微生物学实验思考题
微生物学实验思考题
微生物学实验思考题
实验1 培养基的配置
1、简述配置培养基的基本步骤及注意事项。
步骤：配料-溶解-调PH-加入琼脂-融化-分装-封口（棉花纱布或封口膜）-灭菌
注意事项
①加热溶化过程中，要不断的搅拌，防止琼脂糊底。最后，补足所失水分。
② pH值要按照各种不同培养基的要求调整。
③分装时注意不要使培养基沾染在管口或者瓶口上，以免沾污棉塞引起杂菌污染。
④培养基的灭菌时间和温度需要按照各种培养基的规定进行，培养基灭菌后，须放在37℃温箱培养24-48h，以检查灭菌是否彻底。
2、为什么微生物实验室所用的三角瓶口或试管口要塞上棉塞才能使用？
为了防止外界微生物进入三角瓶或试管，保持三角瓶或试管内部无菌状态或微生物的纯培养状态。同时又允许空气进入，给内部菌种提供适宜生存环境。
3、培养基配好后，为什么必须立即灭菌？如何检查灭菌后的培养基是无菌的？
如果不进行灭菌培养料内的微生物就会发酵生长，从而破坏培养基内的营养成分，并且由于这些微生物的生长过程中分分泌一种或多种毒素从而抑制目的菌的生长。
检查无菌的方法：将灭菌的培养基放入37℃温室中培养24~48小时，若无杂菌生长，即可证明为无菌的。。
4、配置培养基为什么要调节pH？
因为不同微生物所需环境的PH不同,同时在微生物的生长过程中由于营养物质的分解、代谢产物的积累,培养基的PH也会发生改变,故
培养基在配置时以及在微生物培养过程中都需要调节PH。
5、什么是选择培养基？它在微生物工作中有何重要性？
选择性培养基是指根据某种微生物的特殊要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。
利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。
实验2 高压蒸汽灭菌
1、如何检查培养基灭菌是否彻底？
将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24h，若无杂菌生长即已彻底。
2、高压蒸汽灭菌开始之前为什么要将锅内冷空气排尽？灭
菌完毕后，为什么要待压力降到0是才能打开排气阀？
灭菌主要因素是温度而非压力，排出冷空气后关上排气阀，维持所需压力。
压力未降至”0“便开盖取物可能会导致的后果：压力锅压力骤然降低，引起容器中的溶液喷
出容器口导致污染或者导致人烫伤。
3、灭菌在微生物实验操作中有何重要意义？
防止培养基被污染；防止杂菌影响实验结果。
4、黑曲霉的孢子与芽孢杆菌的芽孢子对热的抗性哪个最强？为什么？
芽孢杆菌的芽孢强。因为前者主要用于繁殖，抗逆性弱，后者是休眠体，抗逆性强。
5、干热灭菌完毕后，在什么情况下才能开箱取物？为什么？待电烘箱内温度降到70℃以下后才能开箱取物。电烘箱温度未降到70℃以前，切勿打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。
实验3 微生物的接种技术
如何做到避免在接种时污染杂菌？从接种前准备工作和接
种时的无菌操作法两方面来说明。
②在超净工作台上操作,工作台在使用前要紫外消毒,酒精消毒等
③应在酒精灯火焰前操作
④取菌种前灼烧接种针或接种环（要烧红）
⑤烧红的接种针（环）稍事冷却再取菌种,以免烧死菌种
⑥接种后应尽快塞上棉塞
实验4土壤微生物的分离和纯化
1、稀释分离时，为何要将融化的培养基冷却到50℃左右，才倒入装有菌液的培养皿内？
过高的温度会使细菌失去活性，且一般菌体的最适温度为37度左右,50度开始观察可以观察到菌体在什么温度的时候活性最大。
2、如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养？
通过观察菌落特征，单个菌落再次划线分离。
3、如果要分离得到嗜盐细菌，在什么地方取样品为宜？简述理由。
长期保持高盐度的环境，存活的微生物适应了该环境，成为嗜盐细菌。反之，不适应该环境的细菌则无法在那里生存下来。
实验5 光学显微镜的结构和使用方法
使用油镜观察标本时为何要加香柏油？
香柏油的折射率n=1.52，与玻璃基本相同。当光线通过载玻片后，可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。
实验6 细菌的染色技术
1、简单染色法的用途？
可用以观察微生物的形状、大小以及细胞排列状态。
2、革兰氏染色法中哪个步骤可以被省去而不影响最终结果？什么情况下可用？
复染。确定细菌为G+（革兰氏阳性）时。
3、作革兰氏染色涂片时为什么不能过于浓厚？其染色成败
的关键是什么？
如果过于浓厚,菌体会很难吸附到载玻片上,染色冲洗过程中很容易别冲下来；2、表层被染色,但是内层菌体很难染色。
乙醇脱色是染色操作成败的关键。脱色时间不足容易使革兰氏阴性菌（G-）被误认为是革
兰氏阳性菌（G+）；脱色时间过长容易使G+被误认为G-。
4、当你对一株未知菌进行染色时，怎样确证你的染色技术
操作正确，结果可靠？
可用已知菌与未知菌进行混合涂片，使二者染色条件保持一致。若已知菌的结果与预期相符，则证明操作正确，结果可靠。
实验7微生物的显微镜直接计数法
血球计数板计数的误差主要来自哪些方面？应如何尽量减
少误差？
误差主要来自实际误差、方法误差、仪器误差。
减少误差：保持样品的纯净、细胞溶液必须震荡均匀、样品浓度适中、血球计数板要整洁清晰。
实验8 细菌生长曲线的测定
1、为什么用比浊法测定的细菌生长只是表示细菌的相对生
长状况？
因为比色法只能判断菌的相对密度，而没有办法区分活菌和死菌，因此只能表示细菌的相对
生长状况。
2、在生长曲线中为什么会出现稳定期和衰亡期？在生产实践中怎样缩短延迟期？怎样延长对数期及稳定期？怎样控
制衰亡期？试举例说明。
培养基的营养有限，在菌的数量达到环境允许最大值时，同种菌之间竞争剧烈，故出现稳定期，随着营养的进一步消耗，菌没有足够的营养，出现死亡，所以出现了衰退期。缩短延迟期，可以采用营养成分与原来相近的培养基，或者采用该种菌原来类似的生长条件与营养。延长对数期和稳定期，恒化器可以将微生物保持在对数期进行研究，恒浊器可以使细菌连续生长。控制衰退期可以及时补充营养，分离出死菌。
实验10抗生素效价的测定
1、影响抑菌圈大小的因素？
①敏感菌的浓度（用量)；
②培养时间和温度；
③琼脂浓度；
④抗生素发酵水平。
2、测定抗生素效价有哪些方法？
①生物活性测定法（双蝶法、牛津杯法、滤纸片法、打孔法等）；
②化学分析法（HPLC检测）
3、抑菌圈法测定效价需要注意的方面？
①菌落的浓度
②培养基的pH
③菌落的均匀性、均一性
微生物思考题1
