生物：5.1《DNA的粗提取与鉴定》课件(2)(新人教版选修1)
选择适宜材料
破碎细胞
与二苯胺混合，沸水浴， 与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应
1. 下列关于 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是 粗提取与鉴定的说法正确的是 A．氯化钠的浓度越低，对DNA的溶解度越大 ．氯化钠的浓度越低， 的溶解度越大 B．人血也可代替鸡血进行实验 ． C．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂 ． D．DNA不能溶于酒精 ． 不能溶于酒精 2. 在破碎鸡血细胞时，要先加入 在破碎鸡血细胞时，要先加入20ml的蒸馏水，其作用是 的蒸馏水， 的蒸馏水 A. DNA溶解于水 B． 血细胞破裂，DNA释放 溶解于水 ． 血细胞破裂， 释放 C．稀释血液，防止凝固 D． 有利于搅拌 ．稀释血液， ． 3. 若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗 若选择的实验材料为植物细胞， 涤剂和食盐， 涤剂和食盐，加入食盐的目的是 A. 利于 利于DNA的溶解 B. 分离 分离DNA和蛋白质 的溶解 和蛋白质 C. 溶解细胞膜 D. 溶解蛋白质 4. 在DNA粗提取实验中，向在溶解 粗提取实验中， 溶液中， 粗提取实验中 向在溶解DNA的NaCl溶液中，不断加 的 溶液中 入蒸馏水的目的是 A．有利于溶解 B．有利于溶解杂质 ．有利于溶解DNA ． C．减少 D．减少杂质的溶解度 ．减少DNA的溶解度 的溶解度 ．
1、鸡血细胞做实验材料，一是因为鸡血细胞核的 鸡血细胞做实验材料， DNA含量丰富 材料易得； DNA含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水 含量丰富， 胀破。 胀破。 2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同， DNA在不同浓度的 在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 溶液中溶解度不同， 3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶，其作用是分解 嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶， 蛋白质，使提取出的DNA纯度较高 蛋白质，使提取出的DNA纯度较高 4、预冷的乙醇溶液具有以下优点：一是抑制核酸水 预冷的乙醇溶液具有以下优点： 解酶活性，防止DNA降解 二是降低分子运动， 降解， 解酶活性，防止DNA降解，二是降低分子运动，易 于形成沉淀析出，三是低温有利于增加DNA分子柔 于形成沉淀析出，三是低温有利于增加DNA分子柔 韧性，减少断裂； 韧性，减少断裂； 5、洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁，破坏细 洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁， 胞膜，同时也能使蛋白质变性； 胞膜，同时也能使蛋白质变性； 6、在60—75度条件下加温处理，蛋白质变性，而 60—75度条件下加温处理 蛋白质变性， 度条件下加温处理， DNA结构不会受到破坏 提取纯度较高的DNA DNA结构不会受到破坏，提取纯度较高的DNA 结构不会受到破坏， 7、甲基绿能使DNA染成绿色 甲基绿能使DNA染成绿色
纱布过滤
取滤物Leabharlann 2mol/LNaCl溶液 2mol/LNaCl溶液
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图 鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
7、加冷酒精使DNA析出（纯化） 加冷酒精使DNA析出 纯化） 析出（ 冷酒精
DNA的鉴定
总结： 总结：
实验原理 DNA 的 粗 提 取 与 鉴 定 鉴定DNA 鉴定 DNA的纯化 的纯化
