DHA+与+EPA+合成超长链多不饱和脂肪酸的效率比较
【通讯作者】吴峥峥
ＤＨＡ与ＥＰＡ合成超长链多不饱和脂肪酸的效率比较
余 曼，陈 波，张瑞帆，吴峥峥
（四川省医学科学院?四川省人民医院眼科，四川成都６１００７２）
【摘要】 目的 比较在ＥＬＯＶＬ４蛋白酶催化作用下，ＤＨＡ和ＥＰＡ合成超长链多不饱和脂肪酸ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的效率。方法 构建携带ＥＬＯＶＬ４基因和绿色荧光蛋白的重组腺病毒，转入培养的ＰＣ１２细胞，通过ｑＲＴ－ＰＣＲ定量分析ＥＬＯＶＬ４基因的表达量，ＷＢ检测ＥＬＯＶＬ４蛋白的表达；１∶１加入ＤＨＡ和ＥＰＡ，孵育４８ｈ之后进行脂肪酸提取，通过气相质谱ＧＣ－ＭＳ分析超长链脂肪酸的成分。结果 ＧＣ－ＭＳ检测到分别用ＤＨＡ及ＥＰＡ处理后的ＰＣ１２＋Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４的细胞中有ｎ３ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的表达，３４：５ｎ３和３６：５ｎ３分别为０畅８５％和１畅１１％；３４：６ｎ３和３６：６ｎ３分别为０畅１６％和０畅２９％；ＥＰＡ所产生的五烯酸总和是ＤＨＡ所产生的六烯酸总和的４倍。结论 ＥＰＡ合成ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的效率远远高于ＤＨＡ，为患者提供更高比例的ＥＰＡ，而非ＤＨＡ，可能是治疗ＳＴＧＤ３疾病的方式之一。
【关键词】 二十二碳六烯酸；二十碳五烯酸；ＥＬＯＶＬ４基因；Ｓｔａｒｇａｒｄｔ病；超长链多不和脂肪酸【中图分类号】Ｒ７７ 【文献标志码】Ａ 【文章编号】１６７２－６１７０（２０１４）０５－００２４－０４
ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｂｅｔｗｅｅｎＤＨＡａｎｄＥＰＡｉｎｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｖｅｒｙｌｏｎｇｃｈａｉｎｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓ ＹＵＭａｎ，ＣＨＥＮＢｏ，ＺＨＡＮＧＲｕｉ－ｆａｎ，ＷＵＺｈｅｎｇ－ｚｈｅｎｇ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｐｈ－
ｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，ＳｉｃｈｕａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ＆ＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＰｅｏｐｌｅ摧ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００７２，Ｃｈｉｎａ）
【Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ】 ＷＵＺｈｅｎｇ－ｚｈｅｎｇ
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｂｅｔｗｅｅｎＤＨＡａｎｄＥＰＡｆｏｒｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｖｅｒｙｌｏｎｇｃｈａｉｎｐｏｌｙｕｎｓａｔ－ｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄ（ＶＬＣ－ＰＵＦＡｓ）ｕｎｄｅｒｃａｔａｌｙｔｉｃａｃｔｉｏｎｏｆＥＬＯＶＬ４ｐｒｏｔｅａｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＰＣ１２ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒａｎｓｄｕｃｅｄｗｉｔｈｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔａｄｅｎｏｖｉｒｕｓｔｙｐｅ５ｃａｒｒｙｉｎｇｍｏｕｓｅＥｌｏｖｌ４ａｎｄｇｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ（ＧＦＰ）．ＧＦＰ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇａｎｄｎｏｎ－ｔｒａｎｓｄｕｃｅｄｃｅｌｌｓｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｃｏｎｔｒｏｌｓ．ＥＬＯＶＬ４ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓｑｕａｎｔｉｆｉｅｄｂｙｑＲＴ－ＰＣＲｓ．ＥＬＯＶＬ４ｐｒｏｔｅｉｎｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ（ＷＢ）．ＴｈｅｔｒａｎｓｄｕｃｅｄｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＤＨＡｏｒＥＰＡ（１：１）．Ａｆｔｅｒ４８ｈｏｆｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ，ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄ，ａｎｄｆａｔｔｙａｃｉｄｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｓｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄｆｏｌｌｏｗｉｎｇｔｏｔａｌｌｉｐｉｄｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｆａｔｔｙａｃｉｄｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙｕｓｉｎｇａｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＧＣ－ＭＳ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ ＧＣ－
ＭＳａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅＤＨＡａｎｄＥＰＡｔｒｅａｔｅｄＰＣ１２＋
Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４ｈａｄｎ３ＶＬＣ－ＰＵＦＡｓｉｎｗｈｉｃｈ３４：５ｎ３ａｎｄ３６：５ｎ３ｗｅｒｅ０畅８５％ａｎｄ１畅１１％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；３４：６ｎ３ａｎｄ３６：６ｎ３ｗｅｒｅ０畅１６％ａｎｄ０畅２９％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｏｔａｌａｍｏｕｎｔｏｆｐｅｎｔａｅｎｏｉｃｓｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｆｒｏｍＥＰＡｗａｓａｌｍｏｓｔｆｏｕｒｔｉｍｅｓｔｈａｎｔｈａｔｏｆｈｅｘａｅｎｏｉｃｓｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｆｒｏｍＤＨＡ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＥｌｏｎｇａｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆＶＬＣ－ＰＵＦＡｓｆｒｏｍＥＰＡｉｓｍｕｃｈｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｆｒｏｍＤＨＡ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｄｉｅｔａｒｙｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｍｏｒｅＥＰＡｒａｔｈｅｒｔｈａｎＤＨＡｍａｙｐｒｏｖｉｄｅｓｏｍｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｂｅｎｅｆｉｔｓｆｏｒｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＳｔａｒｇａｒｄｔｓ摧ｄｉｓｅａｓｅ（ＳＴＧＤ３）．
【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】 Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｉｃａｃｉｄ（ＤＨＡ），Ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃａｃｉｄ（ＥＰＡ），ＥＬＯＶＬ４ｇｅｎｅ，Ｓｔａｒｇａｒｄｔｓ摧ｄｉｓｅａｓｅ，Ｖｅｒｙｌｏｎｇｃｈａｉｎｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄ（ＶＬＣ－ＰＵＦＡ）
以ＤＨＡ和ＥＰＡ为代表的ｎ３ＰＵＦＡｓ（ｐｏｌｙｕｎｓａｔ－ｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，ＰＵＦＡｓ）是指含有两个或两个以上双键的一类脂肪酸，通常按照第一个双键的位置把多不饱和脂肪酸分类，其中ｎ３ＰＵＦＡｓ，即从甲基端数第１个双键的位置在第３碳位的多不饱和脂肪酸，如二十二碳六烯酸（２２：６ｎ３，ＤＨＡ）和二十碳五烯酸（２０：５ｎ３，ＥＰＡ）。在哺乳动物神经系统中，ｎ３ＰＵＦＡｓ不但是重要的结构组分，而且是重要的营养
