天然药物化学实验指导
中药化学实验指导药物化学教研室
中药化学实验指导
一．说明
中药化学是一门实验学科，实验教学占重要地位，通过实验要达到以下目的。
1．能检验学生在课堂上所学的理论知识。使学生对理论知识的理解更加深入，掌握的更加牢固。
2．训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事中药化学科研工作和实际工作的基本训练。
3．使学生养成严谨的科学态度和良好的科学作风。
实验中，重点是加强对学生基本技能的训练。
二．实验须知
1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。若发生事故应立即采取措施并报告指导老师。
2．实验前做好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法。安排的实验计划，争取准时结束，实验过程中应养成及时记录的习惯，凡是观察到的现象和结果及有关数据，应随时如实地记录。实验完毕，要认真总结，写好实验报告，实验所得的提纯物要包好，贴上标签，交给老师。
3．实验室内应保持安静，不得大声喧嚷，不许抽烟。进入实验室必须穿工作服，实验过程中，不许随便离开。
4．实验台前应保持整洁，与实验无关的物品不得放在台前。实验中废弃的固体物，要丢入废物桶内。
5．爱护仪器，节约药品，仪器损坏后应填写报损单，注明原因，由指导教师按规定处理。
6．实验过程中要节约用水、用电。
7．每次实验结束后，值日生应将实验室打扫干净，倾倒废物桶，关好水、电、门窗，方可离去。
实验一 粉防已生物碱的提制和鉴识
粉防已是防已科千金藤植物粉防已Stephania tetrandra S.Moore 的根。又名汉防已、倒地拱、百木香，是一种解热镇痛药。中医用于风湿止痛、利尿消肿以及毒蛇咬伤等。
粉防已的有效成分是生物碱，其总碱含量为 1.2%左右，主要是粉防已碱（Tetrandrine ）和防已诺林碱（Fangchinoline ）及轮环藤酚碱（Cyclanoline ），本实验经提取，分离可得到这3个生物碱结晶。它们的物理性质如下：
1．粉防已碱（Tetrandrine ，亦称汉防已甲素）
H 3C CH 3
H 3CO N
OCH 3
OCH 3
O N O OCH 3
无色针状结晶，丙酮中结晶有双熔点：126~127℃/217~218℃，即结晶测至126~127℃熔融。继续加热于153℃固化，温度上升至217~218℃复融化。
不溶于水、石油醚，易溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂及稀酸水溶液。 2．防已诺林碱（Fangchinoline ，汉防已乙素）
H 3C CH 3
H 3CO N
OCH 3
OH
O N
O OCH 3
细棒状结晶，同样有双熔点现象，丙酮中结晶mp.134~136℃/238~240℃，甲醇中结晶mp.177~179℃/238~240℃。
溶解度与粉防已碱相似，但极性稍大，故在冷苯中的溶解度小于粉防已碱，而在乙醇中溶解度稍大于粉防已碱，具隐性酚羟基，不溶于NaOH 溶液。
3．轮环藤酚碱（Cyclanoline ）
N HO H 3CO
OH OCH 3
CH 3
+
氯化物 无色八面体状结晶 216~6℃ 碘化物 无色丝状结晶 185℃ 苦味酸盐 黄色结晶 154~6℃ 水溶性季铵型生物碱，不溶于低极性有机溶剂。 一、实验目的
1．掌握各种生物碱的分离纯化方法，包括脂溶性碱与水溶性碱分离，脂溶性碱中酚性碱与非酚性碱的分离，水溶性与非生物碱碱水溶性成分的分离，脂溶性碱单体的分离
2．学习生物碱的各种鉴识方法，包括：层析方法（TLC 及PC ），沉淀反应，衍生物制备鉴识。
3．学习各种实验技能 提取：回流提取 分离：萃取、柱层析
净化精制：沉淀法、柱层析法 鉴识：层析法、化学法 二、实验原理
根据一般生物碱的亲脂通性及季铵型生物碱易溶于水，不溶于有机溶剂的特性，提取分离脂溶性生物碱和水溶性生物碱，利用汉防已甲、乙素结构上的差别，用吸附柱层析分离二者，利用季铵碱可与雷氏铵盐产生沉淀的性质与其它水溶性成分分离。本实验涉及的知识点有：溶剂提取法、两相溶剂萃取法、色谱法等。
三、实验流程
防
粉
醇
提
取，
回
收 溶
剂 糖
酸 化 液 以 浓 氨 仿 萃 取
丁 醇 萃 取取
层 化 铵 调 pH9-10 仿 萃 取氯 仿 层水 洗 中 性 ，脱
回 收 溶 剂小 檗 胺（ 亲 脂 酚 性 碱 ）仿 层
洗 中 性 ， 脱 水 收 溶 剂 ，抽 松乙 素 ）
层 析 分 离 丙 酮 洗 脱 （ 亲 脂 非 酚 性 碱 ）
收 溶 剂轮 酚 碱
TLC 检 识
四、实验方法 （一）总生物碱的提取
称取粉防已粗粉200g ，用95%EtOH 回流提取二次（500ml1小时，400ml45分钟），两次提取液合并，减压回收乙醇至无醇味，得糖浆状物。
（二）分离
1．亲脂性生物碱与水溶性生物碱的分离
在糖浆状总提取物中加入1%的盐酸约200ml ，充分搅拌使生物碱溶解，放置过滤。滤渣用水洗涤2~3次后弃去，滤液合并后移至500ml 分液漏斗中加150mlCHCl 3。再滴加浓氨水调PH9-10，振摇萃取（此时再向水层滴加、浓氨水至无沉淀析出），稍静置，放出CHCl 3层，碱水层以新CHCl 3萃取4次，依次加入80ml ×4，最后一次萃取的CHCl 3层中应基本没有生物碱时认为CHCl 3萃取基本完全（取CHCl 3液滴在滤纸上，Drangedorff 试剂显色不明显为止）。合并CHCl 3液即为亲脂性生物碱的提取液。碱水层则为水溶性生物碱，CHCl 3提取液和碱水层分别在下述（2）、（3）项中处理。
2．亲脂性生物碱中酚性与非酚性碱的分离
上述CHCl 3液置分液漏斗中，用2%NaOH 水溶液萃取2次，每次50ml ，此时碱水层色已很浅，示酚性脂溶性碱已基本被萃取到NaOH 层，合并NaOH 萃
取液，将NaOH层与CHCl3液分置2个分液漏斗中，可同时操作：（1）NaOH层加固体NH4Cl至PH9左右，然后CHCl3萃取2次（80ml，50ml），第2次CHCl3层生物碱应极弱示萃取基本完全，弃去水相，合并CHCl3层并用蒸馏水洗至中性，加无水Na2SO4脱水24小时以上，过滤，回收CHCl3，得粗酚性生物碱。
（2）CHCl3层用蒸馏水洗至中性，脱水，回收，残留物抽松，得非酚性生物碱的抽松物，称重，取出50mg作第4项，其余用（CH3）2CO结晶（1：15）。
3．季铵型生物碱的分离纯化
碱水液用正丁醇萃取（50ml×2），回收正丁醇，水精制得轮环藤酚碱。
4．非酚性碱中汉防已甲素和乙素的分离纯化。
柱层析分离条件：
吸附剂，中性Al2O3300-200目，Ⅱ-Ⅲ级，装柱15cm。
样品：拌样上样，取非酚性碱的油松物50mg，用少量CHCl3溶液于吸附剂中分散均匀，边加热挥去CHCl3。
装柱：湿法装柱（干法装柱也可以）
洗脱剂：环已烷，丙酮2：1。
将样品加于柱顶，倒入洗脱剂，然后于柱顶加低压层析分离，流速控制在5ml/分，收集各流份（5-10ml /份），各流份回收溶剂，用硅胶GTLC检查，合并相同流份，回收溶剂至干，分别用（CH3）2CO重结晶1-2次，可得汉防已甲素，乙素精品。
附：（1）湿法装柱法。取吸附30g左右于烧杯中，加洗脱剂一定湿润，搅匀，打开层析柱活塞。将吸附剂缓缓倒入柱内。待其自然沉降后即可。柱顶留5ml 左右洗脱剂。倒入拌好的样品。敲平（此时洗脱剂不能被样品吸干，应有余量），即可开始层析。
（2）干法装柱法。打开柱活塞，倒入干的吸附剂装15cm高，敲匀，然后倒入拌样的吸附剂再敲平，沿柱壁均匀加入洗脱剂，待流出第1滴流出液时，加满洗脱剂，开始层析。
（3）硅胶GTLC制备与层析，铺板，一块板用吸附剂1.5g，板规格15×5cm，每克吸附剂用水3ml，在乳体中研匀后铺板，每人铺板6块，自然干燥后用前在100-105℃活化30分钟。
层析条件：
对照品：甲素、乙素。
展开剂：CHCl3：（CH3）2CO （1：1）展开前浓氨水饱和15分钟。
显色剂：改良Drangendorff 试剂 （三）鉴识 1．层析鉴识
（1）硅胶GCMC 板TLC
条件均与柱层检识TLC 条件一致，结果参照柱层析检识的结果，可不重复。 （2）叔胺碱多缓冲纸层析 Ⅰ多缓冲滤纸的制备
取滤纸条（2×30cm 2），离下端6cm 处开始用铅笔划一原点线，然后向上每隔2cm 划一平行线。并自下而上在每隔2cm 的行间顺次涂布PH 值不同的缓冲液（6.0，5.4，5.0，4.6，4.0）。如图示
6.0
5.45.04.64.0
涂布时勿使缓冲液渗出线外，涂完后将滤纸悬挂在空中自然干燥。 Ⅱ点样
分别在两条滤纸起始线上点下列样品的氯仿溶液。 汉防已甲素 汉防已乙素 Ⅲ展开
溶剂皿内置展开剂CHCl 3:H 2O （1：1）（水预先饱和过的），将点样后的滤纸悬挂在筒内，密闭，饱和30分钟后展开。
Ⅳ显色
喷以改良Dragendorff 试剂 2．衍生物的制备
（1）汉防已甲素苦味酸盐的制备
取甲素10mg 溶于（CH 3）2COlml 中，滴加饱和苦味酸试剂至不再析出黄色沉淀，稍放置。抽滤收集沉淀，依次用少量H 2O ，EtOH 洗涤，再以乙醇重结晶，得甲素苦味酸盐，mp235~242℃。
3．定性反应
取甲素（乙素）溶于稀HCl中，分置4支试管中，加下列试剂1~3滴。观察现象。
