生物分离工程总结 课后思考题
生物分离工程思考题
第一章
一、凝聚、絮凝的概念
凝聚作用：向胶体悬浮液中加某种电解质，使胶粒双电层电位降低，排斥作用降低，使胶体体系不稳定，胶体间相互碰撞产生凝聚的现象。特点是凝聚体的颗粒比较小
絮凝作用：当一个高分子聚合物的许多链节分别吸附在不同的胶体表面上，产生架桥联接，形成较大絮凝团的过程，特点是可形成粗大的絮凝体
二、影响过滤速度的因素有哪些？如何提高过滤速度？
过滤操作一般以压力差为透过推动力，只靠重力很难达到足够大的透过速度
透过速度:
()
L m c dV A P
dt R R
μ
?
=
+
过滤速度与过滤面积，介质两侧压力差，滤液粘度，介质和滤饼阻力有关，适当增加过滤面积，提高介质两侧压力差，加入助滤剂均可提高过滤速度
三、什么是分离因素？据此离心机可以分为哪几类？影响分离速度的因素还有哪些？
离心设备所能达到的离心力与重力的比值称为分离因素
分离因素：
22
4N r Z
g
π
=
根据分离因素可将离心机分为低速离心机，高速离心机和超高速离心机三类
分离速度:
()
22
18
P S L
s
L
d r
V
ρρω
μ
-
=
与颗粒直径、颗粒密度、液体密度和液体粘度有关
密度差越大，分离速度越大；密度差存在时，固体颗粒尺寸越大，越容易离心；粘度增大时，不容易离心；颗粒密度与液体密度差异小，固体颗粒不大，粘度很大时，增加离心力能提高离心速率
细胞破碎思考题
一、试述微生物细胞壁的组成和结构特点？
革兰氏阳性菌的细胞壁主要由肽聚糖层组成，细胞壁较厚，约15-50nm，肽聚糖含量占40%-90%
革兰氏阴性菌的细胞壁在肽聚糖层的外侧还有分别有脂蛋白和脂多糖及磷脂构成的两层外壁层，肽聚糖层约1.5-2.0nm，外壁层约8-10nm，肽聚糖含量占5%-10%
酵母的细胞壁由葡聚糖（30%-40%），甘露聚糖（30%）和蛋白质组成，比革兰氏阳性菌的细胞壁厚
霉菌由多聚糖（几丁质+葡聚糖）（80%-90%）构成
破碎难度霉菌＞酵母＞革兰氏阳性菌＞革兰氏阴性菌
二、常用微生物细胞破碎的方法有哪些？
机械法：珠磨法、X-Press法、超声破碎法和高压匀浆法
非机械法：溶酶法、化学法、渗透压法和冻结融化法
三、选择细胞破碎法的原则
一般原则
（1）、仅破坏或破碎目标产物的位置周围，当目标产物存在于细胞膜附近时，可采用较温和的方法，如酶溶法（包括自溶法），渗透压冲击法和冻结融化发等，当目标产物存在于细胞质内时，则需采用强烈的机械破碎法
（2）、选择性溶解目标产物，当目标产物处于与细胞膜或细胞壁结合的状态时，调节溶液pH值，离子强度或添加与目标产物具有亲和性的试剂如螯合剂，表面活性剂等，使目标产物容易溶解释放，同时，溶液性质应
使其他杂质不易溶出，另外，机械法和化学法并用可使操作条件更温和，在相同的目标产物释放率的情况下，降低细胞的破碎程度。
四、包含体概念，包含体分离和蛋白质复性常用工艺路线 包含体：外源基因表达的产物不能分泌到细胞外，而在细胞内凝聚成没有活性的固体颗粒，主要由蛋白质组成，一级结构正确，立体构型错误，没有活性 常用工艺路线：
细胞破碎——分离出包含体——溶解包含体——目标产物复原和复性——目标产物纯化——产品
包含体的分离可以由机械法和非机械法得到，通过机械破碎离心提取包含体加变性剂溶解包含体，最后除去变性剂复性，也可通过化学破碎溶解包含体，离心除去变性剂，使包含体复性
一、蛋白质沉淀的方法有哪些？
蛋白质沉淀常用的方法有：盐析沉淀、等电点沉淀、有机溶剂沉淀及热沉淀法
二、盐析的原理是什么？影响因素有哪些？
水溶液中蛋白质溶解度一般在生理离子强度范围内（0.15-0.2mol/kg ）最大，低于或高于此范围溶解度降低，蛋白质在高离子强度的溶液中溶解度降低发生沉淀的现象称为盐析。 蛋白质的盐析行为随蛋白质的相对分子质量和立体结构而已，不同蛋白质β值不同，K S 值随蛋白质相对分子质量的增大或分子不对称性的增强而增大，盐析沉淀结构不对称的高相对分子质量蛋白质所需的盐浓度较低，对特定蛋白质影响蛋白质盐析的主要因素有无机盐的种类，浓度，温度和pH 值 盐的种类影响K S 值，离子半径小而带电荷较多的阴离子盐析效果好
温度和pH 值影响β，在高离子强度溶液中，温度上升，有利于某些蛋白质失水，因此温度升高，蛋白质溶解度下降
pH 值接近蛋白质等电点有利于提高盐析效果
四、常用的有机溶剂沉淀剂有哪些？ 丙酮和乙醇
一、分配定律（分配系数概念）及其应用条件是什么？
在恒温恒压条件下，溶质在互不混溶的两相中达到平衡系数时，其在两相中的浓度之比为一常数，该常数称为分配系数，即
2
1C K C =
=
溶质在萃取相中的浓度溶质在萃余相中的浓度
上式应用条件：（1）稀溶液；（2）溶质对溶剂之间的互溶度没有影响；（3）溶质之间不发生缔合或解离
二、弱电解质在溶剂萃取两相中的分配平衡有何特点，pH 值如何影响弱酸、弱碱的萃取
弱电解质在水相中发生不完全解离，仅仅是游离酸或游离碱在两相产生分配平衡，而酸根或碱基不能进入有机相，所以萃取达到平衡状态时，一方面弱电解质在水相中达到解离平衡，另一方面，未解离的游离电解质在两相中达到分配平衡。对酸来说，越酸萃取效果越好，对碱来说越碱效果越好
三、化学萃取及其应用领域
化学萃取是利用脂溶性萃取剂与溶质之间的化学反应生成脂溶性复合分子实现水溶性溶质向有机相的分配，主要用于一些氨基酸和极性较大的抗生素的萃取
四、试简述单机萃取的过程，并推导回收率公式
回收率：
1
1
E
E
?
