药用野生稻愈伤组织诱导与分化探讨
水稻愈伤分化和再生研究进展
水稻愈伤分化和再生研究进展朱克明;陶慧敏;徐硕;端礼钦;杨艳华【摘要】水稻是我国最重要的粮食作物,维持着超过半数人口的生存.转基因技术是水稻产量提高和质量提升的一个重要工具.然而,籼稻中大多数品种由于愈伤诱导困难以及分化率低,限制了转基因技术在籼稻中的应用.本文综述了基因型、外植体来源、培养基和外源激素对籼稻愈伤诱导和分化的影响,以及调控愈伤分化和再生的基因,为今后籼稻品种的进一步遗传改良提供理论依据.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2016(035)011【总页数】5页(P55-59)【关键词】水稻;愈伤组织;组织培养;转基因;籼稻【作者】朱克明;陶慧敏;徐硕;端礼钦;杨艳华【作者单位】江苏大学生命科学研究院, 江苏镇江212013;江苏大学生命科学研究院, 江苏镇江212013;江苏大学生命科学研究院, 江苏镇江212013;徐州市农水畜禽产品质量检测中心, 江苏徐州221003;江苏大学生命科学研究院, 江苏镇江212013【正文语种】中文【中图分类】S511水稻是禾本科模式植物，也是最重要的粮食作物之一，养活了全世界一半以上的人口[1]。
但是随着世界人口的不断增加，粮食供求也越来越紧张。
目前，主要通过传统育种提高水稻的产量，但是转基因育种具有周期短、适用对象广等特点。
由于粳稻品种愈伤分化和植株再生率较高，转基因育种在粳稻中已取得了可喜的成果，但是占整个水稻品种的80%以上的籼稻，由于愈伤组织诱导和植株再生率低造成遗传转化困难，严重地制约了转基因技术在籼稻中的应用[2-3]。
本文主要从影响水稻愈伤分化和再生因素以及调控基因等方面的研究进行综述。
水稻遗传转化采用最多的体系为愈伤组织再生系统，水稻体细胞组织培养作为水稻基因工程的基础技术，在水稻遗传改良中具有重要的作用。
利用愈伤组织再生系统具有以下优点： 1) 外植体来源广泛； 2) 繁殖速度快； 3) 易于接受外源基因； 4) 转化效率高[4]。
水稻愈伤组织的诱导实验报告
水稻愈伤组织的诱导实验报告This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020水稻愈伤组织的诱导一、实验目的1、掌握外植体的消毒方法和接种技术；2、了解愈伤组织诱导的过程。
二、实验原理以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时，在一定的诱导培养条件下都能诱导形成愈伤组织。
愈伤再经分化培养，通过器官发生途径或体细胞胚胎发生途径可再生成植株。
外植体源自自然环境均为带菌状态，在接种前都必须进行消毒。
对于难消毒的材料，有时要几种消毒剂配合使用；对于多茸毛表面粗糙不平的材料，要加展着剂（吐温20）以增强消毒效果。
三、实验材料与用具1、材料：水稻成熟种子（用于诱导愈伤组织）；2、试剂：75%酒精，2% NaCLO，无菌水(每组1瓶400mL)；3、培养基：诱导培养基：NB+2,4-D 2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L（）；4、仪器设备：培养室、超净工作台、培养皿（￠9cm）2个、枪形镊、量筒（100mL）2个、三角瓶（50mL、无菌）2个、废液缸、保鲜膜、标签纸。
四、实验步骤1、接种室、培养基及用具表面消毒用75%酒精棉球试擦超净工作台、镊子，将培养基及用具放工作台，打开紫外灯，照射20分钟以表面消毒。
之后关紫外灯，打开工作台风机，通风30分钟后可进行无菌操作。
