《仪器分析》知识点整理

教学内容

绪论

分子光谱法：UV-VIS、IR、F

原子光谱法：AAS

电化学分析法：电位分析法、电位滴定

色谱分析法：GC、HPLC

质谱分析法：MS、NRS

第一章绪论

⒈经典分析方法与仪器分析方法有何不同？

经典分析方法：是利用化学反应及其计量关系，由某已知量求待测物量，一般用于常量分析，为化学分析法。

仪器分析方法：是利用精密仪器测量物质的某些物理或物理化学性质以确定其化学组成、含量及化学结构的一类分析方法，用于微量或痕量分析，又称为物理或物理化学分析法。

化学分析法是仪器分析方法的基础，仪器分析方法离不开必要的化学分析步骤，二者相辅相成。

⒉仪器的主要性能指标的定义

1、精密度（重现性）：数次平行测定结果的相互一致性的程度,一般用相对标准偏差表示（RSD%），精密度表征测定过程中随机误差的大小。

2、灵敏度：仪器在稳定条件下对被测量物微小变化的响应，也即仪器的输出量与输入量之比。

3、检出限（检出下限）：在适当置信概率下仪器能检测出的被检测组分的最小量或最低浓度。

4、线性范围：仪器的检测信号与被测物质浓度或质量成线性关系的范围。

5、选择性：对单组分分析仪器而言，指仪器区分待测组分与非待测组分的能力。

⒊简述三种定量分析方法的特点和应用要求

一、工作曲线法（标准曲线法、外标法）

特点：直观、准确、可部分扣除偶然误差。需要标准对照和扣空白

应用要求：试样的浓度或含量范围应在工作曲线的线性范围内，绘制工作曲线的条件应与试样的条件尽量保持一致。

二、标准加入法（添加法、增量法）

特点：由于测定中非待测组分组成变化不大，可消除基体效应带来的影响

应用要求：适用于待测组分浓度不为零，仪器输出信号与待测组分浓度

符合线性关系的情况

三、内标法

特点：可扣除样品处理过程中的误差

应用要求：内标物与待测组分的物理及化学性质相近、浓度相近，在相同检测条件下，响应相近，内标物既不干扰待测组分，又不被其他杂质干扰

第2章光谱分析法引论

习题

1、吸收光谱和发射光谱的电子能动级跃迁的关系

吸收光谱：当物质所吸收的电磁辐射能与该物质的原子核、原子或分子的两个能级间跃迁所需要的能量满足ΔE=hv的关系时，将产生吸收光谱。M+hv→M*

发射光谱：物质通过激发过程获得能量，变为激发态原子或分子M*，当从激发态过渡到低能态或某态时产生发射光谱。M*→M+hv

2、带光谱和线光谱

带光谱：是分子光谱法的表现形式。分子光谱法是由分子中电子能级、振动和转动能级的变化产生。

线光谱：是原子光谱法的表现形式。原子光谱法是由原子外层或内层电子能级的变化产生的。

第6章原子吸收光谱法（P130）

熟识: 原子吸收光谱产生的机理以及影响原子吸收光谱轮廓的因素

了解: 原子吸收光谱仪的基本结构；空心阴极灯产生锐线光源的原理

掌握:火焰原子化器的原子化历程以及影响因素、原子吸收光谱分析干扰及其消除方法、AAS测量条件的选择及定量分析方法(实验操作)

