细胞房的使用和操作规范 - 复件
细胞房的使用及操作制度
一、操作人员制度
1.新进细胞房操作前，必须首先了解细胞培养的基本要求，进行必要的培训。
培训考核合格后授予其细胞室使用权限。
2.为保持无菌室清洁，进入无菌室必须在缓冲间更换专用拖鞋、工作服、戴好
帽子和口罩。
3.进入细胞间后随手关门。缓冲间拉门与无菌室拉门不能同时开放，否则失去
缓冲间作用。
4.无菌室室内禁止不带口罩开口说话，禁止大声喧哗。
5.专用工作服、拖鞋禁止在室外穿用，定期清洗并消毒，请勿将其带出无菌室。
6.个人配制的试剂需标明试剂名称、配制日期及配置人，冰箱内试剂摆放位置
都要固定化，并作好标记。禁止交叉乱用，乱放，造成可能的污染扩大，所有人员未经本人许可不得使用他人的物品和位置。
7.个人用灭菌物品必需注明消毒人、物品名称、消毒日期。灭菌后物品放在指
定位置，高压灭菌物品可存放7-14天，过期不能再用，需重新包装灭菌。
二、无菌操作
1.实验人员的无菌准备
1)实验前应用肥皂洗手。
2)更换专用拖鞋、工作服、戴好帽子和口罩。
3)75%酒精消毒手掌、手背。
2.操作台中的无菌操作(此处为操作考核中需要注意的要点内容)
1)生物安全柜使用前用经紫外照射灭菌30分钟，实验人员打开通风在通风
条件下进行实验操作。
2)在通风条件下，先点燃酒精灯（点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，
液面应占瓶高1/3-2/3），再用酒精棉擦拭超净台桌面（尽可能的大于自己所用台面），同时保持工作区域的宽敞。注：消毒用75%的酒精，酒精灯用95%以上的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。
3)超净台虽经紫外照射除菌，但操作时仍应靠近酒精灯火焰。
4)操作时应尽量减少手臂的运动，尽可能避免左右手交叉（近手操作）：把
需要有用的工具和试剂尽可能放在手边，以酒精灯为界，左手用的东西放在酒精灯的左边，右手用的东西放在右边。例如，一个右手操作者要从试剂瓶里吸取液体，则移液枪应放在右手，而枪头与试剂瓶都应放在左手边。
5)带入操作台中的物品，应注意：经高压灭菌烘干的物品以及各种装培养基、
缓冲盐等的瓶子、试管架、胶塞等应先用75%酒精擦拭或喷洒后再放入超净台。进入操作台操作前的手掌手背以及将要放入培养箱的培养瓶，培养板和培养皿都应用喷洒75%酒精。
6)要养成用镊子操作的习惯：拿取饭盒中的各类物品，尽可能用镊子去夹取；
对于小的物品，如瓶盖、枪头、EP管，应避免用手直接去拿取。
7)保持试剂瓶与桌面成约45℃时打开盖子或移取液体：这样可以尽量减少
空气的污染以及在移液时产生最少的气溶胶。
8)在打开试剂瓶、拿取瓶盖、镊子及玻璃移液管等时都要用火烧下：灼烧不
是为了灭菌，只需在火焰上燎1~3秒即可。灼烧一下瓶口和移液管等，使颗粒固定在表面和制造一个向上的气流，以减少掉落颗粒的数量。培养基等试剂长时间不用时需要盖上瓶盖。
9)打开的瓶子，应放在酒精灯火焰旁，瓶盖反放朝上。禁止在打开试剂瓶包
括瓶盖的正上方进行实验操作（包括跨越敞开的开试剂瓶上方去拿取东西）。禁止手触碰到瓶口或瓶盖。
10)将移液枪头中的液体打入培养瓶和离心管时应是悬空打入。将培养瓶中
的液体倒入废液缸以及将枪头打入废液缸时，培养瓶和枪头需要与废液缸保持一定的距离。当枪头的尖端碰触到任何非灭菌物品包括瓶口螺纹的外缘时，必须重新换取新枪头。当液体泼溅时应该立即用75%的乙醇擦拭该区域。
11)用PBS清洗细胞后需用移液枪吸净培养瓶中剩余的PBS，以免造成对胰
酶的稀释；加入培养基终止胰酶消化后也需用移液枪吸净培养瓶中剩余的培养基以减少胰酶对细胞的损伤。
12)实验结束后，将操作台中的个人物品拿出操作台，并将公共物品摆放整
齐，用酒精棉擦拭桌面，将废液缸中的废弃物倒入垃圾桶，向废液缸内喷
入酒精消毒后放入操作台内。打开安全柜的紫外灯。
3.培养箱的使用规则
1)培养箱专供细胞培养用，严禁放入其他物品，以防污染。
2)从培养箱取放物品前，用75％酒精清洁双手（或手套）。培养瓶皿放入
培养箱前，用75％酒精消毒表面，尽量缩短开门时间和减少开门次数。
当培养箱的门处于打开状态时禁止说话。
3)细胞培养板或培养皿请勿堆砌过高，以防打翻。从培养箱拿取细胞时轻
拿轻放，动作迅速，随手关紧培养箱门。未经允许，禁止翻看、移动他
人细胞或样品，如有特殊需要的，请联系实验室负责人协调。
4)如不慎有培养基洒出，需及时清理消毒并更换底部托盘中的灭菌水，以
防污染，同时通知仪器负责人。
5)普通培养中的细胞，若非实验特殊需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生
长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。
6)原代细胞需放置在原代培养专用培养箱培养，不得放置于其他培养箱。
7)培养箱在使用时，室内温度要保持在28℃以下，特别是夏天需要24小
时开空调，否则设备会超温报警。二氧化碳气瓶分压阀的读数应为
0.04-0.06；二氧化碳气瓶总阀正常读数为5-6，低于该数值说明余量不多，
需尽快更换新的气瓶；未经允许请勿调节安全阀。
8)如果报警显示Add Water，表示设备里的水套缺水，应用蒸馏水并使用附
件提供的漏斗一直加到设备不报警为止，如果显示Replace HEPA，只是
提醒需要更换箱内高效过滤器，不是表示设备有问题，如果不想更换可
以照常使用。
9)实验人员应经常注意检查培养箱温度、CO2气体量是否相符设定值。密
切注意培养箱内的增湿盘，定期更换无菌水并进行消毒。密切注意培养
箱内情况，如出现霉变、菌斑、支原体和衣原体感染或其他明显染菌迹
象，应立即通知管理员及其它使用者。
4.显微镜使用规则
1)显微镜使用前应保持载物台的清洁。
2)使用显微镜观察完细胞后，应将显微镜的灯泡亮度开到最小。离开细胞
房时或较长时间不需使用时，应及时关上电源，延长灯泡寿命。尽量避
免频繁开关显微镜电源。
5.冰箱、试剂等相关操作规则
1)从冰箱取放物品动作要迅速，关门时要检查门是否关好。严禁长时间敞
开冰箱门。
2)各人存放于冰箱内的培养液、生化试剂、样品要注明姓名、配制日期、
样品名称，特殊试剂需获得细胞房管理人员同意后方能放置。不得使用
他人的培养液或其他生化试剂。
3)分装好的血清长时间保存于-20℃，使用前放于4℃预解冻。原则上解冻
好的血清应全部配成含血清的培养基备用，若有剩余，则暂存于4℃并
尽快使用。尽量不要使用他人开过的血清，以免交叉污染。
4)细胞室内的冰箱空间有限，尽量仅放置使用频率较高的试剂。请勿将
一些闲置试剂，污染试剂长期放置在细胞室。
5)工作人员会定期对冰箱进行清理，发现未封口、无标记、过期试剂等
违规物品将全部清除出去，并且查找试剂配置人给予警告。
6.进入细胞室物品控制
1)所有进入细胞室的物品需经过灭菌处理，酒精表面消毒。
2)严禁将可能含有污染物或病原菌的实验物品带入细胞室。
3)细胞室内仅放置少量实验必须耗材即可，不得整箱搬入，出现洁净室内
物品堆积状况。
4)细胞室内储物柜的物品放置由相关管理人员安排，并做标记。
三、细胞培养、换液、消化传代
每个人在第一次接触一种新的细胞株时，应对其细胞形态、生长速度有个明确的认识，这个过程可能需要一周左右（指熟练的人）。细胞形态的观察可以先参考一些资料，比如ATCC网站上或一些文献中的照片。体外培养的细胞，按其生长方式主要分为贴壁细胞与悬浮细胞两大类。这两大类细胞在细胞换液与传代时的方式截然不同。
1.培养基颜色的观察
培养基的pH直接影响到细胞的生长状况，大多数细胞的最适pH为7.4左右。
pH6.5以下为柠檬黄
pH6.5为黄色
pH7.0为橙色
pH7.4为红色
pH7.6为酚红
pH7.8为紫色
2.血清的使用
血清可以提供细胞生长所必需的生长因子和营养元素。我们常用的血清为小牛血清，培养基中血清的浓度为10%。具体选择什么样的血清及血清的浓度，应根据细胞生长的特点而定，有些细胞可能需要胎牛血清，而有些细胞特别是转化后的细胞，对于血清的需要量是很低的，在0.5%左右。
A：血清一般在-20℃保存；
B：体积较大的血清，融化后应分装后，-20℃保存；