因子［１］
。ＤＨＡ被认为是功能最强的ｎ３ＰＵＦＡｓ，
ＤＨＡ与人类多种神经性疾病，例如阿尔默茨症［２］
。
Ｓｔａｒｇａｒｄｔ病（Ｓｔａｒｇａｒｄｔ－ｌｉｋｅｍａｃｕｌａｒｄｙｓｔｒｏｐｈｙ，ＳＴＧＤ）是一种发生于青少年期的遗传性黄斑营养不良，目前尚无有效的治疗方法。近年来的研究又发现，ＥＬＯＶＬ４基因第ＶＩ外显子上突变导致了人类的
常染色体显性遗传ＳＴＧＤ３的发病［３］
。ＥＬＯＶＬ４属
于超长链脂肪酸延伸酶（ｅｌｏｎｇａｓｅｏｆＥＬＯｎｇａｔｉｏｎｏｆｖｅｒｙｌｏｎｇｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，ＥＬＯＶＬ）家族，已被证实参与多不饱和脂肪酸（ｖｅｒｙｌｏｎｇｃｈａｉｎＰＵＦＡ，ＶＬＣ－ＰＵ－
ＦＡ）的Ｃ２８－Ｃ３８碳链延长的生化过程［４］
。ＭｃＭａｈｏｎ等发现，ＥＬＯＶＬ４基因突变的ＳＴＧＤ３小鼠模型的视
网膜中的Ｃ３２－Ｃ３６酰基磷脂酰胆碱的水平下降［５］
，ＶＬＣ－ＰＵＦＡ水平减少还会导师ＥＲＧ波幅的下降，因此，治疗ＳＴＧＤ３的策略之一可能是通过食物供给方式将ＶＬＣ－ＰＵＦＡ送到视网膜组织。然而，由于ＶＬＣ－ＰＵＦＡ结构的不稳定性，使得其很能被大量生产，那么另外一种方式就是通过提供ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的前体物质，体内合成ＶＬＣ－ＰＵＦＡ。图１显示ｎ３ＰＵＦＡｓ的合成通路，我们看到ＤＨＡ和ＥＰＡ均为ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的前体脂肪酸，尤其是ＤＨＡ占有在感光体外部节段磷
脂中大约５０％的脂肪酸［６］
，它在神经系统以及视网膜中的作用曾受到广泛的关注。本研究将转基因ＥＬＯＶＬ４蛋白在ＰＣ１２细胞中过量表达，等浓度加入
４
２ 实用医院临床杂志２０１４年９月第１１卷第５期
ＤＨＡ和ＥＰＡ，通过气相质谱（ｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＧＣ－ＭＳ）定量分析ＤＨＡ和ＥＰＡ的
转化效率。图１ ＥＬＯＶＬ４蛋白酶催化Ｃ２８－Ｃ３８ＰＵＦＡ的合成。
１ 材料与方法
１畅１ 重组腺病毒载体的构建、细胞培养和病毒转导携带鼠ＥＬＯＶＬ４基因和绿色荧光蛋白（ＧＦＰ作为对照）的重组腺病毒构建系统采用ＡｄｅｎｏＸ腺病毒表
达系统２和Ｃｒｅａｔｏｒ技术［４］
。将重组病毒质粒转染ＨＥＫ２９３细胞，在转染３６小时后开始收集、纯化培养液中的病毒。流式细胞仪测定滴度。ＰＣ１２细胞是大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株由我院人类分子生物学与遗传研究中心实验动物中心引入，培养于含体积分数为１０％马血清、体积分数５％胎牛血清的ＲＰＭＩ－１６４０培养基中，体积分数５％ＣＯ２条件下培养。次日，进行病毒转导，即将Ａｄ－ＧＦＰ和Ａｄ－
ＥＬＯＶＬ４病毒质粒按１×１０４至２×１０４
ｐｆｕ／ｍｌ浓度滴度加入含有２％（ｖ／ｖ）ＦＢＳ的细胞培养液中。转导２４时后，观察并纪录ＧＦＰ表达情况和细胞形态变化，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测ＥＬＯＶＬ４和ＧＦＰ的蛋白表达量。１畅２ ＲＴ－ＰＣＲ 采用ＰｕｒｅＬｉｎｋＭｉｃｒｏｔｏＭｉｄｉ总ＲＮＡ提取试剂盒（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ），提取ＰＣ１２、ＰＣ１２＋Ａｄ－ＧＦＰ和ＰＣ１２＋Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４三组细胞的ＲＮＡ。构建２５μｌ反应体系，上样扩增。琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察并照相，扫描各条带灰度值，定量分析，ＲＰＬ１９为管家基因。１畅３ 供给ＤＨＡ和ＥＰＡ于ＰＣ１２细胞 制备牛血清白蛋白ＢＳＡ共轭ＥＰＡ和ＤＨＡ：纯度高于９９％的ＥＰＡ的钠盐购自Ｎｕ－ＣｈｅｋＰｒｅｐ，Ｉｎｃ．（Ｅｌｙｓｉａｎ，ＭＮ）；纯度高于９５％的ＤＨＡ的钠盐购自ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌ
Ｃｏ．（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡ）。每种钠盐溶于ＢＳＡ，制备成ＢＳＡ共轭ＤＨＡ和ＥＰＡ制备，储存于－８０℃备用。当外源基因ＥＬＯＶＬ４在ＰＣ１２细胞中转染成功，细
胞培养２４小时后，培养被替换为含有ＤＨＡ和ＥＰＡ（１∶１）的培养液，两种ＰＵＦＡ的浓度控制在１５～２０μｇ／ｍｌ，以防浓度过高导致的细胞死亡。在孵育４８之后，用含有５０μｍＢＳＡ的ＰＢＳ溶液的清洗细胞一次，然后用不含ＢＳＡ的ＰＢＳ溶液清洗细胞两次，收集细胞，储存于－８０℃备用。
１畅４ 脂肪酸提取和薄层色谱（ｔｈｉｎｌａｙｅｒｃｈｒｏｍａ－ｔｏｇｒａｐｈｙ，ＴＬＣ） 从至少２ｍｇ的细胞蛋白中提取总脂质，参照Ｂｌｉｇｈ－Ｄｙｅｒ法提取总脂质
［４］
，将含有脂
质的氯仿溶液储存在－２０℃中备用。加入５０ｎｍ的１５：０，１７：０，２３：０（短链脂肪酸的参照物）和４ｎｍ的３０：３ｎ６（作为长链脂肪酸的参照物）。之后，在加入１６畅６％的ＨＣｌ的甲醇溶液，在氮气下封好装有氯仿的试管口后，１００℃加热过夜，第二天将试管在冰上
冷却。将上述获得的溶液用毛细管在硅胶层析板上，分离脂质
［７］
。分离的脂质是无色的，用二氯荧
光黄使其显色，之后将脂质从层析板上刮除，分类收集到试管中，从而得到脂肪酸甲酯（ｆａｔｔｙａｃｉｄｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ，ＦＡＭＥ），置入色谱质谱仪上分析。
１畅５ ＧＣ－ＭＳ 分析脂肪酸ＦＡＭＥ定量分析：采用ＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ６８９０Ｎ气相色谱和火焰离子检测仪质谱检测仪，得到的总离子色谱图或质量色谱图，其色谱峰面积与相应组分的含量成正比，若对某一组份进行定量测定，该研究中采用色谱分析法中的内标法等方法进行，即前面提到的１５：０，１７：０，２３：０作为短链脂肪酸的参照物，３０：３ｎ６作为长链脂肪酸的参照物。１畅６ 统计学方法 采用Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａ２０００和ＣｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ５软件进行数据分析。定量单位以ｍｏｌｅ％±ＳＤ表示，采用多变量ＡＮＯＶＡ方差分析和Ｓｃｈｅｆｆｅｔ检验。Ｐ＜０畅０５为差异有统计学意义。
２ 结果
２畅１ ＰＣ１２细胞中ＥＬＯＶＬ４基因的表达水平 ＥＬＯＶＬ４基因在ＰＣ１２＋Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４组的细胞中的表达是对照组（ＰＣ１２和ＰＣ１２＋Ａｄ－ＧＦＰ）的４０倍，两个
对照组之间的ＥＬＯＶＬ４表达无明显差异（图２ａ）。同样，蛋白质印迹的结果亦证实经过Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４转导的ＰＣ１２细胞中ＥＬＯＶＬ４蛋白的有明显表达（图２ｂ），并且４８ｈ后的蛋白表达水平比２４ｈ后的表达水平增加。
２畅２ ＥＬＯＶＬ４蛋白酶催化ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的合成过程 ＰＣ１２细胞中本身具有相对高含量的内源性的５
２ 实用医院临床杂志２０１４年９月第１１卷第５期
图２ ＰＣ１２细胞中ＥＬＯＶＬ４的表达水平 ａ：ｑＲＴ－ＰＣＲ定量分析ＥＬＯＶＬ４在ＰＣ１２细胞中的表达水平，纵轴显示目的基因／管家基因ＲＰＬ１９的矫正值（Ｍｅａｎ±ＳＤ，ｎ＝３）；ｂ：ＷＢ显示在Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４转导的ＰＣ１２细胞组中ＥＬＯＶＬ４蛋白表达量增加，Ａｄ－ＧＦＰ转导的ＰＣ１２细胞中ＧＦＰ蛋白的表达亦增加，β－ａｃｔｉｎ蛋白表达量为对照
１８：３ｎ３，２０：４ｎ３，２０：５ｎ３，２２：５ｎ３，２２：６ｎ３和２４：５ｎ３，然而，与对照组相比（ＰＣ１２和ＰＣ１２＋Ａｄ－ＧＦＰ），Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４转导的ＰＣ１２细胞组中２０：４ｎ３，２２：５ｎ３，２２：
６ｎ３，和２４：５ｎ３的含量下降（图３ａ），并在该组中检测到Ｃ２８－Ｃ３６ＰＵＦＡｓ的产物（图３ｂ），而对照组无Ｃ２８－Ｃ３６ＰＵＦＡｓ的合成。说明在ＥＬＯＶＬ４蛋白酶
的催化作用下，五烯酸２０：４ｎ３，２２：５ｎ３，２４：５ｎ３延长碳链合成２８：５ｎ３，３０：５ｎ３，３２：５ｎ３，３４：５ｎ３和３６：
５ｎ３，此外有少量的六烯酸产物３４：６ｎ３和３６：６ｎ３合成，可能是有２２：６ｎ３（ＤＨＡ）转化而来，也可能是内源性的ＦＡＤＳ２／Δ６ｄｅｓａｔｕｒａｓｅ（去不饱和酶）的作用下将五烯酸转化成六烯酸。
