饲料分析

目录

饲料概略养分分析简介 (2)

饲料中水分的测定 (4)

综合技能考试 (8)

饲料中粗蛋白的测定 (9)

综合技能考试 (15)

饲料CF含量的测定 (16)

综合技能考试 (20)

饲料中EE含量的测定 (21)

综合技能考试 (25)

饲料中粗灰分（矿物质的测定） (27)

综合技能考试 (30)

饲料中无氮浸出物含量的计算 (31)

饲料中矿物元素的分析 (32)

饲料中Ca含量的测定 (33)

综合技能考试 (37)

饲料中P含量的测定 (38)

综合技能考试 (42)

饲料概略养分分析简介

一.饲料概略养分分析方法的来源和主要内容

一百多年来，人们一直沿用德国Weende试验站的汉尼伯格（Hunneberg）和司徒门（Stohman）两位科学家在1860年所创立的方法来分析饲料，这种方法称为Weende饲料分析体系，也就是饲料常规成分分析体系，亦称饲料近似成分分析或饲料概略养分分析（Feed Proxinate Analysis）

此法可测定饲料中六种概率养分，即水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分、无氮浸出物的含量。测定饲料水分含量系用105oC烘箱烘干称重法；测定饲料中CP 含量系用凯氏定氮法测定饲料的含氮量，再乘以6.25系数记得；测定饲料中EE含量系采用索氏脂肪抽提器，应用乙醚提取称重法；测定饲料中Ash含量系用550oC 高温炉灼烧烧杯称重法；测定饲料中CF含量系在特定温度与时间下，用规定浓度的稀酸、稀碱先后处理、洗净、烘干、烧灰称重法；饲料中NFE含量并非直接测定而是推算而得。由饲料样品重（100%）减去水分含量%、CP%、EE%、CF%、Ash%的总和即可得出饲料中的NFE%

二.饲料概略养分分析法评价

概略养分分析是建立总消化养分体系的基础，并为现行饲料成分和营养价值表

及饲料数据库提供数据，但此法仍有一下不足：

1.分析的六大营养成分并非纯粹的化合物，而是各种成分的混合物。例如H

2 0与挥发性物质的混合物；Ash为矿物质元素与沙泥土的混合物；CP为Pr、AA 为H

2

与非蛋白质含氮化合物的混合物等。NFE更是一个复杂混合物，主要包括淀粉、糖类、木质素等。

2.测定饲料Pr系采用间接法：先测饲料含氮量，再乘以换算系数6.25而得，此系数是根据跟中饲料Pr平均含氮量为16%而计算出来的，实际上饲料的含氮量的变异范围是14.7～19.5%。因此，系数的变异范围为5.12～6.73

3.不能确定饲料中纯营养物质含量。例如缺少维生素、微量元素及AA等成分的分析

4.不能确定饲料的适口性、质地、营养有效性及有无毒性

5.耗费时间较长。例如凯氏定氮法测定饲料中CP是要花费几个小时到近十个小时

6.饲料总Ash是包括各种矿物元素和杂志；粗灰分含量高的饲料中，对畜禽营养最重要的Ca、P等元素的含量不一定高

7.饲料中CF是公认强制规定条件下测得的一种易变化合物；在分析过程中，由于部分半纤维素、纤维素及木质素溶解于酸、碱中，使测得的CF不能真正代表饲料中CF的含量。同时又增加了NFE的含量。

8.它不能告知某种饲料中有多少不可消化的物质

9.此种分析方法只能测定出饲料中所含的营养物质的总量，不能反映饲料进入畜禽体内后消化、代谢变化及产生的生产价值。故这种分析法仅是全面评价饲料营养价值方面的一个初步指标

GB6435-86 饲料中水分的测定

——常压恒温烘干法

水分：试样在100～105oC烘至恒重所失去的重量。

干物质：从试样中扣除水分后的物质。（DM）

一.适用范围：

适用于测定配合饲料和单一饲料中水分的含量。但用作饲料的奶制品、动物和植物油脂及矿物质则除外

二.目的

1.掌握测定饲料水分的原理

2.掌握饲料水分测定的方法

三.原理

将制备的试样置于105oC±2oC烘箱烘干后的失重则为水分的重量

四.仪器及试剂

1.仪器：称量瓶（玻璃或铝质）

干燥器（干燥剂为变色硅胶）

坩埚钳

小瓷盘或饭盒

分析天平（感量0.0001g）

小角匙

鼓风烘箱

2.试剂：凡士林

五.试样的选取和制备

1.选取有代表性的试样。其原始样量应在1000g以上

2.用四分法将原始样品缩至500g，风干后粉碎至40目，再用四分法缩至200g，装入密封容器，放在阴凉干燥处保存

3.如试样是多汁的鲜样，或无法粉碎时，应预先干燥处理。称取试样200～300g，在105oC烘箱中烘15'，立即降至65oC，烘干5～6h，取出后在室内空气中冷却4h，称重，即得风干试样

