利用mtDNA+COⅠ基因序列鉴定我国烟粉虱的生物型

　万方数据

烟粉虱的生物防治

烟粉虱的生物防治烟粉虱[Bemisia tabaci (Gennadius)]，又称甘薯粉虱、棉粉虱，是热带和亚热带地区的重要害虫之一。20世纪80年代中期以来，由于新生物型(B型)的出现和广泛传布，以及抗药性的迅速发展，已成为许多国家棉花、蔬菜和园林花卉等植物的主要害虫，平均每年在世界各地造成的经济损失超过3亿美元，在美国10年内所造成的损失超过10亿美元。近年来，我国粉虱种群发生动态出现了明显变化,B型烟粉虱有逐年加重危害与蔓延的趋势。在烟粉虱的治理中，生物防治是十分重要的控制手段，且烟粉虱的天敌资源丰富，各国学者对其天敌的研究和应用做了较多工作并已在生产实践中取得一定成效。 1 捕食性天敌的研究和应用目前已报道的烟粉虱捕食性天敌约有114种(隶属9目31科)，其中瓢虫94种、捕食蝽25种、草岭14种、捕食螨17种。虽然天敌种类较多，但实际应用的只有少数几种，且大部分属多食性捕食者。Dean等指出多食性捕食者具有行为可塑性，可通过取食多种猎物提高其捕食作用，使种群得以繁衍。 1.1瓢虫类小黑瓢虫(Delphastus catalinae)原产于美国，为粉虱的专食性捕食者，在加州和弗罗里达等地已成功地应用于控制棉花和圣诞红上的烟粉虱，并已被引入欧洲和我国福建。在室内，小黑瓢虫以取食粉虱卵的生殖力最强，而在田间取食粉虱若虫时生殖力较大。当粉虱密度较低时还可取食红蜘蛛等其它猎物，但不能维持种群繁衍。小黑瓢虫能够捕食已被寄生的粉虱若虫，但随着蚜小蜂的发育能被逐渐辨别而嗜食未被寄生的若虫。小黑瓢虫已由多家公司生产销售，其温室作物

推荐释放量为1头成虫/1.39-9.29m2。有报道说，小毛瓢虫(Nephaspis oculatus)捕食烟粉虱的潜能虽低，但其搜索力明显强于小黑瓢虫，因此当粉虱密度较低时，该种瓢虫的种群密度较高。 1.2 捕食蝽类盲蝽Macrolophus caliginosus为多食性捕食者，取食烟粉虱的卵、若虫和成虫，且更嗜食粉虱卵；当粉虱密度较低时，还可取食某些花卉植物以维持其种群的延续。在欧洲，盲蝽已被广泛用于防治烟粉虱和温室白粉虱(Trialeurodes vaporariorum)。由于该盲蝽历时1个多月方能建立种群，与丽蚜小蜂(Encarsia Formosa)同时释放是保持温室粉虱种群密度较低的关键措施。目前已在地中海地区一些国家得到应用。Rabou报道在茄子地以2头/株的释放量连续释放3次盲蝽，1个月后粉虱种群便可得到有效控制；以0.5-1头/m2的释放量每2周1次，结合每周释放1次丽蚜小蜂，亦能有效地控制温室番茄粉虱的危害。此外，斯氏盲走螨(Typhlodromus swirskii)和Euseius scutalis取食烟粉虱后，其内禀增长力比烟粉虱增大，且能在温室单一种植的作物上抑制烟粉虱种群的增长，有进一步利用的价值。 2 寄生性天敌的研究与应用烟粉虱的寄生性天敌资源丰富，包括恩蚜小蜂属(Encarsia)、桨角蚜小蜂属(Encarsia)、Amitus属和阔柄跳小蜂属(metaphycus)的许多种类。我国初步调查记录有19种(主要隶属恩蚜小蜂属和桨角蚜小蜂属)。 2.1恩蚜小蜂属该属种类多为单寄生。少数为重寄生或多寄生。成虫均将卵产在寄主体内。由于丽蚜小蜂能成功地防治温室白粉虱，因此，国内外学者已做了不少研究与报道。有关成蜂和幼虫的生物学特性、该蜂与粉虱相互作用的种群动态

微生物常规鉴定技术

微生物常规鉴定技术一、形态结构和培养特性观察１、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的细菌在一定条件下，培养特征却有一定稳定性。，以此可以对不同微生物加以区别鉴定。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。１）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。

革兰氏染色: 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色步骤：（1）涂片：涂片方法与简单染色涂片相同。（2）晾干：与简单染色法相同。（3）固定，与简单染色法相同（4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟。（5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗。（6）媒染：滴加卢哥氏碘液，媒染1min。（7）水洗：用水洗去碘液。（8）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色20—25s至流出液无色，立即水洗。（9）复染：滴加蕃红复染5min。（10）水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液。（11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干。（12）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性。（13）实验完毕后的处理： ①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净，a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。b.用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头擦2—3次。c.再用干净的擦镜纸将镜头擦2—3次。注意擦镜头时向一个方向擦拭。 ②看后的染色玻片用废纸将香柏油擦干

