遗传变异和育种 答案

遗传变异和育种

一、填空：

1、孢子

2、缺陷噬菌体

3、-196℃

4、转座子

5、有性、准性

6、紫外线亚硝基胍

7、缺失、添加、易位、倒位

8、转化、转导、接合、原生质体融合、有性杂交、准性杂交

9、遗传物质结构、转录、转译

10、移码

11、高频转导、低频转导

12、诱变剂处理、淘汰野生型、检出缺陷型、鉴定缺陷型

13、嘧啶二聚体

14、经典转化实验、噬菌体感染实验、植物病毒的重建实验

15、变量试验、涂布试验、影印平板培养法

二、选择题BCDC

三、判断题对对错对对对

四、名词解释

1、准性生殖：在自然条件下，真核微生物体细胞间的一种自发性的原生质体融合现象。

2、流产转导：经转导噬菌体的媒介而获得了供体菌DNA片段的受体菌，如果这段外源DNA 在其内既不进行交换、整合和复制，也不迅速消失，而仅表现稳定的转录转译和性状表达，这一现象就称流产转导。

3、野生型与原养型菌株：野生型指从自然界分离到的任何微生物在其发生人为营养缺陷突变前的原始菌株，在相应的基本培养基上能生长。原养型指营养缺陷型突变株经回复突变或重组后产生的菌株，其营养要求在表型上与野生型相同，遗传型均用[A+B+]表示。

4、感受态：指受体细胞最容易接受外源DNA片段并能实现转化的一种生理状态。

5、转化子：受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而形成的杂种后代，称转化子。

6、温度敏感突变株：是一类典型的条件致死突变株。指突变使某些菌株的重要蛋白质的结构和功能发生改变，以致会在某特定温度下具有功能，而在另一温度（一般为较高温度）下则无功能。

7、抗性突变株：指野生型菌株因发生基因突变，而产生的对某化学药物或致死物因子的抗性变异型。

8、Hfr菌株：即高频重组菌株，指F质粒整合到染色体上的菌株。

9、质粒：原核生物的质粒指游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的小型共价闭合环状dsDNA分子，即cccDNA。

10、细菌的普遍性转导：通过极少数完全缺陷噬菌体对供体基因组上任何小片段DNA进行“误包”，而将其遗传性状传递给受体菌的现象，称为细菌的普遍性转导。

11、点突变：一对碱基被另一对碱基置换的突变。

12、条件致死突变：某菌株或病毒经基因突变后，在某种条件下可正常地生长、繁殖并呈现其固有的表型，而在另一种条件下却无法生长、繁殖，这种突变型称为条件致死突变。13、局限性转导：指通过部分缺陷噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中，并与后者的基因组整合、重组，形成转导子的现象。

14、营养缺陷型：野生型菌株经诱变剂处理后，由于发生了丧失某酶合成能力的突变，因而只能在加有该酶合成产物的培养基中才能生长，这类突变菌株称为营养缺陷型突变株，或称为营养缺陷型。

15、低频转导：指通过一般溶源菌释放的噬菌体所进行的转导，因其只能形成极少数（10-4-10-6）转导子。

16、接合：供体菌通过性菌毛与受体菌直接接触，把F质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者，使后者获得若干新遗传性状的现象。

17、饰变：指外表的修饰性改变，即一种不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。

五简答题

1简述：

原理：鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株在基本培养基的平板上不能生长，如果发生回复突变称原养型后则可生长。

方法：在含待测可疑“三致”物的式样中，加入鼠肝匀浆液，经过一段时间保温后，吸入滤纸片中，然后将滤纸片放于上述平板中央。结果：（1）平板上无大量菌液，说明试样中不含诱变剂；（2）纸片周围有抑菌圈，外围出现大量菌落，说明试样中有某种高浓度的诱变剂；（3）纸片周围出现大量菌落，说明试样中有浓度适当的诱变剂存在。

优点：快速（约3天）、准确（符合率>85%）、费用省。

2何谓原生质融合技术？简述其主要的操作及微生物育种的意义。

原生质融合是通过人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲性状的稳定重组子的过程。

操作过程：先选择两株适当的有特殊价值，并带有选择性遗传标记的细胞作为亲本菌株置于等渗溶液中，用适当的脱壁酶去除细胞壁，再将形成的原生质体进行离心聚集。加入促融合剂PEG或者接电脉冲等因素促进融合，然后用等渗液稀释，再涂在能促进它再生细胞壁和进行细胞分裂的基本培养基平板上，待形成菌落后，再通过影印平板法，把它接种到各种选择性培养基平板上，检验它们是否为稳定的融合子，最后再测定其有关生物学性状或生产性能。