１.取新鲜植物组织（菜花） 取新鲜植物组织（菜花） 放置于冰箱中冷却1~2 放置于冰箱中冷却1~2 天 30克植物组织 切碎, 克植物组织, ２.取30克植物组织,切碎, 置于研体中, 置于研体中,倒入适量 洗洁精, 洗洁精,加入适量的 NaCl,充分研磨 分钟 NaCl,充分研磨10分钟 充分研磨10 过滤研磨液， ３.过滤研磨液，取上清夜 置于冰箱中冷却几分钟 倍体积的上清液， ４.取1倍体积的上清液， 加入2倍体积的95%的 加入2倍体积的95%的 冷酒精当中， 冷酒精当中，用玻棒轻 轻搅拌，沉淀3~5分钟 轻搅拌，沉淀3~5分钟 后可见白色絮状DNA缠 后可见白色絮状DNA缠 绕于玻棒末端。 绕于玻棒末端。 .DNA的提纯同鸡血细胞 ５.DNA的提纯同鸡血细胞 为实验材料的实验操作 步骤6 步骤6、7，具体数据有 一定的差异。 一定的差异。 ６.鉴定
根据以上原理可设计提取和纯化DNA的方案 根据以上原理可设计提取和纯化DNA的方案： 的方案：
方案一：30mL含DNA的滤液 的滤液＋ 方案一：30mL含DNA的滤液＋2mol/L NaCl→同方向搅拌 DNA溶解 NaCl→同方向搅拌，DNA溶解→加入蒸 同方向搅拌， 溶解→ 馏水→DNA析出 过滤得到过滤物→ 析出→ 馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放到 2mol/LNaCl溶液中溶解 DNA-NaCl溶 2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl溶 溶液中溶解→ 解液 方案二：30mL滤液 嫩肉粉（ 滤液＋ 方案二：30mL滤液＋嫩肉粉（木瓜蛋白 静置10～15分钟 DNA滤液 分钟→ 酶）→静置10～15分钟→DNA滤液 方案三：30mL滤液 60～75℃ 滤液→ 方案三：30mL滤液→60～75℃恒温保温 10~15分钟 过滤获得DNA滤液 10~15分钟→过滤获得DNA滤液 分钟→
DNA的溶解和析出 的溶解和析出 DNA粗提取 粗提取 DNA在不同浓度 在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 在不同浓度 溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 和蛋白质对酶、 和蛋白质对酶 DNA与二苯胺呈现蓝色反应 与二苯胺呈现蓝色反应
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图 鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图 鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
2mol/L
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图 鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
5、过滤→取纱布上的滤物 过滤→
6、再次溶解DNA 再次溶解DNA
DNA粗提取与鉴定 DNA粗提取与鉴定
学习目标
知识目标 1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进 行粗提取，了解DNA的物理化学性质。 2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。 能力目标 掌握DNA粗提取及鉴定方法，能利用DNA 的性质进行实验设计和操作。 态度观念目标 通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及 操作，锻炼科学的思维方法，培养实事求是 的科学态度。
两种材料的DNA粗提取与鉴定过程 两种材料的DNA粗提取与鉴定过程
①释放组织细胞中的DNA， 释放组织细胞中的DNA， 粗提取DNA， ②粗提取DNA， ③将粗提取的DNA进一步纯化， 将粗提取的DNA进一步纯化， 进一步纯化 鉴定提取物是DNA ④鉴定提取物是DNA
以鸡血为材料 以花菜为材料
鸡血细胞
植物组织