1、定义：它是基于物质所产生的原子蒸气对特定谱线的吸收来进行定量分析的方法。基态原子吸收其共振辐射，外层电子由基态跃迁至激发态而产生原子吸收光谱。

原子吸收光谱位于光谱的紫外区和可见区。

2、原子吸收定量原理：频率为ν的光通过原子蒸汽，其中一部分光被吸收，使透射光强度减弱。

3、谱线变宽的因素(P-131)：

⑴多普勒（Doppler）宽度ΔυD：由原子在空间作无规热运动所致。故又称热变宽。

Doppler宽度随温度升高和相对原子质量减小而变宽。

⑵压力变宽ΔυL（碰撞变宽）：由吸收原子与外界气体分子之间的相互作用引起

外界压力愈大，浓度越高，谱线愈宽。

4、对原子化器的基本要求：①使试样有效原子化；②使自由状态基态原子有效地产生吸收；③具有良好的稳定性和重现形；④操作简单及低的干扰水平等。

1．测量条件选择

⑴分析线：一般用共振吸收线。

⑵狭缝光度：W=DS没有干扰情况下，尽量增加W，增强辐射能。

⑶灯电流：按灯制造说明书要求使用

⑷原子条件:燃气：助燃气、燃烧器高度石墨炉各阶段电流值

⑸进样量:（主要指非火焰方法）

2．分析方法

(1).工作曲线法

最佳吸光度0.1---0.5，工作曲线弯曲原因：各种干扰效应。

⑵. 标准加入法

标准加入法能消除基体干扰，不能消背景干扰。使用时，注意要扣除背景干扰。

习题

⒈引起谱线变宽的主要因素有哪些？

⑴自然变宽：无外界因素影响时谱线具有的宽度

⑵多普勒（Doppler）宽度ΔυD：由原子在空间作无规热运动所致。故又称热变宽。

⑶. 压力变宽ΔυL（碰撞变宽）：由吸收原子与外界气体分子之间的相互作用引起

⑷自吸变宽：光源空心阴极灯发射的共振线被灯内同种基态原子所吸收产生自吸现象。

⑸场致变宽(field broadening)：包括Stark变宽(电场)和Zeeman 变宽(磁场)⒉火焰原子化法的燃气、助燃气比例及火焰高度对被测元素有何影响？

①化学计量火焰：由于燃气与助燃气之比与化学计量反应关系相近，又称为中性火焰，这类火焰, 温度高、稳定、干扰小背景低，适合于许多元素的测定。

②贫燃火焰：指助燃气大于化学计量的火焰，它的温度较低，有较强的氧化性，有利于测定易解离，易电离元素,如碱金属。

③富燃火焰：指燃气大于化学元素计量的火焰。其特点是燃烧不完全，温度略低于化学火焰，具有还原性，适合于易形成难解离氧化物的元素测定；干扰较多，背景高。

④火焰高度：火焰高度不同，其温度也不同；每一种火焰都有其自身的温度分布；一种元素在一种火焰中的不同火焰高度其吸光度值也不同；

因此在火焰原子化法测定时要选择适合被测元素的火焰高度。

⒊原子吸收光谱法中的干扰有哪些？如何消除这些干扰？

一．物理干扰：指试样在转移、蒸发和原子化过程中，由于其物理特性的变化而引起吸光度下降的效应，是非选择性干扰。

消除方法：①稀释试样；②配制与被测试样组成相近的标准溶液；③采用标准化加入法。

二．化学干扰：化学干扰是指被测元原子与共存组分发生化学反应生成稳定的化合物，影响被测元素原子化，是选择性干扰，一般造成A下降。

消除方法：(1)选择合适的原子化方法：提高原子化温度，化学干扰会减小，在高温火焰中P043-不干扰钙的测定。

（2）加入释放剂（广泛应用）

（3）加入保护剂：EDTA、8—羟基喹啉等，即有强的络合作用，又易于被破坏掉。

（4）加基体改进剂

（5）分离法

三. 电离干扰：在高温下原子会电离使基态原子数减少, 吸收下降, 称电离干扰，造成A减少。负误差

消除方法：加入过量消电离剂。（所谓的消电离剂, 是电离电位较低的元素。加入时, 产生大量电子, 抑制被测元素电离。）

四. 光谱干扰：

吸收线重叠：

①非共振线干扰：多谱线元素－－减小狭缝宽度或另选谱线

②谱线重叠干扰－－选其它分析线

五.背景干扰：背景干扰也是光谱干扰，主要指分子吸与光散射造成光谱背景。（分子吸收是指在原子化过程中生成的分子对辐射吸收，分子吸收是带光谱。光散射是指原子化过程中产生的微小的固体颗粒使光产生散射，造成透过光减小，吸收值增加。背景干扰，一般使吸收值增加。产生正误差。）

消除方法：

⑴用邻近非共振线校正背景

⑵连续光源校正背景（氘灯扣背景）

⑶Zeaman 效应校正背景

⑷自吸效应校正背景

第3章紫外-可见分光光度法(P21)