2、种子去壳选取饱满、无霉变、成熟的水稻种子，手工脱去谷壳（注意保持胚完整），每人准备30粒去壳种子，并按照分组放到三角瓶中。
3、操作者双手的清洗与消毒在进入无菌室之前，各操作者先用自来水清洗干净双手并晾干，然后进入无菌室，坐在超净台前位子上后，用含75%酒精的酒精喷壶喷洒双手对双手进行消毒，在超净台风口待双手酒精风干后进入超净工作台。
（注意：酒精喷壶喷洒双手时切记不要把酒精喷到超净台的有机玻璃板上！）4、超净台面的表面消毒（以下工作在超净工作台内进行）用枪形镊子从含75%酒精棉球的容器中取一团棉球，仔细把整个超净台面擦试一遍，尽量降低超净台面的带菌量，并将废棉球丢到废液缸中，然后点亮超净台里面放置的酒精灯。
愈伤组织的诱导形成及分化
第五章 愈伤组织的诱导、形成及分化第一节 愈伤组织的诱导、形成及特点一、愈伤组织的诱导和形成愈伤组织是在离体培养条件下，经植物细胞脱分化和不断增殖所形成的无特定结构的组织。
经一段时间的生长和增殖以后，在其内部出现一定程度的分化，产生出一些具有分生组织结构的细胞团、色素细胞或管状分子。
植物外植体在培养基和外界环境的作用下，经过一个复杂的过程形成愈伤组织，即： 外植体＋培养基＋环境愈伤组织愈伤组织的形成一般可分为三个时期：诱导期、细胞分裂期和细胞分化期（见图4.1）。
图4.1 愈伤组织的形成特点1. 诱导期愈伤组织诱导期又称启动期，是指外植体组织受外界条件刺激后，开始改变原来的分裂方向和代谢方式，合成代谢活动加强，大量合成蛋白质和核酸物质，为细胞分裂做准备。
诱导期的长短因植物种类、外植体的生理状态和外部因素而异，即使是同一种物种不同基因型同一外植体的愈伤组织，其诱导期也不同。
有的植物愈伤组织诱导期只有1天（菊芋），而有的植物诱导期需要数天（胡萝卜）。
刚收获的菊芋块茎的诱导期仅22 h ，但经贮藏5个月后，诱导期延长为2天。
2. 分裂期外植体在培养基上经过离体诱导后，外层细胞开始发生分裂，细胞脱分化。
愈伤组织的细胞分裂快，结构疏松，缺少组织结构，颜色浅而透明（见图4.2）。
分裂期的细胞分裂局限在愈伤组织的外缘，主要是垂周分裂。
小麦幼胚 分裂期 分裂期分化期 分化期图4.2 小麦幼胚愈伤组织诱导分裂期与分化期（东北农业大学小麦研究室，李文雄，曾寒冰，胡尚连等，1994）愈伤组织进入分裂期时，外植体的脱分化因植物种类、基因型、外植体种类和生理状况而有很大差异。
烟草、胡萝卜等的脱分化很容易，而禾谷类则较难；花器官脱分化较易，茎叶较难；幼茎组织脱分化较易，而成熟的老组织较难。
进入分裂期的愈伤组织，如仍在原来的培养基上继续培养，某些愈伤组织将不可避免地发生分化，产生新的结构，但将其及时转移到新鲜的培养基上（继代培养），则愈伤组织可无限制地进行细胞分裂增殖，维持不分化的状态。
水稻愈伤转化
水稻愈伤组织转化一、实验目的1.掌握植物组织培养的基本原理；2.学习水稻愈伤组织的诱导方法；3.学习农杆菌转化法的原理，掌握农杆菌转化水稻愈伤组织的方法；4.学习转基因植株的各种鉴定方法（包括PCR检测、GUS染色、Southern-blot、Western-blot、FISH等），同时能够操作PCR与GUS染色鉴定的方法。
二、实验原理1.植物组织培养植物组织培养（plant tissue culture）是指在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体和花药等，在人工控制的培养基上培养，使其生长、分化以及形成完整植株的技术。
自1902年Haberlandt 首先用紫鸭跖草( Tradescantia )的叶片栅栏组织进行培养来，植物组织培养已有100余年历史。
