饵料生物培养重点整理

饲料：饲养动物（禽、畜等）的食物。

饵料：鱼、虾、贝等水产动物的食物。

饵料生物:是指在海洋、江河、湖泊等水域中生活的各种可供水产动物食用的水生动、植物

生物饵料: 是经过筛选的优质饵料生物，进行人工培养后投喂给养殖对象食用的活的饵料。

微粒饲料：将不同营养物质加工，配合，制成相应生物饵料大小的颗粒饲料产品，称微粒饲料。

生物饵料培养学：是研究生物饵料的筛选、培养及其营养价值评价的一门应用性科学。

光合细菌：又称光养细菌，是能进行光合作用的一群原核生物。

饱和光照强度：光合作用或细胞分裂速率达到最大值时的光照强度称为最适光照强度或称饱和光照强度。

补偿光照强度：适光范围的低限。在这样的光照强度下，藻类呼吸作用消耗的氧气量与光合作用放出的氧气量恰好相等，细胞只能维持基础代谢不能生长。

饱和白昼现象：在较强的光照强度和较长的日照时间下，日照时间虽然增加，生长率并不再增加，这种现象称为饱和白昼现象。

光抑制: 过强和过长时间的光照会引起光抑制，使叶绿素发生光解而褪色。

纯培养：即无菌培养,是指排除了细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。

单种培养：在培养过程中不排除细菌存在的一种培养方式，称为单种培养。

混合培养：各藻种混杂在一起的培养方式。例如水样采集后单一藻种分离前的预备培养。

一次培养：在一定的容器中，配成培养液，把少量的藻种接种进去，然后在适宜于藻类生长的环境条件下培养，经过一定时间（5-7天），待藻液达到一定的密度后，便一次性采收或作进一步扩大培养。

半连续培养：是指在一次培养的基础上，当藻类细胞达到一定密度后，每天（或隔天）收获一部分浓藻液，并加入新的培养液继续培养。连续培养：在培养容器内，新的培养液不断流入，达到一定密度的藻液不断流出。一般在室内进行，采用自动控温、人工光源、封闭式通气培养。

自养培养：是一种传统的培养方式，是利用光能、以二氧化碳为主要碳源进行的培养。

异养培养：以可利用有机碳作为唯一碳源和能源进行的培养，具有易进行高密度的纯种培养、可实现培养条件的自动控制等优点。

兼养培养：是介于自养培养和异养培养之间的一种培养方式。是利用光能，以可利用有机碳作为碳源进行的培养。

选择育种:在培养过程中，不经过特殊处理，利用藻类自然变异，有目的定向选择具有优良性状的藻种。

诱变育种：通过物理和化学诱变方法，导致藻类发生大量变异，从中选育出具有优良性状的藻种。

非需精卵（夏卵、非混交卵）：环境适宜时非混交雌体产生的卵壳薄而光滑的成熟后无需受精就能迅速发育成二倍体非混交雌体的卵。需精卵(未受精冬卵,混交卵)：当外界环境恶劣不适宜轮虫生存时，混交雌体经减数分裂产生单倍体需精卵，个体较小，只有夏卵一半大，透明，数目多。

休眠卵（冬卵）:混交卵与精子结合成二倍体的受精卵，受精卵再形成厚壳的休眠卵。

初孵无节幼体（1龄无节幼体）：卤虫出卵后为体长400-500 m，橘红色，不摄食，靠卵黄维持新陈代谢的初孵无节幼体。

孵化率：每百粒卤虫卵（不包括空壳）能够孵化出的无节幼体的只数，以百分比表示。孵化率是衡量卤虫卵孵化性能最常用的指标。

孵化效率：每克卤虫卵能够孵化出的无节幼体的只数。

孵化产量：每克卤虫卵能够孵化出的无节幼体的总干重（mg）。孵化产量最能反映卤虫卵的孵化质量。

孵化速度：孵化速度：孵化出90%无节幼体所需的时间T

与孵化出

90

的差值。

第一个无节幼体所需的时间T

孵化同步性：孵化出90%无节幼体所需的时间与孵化出10%无节幼体所需时间的差值。

生殖力：是桡足类产卵量、卵的孵化率、幼体成活率等的综合能力。世代时间或生殖周期：指从个体孵化到其成熟产卵并孵化出第一批幼体的时间，或成熟个体交配开始到下一世代幼体发育到成体的时间。