微生物思考题1 微生物学思考题 介绍 1、微生物包括哪些类群？微生物有哪五大共性？ 2、试述微生物与当代人类实践的重要关系。 3、什么是微生物？ 原核微生物 菌落、芽孢、phb、鞭毛伴孢晶体菌毛、lps、基内菌丝、气生菌丝、孢子丝、糖被、异形胞、磁小体、原生质体、l型细菌、性菌毛。 － 1、g+、g细菌的细胞壁化学成分、结构及相关的特点有何区别？ 2、依据鞭毛的数目和着生位置不同,可将鞭毛菌分为哪几种类型?6、试用渗透调节皮层膨胀学说解释芽孢耐热机制。9、细菌主要贮藏物的特点及生理功能是什么？ 10.细菌的基本形式是什么？根据分离后的不同排列，将球菌分为哪些种类？12.典型细菌的大小和重量是多少？14.蓝藻及其特征？ 15、简述革兰氏染色机理、染色方法、步骤、结果是什么? 16.比较了链霉菌和大肠杆菌的形态、结构、功能和化学成分。18.细菌糖原的化学成分是什么？它对细菌本身有什么影响？与人类的关系是什么？细菌糖可以根据其现有特性分为几种类型？简要描述了它们的特点。 19、细菌芽孢的作用是什么？是什么样的结构和化学组成使之具有这种作用？ 真核微生物 假根、子实体、吸器菌丝、菌丝体、真菌丝、假菌丝 1.霉菌营养菌丝和气生菌丝的特征是什么？它们能区分哪些特殊结构？ 2.尝试比较各种真菌孢子的特征。 3、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌四大类微生物的菌落有何不同？ 4、试比较细菌、放线菌、酵母菌、霉菌细胞壁成分的异同。 5、比较真核与原核生物的异同。7、真菌及其特点？病毒 斑块、病毒、轻度噬菌体、强效噬菌体、溶原细菌、类病毒、类病毒、朊病毒、亚病毒、包涵体、包膜、原噬菌体、噬菌体滴度、一步生长曲线1、病毒颗粒和核壳之间的关系？
环境工程微生物学思考题及答案
环境工程微生物学思考题及答案 第一章病毒 1.病毒是一类怎样的微生物？它有什么特点？ 答：病毒是没有细胞结构，专性寄生在活的敏感宿主体内的超微小微生物。 2.病毒分类依据是什么？分为哪几类病毒？ 答：病毒是根据病毒的宿主、所致疾病、病毒粒子的大小、病毒的结构和组成、核酸的类型、复制的模式、有无被膜等进行分类。 根据专性宿主分类：动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）、放线菌病毒（噬放线菌体）、藻类病毒（噬藻体）、真菌病毒（噬真菌体） 根据核酸分类：DNA病毒（除细小病毒组的成员是单链DNA外，其余所有病毒都是双链DNA）和RNA病毒（除呼肠孤病毒组的成员是双链RNA外，其余所有的病毒都是单链RNA）。 3.病毒具有怎样的化学组成和结构？ 答：病毒的化学组成：蛋白质和核酸，个体大的病毒如痘病毒，除含蛋白质和核酸外，还含类脂质和多糖。结构：没有细胞结构，分两部分：蛋白质衣壳和核酸内芯，共同构成核衣壳。 4.叙述大肠杆菌T系噬菌体的繁殖过程。 答：吸附→侵入→复制与聚集→释放 5.什么叫毒性噬菌体？什么叫温和噬菌体？ 答：侵入宿主细胞后，随即引起宿主细胞裂解的噬菌体称作毒性噬菌体叫毒性噬菌体；侵入宿主细胞后，其核酸附着并整合在宿主染色体上，和宿主的核酸同步复制，宿主细胞不裂解而继续生长，这种不引起宿主细胞裂解的噬菌体叫温和噬菌体。
6.什么叫溶原细胞（菌）？什么叫原噬菌体？ 答：含有温和噬菌体核酸的宿主细胞被称作溶原细胞。在溶原细胞内的温和噬菌体核酸，称为原噬菌体（或前噬菌体）。 7.解释Escherichia coli K12（λ）中各词的含义。 答：Escherichia是大肠杆菌的属名，coli是它的种名，K12是大肠杆菌的株名，括号内的λ为溶原性噬菌体。 8.病毒在固体培养基上有怎样的培养特征？ 答：将噬菌体的敏感细菌接种在琼脂固体培养基上生长形成许多个菌落，当接种稀释适度的噬菌体悬液后引起点性感染，在感染点上进行反复的感染过程，宿主细菌菌落就一个个地被裂解成一个个空斑，这些空斑就叫噬菌斑。 9.噬菌体在液体培养基和固体培养基中各有怎样的培养特征？ 答：将噬菌体的敏感细菌接种在液体培养基中，经培养后敏感细菌均匀分布在培养基中而使培养基浑浊。然后接种噬菌体，敏感细菌被噬菌体感染后发生菌体裂解，原来的细菌悬液变成透明的裂解溶液；将噬菌体的敏感细菌接种在琼脂固体培养基上生长形成许多个菌落，当接种稀释适度的噬菌体悬液后引起点性感染，在感染点上进行反复的感染过程，宿主细菌菌落就一个个地被裂解成一个个空斑，这些空斑就叫噬菌斑。 10.什么叫噬菌斑？什么叫PFU？ 答：将噬菌体的敏感细菌接种在琼脂固体培养基上生长形成许多个菌落，当接种稀释适度的噬菌体悬液后引起点性感染，在感染点上进行反复的感染过程，宿主细菌菌落就一个个地被裂解成一个个空斑，这些空斑就叫噬菌斑；一个空斑表示一个病毒，PFU即plaque forming unit表示病毒空斑单位。 11.破坏病毒的物理因素有哪些？它们是如何破坏病毒的？ 答：温度、光、干燥度。
微生物思考题大全
●从细菌生长繁殖的条件入手，如何进行细菌的人工培养？ 充足的营养成分、适合的酸碱度、合适的酸碱度、适宜的温度、一定的气体环境、渗透压等、及时高压灭菌、适宜的培养基 ●什么是生长曲线？简述其分期及各期意义。 迟缓期：细菌被接种培养基的最初一段时间，主要是适应新环境，同时为分裂繁殖作物质准备，此时细菌体积比较大，含有丰富的酶和中间代谢产物。 对数期：细菌分裂繁殖最快的时期，菌数以几何级数增长，研究细菌的最佳时期。 稳定期：由于营养物质的消耗，代谢产物的堆积，繁殖数与死亡数几乎相等。活菌数保持稳定。一些细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生。 衰退期：繁殖变慢，死菌数超过活菌数。细菌形态发生改变，生理活动趋于停滞。 ●如何利用细菌分解代谢产物鉴别细菌？ 糖发酵试验：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖 IMViC 试验常用于肠道杆菌的鉴定：吲哚（I）、甲基红（M）、VP（Vi）、枸橼酸盐利用（C）实验。结果：大肠埃希菌：++-- 产气杆菌--++ ●简述细菌合成代谢产物在医药学上的意义。 1、热原质（致热源）：是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。产生热致源的细菌大都为格兰阴性菌，热致源即其细胞壁的脂多糖。 2、毒素及侵袭性酶：①外毒素：多数G+菌和少数G-菌在生长繁殖过程中释放菌体外的蛋白质；②内毒素：G-菌细胞壁的脂多糖；外毒素毒性强于内毒素。 ③侵袭性酶：某些细菌产生的，能损伤机体组织，促使菌体的侵袭和扩散，是细菌重要的致病物质。 3、色素：①水溶性；②脂溶性。 4、抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。抗生素大多由放线菌和真菌产生。 5、细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。细菌素仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。 6、维生素 ●简述微生物的分类及各类微生物的特点 P4