用于离体培养的各种植物材料称为外植体（explant）。
根据外植体的类型，又可将组织培养分为：器官培养、组织培养、胚胎培养、细胞培养以及原生质体培养等。
（从这个角度讲，本学期的实验属于胚胎培养。
）植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。
2.基因工程基因工程技术是在离体条件下对不同生物的遗传物质(DNA)进行人为“加工”，并按照人们的意愿重新组合，以改变生物的性状和功能，然后再通过适当的载体将重组DNA转入生物体或细胞内，并使其在生物体内或细胞中表达，从而获得新的生物机能。
这种利用基因工程技术获得的植物一般称为“基因工程植物”。
自1983年首次获得转基因植物以来，转基因技术发展十分迅速，成功进行转基因的植物已达60多种，在世界上批准进入田间试验的转基因植物已超过500例，有些转基因产品已进入市场。
通过基因工程改良作物品种在未来的农业生产中日益显示出巨大潜力。
3.农杆菌转化法转基因的方法有很多，对于植物而言，最常用的是农杆菌转化法和基因枪法。
农杆菌转化法使用的是根癌农杆菌，其内含Ti质粒：T-DNA（Transferre DNA）区：农杆菌Ti 质粒中向植物中转移并整合进植物基因组中的部分。
植物生物技术 愈伤组织的诱导继代及分化
⑶先芽后根： 愈伤组织中产生多个分生细胞形成分生中心，从中仅分化出芽，一般情况下待芽 长到一定大小时，切下移入生根培养基中，在其基部即可分化出根。有些植物在分 化芽的培养基上同时在芽器官基部分化出根，形成完整的植株。大多数植物均属这 类正常的分化途径，这类苗移栽较易成活。 ⑷先根后芽： 有些植物外植体脱分化后在愈伤组织上先分化出根，而后在靠近愈伤组织的根部 上再分化出芽，有的将根切下放入分化培养基，再于根上分化出芽器官，甚至在根 端也能分化出芽。
长素降低些，尤其是使用2，4-D时。 一般地，经过继代培养的愈伤组织在稳定生长1～2代后，具有S型生长曲线。开 始一周生长缓慢，中间3周生长很快，4周以后生长又变迟缓。
第二节 悬浮培养
悬浮培养:一般是把一些小块生长旺盛的愈伤组织
放入液体培养基中，进行振荡培养，从而使愈伤 组织块变成良好分散性的细胞和小的细胞聚集体。 愈伤组织通过悬浮培养能产生大量的比较均一 的细胞，而且细胞增殖速度快，适宜进行大规模
（1）三角烧瓶容纳的培养基占总容积的20%～30%，培养基含量可随培养物量的减 少而减少； （2）转速一般为80～100 r/min； （3）细胞或愈伤组织的生长呈典型的S型曲线，即延滞期（lag phase），对数生长 期（log phase），然后逐渐减慢，直至停止。
3、愈伤组织的生长特性
一般情况下，25℃下培养的愈伤组织需要每4~6周继代一次。大多数研究工作表
官。可以把愈伤组织分化出芽、根器官概括为以下几种方式：
⑴单极分化： 愈伤组织中的分生中心在刺激物质的影响下向着一极分化，形成有根无芽或 者有芽无根的现象。 ⑵双极分化： 愈伤组织中随着细胞分裂出现两个或两个以上分生中心，其中有的分化芽， 有的分化根，根芽之间并无输导等组织沟通，在培养瓶内靠愈伤组织提供养料， 这种以愈伤组织隔离着的芽和根的苗，常常不能移栽成活。
水稻愈伤组织培养
水稻愈伤组织的诱导李希北京科技大学化学与生物工程学院生物科学与技术系，北京，100083摘要：以水稻种子为外植体，研究了外植体的消毒方法和接种技术，了解了水稻愈伤组织诱导的过程。
结果表明水稻种子接种在诱导培养基上两天已产生愈伤组织发芽2mm，四天愈伤组织呈现浅黄色发芽5-10mm，6天愈伤组织颜色加深发芽1-2cm，8天愈伤组织为橙黄色发芽2-3cm，无杂菌污染。