A碘化汞钾试剂
B碘——碘化钾试剂
C硅钨酸试剂
D碘化铋钾试剂
五、思考题
1．有机溶剂提取必须用什么方式？为什么？
2．减压回收较常压回收有哪些特点？影响减压回收速度的关键是什么，如何控制？
3．萃取操作的好坏对实验结果会有什么影响，为什么说分离是影响产品产量及质量的主要因素。
4．怎样防止产生乳化，怎样消除乳化？
5．为什么有机溶剂必须洗至中性方能浓缩或放置？
6．何时有机相需要脱水干燥，何时不必？
7．如何用TLC摸住层条件（包括切割柱层，洗脱柱层）？
8．为什么PC中的展开剂必须用固定相预先饱和？
9．什么叫假阳性和假阴性反应？有什么意义，能消除吗？
10．粉防已中各种生物碱的分离原理是什么？
11．为什么用NH3或NH4Cl调PH，而不用其它碱和酸。
六、主要参考文献
1．药学杂志（日）48；107；1928
77；807；1957
82；741；1962
87；316；1967
2．化学学报23；405；1957
3．中成药研究3；36；1980
4．中草药通讯1：10；2；8；1976
5．Science Record 3；107；1950
6．Chinese J Physiol 9（3）；267，1935
13（2）；167，1938
实验二虎杖蒽醌类成分及白黎芦醇苷的提制和鉴定
虎杖系蓼科蓼属植物polyganum cuspidetum siebet zucc.（即Reynoutrin japonica Houobluyn）的根茎。又名阴阳莲。民间用于消炎、杀菌、利尿、通经和镇痛。近年来用于烫伤、止血、消结石和降血脂均有疗效。虎杖根茎中含有大量的蒽醌类成分和二苯乙烯类成分。后者具有降血脂的作用。
一、部分已知成分的物理性质
1．大黄酚（chrysophanol）
HO OH
CH3
O
O
金黄色六角形状结晶（丙酮中结出）或针状结晶（乙醇中结出）196℃，能升华。不溶于水，易溶于苯、氯仿、乙醚、乙醇、冰醋酸，稍溶于甲醇，难溶于Na2CO3和NaHCO3水溶液可溶于NaOH及热水溶液。
2．大黄素（Emodin）
HO HO OH
CH3
O
橙黄色长针晶（丙酮中结出者为橙色，甲醇中为黄色），mp256~7℃，能升华，其溶解度如下：Et2O 0.14%，CCl4 0.01%，CHCl3 0.0718%，CS2 0.009%，几乎不溶于水，易溶于乙醇，可溶于NH4OH、Na2CO3和NaOH水溶液。
3．大黄素-6-甲醚（physion）
H3CO HO OH
CH3
O
金黄色针晶。熔点207℃。能升华，溶解性质与大黄酚相似。
4．虎杖苷（polygonln ）
为大黄素的苷。结构未明，可能是混合物，浅黄色针状结晶。203~5℃。以甲醇、乙醇或乙酸乙酯重结晶时，若急速冷却，呈胶冻状，多次重结晶后慢慢冷却，得浅黄色针状结晶，不溶于乙醚，难溶于丙酮，可溶于热的乙酸乙酯、热的甲醇或乙醇，冷后均较难溶，可溶于NaHCO 3水溶液，冷水中溶解度不大。
5．大黄素β—D —葡萄糖苷（Emodin monoglycoside ） mp190~1℃，为浅色针晶（稀乙醇中结出，含一分子结晶水）。 6．大黄素6—甲醚—8—D 葡萄糖苷 mp230~2℃，为黄色针晶（稀甲醇中结出）。 7．白黎芦醇（resveratrol ）
HO
OH OH
C
C
无色针状结晶，mp256~7℃，261℃，264℃，能升华，易溶于乙醚、氯仿、甲醇、丙酮等。
8．白黎芦醇葡萄糖苷（polydatin, peceid ）
HO
Oglc OH
C
C
又名3，4，5一三羟基芪—3—B —D —葡萄糖苷，mp225℃，232℃，易溶于甲醇、丙酮、热水，可溶于EtOAC ，稍溶于冷水，但可溶于NaCO 3和NaOH 水溶液，难溶于乙醚。
（附注：此化合物具顺，反二种异构体，能够互相转化，所得常是二者的混合物，以反式为多，故前人工作中所报导的熔点有所不同，按本实验方法所得的白黎芦醇苷结晶仿呈分子结晶水，在130~140℃时先融化，继续加热又固化，至225~6℃全熔）。
二、实验目的
1．学习用PH 梯度萃取法分离本性不同的蒽醌类成分。 2．学习脂溶性成分和水溶性成分的分离方法。 3．了解蒽醌类成分的一般性质和鉴别反应。 三、实验原理
虎杖中的蒽醌类成分由于结构中羧基和酚羟基数目及位置不同而呈现不同强度的酸性，根据此性质，在乙醚萃取出脂溶性成分后，碱度递增的水溶液（5%NaHCO 3，5%NaCO 3，2%NaOH ）自乙醚中提出游离蒽醌类成分，达到分离目的。本实验涉及的知识点：溶剂提取法、萃取、pH 梯度萃取法、色谱检识、重结晶等。
四、实验流程
虎 粗 粉
醇 提 取 ， 回 收 溶 剂摇 后 放 置
制， 结 晶白 梨 芦 醇 苷
取
酸 化 至 pH2放 置，过 滤强 酸 性 成 分
O 3萃 取
左
大 素
结 晶大 黄 素 精 品
萃取同 左 大 黄 素 甲 醚大 黄 酚
收 溶 剂β- 醇
鉴识：TLC ，定性反应 五、实验方法
1．乙醇总提取物的制备
取虚仗粗粉200g ，用95%乙醇回流提取二次（500ml 回流1hr ，450ml 回流30’）。合并乙醇液。放置如有沉淀。抽滤一次，减压回收乙醇至糖浆状（要求乙醇回收至无醇味。）
2．总游离蒽醌的提取
将上述提取转移至三角瓶中，加入30ml 水，溶解后加100ml 乙醚，不断振摇后放置，将上层乙醚倾入另一500ml 三角瓶中（切勿将水倒出），或用吸管吸出，瓶中糖浆状物再以乙醚多次萃取，每次萃取的乙醚用量顺序为50ml ，40ml×4，合并乙醚液为总游离蒽醌，乙醚提取的剩余物含水溶性成分，上继续分离，在第4项中做。
3．游离蒽醌的分离
（1）强酸性成分的分离
上述乙醚液移至分液漏斗中，用5%NaHCO3水溶液（测定pH值）取3-4次（40，30×2），合并碱液，在搅拌下慢慢滴加6NHCl调PH为2。放置，抽滤，水洗沉淀至近中性，干燥，得深褐色粉末，为强酸性部分。
（2）中等酸性成分——大黄素的分离
以上用NaHCO3取过的乙醚液用5%（测定pH值），取5~9次（40×3，30×4）。碱液用量视碱水层萃取液色较浅为止。合并碱液。加浓HCl调PH2。稍放置。抽滤。沉滤以水洗至中性，干燥，称重，用丙酮结晶一次（1：15）。再用甲醇重结晶（1：15~20）。得大黄素结晶。mp.256~7℃。
（3）弱酸性成分——大黄酚和大黄素6—甲醚的分离
以上用Na2CO3萃取过的乙醚液用2%NaOH（测pH值）萃取4—5次。每次20ml合并NaOH液。同（2）法处理。干燥后粗品以CHCl3—MgOH（1：1）重结晶，再用乙醇重结晶。
（4）中性成分——甾醇类化合物的分离
上述NaOH萃取过的乙醚液，用水洗至中性，以无水Na2SO4脱水，回收乙醚得残留物，即得β-谷甾醇粗品。
用甲醇少量溶解β-谷甾醇，作TCL鉴识用。
4．白黎芦醇葡萄糖苷的分离
取“2”中乙醚提取过的糖浆状物，挥去乙醚，置烧杯中加500ml水，搅拌混合后，直火加热20~30’。倾出上层液，稍冷过滤。滤液加活性炭煮沸10’。趁热过滤。滤液置蒸发皿中。水浴浓缩至15~20ml。水液用乙酸乙酯（约30ml）萃取。回收乙酸乙酯。
5．鉴识
层析法鉴定
（1）游离蒽醌的硅胶GTLC
对照品：大黄素甲醚与大黄酚的混合物。
样品：大黄素、大黄素甲醚。强酸性部分。
展开剂：苯：乙酸乙酯（8：2），石油醚—已烷—甲酸乙酯—甲酸（1：3：5：1，5：0.1）加0.5ml水，上层。
显色剂：5%KOH喷色。
（2）甾醇类成分的硅胶GTLC。
样品：β-谷甾醇粗品
对照品：β-谷甾醇
展开剂：环已烷：丙酮（8：2）
显色剂：10%磷钼酸乙醇溶液120℃烘烤数分钟。
定性反应
（1）游离蒽醌的反应
分别取大黄素、大黄素甲醚少许，用乙醇溶解，做如下反应：
A．Borntragor反应，取试液1ml，滴加2%NaOH液观察颜色。
B．Mg（AC）2试验，取试液1ml，加入0.5％Mg（AC）2溶液2～3滴，观察颜色。
（2）甾醇类显色反应
Liebberman-Burchard实验：取样品少许，加1mL醋酐溶解，加浓硫酸1滴，观察颜色变化（此试验可在蒸发皿或点滴板上进行）。
（3）白黎芦醇苷的呈色反应
取样品少许，用乙醇溶解，做如下反应
A．荧光反应：将试液滴在滤纸上，在紫外光下观察荧光。
B．三氯化铁一铁氰化钾反应
将试液用毛细管滴在滤纸上，喷上述试剂观察颜色。
C．偶合反应
取试液1ml，加0.5ml5%Na2CO3然后滴入新配制的重氮化试剂1~2滴，观察颜色。
D．Molish反应
取试液1ml，加入等体积的10%α—萘酚乙醇液，摇匀，沿试管壁滴加2~3滴浓H2SO4，观察两液界面颜色。
E．Gibb’s反应
取试液1ml，滴加0.5%2，6二氯苯醌4—亚胺氯化物的乙醇溶液2~3滴，并加Na2CO3调PH10左右，观察颜色（G ibb’s试剂需临用前配制）。
六、思考题
1．PH梯度萃取法的原理是什么？适用于哪些中草药成分的分离？
2．根据TLC结果，分析各蒽醌类成分的结构与PH值的关系。
3．试说明各显色反应的机制。
4．此实验在操作方面应注意什么？
5．试总结萃取操作程序及注意事项？
6．重结晶操作的关键步骤是什么？
7．过滤方式有几种？怎样选用？
8．活性炭脱色在什么溶剂中效率最高？为什么加入活性炭时要求溶液不能太热？
9．试述有机溶剂和溶液的一般浓缩方式。
10．在水与亲脂性有机溶剂萃取时，为什么样品中不能有醇，体会乙醇总提取液浓缩至无醇味一句的意义。
