土壤中全磷测定
土壤全磷分析
土壤全磷测定要求把无机磷全部溶解，同时把有机磷氧化成无机磷，因此测定的第一步是样品分解，第二步是溶液中磷的测定。
一、HClO4–H2SO4消煮，钼蓝比色法
1.方法原理
在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的H2SO4和强氧化剂HClO4作用，分解成正磷酸盐而进入溶液。
在一定酸度下，正磷酸根与钼酸铵作用生成磷钼杂多酸，在还原剂的作用下形成“钼蓝”，使溶液呈蓝色。蓝色深浅与磷的含量成正比，可用分光光光度法于700nm处测定。
2.仪器设备
分光光度计 消煮炉
3.试剂
（1）浓H2SO4；
（2）70%～72%HClO4；
（3）2,4-二硝基酚指示剂：0.2g 溶于100 mL水中；
（4）4 mol?L-1氢氧化钠溶液；
（5）钼锑储存溶液；a浓硫酸153 mL缓缓倒入400 mL水中，b10g 钼酸铵溶于60℃ 300 mL水中，a倒入b中，加入100 mL 5g·L-1的酒石酸锑钾溶液，用水定容摇匀，贮存于棕色试剂瓶中。
（6）钼锑抗显色剂：100 mL钼锑储存溶液中加1.5g抗坏血酸，现配现用。
（7）磷标准贮存溶液（ρ=100 mg·L-1)，0.4390g 磷酸二氢钾（105℃烘2h）溶于100 mL水中，加入5mL硫酸，定容至1L；
（8）磷标准溶液（ρ=5.00mg·L-1)，磷标准贮存溶液准确稀释20倍。
4.操作步骤
（1）样品消煮
称取100目土样0.3～1 g于50 mL消化管中
→ 加少量水润湿后加浓硫酸8mL，摇匀
→ 加70～72%高氯酸10滴 ，摇匀，管口加一个小漏斗
→ 加热消煮，至溶液开始转白后继续消煮20min
→ 冷却后用水洗入100 mL容量瓶中
→ 定容摇匀
→ 静置过夜取上清液或用干燥的无磷滤纸过滤。
（同时做空白试验）
（2）溶液中磷的比色测定
移取澄清液或滤液2～10 mL于50ml容量瓶中
→ 加水至约30 mL
→ 加二硝基酚指示剂2滴
→ 用4 mol?L-1 NaOH调节pH至溶液刚呈黄色
→ 加钼锑抗显色剂5 mL
→ 定容，摇匀
→ 半小时后（高于15℃）于700nm处比色测定
标准曲线
分别移取5.00mg·L-1磷标准溶液0、1、2、3、4、5mL于50mL容量瓶中，同上操作， 以吸光度为纵坐标，磷浓度为横坐标绘制工作曲线。
5. 结果计算
土壤全磷(P)量 = ρ×V ×ts×/m10-3（mg·kg-1）
ρ —— 从工作曲线查得待测液中P浓度（mg·L-1）
V —— 显色液体积（mL）
Ts —— 分取倍数
10-3 ——换算系数
m —— 烘干土质量（g）
二. NaOH熔融—钼锑抗比色法
1.方法原理
土壤样品与NaOH熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，用分光光度法定量
测定。
2.仪器设备
镍坩埚 高温电炉 分光光度计
3.试剂
1）NaOH； （2）无水乙醇； （3）其余同HClO4–H2SO4消煮，钼蓝比色法。
4. 操作步骤
（1）熔样
称取100目土样0.2500g于镍坩埚中，切勿粘在壁上
→ 加入无水乙醇3～4滴湿润样品
→ 在样品上平铺2g氢氧化钠，将坩埚放入高温电炉
→ 当温度升至400℃左右时，切断电源，暂停15min
→ 然后继续升温至720℃，并保持15min
→ 取出冷却，加入约80℃的水10mL将内容物洗入100 mL容量瓶中，并用水多次洗涤坩埚，冷却，定容
→ 用无磷定量滤纸过滤（同时做空白试验）
（2）溶液中磷的比色测定同HClO4–H2SO4法
※土壤有效磷的测定
一、NaHCO3法
1. 方法原理
用0.5mol?L-1NaHCO3 (pH 8.5)提取土壤有效磷。
在石灰性土壤中提取液中的HCO3-可和土壤溶液中的Ca2+形成CaCO3沉淀，从而降低了Ca2+的活度而使某些活性较大的Ca-P被浸提出来。
在酸性土壤中因pH 的升高而使Fe–P和 Al–P水解而部分被提取。
此外，碳酸氢钠碱溶液中存在的OH-、HCO3-、CO32-等阴离子，有利于吸附态磷的置换。
在浸提液中Ca、Fe、Al浓度较低，不会产生磷的再沉淀，溶液中的磷可用钼蓝比色法测定。
2. 仪器设备
往复式振荡机 分光光度计
3. 试剂
（1）0.5 mol?L-1 NaHCO3 （pH 8.5）浸提剂
（2）无磷活性炭