-=
+，其中
KL
E
H
=
一、何谓超临界流体（SCF）？SCF有哪些特征？
物质均有其固定的临界温度和临界压力，在P-T相同上称为临界点，在临界点以上物质处于既非液体也非气体的超临界状态，称为SCF，SCF特征如下：
（1）、SCF的密度接近液体，因此具有与液体相近的溶解能力
（2）、由于SCF粘度小（比液体小10-100倍），自扩散系数大（比液体高10-100倍），所以可以迅速渗透到物体的内部溶解目标物质，快速达到萃取平衡
（3）、在临界点附近流体的物理化学性质随温度和压力的变化及其敏感，在不改变化学组成的条件下，即可通过温度和压力调节流体的性质
这是SCF作为萃取剂优于液体的主要优点，这一特点在提取固体内有用成分时尤为重要
二、CO2的临界温度和临界压力是多少？采用超临界CO2作为萃取流体的有点有哪些？
CO2的临界温度为31.3℃，临界压力为73.8×105Pa
CO2的临界点较低，特别是临界温度接近常温，并且无毒，化学稳定性高，价格低廉，是最常用的超临界流体萃取剂
三、根据萃取过程中超临界流体与溶质分离方式的不同，超临界流体萃取可分为哪几种？
（1）、等温法萃取与分离在等温条件下操作，在分离槽减压，使SCF变成普通气体与被萃取物质分离（2）、等压法萃取与分离在等压条件下操作，在分离槽升温，使SCF变成普通气体与被萃取物质分离（3）、吸附法温度压力均不变，吸附被萃取物质，超临界流体循环使用
四、试列举四条以上超临界流体萃取的优点
1、SCF萃取同时具有液相萃取和精馏的特点，SCF萃取过程是由两种因素，即被分离物质挥发度之间的差异和它们分子间亲和力的大小不同，同时发生作用而产生相际分离效果，尤其适用于脂溶性，挥发性物质的提取
2、SCF萃取的独特优点是它的萃取能力取决于流体的密度，而密度很容易通过调节温度和压力来加以控制
3、SCF萃取中的溶剂回收很简便，并能大大节省能源，被萃取物可通过等温减压或等温升压的办法与萃取剂分离，而萃取剂只需重新压缩便可循环使用
4、SCF萃取工艺可以不在高温下操作，因此特别适合于热稳定性较差的物质，同时产品中无其他物质残留
一、在生物分离中常用的双水相体系有哪些？
常用的有高聚物/高聚物体系，如聚乙二醇（PEG）/葡聚糖（Dx）体系，高聚物/无机盐体系，如PEG/磷酸盐体系（KPi）
二、掌握双水相系统相图，理解双节线、系线、系统的总浓度，上下相组成，杠杆规则等概念
相图中的曲线称为双结点线，双结点线以下的区域为均相区，以上的区域为两相区
连接双结点线上的直线为系线，在系线上各点处系统总浓度不同，但均分组成相同而体积不同的两相
杠杆规则：均分组成相同而体积不同的两相，两相体系近似服从杠杆规则，即
T
B
V BM
V MT
=
其中，V T，V B分别为上相和下相体积，BM，MT分别为B点和M点与T点之间的距离
系线长度是衡量两相间相对差别的尺度，系线越长，两相间的性质差别越大，反之则越小，当系线长度趋向于零时，两相差别消失，任何溶质在两相中的分配系数均为1，该点称为临界点
系统总浓度：初始浓度
上下相组成：双水相平衡后，上相中的浓度与下相中的浓度
三、为什么说双水相萃取适合胞内酶和蛋白质的萃取
双水相萃取法可选择性地使目标碎片分配于双水相系统的下相，而目标产物分配于上相，同时实现目标产物的部分纯化和细胞碎片的除去，从而节省利用离心或膜分离除碎片的操作工程，因此，双水相萃取应用于胞内蛋白质的分离纯化是非常有利的
四、影响蛋白质在双水相体系中分配平衡的因素有哪些？如何影响？
1、成相聚合物及其浓度
若降低聚合物的相对分子量，则蛋白质易于分配于富含该聚合物的相中，适用于任何成相聚合物和生物大分子溶液
成相体系总浓度上升，系线远离临界点，系线长度增加，两相性质差别增大，蛋白越容易分配于其中某一相中2、无机盐离子的影响
对相间电位的影响：在体系中加入适当盐类，会大大促进带相反电荷的两种蛋白质的分离
对蛋白质疏水性的影响：无机盐的种类和浓度影响蛋白质表面疏水性增量，从而影响蛋白质的分配系数
对双水相系统组成的影响：改变成相物质的组成和体积比，这种相组成即相性质的改变直接影响蛋白质的分配系数
3、pH的影响
由于pH值影响蛋白质的解离度，调节pH值可改变蛋白质的表面电荷数，因而改变分配系数。因此。pH值与蛋白质的分配系数存在一定的关系
4、温度的影响
温度影响双水相系统的相图，因而影响蛋白质的分配系数，但一般来说，当双水相系统离临界点足够远时，温度的影响很小，1-2℃的温度改变不影响目标产物的萃取分离
五、试列举1-2种回收目标蛋白和PEG溶液的方法
1、蛋白质在富含PEG的上相中，上相加盐，形成新的双水相体系，适当条件下，蛋白质被重萃进入盐相，PEG 回收，盐相少量PEG超滤或透析除去
2、膜分离选择性孔径大小的半透膜，截留蛋白质，同时除去PEG进行回收
3、使用离子交换和吸附通过蛋白质与基质的选择性相互作用进行的
六、双水相萃取与有机溶剂萃取有何不同？
膜分离
一、试述常见的7种膜分离方法的分离原理、推动力、膜的结构、分离对象和应用领域
二、什么是截断曲线和截留分子量
通过测定已知相对分子量的球型蛋白质和水溶性多糖的截留率，可以得到截留率与相对分子量之间关系的曲线，称截留曲线
一般将在截留曲线上截留率在90%的溶质的相对分子量定义截留分子量，截留率越高，截留分子量范围越窄的膜越好
三、什么是浓度极化和凝胶极化
在膜分离操作中，所有溶质均被透过液传送到膜表面上，不能完全透过膜的溶质受到膜的截留作用，在膜表面附近浓度升高，这种在膜表面附近浓度高于主体浓度的现象称为浓度极化或浓差极化，膜表面附近浓度升高，增大了膜两侧的渗透压差，使有效压差减小，透过通量降低
当膜表面附近的浓度超过溶质的溶解度时，溶质会析出，形成凝胶层，当分离含有菌体，细胞或其他固形成分的料液时，也会在膜表面形成凝胶层，这种现象称为凝胶极化，凝胶层的形成对透过产生附加的传质阻力四、常用膜分离的组件有哪些？各有哪些优缺点
五、造成膜污染的因素有哪些？如何消除？ 膜污染的主要原因来自以下几个方面： 1
、凝胶极化引起的凝胶层 2、溶质在膜表面的吸附层 3、膜孔堵塞
4、膜孔内的溶质吸附
膜污染不仅造成透过通量的大幅度下降，而且影响目标产物的回收率，为保证膜分离操作高效稳定地进行，必须对膜进行定期清洗，除去膜表面及膜孔内的污染物，恢复膜的透过性能，清除方法分物理法与化学法
物理法：等压冲洗、反冲洗、脉冲流动、清置浸泡加水力反冲洗、泡沫塑料软球、海绵球去除污染物、超声波等
化学法：水、盐溶液、稀酸、稀碱、表面活性剂、络合剂、氧化剂和酶溶液等为清洗剂，使用的清洗剂要具有良好的去污能力，同时又不能损害膜的过滤性能
预防方法：1、选用高亲水性膜或对膜进行适当的预处理
2、对料液进行适当的预处理（如进行预过滤、调节pH 值）
3、在临界压力以下进行膜分离操作，可长时间维持较高的透过通量，降低对清洗操作的依赖程度，
提高膜分离效率
一、常用的吸附剂有哪几种？常见的吸附等温线有哪些？
活性炭：最普遍使用的吸附剂，常用于生物产物的脱色和除臭等过程 硅胶：在吸附操作特别是吸附层析中应用广泛 有机高分子吸附剂：大孔网状吸附剂
1、非极性吸附树脂：苯乙烯交联而成，交联剂为二乙烯苯，又称芳香族吸附剂
2、中等极性吸附树脂：聚酯，交联剂为甲基丙烯酸酯，又称脂肪族吸附剂
3、极性吸附剂：丙烯酰胺或亚砜聚合而成，通常含有硫氧、酰胺、氮氧等基团
此类吸附剂机械强度高，使用寿命长，选择性吸附性能好，吸附质容易脱附，并且流体阻力小，常应用于抗生素和维生素B 12等的分离浓缩过程
天然凝胶型吸附剂：多孔性纤维素、琼脂糖凝胶、葡萄糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等
等温吸附线：吸附达到平衡时，吸附剂的平衡吸附浓度q *与液相游离溶质浓度C 之间的关系，一般q *是C 和温度的函数，即q*=f(C,T)，一般吸附操作在一定温度下极性，此时q *只是C 的函数，q *与C 的关系曲线称为等温吸附线
常见的等温吸附线：
Henry 型吸附平衡， Freundlich 吸附平衡，Langmuir 单分子层吸附，矩形吸附平衡
二、离子交换树脂有哪几部分组成？常见的离子交换树脂有哪几类？其使用的pH 条件有何不同？ 离子交换树脂由三部分组成：
1、不溶性的三维空间的高分子网状骨架（固体载体）
2、以共价键连接在骨架上的官能团（活性基团）
三、各种离子交换树脂的滴定曲线有何特点
强酸（弱碱）性离子交换剂的滴定曲线开始时是水平的，到某一点突然升高（或降低）表明在该点交换剂上的离子交换基团已经被碱（或酸）完全饱和，弱酸（或弱碱）性离子交换剂的滴定曲线逐渐上升（或下降），无水平部分
四、试列举两类常用生化分离用离子交换剂，并举出两种常见阴阳离子交换基团以及分离蛋白质的特点
固相载体为多糖类物质，亲水性强，交换空间大，对生物大分子无变性作用，多采用弱酸或弱碱性交换基团羧基葡聚糖凝胶离子交换树脂，伯胺基琼脂糖凝胶离子交换树脂
常用阳离子交换基团：羧基，酚羟基
常用阴离子交换基团：伯胺基、仲胺基
五、什么是交换容量和穿透曲线
交换容量用单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数来表示吸附过程中吸附塔出口溶质浓度的变化曲线称穿透曲线