1、生物饵料的筛选原则：①大小适中：不同的动物及同种动物的不同发育阶段对饵料大小的要求不同。

扇贝幼虫的早期阶段：等鞭金藻等个体小、游动缓慢的种类。

扇贝幼虫的后期阶段：扁藻、塔胞藻等个体较大，游动活泼的种类。

②方便养殖动物摄食：生物饵料在水中的运动速度与在水层中的分布情况，应便于养殖动物摄食。

扇贝幼虫：浮游生活，选用浮游生物饵料。

鲍鱼苗（稚鲍）：底栖生活，选用底栖生物饵料。

③营养丰富：容易被养殖动物消化吸收，具有较高的营养价值，使养殖动物生长迅速。

④生物饵料及其代谢产物无毒或毒性很小，使养殖动物具有较高的成活率。例微囊藻和螺旋藻。

⑤生物饵料的生活史短，生殖力强。如球等鞭金藻。

⑥环境的适应性（对温度、盐度、光照强度等）和抗逆性强，易于大量培养，培养达到的密度大，产量高。如褶皱臂尾轮虫。

2、试述生物饵料在水产动物育苗中的应用情况。

（1）育苗

贝类育苗：微藻，常用硅藻类、金藻类和绿藻类。

鲍鱼（底栖种类）育苗：底栖硅藻。

甲壳类（虾、蟹等）育苗：微藻、轮虫、卤虫的无节幼体、桡足类等。

鱼类育苗：轮虫、卤虫的无节幼体、桡足类、枝角类、糠虾类等。

海参育苗：角毛藻、盐藻（杜氏藻）、底栖硅藻等。

（2）养成

卤虫的成虫：是鱼、虾养成期的优质饵料。

光合细菌：是鱼、虾池塘的水质净化剂。

螺旋藻：蛋白质含量高于50%, 是人工配合饵料的理想添加剂。

3、为什么生物饵料培养仍是今后鱼虾蟹幼体育苗的主要途径？

苗种的饵料问题是水产苗种规模化和产业化的主要制约因素，未来生物饵料将会由全价微粒饲料完全取代，但微粒饲料目前存在的问题如下：

①要求的粒径小，加工工艺复杂，微粒饲料的均质性难以保证

②营养成分在水中的稳定性难以保证

③在水中的悬浮性难以保证

④对鱼虾蟹幼体的营养需求了解较少

4、两种光合作用的异同

产氧光合作用不产氧光合作用

涉及光反应系统光系统I 和光系统II

Photosystem I and II

光系统I Photosystem I

光合色素叶绿素Chlorophyll 细菌叶绿素

供氢体水分子分子氢、硫化氢、硫、硫代硫酸钠等氧气有氧放出没有氧气产生

涉及生物体蓝细菌和植物不产氧光合细菌

5、光合细菌的培养基的组成：水分、氮源（无机氮和有机氮）、碳源（有机化合物和碳氢化合物）、微量元素（铜、钾、镁、硫等的无机盐）

6、试述光合细菌的培养流程

（1）容器、工具的洗涤和消毒

（2）培养基的制备

1）准备培养用水

2）培养基配制

3）灭菌和消毒

（3）接种

（4）培养管理

搅拌和充气、调节光照度、调节温度、酸碱度的测定和调整、生长情况的观察和检查、问题的分析和处理

7、影响光合细菌大量培养的因子有哪些？如何进行日常管理？

①溶解氧、CO2

小型厌气培养：摇动培养容器

大型厌气培养：机械搅拌器或小水泵

微气培养：充气

②光照：连续照明，白天用太阳光，晚上用人工光源

③温度：调节温度在23-39℃之间

④酸碱度：经常测定酸碱度，常用醋酸来降低菌液的酸碱度

8、光合细菌在水产养殖上的应用

①水质净化剂

光能异养菌以水体中的有机物质作为菌体生长、繁殖的营养成分。分解利用水体中的氨盐、亚硝酸盐、硫化氢等有害物质

②浮游动物的饵料

用光合细菌和微藻的混合液培养卤虫、轮虫和枝角类，效果较好

（三）鱼、虾、贝幼体的饵料

光合细菌营养价值高，在水产经济动物均可作为辅助饵料投喂，能够促进幼体生长、变态和提高成活率。

（四）饲料添加剂

可提高饲料效率，增加养殖动物的脂类和蛋白质含量。

（五）预防疾病

9、目前广泛应用在水产上的光合细菌是紫色非硫细菌，个体较小，<5微米

10、光合细菌主要有哪两种光合色素？它们如何决定光合细菌的颜色？

细菌叶绿素（菌绿素）和类胡萝卜素

若类胡萝卜素含量较高，掩盖了菌绿素的颜色，细菌则会呈红、粉红、橙黄、紫或茶褐色；若菌绿素含量较高，掩盖了类胡萝卜素的颜色，细菌则会呈现蓝绿色。

11、目前可规模化养殖的微藻有几种？每种微藻的作用是什么？分别属于哪些门、纲、目？（1）三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum) ——低温种类。

