分子生物学题库汇总
分子生物学题库汇总
名词解释：
1.基因(gene)：是一段携带功能产物（多肽，蛋白质，tRNA和rRNA和某些小分子RNA）信息的DNA片段，是控制某种性状的的遗传单位。
2.基因组(genome)：泛指一个有生命体、病毒或细胞器的全部遗传物质；在真核生物，基因组是指一套染色体（单倍体）DNA。
3、端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。
4、操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA为多顺反子。
5、顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。
6、反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。在反式作用因子中，可直接或间接结合RNA聚合酶的，称为转录因子。
转录调节因子结构
DNA结合域
酸性活域
脯氨酸富含域 TF 转录激活域
谷氨酰胺富含域
蛋白质-蛋白质结合域
（二聚化结构域）
7、启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。
8、增强子:位于真核基因中远离转录起始点，能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游，
也可相距靶基因较远。
9、基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质，进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。
10、信息分子:调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子；而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。
11、受体:是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合，进而发生生物学效应的的特殊蛋白质。
12、分子克隆:在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组，将重组分子导入合适宿主，使其在宿主中扩增和
繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。
13、蛋白激酶:是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。
14、蛋白磷酸酶:是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子，与蛋白激酶相对应存在，共同
构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。
15、基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。
16、载体:能在连接酶的作用下和外源DNA片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA分子。
17、转化:指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。
18、感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌
体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。
19、转导:指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。
20、转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
21、DNA变性:在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之
间的氢键断裂，而核酸分子中的所有共价键则不受影响。
22、DNA复性:当促使变性的因素解除后，两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构。
23、退火:指将温度降至引物的TM值左右或以下，引物与DNA 摸板互补区域结合形成杂交链。
24、筑巢PCR:先用一对外侧引物扩增含目的基因的大片段，再用内侧引物以大片段为摸板扩增获取目的基因。可以提高PCR的效率和特异性。
25、原位PCR:以组织固定处理细胞内的DNA或RNA作为靶序列，进行PCR反应的过程。
26、定量PCR:基因表达涉及的转录水平的研究常需要对mRNA 进行定量测定，对此采用的PCR技术就叫定量PCR。
27、基因打靶:是指通过DNA定点同源重组，改变基因组中的某一特定基因，从而在生物活体内研究此基因的功能。
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28、DNA芯片:DNA芯片技术是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后与标记的样品杂交，通过对杂交信号的检测分析，即可获得样品的遗传信息。由于常用计算机硅芯片作为固相支持物，所以称为DNA芯片。
29、错义突变:DNA分子中碱基对的取代，使得mRNA的某一密码子发生变化，由它所编码的氨基酸就变成另一种的氨基酸，使得多肽链中的氨基酸顺序也相应的发生改变的突变。
30、无义突变:由于碱基对的取代，使原来可以翻译某种氨基酸的密码子变成了终止密码子的突变。
31、同义突变:碱基对的取代并不都是引起错义突变和翻译终止，有时虽然有碱基被取代，但在蛋白质水平上没有引起变化，氨基酸没有被取代，这是因为突变后的密码子和原来的密码子代表同一个氨基酸的突变。
32、移码突变:在编码序列中，单个碱基、数个碱基的缺失或插入
以及片段的缺失或插入等均可以使突变位点之后的三联体密码阅读框发生改变，不能编码原来的蛋白质的突变。
33、癌基因:是细胞内控制细胞生长的基因，具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性。当癌基因结构或表达发生异常时，其产物可使细胞无限制增殖，导致肿瘤的发生。包括病毒癌基因和细胞癌基因。
34、细胞癌基因:存在于正常的细胞基因组中，与病毒癌基因有同源序列，具有促进正常细胞生长、增殖、分化和发育等生理功能。在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因，当其受到某些条件激活时，结构和表达发生异常，能使细胞发生恶性转化。
35、病毒癌基因:存在于病毒（大多是逆转录病毒）基因组中能使靶细胞发生恶性转化的基因。它不编码病毒结构成分，对病毒无复制作用，但是当受到外界的条件激活时可产生诱导肿瘤发生的作用。
36、基因诊断:以DNA或RNA为诊断材料，通过检查基因的存在、结构缺陷或表达异常，对人体的状态和疾病作出诊断的方法和过程。
37、RFLP:即限制性片段长度多态性，个体之间DNA的核苷酸序列存在差异，称为DNA多态性。若因此而改变了限制性内切酶的酶切位点则可导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化，称为RFLP。
38、基因治疗:一般是指将限定的遗传物质转入患者特定的靶细胞，以最终达到预防或改变特殊疾病状态为目的治疗方法。
39、反义RNA:碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA称为反义RNA。可以作为一种调控特定基因表达的手段。
40、核酶:是一种可以催化RNA切割和RNA剪接反应的由RNA 组成的酶，可以作为基因表达和病毒复制的抑制剂。
41、三链DNA:当某一DNA或RNA寡核苷酸与DNA高嘌呤区可结合形成三链，能特异地结合在DNA的大沟中，并与富含嘌呤链上的碱基形成氢键。
42、SSCP:单链构象多态性检测是一种基于DNA构象差别来检测点突变的方法。相同长度的单链DNA，如果碱基序列不同，形成的构象就不同，这样就形成了单链构象多态性。
43、管家基因:在生物体生命的全过程都是必须的，且在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达的基因。
44、基因表达就是基因的转录及翻译，也包括RNA基因的转录。
基因表达的规律性包含时间特异性和空间特异性。
基因表达的方式有组成性表达及可诱导或可阻遏表达。
诱导和阻遏表达：可诱导基因在特定环境中表达增强的过程，称为诱导(induction)。
如果基因对环境信号应答是被抑制，这种基因是可阻遏基因。可阻遏基因表达产物水平降低的过程称为阻遏(repression)。
基因表达的调控（control of gene expression）是指对基因组中某一个基因或一些功能相近的基因表达的开启、关闭和表达强度的直接调节。它是生物在进化过程中逐渐形成的精确而灵敏的生存和应变能力。
原核生物基因表达转录激活调控通常通过操纵子模式实现，并且以负性调节为主。
而真核生物基因表达调控则更复杂，多是通过反式作用因子（转录调节因子）与顺式反应元件（启动子、增强子、沉默子）的相互作用而实现的，大多数是正性调节。
45、SD序列:转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译，需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌16S rRNA3，末端富含嘧啶的序列互补，是核糖体的识别位点。
46、反义核酸技术:是通过合成一种短链且与DNA或RNA互补的，以DNA或RNA为目标抑制翻译的反义分子，干扰目的基因的转录、剪接、转运、翻译等过程的技术。
47、核酸探针:探针是指能与某种大分子发生特异性相互作用，并在相互作用之后可以检测出来的生物大分子。核酸探针是指能识别特异碱基顺序的带有标记的一段DNA或RNA分子。
48、周期蛋白:是一类呈细胞周期特异性或时相性表达、累积与分解的蛋白质，它与周期素依赖性激酶共同影响细胞周期的运行。
49、CAP:是大肠杆菌分解代谢物基因活化蛋白，这种蛋白可将葡
萄糖饥饿信号传递个许多操纵子，使细菌在缺乏葡萄糖时可以利用其他碳源。
50、顺反子（cistron）在反式构型中不能互补的各突变型所占有的那部分DNA片断（见互补测验）。
51、结构域是指超二级结构在空间上进一步聚集形成的紧密稳定的在蛋白质分子上明显可分的类似球状的结构。
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52、分子生物学（molecular biology）是在分子水平上研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的学科。
53、医学分子生物学从分子水平上研究人体在正常和疾病状态下的生命活动及其规律，从分子水平开展人类疾病的预防、诊断和治疗研究的一门科学。
53、抑癌基因是指存在于正常细胞内的一大类可抑制细胞生长并具有潜在抑癌作用的基因，当这类基因在发生突变、缺失或失活时可引起细胞恶性转化而导致肿瘤的发生。
54、基因文库（gene library，gene bank）利用限制性内切酶将基因组DNA切成片段，每一DNA片段都与一个载体分子拼接成重组DNA。将所有的重组DNA分子都引入到宿主细胞并进行扩增，得到分子克隆的混合体，这样一个混合体称为基因文库。
55、cDNA文库将cDNA的混合体与载体进行连接，使每一个cDNA分子都与一个载体分子拼接成重组DNA。将所有的重组DNA 分子都引入宿主细胞并进行扩增，得到分子克隆的混合体，这样一个混合体就称为cDNA文库。
56、表达载体（expressing vector）是用来在受体细胞中表达（转录和翻译）外源基因的载体。这类载体除具有克隆载体所具备的性质以外，还带有表达构件——转录和翻译所必需的DNA序列。
真核细胞——病毒做载体；原核细胞——质粒、噬菌体做载体
57、重组DNA技术采用载体基因与某目的基因在体外重组的方法克隆DNA的技术，称为重组DNA技术。过程包括：目的基因的获取、基因载体的选择与构建、目的基因与载体的拼接、重组DNA分子导入
受体细胞、筛选并无性繁殖含重组体分子的受体细胞以及阳性克隆的表达。
58.C值佯谬：这种生物体的进化程度与基因组大小之间不完全成比例的现象称为C值佯谬（ C value paradox ）；
59.基因家族(genefamily)概念:指核苷酸序列或编码产物的结构具有一定同源性的一些基因。
60..基因组学(genomics)：发展和应用基因作图、 DNA测序、基因定位等新技术以及计算机程序，分析生命体（包括人类）全部基因组结构及功能。
61.分子伴侣：是细胞一类保守蛋白质，可识别肽链的非天然构象，促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。
62..信号肽：各种新生分泌蛋白的N端有保守的氨基酸序列称信号肽。
63..细胞凋亡（apoptosis)(有树叶凋零之意)或程序化细胞死亡（programmed cell death , PCD)
是指多细胞有机体在正常生理或病理情况下，发生的一种由多基因控制的主动死亡过程。
64..凋亡小体:指凋亡的最后阶段，由胞质分割形成大小不等，含有细胞质膜、细胞器及核碎片的膜包被小体。
65.DNA片段化（主）:凋亡细胞DNA经琼脂糖凝胶电泳呈特征性梯状条带图谱
66.死亡受体(death receptors,DR)：指细胞表面存在的一类能结合凋亡剌激分子，并将信号传递至胞内引起细胞凋亡
的受体
67.“死亡结构域”概念：是凋亡信号受体共有的、存在于胞内的转导细胞凋亡所必需的一段高度同源的aa序列。
68.周期蛋白框:各类周期蛋白均含有一段约100个氨基酸的保守序列，称为周期蛋白框，介导周期蛋白与CDK结合。
69.检验点:意指当DNA受到损伤时,复制不完全或纺锤体形成不正常，周期将被阻断。
70.蛋白质组的含义：一个基因组、一种生物或一种细胞/组织所表达的全套蛋白质
蛋白质组学就是从整体的角度，分析细胞内动态变化的蛋白质组成成份、表达水平与修饰状态，了解蛋白质之间的相互作用与联系，揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律的一个新的研究领域
71.酵母双杂交系统:是在真核模式生物酵母中进行的，研究活细胞内蛋白质相互作用，对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能通过报告基因的表达产物敏感地检测得到。它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。
72.报道株:经改造的、含报告基因的重组质粒的宿主细胞。
73.克隆(clone):来自于同一始祖的一群相同分子、细菌、细胞或动物（常被成为副本或拷贝）。
74.克隆化(cloning):获取大量单一拷贝的过程，也称无性繁殖
75.DNA克隆:应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质（同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA）与载体DNA接合成一具有自我复制能力的DNA分子。继而通过转化或转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转化子细胞。再进行扩增提取获得大量同一DNA分子，又称基因克隆(gene cloning)或分子克隆(molecular cloing)。
76..载体（vector）：能携带外源基因进入受体细胞, 并在其中进行扩增或诱导外源基因表达的工具。
77.质粒:细菌染色质以外的双链环状DNA，能自我复制和表达其携带的遗传信息。
78.限制性核酸内切酶:由细菌自己产生的一种能识别和切割DNA 内部特定序列的一类核酸酶
79.基因组文库(genomic library，G文库):用基因克隆的方法保存宿主细胞中的DNA重组分子中的集合, 所有重组子
所含的插入片段的总和代表某种生物基因组全部核苷酸序列。
80.cDNA文库(cDNA library，C文库):用基因克隆的方法保存在宿主细胞中的DNA重组体的群体，每一重组子只含一种mRNA信息，
这些重组子的总和包含某种生物的全部mRNA序列。
81.定向克隆:将外源DNA片段定向插入到载体中的方法
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82.TA克隆定义:利用嗜热聚合酶如Taq聚合酶的模板非依赖性末端转移酶活性(在70～75℃活性高)，使PCR产物的3′末端加一个A的粘性端，将其直接克隆至3′粘性末端含一个T的线性克隆载体中.