六.操作步骤

1.恒重：将洗净的称量瓶放在105oC±2oC的烘箱内，开盖烘1h，用坩埚钳取出并移入干燥器中冷却约30'称重，称准至0.00005g

2.去水分：用已恒重的称量瓶称取2～5g风干样本或半干样本，放入105oC±2oC烘箱内，将瓶盖揭开少许，红4～6h（从温度达到105oC开始计时）后紧盖瓶盖移入干燥器中，冷却30'后称重，继续将称量瓶放入烘箱内烘30'～60'后称重至恒重（前后两次称量之差<0.002g）

七.记录和计算

1.记录

XX样品中水分含量的测定记录单位：g

操作次数一二

记录项目

称量瓶重

（称量瓶+样品）重烘前

（称量瓶+样品）重冷却

样品重

水分重

水分的百分量

DM的百分量

H2O%的平均值

DM%的平均值

1.计算

H2O(%)=

1000

121?--W W W W

W 1 ——105oC 烘前样品及称量瓶重（g ） W 2 ——105oC 烘后样品及称量瓶重（g ） W 0 ——已烘恒重的称量瓶重（g ）

注：水分计算采用数次称重中的最高值，干物质计算值采用数次称重中的最低值 3.重复性

每个试样取两个平行试样进行测定，以其算数平均值为结果，两个平行样测定值相差不得超过0.2%，否则重做 八.注意事项

1.应将称量瓶洗净并称至恒重

2.不能用手拿取称量瓶，可戴上薄绒手套或用干燥吸水纸包裹拿取，还可用坩埚钳夹取

3.称量时被称量物一定要冷却，以免因热称量时不稳定而导致称量误差并损害天平

4.在烘箱中烘干时，称量瓶盖应微开。在干燥器中冷却时，应严盖

5.加热时样品中挥发性物质可能会与样品中水分一起损失，对称量造成一定误差。例如青贮料中的挥发性脂肪酸

6.样品中有些物质如脂肪，在加热时间过长时可能在空气中氧化，使样品重量不但不减少，反而会增加，应以增重前那次重量作为测定结果，若测定含脂量高的样品中水分，需在真空烘箱中或装有CO 2的特殊烘箱中进行

7.有些饲料，在105oC 时可能发生某些化学变化，例含糖分高的糖浆，易分解或易焦化的饲料，这类饲料应在较低温度和减压条件下干燥（70oC 、80KPa-600mm 汞柱以下烘5h ）测定水分

8.如用已测过70oC 干物质%的半干样本，在称样时须将其重新放入70oC 烘箱中烘1h ，再放入干燥器中冷却后再称样，这样可减少半干样本在磨碎制样过程中由于吸收空气中水分而引起的误差

9.若试样进行过预干燥处理，应按下列计算原试样中所含水分总量

原试样总水分（%）=预干燥减重（%）±[100%-预干燥减重（%）]×风干试样水分（%）

附：

饲料中总水分的测定

一.仪器及试剂

1.仪器：小瓷盘

干燥器

坩埚钳

托盘天平（感量0.1g ） 鼓风烘箱

2.试剂：凡士林

硅胶

二.操作步骤

在已知重量的瓷盘中称取鲜样100～200g 。在普通天平上称重，准确至0.1g ，然后在120oC 温度下灭酶10～15'，移入65oC 烘箱中烘至半干，再移入105oC ±2oC 烘箱内干燥3～4h ，取出置于干燥器内冷却30'后称重至恒重（两次称重之差不超过0.5g ），样品烘干后减少的重量即为水分含量 三.计算