C：对于未灭活的血清，在常温下溶解后，56℃水浴中灭活30min，再分装于-20℃保存。
3.细胞换液
细胞何时换液，依赖于细胞生长速度、细胞密度等。一般情况下，2~3天更换一次。同时也可以根据培养基的颜色进行判断。培养瓶从孵箱中拿出来后，最好竖立着放，不要平放（培养基易冲出瓶盖，导致染菌），包括在超净台中的操作。
1)贴壁细胞
A:倒掉旧的培养基；
B:用PBS清洗：加入PBS，轻轻摇荡，倒掉（这步并非必须的，
视细胞生长情况而定，一般在消化传代后第一次换液时，最好用
PBS清洗）；
C:加入新的培养基（一般中小号培养瓶，4~6ml左右）。
2)悬浮细胞
A:培养瓶中培养基不多时：直接加入新培养基（培养瓶可以竖立着
放）；
B:培养瓶中培养基过多时：将细胞连同培养基一起转移到离心管中，
1000rpm，5min；倒掉上清液，加入新的培养基到离心管中，吹打
成细胞悬液，转移到培养瓶中继续培养。
4.细胞消化传代
贴壁细胞一般采用消化传代法；部分贴壁生长细胞（半贴壁细胞）可直接吹打即可传代；悬浮细胞可采用直接吹打或离心后传代。
贴壁细胞：
A：倒掉培养基；
B：加入PBS清洗（必须，清洗掉含血清的培养基，一方面可以节约消化液，又能尽快的消化细胞，并且好控制消化时间）；
C：加入消化液以覆盖住细胞为准，不宜过多，37℃孵箱中消化3~5min左右；
D：显微镜下观察，发现细胞质回缩、细胞间隙增大后（细胞变圆），立即加入2ml含血清的培养基终止消化，弃去；
E：重新加入2ml含血清的培养基，用移液管或移液枪吸取瓶内培养液，反复吹打瓶壁细胞，吹打时应从瓶底一边开始到另一边，
以确保瓶壁上细胞均被吹打下来。（吹打不宜过猛，避免过多的泡
沫形成）
F：吹打均匀，细胞计数后，吸取合适数量的细胞悬液，至新培养瓶中，再补足培养基（50ml培养瓶可加4-6ml培养基）。
悬浮细胞：操作同上述悬浮细胞换液，仅是在细胞计数后，将合适数量的细胞悬液，分配到新培养瓶中。
注意：不应待细胞长得特别满的情况下，消化细胞，因为这时细胞的活力并非最好。应选择在对数生长期的细胞（密度大约为80%-90%）进行消化传代或冻存。
四、细胞计数
1.血球计数板的使用
血球计数板一般有二个小室，每个室中细刻9个1mm2大正方形（见下图），其中上下左右4个角落之正方形再细刻16个小格，深度均为0.1mm。血球计数板上方盖上盖玻片后，每个大正方形之体积为1mm2×0.1mm=1.0×10-4ml。使用时，计数4大正方形内之总的细胞数目，求平均值，再乘以104，即为每ml
溶液中细胞数目，再乘以稀释倍数，即可得出母液中细胞的浓度。
2.计数
A：用酒精棉将计数板与盖玻片擦干净；
B：盖玻片平稳地盖在计数板的中间，盖玻片与计数板的边缘相距
0.5cm左右；
C：用移液枪取20μl左右细胞悬液，滴加到盖玻片与计数板的边缘空隙处，让液体通过毛细管现象自然吸附进盖玻片下计数板的小
室中；
D：显微镜下统计4个方格中的细胞数目，求平均值，即可得到细胞悬液中细胞浓度，（比如：四个方格中的细胞数分别是15、18、17
和14，平均为16，那么细胞浓度为16×104=1.6×105个/ml）。
E：或者吸10μl细胞悬液到一离心管中，加入10μl台盼蓝染液（0.4％）或苯胺黑，活细胞不会被染色，加入染液后就可以在显微镜下区
别活细胞和死细胞。如细胞密度太高，可稀释后计数。
（细胞悬液的细胞数）/ml＝（四个大格子细胞数/4）×104×稀
释倍数
F：用完后用纸或酒精棉擦净计数板上的液体。
注意：
A:计数时应注意一个原则“压上不压下，压左不压右”，也就是说计数时，如果将方格上方边缘线上细胞统计了，那么方格下方边缘线上
的细胞就不用统计了。如下图，如果上面压边线的白色球统计了，
那么下方压边线的黑色球就不用统计在内了。
B:吸取的液体不宜过多，否则计数不准，要靠盖玻片下毛细管作用将液体填充到小室中。
C:细胞一定要吹打均匀后才可计数。
3.试剂的配制
4％台盼蓝母液：称取4克台盼蓝，加入少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100毫升，用滤纸过滤，4℃保存。
使用液：使用时，用PBS稀释母液至0.4％即可。
五、细胞的复苏与冻存
1.细胞复苏
1)将水浴锅的温度设定为37℃，当水浴锅中的水的温度达到37℃时；
2)从-70℃或液氮罐中迅速取出所需细胞冻存管，放入水浴锅的水中，快
速摇晃，使其尽可能快的融化（最好控制在1min左右）；
3)完全融化后，立即从水中取出。取一离心管，向离心管中加入4ml的
培养基后把1ml冻存的细胞加入，1000rpm，离心5min；
4)将离心管中上清液倒掉，加入培养基，轻轻吹打；
5)再将细胞悬液转移至培养瓶中，加入充足的培养基，吹打均匀，孵箱
培养。（此时可以用台盼蓝染色后记录下细胞的存活率，细胞存活率=
（细胞总数-死亡细胞数）/细胞总数，一般要大于70%。
2.细胞冻存
1)取对数生长期的细胞（细胞密度约为90%左右），用PBS清洗一遍，
加入消化液，消化，含血清培养基终止消化后，离心。
2)在超净台中，倒掉上清液，加入冻存液（培养基：血清：DMSO=7:2:1），
吹打均匀，将细胞悬液转移至冻存管中（体积不宜过满，加入冻存液
时需要缓慢加入，且冻存液要在4度冰箱预冷，因为DMSO加入血
清后会放热，在高温条件下DMSO对细胞的毒性大）。
3)用胶布封好冻存管接口处，在冻存管中表明细胞名称、细胞代数、冻
存日期、操作人名字。
4)将冻存管放入4℃冰箱30min，再转移至-20℃，放置2h，最后转移
至-70℃存放（有条件的话，在-70℃过夜后，可将细胞转移至液氮中
长期保存）。也可将冻存管用棉花包裹后，放入泡沫盒中，直接放入
-70℃。总之，冻存时掌握一个原则，慢冻（降温速度为1～3℃/min）。
两种方法可对比使用。
附表1
无菌技术核对表
工作区域
细胞培养通风橱设置是否正确？
细胞培养通风橱所在区域有无气流和直接出入通道？
工作台面是否整洁？是否仅仅放置了实验所需物品？
开始工作前用70%乙醇擦拭工作台面了吗？
是否定期对培养箱、冰箱、冰柜及其他实验室设备进行清洁和消毒？
个人卫生
您洗手了吗？
您穿戴个人防护设备了吗？
如果您留了长发，您把头发扎在后面了吗？
您是用移液器操作液体吗？
试剂和培养基
您采用适当的方法对实验室中配制的所有试剂、培养基和溶液进行灭菌了吗？
在将容器、培养基、培养板和培养皿放入工作台面之前，您用70%乙醇擦拭其外部了吗？
试剂瓶、培养瓶及其他容器不使用时盖紧了吗？
是否已将所有培养板均放入无菌重复密封袋中？
是否有试剂外观浑浊？是否被污染了？试剂中有漂浮颗粒吗？有难闻气味吗？有颜色异常吗？如果出现上述情况，是否已对其进行去污并丢弃？
操作
您操作时否缓慢、谨慎、注意无菌技术了？
在将移液器、试剂瓶和培养瓶放入细胞培养通风橱之前，用70%乙醇擦拭其表面了吗？
是否将盖子口朝下放置在工作区域？
您是使用无菌玻璃吸管或者一次性无菌塑料吸管操作液体吗？
无菌吸管是否仅仅使用一次以免交叉污染？
您是否注意到避免使吸管尖端碰触到任何非灭菌物品包括瓶口螺纹的外缘？
发生液体泼溅时是否立即吸干并用70%乙醇擦拭该区域？
以上核对表列出了一些建议和方法，指导您切实使用无菌技术。有关无菌技术的深入介绍，请参阅《动物细胞培养：基本技术手册：基本技术手册（Freshney,2000）》
细胞房的维护及仪器操作规程
一、日常检查项目：
1）气流压力表（＞10Pa）监测：主要是观察操作间屏障系统是否正常工作，如正常状态操作间是出于正压状态，操作间门外的气流压力表值应＞10Pa。
2）气瓶气压检查（CO2/N2）：主要是观察气体量的使用情况，主要观察总压力表，如果气量充足，压力值一般为5MPa左右
3）培养箱报警情况：主要是观察培养箱状态是否正常，如不正常则会出现红色的报警提示，如漏水、高温、低压等提示。
4）生物安全柜报警情况：主要是观察生物安全柜状态是否正常，如不正常红色报警提示，如气流故障、照明及紫外灯故障灯
5）紫外灯及日光灯等异常情况：主要观察紫外及日光灯能否正常开启，使用过程中是否有频繁闪烁等故障现象
6）冰箱异常情况:主要观察冰箱使用过程中，是否有高温等报警提示
二、每周清洁/检查项目
1）缓冲间地面吸尘：请先吸尘器（放于238房间）及洗头擦干净后再拿入缓冲间。
