临床常见细菌的手工鉴定和结果判断
临床常见细菌的手工鉴定和结果判断
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临床常见细菌的手工鉴定和结果判断
一.细菌的鉴定步骤
１、鉴定的概念:将一个未知的菌株按其生物学特性，经过与所有已知菌种进行比较后划归到一个已知菌种的分析过程。
2、对待鉴定的菌种要明确已经获得纯化培养或者该菌种在血平板
上生长良好，有单个菌落可以进行生化试验。(我们这里一般都是预先纯化培养)
３、对待鉴定的菌种进行革兰染色,观察形态(G+c,Ｇ–ｂ,G–c,Ｇ+b）,做触酶，氧化酶实验，然后按科，属，种逐步鉴定。要注意对待鉴定的菌种选择一个合适的鉴定系统,临床常见细菌的快速简单的鉴定系统我们都已经设计好,参考鉴定质控单。
4、按鉴定质控单的要求填写好病人姓名，年龄，性别;标本类型,
标本编号,送检日期等。另外最重要的是要填写好该菌种的菌落形态以及有无溶血。
５、复习革兰染色，触酶实验，氧化酶实验。
⑴.革兰染色:是细菌鉴定过程中最常用最基本最重要的染色方
法。
首先要将待鉴定的细菌涂片,固定（目的：杀死细菌，改变
细菌对染料的通透性)。
第一步:以结晶紫初染(染色液Ⅰ)
第二步:以卢戈氏碘液媒染(染色液Ⅱ)
第三步:用95%乙醇脱色（染色液Ⅲ)
第四步:最后用稀释复红复染（染色液Ⅳ）
⑵．触酶实验(H2Ｏ2实验)：
a.原理:具有过氧化氢酶的细菌能催化双氧水生成水
和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。
b．方法：一般用玻片法，就是挑取菌落在洁净的玻片上涂开，滴加3％过氧化氢数滴,观察结果（立即有大量气泡产生者为阳性,不产生气泡者为阴性)。要注意不能在血平板上进行实验,这样易出现假阳性;另外陈旧菌落要是进行实验可能会导致假阴性结果;还有不能在接种针或环上进行实验。
c.阳性对照用金黄色葡萄球菌，阴性对照用链球菌；试剂要避光置4℃冰箱保存。
ｄ.应用:绝大多数含细胞色素的需氧和兼性厌氧细菌触酶实验阳性,链球菌属阴性。临床常见细菌鉴定实验中我们一般用于区别葡萄球菌属（＋)，微球菌属（+),链球菌属（－）。⑶.氧化酶实验（Ｋovａc实验）:
ａ. 原理：氧化酶又称细胞色素酶，是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。酶并不直接与试剂(1％盐酸四甲基对苯
二胺）起反应，而是首先使细胞色素ｃ氧化，然后氧化型
细胞色素c使对苯二胺氧化，出现深兰色反应。
ｂ. 方法（滤纸法,菌落法,试剂纸片法):
一般我们采用滤纸法,取白色洁净滤纸条,沾取菌落少许，
加试剂一滴,阳性者立即呈粉红色，继而出现深兰色。结
果读取在1０秒钟时为最佳，６0秒内读取可靠。本实验
避免接触含铁物质（假阳性），也不能在含糖培养基上生
长的菌落进行实验（假阴性）。
c．阳性对照用铜绿假单胞菌,阴性对照用大肠埃希菌。
d．应用：奈瑟氏属的菌种均阳性，也用于区别假单胞菌属和肠杆菌，前者阳性,后者阴性。
二.葡萄球菌属的鉴定
葡萄球菌属主要的种有金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌，腐生葡萄球菌。
1、形态与染色：葡萄球菌直径0.５~1．5μm，菌体圆形，呈单
个,成双以及不规簇状排列。染色呈紫色,为革兰阳性球菌。2.与链球菌的区别：触酶实验为阳性,而链球菌阴性;菌体形态链球
菌小于葡萄球菌，呈成双和链状排列的卵圆形的革兰阳性球菌。
3. 与微球菌的区别：触酶实验同为阳性，但微球菌的菌体呈四联
状,要大于葡萄球菌，微球菌葡萄糖氧化发酵实验（操作方法同甘露醇ＯF试验）为氧化型；而葡萄球菌为发酵型。另外呋喃唑酮（即痢特灵50μg/片)敏感实验微球菌为耐药，而金黄色葡萄球菌为敏感。
4.葡萄球菌属的种间鉴定：
⑴.菌落色素与溶血毒素：金黄色葡萄球菌在血平板上呈金黄
色，柠檬色或者淡黄色,而其他葡萄球菌则在血平板上菌落大多数为白色，也有部分为柠檬色或深黄色。
⑵．溶血毒素:金黄色葡萄球菌有α﹑β﹑γ﹑δ溶血毒素，
各毒素的区别是对动物红细胞的溶血范围﹑抗原性及溶血时的温度等。其中以α溶血毒素为主。而其他葡萄球菌大多数不产生溶血毒素，只有表葡有极少能产生溶血毒素。
⑶．血浆凝固酶实验:用与区别金黄色葡萄球菌（阳性）,表皮
葡萄球菌（阴性）,腐生葡萄球菌（阴性）。血浆凝固酶是金葡菌所产生的，有结合凝固酶和游离凝固酶两种。血浆凝固酶检测有两种方法,为玻片法和试管法，我们一般采用玻片法。
a. 操作方法：挑取少许金黄色葡萄球菌菌落在玻片上与血
浆乳化，结合凝固酶能作用于血浆中的纤维蛋白原,从而在金黄色葡萄球菌表面发生凝集,所以我们肉眼能看见凝集颗粒。玻片法主要由结合凝固酶作用产生；游离凝固酶是金黄色葡萄球菌产生的胞外酶,能与血浆中的血浆凝固反应因子(类似凝血酶的一种物质)作用，形成复合物再使纤维蛋白原转化成纤维蛋白而发生凝集。试管法主要由游离凝固酶作用产生。
ｂ. 注意事项:菌落不能太多,否则会影响结果观察；凝固酶阳性要做自凝阴性对照（用生理盐水代替血浆)，只有在阴
性对照也不凝集才能认为是真正的阳性，有一部分葡萄球菌
有自凝现象。
⑷．新生霉素敏感实验:金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌对新生
霉素纸片(5μｇ／片）敏感;而腐生葡萄球菌,微球菌则对之
耐药。抑菌环直径＞16mｍ即为新生霉素敏感。
⑸．甘露醇氧化发酵实验：
a.操作方法:取两支甘露醇微量生化管，在微量管内接种待
检细菌,然后一支加两滴石腊密封，另外一支则不加,放３
7℃孵箱内１8～２4h后观察结果。
b.结果观察：微量生化管变黄色为阳性,也就是能利用甘露
醇。若两管都变黄色则说明是发酵型;其中加石蜡管不变色，
没加石蜡管变黄色则为氧化型；如果两管都不变色则说明该
细菌是不利用甘露醇(产碱型）。
c．应用:金黄色葡萄球菌在需氧和厌氧的条件下都能利用甘
露醇（即两管都变黄色)；表皮葡萄球菌需氧部分产酸,厌氧
条件下不利用甘露醇(即没加石蜡管有部分会变黄色，加石
蜡管不变黄色)；腐生葡萄球菌与表皮葡萄球菌类似。
三.微球菌属的种间鉴定
微球菌属主要的种有易变微球菌,藤黄微球菌，玫瑰微球菌。鉴定生化见下表
微球菌属的种间鉴定
易变微球菌藤黄微球菌玫瑰微球菌
色素产生黄色黄色
粉红色
需氧葡萄糖产酸＋＋
-
硝酸盐还原 + －
－
脲素酶ｄ
ｄ＋
氧化酶－
＋－/＋(弱）
新生霉素敏感S/Ｒ
S R
ｄ：不定S：敏感 R:耐药
四.链球菌属
1．形态和染色:链球菌的直径为0.5～1．0μm，呈成双和链状排列的卵圆形革兰阳性球菌，菌体小于葡萄球菌，无鞭毛，没有芽胞,但有些菌株会形成荚膜。肺炎链球菌呈矛头状,宽端
相对，尖端向外。
2．根据链球菌在血平板上溶血现象的不同分为三种：⑴甲型（α-）溶血，即菌落周围出现较窄的草绿色溶血环;⑵乙型（β－）溶血,即菌落周围出现较宽的透明溶血环；⑶丙型(γ-）溶血，即菌落周围无溶血环。
3. 根据抗原结构(Ｃ多糖抗原）的不同可分为Ａ﹑B﹑C﹑D﹑E
﹑Ｆ﹑G﹑Ｈ﹑K﹑L﹑M﹑N﹑Ｏ﹑P﹑Q﹑R﹑S﹑T等18个群,对人类有致病者９0%属于Ａ群,偶见其他群链球菌致病。
4. 链球菌属的种间鉴定
⑴．乙型溶血链球菌的鉴定:
a. 对杆菌肽(0.０4U／片）(抑菌圈直径≥10mm)敏感：
A群链球菌(主要为化脓性链球菌)。
b．对杆菌肽不敏感,胆汁七叶苷实验阴性，但马尿酸钠水解实验﹑CAＭＰ实验阳性：B群链球菌（主要为无乳
链球菌)。
c. 对杆菌肽不敏感,胆汁七叶苷实验阴性，马尿酸钠水
解实验阴性，CAMP实验阴性：主要为马链球菌﹑类马链
球菌﹑兽疫链球菌;对三者的区别实验要加做海藻糖和
山梨醇实验。
ｄ． CＡＭP实验:将能产生β-溶血的金黄色葡萄球菌在血平板上划一横线接种，再将待鉴定菌于金黄色葡萄
球菌３mm处垂直种一短线,若在有ＣＯ2条件下培养5~6
小时,或无CO2条件下培养1８~24小时,在两细菌连接处
出现一个半月型的加强溶血区即为ＣAMP实验阳性。⑵．甲型溶血链球菌的鉴定：