微生物学实验原理及思考题答案
油镜便于观察的原理是什么? 用油镜观察时在油镜与载玻片之间加入了和玻璃折射率相近的香柏油，使进入透镜的光线增多，视野亮度增强，使物象明亮清晰。 1.细调节器每旋转一周使镜筒上升或下降0.1mm. 一。培养基的配制 原理：微生物的生长发育都有一定的营养需要，培养基即人工培养物，为其生长发育提供所需营养的基质。培养基配制好以后必须经过灭菌方能用于分离培养微生物实验。一次培养基的配制和灭菌是微生物实验室中最基本的操作，通过本次实验学习微生物实验室中常用培养基的配制方法和灭菌方法。 1.称药品的钥匙不要混用 称完药品应及时盖紧瓶盖，因为某些成分如蛋白胨极易吸水潮解 调PH时要小心操作，避免回调。 配制培养基应注意哪些问题？ 要选定合适的培养基;培养基成分要称量准确；PH要适宜；灭菌要严格。 培养基配制完成后为什么要立即灭菌？已灭菌的培养基如何进行无菌检查？ 防止细菌污染培养基 一旦细菌污染了培养基，由于培养基有丰富的营养物质，细菌会段时间内大量产生 这样子就会跟培养物争夺营养物质，另一方面，细菌生长过程中会产生有毒物质致使培养物死亡。放在37℃的恒温箱中一两天后，培养基上没有生长任何微生物的就可以使用（若有微生物则是以菌落出现的肉眼可以看见） 二。细菌的单染色技术 原理：单染色法师利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。 在中性，碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，所以常用碱性染料进行染色。碱性染料并不是碱，和其他染料一样是一种盐，电离时染料离子带正电，易于带负电荷的细菌结合而使细菌着色。 制备染色标本时的注意事项？ 选择合适菌龄的细菌；固定时避免火焰直接烘烤破坏细菌形态；染色时间要适宜；水洗时水不能直接冲在涂片处。 制片为什么要完全干燥后才能用油镜观察？ 油和水之间会分层，油就不能与标本接触还有光会发生折射等等原因，这样不利于油镜观察三。细菌的革兰氏染色法 原理：细菌先经碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后用酒精脱色，在一定条件下有的细菌紫色不被脱去，为G+，有的可被脱去，为G-. 1.革兰氏染色成败的关键是乙醇脱色。脱色过度，阳性细菌被染成阴性细菌，脱色不足，阴性细菌被染成阳性细菌 涂片务必均匀，切忌过厚，以免脱色不彻底造成假阳性 要用活跃生长期的适龄菌，老龄菌因体内核算减少或菌体死亡，会使阳性菌被染成阴性菌，故不建议使用。 为什么革兰氏染色所用细菌的菌龄一般不超过24h？ 若菌龄太老,由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应,关键在于细胞壁的通透性的改变，使结晶紫染液可以脱色透出。 当你对一株未知菌进行革兰氏染色时，怎样才能保证你的操作正确，结果可靠？ 找事先已知的且和未知菌形态明显不同的G+和G-分别做混合涂片，当和G+做时G+正确显紫色和当和G-做时G-正确显红色，看这个未知菌分别显什么色，若一致，则可确定此菌为G+
微生物学实验思考题和名词解释
1培养基配好后，为什么必须立即灭菌？ 灭菌是杀灭培养基中本身的原著菌或在空气中附着的杂菌,更好的让目标菌生长，如果存放时间长不进行灭菌培养基内的微生物就会在基内发酵生长，从而破坏培养基内的营养成分，并且由于这些微生物的生长过程中分分泌一种或多种毒素从而抑制好菌的生长。 2为什么高氏一号培养基和土豆蔗糖固体培养基中要分别加入酚和乳酸？ 高氏一号加的酚是显色用的，不是抑制剂，目的是区分目标菌。土豆蔗糖固体培养基加乳酸是抑制剂，抑制非目标菌的生长的，使得目标菌(真菌)得到选择性生长。 3在恒温箱中培养微生物时为何培养基均需倒置？ 培养时培养基会有水分蒸发,当水蒸气会聚成水滴，倒流到培养中的细菌中时,会冲散菌体，污染菌落，不利于培养观察，倒置可以避免此现象的发生。 4涂片后为什么要进行固定？固定时应注意什么？ 如果不进行固定，冲洗时就会把玻片上的细菌冲走；固定时应注意温度不能过高，以热而不烫为宜，否则会杀死细菌。 5用革兰氏染色法染色过程中应注意什么？ 选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性；涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性。；色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性。 6为什么芽孢染色要加热？为什么芽孢及营养体能染成不同的颜色？ 芽孢壁厚，透性低，不易着色，加热条件下染色，染料可以进入菌体内，也可以进入芽孢。进入菌体的染料，经水洗后被脱色，而芽一经着色难以被水洗脱，则可以使用复染剂将菌体着色，而芽孢是初染剂的颜色。 名词解释 菌苔：细菌在固体培养基接种线上由母细胞繁殖长成的一片密集的、具有一定形态结构特征的细菌群落，一般为大批菌落聚集而成。 菌落：由单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞接种到固体培养基表面，当它占有一定的发展空间并处于适宜的培养条件下迅速生长繁殖并形成的细胞堆。 芽孢：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造。 细菌：指一类细胞细短、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。 天然培养基：指一类利用动植物或微生物体包括用其提取物制成的培养基，这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其确切化学组成的培养基。 合成培养基：是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。 半组合培养基：指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。 液体培养基：一类呈液体状态的培养基，在实验室和生产实践中用途广泛，尤其适用于大规模的培养微生物。 固体培养基：一类外观呈固体状态的培养基。 半固体培养基：指在液体培养基中加入少量的凝固剂而制成的半固体状态培养基。
微生物思考题
