硝基苯类 还原偶氮分光光度法

硝基苯类一稍基和二硝基化合物还原一偶氮光度法（B) 1．方法原理

在含硫酸铜的酸性溶液中，由锌粉反应产生的初生态氢将硝基苯还原成苯胺，经重氮偶合反应生成紫红色染料，进行比色测定。以硝基苯为例，反应如下：

当测定含有苯胺类化合物的废水时，需测定两份样品，一份不经还原测苯胺类含量，另一份按本法将硝基苯类还原成苯胺类测定其总吸光度，在减去苯胺类的吸光度后，计算出硝基苯类化合物的含量。

本法测得结果为一硝基和二硝基类化合物，测定结果均以硝基苯表示。

2．干扰及消除

酚200mg/L以下、乙醇5％以下、甲醇2.5％以下、丙酮10%以下无干扰。

3．方法的适用范围

本方法适用于测定染料、制药、皮革及印染等行业废水中的硝基苯类化合物，最低检出浓度为0.2mg/L。

4．仪器

①分光光度计。② 25m1具塞比色管。

5．试剂

①盐酸（ρ=1.18g/ml)。②锌粉。

③ 20％硫酸氢钾溶液。④10％硫酸铜溶液。⑤ 10%氢氧化钠溶液。

⑥5％亚硝酸钠溶液：称取1.0g亚硝酸钠溶于20m1水中，贮存于棕色瓶中，置冰箱内保存，放置时间不要超过三周。

⑦2.5%氨基磺酸馁溶液：称取2.5g氨基磺酸钱溶于l00m1水中，贮存于棕色瓶中，置冰箱内保存，放置时间不要超过三周。

⑧2% N- (1-萘基）乙二胺溶液：称取10gN-(1-萘基）乙二胺盐酸盐溶于水中，在沸水浴上加热使成澄清液，加水至50m1，贮存于棕色瓶中，置冰箱内保存。当颜色加深或出现沉淀时，需重新配制。

⑨精密pH试纸（pH范围0.5-5.0)。

⑩硝基苯标准溶液：取l0ml乙醇于25m1容量瓶中，盖紧瓶塞，精确称重。加入2-3滴硝基苯，盖紧瓶塞再称重。用0.lmol/L硫酸溶液稀释至标线，摇匀。使用时，再用0.lmol/L硫酸溶液稀释，配制成每毫升含0.l00mg硝基苯的使用液。

6．步骤

(1）校准曲线的绘制

①吸取1.00ml硝基苯使用溶液（每毫升含0.l00mg）于50m1锥形瓶中，加水至20ml,加入浓盐酸2.0m1，锌粉0.5g, 10％硫酸铜溶液2滴，摇匀。放置15min，过滤，滤液收集于50m1容量瓶中，用水洗涤滤纸三次，稀释至标线，混匀。

②吸取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10.0ml分别置于25m1比色管中，加水至0ml。加10%氢氧化钠溶液至出现白色絮凝状沉淀（pH5)加水至标线，摇匀。加lml 20％硫酸氢钾溶液混匀，待白色沉淀消失。加5％亚硝酸钠溶液1滴，摇匀。放置3min，加2.5%氨基磺酸铵溶液

0.5ml，充分摇匀，放置3min，待气泡除尽后，加入2%N- (1-萘基）乙二胺溶液1.0ml，摇匀。

②放置30min，用l0mm比色皿，于545nm波长处，以水为参比，

测量吸光度。减去零浓度的空白吸光度后，绘制校准曲线。

(2）样品测定

①取适量水样（使硝基苯加苯胺的总吸光度不超过0.5)于锥形瓶中，加水至20m1,加浓盐酸2.0ml，锌粉0.5g, 10％硫酸铜溶液2滴，摇匀。放置15min，过滤并转移至50ml容量瓶中，用水洗涤锥形瓶及滤纸三次，稀释至标线，混匀。

②取与①同样量水样于50m1容量瓶中，加浓盐酸2.0m1, 10％硫酸铜溶液2滴，加水至标线，混匀。

③分取上述①、②溶液各10.0ml，分别置于25ml比色管中，与绘制校准曲线步骤相同，以水为参比，测量吸光度。

④空白试验：取20ml水于锥形瓶中，加浓盐酸2.0ml、锌粉0.5g，用与样品测定相同操作步骤，测量空白吸光度。由①、②两份水样所测得的吸光度减去空白吸光度后的差值，分别为水样中的硝基苯类和苯胺类的吸光度。

7．计算

硝基苯类（mg/L)＝m×5/V

式中：m——由硝基苯类的吸光度减去苯胺类吸光度后，在校准曲线上查得硝基苯的含量(μg);

V——水样体积（ml)。 8．精密度和准确度

浓度为3.8mg/L的制药废水，经六个实验室测定，室内相对标准偏差为3.5%；室间相对标准偏差为6.1%；加标回收率为90.3％-108.6%。 9．注意事项

①当水样中苯胺类化合物含量（酸化后测得的苯胺含量）是硝基苯类化合物含量7倍时，本方法仍适用。若苯胺比例增加，则误差增大。

②由于水样酸化与否对苯胺类测得值有影响，因此测定样品时，①、②一定要同时取样，同时加入盐酸及硫酸铜溶液，待②样还原后，同时进行比色。③水样经还原操作过滤时，应使用慢速滤纸。

④加10%氢氧化钠溶液于经还原操作的水样中，当pH调至4-5时，溶液可能出现絮状沉淀，而不经还原操作的水样则无絮状沉淀。因此，氢氧化钠溶液用量会略多于经还原操作的水样。⑤本方法最适宜的显色温度在22-30℃，当低于此温度时，尤应注意校准曲线与水样同时进行操作。

⑥当水样色泽较深时，将同时影响硝基苯类和苯胺类吸光度的测量。必要时，应在减去水样空白吸光度后，查得并计算两者的含量（参见本章二、苯胺类，注意事项③）