→盐酸浸泡，抽气过滤，多次淋洗
→0.5 mol?L-1NaHCO3浸泡，抽气过滤，多次淋洗
→直至检查无磷。
（3）钼锑抗显色剂
（4）磷标液
4. 操作步骤
（1）浸提
称取20目风干土样2.50 g 于100 mL塑料瓶中
→加入50 mL NaHCO3 浸提剂
→加一小勺无磷活性炭吸附有色物质及其它悬浮物以消除干扰。
→20～25℃恒温振荡30 min
→无磷滤纸过滤
（同时做空白试验）
（2）溶液中磷的比色测定
移取滤液10 mL(1～10 mL)于50 mL容量瓶中
（不足10 mL时应补加碳酸氢钠浸提液至10 mL）
→加水至约35mL，加5 mL钼锑抗显色剂
→摇至无气泡后定容摇匀
→30 min 后于700 nm处比色
（3）制作标准曲线（略）
本法中最后显色液的酸度为0.45mol?L-1，仍然在钼蓝法要求控制的显色液酸度范围(0.35～0.55 mol?L-1)内，可以不调酸碱度。
5. 结果计算
土壤有效磷(P) = ρ×V ×ts×/m10-3（mg·kg-1）
ρ —— 从工作曲线查得显色液中P浓度（mg·L-1）
V —— 显色液体积（mL）
Ts —— 分取倍数
m —— 风干土质量（g）
二、HCl-NH4F 法（Bray I 法）
1.方法原理
本法通过两种作用释放土壤中的有效磷：一方面F-与Fe-P、Al-P中的Fe、Al在酸性条件下形成络合物，促进了Fe-P
和Al-P的溶解；另一方面，稀酸可溶解部分磷。溶液中的磷可用钼蓝比色法测定。
2. 仪器设备
往返振荡机 分光光度计
3.试剂
浸提剂：0.03 mol?L-1NH4F – 0.025 mol?L-1HCl；1.11gNH4F溶于800mL水中，加25mL1mol?L-1HCl，定容至1L，贮存于塑料瓶中。0.8 mol?L-1硼酸溶液，钼锑抗显色剂，磷标液
4. 操作步骤
（1）浸提
称取20目风干土样5.00 g于100mL塑料瓶中
→加入50 mL HCl–NH4F浸提剂
→20～25℃恒温振荡30 min
→ 过滤于塑料瓶中
（同时做空白试验）
（2）溶液中磷的比色测定
移取滤液10～20 mL于50 mL容量瓶中
→ 加10ml硼酸溶液
→ 加二硝基酚指示剂2滴
→ 用稀 NaOH调节pH至溶液刚呈黄色
→ 钼蓝比色法测定
（3）制作标准曲线（略）
显色过程加硼酸主要为了和氟离子形成络合物，避免氟对磷测定造成干扰。风化程度较高的强酸性土壤可用（Bray II 法）0.03 mol?L-1NH4F – 0.1 mol?L-1HCl法
5. 结果计算
土壤有效磷(P) = ρ×V ×ts×/m10-3（mg·kg-1）
ρ —— 从工作曲线查得显色液中P浓度（mg·L-1）
V —— 显色液体积（mL）
Ts —— 分取倍数
m —— 风干土质量（g）
三、阴离子交换树脂法
1.方法原理
通过阴离子交换树脂中阴离子和土壤中的吸附磷酸根相交换，从而使磷从土壤固相不断释放（这部分磷对作物是有效的）。用氯化钠将吸附在树脂上的磷置换下来进行测定。
2. 仪器设备
往返振荡机 蒸汽浴 50目筛子
3.试剂
阴离子交换树脂：强盐基型，Cl-饱和，颗粒大小在30至50目之间。100 g?L-1 氯化钠溶液，其它试剂钼蓝法测定磷
4. 操作步骤
称取100目风干土样1.000g、树脂1g于250mL三解瓶中
→加入100 mL 水连续振荡16h
→将悬液倾入50目以上筛中，用水冲洗，洗去土粒
→将树脂移入盛有25 mL氯化钠溶液的50 mL烧杯中
→在蒸汽浴上加热40min后冷却
→过滤入100 mL容量瓶中，用氯化钠冲洗至100 mL
→吸取40 mL滤液于50 mL容量瓶中
→加指示剂调酸碱度用钼蓝法比色测定。
※土壤有机磷的测定
一、土壤有机磷的测定
土壤有机磷通常采用间接测定法
灼烧法：用高温（550℃）或低温（250℃）灼烧
缺点：烧灼过程中可能改变矿物态磷的溶解度；有机磷含量高时，高温使部分磷挥发
浸提法：用酸或碱浸提
缺点：手续繁复，浸提不易完全，在浸提过程中有机磷可能水解
1.方法原理
土壤经过550℃灼烧，使有机磷化合物转化为无机态磷；然后与未经灼烧的同一土样，分别用硫酸溶液1 mol?L-1 (1/2H2SO4) 浸提后，用钼蓝法分别测定磷；二者结果的差即为有机磷
2.仪器
设备
马福炉（高温电炉） 离心机 分光光度计
3.试剂