烟粉虱的危害生物型及有关生物化学的研究进展

北京农业科学烟粉虱专辑 14烟粉虱的危害北京市农林科学院植保环保所北京 100089?-2úóúèè′?oí??èè′?μ?????3??a?àê3D?o|3??¨?üμè?-??×÷??ó???êò°×·?ê-Trialeurodes vaporariorum 相比涉及74科420余种植物具有更大的经济危害性烟粉虱在我国部分地区正在取代温室白粉虱成为温室及其它经济作物的主要害虫本文对国外烟粉虱的部分研究成果综述如下 1889年Gennadius 记述了希腊的一种烟草害虫这是烟粉虱的首次报道在美国的甘薯上发现了第一个新北区白粉虱标本称之为甘薯粉虱[2]·?ààμ???ò2±?μ??ì?y2?????19个种名作为B. tabaci 的同物异名[3]?ì·?ê-?ú???×?D?1óD?T·?ê-oí?êêí·?ê-μè??????3? ???÷?2??êêó|?üá|ò??°′?2￥?2??2???μ??üá|é?óD?ù2?í?óúê?ò?D??§??òà?Y?ì·?ê-μ??aD?2?òì???ì·?ê-??·??aè??ééú??Dí ??óDè???B 生物型重新命名为银叶粉虱文中描述了烟粉虱在温室花卉上前所未有的的危害据统计从1985~1998年间 A B 型比A 型产更多的卵因而分泌更大量的蜜露而A 型不会它具有导致西葫芦叶片银叶化的特征从世界许多地方收集的烟粉虱标本证明了这样的假设B 生物型的存在可以用异构酶标记法和多态DNA 扩增法来证实 Bellows (1994)提出以烟粉虱B 生物型为基础建立粉虱新种Bemisia argentifolii B 型蛹的几个形态特征成为鉴别银叶粉虱的依据 B 生物型argentifolii 前蜡缨细窄与之相反这些描述和用于区分A 和B 生物型异构酶标记以及在某些条件下生物型不能交配的证据已经被用做新的分类单元

烟粉虱的发生规律与防治技术

烟粉虱的发生规律与防治技术摘要近年来，烟粉虱在和县已由次要害虫上升为蔬菜、棉花上的主要害虫，成为蔬菜、棉花生产发展的主要障碍之一。分析烟粉虱发生与为害特点，针对烟粉虱发生规律，提出综合防治对策。关键词烟粉虱；为害特点；发生规律；防治措施近几年，我地蔬菜产区秋番茄、秋延辣椒烟粉虱局部暴发，少数重发田块出现了毁棚绝收；棉花产区烟粉虱全面暴发，为害面积大、减产严重。烟粉虱在我地已由次要害虫上升为蔬菜、棉花上的主要害虫，已成为蔬菜、棉花生产发展的主要障碍之一。 1发生与为害特点近年来，冬季温室大棚等保护地迅速增多，持续暖冬气候，为烟粉虱种群数量的积累提供了有利条件。再加上我地大面积种植转Bt基因抗虫棉后，大幅度减少了化学农药的使用量，使原来棉田内的偶发性害虫得不到兼治，烟粉虱等种群越来越大，导致了烟粉虱的为害趋于加重。烟粉虱虫体微小，体覆白色蜡粉，繁殖力强，1年发生10多代，田间世代重叠。在25℃条件下从卵到成虫需要18～30d，成虫寿命10～22d。蔬菜上，烟粉虱成虫、若虫群集叶背为害，直接刺吸植株汁液，使叶片褪绿发黄、萎蔫，植株矮小或枯死；成虫、若虫所分泌的蜜露诱发煤污病，影响光合作用，直接严重影响蔬菜的产量和品质。棉花上，烟粉虱成虫、若虫聚集在棉叶背面，以刺吸式口器吸取棉株的营养物质。虫口密度大时，棉叶正面出现成片黄斑，严重时引起蕾铃和叶片大量脱落，使棉花减产；成虫、若虫还大量分泌蜜露，蜜露多时可使棉叶棉铃污染变黑，影响光合作用，导致干物质积累减少，棉铃吐絮时受到污染，会使棉纤维品质下降。烟粉虱还可传播多种病毒，使茄果类、瓜类、豆类等众多作物感染病毒病，造成严重损失。 2发生规律