UV-Vis：根据物质分子对200～800 nm 光谱区域内辐射能的吸收来研究

物质的性质、结构和含量的方法。

3.1 紫外-可见吸收光谱

3.1.5 影响紫外-可见光谱的因素：溶剂的影响

极性：水>甲醇>乙醇>丙酮>正丁醇>乙酸乙酯>乙醚>氯仿>二氯甲烷>苯>四氯化碳>己烷>石油醚

3.2 光的吸收定律

Lambert-Beer 定律：A =k c l = -lgT = lgI0 / I

l—cm，c--mol/L，

k 值称为摩尔吸光系数—ε（L·mol-1·cm-1）

A =εlc

3.4 分析条件的选择

单光束分光光度计特点：只有一条光束

单波长双光束分光光度计特点：在同一台仪器中使用两个完全相同的光束。

双波长分光光度计：不需要参比溶液

透光率读数的影响：

结论：1. ?c/c与透光率读数T有函数关系;当T=36.8%时(或A=0.434)，?c/c最小。

2. 当T读数在70%～10%,即A读数0.15～1.0 范围时, ?c/c较小(<5%)，并且变化不大。

习题

1、分子光谱是如何产生的？它与原子光谱的主要区别是什么？

分子光谱是由分子中电子能级、振动和转动能级的变化产生的，表现形式为带光谱

它与原子光谱的主要区别在于表现形式为带光谱。

（原子光谱是由原子外层或内层电子能级的变化产生的，它的表现形式为线光谱。）

2、试说明有机化合物紫外光谱产生的原因。机化合物紫外光谱的电子跃迁有哪几种类型？吸收带有哪几种类型？

有机化合物分子的价电子在吸收辐射并跃迁到高能级后所产生的吸收光谱。

机化合物紫外光谱电子跃迁常见的4种类型：σ→σ*，n→σ* ，π→π*，n→π*

①饱和有机化合物：σ→σ* 跃迁，n→σ*跃迁

②不饱和脂肪族化合物：π→π*，n→π*

③芳香族化合物：E1和E2带，B带

3、在分光光度法测定中，为什么尽可能选择最大吸收波长为测量波

长？

因为选择最大吸收波长为测量波长，能保证测量有较高的灵敏度，且此处的曲线较为平坦，吸光系数变化不大，对beer定律的偏离较小。

4、在分光光度测量中，引起对Lambrt-Beer定律偏离的主要因素有哪些？如何克服这些因素对测量的影响？

偏离Lambert-Beer Law 的因素主要与样品和仪器有关。

（1）与测定样品溶液有关的因素

浓度：当l不变，c > 0.01M 时, Beer定律会发生偏离。

溶剂：当待测物与溶剂发生缔合、离解及溶剂化反应时，产生的生成物与待测物具有不同的吸收光谱，出现化学偏离。

光散射：当试样是胶体或有悬浮物时，入射光通过溶液后，有一部分光因散射而损失，使吸光度增大，Beer定律产生正偏差。

（2）与仪器有关的因素

单色光：Beer定律只适用于单色光，非绝对的单色光，有可能造成Beer 定律偏离。

谱带宽度：当用一束吸光度随波长变化不大的复合光作为入射光进行测定时，吸光物质的吸光系数变化不大，对吸收定律所造成的偏离较小。对应克服方法：

①c ≤ 0.01M

②避免使用会与待测物发生反应的溶剂

③避免试样是胶体或有悬浮物

④在保证一定光强的前提下，用尽可能窄的有效带宽宽度。

⑤选择吸光物质的最大吸收波长作为分析波长

5、极性溶剂为什么会使π→π*跃迁的吸收峰长移，却使n→π*跃迁的吸收峰短移？

溶剂极性不同会引起某些化合物吸收光谱的红移或蓝移，称溶剂效应。在π→π*跃迁中，激发态极性大于基态，当使用极性溶剂时，由于溶剂与溶质相互作用，激发态π*比基态π能量下降更多，因而使基态与激发态间能量差减小，导致吸收峰红移。在n→π*跃迁中，基态n电子与极性溶剂形成氢键，降低了基态能量，使激发态与基态间能量差增大，导致吸收峰蓝移。

第五章分子发光分析法（P88）

1.荧光和磷光的产生：具有不饱和基团的基态分子受光照后，价电子跃迁产生荧光和磷光。

2.激发光谱和发射光谱：

激发光谱：将激发光的光源用单色器分光，测定不同波长照射下所发射的荧光强度（F），以F做纵坐标，激发光波长λ做横坐标作图。激发

光谱反映了激发光波长与荧光强度之间的关系。

发射光谱：固定激发光波长，让物质发射的荧光通过单色器，测定不同波长的荧光强度，以荧光强度F做纵坐标，荧光波长λ做横坐标作图。荧光光谱反映了发射的荧光波长与荧光强度的关系。

3. 荧光和分子结构的关系

发射荧光的物质应同时具备以下两个条件：

物质分子必须具有能够吸收紫外或可见光的结构，并且能产生π→π*或 n→π* 跃迁。

荧光物质必须有较大的荧光量子产率。

（1）跃迁类型：π→π*较n→π*跃迁的荧光效率高。

（2）共轭结构：凡是能提高π电子共轭度的结构，都会增大荧光强度，并使荧光光谱长移。

（3）刚性平面：分子的刚性及共平面性越大，荧光量子产率就越大。（4）取代基效应：在芳香化合物的芳香环上，给电子基团增强荧光，吸电子基团减弱荧光。

★影响荧光强度的因素及溶液荧光的猝灭（P93~95）

1. 影响荧光强度的因素

(1) 溶剂

(2) 温度——低温下测定，提高灵敏度

(3) pH值的影响

当荧光物质本身是弱酸或弱碱时，溶液pH值对该物质荧光强度有较大影响。

(4) 内滤光作用和自吸收现象

内滤光作用：溶液中若存在能吸收激发光或荧光体所发射荧光的物质，会使荧光减弱的现象。

自吸收现象：荧光物质的荧光发射光谱短波长一端与该物质的吸收光谱的长波长一端有重叠，在溶液浓度较大时，一部分荧光被自身吸收。

(5) 散射光的影响：应注意Raman光的干扰（分子的运动方向和能量都改变了！）

2. 溶液荧光的猝灭 (P95)