图３ ＰＣ１２、ＰＣ１２＋Ａｄ－ＧＦＰ、ＰＣ１２＋Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４三组细胞中Ｃ１８－Ｃ３６ＰＵＦＡ的组成 ａ：ＰＣ１２、ＰＣ１２＋Ａｄ－ＧＦＰ、ＰＣ１２＋Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４三组细胞中Ｃ１８－Ｃ２６ＰＵＦＡ的组成（ｎ＝３，ｍｏｌｅ％±ＳＤ）；ｂ：ＰＣ１２、ＰＣ１２＋Ａｄ－ＧＦＰ、ＰＣ１２＋Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４三组细胞中Ｃ２８－Ｃ３６ＰＵＦＡ的组成（ｎ＝３，ｍｏｌｅ％±ＳＤ）
２畅３ ＤＨＡ（２２：６ｎ３）和ＥＰＡ（２０：５ｎ３）转化成ＶＬＣ－ＰＵＦＡｓ的效率 ＤＨＡ和ＥＰＡ（１：１）处理ＰＣ１２细胞，如图４ａ中所示，ＤＨＡ和ＥＰＡ几乎等比例被ＰＣ１２细胞所吸收（１５～１７ｍｏｌｅ％），由于２０：５ｎ３大部分转化为２２：５ｎ３，因此有必要在统计２０：５ｎ３被吸收的量时将２２：５ｎ３。在Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４转导的ＰＣ１２细胞组中，ＤＨＡ和ＥＰＡ均被有效转化为ｎ３ＶＬＣ－ＰＵＦＡｓ。通过ＧＣ－ＭＳ定量分析它们在所有脂肪酸中的ｍｏｌ％，对于２０：５ｎ３／ＥＰＡ，３４：５ｎ３和３６：５ｎ３是其主要产物，分别为０畅８５％和１畅１１％；而３４：６ｎ３和３６：６ｎ３作为２２：６ｎ３／ＤＨＡ的主要产物，则分别只有０畅１６％和０畅２９％（图４ｂ）。此外，在ＶＬＣ－ＰＵＦＡｓ产物中，ＥＰＡ所产生的五烯酸总和ｍｏｌｅ％是ＤＨＡ所产生的六烯酸总和的近４倍（图４ｃ），说明ＥＰＡ转化成ＶＬＣ－ＰＵＦＡｓ的效率明显高于
ＤＨＡ。
６
２ 实用医院临床杂志２０１４年９月第１１卷第５期
图４ 供给ＤＨＡ和ＥＰＡ后ＰＣ１２细胞中ｎ－３ＰＵＦＡ的组成 ａ：分别在ＰＣ１２和ＰＣ１２＋Ａｄ－ＧＦＰ，ＰＣ１２＋Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４三组中添
加１：１的ＤＨＡ和ＥＰＡ；ｂ：ＧＣ－ＭＳ分析ｎ３ＶＬＣ－ＰＵＦＡｓ产物，红
色波形代表ＰＣ１２＋Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４＋ＤＨＡ＋ＥＰＡ组中ｎ３ＶＬＣ－ＰＵＦＡｓ
产物，绿色和蓝色波形分别代表ＰＣ１２＋Ａｄ－ＧＦＰ＋ＤＨＡ＋ＥＰＡ组
和ＰＣ１２＋ＤＨＡ＋ＥＰＡ组中无ｎ３ＶＬＣ－ＰＵＦＡｓ产物，３０：３ｎ６ＩＳＴＤ：ｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄ３０：３ｎ６作为长链脂肪酸的内标物；ｃ：ＶＬＣ－ＰＵ－ＦＡｓ产物中，五烯酸（Ｐｅｎｔａｅｎｏｉｃｓ）产物和六烯酸（Ｈｅｘａｅｎｏｉｃｓ）
产物的含量的比较
３ 讨论
啮齿目动物视网膜中ＤＨＡ含量减少会导致明适应ＥＲＧ波幅降低［８］，非人类的灵长类动物视网膜中ＤＨＡ将少则导致视力下降［９］，此外，视网膜色素变性患者的血液中ＤＨＡ的含量明显较正常对照组减少［１０］，一系列的研究证明，说明ＤＨＡ对维持视网膜功能有些重要作用，ＤＨＡ含量减少可能是导致视网膜变性的重要原因之一。起初，我们推测ＤＨＡ除本身具有保护视网膜的作用以外，也可以作为重要的前体物质，在ＥＬＯＶＬ４蛋白的作用下，高效率的转化为ＶＬＣ－ＰＵＦＡ，从而对ＳＴＧＤ３有潜在的治疗作用。有趣的是，在本实验中，ＤＨＡ在ＥＬＯＶＬ４蛋白的作用下有一部分转化成了ＶＬＣ－ＰＵＦＡ，然而与ＥＰＡ相比，ＤＨＡ的转化效率非常低。与以往的体内实验结果类似，Ｓｕｈ等玻璃体腔内注射［３Ｈ］ＥＰＡ和［３Ｈ］ＤＨＡ入大鼠的眼内，发现有９０％的ＥＰＡ转化为ＶＬＣ－ＰＵＦＡ，而没有检测到ＤＨＡ被有效转化［１１］，Ｚｅｂｒａ斑马鱼体内具有ＥＬＯＶＬ４ａ和ＥＬＯＶＬ４ｂ两种基因，其中ＥＬＯＶＬ４ｂ蛋白可以高效率转化ＥＰＡ为ＶＬＣ－ＰＵＦＡ［１２］。
目前ＳＴＧＤ３无有效的治疗方式，ＶＬＣ－ＰＵＦＡ减少可能是导致ＳＴＧＤ３特征性视网膜病变的原因，因此提供ＶＬＣ－ＰＵＦＡ可能是治疗该病的途径之一。然而，ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的结构不稳定性，对大量生产带来了困难。ＥＰＡ和ＤＨＡ是人体的必须脂肪酸，可以通过食物摄取，两者均可以转化为ＶＬＣ－ＰＵＦＡ，因此为患者提供ＥＰＡ或／和ＤＨＡ，有希望达到治疗目的。以往的研究更多的强调ＤＨＡ的作用，尤其是其在中枢神经系统以及视网膜中的作用，而实际上ＥＰＡ转化效率远远高于ＤＨＡ，这也许是造成视网膜中ＥＰＡ的含量低，而大部分的ＤＨＡ未被有效转化而储存于组织当中的原因。此外，ＥＰＡ除能合成五烯酸的ｎ３
ＶＬＣ－ＰＵＦＡ外，还可以在ＦＡＤＳ２／Δ６ｄｅｓａｔｕｒａｓｅ（去不饱和酶）的作用下，生成六烯酸的ｎ３ＶＬＣ－ＰＵＦＡ。因此，我们推测：为患者提供更高比例的ＥＰＡ，而非ＤＨＡ，可能是治疗ＳＴＧＤ３疾病的方式之一，该假设需要进一步的实验证明。
【参考文献】
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［８］ＷｈｅｅｌｅｒＴＧ，ＢｅｎｏｌｋｅｎＲＭ，ＡｎｄｅｒｓｏｎＲＥ．Ｖｉｓｕａｌｍｅｍｂｒａｎｅｓ：ｓｐｅｃｉ－ｆｉｃｉｔｙｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓｆｏｒｔｈｅｅｌｅｃｔｒｉｃａｌｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｉｌｌｕｍｉｎａ－ｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７５，１８８（４１９５）：１３１２－１３１４．
［９］ＮｅｕｒｉｎｇｅｒＭ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｒｅｎａｔａｌａｎｄｐｏｓｔ－ｎａｔａｌｏｍｅｇａ３ｆａｔｔｙａｃｉｄｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｏｎｒｅｔｉｎａａｎｄｂｒａｉｎｉｎｒｈｅｓｕｓｍｏｎｋｅｙｓ［Ｊ］．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ，１９８６，８３（１１）：４０２１－４０２５．［１０］ＨｏｆｆｍａｎＤＲ．Ａｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｐｌａｃｅｂｏ－ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｏｆｄｏｃｏ－ｓａｈｅｘａｅｎｏｉｃａｃｉｄｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｆｏｒＸ－ｌｉｎｋｅｄｒｅｔｉｎｉｔｉｓｐｉｇｍｅｎｔｏｓａ［Ｊ］．ＡｍＪＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ，２００４，１３７（４）：７０４－７１８．
［１１］ＳｕｈＭ，ＣｌａｎｄｉｎｉｎＭＴ．２０：５ｎ－３ｂｕｔｎｏｔ２２：６ｎ－３ｉｓａｐｒｅｆｅｒｒｅｄｓｕｂ－ｓｔｒａｔｅｆｏｒｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｎ－３ｖｅｒｙ－ｌｏｎｇ－ｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｃｉｄｓ（Ｃ２４－Ｃ３６）ｉｎｒｅｔｉｎａ［Ｊ］．ＣｕｒｒＥｙｅＲｅｓ，２００５，３０（１１）：９５９－９６８．
［１２］ＭｏｎｒｏｉｇＯ．ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｒｏｌｅｏｆＥｌｏｖｌ４ｅｌｏｎｇａｓｅｓｉｎｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｖｅｒｙｌｏｎｇ－ｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｃｉｄｓｄｕｒｉｎｇｚｅｂｒａｆｉｓｈＤａｎｉｏｒｅｒｉｏｅａｒｌｙｅｍ－ｂｒｙｏｎｉｃｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ，２０１０，１８０１（１０）：１１４５－１１５４．
（收稿日期：２０１３－１２－０６；修回日期：２０１４－０３－２０）
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实用医院临床杂志２０１４年９月第１１卷第５期
DHA 与 EPA 合成超长链多不饱和脂肪酸的效率比较
作者：余曼， 陈波， 张瑞帆， 吴峥峥， YU Man， CHEN Bo， ZHANG Rui-fan， WU Zheng-zheng
作者单位：四川省医学科学院· 四川省人民医院眼科，四川 成都 610072
刊名：
实用医院临床杂志
英文刊名：Practical Journal of Clinical Medicine
年，卷(期)：2014(5)
本文链接：https://www.360docs.net/doc/b31499213.html,/Periodical_syyylczz201405009.aspx
发酵法生产多不饱和脂肪酸