鲜样总水分%=

100- 鲜样重

干物质重

鲜样重

多水分饲料，例如青贮料、多汁料、青饲料等经初水分测定、风干样品的制备、吸附水的测定后可按下列公式计算试样原来所含的总水量

X=A+B ×(100-A) X ——鲜样的总水分含量 A ——初水分的含量 B ——吸附水的含量

注：吸附水即为风干样品或半干样品中水分含量。以半干样品中水分含量计算更准 确

鲜样中DM 计算法：

①．鲜样中DM%=鲜样70oC DM%×半干样品105oC DM% ②. 鲜样中DM%=鲜样空气干燥DM%×半干样品105oC DM%

综合技能考试

1.将新鲜样本中DM%如何计算？——口试

（新鲜样本DM%=新鲜样本中70℃ DM%×半干样本105℃ DM%）

2.在DM的测定中，若用已测定过70℃DM%的半干样本测定DM的量，在称样前应该怎样操作？

（在称样前应将半干样本重新放入70℃烘箱中烘1h，再移入干燥器中冷却30'再称样）

3.吸附水测定过程中应注意哪些问题？

4.从烘箱中取出DM测定样称量？——操作

①干燥器移至烘箱前；

②坩埚钳取出，放入称量皿中，盖好称量皿盖，冷却30min后称量。

5.将已称量好的测定干物质样放入烘箱中烘干

①小瓷盘转移，坩埚钳取放；

②称量皿盖好侧开。

6.在玻璃称量皿上编号

（铅笔，磨口处）

一级大豆粕CP可达46%以上，鱼粉为60%，而木薯干仅为2～3%

饲料中粗蛋白的测定

——凯氏半微量定氮法 (GB/T 6432-94）粗蛋白质：饲料中含氮量乘以6.25.CP

一.适用范围

配合饲料，浓缩饲料，单一饲料，畜体，畜产品，粪，尿等

二.目的

1.掌握饲料CP含量的测定原理

2.掌握饲料CP含量的测定方法

三.原理

饲料中的CP（纯蛋白质与氨化物）在浓硫酸的分解作用及硫酸铜、硫酸钾的还原性催化剂的帮助下，使其中有机态氮都转变成氨，并与硫酸结合成硫酸铵，消化液在浓碱的作用下进行蒸馏放出铵态氮，用硼酸吸收成四硼酸胺，再用标准盐酸溶液滴定即可求出氮的含量，再乘以特定系数（常用6.25）即为样品中CP的含量。

反应方程式为：

消化时：(通风橱进行 2242SO O H SO H +?→??

) O 16H 12SO 6CO SO )(NH SO 13H COOH )(CH 2NH 22242442222+++→+

蒸馏时： ()4223424SO 2Na O 3H 2NH 2NaOH SO NH ++→+

O 5H O HB NH NH BO 4H 2744333+→+

滴定时： 3342744BO 4H Cl NH O 5H HCl O HB NH +→++

四.仪器与试剂：

1、仪器： 凯氏烧瓶 分析天平：感量0.0001g 量筒：5ml 、10ml 、50ml 小漏斗 容量瓶：100ml 三角瓶 滴定管：白色，酸式 移液管：10ml

2、试剂： CuSO4（化学纯） 无水硫酸钠或硫酸钾（化学纯） H 2SO 4 1%硼酸溶液

40%NaOH 溶液（饱和） 蔗糖，（NH 4）2SO 4(分析纯) 甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：为0.1%甲基红乙醇溶液与0.5%溴

甲酚绿乙醇溶液等体积混合而得

0.05N HCL 标准溶液：量取浓盐酸4.3ml ，注入100ml 水中，转入1000ml 容量瓶中，用蒸馏水边摇匀边稀释至刻度

精确称取烘干冷却后的无水Na 2CO 3约0.13～0.15g ，溶于50ml 水中，加入甲基橙指示剂2～3滴，用标准酸滴定至呈红色为止煮沸2min 后再滴定变红 酸