基因组学重点整理

生物五界：动物、植物、真菌、原生生物和原核生物；生物三界：真细菌、古细菌、真核生物具有催化活性的RNA分子称为核酶（ribozyme）核酶催化的生化反应有：自我剪接、催化切断其它RNA、合成多肽键、催化核苷酸的合成新基因的产生：基因与基因组加倍1）整个基因组加倍；2）单条或部分染色体加倍；3）单个或成群基因加倍。DNA水平转移：原核生物中的DNA水平转移可通过接合转移，噬菌体转染，外源DNA的摄取等不同途径发生，水平转移的基因大多为非必须基因。动物中由于种间隔离不易进行种间杂交，但其主要来源于真核细胞与原核细胞的内共生。动物种间基因转移主要集中在逆转录病毒及其转座成分。外显子洗牌与蛋白质创新：产生全新功能蛋白质的方式有二种：功能域加倍，功能域或外显子洗牌基因冗余：一条染色体上出现一个基因的很多复份(复本）当人们分离到某一新基因时，为了鉴定其生物学功能，常常使其失活，然后观察它们对表型的影响。许多场合，由于第二个重复的功能基因可取代失活的基因而使突变型表型保持正常。这意味着，基因组中有冗余基因存在。看家基因很少重复，它们之间必需保持剂量平衡，因此重复的拷贝很快被淘汰。与个体发育调控相关的基因表达为转录因子，具有多功能域的结构。这类基因重复拷贝变异可使其获得不同的表达控制模式，促使细胞的分化与多样性的产生，并导致复杂形态的建成，具有许多冗余基因。非编码序列扩张方式：滑序复制、转座因子模式生物海胆、果蝇、斑马鱼、线虫、蟾蜍、小鼠、酵母、水稻、拟南芥等。模式生物基因组中G+C%含量高, 同时CpG 岛的比例也高。进化程度越高, G+C 含量和CpG 岛的比例就比较低如果基因之间不存在重叠顺序，也无基因内基因（gene-within-gene），那么ORF阅读出现差错的可能只会发生在非编码区。细菌基因组中缺少内含子，非编码序列仅占11%, 对阅读框的排查干扰较少。细菌基因组的ORF阅读相对比较简单，错误的机率较少。高等真核生物DNA的ORF阅读比较复杂：基因间存在大量非编码序列（人类占70%）；绝大多数基因内含有非编码的内含子。高等真核生物多数外显子的长度少于100个密码子内含子和外显子序列上的差异：内含子的碱基代换很少受自然选择的压力，保留了较多突变。由于碱基突变趋势大多为C-T,故A/T的含量内含子高于外显子。由于终止密码子为TAA\TAG\TGA，如果以内含子作为编码序列，3种读码框有很高比例的终止密码子。基因注释程序编写的依据：1）信号指令，包括起始密码子，终止密码子，终止信号，剪接受体位和供体位，多聚嘧啶序列，分支点保守序列2）内容指令，密码子偏好，内含子和外显子长短基因功能的检测：基因失活、基因过表达、RNAi干涉双链DNA的测序可从一端开始，亦可从两端进行，前者称单向测序，后者称双向测序。要获得大于50 kb的DNA限制性片段必需采用稀有切点限制酶。酵母人工染色体（YAC）1）着丝粒在细胞分裂时负责染色体均等分配。2）端粒位于染色体端部的特异DNA序列，保持人工染色体的稳定性3）自主复制起始点（ARS）在细胞中启动染色体的复制合格的STS要满足2个条件：它应是一段序列已知的片段，可据此设计PCR反应来检测不同的DNA片段中是否存在这一顺序；STS必需在染色体上有独一无二的位置。如果某一STS在基因组中多个位点出现，那么由此得出的作图数据将是含混不清的。遗传图绘制主要依据由孟德尔描述的遗传学原理，第一条定律为等位基因随机分离，第二条定律为非等位基因自由组合，显隐性规律/不完全显性、共显性、连锁衡量遗传图谱的水平覆盖程度饱和程度基因类型：transcribed, translatable gene (蛋白基因) ；transcribed but non-translatable gene ( RNA基因)Non- transcribed, non-translatablegene ( promoter, operator ) rRNA基因，tRNA基因, scRNA基因, snRNA基因, snoRNA基因, microRNA基因基因组(genome)：生物所具有的携带遗传信息的遗传物质总和。基因组学（genomic）：用于概括涉及基因作图、测序和整个基因功能分析的遗传学分支。染色体组（chromosome set）：不同真核生物核基因组均由一定数目的染色体组成，单倍体细胞所含有的全套染色体。比较基因组学（comparative genomics）：比较基因组学是基因组学与生物信息学的一个重要分支。通过模式生物基因组与人类基因组之间的比较与鉴别，为分离重要的候选基因，预测新的基因功能，研究生物进化提供依据。（目标）