发酵法生产多不饱和脂肪酸 技术概况：多不饱和脂肪酸（PUSA）指含有两个或两个以上双键且碳链长度为18～22个碳原子的直链脂肪酸。多不饱和脂肪酸按照从甲基端开始第1个双键的位置不同，可分为ω-3和ω-6多不饱和脂肪酸。其中ω-3同维生素、矿物质一样是人体的必需品，不足容易导致心脏和大脑等重要器官障碍。 ω-3不饱和脂肪酸中对人体最重要的两种不饱和脂肪酸是DHA和EPA。EPA 是二十碳五烯酸的英文缩写，具有清理血管中的垃圾（胆固醇和甘油三酯）的功能，俗称"血管清道夫"。DHA是二十二碳六烯酸的英文缩写，具有软化血管、健脑益智、改善视力的功效，俗称"脑黄金"。 主要功能： 1．保持细胞膜的相对流动性，以保正细胞的正常生理功能。 2．使胆固醇酯化，降低血中胆固醇和甘油三酯。 3．降低血液粘稠度，该善血液微循环。 4．提高脑细胞的活性，增强记忆力和思维能力。 近年在世界范围内掀起的第四代功能性食品，即有效成份和生理功能清楚的功能性食品之一。它可以为人类提供必需的营养补充要素和预防心脏病、高血压、炎症及某些癌症等的药物。因而，多不饱和脂肪酸是一类有重要生理活性的物质。过去人类主要从植物、动物中获取。由于人口骤增和资源减少，科学家想从微生物中获取。我们经过多年努力，已取效。 产品性能：应用于功能性食品及药品，国外有大量动植物多不饱和脂肪酸油脂产品进入我国市场。 市场前景及经济效益：投资5200万元，年产值2.27亿多元，利税1.4亿元。 几种重要的多不饱和脂肪酸： 1，α-亚麻酸（AIpha-linolenic acid，ALA），ALA的主要功能在于它是n-3多不饱和脂肪酸（EPA、DHA）合成前体。 2，二十碳五烯酸（Eicosapentaenoic acid，EPA），是一类重要的多聚不饱和脂肪酸化学信使物，在免疫和炎症反应上起至关重要的作用。 3，和二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic acid，DHA）。动物实验显示，DHA是视网膜正常发育和发挥其正常功能所必需的。大脑和神经组织中DHA含量远远高于机体其他组织，对神经功能发挥着至关重要的作用。
不饱和脂肪酸
不饱和脂肪酸 缺乏脂肪，和缺乏其它任何一种营养一样，都会造成身体的不适。脂肪经消化后，分解成甘油及各种脂肪酸。 根据结构不同，脂肪酸分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸，其中不饱和脂肪酸根据双健个数的不同，分为单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸（PUSA）两种。单不饱和脂肪酸有油酸，多不饱和脂肪酸按照从甲基端开始第1个双键的位置及功能不同，又分为ω-6系列和ω-3系列。亚油酸和花生四烯酸属ω-6系列，亚麻酸、DAH、EPA属ω-3系列，ω-3同维生素、矿物质一样是人体的必需品，不足容易导致心脏和大脑等重要器官障碍。人体不能合成亚油酸和亚麻酸，必须从膳食中补充。 ω-3不饱和脂肪酸中对人体最重要的两种不饱和脂肪酸是DHA和EPA。EPA是二十碳五烯酸的英文缩写，具有清理血管中的垃圾（胆固醇和甘油三酯）的功能，俗称"血管清道夫"。DHA是二十二碳六烯酸的英文缩写，具有软化血管、健脑益智、改善视力的功效，俗称"脑黄金"。 ω-3 多不饱和脂肪酸，是由寒冷地区的水生浮游植物合成，以食此类植物为生的深海鱼类（野鳕鱼、鲱鱼、鲑鱼等）的内脏中富含该类脂肪酸。1970年，两位丹麦的医学家霍巴哥和洁地伯哥经过研究确信：格陵兰岛上的居民患有心脑血管疾病的人要比丹麦本土上的居民少得多。格陵兰岛位于北冰洋，岛上居住的爱斯基摩人以捕鱼为主，他们喜欢吃鱼类食品。由于天气寒冷，他们极难吃到新鲜的蔬菜和水果。就医学常识来说，常吃动物脂肪而少食蔬菜和水果易患心脑血管疾病，寿命会缩短。但是事实恰恰相反，爱斯基摩人不但身体健康，而且在他们之中很难发现高血压、冠心病、脑中风、脑血栓、风湿性关节炎等疾病。无独有偶，这种不可思议的现象同样也发生在日本的北海道岛上。当地渔民的心脑血管疾病发病率明显低于其它区域，北海道人心脑血管疾病发病率只有欧美发达国家的1/10。在我国，也有研究发现浙江舟山地区渔民血压水平较低。其实问题就在于上述这些人的膳食中以鱼类为主，鱼类富含长链的不饱和脂肪酸，这就是他们保持心血管健康的原因之一。 但是日常生活中大多数人不能像爱斯基摩人那样天天吃深海鱼，同时由于生产和加工方面的技术原因，使人对一些食品中含有的不饱和脂肪酸吸收利用率很低，因此导致体内多不饱和脂肪酸严重缺乏，而饱和脂肪酸却大量积累。 主要功效 一、不饱和脂肪酸的生理功能 1、保持细胞膜的相对流动性，以保正细胞的正常生理功能。 2、使胆固醇细化，降低血中胆固醇和甘油三酯。 3、是合成人体内前列腺素和凝血恶烷的前躯物质。 4、降低血液粘稠度，该善血液微循环。 5、提高脑细胞的活性，增强记忆力和思维能力。 二、膳食中不饱和脂肪酸盈缺和健康 1、血中低密度脂蛋白和低密度胆固醇增加，产生动脉粥样硬化，诱发心脑血管病。 2、ω-3不饱和脂肪酸是大脑和脑神经的重要营养成份，摄入不足将影响记忆力和思维力，对婴幼儿将影响智力发育，对老年人将产生老年痴呆症。 膳食中过多时，干扰人体对生长因子、细胞质、脂蛋白的合成，特别是ω-6系列不饱和脂肪酸过多将干扰人体对ω-3不饱和脂肪酸的利用，易诱发肿瘤。 三、推荐的日摄入量 多不饱和脂肪酸含量是评价食用油营养水平的重要依据。豆油、玉米油、葵花籽油中，ω-6系列不饱和脂肪酸较高，而亚麻油、苏紫油中ω-3不饱和脂肪酸含量较高。由于不饱和脂肪酸极易氧化，食用它们时应适量增加维生素E的摄入量。一般ω-6：ω-3应在4 -10：1，摄入量为摄入脂肪总量的50% -60% 。 四、食物来源 1、脂肪的热量密度（1克= 9卡路里）是碳水化合物或蛋白质（1克=4卡路里）的两倍。尽管橄榄油和菜籽油对健康有益，但它们的热量也很高（1汤匙=120卡路里）。此外，许多加工食品和快餐食品的脂肪含量也较高，尤其是饱和脂肪。 2、多不饱和脂肪存在于红花籽油、印加果油、茶油、橄榄油、阿甘油、芥花籽油、葵花籽油、玉米油和大豆油中。而饱和脂肪存在于畜产品中，例如黄油、干酪、全脂奶、冰淇淋、奶油和肥肉，以及某些植物油（椰油、棕榈油和棕榈仁油）中。经科学家最新研究发现：来自南美洲亚马逊流域天然无污染的肥沃土壤中的印加果堪称世界植物营养“果王”，由此，印加果荣获巴黎世界博览会金奖。印加果油是目前世界上发现唯一含α-亚麻酸ω- 3、ω-6、ω-9三种不饱和脂肪酸高达92%的纯天然植物，独一无二，高含量亚麻酸被誉为“21世纪人类健康的加油站”，是不可忽视的生命活力素和消除亚健康的理想产品。 五、含其的植物油 可滋泉巴马火麻油是大自然中唯一能溶解于水的油料，在所有植物油中不饱和脂肪酸含量最高，同时含有大量延缓衰老的维生素E、硒、锌、锰、锗，还含有被誉为“植物脑黄金”的α-亚麻酸(ALA)。巴马火麻对自然生长环境要求极为苛刻，目前只产于巴马北部的石山，产量稀少且价格昂贵。 巴马火麻是迄今为止发现最有效的抗衰老和抗辐射植物，当地称之为“长寿麻”或“不老油”。鉴于在美容养颜和抗衰老方面的潜在价值，1999年联合国粮油调查署考察巴马火麻后向全世界特别推荐巴马火麻油为“最有开发价值的植物油”。 沙棘籽油也是典型的不饱和酸植物油，在所有植物油中不饱酸种类及含量都相当高，同时富含天然稳定剂维生素E，天
多不饱和脂肪酸的生理功能及安全性.
多不饱和脂肪酸（Ｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，ＰＵＦＡ）是指含有两个或两个以上双键且碳链长为１８～２２个碳原子的直链脂肪酸，是研究和开发功能性脂肪酸的主体和核心，主要包括亚油酸（ＬＡ）、γ－亚麻酸（ＧＬＡ）、花生四烯酸（ＡＡ）、二十碳五烯酸（ＥＰＡ）、二十二碳六烯酸（ＤＨＡ）等。其中，亚油酸及亚麻酸被公认为人体必需的脂肪酸（ＥＡ），在人体内可进一步衍化成具有不同功能作用的高度不饱和脂肪酸，如ＡＡ、ＥＰＡ、ＤＨＡ等。 多不饱和脂防酸因其结构特点及在人体内代谢的相互转化方式不同，主要可分为ω－３、ω－６两个系列。在多不饱和脂肪酸分子中，距羧基最远端的双键在倒数第３个碳原子上的称为ω－３多不饱和脂肪酸，如在第６个碳原子上，则称为ω－６多不饱和脂肪酸［１］。 １多不饱和脂肪酸的生理功能 多不饱和脂肪酸不仅因为ω－６系列的亚油酸和ω－ ３系列的亚麻酸是人体不可缺少的必需脂肪酸，更重要的是因为由它们在体内代谢转化或者特定食物资源中摄入的几种多不饱和脂肪酸，在人体生理中起着极为重要的作用。 １．１不饱和脂肪酸与心血管系统疾病 多不饱和脂肪酸对动脉血栓形成和血小板功能有明显影响。亚油酸的摄入量与血浆磷脂、胆固醇酯和甘油三酯中的亚油酸含量有很强的相关关系，而且血小板的总亚油酸、α－亚麻酸、花生四烯酸、ＥＰＡ，以及ＤＨＡ与血浆甘油三酯、磷脂、脂肪组织中的脂肪酸浓度呈显著相关性。在芬兰进行的两项研究发现，ＡＤＰ诱导的血小板聚积与脂肪组织和血浆甘油三酯中的亚油酸含量呈显著正相关，但与血小板的亚油酸含量无相关关系。γ－ 亚麻酸在临床上的试验结果表明有降血脂作用，对甘油三酯、胆固醇、β－脂蛋白的下降有效性在６０％以上，而且，γ－亚油酸在体内转变成具有扩张血管作
n-3多不饱和脂肪酸与恶性肿瘤