2）缓冲间地面消毒：请用专用拖布，浸泡于2%新洁尔灭消毒液后，擦拭地面。3）缓冲间物品消毒：请用专用抹布，浸泡于1%新洁尔灭消毒液后，擦拭实验物品（如冰箱、烘箱、水浴锅、液氮罐、不锈钢架、实验台面等物品）。
4）水浴锅换水：请将用过一周后的水倒掉，然后加入新的纯化水。
5）液氮罐液氮量检查：轻轻打开液氮罐外盖，仔细观察液氮液面是否完全浸没冻存盒顶部，应确保储备罐中有足量的液氮（请戴防冻手套操作）。
6）操作间地面消毒：请用专用拖布，浸泡于2%新洁尔灭消毒液后，擦拭地面。7）缓冲间物品消毒：请用专用抹布，浸泡于1%新洁尔灭消毒液后，擦拭实验物品（如生物安全柜、培养箱、离心机、天平、不锈钢架等物品）
8）培养箱水盘换水：将用过一周后的水倒掉，更换新的灭菌水1500ml左右。
三、仪器设备操作规程
供气瓶操作规程
1）供气瓶介绍:
2）气瓶开启步骤：
1.首先将减压阀手柄拧松，即朝“OFF”方向拧松，确保减压阀是关闭状态，
甚至可以将减压阀手柄拧下来。
2.再开总开关，可看到总压力表的压力值应该在5Mpa左右，请保持在5
Mpa左右以内
3.再将减压阀手柄即朝“ON”方向慢慢拧紧，边拧边看二级压力表的压力值
变化，越朝“ON”方向拧紧，二级压力表的压力值越高，一定要将压力值控制在<0.1Mpa以内。以防压力过大，将培养箱的过滤膜冲破！
二级压力表
总压力表
Thermo生物安全柜操作规程（1300A2型）
□操作步骤
?将仪器电源线插入电源插座；
?按on键约3秒仪器开机；
?将操作窗抬至指定位置，风机自检；
?打开日光灯电源；
?操作工作完成后，将操作窗往下拉到指定位置；
?按UV约3秒至紫外灯亮；
?打开紫外灯开关进行消毒灭菌。消毒完成后，紫外灯自动熄灭；
?长按on键至面板不显示，仪器进入待机状态。
Thermo水套培养箱操作规程（3111型）
□培养箱条件设置
?温度：37℃
?CO2浓度：5%
?相对湿度：约为95%
?如果个别细胞培养需要特殊条件，请与仪器负责人联系
□使用注意事项与日常维护
?培养箱专供细胞培养用，严禁放入其他物品，以防污染；
?细胞培养板或培养皿请勿堆砌过高，以防打翻；
?如不慎有培养基洒出，需及时清理消毒并更换底部托盘中的灭菌水，
以防污染，同时通知仪器负责人；
?二氧化碳气瓶分压阀的读数应为0.04-0.06；二氧化碳气瓶总阀正常读
数为5-6，低于该数值说明余量不多，需尽快更换新的气瓶；未经允
许请勿调节安全阀；
?培氧箱在使用时，需定期检查增湿盘内是否缺水，如果缺水请务必加
灭菌蒸馏水；
?培养箱使用时应把减压阀出气压力调到0.06Mpa,最大不能超0.1Mpa；
?如果报警显示Add Water,表示设备里的水套缺水,应用蒸馏水并使用附
件提供的漏斗一直加到设备不报警为止；
?如果显示Replace HEPA,只是提醒需要更换箱内高效过滤器,不是表
示设备有问题,如果不想更换可以照常使用；
?如果不用二氧化碳，请把二氧化碳设定到零点，否则过15分钟后会
报警；
?培养箱在使用时，室内温度要保持在28℃以下，特别是夏天需要24
小时开空调，否则设备会超温报警；
?可用70％酒精或中性不含氯的消毒剂给培养葙培养室作定期的常规
消毒；
?培养箱如果长期不使用，请切断电源和CO2，把增湿盘拿出来并且把
箱内擦干净。
Thermo水套缺氧培养箱操作规程（3131型）
□参数设定
?温度设定：按“Mode”键使“Set”下指示灯亮，按“←”“→”键使显示
“TEMP XX.X C”，按“↓”“↑”键使显示所需设定的目标温度（如
37.0℃），按“Enter”确定。按“Mode”键3次使“RUN”下指示灯亮。
?CO2浓度设定：按“Mode”键使“Set”下指示灯亮，按“←”“→”键使显
示“CO2XX.X”，按“↓”“↑”键使显示所需设定的目标浓度（如5%），
按“Enter”确定。按“Mode”键3次使“RUN”下指示灯亮。
?高温报警设定：按“Mode”键使“Set”下指示灯亮，按“←”“→”键使显
示“OTEMP XX.X C”，按“↓”“↑”键使显示所需设定的目标温度（如
38.0℃），按“Enter”确定。按“Mode”键3次使“RUN”下指示灯亮。
?O2浓度设定：按“Mode”键使“Set”下指示灯亮，按“←”“→”键使显示
“O2XX.X”，按“↓”“↑”键使显示所需设定的目标浓度（如2%），按
“Enter”确定。按“Mode”键3次使“RUN”下指示灯亮（如果将O2浓度
设定到21%，可当成普通CO2培养箱使用）。
?O2浓度校准：按“Mode”键使“CAL”下指示灯亮，按“←”“→”键如显
示O2CAL@20.7%，按“Enter”确定，机器显示“OPEN DOOR“，打开
门，机器显示“CALIBRATING”等两分钟。当机器再次显示“O2CAL@
20.7%”校准完成。按“Mode”键3次使“RUN”下指示灯亮。
XDS-1B倒置显微镜操作规程
□开机
?观察将待观察对象置于载物台上；
?调节双目目镜距离，舒适为宜；
?调节光源；
?选择合适倍数的物镜
?旋转物镜转换器选择合适大小的物镜（切勿直接扳动物镜）；
?通过依次调节粗/细准焦螺旋得到清晰的成像。
□关机
?取下观察对象，推拉光源亮度调节器至最暗，关闭电源开关。
?在使用显微镜观察样品后，对接触样品部分进行清洁，防止造成
污染
?登记使用记录
□日常维护及注意事项
?所有镜头表面必须保持清洁，落在镜头表面的灰尘，可用吸耳球吹去；
当镜头表面沾有油污或指纹时，可用脱脂棉蘸少许无水乙醇和乙醚的混合液（3:7）轻轻擦拭；
?勿用棉团、干布块或干镜头纸擦试镜头表面，否则会刮伤镜头表面，严
重损坏镜头；
?勿用水擦试镜头，否则会在镜头表面残留水迹，可能滋生霉菌，严重损
坏显微镜；
?尽量远离易燃物品，尤其是电源开、关时，避免着火；
?不允许随意拆卸仪器。
细胞房注意事项和管理范文
细胞房注意事项和 管理
细胞房注意事项和管理 一、常规操作 1. 穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套，可脱在门外的衣帽架上。 2. 穿着专用拖鞋。先在入室间换下自己的鞋子，穿着绿色拖鞋进入缓冲间；再在缓冲间换红色拖鞋。尽量避免在缓冲间走动、停留。 3. 细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。 4．离开细胞房前，要保证不使用的仪器及时关闭并拔下插头（离心机、水浴锅、日光灯），超净台开启紫外灯照射2h后关闭。 二、值日生工作职责 1. 每周值日生时间从周一开始，至周日结束。 2. 值日周开始时需做的事情：配制消毒用的75%的酒精，制作酒精棉球，给细胞房内添加足够的95%工业乙醇供酒精灯使用。 * 75%的酒精可用750ml95%的酒精加去离子水至950ml配制而成。 3. 值日周内每天需做的事情：开大紫外灯消毒细胞房15-30min后才能投入一天的使用，晚上开启紫外灯灭菌，第二天及时关闭；检查灭菌物品的储备情况，以便及时补充；及时安排人
员清洗回收培养器皿；检查培养液母液、血清、酒精等公用试剂的储备情况；至少每天倾倒细胞房垃圾、换垃圾袋；检查培养箱内水量是否足够。 4. 值日周结束前需完成的事情：星期五全方位打扫细胞房。包括拖地，擦桌子、柜子、清洁和整理抽屉，擦超净台、冰箱及桌上的仪器，给水浴锅加水或换水，洗细胞房专用的实验服和拖鞋，紫外消毒细胞房。更换培养箱内无菌水、检查硫酸铜溶液是否需要更换（一个月更换一次）！ 5. 每2周清洁一次培养箱：先将培养箱中的物品取出暂存于超净台内，对于比较敏感的细胞能够暂存于其它细胞房的培养箱；将培养箱内的不锈钢板取出，包括4块横板和左右2块立着的架子，用酒精棉球清洁钢板和培养箱内壁；打开培养箱清洁内壁时动作要迅速，避免长时间敞开门使得大量不洁净空气进入，缩短过滤器的寿命；用紫外灯照射培养箱内部15min，手提紫外灯放入培养箱前要用酒精棉擦拭干净。 .6.9培养箱使用注意事项 1. 从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。 * 培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 2. 培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精