第一章 一、选择题： 1．属于细菌细胞基本结构的为 A、荚膜 B、细胞壁 C、芽胞 D、鞭毛 2．生鞭毛最多的菌属于 A、螺旋菌 B、杆菌 C、球菌 D、假菌丝 3．在放线菌发育过程中,吸收水分和营养的器官为 A、基质菌丝 B、气生菌丝 C、孢子丝 D、孢子 4．放线菌属于 A、病毒界 B、原核原生生物界 C、真菌界 D、真核原生生物界5．菌苔是微生物培养特征。 A、固体平板 B、固体斜面 C、液体表面 D、明胶穿刺6．放线菌的形态是 A、单细胞 B、多细胞 C、单或多细胞 D、非细胞 7．用来测量细菌大小的单位是 A、cm B、mm C、um D、nm 8．细菌缺乏下列哪一种结构仍可存活 A、细胞壁 B、细胞膜 C、细胞质 D、核质 9．下列结构中并非细菌生活的必须结构的为 A、细胞壁 B、细胞膜 C、核 D、核糖体 10．下列微生物器官耐温顺序为 A、营养体＞孢子＞芽孢 B、芽孢＞孢子＞营养体 C、孢子＞营养体＞芽孢 D、芽孢＞营养体＞孢子 11．放线菌适宜生长的pH范围为
A、＜4.0 B、4.0～6.0 C、6.5～8.0 D、7.5～8.5 12．革兰氏染色结果中，革兰氏阳性菌应为 A、无色 B、红色 C、紫色 D、黄色 13．细菌主要繁殖方式为 A、增殖 B、芽殖 C、裂殖 D、孢子生殖 14．大肠杆菌经革兰氏染色后,菌体应呈 A、无色 B、红色 C、黑色 D、紫色 15．下列耐热能力最强的是 A、营养细胞 B、菌丝 C、孢子 D、芽孢 16．细菌生长的最适PH为 A、6.5～7.5 B、7.0～8.0 C、7.5～8.5 D、3.8～6.0 17．属于细菌细胞的特殊结构部分为 A、细胞壁 B、芽孢 C、细胞膜 D、原生质 18．革兰氏染色的关键步骤是 A、结晶紫(初染) B、碘液(媒染) C、酒精(脱色) D、蕃红(复染) 19．细菌形态通常有球状、杆状、螺丝状三类。自然界中最常见的是 A、螺旋菌 B、杆菌 C、球菌 D、弧菌 20．自然界长期进化形成的缺壁细菌是 A、支原体 B、L型细菌 C、原生质体 D、原生质球 21．革兰氏阳性菌细胞壁特有的成分是 A、肽聚糖 B、几丁质 C、脂多糖 D、磷壁酸 22．革兰氏阴性菌细胞壁特有的成分是 A、肽聚糖 B、几丁质 C、脂多糖 D、磷壁酸 23．原核细胞细胞壁上特有的成分是
微生物思考题答案
微生物思考题答案 《食品微生物学》思考题 第1章绪论 1、微生物的定义？它包括哪些类群？ 答：微生物的定义：是指所有形体微小，具有单细胞或简单的多细胞结构，或没有细胞结构,并需借助显微镜才能观察到的一群微小低等生物的总称。包括属于原核类的细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、衣原体；属于真菌类的真菌(酵母菌、霉菌)、原生动物和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和亚病毒。 2、简述微生物的特点？ 答：1.个体微小、分布广泛2.种类多、食谱杂3. 代谢能力强、繁殖快4.适应性强、易变异5、观察和研究手段特殊 3、试根据微生物的特点，谈谈为什么说微生物既是人类的敌人，更是人类的朋友？ 答：①有害方面： 引起疾病：如爱滋病、非典型肺炎、细菌性食物中毒、真菌毒素中毒、大肠杆菌O157H7、皮肤病等。食品腐败、变质。②有利方面 生产食品：如酸奶、面包、酒、醋等；生产药物：
如抗生素、激素、干扰素等；自然界物质循环；废水、环境治理等。 4、简述微生物发展史上主要时期的特点和代表人物？答：远古时期：在食品，农业，医学防治方面都有很好的发展。 微生物学初创期-形态阶段安东.列文虎克微生物学奠基期-生理水平罗伯特柯赫，路易斯巴菲特。微生物学的发展期-生化水平 微生物学的成熟期-分子生物学水平 5、阐述列文虎克、巴期德及柯赫的主要贡献？ 答：列文虎克：第一个真正看见并描述微生物的人，自制放大50倍到300倍的显微镜。 巴斯德：1．证明发酵是微生物引起的2．创立巴氏消毒 3．预防接种提高机体免疫功能 4．彻底否定了自然发生说(鹅颈瓶实验) 柯赫： 1．第一个发明了微生物的纯培养。 2．创立了某一微生物是否为相应 疾病的病原基本原则－柯赫法则。 6、什么是学名、双名法、三名法？ 答：学名：是按国际命名法规进行命名的。拉丁词、希
微生物学实验思考题
微生物学实验思考题 微生物学实验思考题 实验1 培养基的配置 1、简述配置培养基的基本步骤及注意事项。 步骤：配料-溶解-调PH-加入琼脂-融化-分装-封口（棉花纱布或封口膜）-灭菌 注意事项 ①加热溶化过程中，要不断的搅拌，防止琼脂糊底。最后，补足所失水分。 ② pH值要按照各种不同培养基的要求调整。 ③分装时注意不要使培养基沾染在管口或者瓶口上，以免沾污棉塞引起杂菌污染。 ④培养基的灭菌时间和温度需要按照各种培养基的规定进行，培养基灭菌后，须放在37℃温箱培养24-48h，以检查灭菌是否彻底。 2、为什么微生物实验室所用的三角瓶口或试管口要塞上棉塞才能使用？ 为了防止外界微生物进入三角瓶或试管，保持三角瓶或试管内部无菌状态或微生物的纯培养状态。同时又允许空气进入，给内部菌种提供适宜生存环境。 3、培养基配好后，为什么必须立即灭菌？如何检查灭菌后的培养基是无菌的？ 如果不进行灭菌培养料内的微生物就会发酵生长，从而破坏培养基内的营养成分，并且由于这些微生物的生长过程中分分泌一种或多种毒素从而抑制目的菌的生长。 检查无菌的方法：将灭菌的培养基放入37℃温室中培养24~48小时，若无杂菌生长，即可证明为无菌的。。 4、配置培养基为什么要调节pH？ 因为不同微生物所需环境的PH不同,同时在微生物的生长过程中由于营养物质的分解、代谢产物的积累,培养基的PH也会发生改变,故
培养基在配置时以及在微生物培养过程中都需要调节PH。 5、什么是选择培养基？它在微生物工作中有何重要性？ 选择性培养基是指根据某种微生物的特殊要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。 利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。 实验2 高压蒸汽灭菌 1、如何检查培养基灭菌是否彻底？ 将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24h，若无杂菌生长即已彻底。 2、高压蒸汽灭菌开始之前为什么要将锅内冷空气排尽？灭 菌完毕后，为什么要待压力降到0是才能打开排气阀？ 灭菌主要因素是温度而非压力，排出冷空气后关上排气阀，维持所需压力。 压力未降至”0“便开盖取物可能会导致的后果：压力锅压力骤然降低，引起容器中的溶液喷 出容器口导致污染或者导致人烫伤。 3、灭菌在微生物实验操作中有何重要意义？ 防止培养基被污染；防止杂菌影响实验结果。 4、黑曲霉的孢子与芽孢杆菌的芽孢子对热的抗性哪个最强？为什么？ 芽孢杆菌的芽孢强。因为前者主要用于繁殖，抗逆性弱，后者是休眠体，抗逆性强。 5、干热灭菌完毕后，在什么情况下才能开箱取物？为什么？待电烘箱内温度降到70℃以下后才能开箱取物。电烘箱温度未降到70℃以前，切勿打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。 实验3 微生物的接种技术 如何做到避免在接种时污染杂菌？从接种前准备工作和接 种时的无菌操作法两方面来说明。 ②在超净工作台上操作,工作台在使用前要紫外消毒,酒精消毒等