七、参考文献
1．上海药物研究所；中草药有效成分的提取和分离。
2．中国医科院药物研究所：中草药有效成分的研究（第一分册）。
3．药学杂志（日）73：100；1953
74：379；1954
76：323；1956
83：988；1963
4．中草药通讯2：6；1974
5．中药材2：；1974
实验三 槐花米黄酮苷元的提制和鉴定
槐花米系豆科槐属植物Sophora japonica L.的花蕾。
历来用作止血药物治疗痔疮、子宫出血、吐血、鼻血等症，其主要化学成分为芦丁（亦称芸香苷Rutin ），含量可高达23.5%。药理证明芦丁有调节毛细血管渗透作用，临床上用作毛细血管性止血药，作为高血压症的辅助用药。
芦丁广泛存在于植物中。现已发现含有芦丁的植物达70种以上。 由槐米提取芦丁的方法有水或醇浸取法，热、冷碱浸取酸沉淀法，每法各有优缺点。前者所用时间长，后者有一定水解产物存在。为克服这些缺点，目前已有超声提取的新技术，利用强力超声波发生“空化”现象瞬间所产生的强大冲击力，使药料组织中的分子在不破坏结构的情况下，更快的与组织剥离，继而分散溶解在溶剂中，从而提高溶出的速度和溶出率。
本实验的提取部分用超场提取新技术和传统的水煎煮提取两种方法进行提取并对提取效率。
一、主要黄酮类成分的物理性质 1．芸香苷（Rutin ）
HO
OH
OH
OH
O
O
O 芸香糖
淡黄色针状结晶，熔点：含三分子结晶水物174~178℃，无水物为188℃。
不溶于乙醚、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等溶剂。易溶于碱液中呈黄色，酸化后复析出。可溶于浓硫酸和浓盐酸呈棕黄色。加水稀释后又析出。
2．槲皮素（quercetin ）
HO
OH
OH
OH
O
O
OH
黄色结晶。熔点：含两分子结晶水物313~4℃。无水物316℃。
溶解度：乙醇1：290，无水乙醇1：23（沸时）。可溶于MeOH 、EtOH 、冰HAc 、吡啶、丙酮等溶剂。不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚。
二、实验目的
1．通过两种提取芦丁方法的对比，了解超声提取的新技术。 2．了解黄酮类化合物的一般性质。
3．学习聚酰胺TLC 法在黄酮类化合物中的应用。 4．掌握由黄酮苷水解制取黄酮类苷元的方法。
5．通过测定芦丁槲皮素的紫外光谱，进一步了解如何利用紫外光谱对黄酮类化合物进行结构测定。
三、实验原理
1
．利用芦丁可溶于热水，难溶于冷水及易溶碱水、难溶难水的性质进行提取。
2．黄酮苷可通过酸水解，得到苷元及糖，并可通过TLC 、PC
及乙酰化物制备进行鉴识。
3．不同类酮类化合物对紫外光有特定吸收，可利用此特点对其进行定性、定量测定。
4．本实验涉及的知识点：超声提取、重结晶、聚酰胺色谱、水解法测定苷的结构等。
四、实验流程
pH10-11浸润pH10-11）二次水精制结晶（芦丁水精制品）
五、实验方法
1．芦丁的提取
称取槐花米30g，研碎后投入70℃石灰水中，迅速搅拌均匀，调控PH10~11，浸润20min，然后超声提取30min（保持PH不变）二次，合并过滤液，以盐酸酸化至PH4~5，放置，滤取沉淀即得芦丁粗品。
2．芦丁的精制
上述沉淀称重后（湿品）加入30~40倍量的热水溶解，趁热过滤，放冷析出结晶、过滤、结晶自然干燥（或在红外灯下干燥），得芦丁精品。
再取1g芦丁水精制品用MeOH重结晶（1：10~15）得芦丁精品。
3．芦丁的水解
称取芦丁水精制品1g，置250ml圆底烧瓶中加1%H2SO4100ml直火回流30min（注意观察现象）。放冷过滤（滤液留作糖的检识）。沉淀物为芦丁苷元——槲皮素的粗品。用甲醇重结晶。干燥称重，得槲皮素精品。
4．糖的检识
取芦丁水解后的滤液20ml。加Ba（OH）2，溶液（或固体BaCO3）中和至中性，不断搅拌下进行。滤去白色的BaSO4沉淀。滤液浓缩至2~3ml作纸层析的样品溶液。
条件：对照品：鼠李糖、葡萄糖
展开剂：n—BuOH—HAc—H2O（4：1：5）上层液
显色剂：苯胺——邻苯二甲酸盐试剂，喷后在105℃加热5-10’。
5．芦丁及槲皮素的聚酰胺层析
样品：1%芦丁、槲皮素甲醇液
展开剂：80%乙醇
显色方法：用浓氨水或1%AlCl3醇溶液显色后，日光及荧光灯下观察。
6．槲皮素乙酰化物的制备及熔点测定
称取精制槲皮素150mg置25ml三角瓶中。加10ml醋酐和一滴浓H2SO4振摇，完全溶解后放置24hr，倾入60ml冷水中，不断搅拌，至油滴消失，则板出白色沉淀，滤取沉淀并洗涤，以95%乙醇重结晶。得槲皮素五乙酰化物的白色结晶。mp.193℃。
7．芦丁及苷元的定性反应
A样品制备：取芦丁及槲皮素精制品少许用MeOH溶解。
B定性试验：取上述两试液1ml分别量小试管中，按下列方法进行试验。比较苷与苷元的反应情况。
①Molish反应
加10% α—萘酚溶液1ml，振摇后斜置试管。沿管壁滴加0.5ml浓H2SO4静置观察液面交界处颜色变化。
②盐酸锌粉（Mg粉）
芦丁（槲皮素）分别于2支试管中加浓HCl，再各加入Mg粉和锌粉，观察颜色变化。
③FeCl3反应
分别加FeCl3醇溶液1—2滴，观察颜色。
④Mg(Ac)2纸片反应
取三张滤纸条，分别滴2滴芦丁，槲皮素甲醇溶液，然后各加1% Mg(Ac)2甲醇溶液2滴。于紫外灯下观察荧光变化。
⑤AlCl3纸片反应
2条纸片上分别滴加芦丁、槲皮素后，各加1% AlCl3乙醇溶液2滴，紫外灯下观察荧光变化。
⑥锆盐——柠檬酸反应
分别加入2%ZrOCl2甲醇溶液3~4滴，观察颜色，然后加入2%柠檬酸甲椁溶液3~4滴，观察颜色。
8．槲皮素的碱降解
称取槲皮素50mg，置50ml磨口三角瓶中，依次加入10mlH2O及5gKOH。直火回流4~5hr，反应液用6N HCL调PH2~3。用乙醚提取三次（共约10ml左右），分取乙醚层，水洗至中性，回收乙醚，残渣做TLC。检查降解结果。
TLC条件
吸附剂：硅胶G －CMC
展开剂：CHCl3—Me2CO—冰HAc（8：2：0.5）
对照品：原儿茶酸、间苯三酚
显色剂：三氯化铁一铁氰化钾试剂
9．芦丁及槲皮素紫外光谱测定
（1）试液配制
A无水甲醇：用分析纯甲醇加入10%氧化钙放置24hr，然后蒸馏，即得。
B甲醇钠溶液：取0.25g金属钠切碎，小心加入10ml无水甲醇（此液置玻璃瓶中，用橡皮塞密封）。
C AlCl3取1g无水AlCl3（呈黄绿色）小心加入甲醇20ml，放置24hr，全溶即得。
D 醋酸纳：采用试剂级无水粉末醋酸钠。
E 硼酸饱和溶液：将试剂级无水硼酸加入适量无水甲醇制成饱和溶液。
（上述各溶液可贮存6个月）
（2）测定方法
精密称取芦丁、槲皮素各10mg分别用甲醇溶解，并稀释至100ml从中吸取5ml，置50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度（20μg/ml）。
A样品甲醇溶液光谱
取样品液置石英杯中，在200~400nm内进行扫描，重复操作一次，观察紫外光谱。
B甲醇钠光谱
取样品液置石英杯中，加入甲醇钠溶液3滴，立即测定，放置5’后再测一次。
C AlCl3光谱
在盛有样品液的石英杯中，滴入6滴AlCl3溶液，放置1’后测定，然后加入3滴HCl溶液（HCl：HO1：1），再进行测定。
D NaAc光谱
取样品液约3ml，加入过量的无水NaAc固体，摇匀（杯底剩有约2mm厚的NaAc），加入NaAc后2’进行测定。5~10’后再测一次。
E NaAc/H3BO3光谱
方法Ⅰ：1、在测定用的盛有检品及NaAc液的石英杯中加入足够量的无水硼酸粉末使成饱和液进行测定（本法适用于在加入NaAc5’后无分解现象的样品）。
方法Ⅱ：于样品液（约3ml）中加入5滴H3BO3溶液，然后迅速加入无水NaAc粉末饱和，立即测定。
六、思考题
1．为什么必须热水提取？水提取多用煎煮法而不用回流提取法，为什么？
2．一般提取液需经适当浓缩才可析出结晶，为什么芦丁未经浓缩就析出结晶？
3．一般需经分离净化才能得到化合物粗品，为什么芦丁未经这些处理就得到了粗品？
4．酸水解常用什么酸，为什么用H2SO4比用HCl水解后处理更方便。
5．为什么定性反应有的在试管中做，有的在纸片上做。
6．当反应试剂组成是2个以上时，常需考虑试剂的加入顺序，试分析盐酸一镁粉反应。
7．在本实验中各项检识（包括显色反应、降解反应、酰化反应等）的原理
是什么？写出槲皮素降解反应的主要产物。
8．制备槲皮素的乙酰化物为何要加一滴浓H2SO4？
9．本实验中各种层析原理是什么？解释化合物结构与Rf值的关系。
10．黄酮类化合物有哪些提取方法？芦丁的提取还可以用什么方法？超声提取有何优点？
11．试讨论苷类成分的鉴定程序，并分析示教所做的紫外光谱图。
七、主要参考文献
1．上海药物研究所：中草药有效成分的提取和分离。
2．中国医学科学院药物研究所：中草药有效成分的研究（第一分册）。
3．药学杂志（日）72：333：1952
79：757：1959
76：1210：1956
4．黄酮体化合物鉴定手册。
5．American pharmaceutical Journal
41：582：1952
6．中草药28：（2）：88 1997
药物化学实验指导