磅房管理制度、磅房管理规定及司磅员操作规程
磅房管理制度、磅房管理规定及司磅员操作规程 一、磅房管理制度 一、磅房系操作重地，非工作人员一律不得入内。 二、专人操作，任何人不得随意乱动。 三、操作人员必须做到以下几点： 1、开机前检查仪器各部位是否正常，检查磅台是否平衡，然后开机校磅。 2、严格按程序操作，严格一车一单制，认真负责，一丝不苟。 3、发现问题，及时停机，查明原因，决不带病操作。 4、磅房码单作为资料，不得随意给无关人员查询。 5、下班切断电源，收好仪器，对磅台进行清扫。 6、周围环境卫生每日一清。 四、此过磅仪器系单位内部设备，如有其它单位或个人需过磅的必须经领导同意后方可进行。 五、过磅仪器为精密设备，每一个工作人员要以主人翁的思想爱护好，安全使用，及时维护保养。 二、磅房管理规定及司磅员操作规程： 一．为了进一步加强磅房基础管理,提高服务水平,规范职工行为,提 高工作效率, 保证计量数据的准确性，维护公司利益。 二．司磅员应坚守岗位，特殊情况双岗至少有一人留守，严禁在工作时间闲聊、吃零食等行为。严禁非本部门人员进入工作岗位。对于进入磅房的非本部门人员，司磅员应对其进行劝阻，特殊情况经部门负责人批准后方可进入。司磅员应服从部门负责人的工作安排，在工作中司磅员之间相互积极配合，确实履行好岗位职责。保持卫生区、设备仪表干净整洁。所属卫生区司磅员要及时清扫，保持磅房内、磅面及四周无赃物，注意仪表的保养，创造一个良好的工作环境。员工之间做好互相监督并针对相关内容定期实施考核。 三、司磅员在工作中应努力提高自身素质，不断改进服务质量，适应公司
不断发展的要求。维持工作秩序,保证工作正常进行。司磅员应与相关人员相互协调、配合，做到计量工作井然有序，使磅区始终保持良好的工作秩序。搞好设备维护和保养，保证设备正常运行。计量设备正常与否，直接关系到计量数据的准确性，因此，司磅员要经常检查计量设备的运行情况，发现故障及时排除或通知相关部门维修。四、严格执行收货人签字制度，不得让他人代开过磅单。对于出入公司的货物，应由相关收货人员在磅单上签字，所签姓名要清晰，没有收货人签字的磅单不准交给发货人或收货人，杜绝过磅单由他人代开的现象。 五、过磅单务必做到内容完整、数据真实准确，毛重、皮重、净重不允许出现涂改现象，并标明司磅员姓名，开具非打印磅单时要向部门负责人说明原因。 六、坚持交接班制度，保证工作的衔接性。交班人员要填写好交接班记录，并向接班人员交待清楚注意事项，严禁接班人员未到而交班人员提前离岗。做好磅单管理，杜绝资料遗失。磅单存根要按时间分类保存，做到查找方便，无遗失现象。计量设备的检定和校准按公司下发的规定执行。 七、工作流程 1. 准确无误的完成每一次计量工作，显示器为“0”时车辆方可上磅，车上磅后一定要停稳且显示器所显示数据不再跳变后才能取数，车辆下磅显示器回“0”后才能进行下一次计量。 2.过磅前要求司磅员和外库人员对司机携带的发货单及过磅卡进行核实以及对车辆滴水等情况是否符合检斤标准进行检查，核实无误后，对检查合格车辆进行过磅并在过磅卡上签字（签名清晰完整），如有对方磅单的，向司机索要对方磅单，核清磅单内容与实际是否相符，并核对双方数据，双
细胞房注意事项和管理
细胞房注意事项与管理 一、常规操作 1、穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套,可脱在门外的衣帽架上。 2、穿着专用拖鞋。先在入室间换下自己的鞋子,穿着绿色拖鞋进入缓冲间;再在缓冲间换红色拖鞋。尽量避免在缓冲间走动、停留。 ３、细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。 4. 离开细胞房前,要保证不使用的仪器及时关闭并拔下插头(离心机、水浴锅、日光灯),超净台开启紫外灯照射2h后关闭。 二、值日生工作职责 1、每周值日生时间从周一开始,至周日结束。 2、值日周开始时需做的事情:配制消毒用的７5%的酒精,制作酒精棉球,给细胞房内添加足够的9５％工业乙醇供酒精灯使用。 ＊ 75％的酒精可用750ｍl９5%的酒精加去离子水至950ｍl配制而成。 3、值日周内每天需做的事情:开大紫外灯消毒细胞房15-3０miｎ后才能投入一天的使用,晚上开启紫外灯灭菌,第二天及时关闭;检查灭菌物品的储备情况,以便及时补充;及时安排人员清洗回收培养器皿;检查培养液母液、血清、酒精等公用试剂的储备情况;至少每天倾倒细胞房垃圾、换垃圾袋;检查培养箱内水量就是否足够。 4. 值日周结束前需完成的事情:星期五全方位打扫细胞房。包括拖地,擦桌子、柜子、清洁与整理抽屉,擦超净台、冰箱及桌上的仪器,给水浴锅加水或换水,洗细胞房专用的实验服与拖鞋,紫外消毒细胞房。更换培养箱内无菌水、检查硫酸铜溶液就是否需要更换(一个月更换一次)！ 5. 每２周清洁一次培养箱:先将培养箱中的物品取出暂存于超净台内,对于比较敏感的细胞可以暂存于其她细胞房的培养箱;将培养箱内的不锈钢板取出,包括4块横板与左右2块立着的架子,用酒精棉球清洁钢板与培养箱内壁;打开培养箱清洁内壁时动作要迅速,避免长时间敞开门使得大量不洁净空气进入,缩短过滤器的寿命;用紫外灯照射培养箱内部15min,手提紫外灯放入培养箱前要用酒精棉擦拭干净。 ２０１4、6、９
细胞房管理规章制度
细胞房管理规章制度 细胞房是进行各种细胞培养的净化级实验室，所有进入实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度。 第一章 总则 第一条 细胞房主要由团队内相关科研人员使用，原则上不对外开放，其他人员如确实需使用细胞房必须预先征得实验室负责人和细胞房负责人同意。 第二条 新养细胞的同学，需先跟随由负责人指定的人员学习，同时学习并熟记细胞房管理条例，最后通过细胞操作考核后，方可进入细胞房进行实验。严禁未经许可擅自进入细胞房或使用相关设备。 第三条 细胞房正常使用过程中，进出实验室的器械和样品需通过传递窗，严禁随身带入。实验用品应尽量一次带入，严禁将和实验无关的物品带入实验室，在细胞房内不得进行微生物等其它易污染物的培养，禁止从事任何高危生化实验。 第二章 条例 第一条 常规操作 穿着专用隔离服，实验人员必须在细胞房缓冲间内更换细胞房专用隔离服并戴上口罩，严禁不穿隔离服或直接穿着普通实验室实验服进入细胞房。 穿着专用拖鞋。在准备间换下自己的鞋子，尽量避免在缓冲间走动、停留。 细胞房最多可4个人同时使用。 实验过程中严禁喧哗，闲聊，反复进出培养室。 离开细胞房时应在缓冲室填写使用登记。 第二条 培养箱使用规则 1.从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。 注：培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 2.从培养箱拿取细胞时轻拿轻放，动作迅速，随手关紧培养箱门。未经允许，禁止翻看、移动他人细胞或样品，如有特殊需要的，请联系实验室负责人协调。 更换隔离服、戴口罩 更换拖鞋 进入细胞房
3.培养瓶/皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。 4.普通培养中的细胞，若非实验特殊需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。 注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。 第三条 显微镜使用规则 1.倒置相差显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。 2.短时间内需再次使用显微镜时，为避免频繁开关显微镜电源，可不必关闭显微镜电源，但须将亮度旋钮调到最低；较长时间不需使用或离开细胞房时，须按规定关闭显微镜电源。 第四条 超净台相关操作规则 1.超净台使用遵循预约原则。在细胞房入口处预约，细胞房内填写使用登记。 a ：无预约者若有必要在他人预约时段内使用，需先征得预约者的同意，否则应无条件让出工作台，以免耽误他人实验。 b ：预约内容请包括：预约时间、姓名、使用日期、使用时间段、实验内容 。 2.使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒，超净台内严禁堆放过多物品影响风路平衡，不同超净台内物品严禁频繁交换使用。 3.点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。 注：消毒用75%的酒精，酒精灯用95%以上的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。 4.超净台中应摆放废液缸，用于暂时存放废弃物，实验结束后将废液缸带走，废液垃圾倒入水池并同时用水冲释，固体垃圾倒入垃圾桶中 注：液缸应及时处理，严禁长时间放置，以免留有大量培养液滋生细菌。 5. 细胞实验后任何含有细胞培养污物的培养瓶，离心管，移液管等必须及时带出细胞房。 第五条 器具的清洗规则 预约超净台 检查酒精灯 酒精消毒（超净台+实验物品） 使用超净台 酒精消毒超净台 带走废品
