检测方法

妆品微生物检验方法hopebiol,2006-05-23 15:21:51

微生物检验方法

Methods of Microbiological Examination for Cosmetics

一、总则

1范围

本规范规定了化妆品微生物学检验总则。

本规范适用于化妆品样品的采集、保存、供检样品制备。

2 仪器和设备

天平、高压灭菌器、振荡器、三角瓶、玻璃珠、玻璃棒、刻度吸管、研钵、均质器、恒温水浴箱、采样工具。

3 培养基和试剂

生理盐水、SCDLP液体培养基、灭菌液体十拉、灭菌吐温80。

4 样品的采集及注意事项

4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小、随机抽取相应数量的包装单位。

4.2 供检样品，应严格保持原有的包装状态，进口产品应为市售包装。

4.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。

4.4 若只有一份样品而同时需作多种分析，应先做微生物检验。

4.5 在检验过程中，从打开包装到全部检验结束，全部操作应在无菌室内进行。

5 供检样品的制备

5.1 液体样品

5.2 膏、霜、乳剂半固体状样品

5.3 固体样品

二、菌落总数

1范围

本规范规定了化妆品中菌落总数的检验方法。

本规范适用于化妆品中菌落总数的测定。

2 定义

菌落总数（aerobic bacterial count）是指化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后，1g（1mL）检样中所含菌落的总数。

测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生学总评价的综合依据。

3 仪器设备

4 培养基和试剂

5 操作步骤

6 菌落计数法

7 菌落计数及报告方法

表1 菌落计数结果及报告方式

三、粪大肠菌群

1范围

本规范规定了化妆品中粪大肠菌群的检验方法。

本规范适用于化妆品中粪大肠菌群的检验。

2 定义

粪大肠菌群（fecal coliforms ）系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在44.5℃培养24h~48h能发酵乳糖产酸并产气。

该菌来自人和温血动物粪便，是重要的卫生指示菌。

3 仪器

4 培养基和试剂

4.1 双倍乳糖胆盐培养基

4.2 伊红美兰琼脂

4.3 蛋白胨水

4.4 靛基质试剂

4.5 革兰氏染色液

5 操作步骤

6 检验结果报告

根据发酵乳糖产酸产气，平板上有典型菌落，并经证实为革兰氏阴性短杆菌，靛基质试验阳性，则可报告被检样品中检出粪大肠菌群。

四、绿脓杆菌

1范围

本规范规定了化妆品中绿脓杆菌的检验方法。

本规范适用于化妆品中绿脓杆菌的检验。

2 定义

绿脓杆菌（pseudomonas aeruginosa）属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。

该菌对人有致病力，可使伤处化脓，引起败血症等。

3 仪器

4 培养基和试剂

4.1 SCDLP液体培养基

4.2 十六烷基三甲基溴化铵培养基

4.3 乙酰胺培养基

4.4 绿脓菌素测定用培养基

4.5 明胶培养基

4.6 硝酸盐蛋白胨水培养基

4.7 普通琼脂斜面培养基

5 操作步骤

6 检验结果报告

被检样品经增菌分离培养后，在分离平板上有典型或可疑菌落生长，经证实为革兰氏阴性杆

菌，氧化酶及绿脓菌素试验皆为阳性者，即可报告被检样品中检出绿脓杆菌；如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出绿脓杆菌。

五、金黄色葡萄球菌

1范围

本规范规定了化妆品中金黄色葡萄球菌的检验方法。

本规范适用于化妆品中金黄色葡萄球菌的检验。

2 定义

金黄色葡萄球菌（staphylococcus aureus ）为革兰氏阴性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞，无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。

该菌是葡萄球菌中对人类致病力最强的一种，能引起人体局部化脓性病灶，严重时可导致败血症。

3 仪器和设备

4 培养基和试剂

4.1 SCDLP液体培养基

4.2 Baird Parker氏培养基

4.3 血琼脂培养基

4.4 甘露醇发酵培养基

4.5 兔（人）血浆制备

4.6 无菌液体石蜡

5 操作步骤

6 检验结果报告

经增菌培养后，在分离平板上有典型或可疑菌落生长，经染色镜检，证明为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品中检出金黄色葡萄球菌。

六、霉菌和酵母菌

1范围

本规范规定了化妆品中霉菌和酵母菌数的检验方法。

本规范适用于化妆品中霉菌和酵母菌的总数测定。

2 定义

霉菌和酵母菌的总数是指化妆品检样在一定条件培养后，1g或1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌菌落总数，籍以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。

3 仪器和设备

4 培养基和试剂

4.1 生理盐水

4.2 虎红培养基

5 操作步骤

碰撞检测

原文地址：https://www.360docs.net/doc/6c16657017.html,/Program/Visual/3D/3DCollision.mht 碰撞 1.碰撞检测和响应碰撞在游戏中运用的是非常广泛的，运用理论实现的碰撞，再加上一些小技巧，可以让碰撞检测做得非常精确，效率也非常高。从而增加游戏的功能和可玩性。 2D碰撞检测 2D的碰撞检测已经非常稳定，可以在许多著作和论文中查询到。3D的碰撞还没有找到最好的方法，现在使用的大多数方法都是建立在2D基础上的。碰撞检测碰撞的检测不仅仅是运用在游戏中，事实上，一开始的时候是运用在模拟和机器人技术上的。这些工业上的碰撞检测要求非常高，而碰撞以后的响应也是需要符合现实生活的，是需要符合人类常规认识的。游戏中的碰撞有些许的不一样，况且，更重要的，我们制作的东西充其量是商业级别，还不需要接触到纷繁复杂的数学公式。最理想的碰撞，我想莫过于上图，完全按照多边形的外形和运行路径规划一个范围，在这个范围当中寻找会产生阻挡的物体，不管是什么物体，产生阻挡以后，我们运动的物体都必须在那个位置产生一个碰撞的事件。最美好的想法总是在实现上有一些困难，事实上我们可以这么做，但是效率却是非常非常低下的，游戏中，甚至于工业中无法忍受这种速度，所以我们改用其它的方法来实现。最简单的方法如上图，我们寻找物体的中心点，然后用这个中心点来画一个圆，如果是一个3D的物体，那么我们要画的就是一个球体。在检测物体碰撞的时候，我们只要检测两个物体的半径相加是否大于这两个物体圆心的实际距离。这个算法是最简单的一种，现在还在用，但是不是用来做精确的碰撞检测，而是用来提

