离子及药物对离体蛙心脏活动得影响

动物生理学实验报告

开课学院及实验室:XXX 2011年4月8日

学院生命科学

学院

班别XXX 姓名XXX 学号XXX

实验课程名称动物生理学实验组别第四组成绩

实验项目名称离子及药物对离体蛙心脏活动得影响指导老师

一、实验目的

1、学习制备离体蛙心脏及离体心脏灌流的方法。

2、观察钠离子、钾离子、钙离子3种离子,去甲肾上腺素、乙酰胆碱、温度、酸碱度等

因素对心脏活动的影响。

3、通过实验使学生初步对递质、受体、受体兴奋剂及受体阻断剂的概念有所感知。

二、实验原理

心脏正常的节律性活动必须在适宜的理化环境中进行,一旦适宜的环境被破坏,例如酸碱度及离子浓度的急剧改变等,心脏的活动就会受到影响。在整体内,心脏的活动受自主神经的双重支配,交感神经兴奋时,其末梢释放去甲肾上腺素,使心肌收缩力量增强,心率加快;而迷走神经兴奋时,其末梢释放乙酰胆碱,使心肌收缩力量减弱,心率减慢。强心甙类药物能够增强心肌收缩能力,减慢心率。

青蛙心脏离体后,用理化特性近似于血浆的任氏液灌流,在一定时间内,可保持其比较稳定的节律性收缩和舒张。改变任氏液的组成成分,如改变Na+﹑K+﹑Ca2+ 的浓度及酸﹑碱度等,心脏跳动的频率和幅度就会发生相应的改变。当血钾离子过高时,心肌兴奋性、自律性、传导性和收缩性均降低,表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞,严重时心脏可停搏于舒张期。而血钙离子升高时,心肌收缩力增强,但过高时可使心室停搏于收缩期。而血钙离子降低时,心肌收缩力减弱。血钠离子轻微变化对心肌影响不明显,只有发生明显变化时才会影响心肌的生理特性,钠离子剧烈升高时心脏的兴奋性和自律性虽升高,但兴奋的传导性和收缩性却下降,严重时可使心脏停搏于舒张期。

三、使用仪器、材料

1、实验仪器:生物信号采集处理系统,张力换能器,小动物手术器械,蛙板,细线,滴

管,烧杯,蛙心夹,滴管,万能支架等

2、实验材料:0.4%肝素-任氏液插管用,任氏液,0.65%氯化钠,2%氯化钙,1%氯化钾,

3%乳酸,2.5%碳酸氢钠,1:10000肾上腺素,1:10000乙酰胆碱,1:5000阿托品等溶液

四、实验步骤

1、双毁髓法处死青蛙

2、蛙类离体心脏制备

3、实验装置连接

4、记录不同离子及药物对心脏收缩的影响

先描记正常的蛙心搏动曲线,注意观察心搏频率、心室的收缩和舒张程度。然后依次

把NaCl溶液、KCl溶液l、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品、4°C任氏液、NaHCO3溶液、乳酸灌到离体蛙心中,观察心搏曲线变化。

五、实验结果

表一:改变灌流液成分对离体蛙心活动的影响

实验项目5%NaCl 2%CaCl2 1%KCl 肾上腺素乙酰胆碱阿托品

心率变化(%)—6.67 0 -44.8 0 -100 +18.2

振幅变化(%)-73.7 先变大(+4)-92.7 +56.2 -100 +24.7

后变小(-33.7)

基线变化略微下降明显上升略微上升略微下降略微上升变化不明显

续表:

实验项目4℃任式液NaHCO3 1%乳酸滴加乳酸后直接滴加NaHCO3

心率变化(%)-8.1 +10 -6.5 +8.7

振幅变化(%)-11.9 -27.3 -41.3 +54.7

基线变化明显上升略微上升略微下降略微上升

注:表中0表示心率变化或振幅变化很小,没有比较意义(正常生理状态下心率也不是固定不变的);-100则表示心脏完全停跳,与心脏活性、药物量等有关。“+”表示心率加快或振幅变大;“-”表示心率减慢或振幅变小。

六、实验分析

1、结果分析

(1)、Na+的影响

收缩力减弱,心率加快。加入NaCl溶液,Na+浓度升高,导致Ca2+与肌钙蛋白的

结合能力降低,Ca2+的内流减少,而心肌细胞的兴奋-收缩耦联又在很大程度上依

赖于细胞外内流的Ca2+,所以心肌的收缩能力被抑制,收缩力减弱,基线下降。

同时Na+内流加速,自动除极速度加快,故自律性增强,心率提高。

(2)、Ca2+的影响

收缩力增强,心率没变。Ca2+浓度增加,内流增加,每一个AP期间进入细胞内

的钙增多加快,收缩力增强,故幅度变大,又钙离子浓度过大,肌钙蛋白与钙离子

结合不能够解离,发生钙僵直(舒张不完全),故之后幅度又变小,且基线上升。

理论上钙离浓度增大,使钠离子内流限制,心率减慢,实验中心率并没有减慢,可

能是实验材料有个体差异造成。

(3)、K+的影响

收缩力下降,心率减小。钾离子和钙离子在心肌细胞膜上有竞争性抑制,故钾离

子浓度上升,钙离子内流减少,减弱了兴奋收缩偶联作用,收缩力下降,幅度减小。

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