关键词：水稻种子外植体诱导愈伤组织引言自Niizeki和Oono1968年首次获得水稻花粉植株以来，水稻组织培养取得了很大的进展，如各种水稻品种愈伤组织的诱导、继代、植株再生培养基的筛选，遗传特性，基因工程转化体系的建立等等。
水稻种子愈伤组织的诱导是这些研究的基础，因此掌握外植体的消毒方法和接种技术，了解了水稻愈伤组织诱导的过程至关重要。
以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时，在一定的诱导培养条件下都能诱导形成愈伤组织。
外植体源自自然环境均为带菌状态，在接种前都必须进行消毒。
对于难消毒的材料，有时要几种消毒剂配合使用。
本次试验使用的诱导剂为2,4-D，诱导率为100%。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1实验材料水稻成熟种子（用于诱导愈伤组织）；1.1.2仪器设备及用具超净工作台培养室、培养皿：￠9cm×2枪形镊量筒：100mL×2三角瓶：50mL×2(无菌)；废液缸；保鲜膜；标签纸1.1.3试剂及培养基试剂：75%酒精，2%NaCLO，无菌水(每组1瓶400mL)培养基：诱导培养基：MS+2,4-D2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L（pH5.8）1.2 实验方法1.2.1 MS固体培养基配制：由于实验室中的MS培养基已含有蔗糖和琼脂，所以直接按照41.5g/L的浓度配置。
实验中配置50ml培养基，需依次加入2.075gMS，0.1mg2,4-D；用NaOH或HCl调节PH=5.8；高压蒸汽锅121℃灭菌20min。
作物育种期末考试复习资料以及真题
一、14年育种各论真题，有标注的大多是21年的育种考的。
二、填空题（每空1分，共20分）1、按作物的繁殖方式，品种群体类型大致可分为无性繁殖系群体、近交家系群体、异交群体和杂种品种群体四大类。
2、作物分子育种的研究与应用目前集中在分子标记辅助选择育种和转基因育种两方面。
3、我国水稻品种资源中三大矮源是指矮脚南特矮仔占低脚乌尖。
（自花授粉）、结实率低是籼粳杂交育种的最大障碍，克服其最好的途径是广亲和种质利用。
5、水稻花药培养中，诱导小孢子出愈伤组织的常用培养基是N6。
6、我国育成的自交系的种质来源中，来自我国的种质主要有旅大红骨、金皇后、塘四平头和获嘉白马牙4大种质。
（玉米）7、依据玉米子粒形状、胚乳淀粉的含量与品质等性状，将栽培玉米亚种分为有稃型、爆裂型、粉质型、甜质型、甜粉型、糯质型、马齿型、硬粒型和半马齿型9种类型。
（异花授粉）8、在油菜品质育种中，籽粒含油量与蛋白质含量是呈负相关的。
（异花授粉）9、油菜的品种间杂交育种中，对自交不亲和性的白菜型油菜，回交育种和轮回选择育种法最为常用。
7、油菜的品种间杂交育种中，甘蓝型和芥菜型油菜，均可采用系谱育种法和回交育种法，而且成效显著。
10、我国3大主棉区是指长江流域棉区、黄河流域棉区和新疆棉区。
11、当前我国棉花品种存在的问题是品质单一和抗逆性尤其是黄萎病有待加强。
单项选择题（每题1分，共10分）1、D 2、B 3、C 4、B 5、A 6、C 7、D 8、A 9、D 10、B1、下列水稻雄性不育类型属于配子体不育的是。
A 野败型和冈型B 冈型和红莲型C 冈型和BT型D 红莲型和BT型2、下列野生稻类型中，为普通栽培稻的祖先的是。
A 药用野生稻B 普通野生稻C 疣粒野生稻D 颗粒野生稻3、水稻花药培养中，诱导愈伤组织再分化的培养基通常采用培养基。
A B5B WhiteC MSD N64、在玉米细胞质雄性不育系类型中，育性败育彻底且抗玉米小斑病的类型是。