硫酸溶液1 mol?L-1 (1/2H2SO4)；将28mL浓硫酸缓缓倒入1L水中并同时搅拌；2,4-二硝基酚指示剂；4 mol?L-1氢氧化钠溶液；钼锑抗显色剂；磷标液
4.操作步骤
（1）浸提
称取60目风干土样1.00 g 于25 mL瓷坩埚中
→缓缓升温至550℃，保持1h
→取出，冷却
→用50 mL硫酸溶液将土样洗入100 mL离心管中
→称取60目风干土样1.00 g于另一离心管中，加入50 mL硫酸溶液，混匀
→两离心管加塞，在振荡机上振荡16h
→干过滤，滤液用于磷的测定
（同时做空白试验）
（2）溶液中磷的比色测定
移取滤液适量于50 mL容量瓶中
→加水至约3mL
→加指示剂并用氢氧化钠调至溶液刚出现黄色
→加5 mL钼锑抗显色剂
→30 min 后于700 nm处比色
（同时做空白试验）
（3）制作标准曲线（略）
二者结果的差即为有机磷
二、土壤有机磷分组测定
化学浸提：根据土壤有机磷在不同浓度酸碱溶液中的水解量，分成四种不同的的组分
活性有机磷
—— 0.5 mol·L-1 NaHCO3提取的有机磷。
中等活性有机磷
—— 1.0 mol·L-1 H2SO4和0.5 mol·L-1NaOH提取的有机磷。
中稳性有机磷（富里酸磷）
—— 能溶于0.5 mol·L-1NaOH，在pH1~1.8条件下不沉淀，难以为植物吸收的磷。
高稳性有机磷（胡敏酸磷）
—— 能溶于0.5mol·L-1NaOH，pH1~1.8条件下沉淀，难以为植物吸收的磷。
※土壤无机磷分级测定
土壤中无机磷形态历来为土壤学者所重视。因为如果知道土壤中磷的化学形态，将很容易地知道土壤中磷的各种化学性质及其对植物营养的关系。
虽然这方面做了不少努力但难度很大。到目前为止，现有方法大多只是将无机磷粗略分类。
现有方法中应用最广的是50年代张守敬和Jackson提出的无机磷的分级方法。
一、张守敬和Jackson法（1957）
利用对土壤中各种无机磷酸盐具有不同浸提能力的化学浸提剂，将这些无机磷酸盐进行逐级分离
第一级：用1mol/L NH4Cl溶液浸提 →水溶性磷、 断键的和松结合态磷（磷很少，可以不测）
第二级：用0.5mol/L（pH8.2）NH4F溶液浸提 →Al-P
第三级：用0.1mol/L NaOH溶液浸提→Fe-P
第四级：用0.3mol/L柠檬酸钠和连二亚硫酸钠Na2S2O4溶液浸提→O-P
第五级：用0.5mol/L 1/2H2SO4溶液浸提→Ca-P
这个方法的缺点是在用NH4F溶液浸提时，会因产生CaF2而导致磷的沉淀，从而使Al-P偏低，Fe-P偏高。
所以它不适用于石灰性土壤。
对Al-P、Fe-P也难以达到清楚分组的目的。
但在酸性土壤仍不失为一个好方法。
石灰性土壤中无机磷的分级，我国顾益
初等提出了一个新的分级方法。
二、顾益初、蒋柏藩法（1990）
石灰性土壤中无机磷的重要特征之一是Ca-P占有很大的比例。而不同组成Ca-P化合物在性质和有效性上存在着很大的差别。
根据不同组成的Ca-P化合物采用相应的浸提剂将它们分离出来。
特点：将石灰性土壤中磷酸钙分为Ca2-P、Ca8-P和Ca10-P三种形态；用混合型浸提剂提取磷酸铁盐，能将土壤中Fe-P、O-P 进行很好的分离。
用0.25 mol·L-1 NaHCO3溶液(pH7.5)浸提土壤→Ca2-P，同时也包括水溶性磷
用0.5mol·L-1 NH4OAc 溶液(pH4.2)浸提土壤→Ca8-P
用0.5 mol·L-1 NH4F溶液(pH8.2)浸提土壤→Al-P
用0.1mol·L-1 NaOH和0.1mol·L-11/2Na2CO3混合溶液浸提 →Fe-P
用0.3 mol·L-1 柠檬酸钠-Na2S2O4溶液浸提→O-P
用0.5 mol·L-1 H2SO4溶液浸提→Ca10-P
友情链接： --学校相关网站-- --相关专业网站-- --教育行政部门-- --其他友情链接-- 环境保护部公益性行业专项江苏省环保厅科研管理国家科技计划项目申报中心江苏省农委科研项目申报
Copyright 2010 https://www.360docs.net/doc/7d14100991.html, 版权所有
地址：江苏省扬州市华扬西路196号扬州大学扬子津校区 电话：0514-******** 传真：0514-******** 邮箱：hjxy@https://www.360docs.net/doc/7d14100991.html,