烟粉虱的发生危害及防治对策

烟粉虱的发生危害及防治对策摘要烟粉虱是徐州市棉花、蔬菜等多种旱作物上的重要害虫之一。总结其危害特点，并对其重发原因加以分析，以提出防治对策。关键词烟粉虱；发生；防治烟粉虱属同翅目、粉虱科，是我市棉花、蔬菜等多种旱作物上的重要害虫之一，自2001年在新沂市部分乡镇首次发现以来，发生程度逐年加重。受其为害，棉花、蔬菜等作物大量落叶、落果，煤污病暴发，作物产量和品质受到严重影响。据调查，烟粉虱在我市适宜寄主近70种，包括棉花、大豆、蔬菜等作物及一品红、紫荆等花卉林木，这些寄主作物往往插花种植，播期又相互交错，许多成为桥梁寄主，为烟粉虱种群暴发提供了稳定的食料条件。 1危害特点烟粉虱是一种寄主范围广、传播和蔓延速度快、繁殖能力强、为害程度高、防治难度较大的危险性害虫，在适宜的寄主植物上具有趋嫩性，成虫喜聚集在植物顶部嫩叶背面活动，在植物的中下部叶片主要是卵及若虫。烟粉虱对植物的为害主要有三个方面：一是以成虫、若虫刺吸植物汁液，造成寄主营养缺乏，影响正常的生理活动，使受害叶片褪绿萎蔫直至死亡；二是成虫可作为植物病毒的传播媒介，传播病毒病；三是由于其分泌蜜露引起被害植物煤污病的发生，虫口密度高时，叶片呈现黑色，影响光合作用和外观品质。据调查，烟粉虱对不同的植物有不同的危害症状，如番茄被害，表现为果实不均匀成熟；甘蓝、花椰菜被害表现为叶片萎缩、黄化、枯萎；西葫芦、南瓜被害表现为银叶；花卉一品红被害造成茎苍白，叶黄化；棉花被害，叶正面出现褐色斑，虫口密度高时出现成片黄斑，严重时导致蕾铃脱落，影响棉花产量和纤维质量。近几年我市因烟粉虱危害造成棉花脱落成光杆、茄果类蔬菜减产超过5成以上的例子屡见不鲜。由于该虫迁移扩散能力较强，在发生量大的地区，秋季将大量向城区扩散，严重影响城市空气质量和环境，甚至影响居民出行。 2重发原因

微生物检验常规鉴定技术

第一章微生物检验常规鉴定技术课堂教学计划（1学时）第一章微生物检验基本知识包括显微镜、染色技术、培养基制备技术、接种、分离纯化和培养技术等。接种、分离纯化和培养技术

一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。１、接种工具和方法接种和分离工具 1．接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀常用的接种方法有以下几种：１）划线接种这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。２）三点接种在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。３）穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。４）浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45°C 左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。５）涂布接种与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。６）液体接种从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至

烟粉虱测报技术规范20150428

NY/T ××××—2012 烟粉虱测报技术规范（试行稿） 1 范围 1.1 本规范规定了棉田烟粉虱发生程度分级指标、越冬虫源基数调查、成虫迁入监测、系统调查、大田普查、预测方法，以及数据汇总、汇报方法等方面的技术和方法。 1.2 本规范适用于长江流域、黄河流域和西北内陆棉区非自然露地越冬区棉田烟粉虱的测报调查和预报。 2 术语与定义 2.1 烟粉虱若虫分类：1龄和2龄若虫统称低龄若虫，3龄、4龄若虫和伪蛹统称为高龄若虫。 2.2 发生危害期的划分：全年的发生危害期划分为两个阶段，即蕾期烟粉虱和花铃期烟粉虱,简称蕾虱和花铃虱。 2.3 百株三叶成虫量（头/百株三叶）：指选取一定株数棉花，在每株指定部位选3张叶片,用翻转叶片法调查叶片上成虫的数量，折算成百株三叶成虫量。 2.4 距蔬菜保护地距离：指棉田边缘与蔬菜保护地边缘最近点的直线距离。 3 发生程度分级指标发生程度分级指标：分蕾期和花铃期，以百株三叶烟粉虱成虫虫量为指标定发生程度。发生程度分为5级，轻发生（1级）、偏轻发生（2级），中等发生（3级），偏重发生（4级），大发生（5级）。具体分级指标如下：表1 烟粉虱发生程度分级指标 4 越冬虫量调查 4.1 调查时间在蔬菜保护地揭膜前一周左右调查。正常年份各棉花揭膜时间，长江流域棉区在4 1

月上中旬；黄河流域棉区5月中旬，西北内陆棉区在6月上旬。 4.2 调查地点棉田周边的保护地蔬菜上，重点调查葫芦科、十字花科、豆科、茄科和菊科等蔬菜。按距离棉田小于500m、500~1000m和大于1000m分别调查各类蔬菜保护地，每类保护地调查2个。 4.3 调查方法保护地内蔬菜上随机取5点，每点随机选4株蔬菜，每株分别取上部、中部、下部叶片各1张，调查成虫和高龄若虫的数量。对叶片着生密集较难区分上、中、下部叶片的蔬菜，可取上、中部嫩叶2张和下部老叶1张，调查烟粉虱虫量。成虫调查采用翻转叶片法，将叶片轻轻翻转，动作要既轻又快，集中精力迅速目测背面叶片上的大概成虫量，然后仔细查看叶片中的成虫数量，再加上估计已飞走的虫量，计为整个叶片上的成虫数量。高龄若虫的调查方法，取白纸一张，用刀刻出一个1cm×1cm的正方形小孔。将白纸上的正方形小孔随机放在叶片背面上，计数正方形小孔中高龄若虫的数量；还要估算叶片面积，算出单片叶片若虫量。结果记入烟粉虱越冬虫量调查记载表（见附录A表A.1）。 5 棉田系统调查 5.1 成虫迁入棉田时间调查 5.1.1 调查时间棉花移栽或定苗后开始，至烟粉虱迁入棉田达始盛期结束，一般为15天左右。 5.1.2 调查地点分别选择距保护地蔬菜田小于500m、500-1000m和大于1000m的棉田各1块，作为系统调查田。 5.1.3 调查方法保护地，在系统调查田内，面向蔬菜保护地一侧、距田埂1m左右处悬挂黄板，每块田挂2块黄板，黄板尺寸为20cm×30cm。黄板悬挂高度为黄板下缘高出棉花冠层10cm。随着棉花的生长，黄板悬挂高度相应提高，以保持黄板与棉花冠层的相对高度。黄板5天更换1次，雨后及时更换。每5天调查1次，观察黄板上诱集的成虫数量。当成虫迁入数量显著增加，结合历年观测情况，确定成虫迁入棉田的始盛期。调查结果记入烟粉虱黄板诱集记载表（见附录A表A.2）。 5.2 棉田系统调查 5.2.1 调查时间自黄板监测烟粉虱成虫迁入棉田始盛期开始，至9月底结束，每5天调查1次。晴天2