83.宿主细胞：被导入重组分子的细胞
84.转化:质粒DNA或以质粒为载体构建的重组DNA导入细菌的过程
85.感受态细胞:用理化方法人工诱导细胞，使之处于易于吸收和容纳外源DNA分子的状态，
86.转导:通过噬菌体的释放和感染将DNA从一个细胞转移到另一个细胞的过程。
87.核酸分子杂交:用一已知的DNA或RNA片段(探针)来检测样品中未知的核苷酸序列，通过核苷酸间碱基互补的原理互相结合，再经显影或显色的方法，将结合核苷酸序列的位置和大小显示出来。
88.探针:用来检测某一特定核苷酸序列或基因序列的DNA片段或RNA片段
89.Southern印迹杂交:是将经凝胶分离的DNA转移到合适的固相支持物，再通过特异性探针的杂交来检测被转移的DNA 片段的一种技术。
90.Northern印迹杂交:将RNA样品变性和通过琼脂糖凝胶电泳进行分离，再转移到NC膜等固相载体上，用标记的DNA
或RNA特异探针对固定在膜上的RNA进行杂交。
91.核酸原位杂交:以特异性探针与细菌、细胞或组织切片中的核酸进行杂交并对其进行检测的方法, 又称原位杂交组织化学或杂交组织化学。
.反转录PCR ( RT-PCR):是将RNA的反转录反应和PCR 反应联合应用的一种技术
92.表位标签:亦称附加表位由短肽序列组成的能显示抗体存在的一
个表位，广泛用于分子生物学中附加到转基因蛋白中，翻译产物为融合蛋白，通过免疫组化或Western印迹杂交跟踪其表达，不会增加抗体对特异蛋白的反应。
93.:基因芯片技术:用已知序列的探针与样品cDNAs杂交，杂交信号阳性的探针序列即为细胞中表达的DNA序列
94.消减杂交法:将实验组mRNA(或cDNA)与对照组cDNA(或mRNA）杂交，去除杂交体和未杂交上的对照组成分（cDNA或mRNA），得到的为实验组独有的mRNA或cDNA，这些基因即是差异表达基因。
95.基因治疗:用正常或野生型基因校正或置换致病基因的一种治疗方法称基因治疗
96.基因疗法:治疗过程中应用的目的基因就像平常临床上使用的药物一样，为了与传统意义上的基因治疗相区别，通常称之为基因疗法。
97.VNTR多态性:不同个体间重复单元[如(CA)n/(TG)n]的拷贝数(即出现的频率)不同，因而产生多态性，称为VNTR多态性。
98.生物芯片：在可识别的有序点阵集合上，试样与每个点阵发生分子间反应或杂交后，通过扫描检测同时获得各个点阵上的作用信息。
分子生物学大题
一、基因与基因组
1.鉴别蛋白质编码基因的五项标准:(1).开放阅读框（open reading frame, ORF）:是始于起始密码子并终于终止密码子的一串密码子。;(2).
序列特征——密码子偏爱和剪接点;(3). 序列保守性;(4). 转录产物:寻找基因的表达产物——RNA或蛋白质.;(5). 基因失活。
2.真核生物基因组特点:（一）分子量很大的DNA与蛋白质形成染色体存在于核内。（二）转录与翻译不同步，转录产物为单顺反子，功能相关基因分散排布，无操纵子结构。（三）基因组存在高比例的非编码序列 (non coding sequence, NCS), NCS可作进化标尺。（四）大量重复序列（repeat sequence）存在。（五）基因多为不连续的，被插入序列（IS）所分隔(这种现象称为断裂基因（split gene）. 断裂
基因由内含子（intron）（非编码序列）和外显子（exon）（编码序列）交替组成。（六）功能相关基因构成各种基因家族
3.重复顺序的功能：1）编码某些重要的功能性蛋白、rRNA、tRNA等; 2）与染色体构象、着丝粒形成有关; 3）参与基因的表达调控. 分类：1）倒位（转）重复顺序：指两互补顺序呈反向排列，形成回文结构或发夹状结构；2）串连重复顺序：由相同的核心顺序（2~70bp）成串（头尾相接）排列而成的高度重复顺序。3）散在重复顺序。
4.人类基因定位的基本方法:(1).家系分析法——发现感兴趣的基因。通过分析统计家系中有关遗传性状的连锁情况和重组率而进行基因定位的方法。;(2).体细胞杂交——初步的基因定位;(3). 核酸杂交技术——精确的基因定位。克隆基因定位法；原位杂交法；原位PCR；定位克隆技术。
5.基因论：1)相引是两个基因位于同一染色体上，相斥则反之；2)同源染色体在减数分裂时发生交换；3)位置相近的因子相互连锁。
6.HGP的主要成果——四张图：
1）遗传图:第一代遗传标记是RFLP（restriction fragment length polymorphism，限制性酶切片段多态性）;第二代遗传标记是STR（short
tandem repeat，简短串连重复序列），6000个标记;第三代遗传标记是SNP（restriction fragment length polymorphism，单核苷酸多态性），不再是分析长度，而是直接测序
2）物理图:以一段已知序列的DNA片段（STS，sequence tagged site，序列标记位点）并有染色体定位为路标，以Mb 或Kb 为图距的基因组图。
3）转录图又称表达序列图或cDNA图的路标:是以部分5 '端或3'端cDNA序列（即表达序列标签，EST）为路标，根据表达顺序的位置和4
距离作图
4）序列图：测定总长约30亿个核苷酸组成的全染色体序列。
7.五大模式生物：E.coli、酿酒酵母、黑腹果蝇、秀丽线虫和小鼠，其序列分析被列为HGP的内容；
8.DNA多态性及其意义：DNA多态性:除同卵双生的两个体外，没有两个人的DNA组成是完全相同的，即人类DNA组成具有多态性。如果比较随机的十个人的常染色体的非编码区,就会发现约200~400bp就有一个核苷酸不同,这些可变区域即称为DNA多态性(DNA polymorphism)位点。 DNA多态性标记的价值：1）为路标，构建DNA标记的遗传连锁图谱;2）
使遗传图谱从直接可见的表型多样性标记进步到DNA分子本身多态性标记。 DNA多态性的种类：1）DNA 位点的多态性；2）串连重复顺序多态性；3）单核苷酸多态性
2.细胞凋亡的生物学意义：1）具有清除个体发育过程及成熟个体中多余细胞及老化细胞的机体调节作用；2）具有消除对机体有害的癌变细胞及病毒感染细胞的机体防御作用。细胞凋亡是维持个体生存所必需的一种生物学机制。
3.Caspase的性质和种类：Caspase即天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶。1）已在哺乳类中发现14种，分为3个亚类：Caspase-1亚家族，Caspase-2亚家族，Caspase-3亚家族；2）根据前体分子(procaspase)N端的原结构域(prodomain)分为2类:启始分子(initiator), 如-8、-9、-10等，为蛋白酶级联反应的启始者，其活化后再切割和活化下游Caspase；效应分子(effector),如-3、-6、-7等，作为上游酶的底物被切割活化，再作用于多种蛋白质或酶，促使细胞凋亡。
4.效应caspase引起细胞凋亡的机制：1）灭活细胞内凋亡抑制蛋白：非凋亡细胞中, CDA (caspase活化的DNAase)与其抑制蛋白(ICDA)结合;凋亡细胞中, caspase剪切ICDA; CDA游离并进入核内降解DNA,细胞凋亡.2）剪切细胞结构蛋白：如Caspase对核板的降解作用; 在凋亡过程中, caspase在单一位点剪切核纤层蛋白(lamin), 导致核板塌陷, 染色质浓缩.3）剪切效应蛋白: 如参与基因表达蛋白因子,如PARP；4）活化caspase抑制剂。