六、基本的离子交换操作包括哪几步？
1、预处理
物理处理：过筛、去杂，以获得粒度均匀的树脂颗粒，水洗和溶胀
化学处理：通常采用酸碱进行处理，对于大孔型处理有时还要用有机溶剂如乙醇、丙酮等进行处理以除去有机杂质
在预处理的最后阶段应使其转化为分离过程所适用离子型式，最后以去离子水或缓冲液平衡
2、上柱交换
顺流进行（正上柱）：即原液自上而下流过树脂层
逆流进行（倒上柱）：即原液自下而上流过树脂层
交换至穿透点时，应停止交换，进行清洗，洗脱或再生
3、清洗
用不含样品的上柱溶液清洗非交换吸附的滞留杂质
4、洗脱
洗脱就是用亲和力更强的同性离子取代树脂上吸附的目的产物
5、树脂的再生
指使离子交换树脂重新具有交换能力的过程
树脂使用失效之后，先用清水洗涤，除去树脂表面和孔隙内部物理吸附的各种杂质，后用酸碱处理除去与功能基团结合的杂质，最后用再生剂再生，用清水洗至所需pH值
一、什么是色谱分离技术？它有哪些特点？
色谱分层，也称作层析分离，是根据混合物中各组分物理化学性质，包括吸附力，分子间作用力，分子大小，分子亲和力，分配系数的差异，使其在互不混容的两相之间的分配行为产生差异，引起移动速度不同而进行分离的方法
色谱分离方法的特点是：
1、分离效率高，适合于极复杂混合物的分离
2、应用范围广，从极性到非极性，离子型到非离子型，小分子到大分子，无机到有机及生物活性物质以及热稳定到热不稳定化合物都可以用色谱分离方法
3、选择性强，可以通过多种途径适应各种不同样品的分离要求，可以选择不同的色谱分离方法，可以选择不同的固定相和流动相，可以选择不同的洗脱方法，可以选择不同的分离操作方法，如温度，pH，离子强度，流速等
4、高灵敏度的在线检测，快速分离，自动化程度高
二、色谱分离技术有哪些分类？
1、按流动相和固定相
根据流动相状态：气相色谱、液相色谱和超临界流体色谱
固定相有固体，液体和以固体为载体的液膜
2、按固定相的形状
根据固定相或色谱装置形状的不同可分为纸色谱、薄层色谱和柱色谱
柱色谱：具有制备量大，样品易回收等优点，是生物分离中主要的分离纯化手段，除用于制备外还用于分析
纸色谱：以吸附于纸上的水位固定相，以有机溶剂为流动相的分配色谱，样品的制备量少，多用于定性分析的目的
薄层色谱：将固定相在玻璃平板或铝箔上铺成薄层，进行分离的一种色谱技术，根据所涂固定相的不同，可以分为多种，薄层色谱主要用于分析目的
3、按操作压力分
液相色谱分为低压（压力一般小于0.5MPa），中压（压力为0.5-4MPa）和高压（压力为4.0-40MPa），高压液相色谱中固定相颗粒微细，分离精度高，速度快，主要用于成分分析，大制备分离常用低压或中压液相色谱4、按分离机理
根据溶质和固定相之间的相互作用机理，液相色谱可以分为：凝胶色谱，离子交换色谱，分配色谱（正向色谱、反向色谱）、疏水作用色谱和亲和色谱等
5、按照色谱流动相的流动方式
轴向流色谱：流动相从柱固定床的一端输入，沿轴向流向另一端
径向流色谱：在柱心设一通透性细管，料液和流动相从柱的周围引入，从外表面沿径向流向柱心，透过中心管流出，其优点是在规模放大时，半径不变，通过增加柱高来提高处理能力，而增加柱高不会增大压降
6、按照柱色谱的洗脱方式
分为洗脱展开，前沿分析，置换展开三种色谱分离方式
三、试概述凝胶色谱、离子交换色谱、疏水作用色谱、反向色谱、（亲和色谱）的原理、固定相、流动相及其应用领域等
六、常用于蛋白质分离的色谱方法有哪些？简述其原理及固定相流动特点
四、解释分配系数、分离度的意义
分配系数：在平衡状态下，组分在固定相和流动相中的浓度之比。分配系数是物质的特性，当分离条件一定时，其为定值
分离度：定量表达相邻两峰之间分离程度的量度，分离度越大，色谱峰分离就越好
五、色谱分离的仪器系统有哪几部分组成？洗脱展开方法有哪些？
色谱分离的仪器系统主要由：流动相供给系统、进样器、色谱柱、检测器及流分收集器等部分构成
洗脱展开方式有：恒定洗脱、线性梯度洗脱、逐次洗脱三种
一、亲和层析的原理
利用生物分子间特异性结合作用的原理进行生物物质的分离纯化的技术称为亲和分离技术，亲和层析是利用偶联亲和配基的亲和吸附介质为固定相亲和吸附目标产物，使目标产物得到分离纯化的液相层析法
二、如何制备亲和吸附剂
亲和层析剂的制备过程一般包括三步：载体的选择，载体的活化和配基的连接
载体选择的标准是：1、具有亲水性多孔结构，无特异性吸附，比表面积大
2、物理和化学稳定性高，有较高的机械强度，使用寿命长
3、含有可活化的反应基团，用于亲和配基的固定化
4、粒径均一的球型粒子
常用的活化方法有：1、溴化氰活化法
2、环氧基活化法
3、硅胶活化法
活化后再用直接或间接的方式连接配基即可
三、亲和分离中常用的亲和关系有哪些？
四、亲和层析分离的洗脱方法有哪些？有何特点？
普通洗脱法：可以通过改变溶剂或缓冲液的类型，改变缓冲液的pH和例子强度，改变洗脱温度，以及添加促溶剂等措施来削弱生物大分子与配体之间的亲和力，进行洗脱
专一性洗脱法：指洗脱溶液中添加的配基与亲和层析剂上的配基同时对生物活性物质产生竞争性的结合，从而达到洗脱目的
专一性洗脱可以获得很高的分辨能力，但是专一性洗脱剂的价格都比较高昂，所以常与普通洗脱条件配合作用
一、结晶与沉淀的异同点如何？
相同点：结晶与沉淀生成的原理相同，都是新相生成的过程，是利用溶质之间溶解度的差别进行分离纯化的分离操作
不同点：结晶是物质内部结构的质点（原子、分子或离子）作有规律排列的、定形固定粒子，而沉淀是无规则排列的、无定形粒子；结晶的形成需在严密控制的操作条件下进行，因此结晶的纯度高于沉淀
二、饱和溶液和过饱和溶液的概念，结晶过程的推动力是什么？过饱和溶液形成的方法有哪些？
饱和溶液：向恒温溶剂中加入溶解性固体溶质，溶质在溶剂中发生溶解现象，溶剂中溶质的浓度不断上升，如果不断添加固体溶质，一定时间后，溶剂中溶质的浓度不再升高，而此时尚有固体溶质存在，即溶质在固液之间达到平衡装才，该溶液称为溶质的饱和溶液
过饱和溶液：溶质浓度超过饱和溶解度时，该溶液称之为过饱和溶液
要使溶质从溶液中结晶出来，必须首先使溶液称为过饱和状态，产生一定的结晶推动力
过饱和溶液的形成方法有：饱和溶液冷却；溶剂蒸发；冷却蒸发
四、在结晶过程中（包括晶核的生成和结晶的生长）如何控制条件以获得质量好的晶体？（主要采用的晶核生成方式以及如何控制晶体生长速度）
接触成核在工业结晶中被认为是获得晶核最简单、最好的方法，二次成核是晶核的主要来源，晶体生长过程中，表面反应速度高，扩散速率低，则晶体质量好，表面反应速率与结晶温度的关系很大，结晶温度升高，表面反应速率加快，扩散速率基本不不变，有利于晶体生长，扩散速率正比于浓度差，一切提高浓度差的因素都会增加扩散速率。而当扩散速率＞表面反应速率时，晶体质量就会下降
一、减压蒸发及其优点
减压蒸发是指冷凝器和蒸发器溶液侧的操作压力低于大气压，此时系统中的不凝性气体必须用真空泵抽出。
优点：1、溶液沸点低，有利于处理高温下易分解和变质的热敏物料；2、蒸发器的操作温度低，系统热损失小二、常用的干燥方法有哪几类？并简述其特点
三、何谓结合水、非结合水、自由水、平衡水？
非结合水：包括存在于物料表面的润湿水及孔隙水，此种水分与物料纯属机械结合方式，与物料的结合强度小，故易于除去
结合水：包括物料细胞或纤维管壁及毛细管中所含的水分，这种水分主要的是属于物理化学结合方式，故难以除去
自由水：用一定温度和湿度的空气干燥湿物料时，可以从物料除去的水分称为自由水
平衡水：物料与其相接触的空气达到相平衡状态时物料所含的水分称为平衡水
《环境微生物学》复习重点总结
《环境微生物学》复习重点 1、微生物是如何分类的？答：各种微生物按其客观存在 的生物属性（如个体形态及大小、染色反应、菌落特征、细胞结构、生理生化反应、与氧的关系、血清学反应等）及它们的亲缘关系，由次序地分门别类排列成一个系统，从大到小，按界、门、纲、目、科、属、种等分类。种是分类的最小单位，“株”不是分类单位。 2、微生物有哪些特点？答：（一）个体极小。微生物的个体极小，有几纳米到几微米，要通过光学显微镜才能看见，病毒小于0.2微米，在光学显微镜可视范围外，还需要通过电子显微镜才可看见。（二）分布广，种类繁多。环境的多样性如极端高温、高盐度和极端pH造就了微生物的种类繁多和数量庞大。（三）繁殖快。大多数微生物以裂殖的方式繁殖后代，在适宜的环境条件下，十几分钟至二十分钟就可繁殖一代。在物种竞争上取得优势，这是生存竞争的保证。（四）易变异。多数微生物为单细胞，结构简单，整个细胞直接与环境接触，易受外界环境因素影响，引起遗传物质DNA的改变而发生变异。或者变异为优良菌种，或使菌种退化。 3 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构有什么异同？各有哪些化学组成？答：革兰氏阳性菌细胞壁厚约20-80nm，结构较简单，含肽聚糖，革兰氏阴性菌细胞壁厚约10nm，结