中国药用野生稻的高度遗传分化
中国药用野生稻的高度遗传分化
L.－ZCao;邱敦莲;等
【期刊名称】《国外作物育种》
【年(卷),期】2002(021)005
【总页数】2页(P4-5)
【作者】L.－ZCao;邱敦莲;等
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S511.9
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药用野生稻愈伤组织诱导与分化探讨目录1.药用野生稻概述 (1)1.1 药用野生稻的概念 (1)1.2 药用野生稻简介 (2)1.2.1药用野生稻的价值 (2)1.2.2 影响野生稻愈伤组织诱导的因素 (2)1.3 药用野生稻愈伤组织的诱导及分化 (3)1.3.1 目标定位 (3)1.3.2 实际用途 (3)1.3.3 生产意义 (3)2 药用野生稻愈伤组织诱导条件 (3)2.1 药用野生稻的生长条件 (3)2.2 各种因素的影响 (3)2.3 实验要求 (4)3 实验设计 (4)3.1培养基类型 (4)3.1.1 实验材料 (4)3.1.2 实验目的 (5)3.1.3 试验操作 (5)3.1.4 结果记录及分析 (5)3.1.4.1四种不同培养基中生长结果记录 (5)3.1.4.2 实验结果 (6)3.1.4.3 四种不同培养基中生长结果分析 (6)3.1.4.4 最适培养基类型分析 (6)3.2生长调节剂的添加 (6)3.2.1实验材料 (6)3.2.2实验目的 (6)3.2.3生长调节剂的种类及作用 (6)3.2.4各种生长调节剂的理化性质 (7)3.2.5水稻的培养中生长调节剂的一般用量 (8)3.2.6 试验操作 (9)3.2.7 结果记录及分析 (9)3.2.7.1 不同种激素添加结果记录 (9)3.2.7.2 同种激素不同添加量结果记录 (9)3.2.7.3 最适激素添加量综合分析 (10)3.3 最适pH (10)3.3.1 实验材料 (10)3.3.2 实验目的 (10)3.3.3 pH对植物组织培养的影响 (10)3.3.4 试验操作 (11)3.3.5 结果记录及分析 (11)3.3.5.1 酸性条件下生长情况 (11)3.3.5.2不同pH条件下生长情况综合分析 (12)4.培养条件控制 (12)4.1 温度 (12)4.2 湿度 (12)4.3 光照 (12)4.3.1 光周期 (13)4.3.2 光照强度 (13)4.3.3 光质 (13)4.4 气体 (13)4.5 试验操作 (13)4.6 结果记录及分析 (14)5. 野生稻愈伤组织诱导及分化 (14)5.1 实验材料 (14)5.2 实验目的 (14)5.3 试验操作 (15)5.3.1 愈伤组织的诱导 (15)5.3.2 芽的诱导 (15)5.3.3 幼苗的长成 (15)5.3.4 幼苗生根 (15)5.3.5 完整植株 (15)5.3.6 炼苗 (15)5.3.7 实验结果 (15)6.结论 (16)7.药用野生稻的展望 (16)参考文献 (17)药用野生稻愈伤组织诱导与分化探讨摘要：云南药用野生稻是我国最具利用价值的野生稻资源之一，具有许多优良的性状和有利基因，是改良栽培稻培育新品种的宝贵基因库。
本文旨在以云南特有的药用野生稻为材料，以常规培养基为基础，探索适合野生水稻生长的培养条件（培养基类型、培养基成分、生长调节剂的添加量、最适pH等）。
在其基础上诱导野生稻的生长及分化，得到野生稻的愈伤组织，然后将愈伤组织进一步进行脱分化进行培养，有望得到野生稻的植株，作为种质资源进行研究。