意义：在育种上应用原生质体融合的研究甚多，成绩显著。在这些例子中其重组频率已经达到10-1，而诱变育种一般仅为10-6，此外，除同种的不同菌株或种间能进行融合外，还发展到属间，科间甚至更远源的微生物或者高等生物细胞间的融合，并借此获得生产性状更为优良的新物种，此外，近年来在原生质体融合育种中还出现用加热或者UV灭活的原生质体做一方甚至两方亲本参与融合，此法大大简化了制备遗传标记亲本的繁琐准备工作。

3微生物基因突变的类型和特点

类型：营养缺陷型，抗性突变型，条件致死突变型，形态突变型，抗原突变型，产量突变型特点：（1）自发性（2）不对应性（3）稀有性（4）独立性（5）可诱变性（6）稳定（7）可逆性

4怎样防止菌种的衰退现象？

1控制传代次数2创造良好的培养条件3利用不易衰退的细胞传代4采用有效的菌种保藏方法

5

6营养缺陷型的定义，筛选的一般步骤？

营养缺陷型：野生型菌株经诱变剂处理后，由于发生了丧失某酶合成能力的突变，因而只能在加有该酶合成产物的培养基上才可能生长，这类突变菌株称为营养缺陷型突变株或简称为营养缺陷型。

筛选方法：诱变处理——淘汰野生型——检出缺陷型——鉴定缺陷型

7结合与转化如何区别？

转化：供体DNA段——注入受体细胞

接合：通过性菌毛，将遗传物质从供体菌转移给受体菌

8何谓菌种复壮？如何达到菌种复壮？

复壮：恢复原菌株固有形状或在菌种中选择到自发的正变个体

措施：

积极措施：在菌种的典型特征或生产形状没有消退前，就经常有意识的采取纯种分离合生产形状的测定工作，以期从中选择到自发的正变个体。

消极措施：在菌种已经发生衰退的情况下，通过纯种分离和测定典型性状，生产性能等指标，从已经衰退的群体种筛选出少数的没有退化的个体，以达到复壮。

六综述题

1 F+，F-，HFR和F`菌株有什么区别？

F+菌株：指细胞内存在一至几个F质粒，并在细胞表面着生一至几条性菌毛的菌株。

F-菌株：指细胞中无F质粒、细胞表面也无性菌毛的菌株。

Hfr菌株(high freguency recombination strain, 高频重组菌株)：由F质粒插入到染色体DNA 后形成的高频重组菌株，这类菌株在F质粒的转移过程中可以把部分甚至全部细菌染色体传递给F-细胞并发生重组。

F’菌株：细胞内存在携带有宿主染色体基因的F质粒的菌株。

2、放线菌产量突变株的筛选方法见P218琼脂块培养法。

3、菌种保藏的基本原理是：根据微生物的生理、生化特点，选用优良菌株，最好是它们的休眠体，人工地创造适合于休眠的环境条件，即干燥、低温、缺乏氧气和养料等，使微生物的代谢活动处于最低的状态但又不至于死亡，从而达到保藏的目的。

菌种保藏的常用方法？

（1）斜面冰箱保藏法：将菌种接在适当的斜面上，待其生长丰满后，可放在4℃冰箱中保藏。此法一般可保藏3个月左右。各类菌种均可用此法进行保藏。

（2）半固体穿刺保藏法：将菌种接入半固体直立柱中，然后进行培养。待长好后，放入4℃冰箱中保藏。此法可保藏半年左右，它适用于细菌、酵母的菌种保藏。

（3）石蜡油封存法：如果将无菌石蜡油加入到上述保藏的菌种中，使菌种与空气隔绝，则保藏效果更佳，一般可保藏三年左右。根据同样的道理，用灭菌的橡皮塞代替原来的棉花塞，效果也是好的。此法适用于各类菌种的保藏。

（4）砂土管保藏法：取过筛（60目）河砂，用10％盐酸浸泡、用水洗净后，烘干。再取瘦土，以4：1量混合，装入小试管、灭菌后，滴入几滴菌种悬液，用接种针搅匀。然后放入干燥器中，抽气干燥，放入低温处保藏。此法一般可保藏1至数年。它适用于产生孢子的微生物的保藏。

（5）冷冻干燥保藏法：将用灭菌牛奶做成的高浓度的菌液装入灭菌的安瓿瓶中，放在低温条件下抽气干燥，使其中的水分因升华作用逸出，而形成完全干燥的菌块，然后将安瓿瓶在真空条件下融封。这种方法因菌体内的水分全部被抽掉，无法进行任何代谢作用，所以保藏期很长。一般可在5年以上。它适用于各大类微生物的保藏。见p244表7-13

4、筛选方法为：首先制备土壤悬液，然后涂布到琼脂平板上，长出菌落后转移到淀粉培养基上培养，根据透明圈的有无和大小来筛选。