ａ. 草绿色链球菌:对杆菌肽敏感，对奥普托欣（Optoc hiｎ）不敏感,胆汁溶菌实验阴性,胆汁七叶苷实验阴性,
在高盐中不生长。主要有变异链球菌,轻型链球菌,血链
球菌，唾液链球菌等。
b. 肺炎链球菌：菌体呈矛头状,成双排列，钝端相对，
尖端相背,较葡萄球菌，其他链球菌略大；在血平板上
菌落细小﹑圆形﹑表面光滑﹑灰白色﹑半透明，开始时
菌落呈扁平状,以后中心塌陷，呈脐窝状。与草绿色链
球菌的主要区别是胆汁溶菌实验阳性，对奥普托欣(Ｏp
tochiｎ）敏感。奥普托欣（Oｐｔocｈin）含量为5μ
ｇ/片，抑菌环＞18mm为敏感,＜15mm为不敏感,15～１
8mm应重复实验。
⑶．肠球菌(D群链球菌）的鉴定：
溶血不定,主要是α－﹑γ-溶血;对杆菌肽不敏感,但其特异性实验是胆汁七叶苷实验阳性;若能在６.5％NaＣl 的心浸液肉汤中生长即为D群肠球菌,不能生长为D群非肠球菌。
⑷.链球菌属鉴定的系统生化结果判断
a. 1%美兰牛乳
b．胆汁七叶苷实验：变黑为阳性。
c. PH9.6肉汤实验:变浑浊为能在碱性环境中生长（阳
性)。
d．６.5%NａCl心浸液肉汤：由紫变黄为能在高盐环境中生长(阳性）。
ｅ．精氨酸双水解酶实验：变红色(对照不变色，仍为黄色)为性
五．奈瑟氏菌属和布兰汉菌属
奈瑟氏菌属主要有脑膜炎奈瑟氏菌和淋病奈瑟氏菌；布兰
汉氏菌属只有卡他布兰汉氏菌。两者系需氧革兰阴性球菌。
⑴奈瑟氏菌的生物学特性:革兰阴性球菌，需氧，卵
圆形或肾形，无动力,氧化酶及触酶均阳性。培养时对营养要
求高,能在巧克力平板或有丰富营养的血平板上,在5~1０%C
O2环境中生长。
⑵．鉴定过程：
ａ． DＮA酶实验阳性为布兰汉氏菌，阴性则为奈瑟氏菌。
b. 能在普通血平板上生长的为其他奈瑟氏菌，在巧克力
平板上生长的主要为脑膜炎奈瑟氏菌和淋病奈瑟氏菌。
c．能使麦芽糖氧化分解产酸的是脑膜炎奈瑟氏菌,不利用麦芽糖的是淋病奈瑟氏菌。
⑶．几种主要细菌对葡萄糖﹑麦芽糖﹑蔗糖的氧化分解产酸结果如下：
氧化分解产酸
菌种葡萄糖麦芽糖
蔗糖
淋病奈瑟氏菌 + －
－
脑膜炎奈瑟氏菌 + +
－
粘液奈瑟氏菌＋ +
+
卡他布兰汉菌－－
-
⑷DＮＡ酶实验:
a. 方法：将待鉴定细菌点种于含0.2％DNA的ＤNA琼脂平
板上，培养后用1mmｏl/LHCl覆盖平板,菌落周围出现透
明环者为阳性。
ｂ. 原理:某些细菌能产生DＮA酶,可使DNＡ长链水解成由几个单核苷酸组成的寡核苷酸链；长链DNA可被酸沉淀,
而水解后形成后的寡核苷酸链则可溶于酸，故在ＤNA琼
脂平板加盐酸,可在菌落周围形成透明的溶血环。(肠杆菌
科中只有沙雷氏菌和变形杆菌可产生DNA酶,阳性球菌中
只有金葡菌能产生ＤNA酶。)
六.肠杆菌科
肠杆菌科是一大群生物学性状相似的革兰阴性杆菌，其中对人致病性较强的鼠疫耶尔森菌(现已基本没有流行)和伤寒沙门菌;4类常引起腹泻和肠道感染的细菌（埃希氏菌﹑志贺氏菌﹑沙门氏菌﹑耶尔森氏菌）和8种常导致院内感染的细菌（枸橼酸杆菌属﹑克雷伯菌属﹑肠杆菌属﹑多源菌属﹑沙雷菌属﹑变形杆菌属﹑普罗威登菌属和摩根菌属)。另外还有很多细菌是肠道的正常菌群，但在一定条件下也可致病（条件致病菌）。
实验过程中对于革兰阴性杆菌首先要做氧化酶实验，阴性为肠杆菌科细菌；阳性的为非发酵菌(我们实验室还没有简单的系统鉴定方法,一般要仪器上卡检测）或弧菌科细菌。
1. 肠杆菌科的系统生化
⑴.KIA试验（克氏双糖铁）
组成:乳糖／葡萄糖＝10／1(斜面／高层,其长度最好是
都是2CM）
结果判断：斜面或高层变黄色：阳性；不变色(红色）：
阴性
高层中出现裂隙：产气阳性
高层中出现黑色（FeS）：产H2S阳性
⑵．苯丙氨酸脱羧酶试验
细菌产生的苯丙氨酸脱羧酶使苯丙氨酸氧化脱羧后生成苯丙酮酸,再与10%的FｅCl3试剂产成深绿色反应。(变形杆菌属﹑普罗威登菌属和摩根菌属为阳性，其他为阴性) ⑶.枸橼酸盐试验（碳源利用实验）
在枸橼酸盐培养基中细菌能利用的碳源只有枸橼酸盐，分解后生成碳酸钠，使培养基变碱性，pH指示剂溴麝香草酚蓝由淡绿色变为深兰色,即为枸橼酸盐试验阳性。（埃希氏菌属,志贺氏菌属，爱德华菌属为阴性，其他为阳性）注意:接种时不能被糖，蛋白胨污染，要单独接种）⑷．甲基红(ＭR)试验
细菌分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步分解为甲酸、乙酸、乳酸和琥珀酸等，使培养基的ｐH下降至4.5以下时,加入甲基红指示剂由桔黄色变桔红色为弱阳性；变红色为阳性。
培养基成分:葡萄糖蛋白胨水
试剂：甲基红0.1g,酒精300ｍl,水200ml
主要用于大肠埃希菌(+)和产气肠杆菌（-)的鉴别；常与V-Ｐ实验联合使用,一般情况下两者结果正好相反,但也有例外如奇变两者同为阳性。
⑸．MIＵ（动力－靛基质-尿素）试验
①.动力：在半固体培养基中穿刺接种细菌培养后，若穿
刺线周围有细菌扩散生长，则为动力（+）;清晰则为动力（-）。
②．靛基质试验（吲哚试验)：某些细菌有色氨酸酶,能分
解培养基中的色氨酸生成吲哚。吲哚再与试剂对位二氨基苯甲醛作用形成玫瑰吲哚而呈红色。
③．尿素试验：某些细菌能产生尿素酶，分解尿素产生大
量的氨，使培养基变碱,再使培养基中的指示剂（0.4%酚红)变红色即为阳性。
⑹.硝酸盐还原试验
ＮO３ˉ→→NO2ˉ(大肠）
NO3ˉ→→NH4+
NO3ˉ→→N2(沙雷氏菌属）
试剂甲：对氨基苯磺酸
试剂乙:α-萘胺
观察结果时甲液和乙液要等量加入,立即或10m
ｉｎ内出现红色为阳性。若不变色,则要加入锌
粉：①变红色,说明硝还试验为真阴性②仍不变
色,说明硝还试验真阳性，但原先还原产物不是
NＯ2ˉ。
阴性结果出现时有三种可能:①细菌不能还原
硝酸盐②亚硝酸盐继续分解生成氨或氮③培养
基不适合细菌生长
肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐。
⑺．氨基酸脱羧试验
细菌产生脱羧酶分解氨基酸使其脱羧生成胺和ＣO2,虽然各种细菌所产生的脱羧酶不一定相同，但最后都能生成胺（赖氨酸→尸胺，鸟氨酸→腐胺,精氨酸→精胺)和CO２。然后胺能使培养基变碱性,通过指示剂(溴甲酚紫)由黄变紫即为阳性。对照管（无氨基酸）为黄色。
注意:①微量管接种好后要加石蜡，使培养基造成厌氧环境。(生成的胺更稳定，还能诱导氨基酸脱羧酶的产生）
②对照管如果不显黄色,则结果不能
判断。
应用:除伤寒沙门氏菌，鸡沙门氏菌外,其他沙门氏菌鸟AA，赖ＡＡ均为阳性；除宋氏和鲍氏志贺菌外其他志贺菌也菌为阳性。
⑻．葡萄糖酸盐试验
微量管在培养18～24h后，加班氏试剂，水浴煮沸10min,由兰色变黄绿色到砖红色即为阳性，不变为阴性。
１．肠杆菌的鉴定流程
⑴.根据苯丙氨酸脱羧酶实验:
(＋）:变形杆菌属，普罗威登斯菌属，摩根氏菌属
（－):埃希氏菌属,志贺氏菌属，沙门氏菌属，枸
橼酸杆菌属，爱德华菌属；克雷伯菌属,
肠杆菌属，沙雷氏菌属,哈夫尼亚菌属。
⑵.苯丙氨酸脱羧酶实验阴性，加做葡萄糖酸盐实验
（+）：克雷伯菌属，肠杆菌属,沙雷氏菌属，哈夫尼亚菌属
a．动力（－)：克雷伯菌属，属内种的鉴定主要根据吲哚试验（肺克吲哚实验阴性，三个亚种鉴别
试验IMViC:肺炎－-++，臭鼻-+-d,鼻硬结-+－-) ｂ. 动力（+），DNA酶(+）：沙雷氏菌属
动力(+），DNA酶（－）,枸橼酸盐(＋）:肠杆菌属
(主要是阴沟肠杆菌和产气肠杆菌,前者赖氨酸阴
性，而后中为阳性）
动力(+),DNＡ酶(－）,枸橼酸盐（－)：哈夫尼亚
菌属（－)：加做ＩMVｉＣ(靛基质-甲基红-VP-枸
橼酸盐)试验
a. IＭViC(＋+－-）：大肠埃希菌(H2Ｓ-)或爱德
华菌属（H2Ｓ+）。
ｂ. IＭVｉC（-／＋＋－＋）:枸橼酸杆菌属
⑶．苯丙氨酸脱羧酶实验阳性，根据产H2S可分
（＋):变形杆菌属
属内主要鉴定试验如下
普变奇变产粘
变潘尼氏
尿素酶＋ + ＋ + 鸟氨酸 - + - -
靛基质+ - -
－
麦芽糖 - － +
+
木糖+ ＋－
＋
（-):普罗威登氏菌属,摩根氏菌属
普罗威登氏菌属：鸟氨酸：－;枸橼