5.细胞凋亡的信号传递通路的特点:(1).同一性：各种因素引起的凋亡的形态与生化改变均相同。(2).多样性：环境因素不同，细胞类型不同，或刺激因素不同时，从凋亡程序启动到凋亡发生，其信号传递途径是不同的。(3).分类：百余种凋亡调控因子，正逐渐被组装成一条条的信息传导通路，可分为基本传导通路和非专一性传导通路二类。
6.细胞凋亡的信号传递途径:(1)死亡受体介导的细胞凋亡;(2)线粒体相关蛋白的凋亡诱导途径：线粒体跨膜电位(Δψm)的下降，线粒体膜通透性转运孔（MPT）破坏或开放，开放的后果是，Δψm 下降、氧化磷化脱偶联、GSH耗竭、ROS 产生等，并形成恶习性循环。;(3)细胞核凋亡诱导途径;(4)粒酶B介导的细胞凋亡：CrB由CTL分泌进入靶细胞胞浆后,其丝氨酸蛋白酶在胞浆pH
7.0条件下发挥最佳活性，切割胞浆和核中的多种底物；Caspase 依赖的死亡通路是CrB介导细胞死亡的重要途径之一。
7.P53蛋白的调控作用：自N端起包括：转录活化区、DNA结合区、四聚体化区和C-调节区；
1）P53的表达与活性调节。正常状态下：胞浆P53水平很低，半衰期很短；胞内P53被严格监控，受HDM2的负反馈调节，并通过泛素降解途径调节P53水平。异常情况下：当细胞DNA损伤、纺锤体丝断裂、癌基因异常表达等细胞生存面临威胁时；P53水平迅速升高和活化；
2）P53对细胞凋亡和细胞周期的调节作用：野生型P53蛋白具维持细胞生长、抑制恶性增殖的作用；P53蛋白作为“基因警卫”负责维持基因组的完整性、DNA损伤修复和细胞周期的正常运转；如果损伤不能修复，P53就激活那些诱导凋亡的基因表达，使细胞进入凋亡状态。
突变型P53蛋白：丧失抑制细胞恶性增殖功能，p53基因突变是50%以上肿瘤逃逸凋亡的重要原因;并且本身具有癌基因功能。
8.Bcl-2家族的功能:(1)属凋亡抑制基因，阻遏细胞凋亡，延长细胞寿命，但对细胞周期和分化无影响.(2)阻止或减少各种刺激引起的细胞损伤。如Bcl-2能阻止由r射线和多种化疗药导致的细胞凋亡。
(3)Bcl-2蛋白具抗氧化作
用;(4)Bcl-2蛋白抑制细胞器内Ca2+ 离子向胞质释放，而凋亡必须有Ca2+ 离子参与。
9.bcl-2家族成员：1）抑制凋亡：bcl-2，bcl-xL，Mcl-1 。2）促进凋亡：bax，bcl-xs ，bad。
10. Bcl-2家族对细胞凋亡的调节机制:(1)Bcl-2、Bax和Bcl-x组成一个凋亡调控系统;(2)当Bax/Bax同源二聚体形成时，便诱导细胞凋亡；
(3).随bcl-2表达量增加，渐多的Bax/Bax解聚，形成更稳定的Bax/Bcl-2异源二聚体，从而中和了‘Bax/Bax'诱导凋亡的作用。即Bax和Bcl-2 比值调节凋亡；(4) 当Bcl-xs存在时，优先形成Bcl-xs/Bcl-2 ，使Bax/Bax形式保留，诱导细胞凋亡。
11.原位末端标记技术(in situ end –lableing, ISEL)：原理: ISEL的原理是基于细胞凋亡时，DNA断裂，利用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）或DNA聚合酶将带有生物素标记的核苷酸（biotin-16-dUTP）掺入到断裂的DNA的3'端，再使其与带有辣根过氧化物酶的抗生物蛋白结合，经DAB显色后，便可观察到细胞内是否存在DNA片段端存在。主要方法有2种: 1）. TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)；2）. DNA聚合酶I 或klenow大片段介导的原位的缺口平移(ISNT)。该法特异性和敏感性较高，可检出早期的凋亡细胞.
12.与细胞凋亡减少有关的疾病：1）.癌症；2）.自身免疫性疾病，红斑浓疮，免疫介导的肾小管肾炎。3）.病毒感染
与细胞凋亡增加有关的疾病：1）.AIDS；2）. 神经退行性病变，帕金森病，老年痴呆；3）再生性障碍贫血；4）.缺血性损伤，心肌梗塞，脑卒中，再灌注损伤；5）.酒精肝
13.细胞凋亡自身免疫性疾病：正常情况下：1）90%以上的淋巴细胞在胸腺内发育都会发生凋亡，那些能识别自身抗原的细胞都应被清除，确保被选择生存下来的淋巴细胞不至于对自身抗原产生免疫应答；2）如果这种选择性清除失败，在靶细胞存在下，淋巴细胞被激活，产生5
大量的效应细胞攻击靶细胞，导致发生自身免疫性疾病。
发病的分子机制：1）淋巴细胞中调节细胞凋亡的一个关键分子是细胞表面受体Fas（又称APO或CD95）， Fas受体与FasL （配体）结合即可激活凋亡信号传导途径，细胞凋亡；2）T细胞表面受体Fas 和FasL发生突变时，T细胞不能发生正常凋亡，导致自身免疫性疾病。3）除系统性红斑狼疮外，还证实类风湿性关节炎、自身免疫性糖尿病、牛皮癣均与淋巴细胞凋亡敏感性改变（Fas和FasL突变）有关。
14.细胞凋亡病毒性疾病：病毒的溶解性感染所产生的细胞病变变作用与引发细胞凋亡有关；而病毒的持续性感染与病毒抑制细胞凋亡有关。1）病毒感染引发细胞凋亡：牛疱疹病毒、鸡白血病毒和HIV等，均能通过诱导细胞凋亡而引起宿主细胞缺失。如HIV感染后引起CD4+T细胞凋亡而缺失。2）病毒感染抑制细胞凋亡：许多病毒具有抑制细胞凋亡的机制，有利于建立持续感染、延长病毒复制时间、以最大限度产生子代病毒。如EB病毒产生LMP-1，使Bcl-2基因上调；牛痘病毒产生crmA,可抑制由caspase所介导的细胞凋亡。
15.细胞凋亡与肿瘤：肿瘤不仅是细胞增殖和分化异常疾病，同时也是细胞凋亡异常疾病。1）大多数肿瘤P53突变、而有些肿瘤过度表达Bcl-2蛋白，这些可有效地以避免细胞凋亡发生。2）P53蛋白作为“基因警卫”负责维持基因组的完整性、DNA损伤修复和细胞周期的正常运转。如果损伤不能修复，P53就激活那些诱导凋亡的基因表达，使细胞进入凋亡状态。3）Bcl-2属凋亡抑制基因，阻遏细胞凋亡，延长细胞寿命。
三、细胞周期调控：
1.细胞周期：1）间期：G1期 (合成前期)； S期 (DNA合成期)；G2期 (合成后期)。 2）分裂期：前期；中期；后期；末期。
2.细胞周期调控的主要分子机制：细胞周期引擎——异二聚体蛋白激酶复合体，包括二个亚单位：1）调节亚单位：细胞周期蛋白，其浓度随细胞周期不断变化，不仅起激活CDK的作用，还决定了CDK何时、何处、将何种底物磷酸化；2）催化亚单位：细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶(CDK)，单独存在时无活性，与cyclin结合才具有蛋白激酶的活性。
参与细胞周期调控的分子：1）异二聚体蛋白激酶复合体；2）生长因子；3）泛素与APC：泛素由76个氨基酸组成，高度保守，普遍存在于真核细胞，故名泛素；泛素相当于蛋白质被摧毁的标签。4）周期蛋白依赖性激酶抑制因子（CKI）3.细胞周期的运行：1）细胞周期的启动（G0→G1）；2)DNA复制（G0→S ）；3）进入M期(G2-M)；
1）细胞周期的启动：细胞在生长因子的刺激下，Cyclin D表达，与CDK4、CDK6结合而活化激酶?下游蛋白质磷酸化?促进基因的转录2）DNA复制：CyclinE与CDK2结合-?S-CDK触发前复制复合体（pre-RC）启动，同时阻止DNA再次进行复制.
3）进入M期(G2-M)：CyclinA、CyclinB与CDK1结合，形成M-CDK?CDK-Cyclin能够积累?CDK1使底物蛋白磷酸化?细胞分裂.