重

V CO Na N ?=

53.0032

五.试样的选取和制备

取具有代表性的试样，粉碎至40目，用四分法缩减至200g ，装于密闭容器中，防止试样成分的变化或变质。

液体或膏状粘液试样应注意取样的代表性用干净的放于凯氏烧瓶的小玻璃容器称量样品。 六.操作步骤

1.称样：将凯氏烧瓶洗净烘干，编号，称取0.5～1g烘干样品，（减量法，不能用去皮）将称量纸卷成筒状，小心无损的把样品放入凯氏烧瓶底部。

2.加催化剂：在凯氏烧瓶中加入无水硫酸钾或硫酸钠，粗天平称取2.5g，

CuSO

4·5H

2

O 0.13g及10ml浓硫酸，摇动与样品混合均匀后即可消化。

在加入催化剂后，最好浸泡一夜，以缩短消化时间，减少泡沫，防止外溢，在加浓硫酸时，转动凯氏烧瓶，以使粘附在凯氏烧瓶上部的饲料能被冲入底部，一般加6～10ml无水浓CuSO

4

（旋转着加）至溶液不成团块。

3.消化：将凯氏烧瓶上加漏斗放入毒气柜中的万用电炉上，小火徐徐加热，直至泡沫停止，然后加强火力，使酸液沸腾，但应保持酸雾在瓶颈一半处冷凝，待溶液呈浅蓝色或浅绿色澄清液后，再消化30～60s即可，一般约需3h，但以瓶底无黑色碳粒为佳。（先3h再30s）

同时做蛋白测定：称取0.1g蔗糖，代替试样进行测定，消耗0.05N HCl标准液的体积不得超过0.3ml。

4.定容：消化结束后，稍冷，用蒸馏水少量多次，将凯氏烧瓶中全部溶液洗入100ml容量瓶中，冷却后加水至刻度（洗涤时，在凯氏烧瓶中滴加甲基橙指示剂，以不出现红色为标志，判断凯氏烧瓶中酸液是否完全冲洗干净）

5.蒸馏：精确吸取10ml试样分解液注入蒸馏装置的反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好入口，再向其中注入40%NaOH，小心打开入口，使碱液沿进样口壁缓缓流入反应室，直至反应室中反应液呈棕褐色为止，将入口塞好吸出多余碱液，且在入口处加水封好，防止漏气（蒸馏装置的蒸汽发生瓶中的蒸馏水应加数滴甲基红指示剂，数滴硫酸溶液，保持此液为橙红色，否则补加硫酸，目的是中和水中的含氮物质成为硫酸铵，以免生成氨气进入反应室，再到硼酸中影响效果）

6.吸收：在蒸馏末开始前，先取150ml三角瓶，加入10ml1%硼酸溶液（已加入甲-溴混合指示剂，硼酸液呈瓦灰色或酒红色），将三角瓶置于冷凝管下，使冷凝管出口或末端略被吸收液淹没即可，当反应室中液体变为棕褐色时开始计时，蒸馏4分钟。使冷凝管末端离开吸收液面。再继续蒸馏1分钟，用蒸馏水洗冷凝管出口（最好用已加指示剂的硼酸液洗），洗液均洗入吸收液里。可用石蕊试纸检查是否蒸馏完全。每次蒸馏完毕，蒸馏液的体积应大致相等。

7.滴定：吸收NH

3

↑后的吸收液，应立即用0.05N HCl标准溶液滴定，溶液由蓝（绿）色变为瓦灰色或酒红色（灰红色）为终点

七.记录和计算

1.记录：

饲料中CP含量的测定记录表单位：g.ml.%

记录项目

操作次数

一二

称量瓶+样重称量纸样重定容量

蒸馏用试样分解液量消耗标准HCl 体积空白消耗HCl 体积CP 的百分含量CP 的平均值

2.计算

100

'''25

.601400.0)((%)0??

???-=V V W N V V CP

V ——试样液消耗标准HCl 溶液的体积 V 0——空白液消耗标准HCl 溶液的体积

N ——标准HCl 溶液的当量浓度 V'——试样分解液蒸馏用体积 V"——试样分解液总体积 0.0140——N 的毫克当量数 6.25——N 换算成Pr 的平均系数 3.重复性

每个试样做两个平行样测定，以算术平均值为结果。当CP%>25%，允许相对

偏差为1%；当CP%=10～25%,允许相对偏差为2%；当CP%<10%，允许相对偏差为3% 八.测定步骤的检验

1.精确称取0.2g （NH 4)2SO 4, 代替试样，按上述各步骤操作及公式计算（但不乘以系数6.25），测得（NH 4)2SO 4含氮量为21.9±0.2%，否则应检查加碱、蒸馏水和滴定步骤是否正确

2.试样消煮时，加入0.2gCuSO 4·5H 2O 和3g 无水硫酸钠与试样混合均匀，再加10mlH 2SO 4，仍可使饲料分解完全，只是试样消化所需时间不同 九.注意事项