酸盐:+（属内鉴定尿素酶及一些碳水
化合物的产酸试验，如甘露醇﹑阿拉
伯糖﹑海藻糖等）
摩根氏菌属:鸟氨酸：+;枸橼酸盐:
－（只有一个种:摩氏摩根氏菌）⑷.志贺氏菌属和沙门氏菌属
这两种菌属在肠道选择性培养基（SS、麦康凯）形成不发酵乳糖的透明或半透明的无色
菌落,但一些沙门氏能产H2S就会形成中心黑色
的菌落,鉴定时在选择性培养基上挑选可疑菌
落进行鉴定。
a.志贺氏菌属
主要系统生化：KＩＡ:K/A(只有福氏6型能产气）, H2S（-）；MIＵ：－+/--；
苯丙:-；枸橼酸盐:-。
报告结果时要根据其血清学的结果鉴定到种,即A群（痢疾志贺氏菌）﹑B群（福氏志贺氏菌）﹑C群（鲍氏志贺氏菌)﹑D群(宋氏志贺氏菌）；我国主要以B群和Ｄ群为主。
b.沙门氏菌属
主要系统生化：KIA：K/AG,H2S(+／－)；MＩU：
＋－－;苯丙:－；枸橼酸盐:－。
伤寒沙门氏菌的抗原结构:菌体抗原（O抗原）,
鞭毛抗原（H抗原），包膜抗原（主要是Vi抗
原）
根据系统生化鉴定到沙门氏菌属后,在根据其
抗原结构的特点，用血清学凝集分到种即可报
告结果。
血清凝集步骤如下：
Ａ-F多价O(+）：
O2,Ha（＋):Ａ群(甲型副伤寒沙门氏菌）
O4，Ｈb(+）:B群(乙型副伤寒沙门氏菌)
O６﹑７，Ｈｃ,Vｉ（+）：Ｃ群（丙型副伤寒沙门氏菌) O9，Hd，Vi（+）：Ｄ群（伤寒沙门氏菌)
Ｏ3﹑10,Ｈｅh（+）:Ｅ群
Ｏ11，Hi（＋）:F群
A-Ｆ多价Ｏ（-)，做Vi血清因子凝集:（+)
浓菌液沸水煮沸3０miｎ,再用A－F多价O血
清定群；(－）继续以A－F以外的多价O血清
凝集分型。
血清凝集注意:确定Ｏ群后, 一定要用H因子再
做凝集；最终结果要以凝到H相后才能报告。
七.非发酵革兰阴性杆菌
非发酵革兰阴性杆菌是指一群不利用葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖﹑需氧或兼性厌氧﹑无芽胞的革兰阴性杆菌。氧化酶试验一般阳性，除不动杆菌属和嗜麦芽假单胞菌外。
非发酵菌按下列试验进行初步分属菌属氧化酶Ｏ-F试验动力MaC Ｃ生长情况触酶
生化指标
1、谷丙转氨酶（ALT）正常参考值0-40IU/L 增高：常见于急慢性肝炎，药物性肝损伤，脂肪肝，肝硬化，心梗，胆道疾病等。 2、谷草转氨酶（AST）正常参考值0-40I/L 增高：常见于心梗，急慢性肝炎，中毒性肝炎，心功能不全，皮肌炎等。 3、转肽酶（GGT）正常参考值0-40IU/L 增高：常见于原发性或转移性肝癌，急性肝炎，慢性肝炎活动期，肝硬化，急性胰腺炎及心力衰竭等。 4、碱性磷酸酶（ALP）正常参考值30-115IU/L 增高：常见于肝癌，肝硬化，阻塞性黄疸，急慢性黄疸型肝炎，骨细胞瘤，骨折及少年儿童。 5、乳酸脱氢酶（LDH）正常参考值90-245U/L 增高：急性心肌梗塞发作后12-48 小时开始升高，2-4 天可达高峰，8-9 天恢复正常。另外，肝脏疾病恶性肿瘤可引起LDH 增高 6、总胆红素（TBIL）正常参考值4.00-17.39umol/L 增高：原发生胆汁性肝硬化急性黄疸型肝炎，慢性活动期肝炎，病毒性肝炎。肝硬化，溶血性黄疸，新生儿黄疸，胆石症等 7、直接胆红素（DBIL）正常参考值0.00-6.00umol/L 增高：常见于阻塞性黄疸，肝癌，胰头癌，胆石症等。 8、游离胆红素（IBIL）正常参考值0.00-17.39umol/L 增高：见于溶血性黄疸，新生儿黄疸，血型不符的输血反应 9、总蛋白（TP）正常参考值55.00-85.00g/L 增高：常见于高度脱水症（如腹泄、沤吐，休克，高热）及多发性骨髓瘤。降低：常见于恶性肿瘤，重症结核，营养及吸收障碍，肝硬化，肾病综合症，烧伤，失血。 10、白蛋白（ALB）正常参考值35.00-55.00g/L 增高：常见于严重失水而导致血浆浓缩，使白蛋白浓度上升。降低：基本与总蛋白相同，特别是肝脏，肾脏疾病更为明显，见于慢性肝炎、肝硬化、肝癌、肾炎等。如白蛋白30g/L,则预后较差。 11、球蛋白(GLO) 正常参考值15-35g/L 增高：常见于肝脏疾病（如慢性肝炎、肝硬化、肝癌、肾炎等），网状内皮系统疾病，如多发性骨髓瘤，单核细胞性白血病，慢性感染，如化脓性感染、梅毒、麻风、结缔组织病。 12、白/球比值(A/G) 正常参考值1.00-2.50。 减低：增高：常见于肝脏疾病（如慢性肝炎、肝硬化、肝癌、肾炎等）。如治疗后白蛋白提高至正常或接近正常，A/G 比值接近正常，表示肝功能有改善。故检测血清白蛋白、球蛋白及其比值，可估计肝脏疾病的病情核预后。 13、血糖(GLU) 正常参考值3.4-6.2 mmol/L 增高：某些生理因素（情绪紧张，饭后1-2 小时）及注射肾上腺素后，病理性增高见于各种糖尿病，慢性胰腺炎，心梗，甲亢，垂体前叶嗜酸性细胞瘤，颅内出血，颅外伤等。 14、前白蛋白(PAB) 正常参考值170-420mg/L 可作为肝功能早期损害的指标和检测机体营养不良的指标。增高：甲状腺机能亢进，各种胶原病、肾变病等。降低：急性肝炎、肝硬化、恶性肿瘤、蛋白吸收不足等。 15、羟丁酸脱氢酶(HBDH) 正常参考值90-250IU/L 增高：作为急性心梗诊断的一个指标，与LDH 大致相同，在急性心梗时此酶在血液中维持高值，可达2 周左右。
细菌鉴定中常用的九个生化反应
１、糖酵解试验 不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。 试验方法：以无菌操作，用接种针或环移取纯培养物少许，接种于发酵液体培养基管，若为半固体培养基，则用接种针作穿刺接种。接种后，置36±1.0°C培养，每天观察结果，检视培养基颜色有无改变（产酸），小倒管中有无气泡，微小气泡亦为产气阳性，若为半固体培养基，则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡，有时还可看出接种菌有无动力，若有动力、培养物可呈弥散生长。 ２、淀粉水解试验 某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。 试验方法：以18~24h的纯培养物，涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板（一个平板可分区接种，试验数种培养物）或直接移种于淀粉肉汤中，于36±1°C培养24~48h，或于20°培养5天。然后将碘试剂直接滴浸于培养表面，若为液体培养物，则加数滴碘试剂于试管中。立即检视结果，阳性反应（淀粉被分解）为琼脂培养基呈深蓝色、菌落或培养物周围出现无色透明环、或肉汤颜色无变化。阴性反应则无透明环或肉汤呈深蓝色。 淀粉水解系逐步进行的过程，因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间，培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。培养基pH必须为中性或微酸性，以pH7.2最适。淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱，因而以临用时制备为妥。 3 、明胶液化试验 有些细菌具有明胶酶（亦称类蛋白水解酶），能将明胶先水解为多肽，又进一步水解为氨基酸，失去凝胶性质而液化。 试验方法：挑取18~24h待试菌培养物，以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度或点种于平板培养基。于20~22℃培养7~14天。明胶高层亦可培养于36±1℃。每天观察结果，若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、静置冰箱中待其凝固后、再观察其是否被细菌液化，如确被液化，即为试验阳性。平板试验结果的观察为在培养基平板点种的菌落上滴加试剂，若为阳性，10~20min后，菌落周围应出现清晰带环。否则为阴性。 4 、石蕊牛奶试验有些微生物能水解牛奶中蛋白质酪素，酪素水解可有石蕊牛奶检测，石蕊牛奶培养基由脱脂牛奶和石蕊组成，是浑浊的蓝色。