分类地位：硅藻门/羽纹硅藻纲/褐指藻目

（2）小新月菱形藻（Nitzschia closterium f.minutissima）——贝类和虾类幼体的良好饵料。

分类地位：硅藻门/羽纹硅藻纲/管壳缝目

（3）牟氏角毛藻（Chaetoceros muelleri）——作为海参、甲壳类等幼体的饵料；耐高温种类，适合夏季培养。

分类地位：硅藻门/中心硅藻纲/盒形藻目

（4）纤细角毛藻（Chaetoceros gracilis）——作为海参、甲壳类等幼体的饵料；耐高温种类，适合夏季培养。

分类地位：硅藻门/中心硅藻纲/盒形藻目

（5）中肋骨条藻（Skeletonema costatum）——广温广盐种类，是对虾幼体、缢蛏、牡蛎等的优良饵料。

分类地位：硅藻门/中心硅藻纲/圆筛藻目

（6）亚心形扁藻（Platymonas subcordiformis）——低温种类

分类地位：绿藻门/绿藻纲/团藻目

我国作为饵料培养的种类还有青岛大扁藻，比亚心形扁藻大。

（7）塔胞藻(Pyramidomonas sp.）——亲贝和许多贝类后期幼虫的良好饵料。

分类地位：绿藻门/绿藻纲/团藻目

（8）盐藻（Dunaliella spp.）——可通过大量培养杜氏藻提取β-胡萝卜素。

分类地位：绿藻门/绿藻纲/团藻目

（9）莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardii）

分类地位：绿藻门/绿藻纲/团藻目

（10）雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)——含大量的虾青素，虾青素是鲑鳟鱼饲料中必不可少的成分，作为天然抗氧化剂用于食品和化妆品中