磺胺嘧啶锌(Sulfadiazine-Zn) 与磺胺嘧啶银（Sulfadiazine-Ag ）的合成 一、目的要求： 了解拼合原理在药物结构修饰中的应用。 二、实验原理 磺胺嘧啶银为应用烧伤创面的磺胺药，对绿脓杆菌有强的抑制作用，其特点是保持了磺胺嘧啶与硝酸银二者的抗菌作用。除用于治疗烧伤创面感染和控制感染外，还可使创面干燥，结痂，促进愈合。但磺胺嘧啶银成本较高，且易氧化变质，故制成磺胺嘧啶锌，以代替磺胺嘧啶银。其化学名分别为2-（对氨基苯磺酰胺基）嘧啶银（SD-Ag ）、2-（对氨基苯磺酰胺基）嘧啶锌（SD-Zn ），化学结构式分别为： NH 2 SO 2N N N NH 2 SO 2N N N NH 2SO 2N Zn N N 磺胺嘧啶银为白色或类白色结晶性粉末，遇光或遇热易变质。 在水、乙醇、氯仿或乙醚中均不溶。磺胺嘧啶锌为白色或类白色粉末，在水、乙醇、氯仿、或乙醚中均不溶。 合成路线如下： NH 3.H 2O H 2O ++SO 2N N N NH 2 SO 2N N N NH 4 NH 2 SO 2N N N NH 4 NH 2 NH 2SO 2N N N NH 2 SO 2N N N NH 2SO 2N Zn N N
三、实验方法 （一）磺胺嘧啶银的制备 取磺胺嘧啶5 g，置50 mL烧杯中，加入10% 氨水20 mL溶解。再称取AgNO33.4 g置50 mL烧杯中，加10 mL氨水溶解，搅拌下，将AgNO3-氨水溶液倾入磺胺嘧啶-氨水溶液中，片刻析出白色沉淀，抽滤，用蒸馏水洗至无Ag+反应，得本品。干燥，计算收率。 （二）磺胺嘧啶锌的制备 取磺胺嘧啶5 g，置100 mL烧杯中，加入稀氨水（4 mL浓氨水加入25 mL水），如有不溶的磺胺嘧啶，再补加少量浓氨水（约1 mL左右）使磺胺嘧啶全溶。另称取硫酸锌3 g，溶于25 mL水中，在搅拌下倾入上述磺胺嘧啶氨水溶液中，搅拌片刻析出沉淀，继续搅拌5 min ，过滤，用蒸馏水洗至无硫酸根离子反应（用0.1 M氯化钡溶液检查），干燥，称重，计算收率。 （三）结构确证 1. 红外吸收光谱法、标准物TLC对照法。 2. 核磁共振光谱法。 注释： 合成磺胺嘧啶银时，所有仪器均需用蒸馏水洗净。 思考题： 1. SD-Ag及SD-Zn的合成为什么都要先作成铵盐？ 2. 比较SD-Ag及SD-Zn的合成及临床应用方面的优缺点。
天然药物化学(2016简答题)
1*天然药物化学研究的内容有哪些？ 答：天然药物中各类化学成分的结构特点、理化性质、提取分离与鉴定方法，操作技术及实际应用。 2*如何理解有效成分和无效成分？ 答：有效成分是指天然药物中经药效实验筛选具有生物活性并能代表临床疗效的单体化合物，能用结构式表示，具有一定的物理常数。天然药物中不代表其治疗作用的成分为无效成分。一般认为天然药物中的蛋白质、多糖、淀粉、树脂、叶绿素、纤维素等成分是无效成分或杂质。 3*天然药物有效成分提取方法有几种？采用这些方法提取的依据是什么？ 答：①溶剂提取法：利用溶剂把天然药物中所需要的成分溶解出来，而对其它成分不溶解或少溶解。②水蒸气蒸馏法：利用某些化学成分具有挥发性，能随水蒸气蒸馏而不被破坏的性质。③升华法：利用某些化合物具有升华的性。 4*常用溶剂的亲水性或亲脂性的强弱顺序如何排列？哪些与水混溶？哪些与水不混溶？ 答：石油醚>苯>氯仿>乙醚>乙酸乙酯>正丁醇（与水互不相容）>丙酮>乙醇>甲醇>水（与水相混溶） 5*两相溶剂萃取法是根据什么原理进行？在实际工作中如何选择溶剂？ 答：利用混合物中各成分在两相互不相溶的溶剂中分配系数不同而达到分离的目的。实际工作中，在水提取液中有效成分是亲脂的多选用亲脂性有机溶剂如苯、氯仿、乙醚等进行液‐液萃取；若有效成分是偏于亲水性的则改用弱亲脂性溶剂如乙酸乙酯、正丁醇等，也可采用氯仿或乙醚加适量乙醇或甲醇的混合剂。 6*色谱法的基本原理是什么？ 答：利用混合物中各成分在不同的两相中吸附、分配及其亲和力的差异而达到相互分离的方法。 7*聚酰胺吸附力与哪些因素有关？ 答：①与溶剂有关：一般在水中吸附能力最强，有机溶剂中较弱，碱性溶剂中最弱；②与形成氢键的基团多少有关：分子结构中含酚羟基、羧基、醌或羰基越多，吸附越牢；③与形成氢键的基团位置有关：一般间位＞对位＞邻位；④芳香核、共轭双键越多，吸附越牢；⑤对形成分子内氢键的化合物吸附力减弱。 8*简述苷的分类。 答：据苷键的构型不同分为α-苷、β-苷；依据在植物体内的存在状态不同，可分为原生苷和次生苷；依据苷的结构中单糖数目的不同，可分为单糖苷、双糖苷、三糖苷；依据苷元结构不同，可分为黄酮苷、蒽醌苷、香豆素苷；依据糖链的数目不同，分为单糖链苷、双糖链苷；依据苷的生物活性，分为强心苷、皂苷等。 9*简述苷键酸水解的影响因素。 答：①苷原子不同，水解难以顺序：N-苷>O苷>S苷>C苷②呋喃糖苷较吡喃糖易水解③酮糖苷较醛糖苷易水解④吡喃糖苷中C5取代基越大越难水解。⑤吸点子基的诱导效应，尤其是C2上取代基的吸点子基对质子的竞争吸引，使苷键原子的电子云密度降低，质子化能力下降，水解速度下降⑥芳香族苷因苷元部分有供电子基，水解比脂肪族苷容易。 10*如何用化学方法鉴别：葡萄糖、丹皮苷、丹皮酚。 答：三种样品分别做α-萘酚-浓硫酸反应，不产生紫色环的是丹皮酚。产生紫色环的，再分别做斐林反应，产生砖红色沉淀的是葡萄糖，不反应的是丹皮苷。 11*为何《中华人民共和国药典》规定新采集的大黄必须储存两年以上才可药用？
天然药物化学试验指导试验室注意事项￣
天然药物化学实验指导 目录 实验室注意事项 (1) 实验一芦丁的提取分离与鉴定 (2) 实验二艾叶及丁香中挥发油的提取鉴定 (5) 实验三从红辣椒中分离红色素 (7) 实验四咖啡因的提取与分离 (8) 自选实验薯蓣皂苷元的提取与分离 (10) 自选实验甘草皂苷元的提取与分离 (10) 自主设计实验 (15)
实验室注意事项 天然药物化学实验课具有实验周期长、使用有机溶剂品种多，用量较大等特点，所用的药品多数是挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、刺激性、实验操作经常在加温，减压下进行，需要使用各种热源和电器，再加上实验室较为拥挤，若操作不慎，易引起着火、触电、中毒、爆炸等事故，为确保实验安全顺利进行，特作如下要求。 一、实验前必须预习实验内容，了解实验原理和操作程序，检查仪器是否完整，装置是否正确，检查合格后方可开始实验。 二、实验室内要保持严肃、安静，不得大声说话打闹；室内严禁吸烟，实验进行时不得擅自离开，必要时委托专人看管。 三、未经教师允许不得擅自使用明火，需使用明火时，实验台周围不得放置易燃有机溶剂，如发生火情,应保持镇静，立即报告指导教师，同时切断火源，移走易燃品！用湿布闷盖或用灭火器进行灭火，切勿轻易用水，以免扩大火势。 四、实验时要做到整齐、清洁、用过的仪器要及时清洗并收人仪器柜内，保持水槽、仪器、桌面、地面四洁。 五、回流、蒸馏有机溶剂时，注意检查冷凝水是否通畅，装置不得密闭，接收有机溶剂时不得使用广口仪器，溶剂瓶不得敞口存放。在进行减压操作时，必须使用安全瓶，弄清操作程序，以免造成回水等事故。 六、使用挥发性试剂或喷显色剂时，应在窗口或通风橱内操作，不慎溅在桌面上的化学药品必须立即清除。身体直接接触化学物品后应及时用肥皂及大量水冲洗，如碱性试剂可用l％HAc溶液冲洗，酸性试剂可用3％NaHCO3溶液冲洗。不要用酒精、丙酮等洗涤皮肤上的有机物，以免增加皮肤对有毒物质的吸收，眼睛里溅入化学试剂后，应立即用大量水冲洗，及时到校医室就诊。 七、使用电器设备（如水浴锅、紫外灯、旋转蒸发仪、循环水泵等）一定要按操作规程进行，不得在烘箱内干燥带有易燃性有机溶剂的仪器或物品，仪器发生故障时及时报告指导教师，不得擅自拆卸。 八、每次实验结果后的产品，应妥善包装好，贴好标签，写明级别、产率等，放入干燥器内保存，不得随意丢失。 九、实验结束后，值日生应做好实验室清洁卫生工作，整理好公共仪器、药品，检查水、电、门窗，经教师检查后方可离去。
药理实验指导
药理学实验指导
实验一药物的作用方式 【实验目的】理解药物的局部作用和全身作用，并了解兴奋作用、抑制作用及拮抗作用。 【实验原理】普鲁卡因为局部麻醉药，抑制中枢神经元，首先抑制对药物敏感的中枢抑制性神经，引起脱抑制而出现兴奋现象，表现为不安、震颤，甚至惊厥。而戊巴比妥钠为镇静催眠、抗惊厥药，随着药物剂量的增加，对中枢的抑制作用逐渐增强，分别产生镇静、催眠、麻醉和抗惊厥的作用。 【实验对象】小白鼠(体重20g左右) 【实验材料】 1．器材：1ml注射器、钟罩、镊子 2．药品：3%普鲁卡因溶液、0.5%戊巴比妥钠溶液 【实验步骤】 1．取小白鼠1只，称重标记，并观察一般活动情况及痛觉反应。 2．在小白鼠一后肢股骨粗隆下端坐骨神经周围，注射3%普鲁卡因溶液0.1ml/10g，随即观察小白鼠左右后肢的活动情况及全身情况。 3．待小白鼠抽搐明显时，立即腹腔注射0.5%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g并继续观察小白鼠全身情况。 4．填表 小白鼠用普鲁卡因后表现用戊巴比妥钠后表现 左后肢全身左后肢全身 【注意事项】 1．要求注射部位要正确。 2．注意抢救时间。 【思考题】 1．小白鼠的那些表现各属于局部、全身、兴奋、抑制和拮抗作用？ 2．本次试验队临床用药有何指导意义？