高效率的模糊碰撞检测查询，到了这个范围以后，再进行更加精密的碰撞检测。一种比较精密的碰撞检测查询就是继续这种画圆的思路，然后把物体细分，对于物体的每个部件继续画圆，然后再继续进行碰撞检测，直到系统规定的，可以容忍的误差范围以后才触发碰撞事件，进行碰撞的一些操作。有没有更加简单的方法呢？2D游戏中有许多图片都是方方正正的，所以我们不必把碰撞的范围画成一个圆的，而是画成一个方的。这个正方形，或者说是一个四边形和坐标轴是对齐的，所以运用数学上的一些方法，比如距离计算等还是比较方便的。这个检测方法就叫AABBs（Axis-aligned Bounding Boxes）碰撞检测，游戏中已经运用的非常广泛了，因为其速度快，效率高，计算起来非常方便，精确度也是可以忍受的。做到这一步，许多游戏的需求都已经满足了。但是，总是有人希望近一步优化，而且方法也是非常陈旧的：继续对物体的各个部分进行细分，对每个部件做AABB的矩形，那这个优化以后的系统就叫做OBB系统。虽然说这个优化以后的系统也不错，但是，许多它可以运用到的地方，别人却不爱使用它，这是后面会继续介绍的地方。 John Carmack不知道看的哪本书，他早在DOOM中已经使用了BSP系统（二分空间分割），再加上一些小技巧，他的碰撞做得就非常好了，再加上他发明的castray算法，DOOM已经不存在碰撞的问题，解决了这样的关键技术，我想他不再需要在什么地方分心了，只要继续研究渲染引擎就可以了。（Windows游戏编程大师技巧P392～P393介绍）（凸多边形，多边形退化，左手定律）SAT系统非常复杂，是SHT（separating hyperplane theorem，分离超平面理论）的一种特殊情况。这个理论阐述的就是两个不相关的曲面，是否能够被一个超平面所分割开来，所谓分割开来的意思就是一个曲面贴在平面的一边，而另一个曲面贴在平面的另一边。我理解的就是有点像相切的意思。SAT是SHT的特殊情况，所指的就是两个曲面都是一些多边形，而那个超平面也是一个多边形，这个超平面的多边形可以在场景中的多边形列表中找到，而超平面可能就是某个多边形的表面，很巧的就是，这个表面的法线和两个曲面的切面是相对应的。接下来的证明，我想是非常复杂的事情，希望今后能够找到源代码直接运用上去。而我们现在讲究的快速开发，我想AABB就足以满足了。 3D碰撞检测 3D的检测就没有什么很标准的理论了，都建立在2D的基础上，我们可以沿用AABB或者OBB，或者先用球体做粗略的检测，然后用AABB和OBB作精细的检测。BSP技术不流行，但是效率不错。微软提供了D3DIntersect函数让大家使用，方便了许多，但是和通常一样，当物体多了以后就不好用了，明显的就是速度慢许多。碰撞反应碰撞以后我们需要做一些反应，比如说产生反冲力让我们反弹出去，或者停下来，或者让阻挡我们的物体飞出去，或者穿墙，碰撞最讨厌的就是穿越，本来就不合逻辑，查阅了那么多资料以后，从来没有看到过需要穿越的碰撞，有摩擦力是另外一回事。首先看看弹性碰撞。弹性碰撞就是我们初中物理中说的动量守恒。物体在碰撞前后的动量守恒，没有任何能量损失。这样的碰撞运用于打砖块的游戏中。引入质量的话，有的物体会是有一定的质量，这些物体通常来说是需要在碰撞以后进行另外一个方向的运动的，另外一些物体是设定为质量无限大的，这些物体通常是碰撞墙壁。当物体碰到质量非常大的物体，默认为碰到了一个弹性物体，其速度会改变，但是能量不会受到损失。一般在代码上的做法就是在速度向量上加上一个负号。绝对的弹性碰撞是很少有的，大多数情况下我们运用的还是非弹性碰撞。我们现在玩的大多数游戏都用的是很接近现实的非弹性碰撞，例如Pain-Killer中的那把吸力枪，它弹出去的子弹吸附到NPC身上时的碰撞响应就是非弹性碰撞；那把残忍的分尸刀把墙打碎的初始算法就是一个非弹性碰撞，其后使用的刚体力学就是先建立在这个算法上的。那么，是的，如果需要非弹性碰撞，我们需要介入摩擦力这个因素，而我们也无法简单使用动量守恒这个公式。我们可以采取比较简单的方法，假设摩擦系数μ非常大，那么只要物体接触，并且拥有一个加速度，就可以产生一个无穷大的摩擦力，造成物体停止的状态。基于别人的引擎写出一个让自己满意的碰撞是不容易的，那么如果自己建立一个碰撞系