分类地位：绿藻门/绿藻纲/团藻目

（11）小球藻（Chlorella s pp.）——用于培养轮虫

分类地位：绿藻门/绿藻纲/绿球藻目

（12）微绿球藻（Nannochloris oculata）——用于培养轮虫

分类地位：绿藻门/绿藻纲/绿球藻目细胞球形，直径2-4微米。

（13）栅藻Scenedesmus spp.——淡水种，静水培养

分类地位：绿藻门/绿藻纲/绿球藻目

（14）球等鞭金藻（Isochrysis galbana）——可以作为扇贝、牡蛎等多种双壳类幼虫的饵料，富含DHA。

分类地位：金藻门/金藻纲

球等鞭金藻有三个常见的生态品系：

3011(高温品系)、8701(低温品系)、塔溪堤品系（高温品系）

（15）湛江等鞭金藻（Isochrysis zhanjiangensis）——可以作为扇贝、牡蛎等多种双壳类幼虫的饵料，富含DHA。

分类地位：金藻门/金藻纲球

（16）绿色巴夫藻（Pavlova viridis）——3012，用于海湾扇贝和中国对虾育苗

分类地位：金藻门/金藻纲

（17）异胶藻（Heterogloea sp.）——可作为牡蛎、贻贝、菲律宾蛤仔、泥蚶等幼体的饵料。分类地位：黄藻门/黄藻纲/异球藻目

（18）钝顶螺旋藻（Spirulina platensis）——可作为鱼、虾饲料添加剂。

分类地位：蓝藻门/蓝藻纲/颤藻目

12、影响微藻生长繁殖的因子：光照、温度、盐度、营养盐、二氧化碳、pH、生物因子

13、培养微藻过程中主要采用哪些措施补充二氧化碳？

①通过搅拌增加水与空气的接触面，使空气中的二氧化碳溶于培养液中。

②通入普通空气（含二氧化碳0.03%），通过微小气泡增加水和空气的接触面，使空气中的二氧化碳溶入培养液中。

③通入含1%—5%二氧化碳的混合空气，效果好，但要防止过量致毒。

④向培养液中添加碳酸氢钠（容易引起沉淀）。

14、微藻生长繁殖所必需的大量元素和微量元素有哪些？

大量元素：N、P、Fe、K、Mg、S、Ca、Si

微量元素：Zn、Cu、Mn、Mo 、Co

15微藻培养液配方应该有哪些主要成分？

大量元素、微量元素、维生素、络合物、土壤抽取液

16、说明微藻培养方法（培养工艺流程）

①容器工具的洗涤与消毒：利用物理和化学方法对容器、工具进行洗涤和消毒：

②培养液的制备：使用的海水需要进行消毒，按配方比例计算和称取营养盐

③接种：选择优良藻种，尽量进行高浓度接种

④培养管理：日常管理要经常搅拌和充气、调节光照、补充营养盐和水分、调节酸碱度、控温，室外培养还应注意防虫和防雨；定期检查藻类生长状况，出现问题及时分析和解决。

⑤采收：育苗生产用水泵直接抽取藻液投喂或浓缩后投喂；实验室或其他用途经常进行冷冻干燥保存。

17、微藻生产性接种时应该注意哪些问题？

①藻种质量：应选取无敌害生物污染、生活力强、生长旺盛的藻种来进行接种。一般是倒取或抽取上层（上浮性好、浓度高）的藻种进行接种。

②接种比例:尽量采用高比例接种。藻种不足时，可以采用分次加培养液的方法。

③接种时间:接种时间最好选择上午8—10点进行，而不宜在晚上接种。

18、藻类生长情况的观察和检查包括那几个方面的内容

①肉眼观察内容：藻液颜色、细胞运动情况、是否有沉淀和附壁现象、有无菌膜

②显微镜检查内容：微藻的形态和运动情况、有无敌害生物及杂藻、计数，确定细胞密度

19、微藻培养的日常管理操作包括哪些？

搅拌和充气、调节光照、营养盐和水分的补充、调节酸碱度、控温防虫和防雨

20、生产上完整的培养设施包括那几个部分？

观察室、清洗消毒室、一级保种室、二级培养室、三级培养室、水处理系统（沉淀池、水过滤装置、海水消毒池）、充气系统（充气机、减压阀、管道设备）

21、目前微藻大规模培养都有哪些方法？它们的优缺点分别有哪些？

（1）开放式大池培养

优点：

①建设及维持成本较低。

②操作简单，技术较成熟。

③空气CO2即可满足需要。

缺点：

①开放培养，容易污染

②细胞密度低，工作量大。

③效率低、占地面积大。

④难以控温

⑤水份蒸发严重，耗水多。（2）密闭式光生物反应器

优点:

①封闭培养，不易污染。

②细胞浓度高，便于后期

处理。

③封闭系统，水消耗少。

缺点：

①建设及维持成本较高。

②操作较复杂。

③需要大量CO2。（3）异养培养

优点：

①可进行高密度的纯种

培养。

②可实现培养条件的自

动控制。

缺点：

①成本高，操作复杂，技

术水平要求高。

②有些微藻种类无法进

行异养培养。

⑥生产不稳定

22、在人工一次性培养条件下，微藻的生长一般经过哪几个时期？如何缩短延缓期，延长指数生长期？

①延缓期：细胞数目不增加或增加很少。

②指数生长期：细胞迅速生长繁殖，细胞数目以几何级数增加。

③相对生长下降期：细胞生长繁殖的速度与指数生长期相比逐步下降

④静止期：细胞数目保持稳定，细胞停止分裂。

⑤死亡期：藻类细胞大量死亡，细胞数目迅速减少。

（1）缩短延缓期，可以采取几项措施：

①接种比较“年轻”的藻类细胞（处于指数生长期的细胞）。（Fv/Fm：PSII的最大光化学量子产量，PSII的最大光能转化效率）

②加大接种量。

③防止藻类细胞从旧培养液到新培养液中，营养物质浓度和环境条件差别过大。

（2）使指数生长期延长的措施：

①追加营养盐，补充营养。

②补充二氧化碳。

③用搅动或充气的方法改良高密度藻液中的光照条件。

④采用连续培养方式或半连续培养方式。

23、常用的藻种分离方法有几种，简述其流程。

（1）微吸管分离法

①制备微吸管

②将稀释适度的藻液水样，置载玻片上，在显微镜下观察、挑选要分离的藻细胞。

③将吸出的藻类细胞放在经消毒的特制小载玻片上，镜检这一滴水中是否只有所需要分离的藻类细胞。

④然后将含有所需分离藻类细胞的小载玻片直接移入装有培养液并经灭菌的试管中，在适宜的光照条件下培养。

（2）水滴分离法

将培养液稀释，每一滴水含有一个左右的藻细胞。水滴尽可能小些，要求在显微镜低倍镜视野中能看到水滴的全部或大部分。用微吸管吸取稀释适度的藻液，放在另一特制的经消毒的小载玻片上，镜检这一滴水中是否只有所需要分离的藻类细胞。

（3）平板分离法

①制备平板培养基

②藻种分离：喷雾法、划线法

③接种培养

④用消毒过的解剖针将所需的藻细胞连同一小块培养基取出，放入试管中培养。

⑤经过一定时间的培养，用显微镜检查是否达到分离目的。

24、目前有50mL藻液，需要在2个月内培养成10方的生产规模，需要哪些容器、药品、仪器、工具？各种容器如何消毒？培养流程包括几个方面，画出培养程序的示意图。（自己整吧，好累。。。。）