(高考生物)模式生物

（生物科技行业）模式生物

生命研究中的明星——模式生物李璐冰2009044020123 河北农业大学生命科学学院生物科学0901班，河北保定071000 摘要：模式生物在现代生命科学研究中有着举足轻重的地位，特别是随着功能基因组计划的开展，数种生物的基因组序列已经获得，模式生物在遗传学、功能基因组学、分子生物学、发育遗传学以及对人类疾病机理模型的研究中被广泛应用。本文主要以微生物大肠杆菌、植物拟南芥和动物斑马鱼这几种经典的模式生物为例，介绍了模式生物的概况。关键词：模式生物，功能基因组学，分子生物学，发育遗传学正文：模式生物（Modelorganism）是人们研究生命现象过程中长期和反复作为实验模型的动物、植物和微生物，通过对这些物种的科学研究来揭示某种具有普遍规律的遗传现象，模式生物的种类有很多，如果蝇、小鼠、拟南芥、大肠杆菌等，主要应用于遗传学和发育遗传学早在二十世纪初期，人们就发现，如果把关注的焦点集中在相对简单的生物上，则发育现象难题可以得到部分解答。因为简单生物的细胞数量少，分布相对单一，更容易进行实验操作，变化也较好观察。由于生物进化的原因，生物在发育的基本模式方面具有很大的相似性，许多生命活动的方式在不同物种的生物见具有同一性，这是通过模式生物来研究更复杂生物的方法可以有效并成功的基础。尤其是当在有不同发育特点的生物中发现共同形态形成和变化特征时，发育的普遍原理也就得以建立。因此对模式生物的研究可以帮助探索和理解生命的一般规律，在生命研究中有着举足轻重的地位。 1987年美国国立卫生院研究所（NationalInstituteofHealth）和美国能源部（DepartmentofEnergy）联合提出了“人类基因组计划（HumanGenomeProject）”,

病毒分子生物学鉴定常用技术

实验二十三病毒核酸检测常用技术（Techniques of Detecting Nucleic Acid of Viruses in Common Use ）近年来随着分子生物学的发展，基因检测技术在微生物学实验室诊断中也取得了长足的进展。由于部分病原微生物的基因组已成功地被克隆并进行了核苷酸序列测定，因此根据病原微生物的基因特点，应用分子生物学技术检测样品中有无相应病原微生物的核酸，从而可以特异、灵敏地判定标本中是否含有相应的病原微生物。在微生物学的研究及感染性疾病的诊断中，最常使用的微生物核酸检测技术有PCR、RT-PCR、核酸杂交等技术，现对病毒核酸（DNA、RNA）的分离、PCR、RT-PCR、核酸杂交等技术的基本原理、操作方法、应用及影响因素等进行概述。实验 1 PCR 检测传染性喉气管炎病毒核酸【目的要求】通过本实验使学生初步了解和熟悉病毒核酸（DNA）的分离与PCR技术的基本原理、操作方法、影响因素和应用。【基本原理】鸡传染性喉气管炎(Infectious laryngotracheitis, ILT)是由疱疹病毒科、α-疱疹病毒亚科的喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis Virus, ILTV)引起的一种急性上呼吸道传染病, 常表现呼吸困难、产蛋鸡产蛋下降和死亡, 是危害养鸡业发展的重要疫病之一。但在临诊上极易与其它一些呼吸道疾病相混淆, 如禽流感、新城疫、传染性支气管炎、支原体感染等。常规检测IL TV 的方法有病原分离鉴定和血清学试验, 这些方法虽经典，但费时且敏感性差, 不能检测亚临床感染, 而传染性喉气管炎潜伏感染是疾病的一种重要表现形式。聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是目前比较快速、敏感、特异的检测手段，已被广泛应用在病毒核酸检测方面。本实验以PCR方法检测鸡传染性喉气管炎病毒核酸为例，对PCR方法进行介绍。 PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93～94℃）使其变性解成单链；人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。如此反复进行，每一次循环所产生的DNA 均能成为下一次循环的模板，每一次循环都使两条人工合成的引物间的DNA特异区拷贝数扩增一倍，PCR产物得以2n的批数形式迅速扩增，经过25～30个循环后，理论上可使基因扩增109倍以上，实际上一般可达106～107倍（图23-1）。