实验二药物剂量对药物作用的影响 【实验目的】掌握药物剂量与药物作用的关系 【实验原理】戊巴比妥钠为镇静催眠、抗惊厥药，随着药物剂量的增加，药物作用越明显，对中枢的抑制作用逐渐增强，分别产生镇静、催眠、麻醉和抗惊厥的作用。 【实验对象】小白鼠(体重20g左右) 【实验材料】 1．器材：1ml注射器、钟罩、镊子 2．药品：0.1%，1%，2%戊巴比妥钠溶液 【实验步骤】 1．取性别相同，体重相近小白鼠3只，分别称重、记号（1、2、3号），观察精神状态、痛觉反射及翻正反射。 2．给1号小白鼠腹腔注射0.1%戊巴比妥钠溶液0.1ml/ 10g 给2号小白鼠腹腔注射1%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g 给3号小白鼠腹腔注射2%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g 3．用大烧杯罩住小白鼠，并随时观察用药后各小鼠的精神状态、痛觉反射、翻正反射。 4．填表 小白鼠号用药用药后的表现（3′6′9′12′15′） 精神状态痛觉反射翻正反射1号 2号 3号 【注意事项】 1．更换药物要冲洗注射器。 2．小白鼠体重相差应小于两克。 【思考题】 1．药物剂量和药物作用的关系？ 2．讨论3只小白鼠用药以后表现为何不同？
天然药物化学实验
天然药物化学实验 Document number【AA80KGB-AA98YT-AAT8CB-2A6UT-A18GG】
实验一天然产物化学成分系统预试验 天然产物中所含的化学成分种类很多，在深入研究之前应首先了解其中含有哪些类型的化学成分，如生物碱、皂苷、黄酮类等等。这就需要进行各类化学成分的系统定性预试验。或根据研究的需要进行单项预试法来初步判断。 一、实验目的与要求 掌握未知成分的天然产物是怎样初步提取分离的，熟悉各主要成分的试管试验、沉淀反应和纸层析、薄层层析的方法并根据试验结果判断含有什么类型的化学成分。 二、基本原理 利用各类成分的颜色反应和沉淀反应，对天然产物的提取液进行检查可以初步判断其中的化学成分。由于提取液大多数颜色较深，影响对颜色变化的观察，可以使用薄层层析（TLC）或纸层析（PC）等方法对天然产物的提取液进行初步分离，再进一步检查。 三、实验内容： 利用不同成分在各种溶剂中的溶解度的不同，一般可采用以下3种溶剂分别提取，试验。 1．水浸液：取中草药粗粉5 g加水60 ml，在50~60℃的水浴上加热1小时，过滤，滤液进行下列试验。
*在试管进行，△在滤纸或硅胶CMC-Na薄层板上进行，下同。 糖鉴定 （1）α-萘酚一硫酸试剂检查还原糖。 ①溶液I：10％α-萘酚乙醇溶液。溶液II：硫酸。取1ml样品的稀乙醇溶液或水溶液，加入溶液I 2滴～3滴，混匀，沿试管壁缓缓加入少量溶液II，二液面交界处产生紫红色环为阳性反应。 （2）斐林试剂检查还原糖。 溶液I：6．93g结晶硫酸铜溶于100ml水中。溶液II：34．6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于100ml水中。取1ml样品热水提取液，加入4滴～5滴用时配制的溶液I、II 等量混合液，在沸水浴中加热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性反应。如检查多糖和苷，取1ml样品水提液，加入1m110% 盐酸溶液，在沸水浴上加热10min，过滤，（成盐去除杂质）再用10％氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查还原糖。 或者直接用高效液相色谱看色谱图。 酚类鉴定试剂 （1）三氯化铁试剂检查酚类化合物、鞣质1％～5％三氯化铁水溶液或乙醇溶液，加盐酸酸化。取1ml样品的乙醇溶液，加入试剂1滴～2滴，显绿、蓝绿或暗紫色为阳性反应。作色谱显色剂用，喷洒后，显绿或兰色斑点为阳性。 2．乙醇提取液 取中草药粗粉5 g，加5~12倍量95%乙醇，在水浴上加热回流提取1小时，过滤，滤液留2 ml作（1）项试验，其余回收乙醇至无醇味，并浓缩成浸膏状，浸膏分为二部分，一部分加少量2% HCL振摇溶过滤。分出酸液，作（2）项式验，附于滤纸上的一部分再以少量乙醇溶解，溶液作（3）项试验；
天然药物化学实验指导书
药用植物学实验指导 适用专业：（本科）药学、药物制剂 （专科）药物制剂技术 郑州华信学院医学院药学系 药学教研室
目录 实验一显微镜的构造、使用和保护以及植物细胞的构造 (2) 实验二植物细胞后含物——淀粉粒、草酸钙结晶体 (5) 实验三保护组织和分泌组织 (7) 实验四机械组织和输导组织 (9) 实验五根的显微构造 (11) 实验六单子叶植物地上茎和地下茎观察 (13) 实验七双子叶植物茎的初生构造和次生构造 (14) 实验八大黄、甘草、人参的鉴定 (16)
实验一显微镜的构造、使用和保护以及植物细胞的构造 一、实验目的： 1.了解显微镜的基本构造并掌握显微镜的正确使用方法和保养。 2.掌握撕取表皮的制片方法。 3.掌握植物细胞的基本构造。 二、实验仪器与材料 1.仪器：生物显微镜。 2.用具：镊子、刀片、解剖针、载玻片、盖玻片、玻璃皿、吸水纸、擦镜纸、棉布块。 3.材料：洋葱鳞茎的磷叶或大葱磷叶。 4.试液：蒸馏水、稀碘液、10%硝酸钾溶液。 三、实验内容： （一）显微镜的构造 1.机械部分次部分是显微镜的骨架，是安装光学部分的基座。 包括：镜座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调焦装臵等。 （1）基座是显微镜的底座，支持整个镜体，使显微镜放臵平稳。 （2）基柱镜座上面直立的短柱，支持镜体上部的各部分。 （3）镜臂弯曲如臂，下连镜柱，上连镜筒，为取放镜体时手握的部分。直筒显微镜的镜臂下端与镜柱连接处有一活动关节，可使镜体在一定范围内后倾，便于观察。 （4）镜筒上端臵目镜，下端与物镜转化器相连。 （5）物镜转换器连接于镜筒下端的圆盘，可自由转动，盘子有3－4个安装物镜的螺旋孔。当旋转转换器时，物镜即可固定在使用的位臵上，保证物镜与目镜的光线合轴。 （6）载物台放臵玻片标本的平台，中央有一通光孔，两侧有压片夹或机械移动器，既可固定玻片标本，也可以前后左右各方向移动。 （7）调焦装臵调节物镜和标本之间的距离，得到清晰的物像。在镜臂两侧有粗细调焦螺旋各1对，旋转时可使镜筒上升或下降，大的一对为粗调焦螺旋，旋转一圈可使镜筒移动2mm左右。小的一对为细调焦螺旋，旋转一圈可使镜筒移动0.1mm。 （8）聚光器调节螺旋镜柱一侧，旋转它时可使聚光器上下移动，借以调节光线德鄂强弱。 2.光学部分包括：物镜、目镜、反光镜、聚光器 （1）物镜安装在镜筒前端物镜转化器上的透镜。利用光线使被检标本第一次
天然药物化学实验讲义
天然药物化学实验讲义目录 一、芦荟粗多糖的提取及鉴定 二、大黄中蒽醌苷元的提取、分离与鉴别 三、槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离与鉴别 四、八角茴香挥发油的提取及鉴别 五、黄柏中生物碱的提取、分离和鉴别 六、茶叶中咖啡因的提取 前言 《天然药物化学实验》是一门实践性很强的课程，理论教学与实验教学是一个不可分割的完整体系。通过实验课的学习使学生能印证并加深理解课堂讲授的理论知识，掌握由天然药物中提取、分离、精制有效成分，并对其进行鉴别的基本方法和技能，提高学生独立动手、观察分析、解决问题的能力，培养学生严谨的科学态度和良好的科研作风。
实验一芦荟粗多糖的提取及鉴定 一、实验目的 1、水提醇沉法提取多糖的原理和方法 2、掌握高速冷冻离心机、旋转蒸发器等仪器的用法 3、了解芦荟多糖在医药中的应用 二、实验原理 芦荟的多糖类可增强人体对疾病的抵抗力，治愈皮肤炎、慢性肾炎、膀胱炎、支气管炎等慢性病症，抑制、破坏异常细胞的生长的作用，从而达到抗癌目的。植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖，所以本实验采用水提醇沉法提取芦荟中的粗多糖。 三、试剂、材料及仪器 1、试剂：盐酸、无水乙醇、丙酮、乙醚、葡萄糖对照品、苯酚、浓硫酸 2、材料和仪器：芦荟叶、烧杯、移液管、量筒、容量瓶、玻璃棒、旋转蒸发仪、电子天平、真空泵、电热恒温水浴锅、紫外-可见分光光度计、高速离心机、真空冷冻干燥机。 四、实验方法与步骤 1、取芦荟鲜叶50g，洗净，去掉叶尖和叶底，在蒸馏水水中浸泡0.5h,已除去由表面滲出的黄色液体。然后切去表皮，将内层凝胶（匀浆后）置于烧杯中，加入三倍蒸馏水，置于55℃恒温水浴锅中加热浸提4h。 2、浸提液离心分离（2500r/min，5min）并过滤（直接6层纱布过滤），将所得液汁减压浓缩（至30ml），用6mol/L的盐酸调pH值3.2左右，向经过调酸处理的芦荟凝胶浓缩汁中缓慢加入6倍量的95％乙醇，边加边搅拌大约需要15～30min，室温下静置2h，离心分离(2500r/min，7min)得多糖沉淀。依次用乙醇、丙酮和乙醚洗涤，然后真空干燥（通风橱干燥），最终得到的沉淀即为芦荟多糖粗品。 3、芦荟多糖的鉴定 对芦荟多糖的鉴定利用改进的苯酚一硫酸法。苯嘞一硫酸试剂能与芦荟多糖中的己糖起显色反应，在一定波长下其吸光度的变化与多糖含量呈线性关系。采用苯酚一硫酸显色法鉴定芦荟多糖，芦荟中的多糖在硫酸的作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，然后和苯酚缩合成有色化合物共轭酚在490nm处有最大波长，由此可以鉴定出芦荟中的多糖(图1)。