酪素水解成氨基酸和肽后培养基就会变得透明。石蕊牛奶也常用来检测乳糖发酵，有酸石蕊会转变为粉红色，过量的酸可引起牛奶的固化（凝乳形成）。氨基酸分解会引起碱性反应使石蕊变为紫色。某些细菌能还原石蕊使试管底部变为白色。 试验方法：取两支石蕊牛奶培养基试管，以无菌操作分别接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌，置35℃恒温箱中，培养24~38h。观察培养基颜色。石蕊酸性时为粉红色，碱性为紫色，还原后为无色。 ５、靛基质试验 某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合，形成玫瑰吲哚，为红色化合物。 试验方法：将待试纯培养物小量接种于试验培养基管，于36±1C培养24h时后，取约2ml培养液，加入Kovacs氏试剂2~3滴，轻摇试管，呈红色为阳性，或先加少量乙醚或二甲苯，摇动试管以提取和浓缩靛基质，待其浮于培养液表面后，再沿试管壁徐缓加入Kovacs 氏试剂数滴，在接触面呈红色，即为阳性。 6 、硫化氢（H2S）试验 有些细菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物，而产生硫化氢气体，硫化氢遇铅盐
临床常用细菌感染指标87626
临床常用细菌感染指标 感染性疾病是目前临床上常见并严重危害人类健康的重要疾病之一，而细菌和病毒是最多见的、最主要的两种病原微生物，临床上快速、准确的诊断和鉴别对病人的治疗十分重要。在大多数情况下，尚无完善的、实用的、快速的病原学诊断技术以实现对细菌和病毒快速分离和鉴定，而目前常用鉴定感染指标有（1）血WBC和N分类；（2）血沉ESR；（3）白细胞介素-6（IL-6）；（4）血清hs-CRP；（5）PCT降钙素原。 一、白细胞计数和中性粒细胞分类比例 目前，WBC、N%作为传统感染指标，因其检测方法简便经济，是广大医院尤其是基层医院感染鉴别的主要指标，具有一定临床价值。WBC 计数方法简便、快捷, 目前仍被认为是鉴定细菌感染的常规项目。但是,白细胞及中性粒细胞计数对于细菌感染诊断的准确性较低,在局部细菌感染和脓毒症时二者有所升高，但在重症细菌感染组二者均下降，白细胞降至正常范围内，中性粒略有升高，因此二者均不能很好的反应细菌感染的严重程度。因为全身细菌感染时外周血WBC计数既可升高，又可减少，受许多因素的影响。另外剧烈运动、进食、寒冷刺激、情绪波动等以及采血部位不同和采血技术水平也可使血象出现较大差异[1]。所以WBC 计数和N%用于细菌性感染的诊断敏感性不够, 有一定的局限性。 血沉（ESR）是指在一定条件下红细胞沉降的速度。 绝大多数急性或慢性感染、恶性肿瘤、组织变性和坏死性疾病都能使血浆球蛋白和纤维蛋白原产生变化，或使异常蛋白进入血液，引起血沉加速。此外，贫血和月经期及妊娠三个月后也可以使血沉加速。因此，血沉是一种非特异性试验，不能单独用以诊断任何疾病。白细胞介素-6（IL-6） IL-6 是具有多种生物活性的细胞因子，由212 个氨基酸组成的多功能糖蛋白。在感染和炎症时，上皮细胞可分泌细胞因子IL-6 和IL-8，是局部和系统免疫反应的重要因子。在败血症患者体内的细菌感染产生炎症，刺激机体的T、B 细胞，单核细胞和内皮细胞分泌大量的IL-6。IL-6 通过促进巨噬细胞表达细胞黏附分子、组织因子，诱导肝细胞合成超敏C反应蛋白(hs- CRP)，使超敏CRP浓度提高。但国外资料表明，除细菌因素外，其它非感染因素也会引起IL- 6的非特异性升高，从而限制了IL- 6对诊断脓毒血症的诊断价值。而PCT 与hs- CRP则正好可以弥补IL- 6这一缺点。 另外，IL-6与急性胰腺炎疾病严重程度正相关，故IL-6水平能很好地评估急性胰腺炎的程度。 hs-CRP C －反应蛋白早于1930 年发现，是一种能与肺炎球菌C 多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白。近年来，随着检测技术的不断发展，检测超敏CRP（HS-CRP）方法的引入，CRP不仅可作为一种急性炎症的标志物，而且可区别在正常范围内低程度炎症反应中CRP 的水平。HS-CRP已被证实是由慢性炎症引发心血管疾病的独立危险因素，检测其浓度对心血管疾病的干预及预后起重要作用被临床重视。 C 反应蛋白（CRP）是肝脏细胞在IL-6 的作用下分泌产生的一种非特异性急性时相蛋白，在应激情况下血清CRP 水平增高，在任何组织损伤和感染的急性期均可升高[2]。除细菌感染外，病毒感染、慢性炎症反应、梗死、急性创伤或手术、烧伤、免疫复合物沉积等都可以使CRP升高。健康人血清中CRP 含量很低，当机体受到细菌入侵引起炎症时，血中浓度其峰值可达基础值的数十倍至数百倍，并不受年龄、性别、体温及贫血等因素的影响，被认为是鉴别细菌感染与病毒感染的一个首选指标[3]。据沈国森等实验研究报道显示[4]，细菌性
临床常见细菌手工鉴定和结果判断
临床常见细菌的手工鉴定和结果判断 一．细菌的鉴定步骤 1、鉴定的概念：将一个未知的菌株按其生物学特性，经过与所有已知菌种进行比较后划归到一个已知菌种的分析过程。 2、对待鉴定的菌种要明确已经获得纯化培养或者该菌种在血平板上生长良好，有单个菌落可以进行生化试验。（我们这里一般都是预先纯化培养） +––+b）G，G，c，对待鉴定的菌种进行革兰染色，3、观察形态（Gc，Gb做触酶，氧化酶实验，然后按科，属，种逐步鉴定。要注意对待鉴定的菌种选择一个合适的鉴定系统，临床常见细菌的快速简单的鉴定系统我们都已经设计好，参考鉴定质控单。 4、按鉴定质控单的要求填写好病人姓名，年龄，性别；标本类型，标本编号，送检日期等。另外最重要的是要填写好该菌种的菌落形态以及有无溶血。 5、复习革兰染色，触酶实验，氧化酶实验。 ⑴．革兰染色：是细菌鉴定过程中最常用最基本最重要的染色方法。首先要将待鉴定的细菌涂片，固定（目的：杀死细菌，改变细菌对染料的通透性）。 第一步：以结晶紫初染（染色液Ⅰ） 第二步：以卢戈氏碘液媒染（染色液Ⅱ） 乙醇脱色（染色液Ⅲ）95%第三步：用．
第四步：最后用稀释复红复染（染色液Ⅳ） ⑵．触酶实验(HO实验)：22a.原理：具有过氧化氢酶的细菌能催化双氧水生成水和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。 b.方法：一般用玻片法，就是挑取菌落在洁净的玻片上涂开，滴加3%过氧化氢数滴，观察结果（立即有大量气泡产生者为阳性，不产生气泡者为阴性）。要注意不能在血平板上进行实验，这样易出现假阳性；另外陈旧菌落要是进行实验可能会导致假阴性结果；还有不能在接种针或环上进行实验。 c.阳性对照用金黄色葡萄球菌，阴性对照用链球菌；试剂要避光置4℃冰箱保存。 d.应用：绝大多数含细胞色素的需氧和兼性厌氧细菌触酶实验阳性，链球菌属阴性。临床常见细菌鉴定实验中我们一般用于区别葡萄球菌属（+），微球菌属（+），链球菌属（－）。 ⑶．氧化酶实验（Kovac实验）： a. 原理：氧化酶又称细胞色素酶，是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。酶并不直接与试剂（1%盐酸四甲基对苯二胺）起反应，而是首先使细胞色素c氧化，然后氧化型细胞色素c使对苯二胺氧化，出现深兰色反应。 b. 方法（滤纸法，菌落法，试剂纸片法）： 一般我们采用滤纸法，取白色洁净滤纸条，沾取菌落少许，结继而出现深兰色。阳性者立即呈粉红色，加试剂一滴， 果读取在10秒钟时为最佳，60秒内读取可靠。本实验避免接触含铁
临床常见细菌及其特点
临床常见细菌及其特点 一般分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 一、革兰氏阳性球菌 主要包括葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属等 凝固酶阳性常见金黄色葡萄球菌 （一）葡萄球菌属表皮葡萄球菌 人型葡萄球菌 凝固酶阴性溶血葡萄球菌 腐生葡萄球菌 A：凝固酶阳性 金黄色葡萄球菌 (1)生物学特点：凝固酶阳性，β溶血，耐盐。 (2)传染源与传播途径：；金黄色葡萄球菌可存在于人类鼻咽部粘膜和皮肤表面，可经 手，打喷嚏，皮肤伤口传播。 (3)疾病：①金黄色葡萄球菌引起的食物中毒， ②化脓性感染中最常见的病原菌。皮肤和皮下组织感染如：疖痈、脓肿等 ③严重的肺炎