(完整版)微生物实验思考题
微生物实验思考题 1、用油镜观察时应该注意哪些问题？在载破片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？ 答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防上次实验的污染。操作时,先低倍再高倍。用完要擦掉油。 加滴香柏油。作用:增加折光率，也就是增加了显微镜的分辨率. 2、根据实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进行有效的观察. 答：细菌用油镜，真菌用高倍镜.都是先用低倍镜找到目标后，再用高倍镜调到合适的视野和合适的清晰度. 放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大，用放大 40 倍的物镜就可以看了,细菌小，要用放大 1000 倍的物镜看，感觉还很小。病毒那就要用电子显微镜看了。 3、哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性?其中最关键的环节是什么？ 答:涂片环节、加热固定环节、脱色环节;其中最关键的环节是脱色环节。 4、进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题？ 答：着色不均，染色效果不好。阴性阳性不明显分不太清楚，问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌。 5、革兰氏染色时，初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色？ 答:不可以.因为碘与染料会结合成大分子，使得染料分子不能穿过细胞的细胞壁,对实验结果造成影响。脱色后复染前，革兰氏阳性菌呈紫色,阴性菌无色. 6、不经过复染这一步,能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌？ 答：不行。在复染之前,革兰氏阴性菌是无色透明的,在显微镜下很难观察到；或者脱色过度，也会造成阳性菌脱色，不经过复染，无法进一步区别。 7、你认为制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节? 答：1制备适宜的培养基 2在超净工作台上进行,保持无菌环境
微生物学实验理论及思考题
实验一显微镜的使用及微生物大小测定的方法 二、基本原理 现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，它们由机械装置和光学系统两大部分组成。物镜的性能最为关键，它直接影响着显微镜的分辨率。其中油镜的放大倍数最大，对微生物学最为重要。 微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。微生物大小的测定，需要在显微镜下，借助于特殊的测量工具—测微尺，包括目镜测微尺和镜台测微尺。其中镜台测微尺并不直接用来测量细胞大小，而是用于校正目镜测微尺每格的相对长度。目镜测微尺每小格所代表的实际长度因显微镜的不同放大倍数而异，因此用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度，然后根据微生物细胞相当于目镜测微格数，即可计算出细胞的实际大小. 两重合线间镜台测微尺格数×10 目镜测微尺每格长度= 两重合线间目镜测微尺格数 思考题 1、用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？ 答（1）应先用摖镜纸将镜头摖干净，以防止实验的污染。使用油镜时，应先用低倍镜再用高倍镜，然后再是油镜，用完之后也要用摖镜纸将油镜摖掉。（2）滴加香柏油 （3）作用是增加折射率，即增加了显微镜的分辨率，油的折射率和分辨率成反比，同时与波长成正比。 2、影响显微镜分辨率的因素有哪些？ 答：显微镜的分辨率指显微镜能辨别两点之间的最小距离的能力，最小分辨距离越小，分辨率越高，最小可分辨率距离=λ／2NA且NA=n.sin,所以，分辨率由物镜的NA值与照明光源的波长两个因素决定，当然还有介质的折射率。 3、为什么要换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正？ 答：不同放大倍数，目镜测微尺每小隔所代表实际长度不一样，必须用镜台测微尺进行重新校正，这样目镜测微尺测量的长度才是目前状态的准备长度。 4、在不改变目镜和目镜测微尺，而改用不同放大倍数的物镜来测定同一微生物的大小时，其测定的结果是否相同？为什么？ 答：相同的，不同的放大倍数，目镜测微尺每小格所代表实际长度不一样，必须重新校正，才能得到目前状态的准确长度。 实验二显微镜直接计数法 二、基本原理 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上（又称计菌器），其优点是直观、快速、操作简单。目前国内外常用的计菌器有：血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器及Hawksley 计菌器等。利用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。此法是将单细胞微生物的悬液或孢子悬液，注入血球计数板载玻片与盖玻片
环境工程微生物学实验思考题