细菌鉴定及检测方法

细菌鉴定及检测方法一、启动条件 1、目的样出现坏包，若批次相同，取表现性状相同的任意一包进行细菌初步鉴定。若批次不同则分别进行细菌初步鉴定。 2、随机样出现坏包，必须进行细菌初步鉴定。二、胀包 1、记录批次。 2、及时用72%的酒精对样品的外表进行消毒，尽量不损坏封合待以后检查。在超净台内以无菌操作剪开包装，再避开横竖封处剪开一个圆形或三角形。3、对样品进行微生物划线培养。 3.1采用普通营养琼脂培养基做细菌的划线培养36±1℃、48小时。 3.2分别吸取10毫升样品到两个无菌的小试管中，，分别在80和100℃的水浴中加热10分钟，冷却用营养琼脂分别做芽孢（36±1℃、72小时）和耐热芽孢（55±1℃、72小时）的划线培养。 3.3采用普通营养琼脂培养基或快速检测培养基做嗜冷菌/低温菌的划线培养（4—6℃ 10天或21±0.5℃ 25小时）。 3.4 必须用高盐察氏或虎红琼脂培养基做霉菌和酵母菌的划线培养（25—28℃ 5--7天） 4、对样品做感官检测。 5、用PH计检测样品的PH值。 6、将样品倒掉，进行包装密封性检查，并进行记录。 7、记录菌落特征。 8、选区不同形态的单一菌落进行坚定。 8.1 革兰氏阴性菌和阳性菌的鉴定： 8.1.1涂片、革兰氏染色、镜检。或结晶紫染色、镜检、氢氧化钾拉丝试验。 8.1.2革兰氏染色、结晶紫染色方法见《微生物检测》 8.1.3氢氧化钾拉丝试验在微生物载物片上滴一滴3%氢氧化钾，用接种针从培养皿上的

菌落中挑取微生物，放在氢氧化钾溶液中用力搅拌。7—10秒后，抬起针头，观察针头和玻片之间是否有丝状物，如果15—20 秒后二者之间无丝状物，停止搅拌。判定：无丝状物阳性；有丝状物阴性。 8.2 过氧化氢酶试验（或过氧化氢酶试纸）（产气试验）：试剂：10%过氧化氢溶液步骤：在微生物载物片上滴一滴10%过氧化氢，用接种针从培养皿上的菌落中挑取微生物，放在过氧化氢溶液中看是否有气体产生。判定：产气阳性；不产气阴性。 8.3氧化酶试验试剂：含1%四甲基双噻二胺和99%的乙醇溶液。步骤：用上述试剂将一张滤纸浸透（或直接采用氧化酶试纸条），然后进行细菌培养物的涂片试验。判定：30秒内使显色物质变为深蓝色阳性，不变色阴性。三、酸包 1、发现酸包后，及时将料液快速转入无菌瓶中。 2、记录批次 3、其它项目检测同胀包。

常见的微生物检测方法

摘要：微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常见的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。概述：一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其它生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，一般情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长一般指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同

时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和她们的生长抑制紧密相关。因此有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，因此测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，能够从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。生长量测定法体积测量法：又称测菌丝浓度法。经过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。称干重法：