1.若试样是含脂类特别多的样品，有时需要增加H 2SO 4用量。如果分解冷却后，消化液呈完全固化状态，则是H 2SO 4量不足，氮的回收率会降低

2.消化过程中加K 2SO 4的目的是提高反应温度（可达400oC ），K 2SO 4按以下方式首先分解H 2SO 4:K 2SO 4+H 2SO 4→2KHSO 4

2KHSO 4→K 2SO 4+H 2O+SO 3

这种结果使K 2SO 4渐渐变浓，沸点上升，对残留有机物的作用变得越发强烈，加K 2SO 4的量和沸点之间的关系如下：

K 2SO 4浓度和沸点之间的关系

K 2SO 4浓度

（g/ml ）

00.51 1.52温度计（°C ）329344365388410热电偶（°C ）329344364387405

北美区

91.2

89.8

88.6

76.7

结果表明：反应温度随K 2SO 4用量的增加而递增，但K 2SO 4与浓硫酸的用量比值不宜过大，因温度过高，生成的（NH 4)2SO 4会分解放出NH 3↑，使氮损失，硫酸钠使沸点上升效果不如硫酸钾，故不常用

3.硫酸铜为促进消化反应的催化剂，用作催化剂的还有氧化汞、硒化合物、还原铁以及由上述物质组成的混合物。不少人认为氧化汞为一种优良的催化剂，但汞化合物有毒，故几乎不采用。目前仍以硫酸铜作为催化剂，反应式：

C+2CuSO 4→Cu 2SO 4+SO 2↑+CO 2↑ Cu 2SO 4+2H 2SO 4→2CuSO 4+H 2O+SO 2↑

同时，CuSO 4还可作蒸馏时碱性反应的指示剂指示颜色： ↓??→?→+-

+O Cu Cu(OH)2OH Cu 22-2OH (黑或褐色)

催化剂硫酸铜与硫酸钾的用量为1：3，消化时间为4～5h ；若用

K 2SO 4:CuSO 4:Se=1000:100:1 组成的催化剂，消化时间只要1.5h ，以下为测Pr 常用混合催化剂：

国外：① 1.5g K 2SO 4 + 7.5mg Se ② 3.5g K 2SO 4 + 7.5mg Se ③ 7.5g K 2SO 4 + 7.5mg Se

④ 5g K 2SO 4 + 0.15g CuSO 4 + 0.15g TiO 2 国内：① K 2SO 4:CuSO 4=3:2，消化温度T=415～420oC

② K 2SO 4:CuSO 4·5H 2O:Se=1000:100:1

4.消化时间视不同样品含脂肪、Pr 的量而定，消化液按黑色→黄绿色→绿色→蓝色或浅绿色变化。一般样品消化液呈现绿色后，再消化30'即可（样品消化液通常开始时为黑色，不久变成蓝色澄清状态，这种过程是炭化的有机物完全被氧化的

变化，而它绝不表示样品中的氮素全部转变为NH

4

+的变化，1936年阿什顿Ashton.F.L 曾试验认为：煮沸2～3h N的回收率为最高，此结论也得到其它研究者的支持。1960年西垣等试验认为，样液澄清后继续消化60'，其氮素的回收率最理想）

5.消化时，如消化液不易澄清，可将凯氏烧瓶冷却后，缓缓加入30%H

2O

2

2～3ml，

促进氧化

6.用凯氏烧瓶消化时，应在有浓H

2SO

4

的瓶底部位加热，不使瓶壁的温度过高，

以免铵盐受热分解，造成N的损失

7.通入蒸汽蒸馏时，三角瓶中的硼酸接收液温度不要超过40oC,如果超过45oC，硼酸对NH

4

+的吸收减弱，会造成损失

8.NH

4+是否以NH

3

↑的形式完全蒸馏出来，可用PH试纸或红色石蕊试纸检验馏出

液是否呈碱性

9.冷凝水应充足，切勿中断

10.标准酸浓度的准确程度对测定结果影响很大，因此标准酸的浓度必须准确认真标定

11.K

2SO

4

与CuSO

4

·5H

2

O可先按一定比例配制成混合催化剂，然后以3～5g压成

片剂，每一个测定放一片

12.硼酸接收液可按体积比100:0.25加入混合指示剂，用稀盐酸或稀碱（Na0H)调节，使成瓦灰色，溶液的PH值应为4.5，蒸馏时直接取用，可使接收液具有灵敏的终点指示