药物化学实验
药物化学实验教学讲义 制药与生命科学学院 药学教学研究室 2008年9月
药物化学实验内容计划 教学目的和对学生要求： 药物化学实验教学是药物化学课程的重要组成部分，是更好掌握药物合成的基本操作技能，提高学生分析和解决问题能力，使同学进一步理论联系实际，养成严密科学态度和良好工作作风必不可少的教学环节，为此，提出如下实验须如： 1．遵守实验室制度，维护实验室安全。不违章操作、严防爆炸、着火、中毒、触电、漏电等事故的发生。若发生事故应立即报告指导教师。 2．实验前作好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法，安排好当天计划，争取准时结束，实验过程应养成及时记录的习惯，凡是观察到的现象和结果以及有关的重量、体积、温度或其它数据，应立即如实记录。实验完毕后认真总结，写好报告，将精制所得产物包好，贴上标签（写下日期、样品名称、重量）交给老师。 3．实验室中保持安静，不许大声喧嚷，不许抽烟，不迟到不随便离开，实验台面保持清洁，使用过的仪器及时清洗干净后，存放实验柜内。废弃的固体和滤纸等丢人废物缸内，绝不能丢人水槽和窗外，以免堵塞和影响环境卫生。 4．公用仪器及药品用完后立即归还原处，破损仪器应填写破损报告单、注明原因。节约用水、用电、节约试剂，严格药品用量。 5．保持实验室内整洁，学生采取轮流值日，每次实验完毕，负责整理公用仪器。将实验台、地面打扫干净、倒清废物缸，检查水、电（是否关闭水龙头、拉下总电闸刀，拔下电插头）。关闭门窗。
实验一仪器设备的认识和使用 学时：2 一实验目的： 让即将做该实验的学生初步认识所要接触的仪器设备，并且学会其使用和维护的方法。 二操作： 1．认识每一个玻璃仪器，了解其用途 2．掌握实验室每个设备的使用
药剂学实验指导思考题答案
实验1、混悬剂的制备 1、混悬剂的稳定性与哪些因素有关？ 答：混悬剂的稳定性问题主要是物理稳 定性，它主要与混悬粒子的沉降速度、 微粒的荷电与水化、絮凝与反絮凝、结 晶微粒的长大、分散相的浓度和温度等 这些因素有关。 2、将樟脑醑加到水中时，注意观察所发生 的现象，分析原因，讨论如何使产品微 粒更细小？ 答：将樟脑醑加到水中时，会有白色晶体析出，这是因为樟脑易溶于乙醇而难溶于水所致。操作时应急剧搅拌，以免樟脑因溶剂改变而析出大颗粒。可以用“加液研磨法”和“水飞法”使产品微粒更细小。 3、混悬剂的质量要求有哪些？ 答：药物本身的化学性质应稳定，在使用或贮存期间含量应符合要求；混悬剂中微粒大小根据用途不同而有不同的要求；粒子的沉降速度应很慢，沉降后不应有结块现象，轻摇后应迅速均匀分散；混悬剂应有一定的粘度要求；外用混悬剂应容易涂布。 4、亲水性药物与疏水性药物在制备混悬液 时有什么不同？ 答：亲水性药物：一般应先将药物粉碎到一定的细度，再加处方中的液体适量，研磨到适宜的分散度，最后加入处方中的剩余液体至全量；而疏水性药物不易被水润湿，必须先加一定量的润湿剂与药物研匀后再加液 体研磨混匀。 实验2、乳剂的制备 1、影响乳剂稳定性的因素有哪些？ 答：有：乳化剂的性质；乳化剂的用量，一般控制在0.5%~10%；分散相的浓度，一般控制在50%左右；分散介质的黏度；乳化及贮藏时的温度；制备方法及乳化器械；微生物的污染等。 2、如何判断乳剂的类型，鱼肝油乳、液状石蜡乳及石灰搽剂各属于什么类型？ 答：可用染色镜检法和稀释法判断，镜检法：将液状石蜡乳和石灰搽剂分别涂在载玻片上，用苏丹红溶液（油溶性染料）和亚甲蓝溶液（水溶性染料）各染色一次，在显微镜下观察并判断乳剂所属类型（苏丹红均匀分散者为W/O型乳剂，亚甲蓝均匀分散者为 O/W型乳剂）。稀释法：取试管2支，分别加入液状石蜡乳和石灰搽剂各一滴，再加入蒸馏水约5ml，振摇，翻转数次，观察混合情况，并判断乳剂所属类型（能与水均匀混合者为O/W型乳剂，反之则为W/O型乳剂）。鱼肝油乳和液状石蜡乳均属于O/W型乳剂。而石灰搽剂属于W/O型乳剂。 2、分析鱼肝油乳或液状石蜡乳处方中各组 分的作用？ 答：鱼肝油、液状石蜡是主药；阿拉伯胶是乳化剂；西黄蓍胶是辅助乳化剂；糖精钠是矫味剂；尼泊金乙酯是防腐剂；蒸馏水是溶剂；挥发杏仁油是芳香剂。 实验3、注射剂的制备 1、维生素C注射液可能产生的质量问题是 什么？应如何控制工艺过程？ 答：将NaHCO3加入维生素C溶液中时速度要慢，以防止产生大量气泡使溶液溢出，同时要不断搅拌，以防局部碱性过强造成维生素C破坏。维生素C容易氧化，致使含量下降，颜色变黄，金属离子可加速这一反应过程，同时P H值对其稳定性影响也较大，在处方中加入抗氧剂，通入CO2加入金属离子络合剂，同时加入NaHCO3控制这些因素对维生素C 溶液稳定性的影响，在制备过程中还应避免与金属用具接触。 2、影响注射剂澄明度的因素有哪些？ 答：水系统、输液容器、胶塞与涤纶薄膜、净化系统与灌封、管道系统、原辅料、澄明度检查装量和检查人员的视觉能力、判断能力等其他因素都会影响大输液的澄明度。3、如何保证葡萄糖输液热源与色泽合格？答：配制前注意原辅料的质量、浓配、加热、加酸、加注射剂用碳吸附以及包装用输液瓶、橡皮塞、涤纶薄膜的处理等，都是消除注射液中小白点，提高澄明度、除去热源、霉菌等的有效措施；过滤除碳，要防止漏碳；制备中要严防污染；灭菌温度超过120℃，时间超过30min时溶液变黄，故应注意灭菌温度和时间；PH值要控制好。 4、注射剂制备过程中应注意哪些问题？答：ph值的调节，注射剂的器具清洁，原辅料的洁净度，药液的均匀度，配制环境要清
天然药物化学实验报告(槲皮素的提取与鉴别)
天然药物化学实验报告 一、实验题目：槐米中槲皮素的提取分离及结构鉴定 二、实验目的: 通过对该选题进行资料查阅、方案设计、试验、结果分析等，让我自己学到一套系统、完整的槐米药效成分芦丁和槲皮素进行基源鉴定、提取、分离和结构鉴定的方法，并通过此项训练，提高自己的动手操作能力及综合运用自己所学知识的能力，培养自己独立思考、分析问题、解决问题的能力。 掌握槐米中槲皮素的提取及提取方法 了解槲皮素的药理作用及应用价值 掌握槲皮素的纯度检测 掌握槲皮素的结构鉴定的方法 三、实验基本原理： 本实验主要利用黄酮类化合物虽然有一定的极性，可溶于水，但却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再将碱水提取液调成酸性，黄酮苷类即可沉淀析出。以槐米为原料，采用煎煮法提取槐米有效成分芦丁，然后酸溶液水解获得槲皮素粗品，乙醇重结晶获得槲皮素精品。 四、实验所用试剂、仪器的型号及生产厂家： （一）实验试剂，见下表： 序号名称数量规格生产厂家 1 95%乙醇溶液25ml 500ml／瓶 AR 天津天力 2 浓H2SO4 12ml 500ml／瓶 AR 天津天力 3 甲醇10ml 500ml／瓶 AR 天津天力 4 无水乙醇43ml 500ml／瓶 AR 天津天力 5 纯净水1500ml 18L/桶万家纯水 6 硅胶GF254 30g 500g／瓶 青岛海浪 薄层层析
（二）实验仪器，见下表： 序号名称数量型号生产厂家 1 电子天平1台IM-B200 2 余姚市纪铭称量校验设备有 限公司 2 圆底烧瓶1个GG-17 1000ml 蜀牛 3 烧杯1个GG-17 1000ml 蜀牛 4 烧杯1个 GG-17 500ml 环球 5 烧杯1个GG-17 250ml Jing Xing 6 量筒1个100ml BOMEX 7 量筒1个10ml 旌湖 8 直型冷凝 管 1个BOMEX 9 75?弯管1个 10 橡胶管2条 11 移液管1个10ml 12 玻璃棒1个直径7mm 长40cm 高邮亚泰 13 尾接管1个BZ24129 HENG TAJ 14 布氏漏斗1个 15 抽滤瓶1个GG-17 500ml 蜀牛 16 滤纸1张 17 玻璃漏斗1个 18 研钵1套 19 胶头滴管1个 20 薄层板10个 21 展开缸1个P-1 100×100 上海信谊仪器 厂 22 紫外光谱 仪 1台 UV-8三用紫外分 析仪 无锡科达仪器 厂 23 熔点测定 仪 1台 X-6显微熔点测定 仪 北京泰克仪器 有限公司 24 真空泵1台SHD-III型循环水 式多用真空泵 保定高新区阳 光科教仪器厂 25 电热套1台98-1-C型数字控 温电热套 天津市泰斯特 仪器有限公司
药物化学实验大纲
药物化学实验与指导教学大纲 （供药学专业用） 一、实验教学的指导思想和教学目的 药物化学实验是用现代科学实验方法、药物合成原理，有机化学验基本操作 技能，综合运用前期课程的基本知识和操作技能，通过几种药物的合成，继续巩 固提高有机合成药物的基本操作技能及了解其对药物质量影响的因素。 二、实验教学的基本要求 通过对几个药物的合成,要求学生在修完本课程后达到以下教学目的： 1、掌握药物合成的基本仪器及独立安装全套仪器的技能。 2、掌握药物制备中的单元反应原理，操作步骤，和工艺流程。 3、掌握独立开展药物合成的程序，树立良好的科研作风。 4、熟悉药物合成投料比的基本知识和计算。 5、熟悉药物杂质的来源及除去杂质的手段方法。 6、巩固有机合成单元操作技能训练。 7、了解三废的产生和处理知识。 三、实验教材 《药物化学实验指导》实验指导(讲义), 尤启东等主编。 四、实验考核 实验操作基本技能：仪器安装、操作过程、终点判断、熔点测定、限量检查、质量、收率、实验报告等方面进行考察。 实验成绩：实验平时成绩占70%、考核占30%。无考核班级均为平时成绩。 五、实验项目表