25、敌害生物对微藻培养的危害作用

①直接吞食：一些较大的敌害生物，如轮虫、游仆虫、尖鼻虫、变形虫等，可直接吞食藻细胞。

②通过分泌有害物质对微藻起抑制和毒害作用：量较少时，微藻生长缓慢；量较多时，会使藻细胞大量下沉死亡。

26、敌害生物污染的途径有哪些？应怎么防治？

（1）水：培养用水如果处理不彻底，难以除去或杀死水中的生物，会造成敌害生物的严重污染。

（2）空气：开放式培养及通气培养时，微生物通过空气污染经常发生，而且难以避免。（3）容器和工具：容器和工具消毒不彻底，容易引起敌害生物的污染。

（4）肥料：肥料不清洁，消毒不彻底，也容易引起敌害生物的污染。

（5）昆虫

（6）操作不严：工作人员的手在操作时未消毒或消毒不彻底，操作时不遵守操作规程等。防治敌害生物的措施：

（1）预防措施

①严格防止污染：工作人员要加强责任感。生产性培养中，防止污染的重点是在藻种培养这一级上。

②做好藻种的分离、培养和供应工作：不断补充新的无污染藻种来取代长期培养过程中已污染的藻种。

③保持培养微藻的生长优势和数量优势：微藻通过分泌较多的胞外产物对敌害生物起抑制作用。

（2）清除、抑制和杀灭敌害生物的方法

①使用过滤方法清除大型敌害生物：如轮虫，常用网孔小于60微米的筛绢过滤。

②使用药物抑制或杀灭敌害生物：青霉素和链霉素等。

③改变环境条件杀灭敌害生物：必须了解培养藻类和敌害生物对环境因子的适应范围。

27、简述轮虫的特征

①多细胞动物，个体较小，体长100-500μm

②体分头部、躯干部和足（尾部）三部分，头部和尾部都可缩入背甲内部，体形变化较大。

③内部构造比较复杂，具消化、排泄、生殖、神经等系统和器官。

28、简述轮虫大小和形态变化的原因

轮虫类是形态变异极大的动物，就是同一品系也有大小和形状的变化。水温变化、饵料的质和量、增殖密度等环境条件，是引起轮虫大小和形态变化的主要原因。

29、轮虫发育可分为哪几个阶段

可分为4个阶段：

①胚胎发育期：即卵的发育时期，指卵的产出到幼体的孵出所经历的时间。

②生殖前期：又称幼体阶段或胚后发育，指幼体孵出到其产出第一个卵所经历的时间。

③生殖期：指第一个卵产出到最后一个卵产出所经历的时间。

④生殖后期：又称衰老期，指从轮虫最后一个卵产出到其死亡所经历的时间。

30、图示轮虫生活史

31、简述褶皱臂尾轮虫的摄食特性

滤食性动物，借助轮盘部的纤毛带的颤动所引起的水流，滤食水中的颗粒物质。饵料大小宜在25μm以下，15μm以下最理想。

轮虫的饵料主要有3类：

微藻：各种大小适宜的微藻均可。普遍认为小球藻是轮虫培养的良好饵料。

酵母：面包酵母、啤酒酵母、油脂酵母等。酵母具有供应稳定、易于贮藏、投喂简便等优点，但酵母培养的轮虫存在营养缺陷，投喂前需要进行营养强化。

微生物团絮：即人工制成的有机碎屑。

32、简述轮虫休眠卵的孵化方法

①将轮虫卵放入盛有20-25ppt 海水的圆锥形容器中(0.2g/L)

②水温控制在25℃-30℃，连续光源（1000l x）。

③从底部充气, 开始时气量稍大，数小时后减小气量使轮虫卵在水中充分混合即可.

④轮虫卵在24-30h内孵化，每克轮虫卵可孵化出约2 百万个轮虫。

33、简述轮虫的培养流程

（1）选择合适的培养容器，使用前需进行化学消毒，小型培养容器可进行高温消毒。

种级培养：各种规格的三角烧瓶、细口瓶、玻璃缸、水族箱等。

生产性培养：玻璃缸水槽和水泥池。

（2）选择合适的培养用水

大量培养——砂滤水

种级培养——消毒水（减少原生动物的污染）

（3）培养条件和管理

①盐度：最适15-25。温度：最适25-28℃。

②饵料：微藻、酵母、微生物团絮

③充气：除在小型容器内进行轮虫种级培养外，轮虫的培养一般需要充气。

④水质管理：换水、清底、倒池

⑤生长情况的观察和检查

34、怎样判断轮虫生长的好坏

（1）肉眼观察

生长良好：游动活泼，分布均匀，密度增大。

生长不良：活动力弱，多沉于底层，或集成团块状浮于水面，密度不增加或减少。

（2）显微镜或解剖镜检查

生长良好：个体肥大，肠胃饱满，游动活泼。多数成体带有夏卵（1-4个）。

生长不良：死壳多，身体上附着污物，不活泼，不带卵或带冬卵，雄体出现等。

35、如何诱发轮虫产生休眠卵

生产中：诱发两性生殖形成休眠卵的方法，是以高的种群密度和饥饿刺激相结合的方法进行。先以常规方法培养轮虫，不采收，待轮虫数量达到高峰时，突然停止投饵和充气，池中饵料很快耗尽，即会出现两性生殖，产生大量休眠卵。