司磅员安全操作规程标准范本
操作规程编号：LX-FS-A33076 司磅员安全操作规程标准范本 In The Daily Work Environment, The Operation Standards Are Restricted, And Relevant Personnel Are Required To Abide By The Corresponding Procedures And Codes Of Conduct, So That The Overall Behavior Can Reach The Specified Standards 编写：_________________________ 审批：_________________________ 时间：________年_____月_____日 A4打印/ 新修订/ 完整/ 内容可编辑
司磅员安全操作规程标准范本 使用说明：本操作规程资料适用于日常工作环境中对既定操作标准、规范进行约束，并要求相关人员共同遵守对应的办事规程与行动准则，使整体行为或活动达到或超越规定的标准。资料内容可按真实状况进行条款调整，套用时请仔细阅读。 1、作业前准备 1.1、上班前必须穿好劳保用品 1.2、严格按照称重器《使用手册》进行操作 1.3、工作前，首先应检查衡器周围是否有异物，发现情况应立即向有关人员汇报，排除后方可过车计量。 1.4、保持衡器的清洁卫生，确保衡器称量的准确性。 2、工作过程中安全注意事项 2.1、电子汽车衡的开机程序是先开稳压器开关，再开称重显示控制器，最后开打印机。
2.2、严格衡器称重范围，禁止超出最大称量的物质上磅。 2.3、及时提醒车辆驾驶员上地中衡应限速3公里/每小时，上磅后缓停，过磅后缓缓起动。 2.4、计量室应保持清洁，禁止外人入内。 2.5、微机系统和计量设备出现故障时，要立即向有关专业人员汇报处理，不能私自操作。 3.作业后要求 3.1、每班下班必须关机，其程序是先关打印机，再关称重显示控制器，最后关稳压器。 3.2、工作期间严禁闲人进入操作室，工作完毕离开时要拉闸断电。 请在该处输入组织/单位名称 Please Enter The Name Of Organization / Organization Here
细胞房注意事项和管理
细胞房注意事项和管理 一、常规操作 1. 穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套，可脱在门外的衣帽架上。 2. 穿着专用拖鞋。先在入室间换下自己的鞋子，穿着绿色拖鞋进入缓冲间；再在缓冲间换红色拖鞋。尽量避免在缓冲间走动、停留。 3. 细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。 4．离开细胞房前，要保证不使用的仪器及时关闭并拔下插头（离心机、水浴锅、日光灯），超净台开启紫外灯照射2h后关闭。 二、值日生工作职责 1. 每周值日生时间从周一开始，至周日结束。 2. 值日周开始时需做的事情：配制消毒用的75%的酒精，制作酒精棉球，给细胞房内添加足够的95%工业乙醇供酒精灯使用。 * 75%的酒精可用750ml95%的酒精加去离子水至950ml配制而成。 3. 值日周内每天需做的事情：开大紫外灯消毒细胞房15-30min后才能投入一天的使用，晚上开启紫外灯灭菌，第二天及时关闭；检查灭菌物品的储备情况，以便及时补充；及时安排人员清洗回收培养器皿；检查培养液母液、血清、酒精等公用试剂的储备情况；至少每天倾倒细胞房垃圾、换垃圾袋；检查培养箱内水量是否足够。 4. 值日周结束前需完成的事情：星期五全方位打扫细胞房。包括拖地，擦桌子、柜子、清洁和整理抽屉，擦超净台、冰箱及桌上的仪器，给水浴锅加水或换水，洗细胞房专用的实验服和拖鞋，紫外消毒细胞房。更换培养箱内无菌水、检查硫酸铜溶液是否需要更换（一个月更换一次）！
5. 每2周清洁一次培养箱：先将培养箱中的物品取出暂存于超净台内，对于比较敏感的细胞可以暂存于其他细胞房的培养箱；将培养箱内的不锈钢板取出，包括4块横板和左右2块立着的架子，用酒精棉球清洁钢板和培养箱内壁；打开培养箱清洁内壁时动作要迅速，避免长时间敞开门使得大量不洁净空气进入，缩短过滤器的寿命；用紫外灯照射培养箱内部15min，手提紫外灯放入培养箱前要用酒精棉擦拭干净。 2014.6.9培养箱使用注意事项 1. 从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。 * 培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 2. 培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。 3. 2-3人共用一层培养箱，按预定位置摆放培养器皿，方便查找，以免长时间敞开培养箱。普通培养中的细胞，若非实验需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。 * 频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。 超净台操作规则 1. 超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌，使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台前均应用酒精喷拭表面消毒。
司磅员安全操作规程(最新版)
The prerequisite for vigorously developing our productivity is that we must be responsible for the safety of our company and our own lives. （安全管理） 单位：___________________ 姓名：___________________ 日期：___________________ 司磅员安全操作规程(最新版)
司磅员安全操作规程(最新版)导语：建立和健全我们的现代企业制度，是指引我们生产劳动的方向。而大力发展我们生产力的前提，是我们必须对我们企业和我们自己的生命安全负责。可用于实体印刷或电子存档（使用前请详细阅读条款）。 1、作业前准备 1.1、上班前必须穿好劳保用品 1.2、严格按照称重器《使用手册》进行操作 1.3、工作前，首先应检查衡器周围是否有异物，发现情况应立即向有关人员汇报，排除后方可过车计量。 1.4、保持衡器的清洁卫生，确保衡器称量的准确性。 2、工作过程中安全注意事项 2.1、电子汽车衡的开机程序是先开稳压器开关，再开称重显示控制器，最后开打印机。 2.2、严格衡器称重范围，禁止超出最大称量的物质上磅。 2.3、及时提醒车辆驾驶员上地中衡应限速3公里/每小时，上磅后缓停，过磅后缓缓起动。 2.4、计量室应保持清洁，禁止外人入内。 2.5、微机系统和计量设备出现故障时，要立即向有关专业人员汇
报处理，不能私自操作。 3.作业后要求 3.1、每班下班必须关机，其程序是先关打印机，再关称重显示控制器，最后关稳压器。 3.2、工作期间严禁闲人进入操作室，工作完毕离开时要拉闸断电。 XX设计有限公司 Your Name Design Co., Ltd.