13.此法不能区别蛋白氮和非蛋白氮

14.凯氏烧瓶口放一小漏斗，目的是促进硫酸回流，减少硫酸损失。

15.由总氮量换算Pr含量时，常采用系数6.25.其实不同饲料中Pr含氮比例是有差别的，应当提倡不同饲料采用不同的比例系数。例如：荞麦、玉米、豌豆为6.25，稻米为5.95，小麦、大麦、谷子为5.85，大豆为5.71，小麦糠为6.31，牛奶为6.38

16.还可用紫外分光光度法、双缩尿法测定

附饲料中真蛋白质的测定

纯蛋白质又叫真蛋白质。它是由多种氨基酸合成的一类高分子化合物。纯鱼粉的CP中有95%以上是纯Pr。若鲜鱼粉变质腐烂其CP不变，但其纯Pr显著下降，因此测定CP、TP的含量差额的多少，可以鉴别鱼粉是否腐烂变质及掺有尿素等

1.原理——硫酸铜在碱性溶液中，可将蛋白质沉淀，且不溶于热水，过滤和洗涤后，可将纯蛋白质的含氮化合物分离，再用凯氏定氮法测定沉淀中的Pr含量

2.试剂——10%CuSO

4溶液/6%CuSO

4

溶液

2.5%NaOH溶液/1.25%NaOH溶液

10%BaCl

2

溶液

2mol/L HCl

其它试剂与CP测定法相同

3.测定步骤——准确称取粉碎好的鱼粉1～2g,置于25ml烧杯中，加50ml水加

热至沸，加入20mlCuSO

4

溶液，20mlNaOH溶液，充分搅拌，放置1h以上。用倾泻法

过滤（定性滤纸），以热水（60～80oC）洗涤沉淀，用BaCl

2

溶液5滴和2mol/L HCl

1滴检查滤液，直至不生成BaSO

4

沉淀为止。沉淀和滤纸放在烘箱中，65oC烘干2h 后全部转入凯氏烧瓶，消化后进行凯氏定氮

综合技能考试

1.简述测定CP的步骤？（凯氏定氮法）——口试

（洗净烘干凯氏烧瓶及称样——加催化剂——消化。同时作空白测定——定容——蒸馏——滴定）

2.测定CP中加入CuSO

4、无水Na

2

SO

4

的目的？

（Na

2SO

4

——提高H

2

SO

4

的沸点;CuSO

4

——还原催化剂）

3.测定CP的标准酸浓度？（0.01N HCl溶液）

4.在测定CP中，蒸汽发生器中若装的是自来水，加少量H

2SO

4

入自来水的目的？

（中和水中的含氮物质成为(NH

4)

2

SO

4

,以免生成NH

3

↑入反应室内再到硼酸中影响

效果）

5.请示范凯氏蒸馏装置的使用方法？——操作

（蒸汽发生瓶中蒸馏水酸化；反应室及冷凝管的冲洗；接收三角瓶；加碱；褐色；吸出多余碱；加蒸馏水封闭）

6.请演示将凯氏烧瓶中消化液无损转入容量瓶的操作？

（稀释消化液——移入容量瓶——冲洗多次，洗液倒入容量瓶——用甲基橙指示剂检验至呈橙色为止）

7.请在凯氏烧瓶上编号以示区别？

（在磨口上编号，用铅笔或用玻璃刀刻画）

8.演示将所称样品移入凯氏烧瓶中的操作？

（在称量纸上称量——卷成筒状——塞进凯氏烧瓶中——取出称量纸称量）

9.演示凯氏微量定氮仪的安装？

（蒸汽发生瓶、残液接收管、反应室、冷凝管、小漏斗、止水夹、减压玻管）

10.请将凯氏烧瓶中的样本消化液定量？

11.请简述凯氏定氮法原理：

在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵，加入纯碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出CP的含量。

饲料CF含量的测定（GB/T 6434-94）

——酸碱依次水解法

粗纤维：试样经稀酸、稀碱处理，脱脂去灰后的有机物（纤维素、半纤维素、木质素等）的总称。CF（crude fiber）{或饲料有机物中不溶于稀酸、稀碱、乙醇、乙醚的无灰残留物得总称}