实验室：在一般情况下，任轮虫自然繁殖，当达到较大密度、饵料消耗光时，即出现大量休眠卵。

36、如何保存轮虫的休眠卵

①小规模培养：可连同水体稍加浓缩，直接放到冰箱（4℃）里常年保存。

②瓶装轮虫休眠卵：可放在冰箱的冷藏室或冷冻室保存。

③也可保留在原培养容器或原池中。原池水不能排去，也不能更换新水。若需要再培养时，把原池水排掉大部分，换入新鲜海水，并加入新鲜藻液，池中的休眠卵即孵化，而获得大量种轮虫。

37、轮虫主要的营养缺陷

①必需脂肪酸的比例，特别是DHA/EPA的比例，很难满足海水鱼幼体的营养需求。

②强化轮虫的HUFA含量不稳定，要及时投喂。

38、如何进行轮虫的营养强化

（1）蛋白质的营养强化①准备强化缸，用高锰酸钾或有效氯消毒后，加入25℃左右的过滤海水。

②用筛绢网将要强化的轮虫收集起来，冲洗后转移到强化缸中，轮虫密度为300-500个/毫升。

③按125mg/L强化水体的量称取强化剂，加少量水混匀后倒入强化缸，强化时间为3-4小时，强化过程中需不间断充气。

④强化完毕后，用筛绢网滤出轮虫，用海水充分洗涤，除去多余的强化剂，以减少对育苗水体的污染。

（2）脂类的营养强化——主要针对酵母培养的轮虫

1.用微藻对轮虫进行营养强化（常用微绿球藻、球等鞭金藻等）

2.酵母添加鱼油的直接强化方法，添加量为10%，

3.油脂乳化法：用高HUFA含量的乳化油进行强化。

4.用配合饵料进行强化

（3）轮虫的维生素C强化

以富含维生素C的微藻，如等鞭金藻、小球藻和微绿球藻进行强化。在用乳化油强化轮虫时，在其内加入水溶性维生素C

38、简述卤虫的形态特征

①卤虫的颜色与栖息水环境密切相关

②高盐水体或缺氧水体：红色

③低盐水体或富含溶解氧的水体：灰白色

④虫体(雌虫)较细长，全长1.0-1.5厘米。明显地分为头、胸、腹三部分，不具头胸甲。

⑤雄虫较小,一般体长0.7cm左右。头部短小，不分节，5对头肢。胸部11节，有11对胸肢。腹部由8节组成，不具附肢。

39、简述卤虫的繁殖习性

（1）卤虫的生殖类型

由种的特性决定，不受环境因子的影响而改变。

孤雌生殖卤虫：种的组成中没有雄虫或雄虫的比例极低，雌虫不需要与雄虫交配就可繁殖后代。

两性生殖卤虫：种的组成中有雌虫和雄虫之分，只有雌、雄虫交配后才能繁殖后代。（2）卤虫的生殖方式

与其生殖类型无关，受内、外界环境因子的影响，环境变化会引起卤虫生殖方式的改变。生殖方式：

卵胎生：子代自母体内产出时已孵化为小的无节幼体。

卵生：子代以卵的方式自母体内产出。夏卵和冬卵

40、卤虫的生态习性

①分布：世界性分布。我国卤虫资源主要集中在西北内陆盐湖和华北盐田

②盐度：适盐范围为10-242，最适盐度范围为30-50。耐高盐的特性是卤虫逃避敌害的唯一方法。

③温度：可忍受温度范围-3-42℃，因产地不同而有所差异，最适生长温度25-30℃。

④溶解氧和pH值：卤虫的耐低氧能力很强，可生活在DO为1mg/l的水中。孵化用水的pH值8-9为宜。

⑤食性：滤食性生物，对大小5～16微米的颗粒有较高的摄食率。在天然环境中主要以细菌、微藻和有机碎屑等为食。

⑥敌害：水鸟，某些昆虫或其幼虫(如半翅类、甲虫等)