构复杂，分外壁层和内壁层，外壁层又分三层：最外层是脂多糖，中间是磷脂层，内层是脂蛋白。内壁含肽聚糖，不含磷壁酸。化学组成：革兰氏阳性菌含大量肽聚糖，含独磷壁酸，不含脂多糖。革兰氏阴性菌含极少肽聚糖，含独脂多糖，不含磷酸壁。 4、叙述革兰氏染色的机制和步骤。答：将一大类细菌染上色，而另一类染不上色，一边将两大类细菌分开，作为分类鉴定重要的第一步。其染色步骤如下：1在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，固定。2用草酸铵结晶紫染色1min，水洗去掉浮色。3用碘—碘化钾溶液媒染1min，倾去多余溶液。4用中型脱色剂如乙醇或丙酮酸脱色，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色。革兰氏阴性菌被褪色而成无色5用蕃红染液复染1min，格兰仕阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和格兰仕阴性菌即被区分开。 5、何谓放线菌？革兰氏染色是何种反应？答:在固体培养基上呈辐射状生长的菌种，成为放线菌。除枝动菌属革兰氏阴性菌，革兰氏染色呈红色外，其余全部放线菌均为革兰氏阳性菌，革兰氏染色呈紫色。 6、什么叫培养基？按物质的不同，培养基可分为哪几类？按试验目的和用途的不同，可分为哪几类？答：根据各种微生物的营养要求，将水、碳源、氮源、无机盐及生长因子等
微生物学复习思考题
名词解释： 微生物、微生物学、纯培养、纯培养物无菌技术、灭菌、消毒、过滤富集培养 简答题： 1、微生物的特点有那些？ 2、Mullis的贡献对我们有什么启发？ 3、列文虎克对微生物学有什么贡献？4 、巴士德和柯赫对微生物学的发展有什么贡献？5、柯赫证病律的具体内容是什么？6 、拂来明对微生物学的贡献是什么？7 、我国著名的微生物学家有那些？分别作出了什么贡献？8、干热灭菌和高压蒸汽灭菌有什么差别？9、举出几种常用的消毒药品和方法？10、纯培养有几种方法？11、为什么活菌记数和直接记数有很大的差别？12、按照功能和营养成分培养基有几种类别？13、菌种保藏的基本原理是什么？1 4、保藏微生物的基本方法有那些？1 5、已发现的微生物的形态有几种？1 6、芽孢杆菌和芽孢梭菌有何异同？1 7、举例说明非芽孢杆菌的特点？1 8、古细菌有那三大类？1 9、根霉、曲霉和青霉的形态特征如何？20、吃什么食用菌可以预防感冒？21、吃什么食用菌可以增加智力？22、原核微生物和原核微生物的主要类群有那些？23、球菌的基本形态有几种？24、细菌的基本结构组成有那些？25、细菌的特殊结构有那些？26、细胞壁及其功能是什么？27、肽聚糖的基本组成是什么？28、G+ 和G-细胞壁的结构有和异同？29、Gram染色的基本过程如何？30、细菌为什么可以分为G+ 和G-两种？31、无壁细胞有那几种？32、聚-B-羟丁酸有什么功能？33、气泡有什么功能？34、什么是糖被、根据物理特征不同可以分为几类？35、糖被的化学组成和功能是什么？36、鞭毛有何功能和种类？37、鞭毛的一般结构和基体的组成如何？38、什么是芽孢、有何特点？39、芽孢耐热的分子机制如何？40、为什么放线菌介于真菌和细菌之间而更接近于细菌？41、放线菌的繁殖方式有几种？42、在什么条件下使用火焰灭菌？43、稀释倒平板法和涂平板法有什么差别？
微生物复习思考题教学总结
微生物复习题 第一章原核微生物的形态、构造和功能 1、概念 磷壁酸、LPS、PHB、糖被、芽孢、伴孢晶体、菌落、菌苔、放线菌、原生质体、原生质球、原核微生物、真核微生物、支原体、立克次氏体、衣原体、鞭毛、菌毛、性毛、弧菌、黄原胶、基内菌丝 2、问答题 图解细菌的基本结构和特殊结构都包括那些？ 试述细菌的三种基本形态。 细菌细胞壁与细胞膜的主要生理功能有哪些？ G+和G-细菌细胞壁构造有何异同？ 缺壁细菌有哪些类型? 脂多糖的主要功能？ 细菌的芽孢有何实践重要性。产芽孢的细菌主要有哪几类？各举一例。 阐述溶菌霉和青霉素抑制细菌的机理？ 什么是革兰氏染色法？它的主要步骤是什么？ 试述革兰氏染色的机理 荚膜的化学成分如何？有何生理功能？ 渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制？ 如何理解“放线菌是介于细菌与丝状真菌间而更接近于细菌的一类微生物”？ 放线菌的菌体形态由哪几部分构成？它们之间有何联系？ 放线菌如何繁殖？ 放线菌的菌落有何特点？ 有一未知细菌培养物，请用本章所学的知识，阐述如何研究它的形态、构造和功能，所需要的知识和技术包括哪些内容？ 第二章真核微生物的形态、构造和功能 1、概念 假菌丝、真菌丝、菌丝体、霉菌 2、问答题 真菌和酵母菌有哪些特点？ 真核生物与原核生物在细胞结构和功能方面有何差异？ 霉菌的营养菌丝和气生菌丝分别能分化出那些特化构造？ 细菌、放线菌、酵母菌、霉菌四大类微生物的菌落有何不同？为什么？ 第三章病毒和亚病毒 1、概念 真病毒、亚病毒、病毒粒、噬菌斑、烈性噬菌体、温和噬菌体、多角体。 2、问答题 病毒有哪些特征？ 病毒核酸有哪些特点？ 典型病毒粒的基本结构。 病毒粒有哪几种对称形式？各举一例。 试述烈性噬菌体的繁殖过程。 一步生长曲线可分为几期，各期有什么特点？ 第四章微生物的营养和培养基
微生物学实验指导
实验一光学显微镜的使用及微生物形态的观察、 大小的测定和计数 一、实验目的 １、掌握光学显微镜的结构、原理，学习显微镜的操作方法和保养 2、观察细菌、真菌、原生动物的标本装片,学会绘制生物图 3、掌握使用测微尺测量微生物大小的方法 ４、了解血球计数板的结构，掌握使用和计算方法 二、实验器材 １、显微镜 ２、微生物标本装片 ３、目、物镜测微尺 ４、血球计数板 ５、酵母菌液或霉菌孢子液 6、载波片、盖波片、烧杯、滴管、擦镜纸、香柏油、二甲苯等 三、显微镜的构造、原理及使用方法 1、构造 现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，故又常被称为复式显微镜,由机械装置和光学系统两大部分组成。机械装置包括镜筒、转换器、载物台、镜臂、镜座、调节器;光学系统包括目镜、物镜、聚光器、电光源。显微镜的总放大倍数为目镜和物镜的放大倍数的乘积。 ２、操作 在目镜保持不变的情况下,使用不同放大倍数的物镜所能达到的分辨率及放大率都是不同的。一般情况下,特别是初学者，进行显微观察时应遵循从低倍镜到高倍镜再到油镜的观察程序,因为低倍数物镜视野相对大,易发现目标及确定检查的位置。 四、微生物大小的测量原理和方法 微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和物镜测微尺。 1、目镜测微尺(图1-1）是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍｍ长度刻成5０等分，或把1０mm长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上（此处正好与物镜放大的中 --
-- 间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用物镜测微尺校正，以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。 2、物镜测微尺(图１-２）是中央部分刻有精确等分线的载 玻片,一般将lmm 等分为100格,每格长ｌ０μm （即0.0ｌmm), 是专门用来校正目镜测微尺的。校正时，将物镜测微尺放在载 物台上,由于物镜测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经 过物镜和目镜的两次放大成象进入视野,即物镜测微尺随着显 微镜总放大倍数的放大而放大，因此从物镜测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用物镜测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去物镜测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。 3、目镜测微尺的校正 把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把物镜测微尺置于载物台上，刻度朝上。先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清物镜测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与物镜测微尺的刻度平行，移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“０”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度（图1－３)，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和物镜测微尺的格数。因为物镜测微尺的刻度每格长l0μｍ，所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。 例如目镜测微尺５小格正好与物镜测微尺5小格重叠，已知物镜测微尺每小格为ｌ0μm ，则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/５=1０μm 用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。 由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度）进行，而且只能在特定的情况下重复使用,当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。 4、细胞大小的测定 移去物镜测微尺,换上待测菌体的装片，先在低倍镜下找到目的物,然后在高倍镜下用目镜测微尺来测量菌体的长，宽各占几格（不足一格的部分估计到小数点后一位数）。测出的格数乘上目镜测微尺每格的校正值,即等于该菌的长和宽。 结果计算： 长μm=平均格数×校正值 宽μｍ＝平均格数×校正值 大小表示: 宽μm ×长μｍ 五、微生物细胞数量的测定原理和方法 1、血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个计数区(图1-4），计数区 图1-1 目镜测微尺 图1-2 物镜测微尺 图1-3 目、物镜测微尺的校正 图1-4 血球计数板