细胞复苏步骤和注意事项
细胞复苏步骤注意事项： 【材料】 1. 常规细胞培养仪器设备恒温水浴振荡器。 2. 培养液（DMEM）胎牛血清（CBS）二甲基亚砜（DMSO） 【操作程序】 1. 细胞实验室进行常规消毒，紫外照射40min以上。 2. 培养液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶（Trypsin）恒温水浴箱370C预热20min，备用。 3. 二甲基亚砜（DMSO)在40C冰箱中冷藏30min，备用。 4. 从液氮保存罐中取出冻存管，立即放入400C水浴中，快速摇晃，直至冻存液完全融化。 5. 将细胞悬液移入15ml离心管，缓慢加入4ml培养液，离心（1000r/min，5min）。 6. 用培养液悬液混悬沉淀细胞，调整细胞浓度，方培养箱中培养。 7. 记录复苏日期。 【注意事项】 1. 取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。 2. 冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜（DMSO）对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在1-2min 内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜（DMSO）最好选择进口产品。 3. 离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。 4. 离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。 5. 细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml－15m培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。 6. 复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。 7. 加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是1％。所以如果你的冻存液的浓度是10％DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 一、原理 在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂，可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下，能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在－130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。
磅房操作规程
及司磅员操作规程 工作流程 4.1. 准确无误的完成每一次计量工作，显示器为“0”时车辆方可上磅，车上磅后一定要停稳且显示器所显示数据不再跳变后才能取数，车辆下磅显示器回“0”后才能进行下一次计量。 4.2. 公司采购的物资一律由厂区东门的三号磅房和四号磅房过磅。过磅前要求司磅员和外库人员对司机携带的发货单及过磅卡进行核实以及对车辆滴水等情况是否符合检斤标准进行检查，核实无误后，对检查合格车辆进行过磅并在过磅卡上签字（签名清晰完整），如有对方磅单的，向司机索要对方磅单，核清磅单内容与实际是否相符，并核对双方数据，双方数据差距较大时通知对方确认。待司机卸料回皮时，经过司磅员审核外库和分厂收料员签字的发货单无误后方可回皮，填制检斤单，检斤单一式五联，存根联交财务，运费联交给司机带回，客户、技质部、供应部各执一联。 4.3. 提货车辆全部由公司厂区正门的二号磅房过磅。车辆过皮时，司磅员向司机索要发运物资调拨单并对日期、购货单位、物资名称、车号、开票人等核实无误后进行过磅并在过磅卡上签字。过毛重时，司磅员根据现场装货人员填制的货物登记通知单核清规格、根数等事项后给予过磅并打印检斤单，检斤单一式五联，一联存根，二联客户联，三联运费联，四联技质部，五联销售部。 4.4. 无论是称毛重还是皮重，都坚持磅上不留人。 4.5. 按1—4项称重完毕后填制打印单，司磅员要检查车号、货物名称、收发单位、毛重、皮重、净重等内容是否正确，然后交给收货人签字，把相关磅单交给司机，毛重、皮重、净重不允许有涂改现象。 4.6.无论是进货还是出货都要求三单核对。（进货即过磅卡、发货单、过磅单；出货即过磅卡、调拨单、过磅单） 4.7为正确填制各班报表和防止特殊情况下电脑数据丢失，每称一次毛重或皮重一定要在报表上记载有关数据，并记录车号、收货或发货单
磅房管理规定及操作规程
磅房管理规定及司磅员操作规程 一．学习目的 为了进一步加强磅房基础管理,提高服务水平,规范职工行为,提高工作效率,保证计量数据的准确性，维护公司利益。 二．适用范围 财务部所属磅房（含轨道衡）司磅员。 三、具体内容 1、劳动纪律 1.1遵守公司制度，维护公司利益，树立公司形象。磅房作为公司窗口单位，应严格遵守公司各项制度，把公司利益放在首位，做到认真工作、文明礼貌、热情服务。 1.2按时上下班,严格执行请销假制度。司磅员应严格遵守作息时间，做到不迟到、不早退，因故不能到岗时提前2小时向部门负责人请假。 1.3工作时间不空岗、不睡岗、不串岗，不做与工作无关的事情。司磅员应坚守岗位，特殊情况双岗至少有一人留守，严禁在工作时间闲聊、吃零食等行为。1.4严禁非本部门人员进入工作岗位。对于进入磅房的非本部门人员，司磅员应对其进行劝阻，特殊情况经部门负责人批准后方可进入。 1.5服从领导、团结协作。司磅员应服从部门负责人的工作安排，在工作中司磅员之间相互积极配合，确实履行好岗位职责。 1.6保持卫生区、设备仪表干净整洁。所属卫生区司磅员要及时清扫，保持磅房内、磅面及四周无赃物，注意仪表的保养，创造一个良好的工作环境。 1.7 员工之间做好互相监督并针对相关内容定期实施考核。 2、工作标准 2.1加强业务学习，适应本职工作。司磅员在工作中应努力提高自身素质，不断改进服务质量，适应公司不断发展的要求。 2.2.维持工作秩序,保证工作正常进行。司磅员应与相关人员相互协调、配合，做到计量工作井然有序，使磅区始终保持良好的工作秩序。 2.3搞好设备维护和保养，保证设备正常运行。计量设备正常与否，直接关系到计量数据的准确性，因此，司磅员要经常检查计量设备的运行情况，发现故障及
磅房过磅制度
磅房过磅制度 1．严格按照公司的各项规章制度进行过磅。 2．车辆上下磅过程中不允许称重操作，避免车辆不完全上磅就进行称重3．闲杂人员不准到磅房内休息、闲谈，更不得翻阅原始数据和司磅台帐4．当磅表为负值的状态下不允许过磅．避免人为减少磅的基数（正常应当是空磅为“0”） 5．当磅称重显示器数据平稳后再进行读数、保存，并可以打印。 6．认真核对各种原料供货单位的发货票，所有数据必须保证其准确性。 7．爱护保养设备和仪器仪表保证设备的正常使用做好磅房“三防”工作：防火（离开磅房应切断所有电源，会使用消防器材）；防盗（关、锁好门窗）；防雷（检查接地线是否完好，特别是雷电天气更要精心维护，做好安全防范措施）。加强室内及磅秤的卫生管理工作，发现设备缺陷及时汇报，请相关部门处理，司磅员不得擅自处理。 8．磅单数据与台帐相符，不得涂改、漏页，保管好磅单票据。归纳整理好各单位货运量，按时上交。 9．熟练掌握磅秤的操作规程及有关仪器、仪表的使用方法。严把计量关，做到手勤、眼勤。车辆过皮重、毛重时要仔细检查，坚决消缺堵漏。计量的帐、卡、表要求数字准确、清晰，数据真实、可靠，如有不实，追究相关岗位人员责任。 10.严格检查过磅车速、防止急刹车造成传感器损坏。 11．待车辆发动机熄火，驾驶员离开磅秤后方可进行计量操作，每日早班对汽车衡台面进行检测，并记录。
12．车辆过磅必须清点车内人数，检查是否夹带与本货物无关的货物，检查车辆是否按规定停放合理位置，避免计量不准，造成失误。 13．热爱本职工作，坚持原则、坚守岗位，维护公司利益。司磅员工作态度必须端正，工作细心、认真负责，不得弄虚作假，徇私舞弊，篡改数据。如有损害公司利益的行为，一经发现按公司有关规定处理 14．认真学习业务知识，提高岗位技能。严格要求自己，不谋私利、廉洁奉献，做好本职工作。 15．日常过磅时，应坚守岗位，认真计量，计量结果及时上报。司磅员不得中途串岗、溜岗以及做与工作无关的事，如有发现按公司有关规定执行。 16．搞好室内卫生，保持地磅台面干净整洁，保证设备运行准确性 17．严格执行交接班制度，并作好交接班记录。
