橄榄叶中多酚的提取工艺

橄榄叶中多酚的提取工艺

1.工艺流程

橄榄叶→冷冻干燥→高速绞碎→橄榄叶渣→加乙醇→超声波辅助提取（0.5h）→离心（取上清液）→定容→测吸光值

2. 材料与试剂

油橄榄叶片；福林酚试剂(AR)、焦性没食子酸(AR)、碳酸钠(AR)；无水乙醇。

2.1 仪器与设备

高速粉碎机；电子分析天平；数显恒温水浴锅；分光光度计；SHZ-D Ⅲ循环水式真空泵，冷冻干燥机，超声波提取机。

3.试验方法

将油橄榄叶片在试验室冷冻干燥后，于微型高速粉碎机粉碎，放入干燥器皿中备用。

3.1 单因素试验

称取2 g干燥的叶片粉末，置于250 mL 圆底烧瓶中，在不同条件下（乙醇浓度、提取料液比、提取时间、提取温度作为因素）进行提取，确定各因素较佳值。每次提取液过滤，定容至25mL，测定提取液中多酚的含量并计算出提取率。

3.2 正交试验

以乙醇浓度、提取料液比、提取温度、提取时间作为考察因素，采用正交试验对样品中的多酚进行提取，以多酚提取率作为指标，进行试验优化，确定出最佳提取工艺条件。

提取溶剂的选择：采取不同浓度的乙醇进行对比实验，分别计算其提取率；（30%、50%、70%、90%）

（1）提取温度对得率的影响：选择40、50、60、70℃；

（2）提取时间对得率的影响：选择 20、30、40、50min；

（3）料液比对得率的影响：选择10、20、30、40（ml：g）；

（4）超声波功率对得率的影响：选择200、400、600、800（W）。

3.3 多酚的测定

3.3.1 标准曲线的绘制

标准曲线的绘制：准确吸取没食子酸标准液0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.20mL，移入25mL具塞试管中，分别用水稀释至10.0mL；各加入1.0mL

福林试剂和2.0mL20%的Na

2CO

3

水溶液，试管在沸水裕上加热1min，然后用水冷

却并稀释至25mL。室温放置30min，用1cm的比色杯，在745nm的波长处测定吸光度。以吸收度为纵座标、浓度为横座标绘制标准曲线或求取线性回归方程。

取1ml的待测液，加入1.0mL福林试剂和2.0mL20%的Na

2CO

3

水溶液，试管在沸

水裕上加热1min，然后用水冷却并稀释至25mL。室温放置30min然后用水稀释

至25mL ，于745nm 处进行吸光度的测定。

100m %121???=V V m ）橄榄多酚含量（

式中： m 1——依据标准曲线计算出被测液中酚酸含量（mg ）;

m ——供试品取样量(mg)；

V 1 ——待测液分取的体积(mL)；

V 2 ——待测液的总体积(mL)。

4.提取率和提取得率计算方法

100)%0?=M

C CM 提取率（ 100)%?=

W

CM 提取得率（ 式中：C ——提取物中酚类含量(g/100g)； C 0——橄榄叶粉中酚类含量(g/100g)；

M ——酚类提取物质量(g)；

W ——橄榄叶粉质量(g)。

5.不同品种橄榄叶的多酚含量的比较

对不同品种橄榄叶用以上方法测其多酚含量，然后进行综合比较。