关键词：药用野生稻；愈伤组织；诱导；分化Abstract: Yunnan O. officinalis Wall. ex Watt. is our most valuable resources of wild rice, it, as a valuable gene pool, has many good traits and favorable genes able to be modified to the new varieties of cultivated rice. The aim to this study is to explore the wild rice growth conditions (medium type, medium composition, the addition of growth of ragulators, pH, etc.). Based on their growth and induced differentiation of O. officinalis Wall. ex Watt., wild rice callus were obtained, and then further de-differentiation of callus cultured plants were expected as excellent germplasm matierals.Keywords:O. officinalis Wall. ex Watt., callus, induction, differentiation1.药用野生稻概述云南药用野生稻是我国最具利用价值的野生稻资源之一，具有许多优良的性状和有利基因，是改良栽培稻培育新品种的宝贵基因库。
野生稻不仅是珍贵的野生植物资源，而且蕴藏着十分丰富的优良种质基因，是改良栽培稻，可供人类长期持续发掘利用的重要基因宝库。
目前，水稻育种面临许多困难，抗逆、高产、优质等许多方面都有待改进。
所以，水稻育种问题变得尤为重要。
1.1 药用野生稻的概念云南药用野生稻是我国最具利用价值的野生稻资源之一，具有许多优良的性状和有利基因，是改良栽培稻培育新品种的宝贵基因库。
其具有特殊的CC基因组优良基因，为野生稻的研究、育种提供了良好的条件。
禾本科植物，分布于广东、广西、云南，为渐危种。
本种在我国南部有零星分布，染色体组为cc型，为二倍体植物，作为栽培稻的野生近缘种质基因而需加以保护。
多年生草本，杆直立或下部匍匐，高1.5一3米，直径7一10毫米，具8一15节，基部2一3节上生发达的不定根。
叶鞘长达40厘米，大多比节间长3倍以上，无毛；叶舌膜质，长约4毫米，无毛；叶耳不明显；叶片宽大，线状披针形，长30－80厘米，宽20一30毫米，质地较厚，先端尖，基部渐窄呈柄状，中脉粗壮，侧脉不明显，下面糙涩，上面散生长柔毛，基部贴生微毛，边缘具锯齿状粗糙。
圆锥花序大型疏散，长30－50厘米，分枝长10－15厘米，3一5枚着生于各节，具细毛状粗糙，下部长、裸露、腋问生长毛；小穗柄长1－4毫米，粗糙，顶端具2枚半月形退化颖片；小穗长约5毫米，宽约2.5毫米，厚13毫米，黄绿色或带褐黑色，成熟时易脱落；不孕外粹线状披针形，长1.6－2毫米，顶端渐尖，具1脉、边缘有细纤毛，成熟花外稃阔卵形，脉纹增厚隆起，脊上部或边脉生疣基硬毛，脉间下陷，散生短硬毛，表面具较粗的疣状突起，其在每侧排成24－26纵行；芒自外样顶端伸出，长5一10毫米，具细毛；内稃与外稃同质，宽约为外稃之半，脊疏生疣基硬毛，顶端有小尖头，边缘干膜质；花药长约2.5毫米。
颖果扁平，红褐色，长约3.2毫米，宽约2毫米。