产碱性蛋白酶菌株的筛选_分子鉴定及其酶学性质的初步研究

碱性蛋白酶是在碱性范围内水解蛋白质肽键的酶类，一般最适pH值为9~11，属内肽酶中的丝氨酸蛋白水解酶类，主要用于加酶洗涤剂中，在制革、纺织、医药、化妆品等的生产中也有广泛的应用[1]。目前，全世界所生产的酶中碱性蛋白酶占到总产量的30%左右，显示出良好的使用性能和经济价值。碱性蛋白酶广泛存在于细菌、放线菌和真菌中，其中以芽孢杆菌属的碱性蛋白酶研究的最深入。本实验从山东东营的盐碱地采集土样，从中分离出若干株产碱性蛋白酶的菌株，并对其进行16S rRNA分子鉴定以及酶学性质的初步研究，以期为工业应用提供基础理论依据。 1材料与方法 1.1土样来源山东东营盐碱地中采集土样。 1.2培养基富集培养基：牛肉膏0.5g、蛋白胨1g、NaCl0.5g、水产碱性蛋白酶菌株的筛选、分子鉴定及其酶学性质的初步研究成堃，路福平*，李玉，王盛楠，王建玲（天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院，天津300457）摘要：从盐碱地土壤中筛选到5株产碱性蛋白酶的细菌，分别命名为TCCC11001、TCCC11004、TCCC11013、TCCC11024、TC-CC11029。将其革兰氏染色、16S rRNA鉴定为Bacillus subtilis、Bacillus alcalophilus、Bacillus pumilus、Bacillus subtilis、Bacillus licheni-formis。将菌株接入发酵培养基中，37℃、180r/min摇床培养48h，发酵液进行不同处理后Folin法测定酶活。结果发现：TCCC11001、TCCC11029的最适作用温度为40℃，TCCC11004、TCCC11013、TCCC11024的最适作用温度为50℃；TCCC11001、TCCC11004、TC-CC11013、TCCC11024、TCCC11029的最适作用pH值分别为10.0、11.0、10.0、9.0、11.0；TCCC11004、TCCC11013于40℃保温2h，残留酶活为最高酶活70%；TCCC11001、TCCC11024、TCCC11029的残留酶活＜50%。DFP、PMSF完全抑制酶的活性，表明5种蛋白酶是典型的丝氨酸蛋白酶。关键词：碱性蛋白酶；芽孢杆菌；分子鉴定；热稳定性中图分类号：Q93-331；Q55文献标识码：A文章编号：0254－5071（2009）02-0033-04 Screening,molecular classification of alkaline protease-producing strains and enzyme characteristics CHENG Kun,LU Fuping*,LI Yu,WANG Shengnan,WANG Jianling (Tianjin Key Lab of Industrial Microbiology,College of Bioengineering,Tianjin University of Science and Technology,Tianjin300457,China) Abstract：5strains which could produce alkaline protease were isolated from soil and named TCCC11001,TCCC11004,TCCC11013,TCCC11024 and TCCC11029.They were regarded as Bacillus subtilis,Bacillus alcalophilus,Bacillus pumilus,Bacillus subtilis,Bacillus licheniformis after deter-mination of16s rRNA and Gram staining.Enzyme activities were determined after incubating these strains at37℃,180r/min for48h.The results showed the optimal temperature of TCCC11001and TCCC11029was40℃,and for the others,the temperature was50℃;the optimal pH of these five strains were10.0,11.0,10.0,9.0and11.0respectively.Residual enzyme activities of TCCC11004and TCCC11013were as much as70%com-pared to the maximum activity when incubated at40℃for2h,and residual enzyme activities of TCCC11001,TCCC11024,TCCC11029were less than50%.The enzyme activity could be completely inhibited by DFP and PMSF,and it showed that these five proteases were typical serine protease. Key words:alkaline protease;Bacillus;molecular determination;thermostability 收稿日期：2008-10-23 基金项目：国家高技术研究发展计划（863计划）资助项目（2007AA02Z212）；国家科技基础条件平台项目（2005DKA21204-10）作者简介：成堃（1982-），女，山东济南人，博士研究生，研究方向为发酵工程；路福平*，教授，通讯作者。 [13]TAKAHASHI M,SEKINE T,UBA N,et al.The production of recom- binant APRP,an alkaline protease derived from Bacillus pumilus TY-O-67,by in vitro refolding of Pro-enzyme Fixed on a solid surface[J].J Biochem，2004，136（4）：549-556. [14]WONG S L,CHESTER W.The subtilisin E gene of Bacillus subtilis is transcribed from aσ38Promoter in vivo[J].Proc Natl Acad Sci USA，1984，81：1184-1188. [15]CHANG C T,FAN M H,KUO F C.Potent fibrinolytic enzyme from a mutant of Bacillus subtilis IMR-NK1[J].J Agr Food Chem，2000，48（8）：3210-3216.[16]SEO,J H,LEE S P.Production of Fibrinolytic enzyme from soybean Grits fermented by Bacillus firmus NA-1[J].J Med Food，2004，7（4）：442-449. [17]KIM H K,KIM G T,KIM D K,et al.Purification and characterization of a novel fibrinolytic enzyme from Bacillus sp.KA38originated from fermented fish[J].J Ferment Bioeng，1997，84：307-312. [18]PENG Y,HUANG Q,ZHANG R H,et al.Purification and characteriza- tion of a fibrinolytic enzyme produced by Bacillus amyloliquefaciens DC-4screened from dou-chi,a traditional Chinese soybean food[J]. Comp Biochem Phy B，2003，134：45-52. !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

钯碳含量检测方法

钯炭的含量检测方法稀王水溶液：盐酸∶硝酸∶水= 3∶1∶1 取供试品约5g置于250ml烧杯中，加入50ml盐酸溶液（1∶1）煮沸10分钟清洗其表面。再用水煮沸洗涤三次。将表面处理好的供试品转移到称量瓶内，放入干燥箱，110℃干燥1小时，取出放入干燥器中，放冷至室温。精密称取处理好的供试品1.0g，置于250ml烧杯中，加入20ml稀王水，置于带调压器的电炉上加热至近沸，直至供试品全部溶解，再继续加热，使溶液体积浓缩至约5ml，然后分三次加入浓盐酸（每次4ml），分别蒸至近干，加入14ml 10%氯化钠溶液，蒸至近干，加入200ml 7%（V/V）盐酸溶液，在搅拌下缓慢加入20ml 1%丁二酮肟乙醇溶液。待沉淀完全后，用已在110℃干燥至恒重的四号石英砂芯漏斗抽滤，用7%（V/V）盐酸溶液洗涤至滤液无色，再用水洗涤至滤液呈中性。将石英砂芯漏斗抽干后，置干燥箱内110℃干燥1小时。取出放入干燥器冷却0.5小时称重，直至恒重。 Pd含量按下式计算： Pd% = [（W1－W0）×0.3161/W]×100% W1为沉淀与四号石英砂芯漏斗恒重的重量，g； W0为四号石英砂芯漏斗恒重的重量，g； W为供试品重，g； 0.3161为丁二酮肟钯对钯的换算系数。允许差：两次平行测定结果之差应不大于0.1%，取其算术平均值为测定结果。

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全球汽车安全碰撞实验详细介绍及安全常识

（一）车型碰撞安全指标查询系统 1. 欧洲新车安全评鉴协会Euro-NCAP （1）NCAP新车碰撞简介衡量新车安全性能好不好，不能由厂家自己说了算，要经过试验验证。其中“汽车碰撞安全性能试验”就是主要项目之一，也是人们最关注的试验项目，因为车祸大部分都是碰撞，这个测试结果基本反映了汽车对乘员和行人的安全程度。美国、欧洲和日本都制定了相关的乘员碰撞保护安全法规。例如美国国家公路交通安全管理局(NHTSA)颁布的FMVSS208《乘员碰撞保护》法规、欧盟重新修订的《正面碰撞乘员保护》法规、日本运输省颁布的TRAIS11-4-30《正面碰撞的安全基准》法规等，定期对本国生产及进口新车进行正面碰撞或侧面碰撞进行安全性试验，以检查汽车内驾驶员及乘员在碰撞时的受伤害程度。但是，这些安全法规仅是这些国家或区域国家政府管理部门对汽车产品安全性的最低要求，而汽车生产企业追求的却是行业上公认的NCAP(New Car Assessment Program)，中文称为新车评估计划。它是一个行业性组织，定期将企业送来或者市场上出现的新车进行碰撞试验，它规定的实车碰撞速度往往比政府制定的安全法规的碰撞速度要高，从而在更严重的碰撞环境下评价车内乘员的伤害程度，根据头部、胸部、腿部等主要部位的伤害程度将