司磅员操作规程
司磅员操作规程 1.目的 本规程规定了司磅员的安全注意事项和工作程序，确保其工作符合公司安全要求和质量要求。 2.适用范围 本规程适用于司磅员岗位。 3.上岗前准备工作 3.1 上岗前保证充分的休息，确保良好的工作状态。 3.2 上班前按规定穿戴好劳保用品。 3.3 检查对讲机的完好情况。 3.4做好日检工作。检查磅秤显示屏、电脑、打印机、称重系统是否处于正常状态，物料传递卡、圆珠笔、打印纸等是否完备，发现问题及时向中控反映情况。 3.5准备和核对计量资料，如：原始磅单、发货计划，一次称重车辆清单等，要保证品名及规格、数量、收货人、发货人等的真实有效、准确无误。 3.6检查磅面是否干净，有无杂物，磅底有物异常。 3.7工艺磅的内运车辆是否对历史皮重已经保存、更新，已经保存、更新的历史皮重是否存在异常（同以前的皮重相比出现大的差异），贵重的物资要求每车回皮。 4.作业流程 4.1准确的把显示屏上的重量记录在称重计量单上，并按照操作流程
把数据保存到电脑数据库中，需开据手工磅单的要填写到磅单的相关栏目中。 4.2保证磅房附近道路的畅通，当班司磅员负责协调保卫部协调过磅车辆的次序。 4.3检查车辆是否停在磅秤中间位置，过磅时，不得有人上下磅体，直到车辆完全停稳后，方可确认数据。 4.4对散落在磅面上的物料要随时清扫，避免影响数据的准确性。 5.作业结束 5.1核对称重计量单与数据库中存储的数据是否一致，发现问题及时更正。整理本班的实际作业情况，并把详细情况反映在交接本上。 5.2检查磅单上的相关数据是否正确，出厂货物是否超出发货计划单的数量，出现问题及时联系货主或运销。核对无误后交司机或客户签字确认，加盖理货员专用章，分发磅单的相应联次。 5.3本班司磅员整理本班的票据和检斤记录，做好交接班记录。 6.工作要求 6.1 负责过磅物资的计量数据的保存、整理工作。 6.2 负责每日过磅后，将计量数据以报表的形式上交值班主任。 6.3 配合相关部门做好地磅的日常维护和校验工作，确保衡器始终保持完好状态。 6.4 配合理货员做好物资出入场的计量工作，确保计量数据准确无误。 6.5 严格按照操作规程要求进行设备操作，过磅、保存数据做到称重
细胞房工作守则及注意事项
细胞房工作守则及注意事项 细胞房工作守则及注意事项 一、?常规操作 ??1.?穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套，可脱在门外的衣帽架上。 2.?穿着专用拖鞋。在缓冲间换下自己的鞋子，尽量避免在缓冲间走动、停留。 3.?细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。 二、?培养箱使用规则 三、??1.?从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。 四、注：?培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 五、 2.?培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。 六、 3.?2-3人共用一层培养箱，按预定位置摆放培养器皿，方便查找，以免长时间敞开培养箱。 七、 4.?普通培养中的细胞，若非实验需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。 八、注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。 九、 十、?显微镜使用规则 十一、??1.?显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。 十二、 2.?离开细胞房时或较长时间不需使用时，及时关上电源，延长灯泡寿命。尽量避免频繁开关显微镜电源。 十三、 十四、?超净台相关操作规则
十五、??1.?超净台使用遵循预约原则。无预约者若有必要在他人预约时段内使用，需先征得预约者的同意，否则应无条件让出工作台，以免耽误他人实验。 十六、??2.?超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌，使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒。 十七、??3.?点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。 十八、注：?消毒用75%的酒精，酒精灯用95%的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。 十九、注：?酒精和酒精棉球由值日生负责补给，发现细胞房内存放量不足时请及时通知值日生。 二十、??4.?超净台中应摆放废液杯和废品杯各一只，用于暂时存放废弃物，实验结束后将杯内垃圾倒入水池或垃圾桶中，并冲洗晾干备用。 二十一、注：?将废弃的枪头、管子内的残留液体打（倒）入废液杯后再弃入废品杯中，以免垃圾桶内留有大量培养液滋生细菌。 二十二、??5.?可回收的移液管、离心管、培养瓶皿等，放入装有清水的塑料桶中浸泡，桶内需有足量的清水以没过浸泡物品。 二十三、注：?可回收器皿必要时先初步涮洗后再放入桶内，尤其是培养瓶或血清管中有大量高营养的液体残留时，容易使桶内的清水长菌。 二十四、保证浸泡的瓶、管内完全被清水充满，而不是在装有大量空气的情况下被压倒桶底。 二十五、塑料桶内物品由值日生每天负责送去清洗，使用者实验结束后若发现桶已装满，请通知值日生或顺手将塑料桶带出细胞房。 二十六、??6.?装培养液的瓶子、配培养液的器皿勿放入塑料桶内浸泡！应由使用者本人及时清洗晾干备用。 二十七、注：?因桶内物品通常要浸泡几小时以上才送去清洗，此时细菌可能已在桶中生长并释放内毒素。细菌内毒素很难通过常规湿热灭菌步骤去除干净，即使干烤也不能保证其完全失活。内毒素对细胞生长及多种实验均有较大影响。 二十八、?洗涤程序：洗洁精洗净，清水冲十次以上去除洗涤剂残留，然后冲去离子水3次，再用双蒸水1次，倒置于器皿柜中晾干。关上器皿柜的门防尘。 二十九、 三十、?培养液、试剂等相关操作规则 三十一、??1.?从冰箱取放物品动作要迅速，关门时要检查门是否关好。按类别存放试剂。
德胜磅房操作规程
磅房操作规程 第一章总则 第一条为了加强司磅作业的标准化、规范化，确保司磅记录的准确性和公正性，进一步完善公司对各项物资的监督管理，提高客户满意度，保证公司各项业务顺利开展，特制定本守则。 第二条本规定适用于进出公司大门并使用机动车辆装卸的各类物资的司磅作业。 第三条公司质检部是负责司磅作业和管理的职能部门。所有进出公司大门的货运机动车辆，必须按照本规定和《货运车辆出入管理规定》办理司磅的相关手续，否则值勤门卫不得予以放行。 第四条凡公司购入的原材料、包装物及销售出厂的成品、不能用于生产的原料、废旧物资之地磅作业以及地磅之日常管理均依本规定办理。 第二章司磅操作规程 第五条过磅员的日常操作规程： 1、开机前，检查称重显示仪及打印机是否有异常情况，如有异常情况，要及时报告主管部门并协助处理。 2、过磅员应在地磅微机通电二十分钟并清零后，方可进行操作。开机后仪表出现数字不稳定应清零后，方可正常使用。地磅刚启用会出现回零不及时现象，过磅员称量完毕要及时清零，方可进行下一次称量。 3、过磅车辆应停放在磅台中心位置，并待停稳，驾驶员全部下车后，始可进行过磅。 4、过磅员必须严格按照公司的要求，核对相关单据、联次、印章、签字和车号等内容无误后，方可进行司磅作业 5、过磅员须在读书器上的数据稳定后方可读数。对于跳动不定的数据，应取时间显示较长者，若大小数据各占1/2时限，毛重、皮重统一取小数。 6、过磅员在读数时应观察磅台是否有人走动、踩磅及其它可能影响计重的因素。