１. 0.1g/ml的柠檬酸钠溶液,按1:2的比例与新鲜鸡血混 . 0.1g/ml的柠檬酸钠溶液 1:2的比例与新鲜鸡血混 的柠檬酸钠溶液, 合搅拌均匀。 合搅拌均匀。 将血液置于冰箱中24小时 小时, ２.将血液置于冰箱中24小时,弃上部澄清液 取烧杯中的血细胞液约5~10ml加入到 加入到100ml烧杯中 ３.取烧杯中的血细胞液约5~10ml加入到100ml烧杯中 向烧杯中加入20ml蒸馏水 用玻棒沿一个方向快 蒸馏水， ，向烧杯中加入20ml蒸馏水，用玻棒沿一个方向快 搅拌5分钟， 速搅拌5分钟，加速血细胞在低渗溶液中的破裂 2mol/L的氯化钠溶液 的氯化钠溶液50ml缓缓倒入烧杯中 缓缓倒入烧杯中， ４.将2mol/L的氯化钠溶液50ml缓缓倒入烧杯中，用玻 棒沿一个方向搅拌， DNA溶解于氯化钠溶液中 棒沿一个方向搅拌，使DNA溶解于氯化钠溶液中 滤除杂质，获得粘稠状的鸡血细胞DNA提取液 ，滤除杂质，获得粘稠状的鸡血细胞DNA提取液 将鸡血细胞DNA提取液置于较大的烧杯中 提取液置于较大的烧杯中， ５.将鸡血细胞DNA提取液置于较大的烧杯中，沿烧杯 内壁缓缓倒入蒸馏水，并不断搅拌， 内壁缓缓倒入蒸馏水，并不断搅拌，直到粘稠状 DNA不再析出为止 用玻棒搅拌，使析出的DNA DNA不再析出为止。用玻棒搅拌，使析出的DNA 不再析出为止。 缠绕于玻棒末端。 缠绕于玻棒末端。 将析出的DNA再溶解于 再溶解于2mol/L的氯化钠溶液中 的氯化钠溶液中。 ６.将析出的DNA再溶解于2mol/L的氯化钠溶液中。 DNA的氯化钠溶液中倒入 的氯化钠溶液中倒入95%的酒精 ml（ 的酒精50 ７.在DNA的氯化钠溶液中倒入95%的酒精50 ml（冷 却过的酒精效果较好）， DNA再次析出 ），使 再次析出， 却过的酒精效果较好），使DNA再次析出，用玻 棒搅拌， DNA再次缠绕于玻棒末端 再次缠绕于玻棒末端。 棒搅拌，使DNA再次缠绕于玻棒末端。 .DNA的鉴定 取两支试管，各加入2ml0.015氯化钠 的鉴定： ８.DNA的鉴定：取两支试管，各加入2ml0.015氯化钠 溶液， DNA溶解于其中一支试管中 溶解于其中一支试管中， 溶液，将DNA溶解于其中一支试管中，另一支做 为对照组。然后， 为对照组。然后，在两支试管内加等量的二苯胺试 水浴加热10min左右 冷却，观察实验现象。 左右， 剂，水浴加热10min左右，冷却，观察实验现象。
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人教版高二生物选修一课件：5.1DNA的粗提取与鉴定 (共16张 PPT)
C．第一次是①，第二次是② D．第一次是②，第二次是①
三、实验成功的关键及注意事项 1．破碎细胞，释放DNA过程中，若是血细胞，加水 后必须充分搅拌，不应少于5 min；若是菜花，则应与研 磨液混合，研磨时间不少于10 min。
2．用冷酒精浓缩和沉淀DNA时，所用的95%的酒精， 必须经过充分预冷后才能使用。
蓝色，因此__________ 二苯胺 可以作为鉴定DNA的试剂。
尝试应用
1．提取DNA最好不要选用的材料是( D )
A．鸡血 C．鱼卵 B．花椰莱 D．羊血
2 ．在 DNA 的粗提取实验过程中，有两次 DNA沉淀析出，其依据的原理是( C ) ①DNA 在 物 质 的 量 浓 度 为 0.14 mol/L 的 NaCl溶液中溶解度最低 A．两次都是① ②DNA在冷却的体积 分数为95%的酒精中能沉淀析出 B．两次都是②
作用 防止血液凝固
B
C
蒸馏水
蒸馏水
与鸡血细胞混合
加入到溶解有 DNA的NaCl溶液 中
保持细胞形状
析出DNA丝状物 产生特定的颜色 反应
加入到过滤后含 冷却的酒 D DNA的NaCl溶液 精 中
变式训练
2 ．下列关于 DNA 的粗提取和鉴定的有关说法，正 确的是( C ) A．DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的 增大而增大 B．溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL二苯胺试剂即 变蓝色 C． DNA 粗提取和鉴定时，选材最好用鸡血而不用 猪血 D．提取洋葱的 DNA时，在切碎的洋葱中加入一定 的洗涤剂和食盐，食盐有利于DNA从细胞中释放出来
祝
你
DNA的粗提取与鉴定