一.适用范围

各种混合饲料、配合饲料、浓缩饲料、单一饲料以及粪等

二.目的

1.掌握测定饲料中CF含量的原理

2.掌握饲料中CF 含量的测定方法

三.原理

饲料样品经一定体积、一定浓度的酸碱、醇、醚相继处理一定时间，再经高温灼烧后扣除矿物质的量，所余量即为CF （CF 不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定的条件下，测出的概略养分，除以纤维素为主外，还有少量半纤维素和木质素） 四.仪器及试剂

1.仪器：烧杯 表面皿

抽滤瓶 布氏漏斗 滤布（府绸） 古氏坩埚及垫 角匙 洗瓶 胶头玻棒 量筒：250ml

干燥器 分析天平（感量0.0001g ） 真空尿 电炉 烘箱 茂福炉 坩埚钳：长柄、短柄

2.试剂：0.255±0.005N H 2SO 4浓度

配制：量取H 2SO 47.7ml 注入15ml 水中，冷却后移入1000ml 容量瓶中，并稀释至刻度

标定：精确称取烘干冷却的无水Na 2CO 3约0.13～0.15g ，溶于50ml 水中，加入2～3滴甲基橙，并用配制酸液滴定至呈红色为终点。

酸

重V CO Na N ?=

53.0032

0.313±0.005 NaOH 溶液

配制：在粗天平上用小烧杯迅速称取NaOH 约14.1g ，加入碳酸盐，任其静置，使溶液澄清后移入1000ml 容量瓶中，并用煮沸过的无CO 2的水稀释至刻度 标定：精确称取0.4～0.5g 预先在125oC 烘干的邻苯二甲酸氢钾（KHC 8H 4O 4）于250ml 三角瓶中，用75ml 水使之溶解，加入2～3滴酚酞，并用配制碱液滴定至呈淡红色为终点。

碱

重V O H KHC N ?=

042.20448

石棉制备

将中等长度的酸洗石棉薄铺在蒸发皿中，放入600oC茂福炉中灼烧16h，用

配制的0.255N的H

2SO

4

浸没石棉，煮沸30'过滤，用水洗净酸。同样用0.313N NaOH

液煮沸30'过滤，用水洗净碱，加水浸泡，备用

乙醇石蕊试纸：红色、蓝色试纸两种

五.试样的选取和制备

取具有代表性的试样，粉碎至40目，用四分法缩减至200g，放入密封容器，防止试样成分变化和变质

六.操作步骤

1.称样：准确称取风干样品2～5g左右，放入500ml烧杯内，如用测过脂肪的样本，滤纸上粘附的样本细粒，可用毛刷刷净

2.酸处理：向烧杯中加入预热的0.255N的H

2SO

4

200ml，杯口盖以表面皿，在液

面处作一标记，置于电热板或沙浴上加热，尽快在1～2'内沸腾，从开始沸腾计时，保持微沸30'，每隔5'搅动烧杯一次，以充分混合杯内物质，但须避免饲料粘贴在液面以上的杯壁，并不断用沸热水补充蒸发掉的水分，使液面保持在标记处。

3.抽滤、洗涤、转移：水解30'后取下，趁热用滤布悬空抽滤法抽滤（抽滤时将湿滤布蒙在布氏漏斗上，以橡皮筋固定后，置于抽滤瓶上进行抽滤）。用热蒸馏水冲洗滤渣，少量多次，如上法进行抽滤，一般洗4～5次后，用蓝色石蕊试纸检查滤液，一直洗到滤液不使试纸变色为止，抽滤必须在10'内进行完毕（可加NaOH 液以加快洗涤，最好将样品冲成团块状为宜）

用200ml煮沸的0.313N NaOH溶液冲洗滤布上的残渣至原烧杯内（先用角匙将滤布上的残渣尽量刮入烧杯内），而后将滤布移入50ml小烧杯中，加入少量煮沸的0.313N NaOH溶液，用玻棒拨动布上残渣使其全部移入原烧杯内。最后将煮沸的NaOH 溶液加至200ml刻度处，在烧杯上盖上表面皿