读数后，应核对读数器上的数据与微机上的数据是否一致，无误后，方可保存。 7、过磅员在输入车号、货名、皮杂等关键词时应仔细认真，反复核对，确保过磅的准确性。 8、过磅员应检查车辆是否完全进入磅台上、车辆载运总重是否超重。 9、过磅员应检查车辆皮重是否正常，重点检查水桶、包裹等移动方便、影响计重的物品。运送原料的车辆上磅前应卸下蓬布、绳子等包装物，检查工具箱。 10、过磅时，严禁随车带人，地磅四周严禁靠人，驾驶员应下车，过磅员核对车辆前后车号是否一致。 11、检查完毕后，通知读数。 12、过磅员在复磅时，必须核对车号、皮重与微机上的相符后，方可读出毛重并打出《过磅单》。 13、司磅记录上需要手工填写的重量、司磅时间、签字和印章必须清晰，以便门卫查验。 14、在打印《过磅单》前，应检查计算机是否登录当班过磅员作业状态，计算机及打印机是否开机以及是否处于正常状态，打印报表纸是否处于正常位置，打印字样是否清晰。 15、过磅员对不遵守公司规定的客户应耐心劝阻，发现作弊行为应大胆予以制止。对于造成作弊事实的，上报公司处罚。 16、下班后，要切断电源，用布将设备罩住，关闭好门窗。严禁车辆在在称台上长时间停留或过夜。 17、严格执行交接班制度，并作好交接班记录 18、保持地磅房内的清洁卫生，禁止闲人进入地磅房。 19、地磅人员应遵守工作纪律，坚守岗位，秉公办事。 20、妥善保管地磅单据，严守计量秘密，严禁弄虚作假。 第六条原料入厂的地磅作业规程 1、过磅员根据开出的《计量检验申请单》检查地磅及车上无人时方可过磅。 2、打印《计量检验申请单》之《进厂栏》有关内容后交与客户到仓库卸货，并进行登记。 3车辆卸完货后驶回地磅，过磅员取回经仓库保管员签字的《计量检验申请单》，经确认地磅和车上无人时，过磅打印《计量检验申请单》之《出厂栏》有关内容。
磅房管理规章制度范本
磅房管理规章制度范本 1、磅房工作人员主要负责运输车辆口常过磅工作及供应公司各部门油料加油工作。 2、磅房工作人员目前实行八小时工作制，每天分二班（即早班8:00—16:00;晚班16:00-0:00）。 3、熟练掌握磅秤的操作规程及有关仪器、仪表的使用方法。严把计量关，做到计量数据准确无误，计量结果及时上报。 4、热爱本职工作，坚持原则，坚守岗位，维护公司利益。磅房工作人员必须端正工作态度，工作细心，认真负责，不得弄虚作假，徇私舞弊，篡改数据。如有损害公司利益的行为，一经发现立即辞退; 性质严重的，移交司法机关处理。 5、严格要求自己，不谋私利，廉洁奉公，做好本职工作。若因工作责任心不强，疏忽大意或者徇私舞弊造成公司经济损失的，一万元以下由当班人全额赔偿并辞退；数额巨大的移交司法机关处理。 6、磅房工作人员当班时不得溜岗、脱岗以及做与工作无关的事, 如有发现，每次罚款50元。 7、严禁非磅房工作人员替、代班。如发现有非磅房工作人员替、代班者，每次除扣发当班人当日工资外，另处当班人100元罚款。 8、闲杂人员不准到磅房内休息、逗留、闲谈，更不得翻阅原始数据和司磅台账。 9、磅单数据要与台账相符，不得涂改、漏页，保管好磅单票据,
归纳整理好各单位货运量，按时上交。 10、供应油料时，当班人必须严格把关，寸步不离，坚决消缺堵漏。如有“缺"、“漏",由当班人全额赔偿。 11、爱护保养设备和仪器、仪表，保证设备的正常使用，做好磅房“三防”工作：防火（离开磅房应切断所有电源，会使用消防器材）；防盗（关、锁好门窗，磅房晚上应有专人值守）；防雷（雷雨天气关掉电源，做好安全防范措施）。经常检查蓄电池蓄电情况，保证停电12小时内不影响磅房工作。 12、加强磅房室内及磅秤的卫生管理工作，每班必须清扫一次。发 现机器设备出现故障应及时汇报，请相关部门处理，过磅员不得擅自处 理。 13、严格执行交接班制度,并做好交接班记录。油料出库数据必须每班结算、核实，谁当班出现误差由谁负责。 14、遵纪守规，及时完成公司和领导部署的其它任务。单位财务管 理规章制度企业财务管理规章制度公司管理规章制度
细胞房使用细则
细胞房使用细则 细胞间使用： 1.进细胞间作业要穿实验服，戴口罩，换鞋，随手关闭玻璃门；（口罩使用完毕后可自行 留着，以备下次使用，佩戴时间不超过10小时）。 2.在细胞间作业请保持安静，切勿高谈阔论； 3.严禁对着培养箱讲话；培养箱要轻开轻关，切勿产生剧烈震动； 4.显微镜使用完毕要立即关掉； 5.细胞实验所用实验服每两个月清洗一次；拖鞋每两个月更换清洗一次； 6.细胞间超净台负责人一个月负责清理一次；培养箱负责人每两个月负责清理一次，随时 查看水盘以确保水位不低于2/3； 7.里屋超净台切勿长时间照紫外（紫外时间不超过40分钟）如若超过将会被关闭；做完 实验照紫外半小时后主动关闭超净台以节约用电。此超净台在使用过程中确保不报警的情况下再进行操作，严禁在报警情况下作业； 8.细胞间的垃圾筒满后，实验人员请自觉清理； 9.血清，胰酶以及双抗的融化在4度冰箱内完成。 细胞房使用： 10.细胞房每两个星期大扫除一次，由做细胞实验人员完成，包括：扫地，拖地（含桌椅等 摆放物品下面），擦桌子（细胞房所有桌子）以及所放物品的摆放，最后开紫外灭菌1 小时； 11.细胞房值日生星期一早上给液氮罐中加液氮，清洗恒温水浴锅并换水，值日期间要保证 恒温水浴锅无异味，细胞房整洁；注意：配制PBS缓冲液时要换新瓶子，切勿重复利用！移液管清洗：84液及铬酸浸泡时间均不低于6小时，冲洗时间不低于4小时，如若发现有破碎及尖嘴部位极度发白的移液管请及时清理！ 12.细胞房冰箱使用完毕后要确保门是关闭状态；严禁放置除细胞实验以外的所有物品，一 经发现一律清除，后果自负！处理完的实验物品切勿长时间放置于冰箱，如若两天后仍发现没人处理将会被清除，后果自负！ 13.非做细胞实验时间，闲杂人等切勿在细胞房内逗留。 14.非细胞实验请勿使用细胞房离心机以及移液器。
细胞房房管理规章制度及细则
细胞房房管理规章制度及细则 第一项、所有使用人员要严格按照无菌标准进行操作。 第一条使用人员要严格执行无菌操作，保持实验室清洁。 ①每日第一个开门者，必须将开门时间记录在《细胞房预约登记表》上。 ②使用细胞房者，统一从604门口进入。一更处换鞋，脱外套。二更处穿隔离 衣、戴口罩，手套和帽子（头发必须全部进入帽子）。 ③进入风淋间，必须吹满10s，不允许急停。不可携带物品进入风淋间。 ④所有进出细胞房的物品，必须由传递口出入。洁净物品和污物各有一个传递 口，不允许污物放置于洁净物传递口内。洁净物、废液桶进入传递口必须先紫外照射10min。 ⑤废弃物不可留滞于细胞房。 ⑥超净台使用结束后，打开紫外灯15分钟，然后关闭。 ⑦气瓶间房门如无特殊情况，完全关闭，不允许随意打开。 ⑧如需观察气瓶供气和更换气瓶时，可打开602门，平时不允许随意打开。 ⑨每周日晚8点半之后停止使用细胞房，安排值日生打扫卫生。如有特殊情况 需要使用细胞房者，请提前向管理老师报备，并通知值日生。 第二条未培养过细胞的人员，不可独立使用细胞房。 ①必须在管理老师或者高年级研究生指导下进行操作。 ②考试合格后，方能独立使用细胞房。考试不合格者，不得独立使用细胞房。 ③如发现擅自使用细胞房，将追究其责任。 第三条未经管理老师许可，不得私自带外来人员使用细胞房和细胞房内仪器设备。不得在细胞房做任何与细胞培养无关试验。 第二项、细胞房使用实行预约制，使用人员必须提前预约。 使用人员须在《细胞房预约登记表》上预约使用房间、使用人员姓名、使用时间等信息。严格按照预约登记使用细胞房。 第一条如预约取消，必须及时将预约信息删除。 第二条未登记预约使用细胞房；或在预约时间内，无人使用细胞房等行为将视为违规。
细胞房注意事项
细胞房注意事项 1.进出细胞房必须换拖鞋，勿将细胞房内拖鞋穿出细胞房，房外拖 鞋也不可进入房内。进入细胞房换上细胞房专用白大褂和专用实验服，勿将一楼动物实验的白大褂带进细胞房。 2.实验结束后及时清理台面，勿将垃圾留在实验台面。整齐摆放各 类物品。实验室放置物品请写上姓名和标识。实验后及时清洗实验用品，勿将要洗的用品留在洗涤盆过夜。 3.实验后检查显微镜/酶标仪/培养箱/离心机/超净台（显微镜在关闭 电源前务必将光源调至最暗）。离心时保存两端平衡。 4.实验中用到毒害物质或者有感染物质的，请先进行汇报，得到同 意后才可进行实验。 5.注射器针头、玻璃等利器扔进利器盒，勿直接丢垃圾桶。丢弃到 实验室规定的盒子内。 6.培养瓶等放进培养箱前用，可用75%酒精消毒培养瓶表面，水平 放置。若有培养液渗出培养箱，一定要立即用75%酒精擦拭。7.培养箱内发现细菌等污染，立即将污染的培养瓶丢弃，并及时报 告实验室工作人员对污染区域进行消毒。 8.在使用酒精灯过程中，手上酒精挥发干后方可靠近酒精灯操作， 切勿将表面有酒精的物品靠近火苗。 9.值日人员检查：显微镜/酶标仪/培养箱/离心机/超净台。 10.写好预约本和登记本的各项登记。
细胞房工作人员职责： 定期检测下列项目： 1.CO2 钢瓶之CO2 压力 2.CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。 3.无菌操作台内之气流压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。 4.水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水。