医学微生物学名词解释总结
第一二章细菌的形态结构与生理 1、微生物：（P1）存在于自然界形体微小，数量繁多，肉眼看不见，必须借助 与光学显微镜或电子显微镜放大数百倍甚至上万呗，才能观察的一群微小低等生物体。 2、微生物学：（P2）用以研究微生物的分布、形态结构、生命活动（包括生理 代、生长繁殖）、遗传与变异、在自然界的分布与环境相互作用以及控制他们的一门科学 3、医学微生物学：（P3）主要研究与人类医学有关的病原微生物的生物学症状、 对人体感染和致病的机理、特异性诊断方法以及预防和治疗感染性疾病的措施，以控制甚至消灭此类疾病为的目的的一门科学 4、代时：细菌分裂倍增的必须时间 5、细胞壁：包被于细菌细胞膜外的坚韧而富有弹性的膜状结构 6、肽聚糖或粘肽：原核细胞型微生物细胞壁的特有成分，主要由聚糖骨架、四 肽侧链及肽链或肽键间交联桥构成 7、脂多糖：（P13）LPS 革兰阴性菌细胞壁外膜伸出的特殊结构，即细菌毒素。 由类脂A、核心多糖和特异多糖3个部分组成 8、质粒：（P15）是细菌染色体外的遗传物质，双链闭合环状DNA结构，带有遗 传信息，具有自我复制功能。可使细菌或的某些特定形状，如耐药、毒力等 9、荚膜：（P16）某些细菌能分泌粘液状物质包围与细胞壁外，形成一层和菌体 界限分明、不易着色的透明圈。主要由多糖组成，少数细菌为多肽。其主要功能是抗吞噬，并有抗原性
10、鞭毛：（P16）从细菌细胞膜伸出于菌体外的细长弯曲的蛋白丝状物，是细 菌的运动器官，见于革兰阴性菌、弧菌和螺菌。 11、菌毛：（P17）是存在于细菌表面，由蛋白质组成的纤细、短而直的毛状结 构，只有用电子显微镜才能那个观察，多见于革兰阴性菌 12、芽孢：（P18）那个环境条件下，某些革兰阳性菌能在菌体形成一个折光性 很强的不易着色小题，成为生孢子，简称芽孢 13、细菌L型：（P14）即细菌缺陷型。有些细菌在某些体外环境及抗生素等作 用下，可部分或全部失去细胞壁。 14、磷壁酸：（P12）是由核糖醇或甘油残基经磷酸二酯键互相连接而成的多聚 物。为大多数革兰阳性菌细胞壁的特有成分。有两种，即壁磷壁酸和膜磷壁酸 15、细菌素：（P25）是某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质或蛋白 质与脂多糖的复合物 16、专性需氧菌：（P 23）此类细菌具有较完善的呼吸酶系统，需要分子氧作 为受氢体，只能在有氧的情况下生长繁殖。 17、热原质：（P25）是细菌产生的一种脂多糖，将它注入人体或动物体可引起 发热反应 18、专性厌氧菌：（P23）此类细菌缺乏完善的呼吸酶系统，只能在无氧条件下 生长繁殖 19、抗生素：（P25）为某些微生物代过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他 微生物或癌细胞的物质 20、兼性厌氧菌：（P23）此类细菌具有完善的酶系统，不论在有氧或无氧环境
《生物分离工程》复习内容提要
2009级《生物分离工程》复习内容提要 第一章绪论：重点节：第二节、第三节 1、生物分离工程的一般流程Page4 2、生物分离纯化工艺过程的选择依据Page5 3、生物分离过程的特点Page6 第二章发酵液的预处理：重点节：第一节 1、发酵液的一般特性Page9 2、发酵液预处理的要求Page10-11 3、发酵液预处理的方法Page11-16 4、凝集&絮凝Page11-12 5、转筒真空过滤机的结构和工作原理Page27-28 第三章细胞分离技术：重点节：第二节
1、差速离心&密度梯度离心Page31 2、比较不同细胞破碎方法（机械法、化学法、物理法和酶溶法）的原理和优缺点Page34-39 3、比较珠磨法、高压匀浆法和超声波细胞破碎法的优缺点Page34-36 4、细胞破碎的方法主要有哪些？选择破碎方法时应考虑哪些因素？（自己总结） 5、蛋白质复性及其主要复性方法（稀释与透析、色谱、反胶束）Page41-45 第四章沉淀技术：重点节：第三节 1、盐析的原理Page51 2、K s和β分级盐析法Page52 3、什么是饱和度？盐析沉淀操作曲线的制作实验步骤Page54 4、盐析操作计算Page53-54 5、主要的沉淀方法（盐析、有机溶剂、等电点、变性沉淀等）及其优缺点比较Page27-28
第五章萃取技术：重点节：第二节（二）、第三节（二、三）、第四节（一、二、四）、第六节（一、二）、第八节（一、二、三、四） 1、萃取分配系数、相比、萃取分离系数Page65 2、单级萃取、多级逆流萃取、多级错流萃取理论收率和萃余率的计算Page67-70 3、物理萃取&化学萃取Page72-73 4、水相条件如何影响有机溶剂萃取过程Page73-74 5、有机溶剂萃取剂的选择原则Page74 6、解释双水相相图Page81 7、常用的双水相系统有哪些？Page80-81 8、什么是道南电位Page82，试述道南平衡理论在双水相萃取、纳滤膜分离机制和离子交换 树脂分离机制解释中的应用。（自己总结） 9、影响双水相分配系数的主要因素有哪些？Page83-84
微生物学周德庆版重点课后习题答案
绪论 1.微生物：一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。 2.列文虎克（显微镜，微生物的先驱）巴斯德（微生物学）科赫（细菌学） 3.什么是微生物？习惯上它包括那几大类群？ 答：微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。它是一些个体微小结构简单的低等生物。包括①原核类的细菌（真细菌和古细菌）、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体和衣原体；②真核类的真菌（酵母菌、霉菌和蕈菌）、原生动物和显微藻类；③属于非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒、拟病毒和朊病毒）。 4.为什么说微生物的“体积小、面积大”是决定其他四个共性的关键？ 答：“体积小、面积大”是最基本的，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此而产生其余4个共性。 第一章原核生物的形态、构造和功能 1.细菌：是一类细胞极短（直径约0.5微米，长度约0.5-5微米），结构简单，胞壁坚韧，多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。 2.试图示肽聚糖单体的模式构造，并指出G+细菌与G-细菌在肽聚糖成分和结构上的差别？ 答：主要区别为；①四肽尾的第3个氨基酸不是L-lys，而是被一种只有在原核微生物细胞壁上的特殊氨基酸——内消旋二氨基庚二酸（m-DAP）所代替；②没有特殊的肽桥，其前后两个单体间的连接仅通过甲四肽尾的第4个氨基酸（D-Ala）的羧基与乙四肽尾的第3个氨基酸（m-DAP）的氨基直接相连，因而只形成较为疏稀、机械强度较差的肽聚糖网套。 3.试述革兰氏染色的机制。 答：革兰氏染色的机制为：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色
最新微生物实验思考题参考答案及知识要点