1．DNA的粗提取 RNA 、 (1) 基 本 思 路 ： 利 用 DNA 与 ______ 脂质等在物理和化学性质方面 蛋白质 和 ______ ________ 差异 ，提取DNA，去除其他成分。 的______ (2)方法和原理 蛋白质 等其他成分在不同浓 ①DNA 和 ________ NaCl 溶液中溶解度不同，利用这一特 度的 ______ 盐浓度 就能使 DNA 充分溶解， 点选择适当的 ________ 而使 ______ 杂质 沉淀，或者相反，以达到分离目 的。
选修一5.1DNA的粗提取和鉴定人教版高二生物下课件(共29张PPT)
再用来自mol/L的NaCl溶液溶 解DNA。
Q1：在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液浓度为2mol/L，搅拌 1min，注意应沿一个方向，目的是？
目的是使DNA充分溶解
过滤溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液，目的是什么？
含DNA的滤液、除去不溶的杂质
含核物质的滤液
Q2：再加蒸馏水的目的是？同时搅拌的目的是？（轻轻地沿 一个方向不停地均与搅拌）过滤含DNA黏稠物的0．14mol/L 的NaCl溶液，目的是什么？
部分发生盐析(沉淀) 溶解 某些蛋白质可溶
（二）对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶水解蛋白质，对DNA没有影响。 ②60～80°C的高温中，蛋白质变性后溶解度降 低而产生沉淀，DNA在80°C以上才会变性。 ③洗涤剂瓦解细胞膜（脂质），对DNA没有影 响（在植物材料中提取DNA使用）。
DNA具有耐受性
提取DNA的方法：利用DNA与蛋白质、 RNA 和 脂质等在 物理和 化学 性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
一、DNA的提取的原理： （一）溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶 液中和酒精中的溶解度不同。
❖ 据图： ❖ ①在什么浓度下，DNA的溶解度最小？
0.14 mol/L
课题 DNA的粗提取与鉴定
人教版高二年级 选修1
生物体内的DNA犹如“雾中花”，神秘莫 测，真实的DNA是什么模样？
探究DNA的提取与鉴定的原理
【问题思考】 1.细胞中有哪些生物大分子？ 2.DNA与蛋白质的物理化学性质有哪些主要差异？ 3.提取生物大分子的基本思路是什么？ 4.提取DNA分子的方法是什么？
DNA含量相对较高的组织，成功的可能性更大。
材料：新鲜的鸡血（注意要加入柠檬酸钠，防止血液凝固）
Q1：在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液浓度为2mol/L，搅拌 1min，注意应沿一个方向，目的是？
目的是使DNA充分溶解
过滤溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液，目的是什么？
含DNA的滤液、除去不溶的杂质
含核物质的滤液
Q2：再加蒸馏水的目的是？同时搅拌的目的是？（轻轻地沿 一个方向不停地均与搅拌）过滤含DNA黏稠物的0．14mol/L 的NaCl溶液，目的是什么？
部分发生盐析(沉淀) 溶解 某些蛋白质可溶
（二）对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶水解蛋白质，对DNA没有影响。 ②60～80°C的高温中，蛋白质变性后溶解度降 低而产生沉淀，DNA在80°C以上才会变性。 ③洗涤剂瓦解细胞膜（脂质），对DNA没有影 响（在植物材料中提取DNA使用）。
DNA具有耐受性
提取DNA的方法：利用DNA与蛋白质、 RNA 和 脂质等在 物理和 化学 性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
一、DNA的提取的原理： （一）溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶 液中和酒精中的溶解度不同。
❖ 据图： ❖ ①在什么浓度下，DNA的溶解度最小？
0.14 mol/L