41、简述卤虫冬卵的生物学特性

卤虫冬卵外层为一厚卵壳，卵壳内为处于原肠期的胚胎。卵壳分为三层: 从外到里分别为外壳（硬壳层）、外表皮（外表皮膜）、胚表皮。

42、简述卤虫冬卵的孵化条件

温度：25-30℃，恒温

盐度：20-30的海水。

pH：最适范围8~9 ，过低可用NaHCO3调节。

充气和溶解氧：连续充气以供氧和防止卤虫卵沉底堆积。

虫卵密度：一般为1-3克/升。

光照：连续光照，光强约2000 lx

43、试述卤虫冬卵的孵化流程

（1）准备工作：孵化容器、充气管、散气石、孵化用水的准备及消毒。具锥形底的玻璃钢桶作为孵化容器较好。

（2）卤虫卵的清洗、浸泡和消毒

①将卤虫卵装入150目筛绢袋中，在自来水中充分搓洗至水较清为止。

②淡水浸泡1h，使虫卵充分吸水。

③使用化学方法杀灭虫卵表面粘附的细菌

（3）卤虫卵的孵化（24～36h内可出现无节幼体。）

①将消毒的海水加入孵化桶中至额定水位。

②将经过消毒的卤虫卵，按照1-3g/L的密度放入孵化桶内。

③满足孵化所需的温度、光照、pH、连续充气等条件。

（4）当大多数卤虫卵孵出幼体后，应适时将无节幼体分离采收。

44、怎样对卤虫卵进行去壳？

卤虫卵壳的主要成分是脂蛋白和正铁血红素，去壳的原理就是利用次氯酸钠或次氯酸钙溶液氧化去除这些物质。

去壳步骤：

（1）卤虫卵的吸水（有利于去壳）

一般是在25℃淡水或海水中浸泡1～2小时。一般待虫卵变成圆球形即可。

（2）配制去壳溶液（现配现用）

常用的去壳溶液是次氯酸钠溶液、氢氧化钠和海水按一定比例配制而成的。

每克干虫卵需含有0.5g的有效氯的次氯酸钠或次氯酸钙，而去壳溶液的总体积按每克干

卵14ml的比例，配制后加入适量的pH稳定剂使pH稳定，如NaOH；

（3）去壳

将浸泡好的卤虫卵沥干后放入已配好的去壳液中并不断搅拌，颜色渐渐由咖啡色变为白色，最后变为橘红色，最好在5-15分钟内完成，时间过长会影响孵化率。去壳过程是一个氧化

作用，并产生气泡，要不停地测定其温度，可用冰块防止升温到40℃以上。

（4）清洗脱氯

①当在解剖镜下看不见咖啡色的卵壳时，即表示去壳完毕

②用孔径为120-130微米的筛绢收集上述已去壳的卤虫卵，用足量的自来水或海水充分冲洗，直到闻不出有氯气味为止。

③为了进一步除去残留的次氯酸钠，可将去壳卵浸入1-2%的硫代硫酸钠溶液中约1min中和残氯，然后进一步用自来水或海水冲洗。

④去壳卵经冲洗后，可以直接投喂，也可以孵化后投喂或放入-4℃冰箱中保存。

45、如何判断卤虫质量的优劣

（1）外观质量的判别：①好的卤虫卵一般为棕色或棕褐色，有光泽，无霉腥臭味

②泥沙含量较低。

③破壳卵、碎壳卵、空壳的比例较低。

④含水率在10%以下。

⑤卵的大小比较合适。

（2）孵化特性的判别

①孵化率（H%）每百粒卤虫卵（不包括空壳）能够孵化出的无节幼体的只数，以百分比表示。孵化率是衡量卤虫卵孵化性能最常用的指标。

②孵化效率（HE）每克卤虫卵能够孵化出的无节幼体的只数。

③孵化产量（HO）【反映卵质量的最佳量】：每克卤虫卵能够孵化出的无节幼体的总干重。

与孵化出第一个无节幼④孵化速度（HR）：孵化速度：孵化出90%无节幼体所需的时间T

90

的差值。

体所需的时间T

46、简述卤虫的应用

（1）卤虫无节幼体：可作为甲壳类、鱼类育苗的饵料。应使用刚刚孵化的无节幼体，营养价值较高。

（2）卤虫成体：

①可作为鱼、虾成体的饵料。

②鲜活卤虫作为人工配合饲料的成分，有增味作用，可作为诱食剂。

③深加工后制成卤虫干粉或卤虫虾片，作对虾苗种培育过程中的人工饵料。

④利用卤虫的无选择性滤食，可将卤虫用作某些药物或营养物质的生物载体或生物包囊，对养殖对象进行定向强化。

47、目前枝角类培养的种类主要有哪些？

淡水：蚤状溞、大型溞、透明溞、多刺裸腹溞等。

海水：鸟喙尖头溞

咸水：蒙古裸腹溞

48、简述枝角类的分类地位和形态特征

（1）分类地位

节肢动物门/甲壳纲/鳃足亚纲/枝角目（Cladocera）。

（2）形态特征

①体短，侧面观呈卵圆形，多数种类体长2-3mm。

②身体左右侧扁，分为头部和躯干部（胸部和腹部）。

③头部：触角2对，第一触角小，第二触角发达，双肢型，为主要的游泳器官。

④躯干部通常完全包被在壳瓣内，由胸部和腹部合成，胸部有附肢，腹部无附肢。

①雌雄异体，一般雌性较大，雄性较小，淡水枝角类（如蚤状溞）中有时出现雌雄同体。个别枝角类有雄性变雌性的性反转现象。

②包括两个相互交替的世代，即孤雌生殖世代和两性生殖世代。在淡水中环境变化大，两性生殖世代在1年中出现的次数多。

③孤雌生殖是枝角类大量繁殖的主要方式，在环境条件适宜时进行。卵胎生，产生的卵称为夏卵。

④在不良环境下产生非混交雌体，进行两性生殖，非混交雌体会产生两种不同的卵，一种孵化为两性生殖雌溞，另一种孵化为雄溞。两性生殖产生休眠卵。

50、简述枝角类营养价值及其应用

（1）营养价值

①蛋白质含量高且氨基酸种类齐全②维生素和矿物质含量丰富，营养组成合理，易于水产动物消化吸收，利用率高③投喂不同的食物对枝角类的营养组成有一定影响。以酵母为食物培养的枝角类，缺乏HUFA，投喂前必须进行营养强化。