烟粉虱寄生蜂的应用

烟粉虱寄生蜂的应用烟粉虱Bemisia tabaci ( Gennadius) 属同翅目粉虱科, 属于世界性害虫，其寄主范围广泛。烟粉虱可直接刺吸植物汁液，造成寄主营养缺乏，影响正常的生理活动。若虫和成虫还可分泌蜜露，诱发煤污病，虫口密度高时，叶片呈现黑色，严重影响光合作用和外观品质；虫还可作为植物病毒的传播媒介，引发病毒病[1]。烟粉虱被列为当今对农业造成较大灾害的 100种入侵害虫之一,它造成的全球每年经济损失超过 3亿美元[2]。因此，烟粉虱的防治成为研究的热点。烟粉虱的防治方法主要有药剂防治、物理防治、农业防治以及生物防治[3]。化学防治目前仍是烟粉虱防治的主要手段之一 ,但烟粉虱体被蜡粉 ,且对大多数农药以及优乐得等生长调节剂类杀虫剂产生了不同程度的抗性. 面对烟粉虱为害日趋严重而化学防治难以奏效的现状 ,世界许多国家、地区都给予极大关注,从不同方面对其防治方法和控制策略进行了大量研究, 其中生物防治是研究的重点之一. 生物防治主要包括利用天敌昆虫和昆虫病原微生物 ( 主要有虫生真菌 ) 进行防治[4]。本文着重概括了烟粉虱生物防治中的天敌昆虫寄生蜂防治的研究和应用情况。 2.烟粉虱寄生蜂种类 Gerling等列出了桨角蚜小蜂属 11 种、恩蚜小蜂属 34 种、和埃宓细蜂属 2 种[5],浙江大学孟祥锋等总结了烟粉虱的寄生蜂种类 ,共计 56 种, 包括桨角蚜小蜂属15 种、恩蚜小蜂属 35 种、棒小蜂属 2 种、埃宓细蜂属 3 种、阔柄跳小蜂属1种等[6]。根据研究统计，中国烟粉虱寄生蜂资源十分丰富，其种类目前约有 27 种，占世界总数的 54％。其中，中国烟粉虱寄生蜂有桨角蚜小蜂属 6种，恩蚜小蜂属 21 种，主要分布在长江流域以南的福建、广东、广西、台湾和香港等地，其中台湾种类分布最多，有 17 种恩蚜小蜂和 3 种桨角蚜小蜂，占总数的 74.0％；其次是福建，有 12 种恩蚜小蜂和 3 种桨角蚜小蜂，占总数的55.6％[7].下面就主要对恩呀小蜂属、浆角蚜小蜂两个属进行描述。 2.1恩呀小蜂属目前，在已报道的恩蚜小蜂属47 种烟粉虱寄生蜂中，丽蚜小蜂和浅黄恩蚜小蜂已能进行商业化生产[8].并且前者已大量应用于生产实践[9]. 恩蚜小蜂为单寄生性内寄生蜂 ,是异律发育的寄生蜂（异律发育即雌雄蜂有不同的生殖方式和发育规律）。生殖方式是两性产雌, 雌蜂为初寄生蜂 ,雄蜂为自复寄生。

模式生物小结

模式生物摘要：模式生物的研究对于生命科学的发展具有重大意义，是探索生物起源奥秘、治疗疑难杂症以及解密奇特生命现象的重要手段。模式生物（model organism）能够代表一类生物的基本特点，结构相对简单并易于进行试验操作，因此普遍用于遗传学、发育生物学、生理学和分子细胞学等方面的研究。其普遍特点是如：有利于回答研究者关注的问题，能够代表生物界的某一大类群；对人体和环境无害，容易获得并易于在实验室内饲养和繁殖；世代短、子代多、遗传背景清楚；容易进行实验操作，特别是具有遗传操作的手段和表型分析的方法等. 不同的模式生物由于其各自的遗传生长特点及其在进化过程中的地位，而又具有各自独特的特点.下文主要介绍了酵母、斑马鱼、小鼠这三种模式生物，让我们一起来了解了解这些模式生物的特点及研究优势。关键词：模式生物酵母斑马鱼小鼠 1.酵母在各种模式生物中, 酵母是最早被认识、研究得最深入的真核生物之一, 也是分子生物学研究的常用模式物种。酵母与其它真核生物相比，它们的基因组较小（约 12 Mb），基因数目也比较少（约 5 885）。与大肠杆菌类似，它们可以在实验室里快速繁殖，在理想条件下，每次细胞分裂大约 90 min，可以从单个细胞繁殖成克隆群体. 酵母作为模式实验系统最重要的优点是，酵母细胞不仅简单，而且具有所有真核生物细胞的主要特征，如含有一个独立的细胞核、多条线性染色体包装成染色质、细胞质包含了全部的细胞器（如线粒体）和具有细胞骨架结构（如肌动纤维蛋白）等。在酵母系统中，单倍体和双倍体细胞的存在促进了酵母的遗传分析。酵母在单倍体和二倍体的状态下均能生长，并能在实验条件下较为方便地控制单倍体和二倍体之间的相互转换，这种转换是通过交配（单倍体到双倍体）和孢子生成（双倍体到单倍体）来实现的，这对其基因功能的研究十分有利。例如，