荧光猝灭：指荧光物质分子与溶剂分子或其他溶质分子相互作用引起荧光强度降低或荧光强度与浓度不呈线性关系的现象。

（1）碰撞猝灭：猝灭剂分子与处于激发态的荧光物质分子碰撞而损失能量。

（2）静态猝灭：部分荧光分子与熄灭剂分子作用生成了非荧光的配合物。

（3）转入三重态的猝灭：在荧光物质分子中有溶解氧的存在或引入溴或碘后，易发生体系跨越而转变成三重态。

（4）发生电荷转移反应的猝灭：

（5）荧光物质的自猝灭：单重激发态分子和未激发的荧光物质分子碰撞引起自猝灭。荧光物质浓度超过 1g/L 时，会产生自身猝灭。

★荧光强度与溶液浓度的关系(P93)

I f = K ?c（εl c≤0.05）

分子荧光分析法的应用

定性分析：因物质结构不同，吸收紫外光波长也不同。

定量测定：同一种物质的稀溶液，浓度大的发射的荧光较强。

荧光分析法的特点

优点：灵敏度高（提高激发光强度，可提高荧光强度），达ng/ml；选择性强（比较容易排除其它物质的干扰），重现性好；取样少。

缺点：许多物质本身不能发射荧光，因此，应用不够广泛。

荧光分析法与UV-Vis法的比较

相同点：都需要吸收紫外-可见光，产生电子能级跃迁。

不同点：

荧光法测定的是物质经紫外-可见光照射后发射出的荧光的强度 (F);

UV-Vis法测定的是物质对紫外-可见光的吸收程度 (A) ;

荧光法定量测定的灵敏度比UV-Vis法高。

习题

1、名词解释：

单重态：当基态分子的电子都配对时，S = 0，多重性M=1，这样的电子能态称为单重态。

单重电子激发态：当基态分子的成对电子吸收光能之后，被激发到某一激发态上。如果它的自旋方向不变，S=0，M=1，这时的激发态叫单重电子激发态。

三重态：若通过分子内部的一些能量转移，或能阶间的跨越，成对电子中的一个电子自旋方向倒转，使两个电子自旋方向相同而不配对，这时S=1，M=3，这种电子激发态称三重电子激发态（三重态）

系间跨越：指的是不同多重度状态间的一种无辐射跃迁过程。

振动弛豫：

内转换：指的是相同多重度等能态间的一种无辐射跃迁过程。

量子产率：也称荧光效率或量子效率，其值在0~1之间，它表示物质发射荧光的能力。

荧光猝灭：指荧光物质分子与溶剂分子或其他溶质分子相互作用引起荧光强度降低或荧光强度与浓度不呈线性关系的现象。

重原子效应：

第4章红外吸收光谱法( IR ) P53

根据样品对不同波长红外光的吸收情况，来研究物质分子的组成、结构及含量的方法。

IR 与 UV-Vis 的比较

相同点：都是分子吸收光谱。

不同点：

UV-Vis 是基于价电子能级跃迁而产生的电子光谱;主要用于样品的定量测定。

IR 则是分子振动或转动能级跃迁而产生的吸收光谱;主要用于有机化合物的定性分析和结构鉴定。

基本概念

红外光谱图：是以波数为横坐标，纵坐标用透光率或吸光度来表示的一种频率图。

波数（cm-1）：波长的倒数，表示每厘米长度上波的数目。

红外吸收光谱定性分析的依据

根据化合物红外谱图中特征吸收峰的位置、数目、相对强度、形状等参数来推断样品中存在哪些基团，从而确定其分子结构。

★4.2 基本原理

吸收峰由何引起？每个基团或化学键能产生几个吸收峰？都出现在什么位置？不同吸收峰为什么有强有弱？

物质分子产生红外吸收的基本条件

（1）分子吸收的辐射能与其能级跃迁所需能量相等；

（2）分子发生偶极距的变化（耦合作用）。

只有发生偶极矩变化的振动才能产生可观测的红外吸收光谱，称红外活性。

4.2.3多原子分子的振动(P56)