微生物实验思考题参考答案及知识要点 一．酵母菌形态观察及死活细胞鉴别 1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 美蓝浓度高了，代谢不太活跃的活细胞也会被染色，从而使观察到的死细胞较多，活细胞较少；反之，则代谢微弱的细胞也能还原美蓝，不被染色，从而使观察到的死细胞较少，活细胞较多。 二. 细菌的简单染色和革兰氏染色 1. 革兰氏染色中那一步是关键?为什么？你是如何操作的？ 革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色（是脱色时间）。如果脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s）。 2. 固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同？ 自然死亡的菌体本身已经部分自溶，结构已经改变。固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。 3. 不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？ 能。在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋），被酒精脱色为革兰氏阴性菌。最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。 4. 涂片为什么要固定，固定适应注意什么问题？ a 杀死细菌并使菌体黏附与玻片上； b 增加其对染料的亲和力。 固定时应注意：手持玻片，菌膜朝上，在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜），固定时应尽可能维持细胞原有形态，防止细胞膨胀或收缩。 三. 霉菌、放线菌的形态观察 1. 镜检时，如何区分基内菌丝与气生菌丝？ 一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到
微生物实验复习题
兽医微生物学实验复习题 1、兽医微生物实验室注意事项是什么？ 答：①防止病原微生物的散布；②防火；③节约；④标记；⑤记录；⑥安全；⑦清洁与秩序 2、观察细菌常用什么显微镜？它主要有哪几部分组成？ 答：光学显微镜光学部分:目镜、物镜、反光镜、聚光器；机械部分：镜座、镜臂、镜筒、粗调节器、细调节器。 3、油镜用毕后，为什么必须把油镜擦净？ 答：油镜的原理是通过香柏油的光路折射能更加清晰的观察微生物，油具有粘附性，且不溶于水，所以，在观察完后，香柏油会粘附在镜头上，不擦去的话，风干后镜头就变得模糊不清，甚至报废了，又因为是油所以简单的用擦镜纸擦拭是擦不干净的，二甲苯属于有机溶剂， 4、用过多的二甲苯或酒精乙醚混合液擦拭镜油有什么危害？ 答：过多的二甲苯或酒精乙醚混合液容易脱胶，使油镜脱落。 5、使用油镜时用什么作为物镜与玻片间的介质，有几种？ 答：可用与玻璃的折光系数相近的油类，有7种，如柏木油。 6、观察细菌时显微镜的操作步骤是什么？主意事项是什么？ 答：将显微镜物镜镜头转为油镜对好光线（开高集光器，开大光圈，调好反光镜）使亮度最强在载物台上放上载玻片，并在玻片上放一滴香柏油将标本移至载物台正中转动粗准焦螺旋，使油镜浸入油滴中左眼由目镜注视镜内，慢慢地转动细准焦螺旋，直至物像清晰为止 注意事项：1.调节粗准焦螺旋的时候要慢 2.观察完后要用二甲苯擦拭油镜 7、微生物绘图要求有哪些？ 答：①绘出一个视野，圆形。 ②细菌大小比例合理，必须标明名称。 ③标名显微镜的放大倍数，标明菌名。 ④绘图一律用铅笔。 8、制备细菌染色标本片时应注意哪些事项？ 答：①干燥好的抹片固定时，使抹面向上，以其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回拖动过数次，略作加热，但不能太热，以不烫手为度进行固定。 9、涂片固定的意义何在？固定时应注意什么问题？有哪些固定方法？答：意义：涂片固定可将涂片上的细菌杀死，使之固定而不会到处漂移，并且死菌比活菌更容易着色，为后面染色做准备。 注意：若用火焰固定时，抹面向上，以其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回拖动过数次，略作加热，但不能太热。固定方法：火焰固定和化学固定。 10、细菌染色的原理是什么？ 答：细菌的等电点较低，约在pH 2～5之间，故在中性、碱性或弱碱性溶液中，菌体蛋白质电离后带负电荷，易与带正电荷的碱性染料如龙胆紫及碱性复红等结合，使细菌被染成紫色或红色。 11、试述细菌革兰氏染色法的步骤及结果。革兰氏染色的原理是什么？ 答：原理：G＋菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈蓝紫色。 Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。
微生物学总结
微生物学总结 绪论： 一、名词解释： 微生物：一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。它们都是一些个体微小，构造简单的低等生物。 二、简答、论述： 1、微生物的五大共性： ⑴体积小，面积大；⑵吸收多，转化快；⑶生长旺，繁殖快；⑷适应强，易变异；⑸分布广，种类多。 2、巴斯德和科赫对微生物学的贡献： 巴斯德： ⑴彻底否定了“自生说”。（曲颈瓶实验） ⑵免疫学——预防接种。（鸡霍乱病） ⑶证明发酵是由微生物引起的。 ⑷发明巴氏消毒法。 科赫： ⑴证实炭疽病菌是炭疽病的病原菌。 ⑵发现了肺结核病的病原菌。 ⑷用固体培养基分离纯化微生物。 ⑸配制培养基。 原核生物： 根据外表特征把原核生物粗分为6种类型：细菌、蓝藻（蓝细菌）、放线菌、支原体、衣原体、立克次氏体 一、名词解释： 原核生物：指一大类细胞核无核膜包裹，只存在称作核区的裸露DNA的原始单细胞生物。 细菌：是一类细胞细短、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂繁殖和水生性较强的原核生物。 糖被：是包被与某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质。分为荚膜、微荚膜、粘液层和菌胶团。 芽孢：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造，称为芽孢。 伴孢晶体：少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体，称为伴孢晶体。是毒性蛋白，苏云金芽孢杆菌可作为消灭昆虫的菌剂，就是利用了该性质。
菌落：将单个微生物细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面（有时在内层），当它占有一定的发展空间并处于适宜的培养条件下时，该 细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆，即菌落。 放线菌：一类主要呈丝状生长和以孢子繁殖的革兰氏阳性细菌。 蓝细菌：一类进化历史悠久、革兰氏染色阴性、无鞭毛、含叶绿素a、藻胆素、类胡萝卜素（但不形成叶绿体）、能进行产氧性光合作用的 大型原核生物。 细菌L—型: 是细菌在某些环境条件下所形成的变异型，是遗传性稳定的细胞壁缺损细菌，在固体培养基上形成“油煎蛋”似的小菌 落。 细菌形成L型大多染成革兰阴性。 古生菌的细胞壁：古生菌如产甲烷杆菌、极端嗜盐菌、极端嗜热菌其细胞 壁含假肽聚糖。 中介体：是部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，多见于革兰阳性菌。其功能类似于真核细胞的线粒体，故亦称为拟线粒体 菌毛：许多革兰阴性菌和少数革兰阳性菌菌体表面存在着一种比鞭毛更细、更短而直硬的丝状物，与细菌的运动无关。 产生芽胞的都是革兰阳性菌。芽胞不是细菌的繁殖方式 支原体：一类无细胞壁、能独立生活的最小型原核生物。 支原体特点： 细胞很小，多数直径为250nm,故光镜下勉强可见，能通过细菌滤器。 无细胞壁，G-,形态易变，对渗透压敏感，对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感。 细胞膜含甾醇，比其它原核生物的细胞膜坚韧。 菌落小，在固体培养基上呈特有的“油煎蛋”状。 以二分裂和出芽等方式繁殖 能在含血清、酵母膏和甾醇等营养丰富的加富培养基上生长。 对抑制蛋白质合成的抗生素（四环素、红霉素等）和破坏含甾体的细胞膜结构的抗生素（两性菌素、制霉菌素等）都很敏感。 衣原体：有细胞壁，但缺肽聚糖，对作用于肽聚糖的青霉素、溶菌酶等不敏感。G- 有核糖体。以二分裂方式繁殖 缺乏产生能量的酶系，须严格细胞内寄生，称“能量寄生物”。 不能用普通培养基培养，须在培养基中加入活的鸡胚等进行活体培养。 立克次氏体：细胞较大，光镜下清晰可见，不能通过细菌滤器。 有细胞壁，G-