课题 DNA的粗提取与鉴定
人教版高二年级 选修1
生物体内的DNA犹如“雾中花”，神秘莫 测，真实的DNA是什么模样？
探究DNA的提取与鉴定的原理
【问题思考】 1.细胞中有哪些生物大分子？ 2.DNA与蛋白质的物理化学性质有哪些主要差异？ 3.提取生物大分子的基本思路是什么？ 4.提取DNA分子的方法是什么？
DNA含量相对较高的组织，成功的可能性更大。
材料：新鲜的鸡血（注意要加入柠檬酸钠，防止血液凝固）
生物：5.1《DNA的粗提取与鉴定》课件(新人教版选修1)
目 录/contents
1. 什么是学习力 2. 高效学习模型 3. 超级记忆法 4. 费曼学习法
什么是学习力
什么是学习力-你遇到这些问 题了吗
总是 比别人 学得慢
一看就懂 一 做就错
看得懂，但不 会做
总是 比别人学得差 不会举一反三
什么是学习力含义
管理知识的能力 （利用现有知识 解决问题）
TIP2：越夸张越搞笑，越有助于刺激我们的大脑，帮助我们记忆，所以不妨在 编 故事时，让自己脑洞大开，尝试夸张怪诞些~
故事记忆法小妙招
费曼学习法
费曼学习法-简介
理查德·菲利普斯·费曼 （Richard Phillips Feynman）
费曼学习法出自著名物理学家费曼，他曾获的 1965年诺贝尔 物理学奖，费曼不仅是一名杰出的 物理学家，并且是一位伟 大的教育家，他能用很 简单的语言解释很复杂的概念，让其 他人能够快 速理解，实际上，他在学习新东西的时候，也会 不断的研究思考，直到研究的概念能被自己直观 轻松的理解， 这也是这个学习法命名的由来！
如何利用规律实现更好记忆呢？
超级记忆法-记忆
规律
记忆后
选择巩固记忆的时间 艾宾浩斯遗忘曲线
超级记忆法-记忆 规律
TIP1：我们可以选择巩固记忆的时间！ TIP2：人的记忆周期分为短期记忆和长期记忆两种。 第一个记忆周期是 5分钟 第二个记忆周期是30分钟 第三个记忆周期是12小时 这三个记忆周期属于短期记忆的范畴。
思维导图& 超级记忆法& 费曼学习法
1
外脑- 体系优化
知识体系& 笔记体系
内外脑高效学习模型
超级记忆法
超级记忆法-记忆 规律
记忆前
人教版高中生物选修一5.1《DNA的粗提取与鉴定》ppt课件
1、鸡血细胞做实验材料，一是因为鸡血细胞核的 DNA含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水 胀破。 2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同， 3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶，其作用是分解 蛋白质，使提取出的DNA纯度较高 4、预冷的乙醇溶液具有以下优点：一是抑制核酸水 解酶活性，防止DNA降解，二是降低分子运动，易 于形成沉淀析出，三是低温有利于增加DNA分子柔 韧性，减少断裂； 5、洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁，破坏细 胞膜，同时也能使蛋白质变性； 6、在60—75度条件下加温处理，蛋白质变性，而 DNA结构不会受到破坏，提取纯度较高的DNA 7、甲基绿能使DNA染成绿色
DNA的鉴定
总结：
实验原理
DNA
的
粗
提
DNA粗提取
取
与
鉴
定
鉴定DNA
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
选择适宜材料
破碎细胞
DNA的纯化
DNA的溶解和析出
与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应
D． 有利于搅拌
3. 若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗
涤剂和食盐，加入食盐的目的是
A. 利于DNA的溶解
B. 分离DNA和蛋白质
C. 溶解细胞膜
D. 溶解蛋白质
4. 在DNA粗提取实验中，向在溶解DNA的NaCl溶液中，不断加
入蒸馏水的目的是
A．有利于溶解DNA的方案：