4.检验点由感受异常事件的感受器、信号传导通路和效应器构成，主要检验点有4个：1) G1/S检验点: 在哺乳动物中称R点(restriction point)，控制细胞由静止状态的G1进入DNA合成期，相关的事件包括：DNA损伤？细胞外环境适宜？细胞体积足够大？
2) S期检验点：DNA复制是否完成？3) G2/M检验点：是决定细胞一分为二的控制点，相关的事件包括：DNA损伤？细胞体积足够大？
4)中-后期检验点（纺锤体组装检验点）：任何一个着丝点没有正确连接到纺锤体上，都会抑制APC的活性，引起细胞周期中断。
四、蛋白质分离纯化
1.蛋白质的含量测定方法：
1）紫外光谱(A280)吸收法：色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在280 nm附近。大多数蛋白质含有这两种氨基酸残基，所
以测定蛋白质溶液280
nm的光吸收值是分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法。注意事项：石英比色杯；调零所用溶液；配制标准蛋白所用溶液；光密度范围。
2）Bradford检测法：考马斯亮蓝G-250在一定浓度的乙醇及酸性条件下，可配成淡红色溶液，当与蛋白质结合后，产生蓝色化合物，
反应迅速而稳。蓝色复合物在595 mn波长处具有最大光吸收值，并与溶液中蛋白质浓度成正比，因此可检测595 mn的光吸收值大小计算蛋白的含量。缺点：对各种纯化蛋白质反应不同；这种测定方法对蛋白质引起不可逆的变性。注意事项：标准曲线在2.5 ug～15 ug BSA浓度范围内保持线性关系；反应10～15 min后开始出现沉淀，尤其是高浓度蛋白质溶液在酸性条件下易发生沉淀；若选用目的蛋白来做标准曲线或用另一种方法来校正，所测蛋白浓度较准确。
3）Lowry检测法：在碱性溶液中形成铜-蛋白复合物，然后这一复合物还原磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin-酚试剂)，产生钼蓝和钨蓝复合物的深蓝色，这种深蓝色的复合物在745 ～750 nm处有最大的吸收峰，颜色的深浅(吸收值)与蛋白质浓度成正比，可根据750 nm的光吸收值大小计算蛋白质的含量。缺点：干扰物质多；反应速度慢；某些试剂不稳定；使蛋白质发生不可逆变性。注意事项：在加入试剂30 min后呈色达到饱和，时间延长颜色信号减弱；许多干扰物质降低颜色反应；高盐浓度可引起沉淀。
4）BCA (二喹啉甲酸)检测法：改进的Lowry测定法，反应简单而且几乎没有干扰物质的影响。原理：在碱性环境下蛋白质分子中的肽键能与Cu2＋生成络合物，同时将Cu2＋还原成Cu＋。而BCA试剂可敏感特异地与Cu＋结合，形成稳定的有颜色的复合物，在562 nm 处有高的光吸收值。颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来计算蛋白质的含量。注意事项：与Lowry相比，采用BCA法时，如果样品中含有脂类物质将明显提高光吸收值；为促进BCA法的反应进程，可将样品适当加热。
2. 经典的细胞蛋白质分离纯化流程由下述主要步骤组成：
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(1). 清洗组织或细胞;(2). 裂解细胞;(3). 离心除去膜组分等获得可溶性蛋白质;(4). 离心、层析、电泳等进一步纯化;(5). 获取产物蛋白。
3. 包涵体的成份：包涵体是表达蛋白非天然形式的混合物，包括目的蛋白、宿主细胞蛋白及膜蛋白片段，DNA、RNA和质粒编码蛋白以及LPS。
4. 包涵体的形成原因：表达蛋白不适当的中间折叠体高浓度聚集在一起形成的不溶物。
5.影响包含体形成的因素：除分子伴侣和折叠酶外；还与蛋白质本身的性质（形成转角的残基数目及平均带电性等）和生长条件（宿主、培养温度、培养基和pH等）有关。
6.防止包涵体形成：降低细胞生长温度；共表达分子伴侣；改变渗透压；融合蛋白
7.包含体中蛋白质的提取：用变性剂使之成为可溶性的伸展的肽链，然后再在适当的条件下复性折叠成天然的、有活性的蛋白质分子。
8.分离纯化细菌包涵体蛋白的基本步骤：破碎细胞-?分离包涵体-?溶解包涵体（用6～8mol/L或 9～10mol/L尿素或pH2.0 ～4.5酸性溶液）-?蛋白质产物的构型复原
9.影响电泳迁移率的主要因素：(1)带电颗粒的性质：即净电荷数量、颗粒大小及形状;(2)电场强度：指每厘米的电位降，也称电位梯度，或电势梯度;(3)溶液的pH值：决定带电颗粒的解离程度，亦即决定所带净电荷的多少;(4)溶液的离子强度：影响电动电位，缓冲液离子强度越高，电动电位越小，泳动速度慢;(5)电渗：在电场中，由于多孔支持物吸附水中的正或负离子使溶液相对带电，在电场作用下，溶液就向一定的方向移动.(6)支持介质的选择：(7)其它因素：10.不连续系统原理概要:(1)．在不连续电泳系统中，含有三种离子，两种不同孔径的凝胶，两种或两种以上不同pH的缓冲溶液.(2)．所谓不连续就是指凝胶浓度不一样，缓冲液离子成分及pH不一样。(3)．在不连续电泳系统中，有三种物理效应，即样品的浓缩效应、分子筛效应及电荷效应。由于这三种物理效应，使样品分离效果好，分辨率高。
11.以下为四个不连续性：(1)凝胶层的不连续性：浓缩胶(stacking gel)；分离胶 (separating gel
(2)缓冲液离子成分的不连续性：快离子(前导离子, leading ion)；慢离子(尾随离子, trailing ion)；缓冲配对离子(缓冲抗衡离子,the buffer counter ion); (3)电位梯度的不连续性：在不连续系统中，电位梯度的差异是自动形成的。(4)pH的不连续性：
浓缩胶pH：6.7：分离胶pH：8.9；缓冲液pH：8.3。在浓缩胶与分离胶之间有pH的不连续性，是为了控制慢离子的解离度，从而控制其有效迁移率。由于电泳基质的上述四个不连续性，使样品在电泳开始时得以浓缩，然后再被分离。
12.SDS-PAGE： SDS作用：
1）SDS与蛋白牢固结合，由于十二烷基硫酸根带负电荷，使得样品中各种蛋白质与SDS形成的SDS-蛋白质复合物都带有相同密度的负电荷，掩盖了蛋白质分子间天然的电荷差异；2）SDS-蛋白质复合物分子构型也几乎相同，而且具有相同的荷质比，因此在SDS-PAGE中，SDS-蛋白质复合物的电泳迁移率只与菌、酵母等的破碎。
2）SDS物理法：A. 超声法：在处理少量样品时操作简便、效率高，液量损失少，适于实验室使用。注意: 超声波产生的化学自由基团能使敏感的活性物质变性失活，另外噪声也比较大。B.反复冻融法：由于在此过程中易使活性蛋白失活，故适用于提取非常稳定的蛋白质。
C.冷热交替法：绝大多数细胞被破坏，一般适用于从细菌或病毒中提取蛋白质。
D. 低渗裂解：是指无胞壁细胞在低渗溶液中通过渗透张力作用裂解的方法，常用于红细胞的裂解
3）SDS化学法：A.有机溶剂法：有些有机溶剂(如苯、甲苯等)可以改变细胞壁或膜的通透性，使内含物有选择性的渗透出来。B.表面活性剂：常用的有十二烷基磺酸钠、TritonX-100、去氧胆酸钠等。 C.酶解法：必须根据细胞的结构和化学组成选择适当的酶
15.分离方法：1）利用溶解度的差异分离：A.盐析法。B.有机溶剂沉淀法：有机溶剂能降低溶液的介电常数，从而增加蛋白质分子之间不同电荷的引力，导致溶解度的降低；另外有机溶剂与水的作用，能破坏蛋白质的水化膜，使蛋白质在一定浓度的有机溶剂中沉淀析出。
C.温度。2）根据分子量的不同分离：.A.透析和超滤；B.平衡离心法；
C.凝胶过滤。 3）根据电荷的不同分离：A.电泳； B.离子交换层析。
4）亲和层析。
16.分配定律：1）假设有两种互不混溶的溶剂S和M，将A物质溶于一定量的S溶剂中，再加入一定量的M溶剂；2）A 物质在两相
中相互扩散；3）A物质在两相中达到了平衡(在同一时间内，进出两相的A物质的分子数完全相等)时，其分配系数为常数K=CAS/ CAM。
17.塔板理论的要点：1）分配层析柱象分馏柱一样可以分成很多层，每层为一理论塔相对地化学稳定，对pH和温度变化较稳定，在很多溶剂中不溶，是非离子型的；2）没有吸附和电渗作用. 通过改变浓度和交联度，可以控制孔径变化在极广泛的范围，并且制备凝胶的重复性好；3）由于纯度高及不溶性，还适合于少量样品的制备，不致污染样品。18塔板制备：1）原料：丙烯酰胺(Acr)和亚甲基双丙烯酰胺(Bis)；2）催化剂：引发剂（过硫酸铵, (NH4)2S2O8），加速剂（四甲基乙二胺,
TEMED；3）化学聚合和光聚合两种；4）凝胶浓度和交联度；5）不连续系统制备。
19踏板可能出现的问题及解决措施：1）条带过淡：上样量不足；染色操作错误；2）条带丢失：电泳时间过长，小条带已跑出胶；胶浓度不正确。3）多余条带：还原剂过量。4）条带模糊：被降解; 药品不纯。5）条带位置错误：被降解；上样量过大；电泳条件不正确；上样前加热不够；还原剂失效。6）条带不整齐：孔径不均一；胶聚合太快，不均一；可能有气泡；样品离子强度过大。7）条带扩散：电压过低，电泳时间过长；缓冲液离子强度太低；样品本身结构不均一。8）条带弯曲：电泳过程产热过多；染色、固定时间短。9）拖尾：样品溶解不7
充分；胶板不干净。
20.蛋白质的浓缩：1）超滤法；2）冷冻干燥法；3）吸收法：聚乙二醇 (PEG)、蔗糖、凝胶等； 4）沉淀法。
五、酵母细胞双杂交
1.研究蛋白质相互作用的常用方法：1）酵母双杂交；2）亲和层析；3）免疫共沉淀；4）蛋白质交联；5）基于GFP的细胞内蛋白质相互作用的研究方法；6）噬菌体显示系统筛选。
2.酵母双杂交系统的基本原理：转录激活因子上有DNA结合结构域(BD)与转录激活结构域(AD);单独的BD虽然能和启动子结合,但不能
分子生物学试题(附答案)