试验车的安全性进行分级。尽管NCAP不是政府强制性实验，但由于它代表性广泛，标准科学，试验严格，组织公正，直接面向消费者公布试验结果，通过碰撞测试向消费者表示什么汽车是安全的或是最安全的。因此各大汽车企业都非常重视NCAP，把它作为汽车开发的重要评估依据，在NCAP试验取得良好成绩的厂家，也将试验结果作为产品推广的宣传内容。 NCAP最早出现在美国，随后欧洲和日本等国都制订了相关的NCAP。其中欧洲的NCAP(European New Car Assessment Program)最具影响力和代表性。它由欧洲各国汽车联合会、政府机关、消费者权益组识、汽车俱乐部等组织组成，由国际汽车联合会(FIA)牵头。欧洲NCAP不依附于任何汽车生产企业，所需经费由欧盟提供，不定期对已上市的新车和进口车进行碰撞试验，每年都组织几次。欧洲NCAP的碰撞测试有两个基本项目，即正面和侧面碰撞。正面碰撞速度为64公里/小时，侧面碰撞速度为50公里/小时。在车辆碰撞时邀请生产企业直接参与以示公正性，还允许其产品有两次碰撞机会，当厂家获知初次碰撞结果不理想时，会对产品进行改进或安装安全装置，再进行第二次碰撞，以获得最好的成绩为准。 NCAP的碰撞测试成绩通过星级(★)表示，共有五个星级，星级越高表示该车的碰撞安全性能越好，达到33分为满分。? （2）欧洲NCAP碰撞测试项目详解 ①NCAP正面碰撞测试标准详解

医学检验--常用血清酶和同工酶测定的临床意义

常用血清酶和同工酶测定的临床意义 1.连续监测法测定血清肌酸激酶（CK） 2.连续监测法测定乳酸脱氢酶（LD）总活性 3.连续监测法测定血清（天）门冬氨酸氨基转移酶（AST） 4.连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT） 5.连续监测法测定血清碱性磷酸酶（ALP） 6.连续监测法测定血清中谷氨酰基转移酶（GGT） 7.淀粉酶（AMY）测定 8.比色法测定酸性磷酸酶（ACP）连续监测法测定血清肌酸激酶（CK） CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体。正常人体中有三种同工酶，即CK-BB（CK1）、CK-MB（CK2）和CK-MM（CK3）。 CK作用后生成的磷酸肌酸含高能磷酸键，是肌肉收缩时能量的直接来源。 CK需要镁离子激活。 1.原理酶偶联反应测定CK活性浓度。在340nm监测NAD（P）H的生成量，可计算出CK的活性浓度。 2.生理变异年龄、性别和种族对CK含量都有一定影响。 CK含量和肌肉运动密切相关。 3.参考值男性38～174U/L（37℃）；女性26～140U/L（37℃）。 4.临床意义升高：（1）心肌梗死。心肌梗死发生后2～4h此酶即开始升高，12～48h达最高峰值，可高达正常上限的10～12倍，在2～4天降至正常水平。（2）病毒性心肌炎。（3）肌营养不良症、皮肌炎、骨骼肌损伤。（4）脑血管意外、脑膜炎、甲状腺功能低下等疾病及一些非疾病因素如剧烈运动、各种插管及手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素。降低：甲亢，长久卧床者总CK（主要为CK-MM）可下降。 5.CK同工酶检测原理及临床意义 CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体，正常人体中有三种同工酶：

Uni ty 中的碰撞检测方法

Unity 中的碰撞检测方法碰撞检测技术是游戏和虚拟现实中最核心、最基本的技术。碰撞检测技术在游戏和虚拟现实场景中非常重要，它保证了真实世界的正确虚拟化。例如对于角色的控制欲规划，碰撞检测可以帮助角色避开场景中出现的障碍物。为使用户在虚拟场景中能够感受到自己确实在场景中，就需要能够实时地检测角色与障碍物之间的碰撞检测，并及时作出响应。然而在一个场景中，可能存在许多种不同类型的碰撞，这就要求有不同的碰撞检测方法来适应各种类型的碰撞。目前，在虚拟现实技术中出现了很多种碰撞检测方法，其目的无非有３个：检测模型之间是否发生碰撞；预测即将发生的碰撞；动态获取模型之间的距离。在Unity 中主要有３种碰撞检测方法与上面的３个模型对应，分别是基本碰撞检测、触发器碰撞检测和光线投射。无论是PC 端还是移动应用端，碰撞检测技术始终是程序开发的难点，甚至可以用碰撞检测技术作为衡量引擎是否完善的标准。好的碰撞检测技术要求对象在场景中可以平滑移动，同时还要满足精确性和稳定性，防止对象在特殊情况下发生违背常规的状况。例如，人物无缘无故被卡住不能前进，或者人物穿越了障碍物。目前，引擎Unity ，其功能非常强大，集成了强大的碰撞检测功能，其中一个显著特点就是跨平台游戏开发。碰撞检测方法碰撞检测定义碰撞的发生无非是检测两个物体对象之间的物理接触，在Unity 中是使用碰撞器组件覆盖在物体表面，用来负责与其它物体之间的碰撞。这种从其它碰撞器检测和取得碰撞信息的方法称为碰撞检测。Unity 碰撞检测方法分类在Unity 中，可以检测两个物体之间的碰撞，也可以检测特定碰撞器之间的碰撞，甚至可以使用光线投射预先检测碰撞。本文以一个角色与３D 物体的碰撞为例说明这３种碰撞方法的不同。基本碰撞检测在Unity 中，要实现碰撞检测，就必须给每个对象添加相应的碰撞器。默认情况下，Unity 会自动将碰撞器添加到创建的对象中，当然也可以自己添加碰撞器。判断角色是否和其它物体发生碰撞，可以使用Unity的角色控制碰撞器。Unity 专门有一个方法OnControllerColliderHit用来检测角色控制器和其它物体之间的碰撞，只需要将包含OnControllerColliderHit 的脚本绑定到角色控制器即可。 function OnControllerColliderHit （hit ： ControllerColliderHit）｛／／碰撞发生后的动作｝其中，hit 是一个ControllerColliderHit 类型变量，包含着碰撞发生时所有产生的信息。通过hit 变量，可以获知角色和哪一个物体发生了碰撞。通过记录碰撞时所产生的信息，角色可以做出真实的反应。

