,每管1.5μL。 总结:需要灭菌的东西-液体培养基(试管、30mL三角瓶及剩余液体LB的三角瓶)-固体培养基、离心管(至少30个)、各种规格的枪头。 3)接菌 下午,接种BL21感受态于1管5mL培养基中,37℃震荡培养。 (二)感受态细胞制备、转化、重组菌接种 1)感受态细胞的制备 1.从大肠杆菌DE3平板上挑取一个单菌落接种于5mL LB液体培养基的试管

建筑材料实验报告模板

建筑材料实验报告 XXXXX学院 土木工程系 班级 姓名 学号

水泥性能测试试验报告 试验日期: 气(室)温: C:湿度: 一、试验内容 二、主要仪器设备 三、试验记录 所选水泥样品产地、厂名 水泥品种:出厂标号:

1.水泥细度测定(干筛法) 结论: 根据国家标准GB 该水泥细度为 2.水泥标准稠度用水量测试 室温:℃;相对湿度: % (1)试件成型日期年月日 成型三条试件所需材料用量 (2)测试日期年月日;龄期:天 (3)抗折强度测定 (4)抗压强度测定

4.确定水泥强度等级(只按试验一个龄期的强度评定) 根据国家标准 该水泥强度等级为 混凝土用骨料性能试验报告 试验日 期: 气(室)温: C:湿度: 一、试验内容 二、主要仪器设备 三、试验记录 1.砂的筛分析试验 筛孔尺寸(mm)105 2.5 1.250.630.3150.16筛底筛余质量(g) 分计筛余量a(%) 累计筛余量A(%)

砂样细度模数Mx Mx= Mx= 结论:按M X 该砂样属于砂,级配属于区;级配情况。2.砂的泥含量测试 编号冲洗前的烘干试样 质量G1(g) 冲洗后的烘干试样 质量G2(g) 泥含量(%) 测定值 (%) 平均值 (%) 3.砂的视密度测试 试样名称:水温:℃ 编号试样质量 G12(g) 瓶+砂+满水 质量G13(g) 瓶+满水 质量G14(g) 砂样在水中所占 的总体积V(cm3) 视密度 ρ0(g/cm3) 平均值 (g/cm3) 编号 容量筒容积 V(L) 容量筒质量 G1(kg) 容量筒+砂 质量 G2(kg) 砂质量 G(kg) 堆积密度 (kg/L) 平均值 (kg/L) 级配连续粒级 筛孔尺寸 分计筛余(g)(%) 累计筛余(%) 石子筛分析测试结果评定: (1)最大粒径: mm

材料分析(SEM)实验报告

材料专业实验报告 题目:扫描电镜(SEM)物相分析实验学院:先进材料与纳米科技学院专业:材料物理与化学 姓名: 学号:1514122986 2016年6月30日

扫描电镜(SEM)物相分析实验 一.实验目的 1.了解扫描电镜的基本结构与原理 2.掌握扫描电镜样品的准备与制备方法 3.掌握扫描电镜的基本操作并上机操作拍摄二次电子像 4.了解扫描电镜图片的分析与描述方法 二.实验原理 1.扫描电镜的工作原理 扫描电镜(SEM)是用聚焦电子束在试样表面逐点扫描成像。试样为块状或粉末颗粒,成像信号可以是二次电子、背散射电子或吸收电子。其中二次电子是最主要的成像信号。由电子枪发射的电子,以其交叉斑作为电子源,经二级聚光镜及物镜的缩小形成具有一定能量、一定束流强度和束斑直径的微细电子束,在扫描线圈驱动下,于试样表面按一定时间、空间顺序作栅网式扫描。聚焦电子束与试样相互作用,产生二次电子发射以及背散射电子等物理信号,二次电子发射量随试样表面形貌而变化。二次电子信号被探测器收集转换成电讯号,经视频放大后输入到显像管栅极,调制与入射电子束同步扫描的显像管亮度,得到反映试样表面形貌的二次电子像。 本次实验中主要通过观察背散射电子像及二次电子像对样品进行分析表征。 1)背散射电子 背散射电子是指被固体样品原子反射回来的一部分入射电子,其中包括弹性背反射电子和非弹性背反射电子。弹性背反射电子是指被样品中原子和反弹回来的,散射角大于90度的那些入射电子,其能量基本上没有变化(能量为数千到数万电子伏)。非弹性背反射电子是入射电子和核外电子撞击后产生非弹性散射,不仅能量变化,而且方向也发生变化。非弹性背反射电子的能量范围很宽,从数十电子伏到数千电子伏。背反射电子的产生范围在100nm-1mm深度。背反射电子产额和二次电子产额与原子序数的关系背反射电子束成像分辨率一般为50-200nm(与电子束斑直径相当)。背反射电子的产额随原子序数的增加而增加,所以,利用背反射电子作为成像信号不仅能分析形貌特征,也可以用来显示原子序数衬

实验报告模板

实验报告 (2013 / 2014 学年第二学期) 课程名称Java语言程序设计 实验名称综合图形界面程序设计 实验时间2014年5月5日 指导单位计算机学院软件教学中心 指导教师薛景 学生姓名臧玉付班级学号12001037 计算机科学与技术学院(系)计算机学院专业 (计算机通信)

2、编写一个简单的计算器软件,实现简单的四则运算。(请在下方空白处填写本程序的全部 ..程序代码及软件界面截图) import java.awt.BorderLayout; import java.awt.GridLayout; import java.awt.event.ActionEvent; import java.awt.event.ActionListener; import javax.swing.JButton; import javax.swing.JFrame; import javax.swing.JPanel; import javax.swing.JTextArea; import javax.swing.JTextField; public class test extends JFrame { private final int BUTTON_WIDTH=50; private final int BUTTON_HEIGHT=40; JButton one=new JButton("1"); JButton two=new JButton("2"); JButton three=new JButton("3"); JButton four=new JButton("4"); JButton five=new JButton("5"); JButton six=new JButton("6"); JButton seven=new JButton("7"); JButton eight=new JButton("8"); JButton nine=new JButton("9"); JButton zero=new JButton("0"); JButton DOT=new JButton("."); JButton ADD=new JButton("+"); JButton SUB=new JButton("-"); JButton MUL=new JButton("*"); JButton DIV=new JButton("/"); JButton EQU=new JButton("=");

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