④脑膜炎、心内膜炎等甚至败血症、脓毒血症等全身性感染、同时也 可引起中毒性休克综合症 ⑤接受血液透析治疗的晚期肾脏疾病患者特别容易感染金葡菌。 ⑥金葡菌尤其耐药金葡菌感染是引起住院患者感染和死亡的主要原因 之一 (4)耐药性：耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA），对各类青霉素，头孢菌素和其 他β-内酰胺类均交叉耐药。mecA基因是MRS特有的耐药基因。 B：凝固酶阴性
（二）链球菌
（三）肠球菌属原属链球菌 常见为粪肠球菌和屎肠球菌 1、生物学特性：溶血或不溶血，触酶阴性 2、传染源和途径：胃肠正常菌群，伤口感染，机会感染的致病菌 3、致病：已作为医院感染重要的致病菌，国外上升为第3位的院感菌，泌尿道感染 比较常见 4、耐药性：（1）对头孢菌素，苯唑西林，单环类天然耐药，对青霉素敏感性较链球 菌低， 耐药由β-内酰胺类亲和力降低的低分子量的PBPs引起 （2）耐药性最严重的为耐万古霉素的VRE表型共有VanA、VanB、 VanC、VanD、VanE、VanG六型，最常见为VanA、VanB (3).屎肠球菌的耐药性较粪肠球菌高。
常见细菌及图片
肺炎克雷伯菌 1.形态结构：肺炎克雷伯菌肺炎亚种为革兰阴性杆菌，无鞭毛，无芽孢，标本直接涂片 或在营养丰富培养基上的营养物可见菌体外有明显的荚膜。 2.培养特性：兼性厌氧，营养要求不高，在初次分离培养基可形成较大、凸起灰白色黏 液型的菌落。菌落大而厚实、光亮，相邻菌落容易发生融合，用接种蘸取时可挑出长丝状细丝。在麦康凯琼脂（MAC）培养基上形成较大的黏液型、红色的菌落，红色可扩散至菌落周围的培养基中。在伊红美蓝琼脂（EMB）上为大、粘稠、红色、易融合成一片的菌落。在血琼脂上为灰白色、大而黏、光亮且形成菌丝的菌落。 3.生化特性：氧化酶阴性，葡萄糖产酸产气，动力阴性，吲哚阴性，脲酶阳性。 金黄色葡萄球菌 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4。平板上菌
落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。在EMB培养基上基本不生长。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。 大肠埃希氏菌 1．形态与染色特性 菌体两端钝圆、中等大小，杆状(有时呈卵圆形)、1—3um X 0.6um、周生鞭毛，能运动，不产生荚膜，革兰氏阴性，而且一般是对碱性染料着色较好，但有时两端着色较浓，要与巴氏杆菌区分开来。 2．培养特性 1)需氧及兼性厌氧菌 2)对营养的要求不高，在普通琼脂上就生长良好，在15C-45℃范围内均可生长，但最适生长温度为37℃，最适pH为7.2—7.4。
临床常见细菌及其特点
欢迎阅读 临床常见细菌及其特点 一般分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 一、革兰氏阳性球菌 主要包括葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属等 凝固酶阳性常见金黄色葡萄球菌 (一)葡萄球菌属表皮葡萄球菌' 人型葡萄球菌W | | // I I 、■■ 凝固酶阴性溶血葡萄球菌 腐生葡萄球菌 -I -———■ A:凝固酶阳性 金黄色葡萄球菌 J ~I (1) 生物学特点：凝固酶阳性，卩溶血，耐盐。 (2) 传染源与传播途径：；金黄色葡萄球菌可存在于人类鼻咽部粘膜和皮肤表面，可经手，打喷嚏，皮 :.」W j IA 肤伤口传播。 *1 I # 曲 (3) 疾病：①金黄色葡萄球菌引起的食物中毒， I I ②化脓性感染中最常见的病原菌。皮肤和皮下组织感染如：疖痈、脓肿等 ③严重的肺炎 ④脑膜炎、心内膜炎等甚至败血症、脓毒血症等全身性感染、同时也可引起中毒性休 克综合症 ⑤接受血液透析治疗的晚期肾脏疾病患者特别容易感染金葡菌。 ⑥金葡菌尤其耐药金葡菌感染是引起住院患者感染和死亡的主要原因之一
（4）耐药性：耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA ），对各类青霉素，头抱菌素和其他卩-内酰胺类均交叉耐药。mecA基因是MRS特有的耐药基因。 B :凝固酶阴性
途径呼吸道飞沫传播（一般 不具 高度传染性，因健康人 患后 很少发病） 大叶性肺炎（血色或铁 锈色 痰）、脑膜炎和中耳炎 常见 致病菌 “链球菌 喉” 猩红热 链球菌脓疱病 坏死性筋膜炎 疾病 其它：继发急性肾 小球肾炎、风湿热 胃肠道胃肠道正常菌群 耐药 性 对青霉素耐药菌株日渐 增多 erMs基因存在 红霉素，克林霉素 耐药。 成人：妊娠期妇女、 尿道感染导致羊膜炎 子宫内膜炎。 新生儿：败血症、脑膜炎 膜炎。对于妊娠妇女 <37周的早产或羊膜破 裂>18小时者应给予 青霉素治疗可减少 新生儿发病 对青霉素，头孢菌素 敏感率较高 对庆大霉素耐药 心内膜炎（继发于 牙外伤） 三）肠球菌属原属链球菌 常见为粪肠球菌和屎肠球菌
临床生化指标参考手册2017版
临床生化指标参考手册 生化指标是临床上最常规的检测项目，包括肝功能、肾功能、血脂类、糖代谢、心肌类、特定蛋白、胰腺类及电解质等方面，通过检测血液或尿液中的各种蛋白质、酶类、多糖、脂质及多种离子等，为临床医生的确诊和医疗方案的制订提供依据。生化指标项目繁多，下面小编为大家整理汇编了最具临床意义的生化指标。由于各医院所采用的指标参考区间并不统一，故在此没有列出，以免产生不必要的困惑和误导。 肝功能检查指标临床意义 指标名称缩写临床意义 丙氨酸氨基转移酶ALT增高：可见于肝胆疾病，传染性肝炎，肝癌，肝硬变活动期，中毒性肝炎，脂肪肝，胆管炎和胆囊炎等；心血管疾病：心肌梗死，心 肌炎等。 天门冬氨酸氨基转移酶AST血清中AST可来源于肝细胞，各种肝病可引起血清中AST的升高，中毒性肝炎时可更高。血中AST 显著增高时，在排除心肌病变 后，应考虑肝线粒体大量破坏、肝细胞坏死。血清转氨酶增高程度 与病变程度平行。 转氨酶下降可能是疾病恢复的标志，但也可能是肝细胞坏死殆尽的 结果。 天门冬氨酸氨基转移酶/丙氨酸氨基转移酶AST/ AL T 急性肝炎时多小于1；慢性肝炎多大于1；酒精性肝病时常大于2， 原发性肝癌时AST/ ALT > 1 (约半数> 3)。严重肝细胞坏死时，A ST/ ALT 比值升高。 比值为0.31~0.63者预后较佳，1.20~2.26者往往进展为暴发性肝 衰竭而死亡。比值愈大肝损害愈严重。 AST线粒体同工酶ASTm来自线粒体者为ASTm，来自胞浆中可溶性者为ASTs，肝细胞坏死时ASTm 显著升高。 ASTm 长期升高表示病变转为慢性。胆道疾病时，如胆石症引起 梗阻，虽肝细胞无病变，仍可见ALT 轻或中度增高，一般不超过3 倍，且梗阻解除即于24~48小时大幅度下降，若同时有肝细胞损害 则可更高。 原发性肝癌时AST/ ALT > 1 (约半数> 3)，慢性肝病尤其ALT 无 明显升高，ASTm 处于高值者，应疑及肝癌。 谷胱甘肽S转移GST测定GST 是反映急性肝细胞损伤的极敏感指标。当GST 活性下降2017-11-20CACLP体外诊断资讯
细菌鉴定方法