蛋白质的生物合成 (一)名词解释 1．翻译 2．密码子 3．密码的简并性 4．同义密码子 5．变偶假说 6．移码突变 7．同功受体 8．多核糖体 (二)问答题 1．参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些?它们具有什么功能? 2．遗传密码是如何破译的? 3．遗传密码有什么特点? 4．简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。 5．简述核糖体的活性中心的二位点模型及三位点模型的内容。 6．氨基酸在蛋白质合成过程中是怎样被活化的? 7．简述蛋白质生物合成过程。 8．蛋白质合成中如何保证其翻译的正确性? 9．原核细胞和真核细胞在合成蛋白质的起始过程有什么区别。 10．蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容? 11．蛋白质的高级结构是怎样形成的? 12．真核细胞与原核细胞核糖体组成有什么不同?如何证明核糖体是蛋白质的合成场所? 13. 已知一种突变的噬菌体蛋白是由于单个核苷酸插入引起的移码突变的，将正常的蛋白质和突变体蛋白质用胰蛋白酶消化后，进行指纹图分析。结果发现只有一个肽段的差异，测得其基酸顺序如下： 正常肽段 Met-Val-Cys-Val-Arg 突变体肽段 Met-Ala-Met-Arg （1）什么核苷酸插入到什么地方导致了氨基酸顺序的改变？ （2）推导出编码正常肽段和突变体肽段的核苷酸序列. 提示：有关氨基酸的简并密码分别为 Val: GUU GUC GUA GUGArg: CGU CGC CGA CG AGA AGG Cys: UGU UGCAla: GCU GCC GCA CGC 14. 试列表比较核酸与蛋白质的结构。 15. 试比较原核生物与真核生物的翻译。 (三)填空题 1．蛋白质的生物合成是以___________为模板，以___________为原料直接供体，以_________为合成杨所。 2．生物界共有______________个密码子，其中___________个为氨基酸编码，起始密码子为_________；终止密码子为_______、__________、____________。 3．原核生物的起始tRNA以___________表示，真核生物的起始tRNA以___________表示，延伸中的甲硫氨酰tRNA以__________表示。
分子生物学试题及答案(整理版)
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（IF-2）和（IF-3）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（ S2）开始，无G时转录从（ S1）开始。
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第一章遗传物质 一、填空题 1．病毒ΦX174及M13的遗传物质都是＿＿＿＿＿。 答案：1．单链DNA 2．AIDS病毒的遗传物质是＿＿＿＿＿。 答案：2．单链RNA 3．X射线分析证明一个完整的DNA螺旋延伸长度为＿＿＿＿＿。 答案：3．4nm 4. ＿＿＿＿＿键负责维持A-T间(或G-C间)的亲和力。 答案：4.氢 5．天然存在的DNA分子形式为右手＿＿＿＿＿型螺旋。 答案：5．B 二、选择题(单选或多选) 1．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是( )。 A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂 B．DNA突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能 D．DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子 E．真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代 答案：1．C 2．1953年Watson和Crick提出( )。 A．多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA的复制是半保留的，常常形成亲本—子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 答案：2.A 3．DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。 以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述?( ) A．哺乳动物DNA约为45C，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B．依赖于A-T含量，因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少 C．是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D．可通过碱基在260nm的特征吸收峰的改变来确定． E．就是单链发生断裂(磷酸二酯键断裂)时的温度 答案：3.CD 4．DNA的变性( )。 A．包括双螺旋的解链B．可以由低温产生 C．是可逆的 D. 是磷酸二酯键的断裂 E．包括氢键的断裂
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第三章基因表达与基因表达的调控 1.关于分解物阻遏的作用机制，说法正确的是 A.葡萄糖缺乏时，cAMP浓度低 B.葡萄糖缺乏时，CAP浓度低 C.葡萄糖缺乏时，cAMP不能与CAP形成复合物 D.葡萄糖缺乏时，cAMP-CAP复合物浓度高 E.葡萄糖缺乏时，cAMP-CAP复合物失去DNA结合能力 2.关于加尾修饰，说法错误的是 A.组蛋白的成熟mRNA无需加poly A尾 B.加尾信号包括AAUAAA和富含GU的序列 C.剪切过程需要多种蛋白质因子的辅助 D.加尾不需模板 E.多聚A形成的过程是缓慢、匀速的反应 3.关于操纵子的说法，正确的是 A.几个串联的结构基因由一个启动子控制 B.几个串联的结构基因分别由不同的启动子控制 C.一个结构基因由不同的启动子控制 D.转录生成单顺反子RNA E.以正性调控为主 4.mRNA在蛋白质合成中的功能是 A.运输遗传密码所对应的氨基酸 B.与蛋白质结合，提供合成场所 C.与帽子结合蛋白结合启动翻译 D.由三联体密码指引氨基酸的排列顺序 E.通过剪切因子切除poly A尾调控翻译效率 5.关于基因表达调控的说法错误的是 A.转录起始是调控基因表达的关键 B.环境因素影响管家基因的表达 C.在发育分化和适应环境上有重要意义 D.表现为基因表达的时间特异性和空间特异性 E.真核生物的基因表达调控较原核生物复杂的多 6. 翻译的实质是 A.将4种脱氧核糖核苷酸的排列顺序转换为4种核糖核苷酸的排列顺序 B.将4种核糖核苷酸的排列顺序转换为4种脱氧核糖核苷酸的排列顺序 C.将4种脱氧核糖核苷酸的排列顺序转换为20种氨基酸的排列顺序 D.将4种核糖核苷酸的排列顺序转换为20种氨基酸的排列顺序 E.将蛋白质一级结构的信息转换为空间结构的信息 7. 关于加帽修饰，说法正确的是 A.snRNA不能被加帽 B.由加帽酶催化5' 端加入7甲基鸟苷酸 C.加帽酶可以与RNA聚合酶I、II、III相结合 D.hnRNA转录终止后才开始加帽 E.RNA聚合酶发生磷酸化后，使加帽酶与之脱离 8. 特异转录因子不能够 A.结合RNA聚合酶 B.结合基础转录因子 C.结合其他特异转录因子 D.结合转录非核心元件
分子生物学试题及答案(整理版)3篇
分子生物学试题及答案(整理版) 第一篇：DNA结构与特性 1. DNA的全称是什么？ DNA的全称是脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleic acid）。 2. DNA是由哪些基本单元组成的？ DNA由四种不同的碱基组成，称为腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、鸟嘌呤（G）和胞嘧啶（C）。 3. DNA含有一条还是两条互补的链？ DNA是由两条互补的链组成的，它们以双螺旋形式交织在一起。 4. DNA的双螺旋结构是由哪些部分组成的？ DNA的双螺旋结构是由磷酸基团、脱氧核糖糖基和碱基三部分组成的。 5. DNA的碱基配对方式是什么？每个碱基都能与哪些其他碱基配对？ DNA的碱基配对方式是A-T、C-G，即腺嘌呤与胸腺嘧啶互补，鸟嘌呤与胞嘧啶互补。 6. DNA的链方向是什么？ DNA的两条链是相对方向相反的，即它们是“头对头”地排列在一起的。 7. DNA的复制方式是什么？该过程用哪种酶？ DNA的复制方式是半保留复制，即每条新合成的DNA链都包含一个旧链和一个新链。该过程用DNA聚合酶完成。 8. DNA序列编码的是什么？
DNA序列编码的是生物体遗传信息的载体，包括基因和非编码区域。 9. DNA在哪些生物体中被发现？ DNA存在于所有有细胞核和一些原核生物的细胞中。 10. DNA是如何被发现的？ DNA是由克里克和沃森在1953年通过X射线晶体学研究得到的。这项研究揭示了DNA的双螺旋结构，正式开启了分子生物学的新篇章。 第二篇：基因表达调控 1. 什么是基因表达？ 基因表达是指基因信息从DNA转录为RNA，再转化为蛋白质的过程。 2. 基因表达是否受到调控？为什么？ 基因表达是受到调控的。因为不同的细胞类型和不同的时期需要不同的基因表达模式来维持生命活动。 3. 给出三种调控基因表达的方式。 调控基因表达的方式有：转录水平调控、RNA后转录水平调节和转化水平调控。 4. 什么是启动子？在哪里找到它？ 启动子是一段DNA序列，位于转录开始位点上游，通常是几百个碱基对。启动子上结合一些转录因子，这些转录因子协同作用，使得RNA聚合酶能够起始转录。 5. 什么是转录因子？ 转录因子是一种能够结合在DNA序列上的蛋白质，它们调控基因表达的过程中起到了至关重要的作用。 6. 请解释miRNA的作用原理。 miRNA是一种短RNA，能够结合靶标mRNA，从而导致
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一．单选题 1. 有关DNA链的描述哪条不对 B A. DNA是由很多脱氧单核苷酸形成的多核苷酸 B. DNA5’端是-OH基，3’端是磷酸 C. 单核苷酸之间通过磷酸二酯键相连 D. DNA的一级结构是指dAMP,dGMP,dCMP,dTMP的排列 2 多核糖体中每一核糖体是 C A 呈解离状态 B 合成一种多肽链 C 合成多种多肽链 D 由mRNA3′端向5′移动 3 识别转录起始点的是 D A ρ因子 B 核心酶 C 聚合酶α亚基 D σ因子 4 真核生物中tRNA和5S rRNA的转录由下列哪一种酶催化 D A RNA聚合酶Ⅰ B 逆转录酶 C RNA聚合酶Ⅱ D RNA聚合酶Ⅲ 5 AUC为异亮氨酸的遗传密码，在tRNA中其相应的反密码应为 C A UAG
B TAG C GAU D GAT 6 原核生物中DNA指导的RNA聚合酶由数个亚单位组成，其核心酶的组成是 A A α 2ββ′ B α 2ββ′σ C α 2β′σ D α 2βσ E αββ′ 7 真核生物转录生成的mRNA前体的加工过程不包括 C A 5′末端加帽 B 3′末端加多聚A尾 C 磷酸化修饰 D 剪接去除内含子并连接外显子 8 转录与复制有许多相似之处，但不包括 D A 均以DNA为模板 B 所产生的新链，核苷酸之间的连接键均为磷酸二酯键 C 所用的酶均为依赖DNA的聚合酶 D 可同时合成两条互补链 E 在转录和复制过程中，遵循碱基配对的原则 9 RNA聚合酶Ⅱ催化生成之产物是A A mRNA