中华普通外科学文献 渊电子版冤 圆园员员 年 员圆 月第 缘 卷第 远 期 悦 澡蚤 灶 粤 则 糟 澡 郧 藻 灶 杂怎则 早渊耘 造 藻 糟 贼 则 燥 灶蚤 糟耘 凿蚤 贼 蚤 燥 灶冤袁 阅 藻 糟 藻 皂 遭藻 则圆园员员袁 灾 燥 造 缘 晕 燥 援 远 窑讲座与综述窑 DOI:10.3877/cma.j.issn.1674-0793.2011.06.016 作者单位:510080 广州,中山大学附属第一医院东山院区外科 n-3 多不饱和脂肪酸主要来源于多脂的深海冷水鱼,人类很难完整地合成 n-3 多不饱和脂肪酸,主要 通过食物摄取遥流行病学调查显示,增加 n-3 多不饱和脂肪酸摄取量可以抑制多种肿瘤的发生尧发展,减轻 进展期恶性肿瘤患者恶病质症状, 减少体重丢失甚至增加体重遥 但近年来也有学者对这一观点提出了异 议遥 人类约有 2/3 以上疾病的发生与膳食不当有关遥 越来越多的科研证据表明,危害人类健康的心血管疾 病尧糖尿病尧肥胖症以及癌症等与膳食有着不解之缘遥 根据美国的一项统计,超过 80%的患者的死亡原因 与上述几种疾病密不可分遥 血脂的含量与这些疾病的发生密切相关, 而血脂的高低又受到膳食中脂类物 质的成分及人们摄入脂类物质量的影响遥 如今西化的膳食习惯,导致人们脂肪总摄入量大大增加,此外,膳 食中 n-6 多不饱和脂肪酸(n-6 PUFAs)过量,n-3 PUFAs 严重不足,n-6/n-3 比例的失衡也是多种疾病发生 的潜在危险因素遥 目前,有关 n-3 PUFAs 对心血管疾病尧癌症尧肥胖尧糖尿病等疾病的预防作用的研究广泛 而深入,但环境对基因的作用如何,尤其是对于人体健康而言,膳食与基因存在怎样的相关性,彼此之间是 如何相互作用,相关的研究报道较少遥 现有的动物实验结果提示,膳食中脂肪的量和成份严重影响着动物 的健康,对于具有不同遗传背景以及遗传易感性的人群而言,膳食可能对基因发生的影响力,但目前尚无 明确定论遥 本文主要综述了 n-3 PUFAs 的膳食来源,在人体的代谢情况,及 n-3 PUFAs 在肿瘤防治尧临床 试验和治疗中的作用遥 一尧n-3尧n-6 PUFAs 的膳食来源 人体可以从头合成或从食物中摄取多种饱和及单不饱和脂肪酸遥 但哺乳动物缺乏合成 n-3尧n-6 PU鄄 FAs 的脱氢酶,因此这些必需脂肪酸只能从食物中摄取遥 陆生植物可以合成 n-6 系列 PUFAs 的第 1 个成员要要 要亚油酸(LA;18颐 2n-6)遥 几乎所有食用植物油如 玉米油尧 葵花油尧 红花油尧 橄榄油中 LA 的含量都很丰富遥 植物也能合成 n-3 系列 PUFAs 的第一个成 员要要 要琢 -亚麻酸(琢 -LNA,18颐 3 n-3),富含 琢 -LNA 的植物包括大豆尧核桃尧深绿色叶蔬菜如甘蓝尧菠菜尧椰 菜尧抱子甘蓝的种子等,一些油类如亚麻子油尧芥菜籽油尧菜籽油中,琢 -LNA 的含量也很丰富,同时也富含大 量 LA遥 膳食中的长链 n-3 PUFAs 主要以二十碳五烯酸(EPA,20颐 5 n-3)和二十二碳六烯酸(DHA,22颐 6 n-3) 的形式储存于冷水鱼体内遥 鱼类可以从浮游植物和浮游动物中摄取 EPA 和 DHA,不同种类尧栖息在不同 水域的鱼类,体内总脂肪及 n-3 PUFAs 的含量变化很大即便同一种类的鱼,生活在大西洋和太平洋,体内 n-3 PUFAs 含量的差异也很大遥 总之,深海冷水鱼如鲭鱼尧金枪鱼尧鲑鱼等,含 DHA 和 EPA 的量最高遥 人工 饲养的鱼类,喂食不同的饲料,其体内脂肪酸的组成也有显著区别遥 二尧n-3尧n-6 PUFAs 在人体内的代谢 虽然哺乳动物不能从头合成 n-3尧n-6 PUFAs,但哺乳动物细胞可以通过碳链的延长尧去饱和作用和逆 转等方式使 PUFAs 之间发生转化 [1] 遥 摄食后,LA 通过一系列氧化去饱和及碳链延长的交替作用被代谢,生 成花生四烯酸(AA,20颐 4 n-6)遥PUFAs 转化的主要代谢途径见图 1遥驻 6 途径负责 LA 转化为 AA,琢 -LNA 转化 为 EPA,这个步骤主要在肝脏细胞的内质网中进行遥驻 8 途径主要存在于植物中,可以生成 AA 与 EPA,但是 灶-猿 多不饱和脂肪酸与恶性肿瘤 杨婷 余红兰 石汉平 530 窑 窑
不饱和脂肪酸
EPA 二十碳五烯酸，是鱼油的主要成分。虽然亚麻酸在人体内可以转化为EPA，但此反应在人体中的速度很慢且转化量很少，远远不能满足人体对EPA的需要，因此必须从食物中直接补充。 作用 1、治疗自身免疫缺陷。 2、促进循环系统的健康。Ω-3脂肪酸已经被证实能促进循环系统的健康和防止胆固醇和脂肪在动脉壁上积聚 3、有助于生长发育。保持身体里的Ω-3脂肪酸含量处于一个适当平衡的位置对正常的生长和发育是十分必要的。营养专家建议婴儿应从日常饮食和补充剂中吸收各种类型的Ω-3脂肪酸。根据这些建议的要求，婴儿在日常饮食中吸收的EPA应少于 0.1%。 4、其他的情况。Ω-3脂肪酸，包括EPA在内，对肺病、肾病、2型糖尿病、大肠溃疡和节段性回肠炎的治疗都会起到积极的作用。 5、EPA具有帮助降低胆固醇和甘油三酯的含量，促进体内饱和脂肪酸代谢。从而起到降低血液粘稠度，增进血液循环，提高组织供氧而消除疲劳。防止脂肪在血管壁的沉积，预防动脉粥样硬化的形成和发展、预防脑血栓、脑溢血、高血压等心血管疾病。 6、DHA与EPA组合具有保护眼睛，提高视网膜的发射机能作用。国家卫生部要求：DHA与EPA的配比必须在二点五比一以上。 参考摄入量 中国营养学会副理事长苏宜香教授表示，“相关研究已证实了DHA和EPA对人类的健康有更多益处”。 据联合国粮农组织专家委员会联合会商提出的报告显示，每日摄取250—2000毫克的EPA与DHA是构成人类健康饮食的重要组成部分。报告还指出，“成年男性和非孕期或哺乳期女性每天食用250毫克DHA+EPA; 目前中国成年人人均每天DHA+EPA摄入量仅有37.6毫克，不到美国医学研究院建议值（160mg/天）的四分之一，据国家权威调查数据分析显示，属严重缺乏状态。就是这样一个身体状况，对迎接宝宝的身体准备是不足的，据联合国粮农组织专家委员会联合会商提出的报告显示，孕期和哺乳期女性每日摄取DHA+EPA300毫克，是保证母亲和婴儿最佳健康发育水平的最低标准”。[3] 母乳中DHA:AA的配比均衡，帮助DHA和AA共同吸收，对0-6个月宝宝的头脑智力发育至关重要： 根据研究，中国妈妈母乳中DHA:AA的平均比例约为1：1.7，过多的DHA会抑制AA的吸收 实验证明-相比单独作用，DHA和AA共同作用更有利于支持宝宝脑部发育。 DHA/AA配比(1:1-1:2)亲和人体：帮助DHA和AA的有效利用；
DHA+与+EPA+合成超长链多不饱和脂肪酸的效率比较
【通讯作者】吴峥峥 ＤＨＡ与ＥＰＡ合成超长链多不饱和脂肪酸的效率比较 余 曼，陈 波，张瑞帆，吴峥峥 （四川省医学科学院?四川省人民医院眼科，四川成都６１００７２） 【摘要】 目的 比较在ＥＬＯＶＬ４蛋白酶催化作用下，ＤＨＡ和ＥＰＡ合成超长链多不饱和脂肪酸ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的效率。方法 构建携带ＥＬＯＶＬ４基因和绿色荧光蛋白的重组腺病毒，转入培养的ＰＣ１２细胞，通过ｑＲＴ－ＰＣＲ定量分析ＥＬＯＶＬ４基因的表达量，ＷＢ检测ＥＬＯＶＬ４蛋白的表达；１∶１加入ＤＨＡ和ＥＰＡ，孵育４８ｈ之后进行脂肪酸提取，通过气相质谱ＧＣ－ＭＳ分析超长链脂肪酸的成分。结果 ＧＣ－ＭＳ检测到分别用ＤＨＡ及ＥＰＡ处理后的ＰＣ１２＋Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４的细胞中有ｎ３ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的表达，３４：５ｎ３和３６：５ｎ３分别为０畅８５％和１畅１１％；３４：６ｎ３和３６：６ｎ３分别为０畅１６％和０畅２９％；ＥＰＡ所产生的五烯酸总和是ＤＨＡ所产生的六烯酸总和的４倍。结论 ＥＰＡ合成ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的效率远远高于ＤＨＡ，为患者提供更高比例的ＥＰＡ，而非ＤＨＡ，可能是治疗ＳＴＧＤ３疾病的方式之一。 【关键词】 二十二碳六烯酸；二十碳五烯酸；ＥＬＯＶＬ４基因；Ｓｔａｒｇａｒｄｔ病；超长链多不和脂肪酸【中图分类号】Ｒ７７ 【文献标志码】Ａ 【文章编号】１６７２－６１７０（２０１４）０５－００２４－０４ ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｂｅｔｗｅｅｎＤＨＡａｎｄＥＰＡｉｎｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｖｅｒｙｌｏｎｇｃｈａｉｎｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓ ＹＵＭａｎ，ＣＨＥＮＢｏ，ＺＨＡＮＧＲｕｉ－ｆａｎ，ＷＵＺｈｅｎｇ－ｚｈｅｎｇ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｐｈ－ ｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，ＳｉｃｈｕａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ＆ＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＰｅｏｐｌｅ摧ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００７２，Ｃｈｉｎａ） 【Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ】 ＷＵＺｈｅｎｇ－ｚｈｅｎｇ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｂｅｔｗｅｅｎＤＨＡａｎｄＥＰＡｆｏｒｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｖｅｒｙｌｏｎｇｃｈａｉｎｐｏｌｙｕｎｓａｔ－ｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄ（ＶＬＣ－ＰＵＦＡｓ）ｕｎｄｅｒｃａｔａｌｙｔｉｃａｃｔｉｏｎｏｆＥＬＯＶＬ４ｐｒｏｔｅａｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＰＣ１２ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒａｎｓｄｕｃｅｄｗｉｔｈｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔａｄｅｎｏｖｉｒｕｓｔｙｐｅ５ｃａｒｒｙｉｎｇｍｏｕｓｅＥｌｏｖｌ４ａｎｄｇｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ（ＧＦＰ）．