分子振动自由度：多原子分子的基本振动数目，也是基频吸收峰的数目。

为什么实际测得吸收峰数目远小于理论计算的振动自由度？

①没有偶极矩变化的振动不产生红外吸收，即非红外活性；

②相同频率的振动吸收重叠，即简并；

③仪器分辨率不够高；

④有些吸收带落在仪器检测范围之外。

4.2.5 分子振动频率（基团频率）

1. 官能团具有特征频率

基团频率：不同分子中同一类型的基团振动频率非常相近，都在一较窄的频率区间出现吸收谱带，其频率称基团频率。

2. 基团频率区和指纹区—谱图解析

谱图解析就是根据实验所得的红外光谱图吸收峰的位置、强度和形状；利用基团振动频率与分子结构的关系；确定吸收峰的归属，确认分子中所含的基团或化学键，进而推断分子的结构。

基团频率区（也称官能团区）：在4000～1300cm-1 范围内的吸收峰，有一共同特点：既每一吸收峰都和一定的官能团相对应，因此称为基团频率区。在基团频率区，原则上每个吸收峰都可以找到归属。

主要基团的红外特征吸收峰（P59～63）（4000 ～ 400 cm-1 ）

★1900～1200cm-1：双键伸缩振动区羰基（C=O）：1650～1900cm–1。在羰基化合物中，此吸收一般为最强峰。

红外谱图解析顺序：先看官能团区，再看指纹区。

1. 产生红外吸收光谱的条件

2. 分子基本振动类型和振动自由度

3. 影响吸收峰强度的因素

4. 基团频率及谱图解析

5. 影响基团频率的因素

干涉仪：是FT-IR光谱仪的核心部件，作用是将复色光变为干涉光。

★4.4 试样的处理和制备

4.4.1 红外光谱法对试样的要求

（1）单一组分纯物质，纯度 > 98%；

（2）样品中不含游离水；

（3）要选择合适的浓度和测试厚度。

4.4.2 制样方法

1.气体样品的制备

2.液体和溶液样品的制备

（1）液体池法

（2）液膜法

3. 固体样品制备

（1）压片法：最常用的固体样品制样方法，常用KBr作为固体分散介质。

（2）石蜡糊法：减少试样光散射的影响，但重复性较差；

（3）薄膜法：无溶剂和分散介质的影响。

4.5 红外光谱法的应用

一、定性分析

已知物的鉴定--谱图比对，未知物结构的确定，收集试样的有关数据和资料，确定未知物的不饱和度（P71）

不饱和度有如下规律：

链状饱和脂肪族化合物不饱和度为0；

一个双键或一个环状结构的不饱和度为1；

一个三键或两个双键及脂环的不饱和度为2；

一个苯环的不饱和度为4。

未知物结构的确定

1.收集试样的有关数据和资料

2.确定未知物的不饱和度（P71）

3.谱图解析（P72 例）

二、定量分析

理论依据：朗伯-比尔定律

优点：

（1）有许多谱带可供选择，有利于排除干扰；

（2）气、液、固均可测定。

课后练习题

1.分子产生红外吸收的条件是什么？

（1）分子吸收的辐射能与其能级跃迁所需能量相等；

（2）分子发生偶极距的变化（耦合作用）。

2.何谓特征吸收峰？影响吸收峰强度的主要因素是什么？

能代表基团存在、并有较高强度的吸收谱带称基团频率，其所在位置称特征吸收峰。

①与分子跃迁概率有关，②与分子偶极距有关（P59）

3.红外谱图解析的三要素是什么？

红外谱图解析三要素：位置、强度、峰形。

4.解释名词：基团频率区指纹区相关峰

基团频率区（官能团区）：在4000～1300cm-1 范围内的吸收峰，有一共同特点：即每一吸收峰都和一定的官能团相对应，因此称为基团频率区。在此区，原则上每个吸收峰都可以找到归属。

指纹区：在1300～400cm-1范围内，虽然有些吸收也对应着某些官能团，但大量吸收峰仅显示了化合物的红外特征，犹如人的指纹，故称为指纹区。指纹区的吸收峰数目虽多，但往往大部分都找不到归属。