（2）应用

①作为毒理实验材料②作为水产动物幼体（虾蟹幼体、鱼类幼体）饵料③作为饲料的动物蛋白源和诱食剂，代替鱼粉。④净化水质（摄食大量的细菌和有机碎屑）

51、简述桡足类在水产养殖方面的应用

（1）桡足类幼体配合轮虫投喂能提高海水鱼幼体的成活率和促进生长

原因：

①桡足类是鱼虾蟹的天然饵料，摄食桡足类无节幼体能刺激或诱发其开口阶段的摄食反应。

②海水幼鱼对其他生物饵料（轮虫）的利用率比较低。

③桡足类的营养与其他生物饵料相比，营养价值高，能满足鱼虾幼体的生长需求。

（2）在海水鱼育苗中作为生物饵料应用的桡足类种类：哲水蚤目（Calanoida）和猛水蚤目（Harpacticoida）

52、简述桡足类的分类地位和形态特征

分类地位：节肢动物门/甲壳纲/桡足亚纲（Copepoda）

形态特征：

①体形、体色多样，取决于生活环境和体油滴颜色。

②体狭长，分节明显，16-17体节，但有愈合，一般不超过11节。可分为前体部和后体部，两者间具1活动关节。

③5胸足，前4对构造相同，双肢型游泳器官。第5对胸足常有不同程度的改变，两性有异。

④腹部无附肢，末端具一对尾叉，其后具数根羽状刚毛。

①雌雄异体异形，一般进行两性生殖。

②日本虎斑猛水蚤具性逆转，高温雌性多，低温雄性多。

③具3种产卵形式：

自由产卵于海水中——大多数哲水蚤；

带卵囊：由输卵管分泌物把卵积聚成大小、形状和位置不同的卵囊。粘性卵：粘在胸足上或身体上（如拟哲水蚤）

54、桡足类发育时有哪3个敏感期？

①受精卵发育至无节幼体。

②无节幼体Ⅲ期变态为Ⅳ期。

③无节幼体Ⅵ期变态为桡足幼体

56、桡足类的摄食方式分为哪3种：

滤食方式:主要是哲水蚤的种类。

碎屑食性方式:主要是猛水蚤的种类。

捕食方式:主要包括一部分猛水蚤和剑水蚤的种类。

57、哲水蚤类和猛水蚤类作为作为鱼虾幼体的饵料，各自有哪些优缺点？

（1）哲水蚤类的优缺点：

①无节幼体个体较小，完全营浮游生活，适于鱼虾幼体摄取，特别是开口阶段。

②哲水蚤类的培养只能达到较低的密度，成体一般在100-200个/L。

③在脂类代谢方面，特别是将C18:3n3脂肪酸转换成长链不饱和脂肪酸n3HUFA的能力非常有限，需要从饵料的必需脂肪酸中获取，以维持其繁殖和生长。

（2）猛水蚤类的优缺点：

①可以培养到较高的密度。

②有较强的将C18:3n3脂肪酸转换成长链不饱和脂肪酸n3HUFA的能力。

③营底栖生活，限制了鱼虾幼体的摄取。

58、猛水蚤类的哪些特点使它比较适合于集约化的大量培养

①适应力强。

②饵料幅宽，以活体、各种有机碎屑和粉料为饵料。

③生活史短，生殖周期短，生殖力强。

④可高密度培养。

⑤底栖，培养时密度与水体的的表面积相关，而非容积。

⑥无节幼体阶段以浮游生物为食。

⑦作为其他培养水体的清道夫，有利于改善水质。

59、简述猛水蚤的集约化培养方法

（1）饵料的选择

①沉积水底的藻类和底部细菌的结合，是培养猛水蚤类较好的饵料。

②要尽可能使用多种饵料混合投喂，以确保饵料的营养全面。

（2）水质管理

①除水质恶化，水体氨氮水平过高外，不需要在培养过程中频繁换水。

②是实验室培养或保种不需要充气。

③循环水培养若每天循环水交换量超过1次以上，也不需要充气。

（3）光照、温度和盐度

①光照周期12L:12D比较合适猛水蚤的繁殖。

②温度控制在24～26℃。

③保持盐度30以上更好（低盐度适应性较差）。

（4）培养水箱的规格，形状和培养密度

①容器以盆式锅底形为好。

②在水体中还可放入小球形体，以增加表面积。

③培养密度以20-70个/ml为宜。