B tRNA及5SrRNA C 18S，28S，5.8S及5SrRNA D 18S，28S，及5.8SrRNA 10 操纵子的基因表达调节系统属于B A 复制水平调节 B 转录水平调节 C 翻译水平调节 D 翻译后水平调节 11 乳糖、阿拉伯糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是 D A 与启动子结合 B 与DNA结合影响模板活性 C 与RNA聚合酶结合影响其活性 D 与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNA E 与操纵基因结合 12 有关理想质粒载体的特点，正确的是 B A 为线性单链DNA B 含有多种限制酶的单一切点 C 含有同一限制酶的多个切点 D 其复制受宿主控制 13 以下关于顺式作用元件的叙述哪项是错误的 D
分子生物考试题库及答案
分子生物考试题库及答案 第一部分：选择题 1. DNA的完整结构是由下列哪个组成的？ A. 核苷酸 B. 蛋白质 C. 糖类 D. 氨基酸 答案：A 2. 发生在细胞质中的翻译过程是将DNA信息转化为什么？ A. DNA B. RNA C. 蛋白质 D. 碳水化合物 答案：C 3. 下列哪个是DNA含量最高的？ A. 原核细胞 B. 真核细胞
C. 叶绿体 D. 线粒体 答案：B 4. 下列哪个是RNA分子中包含的核苷酸？ A. A、C、G、U B. A、C、G、T C. A、C、G、C D. A、C、G、A 答案：A 5. RNA的主要功能是什么？ A. 储存遗传信息 B. 构成细胞膜 C. 参与蛋白质合成 D. 调节细胞分裂 答案：C 第二部分：填空题 1. DNA双螺旋结构是由两个互补的_________链组成。
答案：互补的 2. DNA中的碱基配对规则是A和_____结合，C和_____结合。 答案：T，G 3. DNA复制发生在细胞的_______期。 答案：S期 4. RNA的主要类型包括mRNA、_______和rRNA。 答案：tRNA 5. RNA聚合酶是负责在转录过程中合成_____分子的酶。 答案：RNA 第三部分：简答题 1. 简述DNA复制的过程。 答案：DNA复制是指在细胞分裂过程中，DNA分子通过在细胞内复制自身来传递遗传信息的过程。复制的过程包括解旋、合成和连接三个步骤。解旋是指DNA双螺旋结构解开形成两条单链。合成是指DNA聚合酶按照碱基配对原则，在原有模板链上合成新的互补链。连接是指两条新复制的DNA链重新连在一起形成完整的DNA分子。 2. 简述转录的过程。 答案：转录是指在细胞质中，RNA聚合酶根据DNA模板合成RNA 分子的过程。转录过程分为起始、延伸和终止三个阶段。起始时，
河北农业大学分子生物学题库(带答案)
一、名词解释 1.中心法则（Central Dogma）：是指遗传信息从DNA传递 给RNA，再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从DNA传递给DNA，即完成DNA的复制过程。 2.反向重复序列（IR）：存在于双链核酸分子中排列顺序方 向相反的一段核苷酸序列。 3.DNA链的呼吸作用：配对碱基之间的氢键不但处于断裂 和再生的平衡状态中，氢键上的氢原子还能和水发生交换4.Cot曲线（Cot1/2）：DNA 复性通常符合Cot 曲线(Cot curve) 。Cot 曲线标出了DNA复性的部分(1-C/C0)和横轴上的Cot 值。 5.DNA变性，复性：核酸的变性是指核酸双螺旋区的氢键 断裂，变成单链结构的过程。变性DNA在适当的条件下，两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构，这一过程称为复性。 6.DNA的熔解温度（TM）：最大吸光值一半时的温度。 7.基因组（Genome）：生物细胞中单套染色体的所含DNA 序列的全部组成。 8.C-值矛盾：从总体上说，生物基因组的大小同生物在 进化上所处地位的高低无关，这种现象称为C值矛盾9.基因家族（gene family)：一组功能相似且核苷酸序列具有 同源性的基因．可能由某一共同祖先基因(ancestral gene)经重复(duplication)和突变产生。 10.基因簇：基因家族中来源相同、结构相似和功能相关的基 因在染色体上彼此紧邻所构成的串联重复单位。 11.割裂基因，Intron 内元，Economic外元：真核生物基因 的编码序列是不连续的而是被若干个非编码区(内含子)分割。 12.卫星DNA：真核细胞染色体具有的高度重复核苷酸序列 的DNA。总量可占全部DNA的10%以上，主要存在于染色体的着丝粒区域，通常不被转录。因其碱基组成中GC 含量少，具有不同的浮力密度，在氯化铯密度梯度离心后呈现与大多数DNA有差别的“卫星”带而得名。 13.半保留复制：DNA复制时以双链中的每一条单链作为模 板，分别合成一条互补新链，重新形成的双链中各保留一条原有DNA单链。 14.冈崎片段：DNA不连续复制产生的长约1～2kb的片段， 随后共价连接成完整的单链。 15.复制单位（replicon）：作为含有一个复制起始点的独立复 制单元的一个完整DNA分子或DNA分子上的某段区域。 16.复制体（replisome）：DNA复制时，复制叉上结合的由多 种与复制有关的酶和辅助因子组成的复合体。 17.先导链，后随链：在DNA复制过程中，以复制叉向前 移动的方向为标准，一条模板链是3′→5′走向，在其上DNA能以5′→3′方向连续合成，成为前导链；另一 条模板链，是5′→3′走向，在其上也是从5′→3′方向合成，但是与复制叉移动的方向正好相反，所以随着复制叉的移动，形成许多不连续的片段。最后这些片段被连成一条完整的DNA链。该链称之为后随链。 18.突变（mutation）：基因的结构发生改变而导致细胞、病 毒或微生物的基因型发生稳定的、可遗传的变化的过程。 19.移码突变（frame-shift mutation）：在基因编码区，核苷 酸插入或缺失导致三联体密码子阅读方式的改变，从而使该基因的相应编码序列发生改变。 20.无义突变（nonsense mutation）：由于某个碱基的改变使 代表某种氨基酸的密码子突变为终止密码子，从而使肽链合成提前终止。错义突变（missense mutation）：基因中的碱基突变导致翻译产物中相应位置形成错误的氨基酸残基，其结果是一个不同的氨基酸参入到多肽链的相应位置。同义突变（samesense mutation）：编码同一氨基酸的密码子的核苷酸改变但不改变编码的氨基酸，即不改变基因产物的突变。 21.组成型突变（constitutitive mutation）：组成型突变 const itut ive mutat ion 与酶的合成有关的调节基因的一种突变。即原来酶的合成量受调节基因调节的诱导酶或阻遏酶，由于调节基因发生变异，酶的合成变为组成型（不管生长条件如何，酶的合成量总是恒定的）的一种现象。 22.突变热点（Mutation Hotpoint）：基因组DNA的一个片段， 对自发的或某种特别诱变剂作用下的突变表现出较高的倾向性 23.增変基因（mutator gene）：）能够增加自发突变率的基 因。 24.限制-修饰系统（restriction and modification）：原核细胞 保护自己，选择性降解外源DNA的一种机制。包括两类酶，即限制性核酸内切酶和DNA甲基化酶。前者负责降解进入原核细胞的外源DNA，后者则对细胞自身的DNA 进行甲基化，从而保护细胞的DNA，使其不被细胞内的限制性核酸内切酶降解。 25.光裂合酶修复（photo reactivation Repair）：DNA损伤修 复的一种方式，由DNA光裂合酶(photolyase)催化。 该酶需要光(400－700nm)才能激活，它能切除嘧啶二聚体之间的连键(C-C键)，从而修复由紫外照射而造成的损伤。存在于各种生物细胞中，人体中也存在该过程。 26.切除修复（Excision Repair）：切除DNA一条链上受损 伤片段，以其互补链为模板合成正常DNA片段修复DNA 损伤。 27.重组修复（recombinative-repair）：DNA复制后修复。必 须通过DNA复制过程中两条DNA链的重组交换而完成DNA的修复。
(完整版)分子生物学习题与答案
第0章绪论 一、名词解释 1.分子生物学 2.单克隆抗体 二、填空 1．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 三、是非题 1、20世纪60年代，Nirenberg建立了大肠杆菌无细胞蛋白合成体系。研究结果发现poly(U)指导了多聚苯丙氨酸的合成，poly(G)指导甘氨酸的合成。（×） 四、简答题 1. 分子生物学的概念是什么？ 2. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？ 3. 分子生物学研究内容有哪些方面？ 4. 分子生物学发展前景如何？ 5. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？ 6．简述分子生物学发展史中的三大理论发现和三大技术发明。 7. 简述分子生物学的发展历程。 8. 二十一世纪生物学的新热点及领域是什么？ 9. 21世纪是生命科学的世纪。20世纪后叶分子生物学的突破性成就，使生命科学在自然科学中的位置起了革命性的变化。试阐述分子生物学研究领域的三大基本原则，三大支撑学科和研究的三大主要领域？ 答案： 一、名词解释 1.分子生物学：分子生物学就是研究生物大分子之间相互关系和作用的一门学科，而生物大分子主要是指基因和蛋白质两大类；分子生物学以遗传学、生物化学、细胞生物学等学科为基础，从分子水平上对生物体的多种生命现象进行研究。