ＧＦＰ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇａｎｄｎｏｎ－ｔｒａｎｓｄｕｃｅｄｃｅｌｌｓｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｃｏｎｔｒｏｌｓ．ＥＬＯＶＬ４ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓｑｕａｎｔｉｆｉｅｄｂｙｑＲＴ－ＰＣＲｓ．ＥＬＯＶＬ４ｐｒｏｔｅｉｎｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ（ＷＢ）．ＴｈｅｔｒａｎｓｄｕｃｅｄｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＤＨＡｏｒＥＰＡ（１：１）．Ａｆｔｅｒ４８ｈｏｆｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ，ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄ，ａｎｄｆａｔｔｙａｃｉｄｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｓｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄｆｏｌｌｏｗｉｎｇｔｏｔａｌｌｉｐｉｄｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｆａｔｔｙａｃｉｄｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙｕｓｉｎｇａｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＧＣ－ＭＳ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ ＧＣ－ ＭＳａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅＤＨＡａｎｄＥＰＡｔｒｅａｔｅｄＰＣ１２＋ Ａｄ－ＥＬＯＶＬ４ｈａｄｎ３ＶＬＣ－ＰＵＦＡｓｉｎｗｈｉｃｈ３４：５ｎ３ａｎｄ３６：５ｎ３ｗｅｒｅ０畅８５％ａｎｄ１畅１１％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；３４：６ｎ３ａｎｄ３６：６ｎ３ｗｅｒｅ０畅１６％ａｎｄ０畅２９％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｏｔａｌａｍｏｕｎｔｏｆｐｅｎｔａｅｎｏｉｃｓｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｆｒｏｍＥＰＡｗａｓａｌｍｏｓｔｆｏｕｒｔｉｍｅｓｔｈａｎｔｈａｔｏｆｈｅｘａｅｎｏｉｃｓｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｆｒｏｍＤＨＡ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＥｌｏｎｇａｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆＶＬＣ－ＰＵＦＡｓｆｒｏｍＥＰＡｉｓｍｕｃｈｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｆｒｏｍＤＨＡ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｄｉｅｔａｒｙｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｍｏｒｅＥＰＡｒａｔｈｅｒｔｈａｎＤＨＡｍａｙｐｒｏｖｉｄｅｓｏｍｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｂｅｎｅｆｉｔｓｆｏｒｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＳｔａｒｇａｒｄｔｓ摧ｄｉｓｅａｓｅ（ＳＴＧＤ３）． 【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】 Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｉｃａｃｉｄ（ＤＨＡ），Ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃａｃｉｄ（ＥＰＡ），ＥＬＯＶＬ４ｇｅｎｅ，Ｓｔａｒｇａｒｄｔｓ摧ｄｉｓｅａｓｅ，Ｖｅｒｙｌｏｎｇｃｈａｉｎｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄ（ＶＬＣ－ＰＵＦＡ） 以ＤＨＡ和ＥＰＡ为代表的ｎ３ＰＵＦＡｓ（ｐｏｌｙｕｎｓａｔ－ｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，ＰＵＦＡｓ）是指含有两个或两个以上双键的一类脂肪酸，通常按照第一个双键的位置把多不饱和脂肪酸分类，其中ｎ３ＰＵＦＡｓ，即从甲基端数第１个双键的位置在第３碳位的多不饱和脂肪酸，如二十二碳六烯酸（２２：６ｎ３，ＤＨＡ）和二十碳五烯酸（２０：５ｎ３，ＥＰＡ）。在哺乳动物神经系统中，ｎ３ＰＵＦＡｓ不但是重要的结构组分，而且是重要的营养 因子［１］ 。ＤＨＡ被认为是功能最强的ｎ３ＰＵＦＡｓ， ＤＨＡ与人类多种神经性疾病，例如阿尔默茨症［２］ 。 Ｓｔａｒｇａｒｄｔ病（Ｓｔａｒｇａｒｄｔ－ｌｉｋｅｍａｃｕｌａｒｄｙｓｔｒｏｐｈｙ，ＳＴＧＤ）是一种发生于青少年期的遗传性黄斑营养不良，目前尚无有效的治疗方法。近年来的研究又发现，ＥＬＯＶＬ４基因第ＶＩ外显子上突变导致了人类的 常染色体显性遗传ＳＴＧＤ３的发病［３］ 。ＥＬＯＶＬ４属 于超长链脂肪酸延伸酶（ｅｌｏｎｇａｓｅｏｆＥＬＯｎｇａｔｉｏｎｏｆｖｅｒｙｌｏｎｇｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，ＥＬＯＶＬ）家族，已被证实参与多不饱和脂肪酸（ｖｅｒｙｌｏｎｇｃｈａｉｎＰＵＦＡ，ＶＬＣ－ＰＵ－ ＦＡ）的Ｃ２８－Ｃ３８碳链延长的生化过程［４］ 。ＭｃＭａｈｏｎ等发现，ＥＬＯＶＬ４基因突变的ＳＴＧＤ３小鼠模型的视 网膜中的Ｃ３２－Ｃ３６酰基磷脂酰胆碱的水平下降［５］ ，ＶＬＣ－ＰＵＦＡ水平减少还会导师ＥＲＧ波幅的下降，因此，治疗ＳＴＧＤ３的策略之一可能是通过食物供给方式将ＶＬＣ－ＰＵＦＡ送到视网膜组织。然而，由于ＶＬＣ－ＰＵＦＡ结构的不稳定性，使得其很能被大量生产，那么另外一种方式就是通过提供ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的前体物质，体内合成ＶＬＣ－ＰＵＦＡ。图１显示ｎ３ＰＵＦＡｓ的合成通路，我们看到ＤＨＡ和ＥＰＡ均为ＶＬＣ－ＰＵＦＡ的前体脂肪酸，尤其是ＤＨＡ占有在感光体外部节段磷 脂中大约５０％的脂肪酸［６］ ，它在神经系统以及视网膜中的作用曾受到广泛的关注。本研究将转基因ＥＬＯＶＬ４蛋白在ＰＣ１２细胞中过量表达，等浓度加入 ４ ２ 实用医院临床杂志２０１４年９月第１１卷第５期
不饱和脂肪酸的危害
不饱和脂肪酸的危害？ 脂肪是人体必需的营养物质，是构成人体器官和组织的重要成分。不过脂肪也“好”“坏”之分，“好”脂肪可以促进人体对于糖类和蛋白质的吸收，可以维持正常的内分泌，并且帮助吸收利用各种脂溶性维生素等等，而“坏”的脂肪食用过多，却可以导致胆固醇升高。不饱和脂肪酸就是我们俗称的“好脂肪”。 “好”脂肪和“坏”脂肪有哪些区别？ 脂肪是由甘油和脂肪酸组成的化合物。而脂肪酸根据结构的不同可分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。饱和脂肪酸人体可以自己合成，在很多动物性脂肪中含量较高，可以导致胆固醇的升高，因此不宜多摄入。 不饱和脂肪酸分为单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸两种，由各种食物提供，人体无法合成。单不饱和脂肪酸主要提供热量，多不饱和脂肪酸具有降低胆固醇的作用。因此，对于偏胖的准妈妈，或者患有脂肪肝的准妈妈建议可以多选择多不饱和脂肪酸含量丰富的食物。 如何补充不饱和脂肪酸？ 我国规定成人膳食中脂肪提供的热量应占每日摄取总热量的25%~30%。这其中包括肉类和烹调时所含的油类。在猪油、牛油、奶油中饱和脂肪酸的含量较高，因此应该严格控制摄入量。而不饱和脂肪酸多存在于植物油（如豆油、玉米油、花生油、芝麻油和橄榄油等）、鱼油和禽类中，可以作为每日脂肪摄取的主要来源。 哪些食物中富含不饱和脂肪酸？
3．将凉粉切成1厘米左右宽的条状，加入准备好的黄瓜丝、红辣椒丝、鸡丝和所有的调料，搅拌均匀即可。 备注：放入调料前，如果能将凉粉、黄瓜丝、红辣椒丝和鸡丝放入冰箱里冷藏一会儿，口感会更好。也可以根据自己的喜好，撒上一些黑芝麻。 鲫鱼豆腐汤 原料：鲫鱼2条，豆腐1块，姜3片，葱1根 调料：料酒1大勺，盐适量，醋1大勺，香油少许，酱油适量 制作方法：1.鲫鱼洗净，沥干水分，用料酒和盐腌制20分钟，用油略煎后备用； 2.姜切成丝，葱切段，豆腐切块备用； 3.锅内放入5杯水，加入姜丝、煎过的鲫鱼和豆腐块一同用小火煮。大约20分钟左右，汤汁变白时，加入盐调味，关火盛出，撒上葱花即可。 4.将醋、香油和酱油搅拌均匀，可以用鱼肉和豆腐蘸着吃。
转基因植物生产超长链多不饱和脂肪酸研究进展
植物学通报 Chinese Bulletin of Botany 2007, 24 (5): 659?666, https://www.360docs.net/doc/b31499213.html,
.专题介绍.