1.2.1 形态学特征 按照东秀珠和蔡妙英编《常见细菌系统鉴定手册》（1999），中科院微生物所编著《一般细菌常用鉴定方法》（1978）的方法进行鉴定。芽孢杆菌属鉴定到种，参照了蔡妙英等译《芽孢杆菌属》（1980）的方法。 （1）革兰氏染色：挑选少许菌苔，涂布于干净玻片的蒸馏水中，风干固定，结晶紫染色（结晶紫2g，草酸铵0.8g，95%乙醇20 ml，加水至100 ml）1min，水洗后碘液（碘1g，碘化钾2g，水300 ml）作用1min，水洗，脱色，用番红O 液染3min，水洗，风干，光学显微镜观察。 （2）鞭毛染色：将16~24h菌龄的菌苔在载玻片上的水滴中轻蘸几下，将玻片倾斜，使菌液缓慢流到另一端，然后平放在空气中干燥。干燥后滴甲液（丹宁酸5g，FeCl3 1.5g，15%福尔马林2ml，1%NaOH 1ml，蒸馏水100 ml）染6~10min，水洗，干燥后，用乙液（2%AgNO3溶液）加热复染30min，蒸馏水冲洗，干燥，镜检，菌体为深褐色，鞭毛为褐色。 （3）运动性：半固体琼脂穿刺法，将菌种接在可使鉴定菌生长良好的培养基中，其中含0.3~0.6%的琼脂。适温培养，运动性可用透射光目测，如生长菌只生长在穿刺线上，边缘十分清晰，则表明鉴定菌无运动性；如生长菌由穿刺线向四周呈云雾状扩散，其边缘呈云雾状，则表示鉴定菌有运动性。 （4）芽孢染色：孔雀绿染色法。按革兰氏染色涂片后，用饱和的孔雀绿水溶液（约7.6%）染20 min，水冲洗后在用0.5%番红O复染20~30s，水洗，吸干，镜检。芽孢呈绿色，菌体和芽孢囊呈微红色。 （5）抗酸染色：常规涂片，石碳酸复红（10%碱性复红乙醇饱和液10 ml，5%石碳酸水溶液100 ml）加热染色5 min，倾去染液用酸性乙醇脱色，吕氏美蓝（2%亚甲基蓝乙醇饱和液30 ml，0.01%KOH 100 ml。）复染2min，水洗，吸干，镜检。 （6）荚膜染色：在载片一端滴一滴无菌水，取少许菌苔在水滴中制成悬液。取一滴墨汁与菌悬液混合，并用另一载片之一端将此水滴在载片上刮成薄膜风干。用纯甲醇固定1min，加0.5%番红O液数滴滴于涂片上，冲去残余甲醇，并染30s，然后倾去染液，立即吸干，镜检。 1.2.2 培养及生理特性 （1）菌落形态：用划线法将菌种接在平板培养基上，适温培养1~2d，出现单菌落开始观察，包括形状和大小，边缘，表面，隆起形状，透明度，菌落和培养基的颜色等。 （2）生长温度和耐热性：将菌种转接到几支试管中，分别在不同温度下培养，每处理2管，目测生长情况。
临床常用感染指标检测的意义
龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/cc10595915.html, 临床常用感染指标检测的意义 作者：郝小云 来源：《健康必读（上旬刊）》2019年第07期 【中图分类号】R759.1;;;;;;【文献标识码】B; ;;;;【文章编号】1672-3783（2019）07-0278-02 前言 疾病感染是我们日常生活中常见的情况，从医学上来说，感染是指细菌、病毒、真菌或寄生虫等病原体侵入人体导致局部组织或全身性的炎症反应。感染可无明显的症状，也可出现机体体温升高、发热等临床症状，而要确定感染的类型、严重程度则需要对一些感染相关指标进行检测。通过检测某些指标，可以帮助我们明确机体的感染类型、病原体种类、感染严重程度、治疗情况和预后情况，在疾病的诊疗中起着非常重要的作用。本文对临床常用的感染指标进行介绍，解答关于感染指标检测的意义。 1 常见的感染指标有哪些？ 血常规中白细胞（WBC）及其分类指标、C反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）、降钙素原（PCT）、内毒素、血液标本真菌抗体、病毒性肝炎标志物等指标都是临床常见的感染指标。白细胞中还包括中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞等指标的分类检测。这些指标有些是用于检测细菌感染的，有些是用于检测真菌感染的，有的是用于检测病毒感染的，他们的作用各不相同，下面将对这些常用的感染检测指标一一介绍。 2 临床常用感染指标检测的意义 2.1 白细胞及其分类计数 成人白细胞计数（WBC）正常参考值为（3.5～9.5）×109/L，儿童正常参考值（5～12） ×109/L，高于此范围多与化脓性细菌性炎症有关，低于此范围多与病毒性感染有关。中性粒细胞增多是白细胞增多的主要原因，多与化脓性感染、血液病、部分寄生虫感染有关;中性粒细胞减少可能与某些细菌或病毒感染有关;中性粒细胞核左移常见于各种病原体感染、一过性核右移一般出现在感染恢复期。中性粒细胞中如果出现毒性变化如空泡变性、中毒颗粒、大小不均、杜勒小体等情况，则可能与严重的化脓性感染有关，提示可能存在败血症。淋巴细胞的绝对值为（1.1～3.2）×109/L，增多时常见病毒感染、血液疾病、急性传染病恢复期;减少则与感染性疾病无明显相关性;如果出现异型淋巴细胞则代表可能存在传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、流行性出血热等。嗜酸性粒细胞绝对值（0.02～0.52）×109/L，增多时多见于寄生虫病、血液病等;减少时多见于急性传染病。嗜碱性粒细胞绝对值（0～0.06）×109/L，增多时多
常见细菌鉴定
常见细菌鉴定 平装: 331页 正文语种: 简体中文 开本: 16 ISBN: 9787117119610 条形码: 9787117119610 尺寸: x x cm 重量: 540 g 百分网内容简介 《临床常见细菌、真菌鉴定手册》着重对院内感染的常见细菌、真菌及其耐药性检测和研究进行了细致阐述。细菌耐药也是当前临床面临的重大难题之一，抗生素滥用是造成耐药性不断增长的主要原因。微生物是进化史上最成功的例子，存在几十亿年了，新兴的微生态学理论认为，人类和微生物之间是适应而不是对抗。院内感染菌株绝大部分是条件致病菌，当机体免疫力低下、抗生素使用不合理破坏了正常菌群，导致微生态失衡情况下，引起感染的发生、发展。我从事微生态研究多年，深刻认识到只有从生态平衡角度，将传统的单纯“杀菌”理论转变为“杀菌”加“促菌”理论，保护人体的正常菌群，维护人体微生态平衡，提高机体免疫能力，才是控制感染的根本办法。 百分网目录
上篇临床细菌学 第一章需氧及兼性厌氧，革兰染色阴性杆菌、球杆菌、球菌及弯曲菌和螺旋菌 第一节心杆菌属 第二节放线杆菌属、艾肯菌属、金氏杆菌属和色杆菌属 第三节弗朗西丝菌属 第四节布鲁菌属 第五节军团菌属 第六节假单胞菌属 第七节伯克霍尔德菌属、窄食单胞菌属、丛毛菌属和食酸菌属 第八节不动杆菌属 第九节莫拉菌属 第十节金黄杆菌属和威克斯菌属 第十一节奈瑟菌属 第十二节鲍特菌属 第十三节产碱杆菌属、无色杆菌属、苍白杆菌属和根瘤菌属 第十四节弧菌属 第十五节气单胞菌属 第十六节肠杆菌科
第十七节巴斯德菌属 第十八节弯曲杆菌属和弓形菌属 第十九节螺杆菌属 第二十节巴尔通体属 第二十一节钩端螺旋体属 第二十二节疏螺旋体属 第二十三节密螺旋体属 第二章需氧革兰染色阳性球菌及杆菌 第一节葡萄球菌属 第二节链球菌属 第三节肠球菌属 第四节气球菌属及其相关菌属 第五节李斯特菌属和丹毒丝菌属 第六节棒状杆菌属及相关菌属 第七节芽胞杆菌属和其他需氧芽胞杆菌 第八节分枝杆菌属 第九节奴卡菌属、红球菌属 第三章专性厌氧菌 第一节消化球菌属、消化链球菌属、嗜胨菌属、微金菌属和厌氧球菌属 第二节韦荣菌属、氨基酸球菌属和巨形菌属 第三节丙酸杆菌属、放线菌属、双歧杆菌属、真杆菌
临床常见细菌感染及选择药物