2.单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 二、填空 1.结构分子生物学，基因表达与调控，DNA重组技术 三、是非题 四、简答题 1. 分子生物学的概念是什么？ 答案： 有人把它定义得很广：从分子的形式来研究生物现象的学科。但是这个定义使分子生物学难以和生物化学区分开来。另一个定义要严格一些，因此更加有用：从分子水平来研究基因结构和功能。从分子角度来解释基因的结构和活性是本书的主要内容。 2. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？ 分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴边缘学科，它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象，是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。狭义：偏重于核酸的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调节控制等过程，其中也涉及与这些过程有关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会，也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。所谓在分子水平上研究生命的本质主要是指对遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明，从而为利用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。这里的分子水平指的是那些携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白质等生物大分子。这些生物大分子均具有较大的分子量，由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息，并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统，由此构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统。阐明这些复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务。 3. 分子生物学主要包含以下三部分研究内容：A.核酸的分子生物学，核酸的分子生物学研究核酸的结构及其功能。由于核酸的主要作用是携带和传递遗传信息，因此分子遗传学（moleculargenetics）是其主要组成部分。由于50年代以来
分子生物学习题及答案
分子生物学 1.插入或缺失碱基对会引起移码突变,下列哪种化合物最容易造成这种突变()。 A. 吖啶衍生物 B. 5-溴尿嘧啶 C. 咪唑硫嘌呤 D. 乙基乙磺酸 正确答案: A 2.产生移码突变可能是由于碱基对的(): A. 转换 B. 颠换 C. 水解 D. 插入 正确答案: D 3.碱基切除修复中不需要的酶是() A. DNA聚合酶 B. 磷酸二酯酶 C. 核酸外切酶 D. 连接酶 正确答案: B 4.关于DNA的修复,下列描述中,哪些是不正确的?() A. UV照射可以引起相邻胸腺嘧啶间的交联 B. DNA聚合酶III参与修复核苷酸切除修复系统行程的单链缺口 C. DNA的修复的过程中需要DNA连接酶 D. 哺乳动物细胞可以用不同的糖基化酶来除去特异性的损伤碱基 正确答案: B 5.镰刀形红细胞贫血病是异常血红蛋白纯合子基因的临床表现。β-链变异是由下列哪种突变造成的(): A. 染色体臂交换 B. 单核苷酸插入 C. 染色体不分离 D. 碱基替换 正确答案: D 6.在细胞对DNA损伤做出的响应中,哪一种方式可能导致高的变异率?() A. 光复活修复 B. 碱基切除修复 C. 重组修复 D. 跨越合成 正确答案: D 7.下列哪种修复方式,不能从根本上消除DNA的结构损伤?() A. 核苷酸切除修复 B. 错配修复 C. 光复活修复 D. 重组修复 正确答案: D 8.紫外线照射对DNA分子的损伤主要是(): A. 形成共价连接的嘧啶二聚体 B. 碱基替换 C. 磷酸酯键的断裂 D. 碱基丢失 正确答案: A 9.紫外线照射引起DNA最常见的损伤形式是生成胸腺嘧啶二聚体。在下列关于DNA分子结构这种变化的叙述中,哪项是正确的?() A. 是相对的两条互补核苷酸链间胸腺嘧啶之间的共价连接 B. 可由核苷酸切除修复系统在内的有关酶系统进行修复 C. 是由胸腺嘧啶二聚体酶催化生成的 D. 不会影响DNA复制
分子生物学试题库汇总
分子生物学试题库汇总 第2章染色体与DNA 名词解释 原癌基因是细胞内与细胞增殖相关的正常基因，是维持机体正常生命活动所必须的，进化上高度保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，会使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。 复制是以亲代DNA或RNA为模板，在一系列酶的作用下，根据碱基配对的原则生成与亲代相同的子代DNA或RNA 的过程。 转座子（transposon或transposable element）是位于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位，包括插入序列和复合转座子。
半保留复制是以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合 成子代DNA的过程。新形成的子代DNA中，一条链来自亲 代DNA，而另一条链是新合成的。 染色体是遗传信息的载体，由DNA、RNA和蛋白质构成，其形态和数目具有种系的特性。在细胞间期核中，以染色质形式存在。在细胞分裂时，染色质丝经过螺旋化、折叠、包装成为染色体，为显微镜下可见的具有不同形状的小体。 核小体是构成真核生物染色体的基本单位，是DNA和蛋 白质构成的紧密结构形式，包括大约200bp的DNA和9个组 蛋白分子构成的致密结构。 填空题 1.真核细胞核小体的组成是DNA和蛋白质。 2.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片段发生连接， 这是因为天然染色体末端存在端粒结构。 3.在聚合酶链反应中，除了需要模板DNA外，还需加入 引物、DNA聚合酶、dNTP和镁离子。
4.引起DNA损伤的因素有自发因素、物理因素和化学因素。 5.DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶和单链DNA结合蛋白。 6.参与DNA切除修复的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶和特异的核酸内切酶。 7.在真核生物中DNA复制的主要酶是DNA聚合酶δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。 8.端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。 9.DNA的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复和DNA的直接修复。 选择题 1.真核生物复制起点的特征包括（B）A.富含G-C区B.富含A-T区C.Z-DNAD.无明显特征。 2.插入序列（IS）编码（A）A.转座酶B.逆转录酶C.DNA 合成酶D.核糖核酸酶。
现代分子生物学试题库
核酸结构与功能 一、填空题 1．病毒ΦX174及M13(de)遗传物质都是单链DNA . 2．AIDS病毒(de)遗传物质是单链RNA. 3．X射线分析证明一个完整(de)DNA螺旋延伸长度为 3.4nm . 4．氢键负责维持A-T间（或G-C间）(de)亲和力 5．天然存在(de)DNA分子形式为右手B型螺旋. 二、选择题（单选或多选） 1．证明DNA是遗传物质(de)两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内(de)毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌.这两个实验中主要(de)论点证据是（C ）. A．从被感染(de)生物体内重新分离得到DNA作为疾病(de)致病剂 B．DNA突变导致毒性丧失 C．生物体吸收(de)外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA是不能在生物体间转移(de),因此它一定是一种非常保守(de)分子 E．真核心生物、原核生物、病毒(de)DNA能相互混合并彼此替代 2．1953年Watson和Crick提出（ A ）. A．多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA(de)复制是半保留(de),常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C．三个连续(de)核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3．DNA双螺旋(de)解链或变性打断了互补碱基间(de)氢键,并因此改变了它们(de)光吸收特性.以下哪些是对DNA(de)解链温度(de)正确描述（ CD ） A．哺乳动物DNA约为45℃,因此发烧时体温高于42℃是十分危险(de) B．依赖于A-T含量,因为A-T含量越高则双链分开所需要(de)能量越少 C．是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围(de)中间值 D．可通过碱基在260nm(de)特征吸收峰(de)改变来确定 E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时(de)温度 4．DNA(de)变性（ACE ）.A．包括双螺旋(de)解链
分子生物学题库
分子生物学备选考题 A.增强基因表达 C.表达水平不变 4、下列序列中的哪一个可能是 () 3、真核生物基因的TATA box 从 TATAAAT 突变成 AATAAAT 后将：( ) B.减弱基因表达 D.都不对 mRNA : 5-AUAGGCGAU - 3的对应基因序列 A. 3-UAUCCGCUA - 5 B. 5—ATCGCCTAT —3' C. 5- TATCCGCTA —3， 5' D. 3-TATCCGCTA - 5、用实验证实DNA 半保留复制的学者是 ( ) A. Watson 和 Crick B. Kornberg C. Meselson 和 Stahl D. Nierenberg 6 DNA 连接酶在下列哪一个过程中是不需要的？ ( ) A. DNA 复制J B. DNA 彳修复 C. 基因工程制备重组DNA D. DNA 断裂和修饰 7、tRNA 和5s rRNA 是由真核生物哪种酶催化转录产生的? ( ) A. RNA 聚合酶I B.逆转录酶 C. RNA 聚合酶川 D.RNA 聚合酉每II 8、 真核生物的DNA 聚合酶(DNApol) ( ) A.有DNA-pol a 、B 、丫三种 B.由同一种DNA-pol 催化前导链和后随链生成 C. DNA-pol a 是校读、修复的酶 D. DNA-pol 丫是线粒体复制的酶 9、p 因子的功能是 B .增加RNA 合成速率 D.释放结合在启动子上的RNA 聚合酶 选择题 1、卫星DNA 是一类： A. GC 丰富的DNA 序歹 C.高度重复的DNA 序列 2、DNA 的变性： A.双螺旋解链，氢键的断裂 C.磷酸二酯键的断裂 () B.中度重复的DNA 序列 D .不编码的RNA 序列 () B.可以由低温产生 D.是不可逆的 A.在启动区域结合阻遏物 C.参加转录终止过程
（完整版）分子生物学》试题及答案