转基因植物生产超长链多不饱和脂肪酸研究进展
石娟, 朱葆华, 潘克厚 *
中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室, 青岛 266003
摘要
超长链多不饱和脂肪酸(VLCPUFAs)对人类健康非常重要。日常摄入一定量的VLCPUFAs能够补充人体自身合成的
不足, 并对某些疾病起到明显的预防和治疗作用。VLCPUFAs主要源自深海鱼油, 但由于市场需求的迅速增长和海洋可捕捞 鱼类资源的日益减少, 该途径已经远远不能满足市场的需要, 寻找更为持续且稳定的VLCPUFAs来源已经成为当务之急。最 近, 人们已经克隆了VLCPUFAs生物合成相关的去饱和酶和延伸酶基因, 并希望在植物特别是油料作物中共表达这些基因, 使 其成为生产VLCPUFAs的 “绿色细胞工厂” 。目前已有多个研究小组在进行转基因植物合成VLCPUFAs的探索, 并取得了突 破性的研究成果。本文综述了相关的研究进展, 并对存在的问题和解决策略进行了探讨。
关键词 DHA, EPA, 转基因植物, 超长链多不饱和脂肪酸
石娟, 朱葆华, 潘克厚 (2007). 转基因植物生产超长链多不饱和脂肪酸研究进展. 植物学通报 24, 659?666.
超长链多不饱和脂肪酸(VLCPUFAs)是指含有 20 或 22个碳原子及4－6个亚甲基间隔的顺式双键的脂肪 酸链(Abbadi et al., 2004), 包括花生四烯酸(AA, 20: 4n6)、 二十碳五烯酸(EPA, 20:5n3)和二十二碳六烯酸 (DHA, 22:6n3)。 多不饱和脂肪酸(PUFAs)可分为n6系 列和 n3 系列。AA 属于 n6 PUFAs; EPA 和 DHA 属于 n3 PUFAs。 研究表明, VLCPUFAs 对人类健康非常重 要。AA 和 EPA 是哺乳动物细胞膜的组分, 也是生成前 列腺素、白三烯和血栓素等激素的前体(Funk, 2001)。 EPA 在凝血、免疫和抗炎症等各种生理反应中起重要 作用(Simopoulos, 2002)。DHA 对胎儿神经系统的形 成至关重要(Uauy et al., 2001), 还影响着视网膜视紫 红质的活性(Giusto et al., 2000), 并与某些疾病如关节 炎、动脉硬化、抑郁症的预防和治疗有关(Horrocks and Yeo, 1999; Marszalek and Lodish, 2005)。 人体合成 EPA 和 DHA 的效率极低, 在日常饮食中
补充足够的 EPA 和 DHA 对维持身体健康极为重要。 目 前该类脂肪酸的主要来源是深海鱼油, 但是鱼类自身并 不能合成 VLCPUFAs, 而是通过摄食富含 VLCPUFAs 的海藻等进行有限的积累; 另外, 过度捕捞使海洋鱼类资 源日益减少, 该途径已经远远不能满足迅速增加的市场 需求。 此外, 由于环境污染等原因导致鱼油中的重金属 含量越来越高, 寻找更为持续、稳定、安全的 EPA 和 DHA来源成为当务之急(Tonon et al., 2002; Domergue et al., 2005a)。已知某些微生物如真菌和海洋微藻能 够从头合成 VLCPUFAs 且含量丰富(Sayanova and Napier, 2004); 然而现已开发出的商业化的海藻油和真 菌油, 由于其产量低和提取成本高限制了这类资源的大 规模应用。 鉴于植物油的提取工艺非常成熟, 许多研究 者已经将目光转向油料作物的代谢工程, 探索如何利用 转基因植物作为 “绿色细胞工厂 ”生产 V LC PU FA s (Truksa et al., 2006)。近年来国外一些研究小组已在
收稿日期: 2006-10-24; 接受日期: 2007-04-09 基金项目: 973 重大基础研究前期研究专项(No. 2005CCA02400) * 通讯作者。E-mail: khpan@https://www.360docs.net/doc/b31499213.html, 缩写词: AA: arachidonic acid; ALA: α-linolenic acid; DGLA: dihomo-γ-linolenic acid; DHA: docosapentaenoic acid; EDA: eicosadienoic acid; EPA: eicosapentaenoic acid; ER: endoplasmic reticulum; ETA: eicosatetraenoic acid; GLA: γ-linolenic acid; LA: linoleic acid; LPCAT: lyso-phosphatidycholine acyltransferase; OA: oleic acid; PC: phosphatidycholine; PDAT: phospholipid diacylglycerol acyltransferase; PUFAs: polyunsaturated fatty acids; SDA: stearidonic acid; TAG: triacylglycerol; TPA: tetracosapentaenoic acid; VLCPUFAs: very long-chain polyunsaturated fatty acids
多不饱和脂肪酸
多不饱和脂肪酸 多不饱和脂肪酸 不饱和脂肪酸中对人体最重要的两种不饱和脂肪酸是DHA和EPA。EPA是二十碳五烯 酸的英文缩写，具有清理血管中的垃圾（胆固醇和甘油三酯）的功能，俗称"血管清道夫"。DHA是二十二碳六烯酸的英文缩写，具有软化血管、健脑益智、改善视力的功效，俗称"脑黄金"。 基本概述 多不饱和脂肪酸指含有两个或两个以上双键且碳链长度为18～22个碳原子的直链脂 肪酸。通常分为omega－3和omega－6，在多不饱合脂肪酸分子中，距羧基最远端的双键 在倒数第3个碳原子上的称为omega－3；在第六个碳原子上的，则称为omega－6。它是 由寒冷地区的水生浮游植物合成，有助于降低心脑血管疾病。 食物中每一种营养都同样重要，缺一不可。缺乏脂肪，和缺乏其它任何一种营养一样，都会造成身体的不适。脂肪经消化后，分解成甘油及各种脂肪酸。根据结构不同，脂肪酸 分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸，其中不饱和脂肪酸又分成单不饱和脂肪酸和多不饱和脂 肪酸两种。多不饱和脂肪酸（PUSA）按照从甲基端开始第1个双键的位置不同，可分为 ω-3和ω-6多不饱和脂肪酸。其中ω-3同维生素、矿物质一样是人体的必需品，不足容易导致心脏和大脑等重要器官障碍。 主要功效 1．保持细胞膜的相对流动性，以保证细胞的正常生理功能。 2．使胆固醇酯化，降低血中胆固醇和甘油三酯。 3．降低血液粘稠度，改善血液微循环。 4．提高脑细胞的活性，增强记忆力和思维能力。 相关介绍 ω-3 多不饱和脂肪酸，是由寒冷地区的水生浮游植物合成，以食此类植物为生的深 海鱼类（野鳕鱼、鲱鱼、鲑鱼等）的内脏中富含该类脂肪酸。1970年，两位丹麦的医学 家霍巴哥和洁地伯哥经过研究确信：格陵兰岛上的居民患有心脑血管疾病的人要比丹麦本 土上的居民少得多。格陵兰岛位于北冰洋，岛上居住的爱斯基摩人以捕鱼为主，他们喜欢 吃鱼类食品。由于天气寒冷，他们极难吃到新鲜的蔬菜和水果。就医学常识来说，常吃动 物脂肪而少食蔬菜和水果易患心脑血管疾病，寿命会缩短。但是事实恰恰相反，爱斯基摩 人不但身体健康，而且在他们之中很难发现高血压、冠心病、脑中风、脑血栓、风湿性关 节炎等疾病。无独有偶，这种不可思议的现象同样也发生在日本的北海道岛上。当地渔民
多不饱和脂肪酸功能和应用综述
编号 食品分离技术（综述）题目：多不饱和脂肪酸功能与应用综述食品学院营养与卫生学专业 班级食硕1005 学号s100109030 学生姓名张锦 二〇一一年一月
多不饱和脂肪酸功能与应用综述 摘要：概述了多不饱和脂肪酸的种类、来源、营养和生理功能的相关研究，包括n-6系列多不饱和脂肪酸、n-3系列多不饱和脂肪酸。阐述了膳食合理比例的n-6/n-3 多不饱和脂肪酸是保持身体健康的关键。 关键词：多不饱和脂肪酸；营养；生理功能 Abstract：The kinds of polyunsaturated fatty acid including n-6 and n-3 fatty acids, nature resources, nutrition and biological functions are summarized. The balance intake n-6 and n-3 PUFA is important for keep health but not absolute amounts of PUFA. Key words：polyunsaturated fatty acid; nutrition; biological functions 多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)是指有2个或2个以上不饱和双键结构的脂肪酸，也称多烯脂肪酸。根据第一个不饱和键位置不同，可分为n-6、n-3两大类。