4.碱处理：将烧杯放在电炉或沙浴上，1～2'内煮沸，微沸30'，并不断补充蒸馏水使其保持在标记处

5.抽滤、洗涤、转移：在抽滤瓶上安装一个致密薄层的古氏坩埚，水解30'后立即取下，按上述“3”进行操作，趁热进行抽滤、洗涤，直至呈中性，可使用红

色石蕊试纸检查滤液，不变色即可。（可先用稀酸H

2SO

4

冲洗，然后用蒸馏水冲洗至

中性，以加快冲洗速度）

将滤渣移入已铺有酸洗石棉的古氏坩埚内，并用蒸馏水将滤布上的滤渣冲洗干净，加入10ml95%乙醇抽滤，抽尽后，即可取下古氏坩埚（未脱脂样品在抽完乙醇后，再加入10ml乙醚进行抽滤，脱脂样品可不加乙醚）

6.烘干：将古氏坩埚置于烘箱内在100～105oC下开箱门烘10'，然后关箱门烘4h，取出在干燥器内冷却至室温（30'后）称重，再烘1h，取出冷却，称至恒重（前后两次称量之差<0.0005g）

7.碳化：将古氏坩埚盖半揭开置于电炉上，小心加热，烧至无烟为止，切忌着火

8.灰化：将古氏坩埚移入茂福炉内，在550～600oC 下灼烧1h ，取出置于石棉板上稍冷却1～2'，随即放入干燥器内冷却30'称重，再灼烧30'，取出冷却后称重至恒重（前后称重之差<0.0001g ） 七.记录和计算

1.记录

饲料中CF 含量的测定记录表 g.%

记录项目

操作次数

一二

称量瓶+样品称量纸(残样)重样重w

坩埚+残渣重w 1x 1x 1'（100-105oC 烘干）x 2x 2'坩埚+灰分重w 2......(550-600oC 灼烧)a 1a 1'CF 重（w 1-w 2）a 2a 2'CF 的百分含量......

CF%的平均值

2.计算

3.重复性100CF(%) 2

1?-=

W

W W 每个试样应取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。当CF%<10%时，允许相差（绝对值）为0.4；当CF%>10%时，允许相对偏差为4%。 八.注意事项

1.若所测样品含脂肪量<1%可不脱脂；等于1～10%不是必须的，但建议脱脂；若>10%，则必须脱脂，一般用乙醚脱脂

2.烧杯必须洗净、烘干

3.酸可水解饲料中全部淀粉和半纤维素，还可水解饲料中部分蛋白质，溶解部分碱性矿物质及植物碱

4.碱可水解饲料中大部分蛋白质，除去脂肪，并溶解酸不能溶解的全部半纤维素和大部分木质素

5.乙醇处理饲料，可溶解饲料中的树脂、单宁和色素及剩余的脂肪和蜡

6.酸、碱处理后，滤液应分别冲至中性

7.古氏坩埚铺垫石棉，不可过薄或过厚，以抽滤后不见光为宜，或在古氏坩埚内铺两层玻璃纤维，有利于过滤

8.还可采用滤纸过滤法

样品经碱处理后，移入古氏坩埚过滤比较困难，可改用滤纸及布氏漏斗过滤，以加快过滤速度

酸碱处理同常规法。将已知重量的快速定量滤纸平均地铺在布氏漏斗上，滤纸的边缘应高出漏斗底部，然后把经碱处理后的样品趁热进行过滤，用热蒸馏水将残渣洗至中性，抽干加乙醇及乙醚处理（脱脂样本可省去醚处理）。将滤纸和残渣包在一起，无损地移入已知重量的坩埚中，将坩锅置于100～105oC烘箱内，坩埚盖半开烘干，并称至恒重，然后移入550～600oC茂福炉中灼烧1h称重，烘干的残渣减去滤纸及坩埚重，再扣除灼烧后的残留灰分量即为CF重

综合技能测试

1.在概略养分分析中，CF是在什么条件下测定的？其条件是什么？——口试

（强制条件，一定浓度的酸、碱，一定体积、一定时间、温度）

2.在概略养分分析中，CF的测定条件发生改变，测定结果是否可作为CF的含量，说明原因？

（否；CF不是一个化学实体，它是在公认条件下测出来的，若条件发生改变，则不能作为CF的含量）

3.CF中含有哪三种主要成分？

（纤维素、半纤维素、木质素）

4.简述测定CF的步骤

（称样、脱脂、酸处理、碱处理、用98%乙醇15ml洗涤、烘干、称重至恒重、炭