1在干热灭菌操作过程中应注意哪些问题，为什么？ 答：灭菌前：[1]电热干燥箱中玻璃器皿不要放置地过于紧密，否则会灭菌不够彻底 [2]开始灭菌，设定温度为160℃，当干燥箱中温度达到160℃时，灭菌1~2h [3]注意干热灭菌过程严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故，灭菌时人不能离开灭菌后： [4]不要立即打开电热干燥箱，否则会因为内外温差过大而引起玻璃器皿的破裂，灭菌结束后应先关闭电源，放置一段时间后再拿出。 2为什么干热灭菌比湿热灭菌所需要的温度更高，时间要长？ 答：高压蒸汽灭菌时利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌目的的。干热灭菌也是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌目的的。细胞内蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，菌体受热时环境和细胞内含水量越大，蛋白质凝固就越快，反之含水量少，凝固慢。因此与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度更高，时间更长. 3.高压蒸汽灭菌开始之前为什么要将灭菌锅的冷空气排净尽？灭菌完毕后什么情况下才可以打开锅盖取灭菌物品？ 答：排除灭菌器内原有的冷空气原因是：高压锅内存在冷空气时,虽压强达到规定数目,但实际温度却不足,会影响灭菌效果.灭菌完毕后,要等到压强降下来后,将气门慢慢打开,放气.排完气体后,开盖,取灭菌物品. 4、在使用高压蒸汽锅灭菌时，怎样杜绝一切不安全的因素？ 答：（1）在灭菌前一定要检查灭菌锅中是否有水，若没有水或水不够要及时加水（最好是去离子水）否则灭菌锅可能会烧干而引起炸裂事故。 （2）灭菌结束后，注意压力一定要降到0，才能打开排气阀，开盖取物。否则就会因为锅内压力突然下降，使容器内培养基由于内外压力不平衡而冲出，造成棉塞沾染培养基而发生污染，甚至灼烧操作者。 （3）灭菌时，旁边一定要有人观察灭菌锅是否处于正常使用状态。 5.灭菌在微生物学实验操作中有何重要意义？ 答：防止培养基被污染；防止杂菌影响实验结果 1.用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油?起什么作用？ 答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.油的折光率和分辨率成反比(有公式),同时与波长成正比. 2.列表比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作 答：使用高倍镜和油镜时镜头距离标本较近，而粗调节器的调节幅度较大，粗调节器的误操作会使镜头大幅度向标本移动，很容易损坏标本和镜头。一般先用低倍镜找到物象后再换到高倍镜，就只需要用细调节器了。
食品·微生物学实验思考题答案
食品微生物学技术思考题答案 1.如何区别高倍镜和油镜？ 答：（1）油镜更接近标本片（2）油镜与标本间的介质是香柏油（3）油镜刻有“oil”或“Hi”字样，也刻有一圈红线或黑线为标记。 2．为什么在使用高倍镜及油镜是应特别注意避免粗调节器的错误操作？ 答：使用高倍镜及油镜时镜头距离标片很近，而粗调节器的调节幅度较大，粗调节器的错误操作会使镜头大幅度向标本移动，很容易损坏标本和镜头。一般先用低倍镜找到物象后换到高倍镜，就只需要用细调节器了。 3.用油镜观察时应注意哪些问题？在载破片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？ 答：（1）应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防止上次实验的污染，操作时，先低倍再高倍，用完要擦掉油。（2）在转换油镜时，从侧面水平注视镜头注视镜头与玻片的距离。使镜头浸入油中而不以压破载玻片为宜。（3）从目镜内观察，把孔径光阑开到最大，使其明亮。然后用微调将镜台下降，直至视野内物象清晰。如油镜已离开油面仍未见物象，需重复操作。加的是香柏油。作用是增加折光率，增加显微镜的分辨率。 4.在调节焦距时，往往出现一些疑似观察标本的物象点，物象点可能是目镜或物镜上的杂质，也可能是标本片上的观察对象，如何通过操作判断这些物象点是否在标片上？ 答：移动标本片，看物象点是否移动，如果不移动，则不在标本片上。5．如果涂片未经热固定或固定温度过高、时间过长，会出现什么现象？ 答：固定时间是杀死菌体，使菌体蛋白质凝固黏附于载玻片上，增加菌体对染色剂的结合力，易于着色。但是如果没固定，不容易着色，且容易被清水冲走。温度过高会使细胞收缩变形，时间过长会导致菌体变形或形态破坏，难以着色，从而导致难以着色。 6.为什么要培养18-24h的细菌菌体进行革兰氏染色？ 答:此时菌体进入比较活泼的繁殖生长期，细胞壁比较好着色。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应，关键在于细胞壁的通透性的改变。如果菌龄过老，不便于显微镜下观察时阴性还是阳性菌。 7．如何操作才能保证革兰氏染色结果正确，其中的关键环节是什么？ 答：具体操作步骤为（1）涂片，与简单染色法相同，要求薄而均匀。（2）干燥、固定，在空气中自然晾干，或将涂面朝上，在酒精灯微小火焰上干燥；在酒精灯火焰上通过3-4次，温度不宜过高。（3）染色，用结晶紫进行初染1min,然后水洗。用碘液进行媒染，用碘液覆盖染色部位1min,水洗。在涂有细菌的部位连续滴加95%乙醇，约30s，水洗脱色。用番红溶液复染1min,水洗。（4）干燥，自然干燥或用吸水纸吸干，也可以用电吹风吹干。（5）镜检。 关键环节是酒精脱色。 8．为何常用插片法培养放线菌观察个体形态？ 答：放线菌的营养菌丝生长在培养基表面或插入培养基里面，不易被接种针挑取制片。采用插片法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长时期的形态。
微生物学思考题答案
微生物学思考题答案 绪论 1、你如何使你的朋友相信微生物不仅仅是一种病原？ 尽管目前微生物仍在严重威胁人类的生存，但另一方面，我们必须强调，大多数微生物对人类是无害的。事实上，大多数微生物对人类社会还有巨大的价值。 整个农业系统在许多方面都依赖微生物的活动。许多主要的农作物属于豆科植物，它们的生长同专一性细菌紧密相连，这些细菌可在植物的根部形成根瘤结构。根瘤结构中，大气中的氮转变成可用于生长的氮化物。根瘤细菌的固氮活动，减少了昂贵肥料的需要。微生物在农业上的另一个重要性在于，某些动物是反刍动物，这些主要的农业动物具有瘤胃，微生物在瘤胃中进行消化。没有这些微生物牛羊的饲养是不可能的。 植物营养方面，微生物在碳、氮、硫这些重要营养成分的循环起着关键作用。土壤和水中的微生物可见这些元素转化成植物容易利用的形式。 微生物与食品的关系，不仅仅是产生腐败变质等不利影响。奶制品的制造至少部分是借助微生物的活动，包括乳酪、酸乳酪和黄油，都是主要的具有经济价值的产品。泡菜、腌制食品和一些腊肠也归功于微生物的活动。可烘焙的食品及乙醇的制造也基于酵母菌的发酵。微生物在能源生产方面也起着重要作用。天然气是细菌作用的产物，由甲烷细菌代谢产生。光营养的微生物能够收集太阳能生产生命有机体中的储存物——生物量。废物如生活垃圾、剩余谷物、动物废 料等通过微生物转化微生物燃料——甲醇和乙醇。