临床常见细菌感染及药物选择 1.一般软组织感染：痈、疖、蜂窝织炎、乳腺炎、丹毒、淋巴管炎等。常见病原菌是金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌。 首选药物是青霉素、苯唑西林；其次可以考虑氨基糖苷类（庆大霉素、阿米卡星等）、第一代头孢、万古霉素；严重感染用头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林舒巴坦、氟喹诺酮类、碳青霉烯类。 2.软组织混合感染：即需氧菌和厌氧菌共同参与的感染，如坏死性筋膜炎、厌氧类杆菌窝织炎、肌肉坏死、糖尿病足及咬伤感染等，治疗上要兼顾到厌氧菌。 I消化链球菌感染：首选药物是青霉素；其次可以选择克林霉素；严重感染选择阿奇霉素、万古霉素等。 H大肠杆菌感染：首选广谱青霉素（氨苄西林、哌拉西林等）、头孢二三代；其次可以选择氨基糖苷类（庆大霉素、阿米卡星等）、头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林舒巴坦、氟喹诺酮类；严重感染选择碳青霉烯类。 皿肠杆菌属（产气、阴沟）：首选抗绿脓B -内酰胺类（哌拉西林、 头孢他定、头孢吡肟等）＋氨基糖苷类（庆大霉素、阿米卡星等）；其次可以选择头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林舒巴坦、氟喹诺酮类；严重感染选择碳青霉烯类。 以上感染必须考虑到厌氧菌感染，可以加用替硝唑、甲硝唑。 3.梭菌性肌肉坏死及蜂窝织炎和破伤风均为厌氧梭状芽孢杆菌感染，使用普通的青霉素即可。 4.烧伤创面感染：主要是由金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、肠道杆菌引起的感
染。对轻度感染可选用庆大霉素、哌拉西林、氟喹诺酮类等，耐庆大霉素菌株可予阿米卡星等耐氨基糖苷钝化酶的品种替代。严重感染可予三代头孢或哌拉西林联合氨基糖苷类，或予碳青霉烯类药物治疗。绿脓杆菌感染易引起肉芽肿，药物难以渗入，故较重感染治疗应保证有足够的疗程。形成生物膜时疗效降低，此时，可加用大环内酯类等抑制生物膜形成的药物。 5.人工关节或胸骨劈开术后：常见病原菌为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等。 MSS/和MSCN：首选苯唑西林；其次可以选择头孢一代、万古霉素；严重感染用头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林舒巴坦、氟喹诺酮类、碳青霉烯类。 MRSA首选万古霉素；其次可以选择替考拉宁、严重感染用夫西地酸、利福霉素。 MRCNS首选万古霉素；其次可以选择左氧氟沙星；严重感染再加用利福霉素。 6.骨折复位及内固定术后、慢性骨髓炎、化脓性关节炎等：骨和关节的化脓性感染最主要为金黄色葡萄球菌，其次为表皮葡萄球菌、链球菌、肠道杆菌， 用药时要兼顾到使用能够比较多得进入到骨组织的抗生素。 7.脑脓肿（原发性或源自临近感染、创伤或手术后）、脑膜炎、脓胸：脑膜炎、脑室炎、脑脓肿等得颅脑创伤的手术感染，最主要的是金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和链球菌，少数时候也有肠道杆菌和厌氧菌。选药要考虑到药物能够进入血脑屏障而达到感染组织。脑膜炎球菌对青霉素及氨苄西林高度敏感，可首选较大剂量青霉素治疗脑膜炎球菌所致的脑膜炎及败血症。也可予二、三代头孢菌素治疗对青霉素过敏的患者，可用红霉素、阿奇霉素等大环内酯类或林可霉素类替换青霉素治疗。严重的化脓性感染、脑膜炎等可予二、
临床常用感染指标
临床常用感染指标 C 反应蛋白 CRP（C反应蛋白）是一种急性时相蛋白，由肝细胞合成，任何伴有侵袭性细菌感染或组织损伤的患者血清中的浓度都会明显升高。 CRP在炎症发生后6-8h可升高，24～48h达到峰值，可至正常值的20～500倍。CRP的升高程度与细菌感染的程度呈正相关。但随着病变的消退、组织损伤的修复，CRP迅速降至正常水平，因此被誉为炎症标志物。 CRP在病毒感染时不升高，病毒感染时病毒于细胞内增殖，缺乏暴露磷脂蛋白质，不能和CRP结合在一起。 因此，可用于鉴别细菌与病毒感染，细菌感染时CRP升高、病毒感染时不升高。 但除细菌感染外，急性排异反应、心血管系统疾病及手术均可引起CRP升高。并且患者的年龄、营养状况和激素水平等都会影响CRP产生影响，所以临床应用时应参考更敏感的指标综合判断。 降钙素原 降钙素原（PCT）是无激素活性的降钙素前肽物质，其本身没有激素活性，而降钙素（CT）却有降低血钙浓度的作用。 在机体正常情况下，仅由甲状腺 C 细胞和肺的神经内分泌细胞分泌产生PCT；但在机体受到微生物感染时，几乎所有实质组织细胞均可合成PCT。 因此，在炎症刺激特别是严重细菌感染或脓毒血症状态下，机体各个组织、多种细胞类型均可产生PCT 并释放进入血液循环系统，此时，它在血浆中的水平显著升高。 PCT 升高对细菌感染导致的脓毒症特异性很高，可作为诊断脓毒症和鉴别严重细菌感染的生物标志物。 同CRP 相似，PCT 在病毒性疾病时不增高或仅轻度增高，因此，PCT 亦可作为细菌感染和病毒感染的鉴别诊断指标。另外，PCT 在作为鉴别病毒性疾病时，其敏感度和特异性均高于CRP、红细胞沉降率等传统标记物。
不常见细菌的快速鉴别方法
不常见细菌的快速鉴别方法 一. 不常见革兰阴性菌 1. 布氏杆菌属 布氏杆菌属是一类革兰阴性细小杆菌，牛、羊、猪等动物最易感染。人类接触带菌动物或食用病畜及其乳制品，均可被感染。布氏杆菌病广泛分布世界各地，我国部分地区曾有流行。布氏杆菌属分为羊、牛、猪、鼠、绵羊及犬布氏杆菌6个种，20个生物型。中国流行的主要是羊、牛、猪三种布氏杆菌，其中以羊布氏杆菌病最为多见。 布氏杆菌属细菌为非抗酸性，无芽胞，无荚膜，无鞭毛，呈球杆状(见图1)。血琼脂(BAP)上为透明或半透明、光滑且有光泽菌落。此细菌不在麦康凯琼脂上生长。布氏杆菌属细菌尿素阳性，触酶、氧化酶阳性，而吲哚阴性。由于该菌属细菌具有强的传染性，因此一旦怀疑应送往LRN B级参考实验室进行确认。 2. 空肠弯曲菌 空肠弯曲菌是一种人畜共患病病原菌，可以引起人和动物发生多种疾病，并且是一种食物源性病原菌，认为是引起全世界人类细菌性腹泻的主要原因。其致病因素包括粘附、侵袭、产生毒素和分子模拟机制等四个方面，通过分子模拟机制可以引起最严重的并发症一格林一巴利综合征。空肠弯曲菌可以通过产生细胞紧张性肠毒素、细胞毒素和细胞致死性膨胀毒素而致病。空肠弯曲菌对红霉素、新霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感，但近年发现了不少耐药菌株及多重耐药性菌株。 空肠弯曲菌菌体轻度弯曲似逗点状(见图2)。菌体一端或两端有鞭毛，运动活泼，在暗视野镜下观察似飞蝇。有荚膜，不形成芽胞。微需氧菌，在含2.5～5%氧和10% CO2的环境中生长最好，在正常大气或无氧环境中均不能生长，最适温度为37～42℃。本菌在普通培养基上难以生长，在凝固血清和血琼脂培养基上培养36小时可见无色半透明毛玻璃样小菌落，单个菌落呈中心凸起，周边不规则，无溶血现象。空肠弯曲生化反应不活泼，不发酵糖类，不分解尿素。可还原硝酸盐，氧化酶和触酶为阳性。能产生微量或不产生硫化氢，甲基红和v-p试验阴性，枸椽酸盐培养基中不生长,在弯曲菌中马尿酸呈阳性反应具有重要鉴定价值。
细菌鉴定中常见的生理生化反应
实验五细菌鉴定中常见的生理生化反应 16111202班史政伟1120122681 一、实验目的 1)了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。 2)了解不同细菌对不同含碳、含氮化合物的分解利用情况。 3)了解细菌在不同培养基的不同生长现象及其代谢产物在鉴别细菌中的意义。 二、实验原理 各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物存在差别。以此用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生理生化反应。 1.糖（醇）类发酵试验 不同的细菌含有发酵不同的糖（醇）的酶，因而发酵糖（醇）的能力各不相同，产生的代谢产物也不同：有的产酸产气，有的产酸不产气。指示剂溴甲酚紫，pH5.2黄色—pH6.8紫色，当发酵产酸时，培养基将由紫变黄。产气可由杜氏小管中有无气泡来证明。 2.甲基红试验（M.R试验） 甲基红试验，pH4.4红色～pH6.2黄色，是用来检测由葡萄糖产生的有机酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。有些细菌分解糖类产生丙酮酸，丙酮酸进一步反应形成甲酸、乙酸、乳酸等，使培养基的pH降低到4.2以下。有些细菌在培养的早期产生有机酸，但在后期将有有机酸转化为非酸性末端产物，如乙醇、丙酮酸等，使pH升至大约6。 