n-6 PUFA包括亚油酸(linoleic acid C18: 2n-6, LA) 、γ-亚麻酸(gamma-linolenic acid C18:3 n-6 ,GLA) 花生四烯酸(arachidonic acid C20:4 n-6, AA)等,n-3 PUFAs除α-亚麻酸(alfa-linolenic acid C18:3 n-3 ,LNA)外主要有二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid C20:5 n-3, EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid C22:6n-3,DHA)等长链PUFA。由于人类与其它哺乳类动物自身不能合成这些脂肪酸，必需由食物提供，所以称为必需脂肪酸。脊椎动物不能在离甲基端7 个碳原子之内形成双键。所以，动物体内所有的代谢转化不能改变n-6 或n-3 双键的甲基末端的分子数。因此一旦被消化，n-3 和n-6 脂肪酸不能相互转化这些脂肪酸是不可变的并且有不同的生物化学作用。 PUFA 对人体生理作用的研究源于二十世纪二十年代末必需脂肪酸缺乏症的研究，其后沉寂了多年。五、六十年代以后，随着前列腺素(prostaglandins PGE)、白细胞三烯(leukotrienes LTB0、血栓烷素(thromboxanesTXB)等一系列PUFA代谢产物的研究取得极大的进展，PUFA 得到了更为深入的研究，其作用和功能也日益受到人们的重视[1]八十年代以后，随着流行病学研究发现心血管疾病发病率与PUFA 摄入量呈负相关的现象，PUFA 开始成为以功能性食品为首的许多领域的热点，PUFA 的研究得到了进一步的深化和拓展，特别是九十年代以后，研究发现AA 和DHA 等长链PUFA 在脑功能、婴幼儿智力及视功能发育等方面的重要意义，为PUFA 的研究和应用开辟了更广阔的天地。目前PUFA在医药、食品、精细化工、饲料等许多行业和领域都得到了广泛的应用，而且发展极为迅速，已受到越来越多行业人士的关注。 1．PUFA的分类 PUFA按照n编号系统(也ω编号系统)，即从甲基端开始第1个双键的位置不同，可分为n-3组、n-6组、n-7组、n-9组。每一组成员都可转化为多不饱和或链更长的脂肪酸，其中具有重要生物学功能的是n-3组、n-6组。α-亚麻酸和亚油酸分别是n-3组、n-6组PUFA 的前体，在体内经过一系列的碳链延长和脱饱和作用衍化生成其它的PUFA。 n-3 PUFA同维生素、矿物质一样是人体的必需品，摄人不足容易导致心脏和大脑等重要
高中化学生活拓展多不饱和脂肪酸对人体的作用素材
多不饱和脂肪酸对人体的作用 多不饱和脂肪酸又叫多烯酸，是指分子结构中含有2个或2个以上不饱和双键的脂肪酸。双键愈多，不饱和程度愈高，营养价值也愈高。随着科学的发展，某些多不饱和脂肪酸对人体的作用进一步被认识，特别是以廿二碳六烯酸、廿碳五烯酸和一般植物油中的亚油酸(常与亚麻酸共存)等为代表的多不饱和脂肪酸，目前已越来越引起人们的重视。下面就多不饱和脂肪酸对人体的作用谈一下粗浅认识。 1 多不饱和脂肪酸是防治心脑血管疾病的特殊营养物质 许多人都知道这样一种现象，在现代社会心脑血管疾病日趋严重地威胁着人类的健康和生命，以高血压、高血脂、动脉硬化、冠心病、血栓等为代表的心脑血管疾病造成的死亡人数，已以40％的比例高居各类疾病之首，面临死神的威胁，许多人都在寻找病因及防治方法。60年代末，科学家们偶然发现身居北极冰原的格陵兰岛爱斯基摩人几乎不患心脑血管疾病，而欧洲和美国人的发病率最高，亚洲的日本人发病率较低。原来爱斯基摩人具有全世界独一无二的食谱“生鱼和海豹肉”，其中富含防治心脑血管疾病的最有效的物质。鱼肉的脂肪中含有独特作用的n-3系多不饱和脂肪酸──廿二碳六烯酸(DHA)、廿二碳五烯酸(NPA)、廿碳五烯酸(EPA)、廿碳四烯酸、十八碳四烯酸等。鱼类脂肪中多不饱和脂肪酸含量之高，是其他食物无法与之相比的。因心脑血管疾病主要是由动脉粥样硬比所致，而高血脂症则是动脉粥样硬化的首要危险因素。因此纠正高血脂症对于防治心脑血管疾病具有重要作用。多不饱和脂肪酸具有如下影响人体内脂质代谢的作用：(1)促进胆固醇代谢，防止脂质在肝脏和动脉壁沉积。人体血液中的胆固醇可来自食物，也可由肝脏合成，前者是外源性的，后者是内源性的。胆固醇虽然是高等真核细胞膜的组成部分，在细胞生长发育中是必需的，但是血清中胆固醇含量过高，会堆积在冠状动脉血管壁上引起冠心病。当膳食中多不饱和脂肪酸缺乏或饱和脂肪酸摄入过多时，饱和脂肪酸可刺激胆汁分泌，而促进饮食中胆固醇吸收，导致血液中胆固醇含量过高；当膳食中多不饱和脂肪酸充裕时，胆固醇便与之结合形成胆固醇酯，促其形成胆酸而从肠道排出。著名营养学家凯斯(Keys)一直认为血中胆固醇含量与膳食中胆固醇的摄取量关系不大。但血胆固醇与膳食中饱和脂肪酸的摄取量成正比，与膳食中不饱和脂肪酸的摄取量成反比。因此，在膳食中适当地摄入一定量的多不饱和脂肪酸，对促进人体胆固醇代谢，降低血清中总胆固醇含量，防止脂质在肝脏和动脉壁沉积，预防心脑血管疾病(主要是冠心病)是有益的。据研究，海鱼油中所含有的EPA和DHA，是预防冠心病的主要成分。
多不饱和脂肪酸改善动物肉质的功效说明
多不饱和脂肪酸改善动物肉质的功效说明 多不饱和脂肪酸概述 脂肪中的脂肪酸按饱和程度可以分为饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸(分子结构中仅有一个双键)、PU?FA(分子结构中含两个或两个以上双键)。单不饱和脂肪酸包括油酸、棕榈油酸、油酸、肉豆蔻油酸、蓖麻油酸、芥酸等。PUFA包括亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸等。按ω编号系统，根据第一个双键所处的位置可将不饱和脂肪酸分为四个系列，即ω-3，ω-6，ω-7和ω-9系列，其中ω-6系列的亚油酸和ω-3系列的亚麻酸不能被哺乳动物机体从头合成，必须由外源提供，并且对维持机体正常机能和健康具有重要作用，因此称为必需脂肪酸(EFA)，其他许多PUFA可以以这两种必需脂肪酸为前题进行合成。 C18∶2ω6（亚油酸）→C18∶3ω6（γ-亚麻油酸）→C20∶3ω6→C20∶4ω6（花生四烯酸）→ C22∶4ω6→C22∶5ω6 C18∶3ω3（α-亚麻酸）→ C18∶4ω3→C20∶4ω3→C20∶5ω3→C22∶5ω3→C22∶6ω3 多不饱和脂肪酸对动物产品中脂质含量的影响 研究表明，多不饱和脂肪酸能够降低蛋黄中胆固醇的含量。李志琼等（2007）研究报道蛋黄、各种卵泡中胆固醇（TC）均与日粮中α-亚麻酸(ALA)添加量呈显著直线或二次曲线降低；蛋黄、卵泡和肝脏的甘油三酯（TG）以及肝脏的TC 与ALA之间的线性和二次曲线降低均不显著。胡艳等（2005）报道，添加0、0.15%、1%和2%共轭亚油酸（CLA）的日粮，CLA添加组蛋黄中胆固醇含量均明显低于不加CLA的对照组(P<0.05)。郭宝海（2003）报道，蛋鸡日粮中添加月苋草油可以显著降低蛋黄中的胆固醇。王利华等(2001)报道，选用200只产蛋高峰期的新罗曼蛋鸡，结果表明，通过改变日粮中ω-3与ω-6脂肪酸的比例，可降低蛋黄中胆固醇的含量，ω-6与ω-3之比为5∶1的两个试验组鸡蛋中胆固醇含量较对照组分别下降了9.1%和9.7%。 研究发现，多不饱和脂肪酸可以减少脂肪在肉鸡腹部的沉积。贺喜(2007)报道，日粮中添加1%共轭亚油酸可以降低长沙黄或爱拔益加两个品种肉仔鸡腹脂率(P<0.05)和腹脂脂蛋白脂酶(lpl)活性及其mrna相对表达量(p<0.05)。在日粮中分别用6%和10%两个添加水平的牛羊脂(富含sfa)、橄榄油（富含mufa）、
不饱和脂肪酸对健康的影响
不饱和脂肪酸与人体健康关系探讨 摘要：本文系统的介绍了各种不饱和脂肪酸对人体健康的有利和不利影响，为人们合理的摄取油脂提供了科学依据。 关键词：长链多不饱和脂肪酸；共轭脂肪酸；反式脂肪酸；健康 膳食中油脂的来源主要有动物性脂肪和植物油，陆生动物脂肪的脂肪酸三甘油酯含高比例的饱和脂肪酸，室温下呈固态；绝大部分植物油的脂肪酸三甘油酯含较多不饱和脂肪酸，室温下呈液态；某些海洋鱼油中，其脂肪酸三甘油酯含高比例多不饱和脂肪酸，室温下也呈液态?。食品脂质中的不饱和脂肪酸的双键大都是顺式构型，氢原子在双键的同一侧，植物油氢化后熔点提高，氢化过程在加热、加压、通氢气和催化剂存在下进行，部分氢化能使脂肪酸的顺式双键转变为反式构型，反式酸键角小，致使熔点升高，食品中反式酸主要来自氢化植物油为基料制成的人造奶油和起酥油[1]。 1 不饱和脂肪酸对人体健康的影响 1．1 长链多不饱和脂肪酸对人体健康的影响 长链多不饱和脂肪酸(简称LCPUFAs)又叫多烯酸，是指分子结构中含有两个或两个以上不饱和双键且碳原子数目在20个以上的脂肪酸。与人体健康密切相关的多不饱和脂肪酸主要有两类：一类是n-3系多不饱和脂肪酸(n-3PUFAs)；另一类是n一6系多不饱和脂肪酸(n一6PUFAs)。前者主要包括一亚麻酸、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)；而后者主要包括亚油酸、v一亚麻酸和花生四烯酸，它是生长发育、生殖及保持皮肤健康所必需的[2]。营养学家在研究脂质对人类健康影响时，发现膳食及体内保持一定的n一6PUFAs／n一3PUFAst：g例平衡很重要。PUFAs与类脂质结构、代谢及精子的形成等有关。 多不饱和脂肪酸是组成组织细胞生物膜必不可少的成份，它在体内参与磷脂的合成，并以磷脂的形式出现在线粒体和细胞膜中。 1．1．1 n一3PUFAs对人体的生理作用 对心血管系统：多项研究表明，i"1—3PUFAsH‘L够促进人体防御系统功能，使血液中的脂肪酸谱向着对人体健康有利的方向发展，能抑制血栓形成，降低血脂，