相关峰：同一种分子的基团或化学键振动，往往会在基团频率区和指纹区同时产生若干个吸收峰。这些相互依存和可以相互佐证的吸收峰称为相关峰。

5.如何利用红外吸收光谱区别烷烃、烯烃、炔烃？

利用基团的红外特征吸收峰区别：

烷烃：饱和碳的C-H吸收峰< 3000cm –1，约3000~2800cm –1

烯烃、炔烃：不饱和碳的C-H吸收峰> 3000cm-1，

C = C 双键：1600～1670cm–1

C≡C-叁键：2100~2260cm–1

6.红外光谱法对试样有哪些要求？

（1）单一组分纯物质，纯度 > 98%；

（2）样品中不含游离水；

（3）要选择合适的浓度和测试厚度。

7.简述振动光谱的特点以及它们在分析化学中的重要性。

优点：特征性强,可靠性高、样品测定范围广、用量少、测定速度快、操作简便、重现性好。

局限性：有些物质不能产生红外吸收；有些物质不能用红外鉴别；

有些吸收峰，尤其是指纹峰不能全部指认；定量分析的灵敏度较低。

第九章核磁共振波谱法(NMR) P195

思考题

1、简述题:

光谱分析法；核磁共振波谱法；公式νo=gB0/2π的意义

光谱分析法：基于物质与辐射能作用时，测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析

的方法

核磁共振波谱法：将自旋核放入磁场中，用适当频率的电磁波照射，它们会吸收能量，发生原子核自旋能级的跃迁，同时产生核磁共振信号。以核磁共振信号对照射频率（或磁场强度）作图，即为核磁共振波谱。

2、名词解释：

化学位移；屏蔽效应；磁各向异性;耦合常数

化学位移：在有机化合物中，各种氢核周围的电子云密度不同(结构中不同位置)，质子屏蔽效应不同，导致共振吸收峰的位移，这种现象称为化学位移。

3、P214 9.2; 9.3; 9.4; 9.5; 9.8; 9.11; 9.12; 9.13

看课件…………

第十九章质谱法（P400）

思考题

1.质谱分析法：

将样品分子转变成气态的离子，然后按照离子的质荷比（m/z）大小，对离子进行分离和检测,并作定性或定量分析的方法。

2.质谱仪由哪几部分组成？各部分的作用是什么？（划出质谱仪的方框示意图）

进样系统：高效重复地将样品引到离子源中并且不能造成真空度的降低。

离子源：将进样系统引入的气态样品分子转化成离子。

质量分析器：依据不同方式，将样品离子按质荷比m/z分开。

检测器：检测来自质量分析器的离子流并转化成电信号。

显示系统：接收来自检测器的电信号并显示在屏幕上。

真空系统：保证质谱仪离子产生及经过的系统处于高真空状态。

3.离子源的作用是什么？试述EI（电子电离源）和CI（化学电离源）离子源的原理及特点。

离子源：将进样系统引入的气态样品分子转化成离子。

EI（电子电离源）原理：失去电子

特点：电离效率高,灵敏度高；离子碎片多,有丰富的结构信息；有标准质谱图库；但常常没分子离子峰；只适用于易气化、热稳定的化合物。

CI（化学电离源）原理：离子加合

特点：准分子离子峰强, 可获得分子量信息；谱图简单；但不能进行谱库检索, 只适用于易气化、热稳定的化合物

4.为何质谱仪需要高真空?

质谱仪需要在高真空下工作：10-4～10 -6 Pa

①大量氧会烧坏离子源的灯丝；

②用作加速离子的几千伏高压会引起放电；

③引起额外的离子－分子反应，改变裂解模型，谱图复杂化;

④影响灵敏度。

5.四极杆质量分析器如何实现质谱图的全扫描分析和选择离子分析?

①当U/V维持一个定值时，某一U或V值对应只有一个离子能稳定通过四极杆；

②连续改变U或V值，可得到一张全扫描图，此谱图可用于定性；

③固定一个或多个U值，可得到高灵敏度的分析结果，此方法用于定量分析。

第十五章色谱法引论(P300)