方案一：30mL含DNA的滤液＋2mol/L NaCl→同方向搅拌，DNA溶解→加入蒸 馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放 到2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl 溶解液 方案二：30mL滤液＋嫩肉粉（木瓜蛋白 酶）→静置10～15分钟→DNA滤液 方案三：30mL滤液→60～75℃恒温保温 10~15分钟→过滤获得DNA滤液
高中生物选修一DNA的粗提取与鉴定分享资料.ppt
观察现象：溶解丝状物的溶液变为蓝色
14
四、课题成果评价：
是否提取出了DNA
观察你提取的DNA颜色， 如果不是白色丝状物， 说明DNA中的杂质较多； 二苯胺鉴定出现蓝色 说明实验基本成功， 如果不呈现蓝色， 可能所提取的DNA含量低， 或是实验操作中出现错误， 需要重新制备
15
课题延伸
本课题使用的洗涤剂是多组分的混合物，在严格的 科学实验中很少使用。实验室提取高纯度的DNA时， 通常使用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、十二烷 基硫酸钠（SDS）或吐温等化学试剂。
16
练习
1、请解释提取DNA的实验操作主要步骤的目的
提取DNA的第一步是材料的选取，其目的是一 定要选取DNA含量较高的生物材料，否则会由于实 验过程中或多或少的损失而造成检测的困难；第二 步是DNA的释放和溶解，这一步是实验成功与否的 关键，要尽可能使细胞内的DNA全部溶解；第三步 是DNA的纯化，即根据DNA的溶解特性、对酶及 高温的耐受性的不同等特性，最大限度地将DNA与 杂质分开；最后一步是对DNA进行鉴定，这是对整 个实验的结果的检测。
20
21
为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？
1、用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除 去在高盐中不能溶解的杂质；
2、用低盐浓度使DNA析出，能除去溶 解在低盐溶液中的杂质。
因此，通过反复溶解与析出DNA，就能 够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。
22
•本实验中有三次过滤 ,分别有什么作用?
9
（三）除去滤液中的杂质
1. DNA的溶解性
2. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
10
讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？
方案二：利用蛋白酶分解杂质蛋白，使提取的 DNA
14
四、课题成果评价：
是否提取出了DNA
观察你提取的DNA颜色， 如果不是白色丝状物， 说明DNA中的杂质较多； 二苯胺鉴定出现蓝色 说明实验基本成功， 如果不呈现蓝色， 可能所提取的DNA含量低， 或是实验操作中出现错误， 需要重新制备
15
课题延伸
本课题使用的洗涤剂是多组分的混合物，在严格的 科学实验中很少使用。实验室提取高纯度的DNA时， 通常使用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、十二烷 基硫酸钠（SDS）或吐温等化学试剂。
16
练习
1、请解释提取DNA的实验操作主要步骤的目的
提取DNA的第一步是材料的选取，其目的是一 定要选取DNA含量较高的生物材料，否则会由于实 验过程中或多或少的损失而造成检测的困难；第二 步是DNA的释放和溶解，这一步是实验成功与否的 关键，要尽可能使细胞内的DNA全部溶解；第三步 是DNA的纯化，即根据DNA的溶解特性、对酶及 高温的耐受性的不同等特性，最大限度地将DNA与 杂质分开；最后一步是对DNA进行鉴定，这是对整 个实验的结果的检测。
20
21
为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？
1、用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除 去在高盐中不能溶解的杂质；
2、用低盐浓度使DNA析出，能除去溶 解在低盐溶液中的杂质。
因此，通过反复溶解与析出DNA，就能 够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。
22
•本实验中有三次过滤 ,分别有什么作用?