3.Voges-Proskauer试验（伏-普试验，V.P. 试验） 伏-普试验是用来测定某些细菌利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物的能力。某些细菌分解葡萄糖成丙酮酸，再将丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在碱性条件下，被氧化为二乙酰，二乙酰与培养基中所含的胍基作用，生成红色化合物为V.P.反应阳性。 4.靛基质试验 某些细菌，如大肠杆菌，能产生色氨酸酶，分解蛋白胨中的色氨酸，产生靛基质，靛基质与对二甲基氨基苯甲酸结合，形成玫瑰色靛基质。 5.硫化氢试验 某些细菌能分解含硫的氨基酸，产生硫化氢，硫化氢与培养基中的铁盐反应，形成黑色的硫化铁沉淀，为硫化氢试验阳性。 6.明胶液化实验 明胶在25度以下可维持凝胶状态，以固体状态存在，而在25度以上时明胶就会液化。有些微生物可产生一种成为明胶酶的胞外酶，水解这种蛋白质，而使明胶液化，甚至在4 度仍能保持液化状态。 7.柠檬酸盐利用试验 有的细菌如产气杆菌，能利用柠檬酸钠为碳源，因此能在柠檬酸盐培养基上生长，并分解柠檬酸盐后产生碳酸盐，使培养基变为碱性。此时培养基中的溴麝香草酚蓝指示剂 pH6.0(黄)～7.6(蓝)，由绿色变为深蓝色。 8.淀粉水解实验 细菌水解淀粉的过程可以通过底物的变化来证明，即用碘测定不再产生蓝色。 三、实验仪器、材料和用具 实验仪器：32度恒温培养箱、4度冰箱； 微生物材料：大肠杆菌、变形杆菌、枯草杆菌、产气杆菌、待鉴定的未知菌的平板单菌落；
常用医学检查指标及其临床意义(完整版)
常用医学检查指标及其临床意义 医学检查指标为诊断疾病的重要依据，亦是疾病治疗中需要监控的指标。药师在参与设计临床药物治疗方案时，要善于学习和掌握常用医学检查的基础数据，并了解其指标的主要临床意义，以便于与医师沟通，观察疾病的病理状态和进程，对药物治疗方案和疾病的监测指标作出判断，提高疗效和减少药品不良反应的发生机率。 第一节血常规检查 血液是在中枢神经的调节下由循环系统流经全身各器官的红色粘稠液体，血液在血管内流动而形成血流，具有输送营养、氧气、抗体、激素和排泄废物及调节水分、体温、渗透压、酸碱度等功能。一般成人的血液占体重的8%～9%，总量为5000～6000ml，血液的pH为7.35～7.45，比重为1.050～1.060。 血液中的成分可分为血浆（无形成分）和细胞（有形成分）两大部分。血浆为去细胞后的液体部分，占血液总量的55%～60%。血浆中除去91%～92%的水分外，还包括有蛋白质、葡萄糖、无机盐、酶、激素等；而血细胞在正常情况下主要包括红细胞、白细胞、粒细胞、淋巴细胞、血小板等。血液检查的内容通常包括红细胞、白细胞、血红蛋白及血小板等参数的检查。 一、白细胞计数（WBC） （一）简述 白细胞是无色有核细胞，正常的外周血液中常见有中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。 参考范围：成人末梢血：（4.0～10.0）×109／L 成人静脉血：（3.5～10.0）×109／L 新生儿：（15.0～20.0）×l09／L 6个月～2岁儿童：（5.0～12.0）×109／L （二）临床意义 1.白细胞减少： （1）疾病：主要见于流行性感冒、麻疹、粒细胞缺乏症、再生障碍性贫血、白血病等疾病。 （2）用药：应用磺胺药、解热镇痛药、部分抗生素、抗甲状腺制剂、抗肿瘤药等。 （3）特殊感染：如革兰阴性菌感染（伤寒、副伤寒）、结核分枝杆菌感染、病毒感染（风疹、肝炎）、寄生虫感染（疟疾）。 （4）其他：放射线、化学品（苯及其衍生物）等的影响 2.白细胞增多： （1）生理性 主要见于月经前、妊娠、分娩、哺乳期妇女，剧烈运动、兴奋激动、饮酒、餐后等。新生儿及婴儿明显高于成人。 （2）病理性： 主要见于各种细菌感染（尤其是金葡菌、肺炎链球菌等化脓菌感染）、慢性白血病、恶性肿瘤、尿毒症、糖尿病酮症酸中毒以及有机磷农药、催眠药等化学药的急性中毒。 影响白细胞计数的因素较多，其总数高于或低于正常值均为异常现象，必要时应结合白细胞分类计数和白细胞形态等指标综合判断。 二、白细胞分类计数（DC） 白细胞是一个“大家族”，正常血液中白细胞以细胞质内有无颗粒而分为有粒和无粒两大类，前者粒细胞根据颗粒的嗜好性分为中性、嗜酸性、嗜碱性三种；后者包括单核细胞、淋巴细胞。每类细胞的形态、功能、性质各异。 参考范围： 中性粒细胞：0.50～0.70（50%～70%） 嗜酸性粒细胞：0.01～0.05（1%～5%） 嗜碱性粒细胞：0～0.01（0%～l%） 淋巴细胞：0.20～0.40（20%～40%） 单核细胞：0.03～0.08（3%～8%） （一）中性粒细胞 中性粒细胞为血液中的主要吞噬细胞，在白细胞中占的比例昀高，在急性感染中起重要作用，具有吞噬和杀灭病毒、疟原虫、隐球菌、结核分枝杆菌等的作用。中性粒细胞计数增减的临床意义如下。 1.中性粒细胞增多 （1）急性、化脓性感染：
细菌常用生理生化鉴定
细菌鉴定中常用的生理生化反应 录入时间:2009-8-13 15:12:12 来源：中国生命科技论坛 1、实验原理 （1）细菌生化试验 各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物或多或少地各有区别，可供鉴别细菌之用。用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生化反应。 （2）糖（醇）类发酵试验 不同的细菌含有发酵不同糖（醇）的酶，因而发酵糖（醇）的能力各不相同。其产生的代谢产物亦不相同，如有的产酸产气，有的产酸不产气。酸的产生可利用指示剂来判定。在配制培养基时预先加入溟甲酚紫［P HS . 2 （黄色）一6 . 8 （紫色）] ，当发酵产酸时，可使培养基由紫色变为黄色。气体产生可由发酵管中倒置的杜氏小管中有无气泡来证明。 （3）甲基红（Methylred ）试验（该试验简称MR 试验） 很多细菌，如大肠杆菌等分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸再被分解，产生甲酸、乙酸、乳酸等，使培养基的pH 降低到4 . 2 以下，这时若加甲基红指示剂呈现红色。因甲基红指示剂变色范围是pH4 . 4 （红色）一pH6 . 2 （黄色）。若某些细菌如产气杆菌，分解葡萄糖产生丙酮酸，但很快将丙酮酸脱梭，转化成醇等物，则培养基的pH 仍在6 . 2 以上，故此时加入甲基红指示剂，呈现黄色。 （4）大分子物质代谢实验． 靛基质（口引睬）试验 某些细菌，如大肠杆菌，能分解蛋白质中的色氨酸，产生靛基质（叫睬），靛基质与对二甲基氨基苯甲醛结合，形成玫瑰色靛基质（红色化合物）。 硫化氢试验 某些细菌能分解含硫的氨基酸（肌氨酸、半肌氨酸等），产生硫化氢，硫化氢与培养基中的铅盐或铁盐，形成黑色沉淀硫化铅或硫化铁。为硫化氢试验阳性，可借以鉴别细菌。 明胶液化实验 某些细菌具有胶原酶，使明胶被分解，失去凝固能力，呈现液体状态，是为阳性。淀粉水解试验（在紫外诱变中做，本实验不做） 细菌对大分子的淀粉不能直接利用，须靠产生的胞外酶（淀粉酶）将淀粉水解为小分子糊精或进一步水解为葡萄糖（或麦芽糖），再被细菌吸收利用，细菌水解淀粉的过程可通过底物的变化来证明，即用碘测定不再产生蓝色。 （5）有机酸盐及氨盐利用试验 柠檬酸盐利用试验 柠檬酸盐培养基系一综合性培养基，其中柠檬酸钠为碳的唯一来源。而磷酸二氢按是氮的唯一来源。有的细菌如产气杆菌，能利用柠檬酸钠为碳源，因此能在柠檬酸盐培养基上生长，并分解柠檬酸盐后产生碳酸盐，使培养基变为碱性。此时培养基中的溟廖香草酚蓝指示剂由绿色变为深蓝色。不能利用柠檬酸盐为碳源的细菌，在该培养基上不生长，培养基不变色。 2、实验仪器，材料和用具 （1）实验仪器 37OC 恒温培养箱、20OC 恒温培养箱（室温代替）。 （2）微生物材料 大肠杆菌、变形杆菌、枯草杆菌、产气杆菌这四种菌种的斜面各1 支。 （3）试剂