检测鉴定方案

检测鉴定方案辛集市书香园小区4#楼检测鉴定方案一、工程概况：辛集市书香园小区4#楼位于辛集市教育大道东侧，辛集市一中北邻。该楼为六层砖混结构，一层为储藏间，二至六层为住宅。工程于2006年4月份开工建设，2007年11月份竣工验收，建筑面积平方米。该工程由辛集市博远房地产开发有限公司开发，河北天艺建筑设计有限公司设计，石家庄中天监理公司监理，辛集市天久住宅建设有限责任公司第七施工处施工。现该4#楼已入住后多户住宅发现墙体裂缝，为了解该楼建筑工程质量状况，辛集市博远房地产开发有限公司委托河北省建筑工程质量检测中心对该楼工程质量现状进行检测鉴定。二、依据标准 1、委托书 2、《民用建筑可靠性鉴定标准》(GB50292-1999) 3、《建筑结构检测技术标准》(GB50344-2004) 4、《砌体工程现场检测技术标准》(GB/T50315-2000) 5、《建筑结构荷载规范》(GB50009-2001) 6、《砌体结构设计规范》(GB50003-2001)

7、《建筑抗震设计规范》(GB50011-2001) 8、相关技术资料三、检测内容 1、基础检测对该建筑物基础各项工程做法进行检测，纵墙(○17～○18×○A轴处)与横量墙(○A～○B×①轴处)分别开挖一处基础测坑。为便于检测，测坑上部开挖尺寸宜控制在1000mm×1000mm左右，经放坡后测坑底部尺寸应控制在600mm×600mm左右，测坑开挖深度为基础灰土层下皮100mm，测坑内部需将余土清理干净，使基础垫层及大放脚轮廓鲜明，表面无积土。测坑开挖需避开雨水管附近，如测坑周围有堆积物不便开挖，经现场检测人员同意可调换适当位置进行，并做好记录。检测基础工程实际做法，对其标高、尺寸、材料、损伤等逐一进行检测，检查结果绘制成图并详细记录。检测工具：洋镐、大锤、铁锹、盒尺、钢尺、水平尺、数字测距仪、数码相机、记录簿等。检测完毕后及时将测坑进行回填，回填时应分层逐一夯实，恢复表面散水及地面。 2、砌体砂浆强度检测砂浆强度检测对该建筑物砌体用砂浆强度进行实地检测，每层随机抽

血清α-淀粉酶(AMS)测定

血清α-淀粉酶（AMS）测定 1. 实验原理 AMS测定采用酶动态比色测定法。所用底物为4,6-亚乙基-α,D-麦芽七糖苷-对硝基苯酚（EPS－G7）。样品中α－淀粉酶分解底物EPS－G7，生成对硝基苯酚（PNP），在405nm处比色，吸光度的上升速率与样品中α-淀粉酶的活力成正比。 2 亚乙基－G5 ＋ 2 G2PNP 5EPS-G7＋5H2O α-淀粉酶 2 亚乙基－G4 ＋ 2 G3PNP 亚乙基－G3＋G4PNP α-葡萄糖苷酶 2G2PNP＋2G3PNP＋G4PNP＋14H2O 5PNP＋14G （反应式中PNP：对硝基苯酚；G：葡萄糖） 2. 标本采集与处理：

2.1 病人准备：无特殊要求。 2.2 标本类型：血清、肝素或EDTA处理的血浆、尿液。 2.3 血清分离血清或血浆应在收集后尽快分离出来。未酸化的尿液，随机或限时收取。 3. 标本存放：不要用嘴吸取标本或对标本吹气，以免唾液污染标本唾液中的淀粉酶使结果升高。血清淀粉酶在20～25℃稳定一个星期，避免微生物降解作用；在2～8℃时稳定一个月。尿液样品在2～8℃可稳定10天，在15～25℃可稳定2天。对于尿液，酸性pH值可使淀粉酶的稳定性减弱，因此，储存前pH值应调至大约7.0。 4. 标本运输：常温条件下运输 5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血的不能做测定。 6. 实验材料： 6.1 AMS测定试剂盒（试剂1 6×64 ml ＋试剂2 6×16 ml） 6.1.1 试剂组成试剂1： GOOD’S 缓冲液pH 7.1 100mmol/L

氯化钠50mmol/L 氯化镁10mmol/L α-葡萄糖苷酶≥23KU/L 试剂2： EPS－G73mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：原试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。 6.1.5注意事项：唾液和皮肤中含有α-淀粉酶，应避免用嘴吸取试剂，避免皮肤接触试剂。试剂中含叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜。 6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪 8. 操作步骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化