尤启冬主编《药物化学实验与指导》，中国医药科技出版社，2000 药物的水解实验 盐酸普鲁卡因的水解实验 [适用对象] 药学专业 [实验学时] 6学时 一、实验目的 1、掌握不同结构的药物发生水解及氧化反应的原理。 2、了解外界因素对水解及氧化反应的影响 3、认识防止药物发生水解及氧化反应发生所采取的措施的重要性 二、实验原理 1、脂类药物的水解反应 2、酰胺类药物的水解反应
三、实验试剂及仪器 1、药品：盐酸普鲁卡因，青霉素钠 2、试剂：10％氢氧化钠，稀盐酸 3、器材：水浴锅、试管、红色石蕊试纸、滴管。 四、实验步骤 1、盐酸普鲁卡因的水解试验 （1）取盐酸普鲁卡因约0.1g，加水3ml使其溶解，将一条湿的红色石蕊试纸盖于试管口，在沸水浴上加热，红色石蕊试纸不变色。 （2）取盐酸普鲁卡因约0.1g，加水3ml使其溶解，加入10％氢氧化钠试液1ml，将一条湿的红色石蕊试纸盖于试管口，在沸水浴上加热，红色石蕊试纸变蓝色。 2、青霉素钠的水解实验 （1）取青霉素钠0.1g，水5ml使其溶解，观察溶液的澄清度，放置2小时，观察溶液是否浑浊及颜色。 （2）取青霉素钠0.1g，加水5ml使其溶解，加稀盐酸2滴，有白色沉淀产生。 磺胺醋酰钠的制备 [适用对象]药学专业 [实验学时] 6学时 一、实验目的 了解酰化反应的原理和掌握其操作技能。掌握如何控制反应过程的pH、温度等条件及利用主产物与副产物不同的理化性质来分离副产物。了解和掌握其成盐方法和操作方法。
药物化学实验
药物化学实验Experimental Medicinal Chemistry 2013年03月
常用实验仪器与装置 一、常用标准接口玻璃仪器 1．标准接口玻璃仪器 标准接口玻璃仪器是具有标准磨口或磨塞的玻璃仪器。由于口塞尺寸的标准化、系统化，磨砂密合，凡属于同类规格的接口，均可任意互换，各部件能组装成各种配套仪器。当不同类型规格的部件无法直接组装时，可使用变径接头使之连接起来。使用标准接口玻璃仪器既可免去配塞子的麻烦手续，又能避免反应或产物被塞子沾污的危险；口塞磨砂性能良好，密合性可达较高真空度，对蒸馏尤其是减压蒸馏有利，对于毒物或挥发性液体的实验较为安全。 标准接口玻璃仪器，均按国际通用的技术标准制造。当某个部件损坏时，可以选配。 标准接口仪器的每个部件在其口、塞的上或下显著部位均具有烤印的白色标志，表明规格。常用的有10，12，14，16，19，24，29，34，40等。 下面是标准接口玻璃仪器的编号与大端直径： 编号1012 14 16 19 24 29 34 40 大端直径/mm10 12.5 14.5 16 18.5 24 29.2 34.5 40 有的标准接口玻璃仪器有两个数字，如10/30，10 表示磨口大端的直径为10mm，30 表示磨口的高度为30mm。 2．标准接口玻璃仪器简介 图2-1 为药物化学实验常用的标准接口玻璃仪器。 圆底烧瓶二颈烧瓶三颈烧瓶梨形烧瓶
蒸馏头克氏蒸馏头蒸馏弯头二口接管 具支弯接管弯接管真空弯接管三叉弯接管 温度计套管搅拌器套管弯形干燥管变径接头 空气冷凝管直形冷凝管球形冷凝管恒压（滴液）漏斗图2-1 药物化学实验常用的标准接口玻璃仪器
实验指导
天然药物化学实验指导 一、前言 天然药物化学实验是整个天然药物化学课的重要组成部分。其主要目的是： 通过试验，检验在课堂上所学的理论知识。使学生对理性知识的理解更加深入，掌握得更加牢固。 通过试验，训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练。 在实验中，重点是要加强对学生基本操作技能的训练。天然药物化学实验要求学生掌握以下技能： 提取分离方面 要求掌握常用的经典方法的原理及操作。其中包括液-固提取法（浸渍、渗漉、回流提取等）、液-液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法、反流分布法）、重 结晶法等。 掌握纸色谱、柱色谱（包括吸附柱、离子交换柱等）的原理和基本操作。 鉴定方面 化学方法 ①掌握一般定性反应在鉴定中的用 ②掌握重要衍生物（乙酰化物、甲基化物生物碱盐类等）的制备方法及其在结 构鉴定中的应用。 ③了解重要降解反应的原理及应用。 光谱方法 了解UV、IR、NMR、MS在天然物结构测定中的应用。目前要求学员能了解黄酮类化合物的UV、NMR波谱、蒽醌的IR以及麻黄生物碱的NMR谱特征。 二、天然药物化学实验须知 在天然药物化学实验中，所用的药品多数是挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、刺激性、甚至爆炸性药品，试验操作又常在加温加压等情况下进行，需要各种热源、电器或其他仪器，操作不慎易造成火灾、爆炸、中毒、触电等事故。但只要加强爱护国家财产和保障人民生民安全的责任心，提高警惕，消除隐患，注意实验规则，事故是可以避免的。
实验规则 试验前必须预习实验内容，了解原理和操作规程。随时记录试验应记的项目，以作正式报告。 试验前应清点并检查仪器是否完整，装置是否正确，合格后方可进行试验。试验时不准做无关的事情，严禁吸烟，不得擅自离开，并应随时注意反应情况，仪器有否漏气，破裂等。 药品仪器都是国家财产，须节约爱护使用，公用物品，用完后立即放回原处。不可调错瓶塞，以免污染，仪器要洗刷干净。 操作易燃性有机溶剂，回流、蒸馏、减压蒸馏时，不能明火直接加热，要放沸石或一端封死的毛细管，若在加热时发现无沸石则应冷却后再加，防止爆沸冲出。 减压系统应装有安全瓶。加液时应停火或远离火源，一般无漏气开口，冷凝水要通畅。起封易挥发溶剂瓶盖时，脸面要避免开瓶口慢慢启开，以防气体冲脸上。 有毒具腐蚀药品应妥善保管，操作后要立即洗手。勿粘及五官和创口，以免中毒。实验中，有毒气或腐蚀性气体发生适应在通风橱中进行操作。必要时可戴好防护用具进行工作。 若将玻管插入塞中时，可在塞孔中涂些水和甘油等润滑剂，用布包住波管使其旋转而入，防止折断割伤。 试验台上不放无用的药品、仪器，在实验时要做到水槽、仪器、桌面、地上清洁整齐。 试验结束时，应将门、窗、水、电、煤气关好，室内打扫干净，并清点仪器后方可离去。 安全防火须知 实验室存放易燃性有机溶剂时要远离火源，不得超过500ml。 在进行易燃性有机溶剂实验时，一定要按着操作规程进行。不可将易挥发、易燃性有机溶剂倒入水槽或废液缸内。 烘箱内不能烘盛有易燃性溶剂的器皿。 消防器材，沙箱、石棉布、灭火器等应放在方便固定的地点，不能随意移动，均应处于备用状态。 万一不慎着火，要沉着冷静积极抢救，应立即切断室内电源和火源，用石棉布将着火部位盖严，使其断绝空气而熄灭。或是火势情况选用适当灭火器材进行灭火。在实验室使用二氧化碳灭火器较好，它具有不腐蚀不导电之优点。
天然药物化学实验讲义
《天然药物化学实验讲义》 实验须知 天然药物化学实验教学是天然药物化学课程的重要组成部分，是使学生进一步理论联系实际，掌握天然药物有效成分提取、分离和检定的基本操作技能，提高学生分析和解决问题能力。养成严密科学态度和良好工作作风必不可少的教学环节。为此，提出下列实验须知： 1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。若发生事故应立即报告指导教师。 2．实验前作好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法，安排好当天计划，争取准时结束。实验过程应养成及时记录的习惯。凡是观察到的现象和结果及有关的重量、体积、温度或其他数据，应立即如实记录，实验完毕后，认真总结，写好报告，提取纯化所得单体产物包好，贴上标签（日期、样品名称、纯度、mp、bp、TLC、重量）交给老师。 3．实验室中保持安静，不许大声喧嚷，不许抽烟、不迟到、不随便离开，实验台面应保持清洁，使用过的仪器及时清洗干净，存放在实验柜内，废弃的固体和滤纸等丢入废物缸内，绝不能丢入水槽、下水道和窗外，以免堵塞和影响环境卫生。 4．公用仪器及药品用完后立即返还原处，破损仪器应填写破损报告单，注明原因。节约用水、用电、药用试剂。严格药品用量。 5．保持实验室内整洁，学生采取轮流值日，每次实验完毕，负责整理公用仪器，将实验台、地面打扫干净，倒清废物缸，检查水、电和门窗是否关闭。
实验一薄层板的制备、活度测定及应用 一、目的要求 1．掌握硅胶薄层板的制备及薄层层析的操作方法 2．掌握硅胶薄层活度的测定方法 3．应用薄层层析法检测识中草药化学成分 二、实验材料 薄层层析用硅胶G，硅胶F，羧甲基纤维素钠，0.01%二甲基黄（Dimethy-yellow. P-Dimethylaminoazobenzene），苏丹红（Sudan Ⅲ），靛酚蓝（Indophenol blue 4-Tapnthoquinone-4-dimethyl aminoaniline），苯，微量点样管，10×20cm玻璃板20块，碾钵7套。 三、实验操作 （一）薄层板的制备 1．硅胶薄层的制备 （1）硅胶G薄层取硅胶G或硅胶GF一份，置烧杯中加水约5份混合均匀，
药物化学实验
小学期药物化学实验 学院：药学院 分组：一组 姓名： 学号： 指导老师：