1.2 药用野生稻简介禾本科植物，分布于广东、广西、云南，为渐危种。
本种在我国南部有零星分布，染色体组为cc型，为二倍体植物，作为栽培稻的野生近缘种质基因而需加以保护。
多年生草本，杆直立或下部匍匐，高1.5一3米，直径7一10毫米，具8一15节，基部2一3节上生发达的不定根。
叶鞘长达40厘米，大多比节间长3倍以上，无毛；叶舌膜质，长约4毫米，无毛；叶耳不明显；叶片宽大，线状披针形，长30－80厘米，宽20一30毫米，质地较厚，先端尖，基部渐窄呈柄状，中脉粗壮，侧脉不明显，下面糙涩，上面散生长柔毛，基部贴生微毛，边缘具锯齿状粗糙。
圆锥花序大型疏散，长30－50厘米，分枝长10－15厘米，3一5枚着生于各节，具细毛状粗糙，下部长、裸露、腋问生长毛；小穗柄长1－4毫米，粗糙，顶端具2枚半月形退化颖片；小穗长约5毫米，宽约2.5毫米，厚13毫米，黄绿色或带褐黑色，成熟时易脱落；不孕外粹线状披针形，长1.6－2毫米，顶端渐尖，具1脉、边缘有细纤毛，成熟花外稃阔卵形，脉纹增厚隆起，脊上部或边脉生疣基硬毛，脉间下陷，散生短硬毛，表面具较粗的疣状突起，其在每侧排成24－26纵行；芒自外样顶端伸出，长5一10毫米，具细毛；内稃与外稃同质，宽约为外稃之半，脊疏生疣基硬毛，顶端有小尖头，边缘干膜质；花药长约2.5毫米。
颖果扁平，红褐色，长约3.2毫米，宽约2毫米。
1.2.1 药用野生稻的价值云南药用野生稻是珍贵的野生植物资源，蕴藏着十分丰富的优良种质基因，是改良栽培稻，可供人类长期持续发掘利用的重要基因宝库。
药用野生稻主要遗传特性和有关基因(片段)，对野生稻资源的保存、研究和利用，具有重要的理论和实际意义。
1.2.2 影响野生稻愈伤组织诱导的因素在药用野生稻愈伤组织诱导的过程中，既受到内部因素的影响，也受到外部因素的影响。
其中，内部因素包括：培养基类型、植物生长调节剂、pH等。
外部因素有：温度、湿度、光照、气体。
1.3药用野生稻愈伤组织的诱导及分化1.3.1 目标定位为了更好的利用药用野生稻这个资源，在本试验中，着重探究药用野生稻培养基的配方、确定生长调节剂的添加种类及最适量、探究培养基最适pH、愈伤组织培养过程中的条件控制，以培养出优质的药用野生稻植株，作为种质资源进行研究。
1.3.2 实际用途药用野生稻具有许多优良的性状和有利基因，是改良栽培稻培育新品种的宝贵基因库，一般用于水稻育种、抗性的研究。
其具有特殊的CC基因组，虽然很难通过有性杂交转移到栽培稻（AA基因组）上，但是有望以大片段形式通过BIBAC （binary bacterial artificial chromosome, BIBAC）等载体转化到栽培稻中。
BIBAC载体作为第三代新型载体，不仅能够作为大片段基因组文库的载体，而且能够通过根癌农杆菌介导将克隆片段直接导入植物基因组实现转化，成为目前植物基因克隆和转化的有效工具之一。
1.3.3 生产意义随着水稻育种问题日益突出，野生稻的利用越来越广泛，若可以实现野生稻植株的大量栽培，这对水稻的研究将起到不可估量的作用。
2药用野生稻愈伤组织诱导条件2.1药用野生稻的生长条件生长于海拔400~1100m的地区，分布在丘陵山地和山坡中下部的冲积地和沟边。
为喜温暖、多雨、潮湿的短日照植物，生于丘陵林地环境，适宜在荫蔽、腐殖质丰富、pH值为6左右的肥沃沙壤土上生长。
伴生植物有薏苡 Coix lacrymajobi L.，棕叶狗尾草 Setaria palmifolia (Koen.) Stapf，蕨类等。
在较大的河流、池塘、沟渠有较深水层和无阴蔽处均不宜于生长，因而有别于稻和普通野生稻。
2.2 各种因素的影响培养基类型、培养基成分、生长调节剂的添加量、pH、外部因素等。