生物检查法

1 1 0 0 生物检查法 1 1 0 1无菌检查法无菌检查法系用于检査药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检査的要求，检验全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区、工作台面及环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度确认。隔离系统应定期按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环境进行监控。培养基硫乙醇酸盐流体培养基主要用于厌氧菌的培养，也可用于需氧菌的培养；胰酪大豆胨液体培养基用于真菌和需氧菌的培养。培养基的制备及培养条件培养基可按以下处方制备，亦可使用按该处方生产的符合规定的脱水培养基或成品培养基。配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。制备好的培养基应保存在2〖25°C、避光

的环境，若保存于非密闭容器中，一般在3 周内使用；若保存于密闭容器中，一般可在一年内使用。 1. 硫乙酵酸盐流体培养基胰酪胨 15_ 0g 氣化钠 2. 5g 酵母浸出粉5. 0g 新配制的0. 1 % 刃天无水葡萄糖 5.0g 青溶液1.0ml L-胱氨酸 0. 5g 琼脂0. 75g 硫乙醇酸钠0.5g 水1000ml (或硫乙醇酸）（0_3ml) 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节p H 为弱碱性，煮沸，滤清，加人葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节p H , 使灭菌后在2 5 ° C的p H 值为 7.1 土0.2。分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色)不超过培养基深度的1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则，须经100°C水浴加热至粉红色消失（不释过2 0分钟），迅速冷却，只限加热一次，并防止被污染。除另有规定外，硫乙醇酸盐流体培养基置3 0〖3 5 C 培养。 2.胰酪大豆胨液体培养基胰酪胨1 7 .0g 氣化钠 5.0g

一株纤维素酶产生菌的鉴定及酶学性质研究

一株纤维素酶产生菌的鉴定及酶学性质研究 1 引言 1.1 研究纤维素酶的作用和意义纤维素是植物纤维的主要成分，也是地球上最丰富的可再生有机资源。据报道，全世界每年通过光合作用产生的纤维素，其中有89%尚未被人类利用，我国每年仅农业生产中形成的农作物残渣(稻草、秸秆等)就约有7亿t，如何有效利用这些资源已经成为近年来研究的热点。纤维素占植物干重的35%-50%，是地球上分布最广的碳水化合物，同时又是自然界数量最大的可再生资源。纤维素废弃物的有效利用和生物转化已成为世界上许多国家关注的重要科研领域之一。要使纤维素酶真正能够用于工业生产，首先要降低纤维素酶的生产成本。因此，选育高酶活的纤维素分解菌株就成了解决问题的关键之一。 1.2牛胃消化纤维素图1-1 图1-2 瘤胃微生物(rumen rnicrobes)是指栖息在瘤胃中的微生物。瘤胃是反刍动物降解纤维素的消化器官，纤维素的降解靠瘤胃微生物分泌的纤维素分

解酶，瘤胃内含有复杂的微生物区系，不同的微生物对纤维素和其它营养物质的消化各显功能，并有互补作用。纤维素的消化是纤维素酶水解的结果，纤维素酶是多组分复合酶，主要为内切型葡聚糖酶，外切型葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶。瘤胃微生物通过合成和分泌β-1，4-纤维素分解酶复合物，确保了对植物细胞壁的水解，调控瘤胃内环境促进微生物分泌消化酶，或者向饲料中添加酶制剂，都有利于饲料纤维素的利用。瘤胃微生物能分泌纤维素酶，因此瘤胃有较强的发酵和分解纤维素的作用。在瘤胃微生物中，对纤维素降解起主要作用的还是瘤胃细菌。本文主要从牛胃液中分离出兼性氧的高产纤维素酶细菌，对分离所得菌株进行初步鉴定及并对其发酵产纤维素酶的酶学性质进行初步探讨，从而为最终得到产纤维素酶，性能优良的微生物菌株。 2 菌种的鉴定 2.1 材料与方法 2.1.1实验的菌种实验用的菌种由齐肇然同学提供的产纤维素酶枯草芽孢杆菌属的Q菌种。 2.1.2 培养基固体培养基：蛋白胨5.0g，(NH4)2S041.0g，羧甲基纤维素钠 CMC—Na 10.0g，NaCl3.0g，KH2PO4 2.0g，MgSO4·7H2O 1.0g，FeSO4·7H20 10.0mg、MnSO4·H20 5.0mg，琼脂粉20.0g，蒸馏水1000mL，调pH值6.7。发酵培养基：蛋白胨2.0g，酵母膏1.0g，(NH4)2SO4 2.0g，CMC-Na 20.0g，NaC1 3.0g，KH2PO42.0 g，MgSO4·7H20 1.0g，FeSO4·7H2O 10.0 mg MnSO4·H2O 5.0mg，调pH值6.7。 Q菌的硫化氢培养基：蛋白胨10.0g ，牛肉膏10.0g ，酵母膏5.0g ，柠檬酸氢二铵[（NH4）2HC6H5O7] 2.0g，葡萄糖(C6H12O6·H2O) 20.0g，乙酸钠（CH3COONa·3H2O）5.0g ，磷酸氢二钾（K2HPO4·3H2O）2.0g，硫酸镁（MgSO4·7H2O）0.58g ，硫酸锰（MnSO4·H2O）0.25g，琼脂 18.0g、蒸馏水1000mL，pH6.2～6.6。 Q菌的硝酸盐培养基：硝酸盐培养基，硝酸盐培养基成分为硝酸钾0.2g 蛋白5g，蒸馏水1000mL，pH 7.4。试剂：甲液（对氨基苯磺酸0.8g 5moL/L