利用微生物清理被人类活动污染的大气——生物整治。利用微生物降解油污、溶剂、杀虫剂和其他环境污染物。 通过基因操纵技术，能在微生物种生产出人类胰岛素。利用基因组学方法搜索带几百个目的蛋白的基因蓝图，然后将它们转入到合适的受体中由于生产重要的、有商业价值的蛋白质。在自然界中，它无限小，但作用无限大。 2、胡克和列文虎克对微生物学的贡献有那些？科恩对微生物学的贡献有那些？ 1665年，罗伯特.胡克描述了霉菌的子实体结构，因此他是第一个描述微生物的人。 1676年，列文虎克在研究辣椒水渗出的过程中发现了细菌，因此他是首次描述细菌的人。 科恩为细菌学奠定了基础并且发现了细菌的内生孢子。3、19世纪前期，人类认识微生物世界的4大障碍是什么？什么技术使人类克服了这4大障碍？ 4大障碍——个体微小，外貌不显、杂居混生，因果不显技术——显微镜的发明，灭菌技术的应用，纯种分离技术的建立，纯种培养技术的建立。 4、什么是纯培养？如何获得纯培养？为什么获得纯培养对微生物学的发展非常重要？ 纯培养——微生物学中把从一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁 2
微生物实验思考题参考答案及知识要点
微生物实验思考题参考答案及知识要点 ---------------------------------- 二.细菌的简单染色和革兰氏染色 1.革兰氏染色中那一步是关键？为什么？你是如何操作的？ 革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色（是脱色时间）。如果脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误 认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s）。 2.固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同？ 自然死亡的菌体本身已经部分自溶，结构已经改变。固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。 3.不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？ 能。在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G+）,被酒精脱色为革兰氏阴性菌。最 后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。 4.涂片为什么要固定，固定适应注意什么问题？ a杀死细菌并使菌体黏附与玻片上；b增加其对染料的亲和力。 固定时应注意：手持玻片，菌膜朝上，在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜），固定时应尽 可能维持细胞原有形态，防止细胞膨胀或收缩。 三.霉菌、放线菌的形态观察 1.镜检时，如何区分基内菌丝与气生菌丝？ 一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到横隔膜，继而断裂成球状或杆状小体。 2.显微镜下细菌放线菌酵母菌和霉菌的主要区别是什么？ 放线菌与细菌需要在油镜下才能观察清楚，而霉菌和酵母菌在低倍镜下即可看到。
微生物实验思考题
实验一 细菌的简单染色和细菌形态的观察 一、实验原理 简单染色采用一种染料对菌体进展染色，常用结晶紫、美蓝、碳酸复红等碱性染料。染色后， 菌体与背景形成鲜明比照，在显微镜下很容易被识别。通过简单染色方法可以观察细菌的菌 体形态特征和菌体的排列方式。 观察菌体形态 简单染色 〔只用一种染料〕 观察菌体排列方式 染色方法 革兰氏染色 鉴别 鉴别染色 抗酸性染色 〔利用两种染料〕 芽孢染色 观察特殊构造 荚膜染色 鞭毛染色 二、实验步骤： 涂片 枯燥 固定 染色 水洗 枯燥 镜检 三、思考题 1、制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节？ 答；〔1〕涂片：开场所加无菌水液滴不要太大，否那么不易枯燥； 取菌量要适宜且要涂抹均匀，防止过大造成堆积，而难以看清细胞个体形态 同时也应防止取菌量太少而难以在显微镜视野中找到细胞。 〔2〕无菌操作取菌：一定要等接种换冷却后再取菌，以免高温使菌体变形； 〔3〕枯燥固定：枯燥后加热固定，可防止加热时间过长，否那么细胞会破裂或变形； 〔4〕固定：菌膜一面朝上，通过酒精灯微火三次。注意温度不宜过高，时间不宜太长，否 那么菌体形态那么会发生改变。 〔5〕水洗：倾去染色液后，用水沿着菌膜四周冲洗，注意勿使水流直接冲洗菌膜部位，水 流不宜过急，过大，至流出水无色为止； 2、为什么要求制片完全枯燥才能用油镜观察？ 答：使用油镜时，物镜与标本间的介质为香柏油〔N=1.515〕，不仅增加了透明度，而且会提 高了分辨率。 假设制片不完全枯燥后，就用油镜观察，那么N 会减小，分辨率D 也会变小。而且还会造成 油水两相不互溶，所以制片要求完全枯燥后才能用油镜观察。 3、如果涂片未经加热固定，将会出现什么问题？如果加热温度过高，时间太长，又会怎样 呢？ 答：加热固定的作用是使细胞质凝固，使细胞固定在载玻片上，这种加热处理还可以杀死大 多数细菌而且不破坏细胞形态，而且还可增加细胞对染料亲和力。 〔1〕如果图涂片未经加热固定，那么细胞无法固定在载玻片上，在染色水洗后会被水流冲 走。 〔2〕如果加热温度过高，时间太长，那么会使细菌形态发生变化甚至破裂。 4、为什么细菌染色常用碱性染料？什么情况下用酸性染料？ 答：〔1〕细菌染色常用碱性染料，原因在于微生物细胞在碱性、中性及弱酸性溶液中通常带 0.61(/2)n Sin λα
医学微生物学思考题及答案
微生物思考题及答案 1、何为硫磺样颗粒，有什么临床意义？ 答在患者病灶组织和瘘管中流出的脓汁中，可找到肉眼可见的黄色小颗粒，称硫磺颗粒，这种颗粒是放线菌在组织中形成的菌落。用于放线菌的微生物学诊断。〔P184〕 2、简述白喉外毒素的产生、作用机制。 答当b棒状杆菌噬菌体侵袭无毒白喉棒状杆菌时，其编码外毒素的to*基因与宿主菌染色体整合，无毒白喉棒状杆菌则成为产毒的白喉棒状杆菌而产生白喉毒素。 作用机制：此毒素是一种毒性强、抗原性强的蛋白质，由A和B 肽链经二硫键连接而成。A肽链是白喉毒素的毒性功能区，抑制易感细胞蛋白质的合成。B链上有一个受体结合区和转位区，但能和心肌细胞、神经细胞等外表受体结合，协助A链进入这些易感细胞。细胞内蛋白质的合成过程中，需要延伸因子1和延伸因子2.当白喉毒素A链进入细胞后可促进辅酶I上的腺苷二磷酸核糖与延伸因子2结合，结果延伸因子2失活，使蛋白质无法合成。〔P174〕 3、简述结核分枝杆菌形态染色，生长特点。 答形态染色：细长略带弯曲杆菌，齐-尼抗酸染色法阳性。生长特点：生长缓慢，3-4周后可见颗粒、结节或菜花状，乳白色或米黄色菌落，不透明。