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球菌 1,何谓SPA？简述其作用。 答:葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,SPA)：90％以上金黄色葡萄球菌细胞壁表面的蛋白质；可与人及多种哺乳动物的IgG分子的Fc段非特异性结合,结合后的IgG分子Fab段仍能与抗原特异结合。 体内作用：SPA与IgG结合后所形成的复合物具有抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物活性。 体外作用：协同凝集试验,广泛应用于多种微生物抗原检测。 2 ,金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌引起化脓性炎症的特点有何不同,为什么? 答：金黄色葡萄球菌临床特点：脓汁黄而黏稠、病灶界限清晰、感染局限化。 乙型链球菌临床特点：脓液稀薄、病灶界限不清、易扩散。 原因：金黄色葡萄球菌含有凝固酶,可以抵抗吞噬细胞的吞噬；保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏;感染局限化和形成血栓。 而乙型链球菌含有侵袭性酶,均是扩散因子,包括： （1）透明质酸酶：分解间质内透明质酸,利于病菌扩散。 （2）链激酶（SK）：溶解纤维蛋白、阻止血浆凝固,利于病菌扩散。 （3）链道酶（SD）：降解脓液中DNA ,使脓液稀薄,促进病菌扩散。 3.对脑膜炎奈氏菌应如何进行分离培养（为何需要床边接种） 答：营养要求较高,常用巧克力（色）培养基,专性需氧。对理化因素抵抗力很弱。 4.根据涂片染色镜检可作出微生物学初步诊断的病原性球菌有哪些? 4.金黄色葡萄球菌的致病物质和所致疾病？
答：(1)凝固酶：抵抗吞噬细胞的吞噬；保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏,感染局限化和形成血栓。(2)葡萄球菌溶素。损伤细胞膜的毒素(3)杀白细胞素攻击中性粒细胞和巨噬细胞,抵抗宿主吞噬细胞,增强细菌侵袭力(4)肠毒素引起急性肠胃炎（食物中毒）(5)表皮剥脱毒素引起金黄色烫伤样皮肤综合征,又称剥脱性皮炎(6)毒性休克综合征毒素-1引起多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征 肠道杆菌 5.引起胃肠炎的大肠埃希菌有哪几种？简述ETEC的致病机制. 答: 肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC）;肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC);肠致病型大肠埃希菌（EPEC）;肠出血型大肠埃希菌（EHEC）;肠集聚型大肠埃希菌（EAEC）ETEC致病机制：不耐热肠毒素(LT)耐热肠毒素(ST) 激活腺苷酸环化酶激活鸟苷酸环化酶 cAMP浓度升高cGMP浓度升高 过度分泌小肠液 腹泻 6.大肠埃希菌最常见的肠道外感染有哪些？ 以化脓性感染和泌尿道感染最为常见 （1）化脓性感染：腹膜炎、手术创口感染、败血症（死亡率高）、新生儿脑膜炎 （2）泌尿道感染：尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎常见上行性感染,女性患病率高于男性,由尿路致病性大肠埃希菌（UPEC）引起 3. 归纳志贺菌致病的主要特点。 答：包括侵袭力和内毒素,有的菌株（痢疾志贺菌）产生外毒素（志贺毒素） (1).致病物质
微生物学总结16各论部分的复习提纲
Weishengwuxue zhishidianzongjie 三、球菌
主要知识点： 1葡萄球菌A蛋白：（Staphylococcal protein A，SPA）：存在于葡萄球菌细胞壁表面的一种单链多肽，与胞壁肽聚糖共价结合。能与IgG抗体的Fc段非特异性结合，而IgG抗体的Fab段仍能与相应抗原发生特异性结合，这决定了SPA具有多种生物学意义：1.抗调理吞噬作用；2.协同凝集试验； 2 凝固酶coagulase：是葡萄球菌能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的蛋白类物质；有两种：游离凝固酶和结合凝固酶;是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标；作用：有助于抵抗体内吞噬细胞的吞噬，同时保护细菌不受血清中杀菌物质的破坏；与葡萄球菌感染容易局限化和形成血栓也有关系； 3葡萄球菌肠毒素作用特点：50%临床分离株产生；耐热(100oC for 30 mins!);是一种超抗原；毒素通过胃肠道吸收入血，进而对呕吐中枢产生刺激，导致以呕吐为主要症状的食物中毒。在进食含肠毒素食物后1－6小时发病，主要症状是呕吐和腹泻，属自限性疾病; 4致病葡萄球菌的鉴定：产生金黄色色素、有溶血性、凝固酶试验阳性、耐热核酸酶试验阳性和能分解甘露醇产酸 凝固酶阴性的葡萄球菌（coagulase negative staphylococcus，CNS）：指葡萄球菌属中不产生血浆凝固酶的葡萄球菌，过去认为CNS不致病，近年来发现CNS已经成为医源性感染的重要病原菌，且耐药菌株日益增多，引起重视。主要引起泌尿系统感染感染、心内膜炎、败血症、术后感染等。 5 链球菌的分类：根据溶血现象分类链球菌在血琼脂平板培养基上生长繁殖后，按产生溶血与否及其溶血现象分为3类。 （1）甲型溶血性链球菌（α-hemolytic streptococcus）：菌落周围有1~2mm宽的草绿色溶血环，称甲型溶血或α溶血，因而这类菌亦称草绿色链球菌（streptococcus viridans）。α溶血环中的红细胞并未完全溶解。这类链球菌多为条件致病菌。 （2）乙型溶血性链球菌（β-hemolytic streptococcus）：菌落周围形成一个2~4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环，称乙型溶血或β溶血，β溶血环中的红细胞完全溶解，因而这类菌亦称为溶血性链球菌（Streptococcus hemolyticus）。这类链球菌致病力强，常引起人类和动物的多种疾病。 （3）丙型链球菌（γ-streptococcus）：不产生溶血素，菌落周围无溶血环，因而亦称不溶血性链球菌（Streptococcus non-hemolyticus）。一般不致病，常存在于乳类和粪便中。 除此以外，根据胞壁中C多糖抗原不同分群，其中主要为A群致病，两种分类方法并不平行，但A群链球菌大多为乙型溶血。 6 M蛋白（M protein）是A群链球菌细胞壁中的蛋白质组分，，是重要的毒力因子。含M蛋白的链球菌有抗吞噬和抵抗吞噬细胞内的杀菌作用。此外，M蛋白与心肌、肾小球基底膜有共同的抗原，可刺激机体产生特异性抗体，损害人类心血管等组织，故与某些超敏反应疾病有关。 7 链球菌促进扩散的侵袭性酶：（扩散因子,spreading factor） 透明质酸酶：能够分解连接结缔组织间以及细胞间的透明质酸,使组织产生空隙,细菌得以迅速在其间扩散、繁殖及进入宿主组织内的酶类物质。 链激酶：水解纤维蛋白；
微生物学复习思考题
《微生物学》复习思考题 第1章绪论 1.名词解释：微生物，微生物学 2.用具体事例说明人类与微生物的关系。 3.微生物包括哪些类群？它有哪些特点? 4.为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人? 5.试根据微生物的特点，谈谈为什么说微生物既是人类的敌人，更是人类的朋友？ 6.简述21世纪微生物学发展的主要趋势。 第2章原核微生物 1.名词解释：肽聚糖、溶菌酶、核区、异形胞 2.根据革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁通透性来说明革兰氏染色的机制。 3.什么是芽孢？它在什么时候形成？试从其特殊的结构与成分 说明芽孢的抗逆性。渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制的？ 4.立克次氏体有哪些与专性活细胞内寄生有关的特性？它们有什么特殊的生活方式？衣 原体与立克次氏体都为专性活细胞内寄生，两者有何差别？ 5.螺旋体和螺旋菌有何不同？ 6.什么是缺壁细菌？试简述四类缺壁细菌的形成、特点和实践意义。 7.举例说明细菌的属名和种名。 8.试述古生菌和细菌的主要区别。 9.试根据细菌和古生菌细胞结构的特点，分析并举例说明为什么它们能在自然界中分布 泛。 10.细菌（狭义）、放线菌、霉菌、酵母在繁殖方式上各有什么特点？ 第三章真核微生物 1.名词解释：真菌、霉菌、酵母菌、真酵母、假酵母。 2.举例说明霉菌与酵母菌与人类的关系。 3.试列表说明真核微生物与原核微生物的主要区别。 4.试图示真核生物“9+2型”鞭毛的横切面构造，并简述其运动机理。 5.细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同？ 6.试比较细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并讨论它们的原生 质体的制备方法。 7.丝状真菌的营养菌丝和气生菌丝各有何特点？它们可以分化出哪些特殊结构？ 8.试述真菌的孢子类型和特点。 第4章病毒 1. 名词解释：病毒粒子、烈性噬菌体、温和噬菌体、溶源性转变、前噬菌体、溶源性细菌、 裂解量、类病毒、朊病毒。 2. 病毒区别于其他生物的特点是什么? 根据你的理解，病毒应如何定义? 3. 试述病毒的主要化学组成及其功能。 4. 病毒壳体结构有哪几种对称形式? 毒粒的主要结构类型有哪些?