思考题

1.色谱法具有同时能进行分离和分析的特点而区别于其它方法，特别对复杂样品和多组份混合物的分离，色谱法的优势更为明显。

2.按固定相外形不同色谱法是如何分类的？

是按色谱柱分类：

①平面色谱法：薄层色谱法、纸色谱法

②柱色谱法：填充柱法、毛细管柱色谱法

3.什么是气相色谱法和液相色谱法？

气体为流动相的色谱称为气相色谱。

液体为流动相的色谱称为液相色谱。

4.保留时间（t r）、死时间（t0）及调整保留时间（t’r）的关系是怎样的？

t’r = t r - t0

5.从色谱流出曲线可以得到哪些信息？

①根据色谱峰的个数可以判断样品中所含组分的最少个数；

②根据色谱峰的保留值可以进行定性分析；

③根据色谱峰的面积或峰高可以进行定量分析；

④色谱峰的保留值及其区域宽度是评价色谱柱分离效能的依据；

⑤色谱峰两峰间的距离是评价固定相（或流动相）选择是否合适的依据。

6.分配系数在色谱分析中的意义是什么？

①K值大的组分,在柱内移动的速度慢，滞留在固定相中的时间长，后流出柱子；

②分配系数是色谱分离的依据；

③柱温是影响分配系数的一个重要参数。

7.什么是选择因子？它表征的意义是什么？

是A，B两组分的调整保留时间的比值α= t’r（B）/t’r（A）＞1

意义：表示两组分在给定柱子上的选择性，值越大说明柱子的选择性越好。

8.什么是分配比（即容量因子）？它表征的意义是什么？

是指在一定温度和压力下，组分在两相分配达到平衡时，分配在固定相和流动相的质量比。K=m s/m m

意义：是衡量色谱柱对被分离组分保留能力的重要参数；

9.理论塔板数是衡量柱效的指标，色谱柱的柱效随理论塔板数的增加而增加，随板高的增大而减小。

10.板高（理论塔板高度H/cm）、柱效（理论塔板数n）及柱长

（L/cm）三者的关系（公式）？H=L / n

11.利用色谱图如何计算理论塔板数和有效理论塔板数（公式）？

12.同一色谱柱对不同物质的柱效能是否一样？

同一色谱柱对不同物质的柱效能是不一样的

13.塔板理论对色谱理论的主要贡献是怎样的？

(1)塔板理论推导出的计算柱效率的公式用来评价色谱柱是成功的；

(2)塔板理论指出理论塔板高度H 对色谱峰区域宽度的影响有重要意义。

14.速率理论的简式, 影响板高的是哪些因素?

μ：流动相的线速

A：涡流扩散系数

B：分子扩散系数

C：传质阻力项系数

15.分离度可作为色谱柱的总分离效能指标。

16.如何根据分离度分析色谱分离的情况?

R<1 部分重叠

R=1 基本分离

R=1.5 完全分离

第十六章气相色谱法(P318)

思考题

1.气相色谱法适合分析什么类型的样品?

适用范围：热稳定性好，沸点较低的有机及无机化合物分离。

2.哪类固定液在气相色谱法中最为常用?

硅氧烷类是目前应用最广泛的通用型固定液。（使用温度范围宽(50～350℃)，硅氧烷类经不同的基团修饰可得到不同极性的固定相。）

3.气相色谱法固定相的选择原则？

相似相溶原则

①非极性试样选用非极性固定液，组分沸点低的先流出；

②极性试样选用极性固定液，极性小的先流出

③非极性和极性混合物试样一般选用极性固定液，非极性组分先出；

④能形成氢键的试样一般选择极性大或是氢键型的固定液，不易形成氢键的先流出。

4.一般实验室通常备用哪三种色谱柱，基本上能应付日常分析需要？

5.什么是程序升温?

程序升温：在一个分析周期内柱温随时间由低温向高温做线性或非线性变化，以达到用最短时间获得最佳分离的目的。

适用于沸点范围很宽的混合物。

注意：柱温不能高于色谱柱的最高使用温度。

6.气相色谱法各检测器适于分析的样品?