2020年(生物科技行业)微生物常规鉴定技术

（生物科技行业）微生物常规鉴定技术

微生物常规鉴定技术壹、形态结构和培养特性观察１、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同壹种的细菌在壹定条件下，培养特征却有壹定稳定性。，以此能够对不同微生物加以区别鉴定。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的壹项重要内容。１）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性仍是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如

青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。革兰氏染色: 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）俩大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这俩类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色步骤：（1）涂片：涂片方法和简单染色涂片相同。（2）晾干：和简单染色法相同。（3）固定，和简单染色法相同（4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟。（5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗。（6）媒染：滴加卢哥氏碘液，媒染1min。（7）水洗：用水洗去碘液。

烟粉虱和温室白粉虱的区别

调查研究烟粉虱和温室白粉虱的区别Ξ 胡敦孝,　吴杏霞 (中国农业大学昆虫学系,北京　100094) 摘要:　对烟粉虱和温室白粉虱形态做了区别,介绍了B型烟粉虱和温室白粉虱在生物生态学上的差异,同时给出了B型烟粉虱特征性银叶反应的鉴定方法。关键词:　烟粉虱;　温室白粉虱;　银叶反应中图分类号:　S43313　S4361429 文献标识码:　B 文章编号:　0529-1542(2001)05-0015-04 长期以来在中国北方温室中发生的粉虱均为温室白粉虱(T rialeurodes vaporariorum Westwood),在露地未见粉虱大发生的报道。但从1995年以后,烟粉虱(Bem isia tabaci G ennadius)在北方部分温室中逐渐蔓延开来,2000年8～11月北京市东南郊的温室蔬菜和露地蔬菜烟粉虱大暴发。烟粉虱又称棉粉虱,甘薯粉虱, 是热带或亚热带大田作物的主要害虫之一。最近十几年来,出现新的B型烟粉虱(又称银叶粉虱Bem isia argentif olii Bellows&Perring),它比其他型烟粉虱有更强的适应能力,造成作物严重减产和品质损害,已引起世界各国关注[1～3]。如何防治这两种粉虱,明确它们在温室、大棚蔬菜、花卉上的生物学特性和相互关系,以及B型烟粉虱在田间棉花、蔬菜、花卉等作物上的发生情况,首先需准确认识这两种粉虱。现把这两种粉虱的主要区别介绍如下。 1　粉虱鉴别的主要特征粉虱的分类鉴定是根据粉虱4龄若虫后期的拟蛹特征来进行,其中拟蛹腹部端节背面的皿状孔的特征是分类的重要依据。分类特征主要包括:皿状孔的形状,隆起或凹陷;盖片的形状;舌状突是否突出盖片外,突出部分的形状,末端是否具有刚毛,是否伸出皿状孔外等等。皿状孔的功能是排泄蜜露。肛门即开口于盖瓣下面与舌状突的基部,盖片和舌状突起控制蜜露最终排出的作用。用于分类的其他拟蛹特征还很多,见图1所标注内容[4]。 2　两种粉虱拟蛹的区别显微镜下观察,烟粉虱的皿状孔为长三角形,舌状突长,匙状,顶端有一对毛,尾沟基部有瘤状突起5～7个(封面图右上)。而温室白粉虱皿状孔长心脏形,舌状突短,上有小瘤状突起多个,轮廊呈三叶草状,顶端有1对刚毛,亚缘体周边单列分布,有60 图1　粉虱拟蛹模式图(仿Matin修改) 多个小乳突,背盘区还对称有4～5个较大的圆锥形大乳突(封面图右下)。在田间,两者的区别也是明显的。烟粉虱拟蛹的外观为椭圆形、边缘自然倾斜,通常无背刺毛,颜色为淡绿色至黄色,有1对红眼睛(封面图中上)。在多毛的叶片上,拟蛹边缘被叶毛挤压成不规则形,拟蛹背面可具刺毛;温室白粉虱拟蛹的外观为立体(边缘垂直)椭圆形,似蛋糕状,颜色为白色至淡绿色,半透明,拟蛹边缘有腊丝,背上通常有发达直立长刺毛5～8对,是由原乳突内蜡腺分泌的(封面图中下),光滑的叶片上也有不具长刺毛的拟蛹。两者成虫羽化均经拟蛹背面的倒“T”形裂缝中脱出。拟蛹壳上有圆形孔的均为该拟蛹寄生蜂的羽化孔。温室白粉虱被寄生的拟蛹为黑紫色,烟粉虱被寄生拟蛹为深褐色。烟粉虱B型与其他型烟粉虱的拟蛹在形态上很难区分,依据个体第4前亚缘毛(ASMS4)存在于种群中比例的大小,前胸气门外的腊缘饰的宽度曾用来区别烟粉虱B型和A Ξ收稿日期:　2001-05-29