【高考生物】微生物实验思考题参考答案及知识要点
（生物科技行业）微生物实验思考题参考答案及知识 要点
微生物实验思考题参考答案及知识要点 （可能在整理时部分问题未能考虑全面，若有异议，请同学们自行从网络或课本上搜索查找）微生物实验思考题参考答案 一．酵母菌形态观察及死活细胞鉴别 1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 美蓝浓度高了，代谢不太活跃的活细胞也会被染色，从而使观察到的死细胞较多，活细胞较少；反之，则代谢微弱的细胞也能还原美蓝，不被染色，从而使观察到的死细胞较少，活细胞较多。 二.细菌的简单染色和革兰氏染色 1.革兰氏染色中那一步是关键?为什么？你是如何操作的？ 革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色（是脱色时间）。如果脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s）。2.固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同？ 自然死亡的菌体本身已经部分自溶，结构已经改变。固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。 3.不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？ 能。在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋），被酒精脱色为革兰
医学微生物学笔记(总结得真的很好)
医学微生物学 总结得跟教材一样的哦 真的省了不少力气 微生物：存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数 千倍。甚至数万倍才能观察到的微小生物。 3、病原微生物：少数具有致病性，能引起人类、植物病害的微生物。 机会致病性微生物：在正常情况下不致病，只有在特定情况下导致疾病的微生物。 4，郭霍法则：①特殊的病原菌应在同一种疾病中查见，在健康人中不存在；②该特殊病原菌能被分离培养得纯种；③该纯培养物接种至易感动物，能产生同样病症；④自人工感染的实验动物体内能重新分离得到该病原菌纯培养。 5、免疫学：㈠主动免疫；㈡被动免疫。 # 第一篇 细菌学 第一章 细菌的形态与结构 第一节 细菌的大小与形态 1、观察细菌常采用光学显微镜，一般以微米为单位。 2、按细菌外形可分为： ①球菌（双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌） ②杆菌（链杆菌、棒状杆菌、球杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌） ③螺形菌（弧菌、螺菌、螺杆菌） - 第二节 细菌的结构 1、基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞 2、革兰阳性菌（G+）：显紫色；革兰阴性菌（G-）：显红色。 3、 细胞壁结构 革兰阳性菌 G+ @ 革兰阴性菌 G- 肽聚糖组成 由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚韧三维立体结构 由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构 肽聚糖厚度 20～80nm 10～15nm
肽聚糖层数可达50层仅1～2层 占胞壁干重50～80%仅占胞壁干重5～20% 肽聚糖含量 磷壁酸有无 外膜无有 { 4、G-菌的外膜｛脂蛋白、脂多糖（LPS）→【脂质A，核心多糖，特异多糖】、脂质双层、｝ 脂多糖（LPS）：即G-菌的内毒素。LPS是G-菌的重要致病物质，使白细胞增多，直至休克死亡；另一方面，LPS也可增强机体非特异性抵抗力，并有抗肿瘤等有益作用。 ①脂质A：内毒素的毒性和生物学活性的主要成分，无种属特异性，不同细菌的脂质A骨架基本一致，故不同细菌产生的内毒素的毒性作用均相似。 ②核心多糖：有属特异性，位于脂质A的外层。 ③特意多糖：即G-菌的菌体抗原（O抗原），是脂多糖的最外层。 5、细胞壁的功能：维持菌体固有的形态，并保护细菌抵抗低渗环境。 G-菌的外膜是一种有效的屏障结构，使细菌不易受到机体的体液杀菌物质、肠道的胆盐及消化酶等的作用。 6、细菌细胞壁缺陷型（细菌L型）：细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制，这种细菌壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型. … ■细菌L型的诱发因素，如：溶菌酶，青霉素，溶葡萄球菌素，胆汁，抗体，补体等。 溶菌酶：能裂解肽聚糖中N-乙酰葡萄胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1，4糖苷键，破坏聚糖骨架，引起细菌裂解。 青霉素：能与细菌竞争合成肽聚糖过程中所需的转肽酶，抑制四肽侧链上D-丙氨酸与五肽桥间的联结，使细菌不能合成完整的肽聚糖，在一般渗透压环境中科导致细菌死亡。 ■细菌L型需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长。 G+菌细胞壁缺损形成的原生体，在普通培养基中很容易胀裂死亡，必须保存在高渗环境中。 7、细胞膜： 细胞膜的主要功能：①物质转运；②呼吸和分泌；③生物合成；④参与细菌分裂：细菌部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，称为中介体。 8、细胞质： } ①核糖体：链霉素（与细菌核糖体的30S亚基结合）和红霉素（与细菌核糖体的50S亚基结合）均能干扰其蛋白质合成，从而杀死细菌，但对人体核糖体无害。 ②质粒：染色体外的遗传物质，为闭合环状的双链DNA ③胞制颗粒：贮藏有营养物质。异染颗粒（也成迂回体，嗜碱性强，用甲基蓝染色时着色较深呈紫色）常见于白喉棒状杆菌。 9、核质：细菌的遗传物质。 10 ⑴荚膜：包绕在细胞壁外的一层粘液性物质，为多糖或蛋白质的多聚体，用理化方法去除后并不影响菌细胞的生命活动。 ■荚膜的功能：①抗吞噬作用；②粘附作用；③抗有害物质的损伤作用。 ⑵鞭毛：包括：单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌 ~ 鞭毛由基础小体、钩状体、丝状体三部分组成。 ■鞭毛的功能：使细菌能在液体中自由游动，速度迅速。细菌的运动有化学趋向性，常向营养物质处前进，而逃离有害物质。有些细菌的鞭毛与致病性有关。
微生物理论思考题总结河南科技大学
微生物学思考题总结 一、名词解释 1.病毒：病毒是在活细胞内增殖、遗传和变异的非细胞结构的微生物，是目前已知的体积最微小、结构最简单的生命形式 2.包涵体:病毒感染细胞后在细胞的细胞核和胞浆内形成的圆形或椭圆形的斑块，称为包涵体 3.噬菌斑；在涂有敏感宿主细胞的固体培养基表面，接种的噬菌体反复侵染和裂解大量细胞后，在菌苔上形成的具有一定形状、大小和边缘的透明区域 4.病毒粒子：成熟的或结构完整的有感染性的病毒个体 5.主动运输：当细胞内的营养物质浓度低于细胞外若干倍时，这些营养物质在能量的作用下通过逆浓度梯度向细胞内运送的过程 6.基因转位：由复杂运输酶系统参与的既需要载体蛋白又需要消耗能量的一种特殊主动运送方式 7.复制周期：在寄主活细胞中，以自身核酸为模板利用寄主细胞的原料、能量和生物合成场所，合成病毒核酸、蛋白质等成分，然后在寄主细胞的细胞质或细胞核内装配成许多新的、成熟的病毒体，再以裂解宿主细胞、出芽或其他方式释放到细胞外，又开始另一个感染周期，这整个过程称为复制周期。 8.细胞病变效应：病毒在细胞内增殖并对细胞产生毒害，引起细胞变形、坏死、破裂等，进而导致细胞死亡的现象。 9.合胞体：在病毒感染细胞后，相邻细胞间的细胞膜溶解，若干个细胞融合入形成具有多个核的大融合细胞 10.干扰现象：两种病毒共同感染一种细胞时，可能产生一种病毒增殖抑制另一种病毒增殖的现象，称为干扰现象【干扰现象是由于前一种病毒在细胞内增殖时产生了干扰素】 11.干扰素：脊椎动物受到病毒感染后产生的一种能够干扰病毒增殖的蛋白质，当释放到细胞外时，具有保护其他未感染细胞免受病毒感染的作用。 12.种：微生物分类上的一个基本分类单位。是一大群表型特征（形态和生理方面）高度相似、亲缘关系极其接近，与同属内其他种有明显差别的菌株的总称。 13.亚种：当某一个种内的不同菌株存在少数明显而稳定的变异特征或遗传形状，而又不足以区分成新种时，可以将这些菌株细分成两个或更多的小的分类单元——亚种 14.型：当同种或同亚种内不同菌株之间的性状差异不足以分为新的亚种时，可以细分为不同的型 15.菌株；一种微生物不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。 16.细菌：是一类形态细小、结构简单、细胞壁坚韧以二等分分裂方式进行繁殖的原核微生物 17.L型细菌：在实验室中形成的一种自发进行缺壁突变的缺壁细菌 18.质粒：是核体以外的呈环状闭合的双股DNA 19.伴孢晶体：少数芽孢杆菌，例如苏云金芽孢杆在其形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体——δ内毒素，称为伴孢晶体。 20.GF动物:用现在的检测技术,在动物体内外的任何部位都检测不到任何微生物的动物,称为无菌动物 21:SPF动物:指不存在某些特定的具有病原性或潜在病源性微生物的动物,称为无特定病原体动物 22:大肠菌群:一群在37℃培养24h能分解乳糖产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无