〔P150〕 4、简述结核菌素试验的原理，结果判断及意义。 答原理：是应用结核菌素进展皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起迟发性超敏反响〔Ⅳ型变态反响〕从而判定机体对结核有无免疫力的一种试验。结果判断及意义：阴性反响：无硬结者或直径小于5mm,表示未感染过结核分枝杆菌，也未曾接种过卡介苗。 阳性反响：直径大于5mm,表示感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗，机体对结核分枝杆菌有一定的免疫力。强阳性反响：直径大于15mm,表示体内可能有活动性结核感染。〔P153〕5、简述结核分枝杆菌原发感染与原发后感染的特点。 答原发感染：多发生于儿童；原发综合征：原发灶、淋巴管炎、肺门淋巴结肿大；转归原发后感染：多发生于成人，多为内源性感染；病灶多局限，易形成结核结节，发生开发性肺结核的机率大〔P152〕 6、支原体的定义。 答是一类没有细胞壁，呈高度多形性，能通过滤器，能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。〔P187〕 7、支原体与细菌L型的区别。 答支原体与细菌L型的区别
微生物学思考题答案
微生物学思考题答案 1、你如何使你的朋友相信微生物不仅仅是一种病原？ 尽管目前微生物仍在严重威胁人类的生存，但另一方面，我们必须强调，大多数微生物对人类是无害的。事实上，大多数微生物对人类社会还有巨大的价值。 整个农业系统在许多方面都依赖微生物的活动。许多主要的农作物属于豆科植物，它们的生长同专一性细菌紧密相连，这些细菌可在植物的根部形成根瘤结构。根瘤结构中，大气中的氮转变成可用于生长的氮化物。根瘤细菌的固氮活动，减少了昂贵肥料的需要。 微生物在农业上的另一个重要性在于，某些动物是反刍动物，这些主要的农业动物具有瘤胃，微生物在瘤胃中进行消化。没有这些微生物牛羊的饲养是不可能的。 植物营养方面，微生物在碳、氮、硫这些重要营养成分的循环起着关键作用。土壤和水中的微生物可见这些元素转化成植物容易利用的形式。 微生物与食品的关系，不仅仅是产生腐败变质等不利影响。奶制品的制造至少部分是借助微生物的活动，包括乳酪、酸乳酪和黄油，都是主要的具有经济价值的产品。泡菜、腌制食品和一些腊肠也归功于微生物的活动。可烘焙的食品及乙醇的制造也基于酵母菌的发酵。微生物在能源生产方面也起着重要作用。天然气是细菌作用的产物，由甲烷细菌代谢产生。光营养的微生物能够收集太阳能生产生命有机体中的储存物――生物量。废物如生活垃圾、剩余谷物、动物废
料等通过微生物转化微生物燃料――甲醇和乙醇。 利用微生物清理被人类活动污染的大气――生物整治。利用微生物降解油污、溶剂、杀虫剂和其他环境污染物。 通过基因操纵技术，能在微生物种生产出人类胰岛素。利用基因组学方法搜索带几百个目的蛋白的基因蓝图，然后将它们转入到合适的受体中由于生产重要的、有商业价值的蛋白质。 在自然界中，它无限小，但作用无限大。 2、胡克和列文虎克对微生物学的贡献有那些？科恩对微生物学的贡献有那些？ 1665年，罗伯特.胡克描述了霉菌的子实体结构，因此他是第一个描述微生物的人。 1676年，列文虎克在研究辣椒水渗出的过程中发现了细菌，因此他是首次描述细菌的人。 科恩为细菌学奠定了基础并且发现了细菌的内生孢子。 3、19世纪前期，人类认识微生物世界的4大障碍是什么？什么技术使人类克服了这4大障碍？ 4大障碍――个体微小，外貌不显、杂居混生，因果不显 技术――显微镜的发明，灭菌技术的应用，纯种分离技术的建立，纯种培养技术的建立。 4、什么是纯培养？如何获得纯培养？为什么获得纯培养对微生物学的发展非常重要？ 纯培养――微生物学中把从一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁
微生物实验报告思考题参考答案
实验一、微生物的简单染色思考题 1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么？ 答：油镜在使用时必须在载玻片与物镜之间滴加镜头油。油镜使用过程中要注意两点：〔1〕、使用后镜头的清洁：镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度，用完油镜必须进行“三擦〞〔观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯〔或者乙醇乙醚溶液〕擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原〕。 〔2〕、.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。 2、使用油镜时，为什么必须用镜头油？ 答：在使用普通显微镜时，当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。假设中间的介质是一层油〔其折射率与玻片的相近〕，那么几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。 3、镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？ 答：低倍镜视野比拟大，能看到的范围大，容易找到观察的目标，然后在用放大倍数高的高倍镜或油镜有目的的观察。 实验二、革兰氏染色 〔1〕为什么必须用培养24 h以内的菌体进行革兰氏染色？ 答：24h以内的菌体处于活泼生长期，菌体细胞壁具有典型特征，而处于老龄的革兰氏阳性细菌壁结构开始发生变化，染色时会被染成红色而造成假阴性 （2）要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步是关键步骤？为什么？答：应注意如下几点： 其一，选用活泼生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性； 其二，涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性； 其三，脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性 （3）当你对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠？ 答：当要确证未知菌的革兰氏反响时，可用菌进行混合涂片，使二者染色条件保持一致，如果菌的结果与预期相符，那么证明操作操作正确，结果可靠。 实验三、微生物的显微镜直接计数法 1、在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点？ 答：1〕优点：直观、快速、操作简单。