淀粉含量检测方法

谷物中淀粉含量的测定本方法参考GB/T5009.9-2008《食品中淀粉的测定》的第二法酸水解法。适用范围：本方法适用于谷物原料中淀粉含量的测定。原理：试样经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用酸水解成具有还原性的糖，然后按还原糖测定，并折算成淀粉。方法一 1 试剂和材料 1.1 酒石酸铜甲液：34.639g CuSO4溶于水，加入0.5mL浓H2SO4，稀释到 500mL；酒石酸铜乙液：173g酒石酸钾钠，加50g NaOH，稀释到500mL； 1.2 氢氧化钠溶液：c(NaOH)=1mol/L； 1.3 硫酸铁溶液：50g/L（称取50g硫酸铁，加入200mL水后，慢慢加入100mL 硫酸，冷后加入稀释至1000mL）； 1.4 高锰酸钾标准滴定溶液：c(1/5KMnO4)=0.1mol/L； 1.5 乙醇溶液：85% v/v； 1.6 HCL：1+1和1+3； 1.7 NaOH溶液：40%； 1.8 乙酸铅溶液：20%； 1.9 硫酸钠：10%。 2 仪器设备 2.1粉碎磨：粉碎样品，使其完全通过孔径0.45mm（40目）筛。 2.2锥形瓶：250mL。

2.3回流冷凝装置：能与250mL锥形瓶瓶口相匹配。 3操作步骤称取样品(粉碎过40目筛)2.0g～5.0g，准确至0.0002g，置于放有慢速滤纸的漏斗中，用50mL石油醚分5次洗去样品中脂肪，再用150mL85%乙醇溶液分数次洗涤残渣，以除去可溶性糖类物质，滤干乙醇溶液，将滤纸连同残渣一并转移至250mL锥形瓶中。加100mL水、30mL(1+1)HCl，在沸水浴上回流2h，回流完毕后，立即在流水中冷却，待样品水解液冷却完全后，加2滴甲基红指示剂，先用NaOH溶液（400g/L）调至黄色，再用(1+1)的HCl调至水解液刚变红色。若水解液颜色较深，可用pH试纸测试，使试样水解液的pH值约为7，然后加20mL的乙酸铅溶液（200g/L），摇匀，放置10min，再加20mL的硫酸钠溶液(100g/L)，以除去过多的铅。摇匀后，将全部溶液及滤渣转入500mL容量瓶中，用水洗涤锥形瓶，洗液合并于容量瓶中，定容，摇匀，过滤，弃去初滤液20mL，滤液供测定用。吸取25.00mL滤液于三角瓶中，加25mL酒石酸铜甲液，再加25mL酒石酸铜乙液，在电炉上加热(在3min内煮沸)并煮沸2min，取下过滤，并用60℃ 水洗涤烧杯和沉淀至洗液不呈碱性为止，将漏斗连同滤纸一同放至前面使用过的烧杯上，向滤纸内加入硫酸铁(50g/L)40mL，使氧化亚铜完全溶解，摇匀溶液，再加25mL水，用玻璃棒搅拌到看不见Cu2O，以0.1mol/l高锰酸钾标准滴定溶液滴定至呈微红色，10s不褪色为终点。同样条件做空白。方法二 1 试剂 1.1 碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜(CuS04·5H2O)及0.050g亚甲蓝,加适量水溶解，再加水稀释至1000mL。

(整理)3d碰撞检测技术

核心提示：10.3 碰撞检测技术到目前为止，构造的各种对象都是相互独立的，在场景中漫游各种物体，墙壁、树木对玩家（视点）好像是虚设，可以任意从其中穿越。为了使场景人物更加完善，还需要使用碰撞检测技术。 10.3.1 碰撞检测技术简介无论是PC游戏，还是移动应用， 10.3 碰撞检测技术到目前为止，构造的各种对象都是相互独立的，在场景中漫游各种物体，墙壁、树木对玩家（视点）好像是虚设，可以任意从其中穿越。为了使场景人物更加完善，还需要使用碰撞检测技术。 10.3.1 碰撞检测技术简介无论是PC游戏，还是移动应用，碰撞检测始终是程序开发的难点，甚至可以用碰撞检测作为衡量游戏引擎是否完善的标准。好的碰撞检测要求人物在场景中可以平滑移动，遇到一定高度的台阶可以自动上去，而过高的台阶则把人物挡住，遇到斜率较小的斜坡可以上去，斜率过大则会把人物挡住，在各种前进方向被挡住的情况下都要尽可能地让人物沿合理的方向滑动而不是被迫停下。在满足这些要求的同时还要做到足够精确和稳定，防止人物在特殊情况下穿墙而掉出场景。做碰撞检测时，该技术的重要性容易被人忽视，因为这符合日常生活中的常识。如果出现Bug，很容易被人发现，例如人物无缘无故被卡住不能前进或者人物穿越了障碍。所以，碰撞检测是让很多程序员头疼的算法，算法复杂，容易出错。对于移动终端有限的运算能力，几乎不可能检测每个物体的多边形和顶点的穿透，那样的运算量对手机等设备来讲是不可完成的，所以移动游戏上使用的碰撞检测不可能使用太精确的检测，而且对于3D碰撞检测问题，还没有几乎完美的解决方案。目前只能根据需要来取舍运算速度和精确性。目前成功商业3D游戏普遍采用的碰撞检测是BSP树及AABB（axially aligned bounding box）包装盒（球）方式。简单地讲，AABB检测法就是采用一个描述用的立方体或者球形体包裹住3D物体对象的整体（或者是主要部分），之后根据包装盒的距离、位置等信息来计算是否发生碰撞，如图10-24所示。除了球体和正方体以外，其他形状也可以作包装盒，但是相比计算量和方便性来讲还是立方体和球体更方便些，所以其他形状的包装只用在一些特殊场合使用。BSP树是用来控制检测顺序和方向的数据描述。在一个游戏场景中可能存在很多物体，它们之间大多属于较远位置或者相对无关的状态，一个物体的碰撞运算没必要遍历这些物体，同时还可以节省重要的时间。