（完整版）分子生物学》试题及答案 《分子生物学》考试试题B 课程号：66000360 考试方式：闭卷 考试时间： 一、名词解释（共10题，每题2分，共20分） 1. SD 序列 2. 重叠基因 3．ρ因子 4．hnRNA 5. 冈崎片段、 6. 复制叉(replication fork) 7. 反密码子(anticodon)： 8. 同功tRNA 9. 模板链(template strand) 10. 抑癌基因 二、填空题（共20空，每空1分，共20分） 1.原核基因启动子上游有三个短的保守序列,它们分别为____和__区. 2.复合转座子有三个主要的结构域分别为______、______、________。 3.原核生物的核糖体由_____小亚基和_____大亚基组成，真核生物核糖糖体由_____小亚基和_______大亚基组成。 4.生物界共有___个密码子，其中__ 个为氨基酸编码，起始密码子为__ _______；终止密码子为_______、__________、____________。 5. DNA生物合成的方向是_______，冈奇片段合成方向是_______。 6.在细菌细胞中，独立于染色体之外的遗传因子叫_______。它是一 种_______状双链DNA，在基因工程中，它做为_______。 三．判断题（共5题，每题2分，共10分） 1.原核生物DNA的合成是单点起始，真核生物为多点起始。( )
2.在DNA生物合成中，半保留复制与半不连续复制指相同概念。( ) 3.大肠杆菌核糖体大亚基必须在小亚基存在时才能与mRNA结合。( ) 4.密码子在mRNA上的阅读方向为5’→ 3’。( ) 5.DNA复制时，前导链的合成方向为5’→ 3’，后随链的合成方向也是5’→ 3’。（） 四、简答题（共6题，每题5分，共30分） 1.简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。 2.蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容? 3.简述人类基因组计划的主要任务。 4.简述现代分子生物学的四大研究热点。 5.何谓转座子?简述简单转座子发生转座作用的机理。 6.简述大肠杆菌乳糖操纵子与色氨酸操纵子在阻遏调控机制上有那些区别？ 四、问答题（共2题，共20分） 1.叙述蛋白质生物合成的主要过程。（10分） 2.请叙述真核基因的表达调控主要发生在那些环节？分别是怎样进行 的？（10分） 一、名词解释（共10题，每题2分，共20分） 1. SD 序列：起始密码子AUG上7-12bp处的一段长度为4-6bp 的富含 嘌呤地序列，原核生物翻译起始时，SD序列与16s r RNA 反向互补起始翻译。 2. 重叠基因：是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列,或是指一段 DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。 3．ρ因子：一个相对分子量为2.0×105的六聚体蛋白，能水解各种核苷三磷酸，促使新生的RNA链从三元复合物上解离。 4．hnRNA：核内不均一RNA，mRNA的前提，是原初转炉产物。
分子生物学题库
分子生物学题库 一、论述乳糖操纵子的调节机制？ 1、阻遏蛋白的负性调节： 当没有乳糖时，lac操纵子处于阻遏状态。此时，I序列在PI 启动序列作用下表达的Lac阻遏蛋白与O序列结合，阻碍RNA 聚合酶与P序列结合，抑制转录启动。 当有乳糖存在时，lac操纵子即可被诱导。乳糖经透酶催化，转运进入细胞，在经β-半乳糖苷酶催化，转变为半乳糖。半乳糖作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白，使蛋白质构象变化，导致阻遏蛋白与O序列解离，发生转录。基因开放。 2、CAP的正性调节： 葡萄糖存在时，cAMP浓度降低，cAMP与CAP结合受阻。lac 操纵子表达下降。 如果培养基中葡萄糖的含量下降，cAMP浓度增加，cAMP与CAP形成复合物并与lac启动序列结合，促进转录进行，表达产物增加。 3.协同调节 Lac阻遏蛋白负性调节与CAP正性调节两种机制协调合作： 阻遏蛋白封闭转录时，CAP不发挥作用，如没有CAP加强转录，即使阻遏蛋白从操纵序列上解聚仍无转录活性。 葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌优先利用葡萄糖，葡萄糖可降低cAMP浓度，阻碍其与CAP结合从而抑制转录。 结论：lac操纵子强的诱导作用既需要乳糖又需缺乏葡萄糖。
（另外补充）乳糖操纵子结构 乳糖操纵子是个弱启动子，包括３个结构基因：Ｚ、Ｙ和Ａ 2.讨论trp操纵子的转录减弱机制？ 大肠杆菌色氨酸操纵子就是一个阻遏操纵子 (1)当细胞中没有色氨酸时，阻遏蛋白不能与操纵序列结合，因此trp操纵子处于开放状态，结构基因可以表达。 (2)当细胞中有足够的色氨酸时，色氨酸作为共阻遏物，与阻遏蛋白形成复合物，并与操纵序列结合，使trp操纵子关闭，用于合成色氨酸的各种酶的表达停止。 三、α互补筛选（蓝白筛选）原理？（是一种标志补救选择方法）p431 在M13的基因间隔区插入了E.coli的一段调节基因及lacZ的N端146个氨基酸残基编码基因，其编码产物为β-半乳糖苷酶的α片段。突变型E.coli宿主仅可表达该酶的ω片段。单独存在的α及ω片段均无β-半乳糖苷酶活性，只有上述携带有α片段基因的M13进入宿主细胞，宿主细胞才能同时表达α和ω片段，产生有活性的β-半乳糖苷酶活性，使特异性底物变为蓝色化合物，这就是α互补。 将外源基因的插入位点设计在lacZ基因内，则会干扰lacZ的表达，利用lac-菌株为转染或感染细胞，在含X-gal和IPTG 的培养基上生长时会出现白色菌落；如果在lacZ基因内无外源基因插入。则有lacZ表达，转化菌在同样条件下呈蓝色菌落。 四、重组DNA技术的基本原理及操作步骤 DNA克隆过程包括五大步骤：分、选、接、转、筛
医学分子生物学专业知识考核题库与答案
医学分子生物学专业知识考核题库 1.所有下列有关DNA聚合酶Ⅲ的叙述哪一项是错误的（）[单选题] * A.将脱氧核糖核苷酸加在已经存在DNA的5’-羟基端√ B.可将脱氧核糖核苷酸加在引物链上 C.需要四种不同的5’-三磷酸脱氧核糖核苷酸 D.可用双链DNA作为膜板 E.焦磷酸是反应的产物之一 2.目前，在体外进行PCR反应所用的催化酶通常是（）[单选题] * A.大肠杆菌(E).coli)DNA聚合酶Ⅰ B.大肠杆菌(E).coli)DNA聚合酶Ⅲ B.大肠杆菌(E).coli)DNA聚合酶Ⅲ C.大肠杆菌(E).coli)Klenow片段 D.T aq DNA聚合酶√ E.枯草杆菌DNA聚合酶Ⅰ 3.Klenow片段是指: （）[单选题] * A.polⅠ之大片段，无DNA聚合酶活性 B.polⅠ之小片段，有DNA聚合酶活性 C.polⅡ之大片段，有DNA聚合酶活性 D.polⅢ之大片段，有DNA聚合酶活性 E.polⅠ之大片段，有DNA聚合酶活性√ 4.参与DNA 复制的酶不包括：（）[单选题] *
A．DNA-pol B．RNA-pol√ C．连接酶 D．引物酶 E．拓扑异构酶 5.DNA连接酶在下列哪一个过程中是不需要的? （）[单选题] * A.DNA复制 B.制备重组DNA C.损伤DNA切除修复 D.冈崎片段的连接 E.转录√ 6.DNA复制时，DNA聚合酶将核苷酸加在引物或延伸中的核酸链的____上。（）[单选题] * A.5’端 B.3’端√ C.3’端或5’端 D.N端 E.C端 7.在DNA复制中，RNA引物的作用是（）[单选题] * A.使DNA聚合酶Ⅲ活化 B.使DNA双链解开 C.提供5’-P末端作合成新DNA链起点
生物化学与分子生物学试题及参考答案大全
A1页 线 封 密 三峡大学试卷 班级 姓名 学号 XXXX 年秋季学期 《生物化学与分子生物学（二）》课程考试试卷(A 卷) 参考答案及评分标准 注意：1、本试卷共 4页； 2、考试时间: 110 分钟； 3、姓名、学号必须写在指定地方； 一、名词解释 (每小题 2 分，共20 分) 1. 外显子(exon)：是真核生物基因的一部分，它在剪接(Splicing)后仍会被保存下来，并可在蛋白质生物合成过程 中被表达为蛋白质。 2.颠换：嘌呤被嘧啶替代或者相反。即：A-T 变成了T-A 或C-G 。 3.基因：基因是编码RNA 的DNA 序列，编码蛋白质的基因通过RNA 翻译产生蛋白质。 4. DNA 的C 值：单倍体基因组的DNA 总量是活生物的一个重要特征，我们称之为C 值（C-value)。 5.顺式作用元件：真核生物的转录上游调控序列统称为顺式作用元件，主要有TATA 盒、CG 盒、上游活化序列(酵母细胞)、增强子等。 6.反式作用因子：和顺式作用元件结合的蛋白质都有调控转录的作用,统称为反式作用因子。 7.SD 序列： Shine 及Dalgarno 等发现几乎所有原核生物mRNA 上都有一个5‘-AGGAGGU-3’序列，这个富含嘌呤序列与30S 亚基16SrRNA3‘端的富含嘧啶区序列5'-ACCUCCU-3'相互补，称之为SD 序列。 8.核酶（ribozyme ）:由核糖核酸和酶组成，其本质为RNA 或以RNA 为主含有蛋白质辅基的一类具有催化功能的物质，它与普通的酶有所区别：一般的酶是蛋白质，而核酶的主要功能成分为RNA ；有的核酶既是催化剂又是底物，随着反应的进行，自身也消失了。 9.操纵子（Operon ）：是基因表达的协调单位，由启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成。操纵基因受调节基因产物 的控制。 10.可诱导调节：指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下，由原来关闭的状态转变为工作状态，即在某些物质的诱导下使基因活化。 二、填空题(每小题 1分，共20 分) 1.点突变的两种类型包括 转换 和颠换 2.1962年，Watson 、Crick 及Wilkins 因共同发现DNA 双螺旋结构模型而获得诺贝尔奖生理/医学奖（中英文及顺序颠倒均对）。 3.核糖体亚基是由 rRNA 和 核蛋白 构成 4.原核生物DNA 合成时，先由引物酶合成 引物RNA ，再由 DNA 聚合酶Ⅲ 在其3′端合成DNA 链，然后由 DNA 聚合酶Ⅰ 切除引物并填补空隙，最后由 DNA 连接酶 连接成完整的链。 5.DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有 ___电荷 效应和 __分子筛 效应（顺序颠倒算对）。 6.肽链延伸过程需要 进位 、 成肽 、 转位 三步循环往复，每循环一次肽链延长1个氨基酸残基。 7.嘌呤霉素作为蛋白质生物合成抑制剂，其原理是作为氨基酰-tRNA 类似物，进位后引起未成熟肽链脱落；氯霉素抑制蛋白质生物合成的原理是抑制转肽酶、阻断延长。