贝诺酯的合成 摘要：本品以阿司匹林和扑热息痛(对乙酰氨基苯酚)为原料合成。阿司匹林与氯化亚砜反应制备乙酰水杨酰氯时以少量吡啶作催化剂，氯化亚砜过量20％左右以提高收率，过量氯化亚砜减压蒸馏除去。本品经口服进入体内后，经酯酶作用，释放出阿司匹林和扑热息痛而产年药效。本品既有阿司匹林的解热镇痛抗炎作用，又保持了扑热息痛的解热作用。 关键词贝诺酯；溶剂；合成条件 一、实验目的 1. 通过乙酰水杨酰氯的制备，了解氯化试剂的选择及操作中的注意事项。 2. 通过本实验了解酯化反应原理，掌握无水操作的技能及反应中产生有害气体的吸收方法。 二、实验原理 扑炎痛为消炎镇痛药，常以阿司匹林和扑热息痛(对乙酰氨基苯酚)为原料合成。阿司匹林与氯化亚砜反应制备乙酰水杨酰氯时以少量吡啶作催化剂，氯化亚砜过量20％左右以提高收率，过量氯化亚砜减压蒸馏除去。经过上述合成，扑炎痛既保留了解热镇痛的作用，又减小了原药的毒副作用，并有协同作用，适用于急慢性风湿性关节炎、风湿痛、头痛及感冒发烧等病症的治疗。合成反应如下：
三、实验仪器 1 原料与试剂：阿司匹林（药用）、扑热息痛（化学纯）、二氯亚砜（分析纯）、吡啶（分析纯）、氢氧化钠（化学纯）、苯（化学纯）、甲苯（化学纯）、二甲苯（化学纯）、丙酮（化学纯） 2 主要仪器：搅拌机、电热套、铁架台、恒温水浴锅、三口瓶（150ml）、直形冷凝管、抽滤瓶（250ml）、布氏漏斗（60mm）、温度计（100℃）、量筒、滴管 表1-物料规格及配比 表2-物理性质 名称性状熔点（℃）溶解性 阿司匹林白色针状或板 135 在氢氧化钠溶液或碳酸钠状结晶粉末溶液中能溶解，但同时分解乙酰水杨酰氯淡黄色液体 扑热息痛 169-171 能溶于乙醇、丙酮和热水难 溶于水，不溶于石油醚及苯扑炎痛白色结晶 176-178 不溶于水、易溶于热醇中
天然药物化学实验指导
天然药物化学实验注意事项 天然药物化学试验的特点是实验周期长,所用溶剂和试剂品种多,而且用量较大。许多有机溶剂具有易燃、有毒、腐蚀性,刺激性和爆炸性等特点。在实验操作过程中又经常需要加热或减压等操作,学生将接触各种热源和电器。如果操作不慎,易引起中毒、触电、烧伤、烫伤、火灾、爆炸等事故。所以要求每个实验操作者,必须加强爱护国家财产和保障人民生命安全的责任心,严格遵守操作规程,树立严密的科学实验态度,提高警惕,消除隐患,预防事故的发生。 为了确保实验的安全进行,特作如下要求: 一、实验前要必须充分预习实验内容,明确实验原理、操作步骤及注意事项。实验开始前应检查仪器是否完整无损,装置是否正确,经检查合格后方可开始实验。 二、实验时要保持室内整齐、清洁、安静。不准做与实验无关的事情,不得擅自离开岗位。在实验过程中应密切观察实验进程是否正常,仪器又无漏气,破裂等现象。 三、倒取和存放易燃性有机溶剂时,要远离火源。不得随意将易燃性、易爆性的有机溶剂及药品倒入水槽或污水缸内。不得在烤箱内烘烤留有易燃性有机溶剂的仪器或物品。 四、使用精密仪器及电气设备时,应先了解其原理及操作规程,检查好电路,按操作规程进行。遇到不明了的问题应及时向老师请教,切忌自作主张,乱倒以仪器。电线及仪器不应放在潮湿处,不要用湿手接触电器。电器用完后,应立即清理,关好电源。 五、回流或蒸馏易燃性有机溶剂时,应检查冷凝水是否畅通,仪器装置是否漏气。不得用明火直接加热,应根据其沸点选用水浴、油浴或砂浴。蒸馏溶剂时要加入沸石,否则将发生爆沸。添加溶剂时要移开水浴,待溶剂冷却后再加,并应重新加沸石。 六、实验室中常用的苯、卤代苯、苯酚、苯胺、甲醇、二硫化碳、氰化物、汞和铅盐等化合物均为有毒或剧毒药品。人体中毒的途径一般为消化道、呼吸道或皮肤吸收。所以取用毒剧药时要注意切勿洒在容器外,不要接触皮肤或口腔。室内要通风良好,产生毒气的操作应在通风厨内进行。毒物及废液不得随意乱倒。实验室内严禁进食。 七、实验结束时,应将水、电、门窗关妥后,方能离开实验室。 八、实验时一旦不慎起火,应沉着冷静,积极灭火。首先立即切断实验室内所有电源及火源,搬走易燃易爆物品,同时针对起火点情况,选用适当灭火器材进行灭火。 九、急救常识。
天然药物化学实验
实验一天然产物化学成分系统预试验 天然产物中所含的化学成分种类很多，在深入研究之前应首先了解其中含有哪些类型的化学成分，如生物碱、皂苷、黄酮类等等。这就需要进行各类化学成分的系统定性预试验。或根据研究的需要进行单项预试法来初步判断。 一、实验目的与要求 掌握未知成分的天然产物是怎样初步提取分离的，熟悉各主要成分的试管试验、沉淀反应和纸层析、薄层层析的方法并根据试验结果判断含有什么类型的化学成分。 二、基本原理 利用各类成分的颜色反应和沉淀反应，对天然产物的提取液进行检查可以初步判断其中的化学成分。由于提取液大多数颜色较深，影响对颜色变化的观察，可以使用薄层层析（TLC）或纸层析（PC）等方法对天然产物的提取液进行初步分离，再进一步检查。 三、实验内容： 利用不同成分在各种溶剂中的溶解度的不同，一般可采用以下3种溶剂分别提取，试验。 1．水浸液：取中草药粗粉5 g加水60 ml，在50~60℃的水浴上加热1小时，过滤，滤液进行下列试验。
试管进行，△在滤纸或硅胶CMC-Na薄层板上进行，下同。 糖鉴定 （1）α-萘酚一硫酸试剂检查还原糖。 ①溶液I：10％α-萘酚乙醇溶液。溶液II：硫酸。取1ml样品的稀乙醇溶液或水溶液，加入溶液I 2滴～3滴，混匀，沿试管壁缓缓加入少量溶液II，二液面交界处产生紫红色环为阳性反应。 （2）斐林试剂检查还原糖。 溶液I：6．93g结晶硫酸铜溶于100ml水中。溶液II：34．6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于100ml水中。取1ml样品热水提取液，加入4滴～5滴用时配制的溶液I、II等量混合液，在沸水浴中加热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性反应。如检查多糖和苷，取1ml样品水提液，加入1m110% 盐酸溶液，在沸水浴上加热10min，过滤，（成盐去除杂质）再用10％氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查还原糖。 或者直接用高效液相色谱看色谱图。 酚类鉴定试剂 （1）三氯化铁试剂检查酚类化合物、鞣质1％～5％三氯化铁水溶液或乙醇溶 液，加盐酸酸化。取1ml样品的乙醇溶液，加入试剂1滴～2滴，显绿、蓝绿或暗
药物化学实验讲义总论
药物化学实验 必做实验： 1.苯妥英锌； 2.磺胺醋酰钠； 3.苯佐卡因； 4. 扑热息痛的合成 河北联合大学药学院药物化学学科 2012年3月
实验一苯妥英锌（Phenytoin-Zn）的合成 一、目的要求 1. 学习二苯羟乙酸重排反应机理。 2. 掌握用三氯化铁氧化的实验方法。 二、实验原理 苯妥英锌可作为抗癫痫药，用于治疗癫痫大发作，也可用于三叉神经痛。苯妥英锌化学名为5,5-二苯基乙内酰脲锌，化学结构式为： H N N O O Zn 2 苯妥英锌为白色粉末，mp.222~227℃（分解），微溶于水，不溶于乙醇、氯仿、乙醚。合成路线如下： C CH O [O]C C O O C C O O +C O NH2 NH2 NaOH H N ONa O HCl H N OH O ZnSO4 H N O O Zn 2 NH3H2O . 三、实验方法 （一）联苯甲酰的制备 投入3.0g安息香，9ml冰醋酸，10%浓度CuSO4·5H2O水溶液20滴，1.5g硝酸铵*，沸石一粒，加入到100ml单口球形瓶中，装好回流冷凝管，回流反应60min。将反应液倾入盛有50 mL水的烧杯中，用少量水洗涤球形瓶合并至烧杯，搅碎产物，抽滤，结晶用少量水洗，干燥，得粗品2.1—2.4g，收率70—80%。如果要制备纯品，可以将粗品可以用75%乙醇重结晶，产品mp94-96℃。 *该方法是改进的氧化安息香为二苯基乙二酮的方法，使用二价铜离子为催化剂，硝酸盐为氧化剂。请思考原理。
（二）苯妥英的制备 在装有球形冷凝器的100 mL圆底烧瓶中，依次加入联苯甲酰2 g，尿素0.7 g，20% 氢氧化钠6 mL，50% 乙醇10 mL及沸石一粒，直火加热，回流反应30 min，然后加入沸水60 mL，活性碳0.3 g，煮沸脱色10 min，放冷过滤。滤液用10 % 盐酸调pH 6，析出结晶，抽滤。结晶用少量水洗，干燥，得粗品，计算收率。 （三）苯妥英锌的制备 将苯妥英0.5 g置于50 mL烧杯中，加入氨水（15 mL NH3.H2O + 10mL H2O），尽量使苯妥英溶解，如有不溶物抽滤除去。另取0.3 g ZnSO4.7H2O加3 mL水溶解，然后加到苯妥英铵水溶液中，析出白色沉淀，抽滤，结晶用少量水洗，干燥，得苯妥英锌，称重，测分解点，计算收率。 注释： 1. 制备联苯甲酰时，直火加热至中沸，通过测其熔点控制质量。 2. 苯妥英锌的分解点较高，测时应注意观察。 实验二磺胺醋酰钠（Sulfacetamide Sodium）的合成 一、目的要求 1. 通过磺胺醋酰钠的合成，了解用控制pH、温度等反应条件纯化产品的方法。 2. 加深对磺胺类药物一般理化性质的认识。 二、实验原理 磺胺醋酰钠用于治疗结膜炎、沙眼及其它眼部感染。磺胺醋酰钠化学名为N-[（4-氨基苯基）-磺酰基]-乙酰胺钠-水合物，化学结构式为： NH2 2NCOCH3 H2O . 磺胺醋酰钠为白色结晶性粉末；无臭味，微苦。易溶于水，微溶于乙醇、丙酮。合成路线如下：