烟粉虱成虫在日光温室内的分布和日活动规律

第26卷第5期 2006年5月生态学报ACT A EC O LOGIC A SI NIC A V ol.26,N o.5May ,2006 烟粉虱成虫在日光温室内的分布和日活动规律侯茂林,文吉辉,卢　伟 (中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京　100094) 基金项目:国家社会公益研究专项资助项目(2004DI B4J156);教育部留学回国科研基金资助项目收稿日期:2005211211;修订日期:2006204225 作者简介:侯茂林(1968～),男,湖南人,博士,副研究员,主要从事昆虫生态、生物防治和害虫综合治理研究.E 2mail :maolinhou @https://www.360docs.net/doc/c88366973.html,.致谢:感谢长江大学实习本科生乔飞、胥小平、杨光全参与试验调查;河北省固安县蔬菜管理局于觉民、杜永清在温室使用和工作上提供诸多方便 Found ation item :The project was supported by Program on Research for Public G ood ,M OST of China (N o.2004DI B4J156)and SRF for ROCS ,M OE.of China R eceived d ate :2005211211;Accepted d ate :2006204225 Biography :H OU M ao 2Lin ,Ph.D.,Ass ociate profess or ,mainly engaged in research w ork in the fields of insect ecology ,biological control and IPM.E 2mail :maolinhou @https://www.360docs.net/doc/c88366973.html, 摘要:采用中色粘虫板(黄板)和植株调查方法在河北省固安县日光温室内研究了烟粉虱成虫在黄瓜结瓜盛期(4月下旬～5月上旬)的分布和日活动规律。结果表明,温室北边平均诱集量((66818±66319)头Π(板?d ))是南边((35715±34914)头Π(板?d ))的 1187倍;除8∶00～10∶00以外,其他时段内北边诱集量均显著高于南边;同时,北边植株上烟粉虱成虫数量也显著高于南边。温室东边逐日和各时段诱集量均高于西边,但差异不显著。在垂直方向,烟粉虱成虫在黄瓜所有叶片上均有分布。烟粉虱成虫从6∶00～18∶00各时段均很活跃,但不同时段活动水平存在差异。8∶00～10∶00平均诱集比例最高(2517%±917%),12∶00～14∶00 最低(1312%±512%);8∶00～10∶00的诱集量显著高于其他时段。另外,黄板南面诱集量((35215±18611)头Π(板?d ))显著高于北面诱集量((16017±9014)头Π(板?d ))。对日光温室黄瓜上烟粉虱的监测、成虫诱杀和综合治理的意义进行了讨论。关键词:烟粉虱;日光温室;黄瓜;黄板;活动;分布文章编号:100020933(2006)0521431207　中图分类号:Q96811　文献标识码:A Distribution and daily activities of Bemisia tabaci (G ennadius)adults within solar greenhouse H OU Mao 2Lin ,WE N Ji 2Hui ,LU Wei (Institute o f Plant Protection ,Chinese Academy o f Agricultural Sciences ,Stale K ey Laboratory o f Biology o f Plant Diseases and Insect Pests ,Beijing 100094,China ).Acta Ecologica Sinica ,2006,26(5):1431～1437. Abstract :Distribution and daily activities of Bemisia tabaci adults in solar greenhouse (east 2west oriented )were investigated with yellow sticky traps (Y STs ,25×30cm in size )and by plant inspection in G u ’an C ounty ,Hebei Province from late April to early M ay when cucumber was vig orous fruiting.Results show that the Y STs installed in the north side of the greenhouse caught 11872 fold m ore whitefly adults than those in the south side (66818adults Π(trap ?d )vs 35715adults Π(trap ?d )).Catches within each of the five tw o 2hour intervals from 6∶00to 18∶00by Y STs in the north side were significantly greater than in the south side with an exception of the tw o 2hour interval from 8∶00to 10∶00.Number of B .tabaci adults on plants in the north side was also significantly greater than that in the south side.In the east 2west direction ,catches (daily average and averages within each tw o 2hour interval )in the east side were not significantly different from those in the west side.B .tabaci adults were m ore active at certain periods of time than at others during the day as indicated by the percentages of adults caught on the Y STs at different time intervals ;the highest percentage of adults was caught between 8∶00to 10∶00(2517%)and the lowest ,between 12∶00to 14∶00(1312%).When the Y STs were arranged at east 2west direction ,the surface facing south caught significantly m ore B .tabaci adults than the surface facing north.The current results are discussed with reference to m onitoring ,adult trapping and IPM of B .tabaci on solar greenhouse cucumber.