热导检测器：通用浓度型所有

氢火焰检测器：通用质量型含碳

电子捕获检测器：选择浓度型电负性

火焰光度检测器：选择质量型硫、磷

7.气相色谱法常用的定量分析方法有哪些？各方法的适用条件。（1）外标法

适用条件：对进样量的准确性控制要求较高；操作条件变化对结果准确性影响较大；操作简单，适用于大批量试样的快速分析。

（2）归一化法

适用条件：仅适用于试样中所有组分全出峰的情况；操作条件的变动对测定结果影响不大；归一化法简便、准确。

（3）内标法（内标标准曲线法）

适用条件：试样中所有组分不能全部出峰时；定量分析中只要求测定某一个或几个组分；样品前处理复杂

第17章高效液相色谱法(HPLC) P348

1、HPLC：高效色谱柱、高压泵、高灵敏检测器

2、现代高效液相色谱法的特点：

(1)高效；(2)高压；(3)高速；(4)高灵敏度

3、色谱分离的实质：

色谱分离的实质是样品分子（即溶质）与溶剂（即流动相或洗脱液）以及固定相分子间的作用，作用力的大小，决定色谱过程的保留行为。

4、高效液相色谱仪结构：

输液系统→进样系统→分离系统→检测系统

5、高压输液泵

性能：⑴足够的输出压力

⑵输出恒定的流量

⑶输出流动相的流量范围可调节

⑷压力平稳,脉动小

6、在线脱气装置

在线脱气、超声脱气、真空脱气等

作用：脱去流动相中的溶解气体。流动相先经过脱气装置再输送到色谱柱。

脱气不好时有气泡，导致流动相流速不稳定，造成基线飘移，噪音增加。

7、梯度洗脱装置

以一定速度改变多种溶剂的配比淋洗，目的是分离多组容量因子相差较大的组分。

作用:缩短分析时间,提高分离度,改善峰形,提高监测灵敏度

8、影响分离的因素

影响分离的主要因素有流动相的流量、性质和极性。

9、选择流动相时应注意的几个问题：

（1）尽量使用高纯度试剂作流动相。

（2）避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。

（3）试样在流动相中应有适宜的溶解度。

（4）流动相同时还应满足检测器的要求。

10、提高柱效的方法(降低板高)：

①固定相填料要均一，颗粒细，装填均匀。

②流动相粘度低。

③低流速。

④适当升高柱温。

11、固定相的选择：

液相色谱的固定相可以是吸附剂、化学键合固定相（或在惰性载体表面涂上一层液膜）、离子交换树脂或多孔性凝胶；流动相是各种溶剂。被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。

12、高效液相色谱法的分离机理及分类

类型主要分离机理

吸附色谱吸附能，氢键

分配色谱疏水分配作用

尺寸排斥色谱溶质分子大小

离子交换色谱库仑力

13、反相色谱的优点

易调节k或a

易分离非离子化合物，离子化合物和可电离化合物

流动相便宜

可预言洗脱顺序

适宜梯度洗脱

14、小结

分配色谱是利用样品中的溶质在固定相和流动相之间分配系数的不同，进行连续的无数次的交换和分配而达到分离的过程。

第十章电分析化学引论（P218）

1、电分析化学：根据被测溶液所呈现的电化学性质及其变化而建立的分析方法

2、分类：

(1) 电位分析法：测量参数为电极电位（电池电动势）；

(2) 电解分析法：测量电解过程中电极上析出的物质量；

(3) 库仑分析法：测量电解过程中消耗的电量；

(4) 电导分析法：测量参数为溶液的电导值；

(5) 伏安分折：测量电流与电位变化曲线；

(6) 极谱分析：使用滴汞电极时的伏安分析。

3、电池的表示形式与电池的电极反应：

1．表示形式：

1）用︱表示电池组成的每个接界面

2）用∥表示盐桥，表明具有两个接界面

3）发生氧化反应的一极写在左

发生还原反应的一极写在右

4）溶液注明活度；气体应注明温度和压力

( - ) Zn︱ZnSO4 (α1)∥CuSO4 (α2) ︱Cu (+)

4、盐桥：

组成和特点：高浓度电解质溶液

正负离子迁移速度差不多

（饱和KCl溶液+3%琼脂所成凝胶）

盐桥的作用：

1）防止两种电解质溶液混和，消除液接电位，确保准确测定。

2）提供离子迁移通道（传递电子）。

5、被测电极的电极电位：以标准氢电极为负极，被测电极为正极组成电池，所测电池的电动势。

6、指示电极和参比电极应用：

测得电动势计算出待测离子的活度或浓度；主要用于测定过程中溶液本体浓度不发生变化的体系。

7、金属︱金属离子电极

（银、铜、锌、汞）√

（铁、钴、镍、铬）×

8、参比电极—甘汞电极：

特点：

a．制作简单、应用广泛；

b．使用温度较低且受温度影响较大；

c．当温度改变时，电极电位平衡时间较长；

d． Hg (Ⅱ)可与一些离子发生反应。

9、** 对参比电极的要求：

1）电极电位稳定，可逆性好

2）重现性好

3）使用方便，寿命长

10、参比电极使用注意事项：

⑴电极内部溶液的液面应始终高于试样溶液液面；

(2) 污染误差。

11、膜电极：

特点（区别以上三种——第一、二和三类电极）：

1）无电子转移，靠离子扩散和离子交换生膜电位

2）对特定离子具有响应，选择性好

12、中性载体膜电极：

中性载体：电中性、具有中心空腔的紧密结构的大分子化合物。例如：颉氨霉素、抗生素、冠醚等；典型组成为：离子载体1％，非极性溶剂66％，PVC33％

13、酶电极：指示电极表面覆盖了一层酶活性物质，发生酶的催化反应。

应用：选择性相当高，用于有机及生物物质分析

缺点：酶的精制困难，且寿命较短

14、直接电位法的优点：

(1)设备简单、操作方便；

(2)电极响应快，直接显示离子的浓度；

(3)样品不需预处理；

(4)用于微量分析；

(5)实现连续和自动分析。

15、直接电位法的缺点：

(1)误差较大；

(2)电极的选择性不理想；

(3)电极的品种少；

(4)重现性差。

16、电位滴定法：利用电极电位的突跃指示滴定终点的滴定分析方法。关键：选择指示电极

计算题：郎伯—比尔定律；色谱理论塔板数