9
（三）除去滤液中的杂质
1. DNA的溶解性
2. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
10
讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？
方案二：利用蛋白酶分解杂质蛋白，使提取的 DNA
高中生物《第五章 第一节 DNA的粗提取与鉴定》课件2 新人教版选修1
在20m烧杯中轻缓搅拌 3min，使尽可能多的 DNA溶解在NaC溶液。
用放有两层纱布的漏斗过滤步骤⑸所得的溶液，滤液中 含有DNA。
⑺提取含有杂质较少的DNA 步骤⑹所得的滤液＋体积分数为95%的冷却酒精50m， 用玻棒沿一个方向轻缓搅拌，溶液中（析出）出现乳 白色丝状物，用玻棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取上 面的水分。
的粗提取实验过程中，两次向烧杯中加入蒸 馏水的作用是 。
A稀释血液、冲洗样品 B使血细胞破裂、降低NaC浓度使DNA析出 C使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA
答：B
的物质的量浓度为2 mo／和014 mo／对DNA 有何影响
答：前者是溶解DNA，后者是使DNA析出
DNA粗提取与鉴定
1、DNA分子由两条链 组成,这两条链按反向平 行的方式盘旋成双螺旋 结构
2、DNA分子中的磷酸 和脱氧核糖交替连接排 列在外侧,构成基本骨架, 碱基排列在内侧 3、DNA分子两条链上 的碱基通过氢键连接成 碱基对原则
当m在 mN氯oaloNC／化lla/溶钠LLC液时时l的浓溶，，物度液DD的质浓NN增的A度A加的量的低而溶浓溶逐于解渐度解0度降.为度1低随4较；2 大在，0浓.14度m为ol0/L．时1，4DNmAo溶l／解L度时， D最N小A；的当溶N解aCl度溶液最浓低度。继续利增用加这 一时原，理DN，A可的溶以解使度D又逐N渐A增在大盐。溶 液中溶解或析出。
二、DNA的释放
1、怎样使鸡血细胞破裂？原理是什么？
2、如果实验材料是植物细胞又该如何 处理？ 3、加洗涤剂和食盐的作用是什么？ 4、提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加 入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的 搅拌和研磨。如果研磨不充分，会对实 验结果产生怎样的影响？
高中生物《第五章 第一节 DNA的粗提取与鉴定》课件 新人教版选修1
2. DNA的鉴定
⑴ 向两支试管中分别加入 2mol/L NaCl 溶液5ml
⑵ 其中一支试管中加入DNA丝状物
⑶ 各加入二苯胺试剂4ml ⑷ 混匀后，置于沸水浴中加热5min ⑸ 待冷却后，比较两只试管中溶液的颜色变化 观察现象：溶解丝状物的溶液变为蓝色
方法步骤 1.制备鸡血细胞液 柠檬酸钠溶液
§5.1 DNA的粗提取与鉴定
一、基础知识
（一）提取DNA的方法
1.提取生物大分子的基本思路
选用一定的物理或化学方法，分离具有 不同物理或化学性质的生物大分子
2.提取DNA的基本思路
提取DNA，去除其他成分 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等 在物理和化学性质方面的差异
3.DNA等大分子的理化性质 ⑴ DNA的溶解性 DNA和蛋白质等成分 在不同浓度的NaCl溶液 中溶解度不同
食 盐——NaCl，利于DNA的溶解于研磨液中 水分大量进入血细胞，使血细胞胀裂； ② 充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液 加上搅拌作用，加速鸡血细胞细胞膜、核膜破裂，
从而释放出DNA
想一想：研磨的目的是什么，如果研磨不充分， 会对实验结果产生怎样的影响？
经研磨可破碎细胞壁，使细胞核内的DNA释放。若研磨
不充分，会使提取的DNA量变少，导致看不到丝状沉淀
物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。
讨论：滤液/研磨液中可能含有哪些成分？
答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质
为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理
（三）除去滤液中的杂质
1. DNA的溶解性
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
2. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？
⑵ DNA不溶于酒精溶液 利用这一特点，
人教版高中生物选修1-5.1《DNA的粗提取与鉴定》优教课件
3 操作提示
1.以血液为实验材料，每100ml加入3g柠檬酸钠， 作为抗凝剂。 2.加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以 免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮 状沉淀。
3.二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。
方法步骤
加入物质
目的
1. 制备鸡血细胞液
柠檬酸钠溶液
①
提取鸡血细胞细胞核物质 20 m1蒸馏水
方案三：将滤液放在60-75℃的恒温水浴中 保温10-15℃，注意严格控制温度范围。
（四） DNA的析出与鉴定
1、DNA的析出： 将处理后的溶液过滤，加入 与滤液体积相等的、冷却的 酒精溶液（体积分数为95%）， 静置2～3min，溶液中会出现 白色丝状物，这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个 方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。
2、DNA的鉴定： 取两支20mL的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的 NaCl溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻 璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加 入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水 中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜 色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
1、动物细胞的破碎：以鸡血为例，在鸡血细胞液 中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过 滤后收集滤液即可。
2、植物细胞的破碎：提取洋葱DNA时，在切碎的 洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅 拌和研磨，过滤后收集研磨液。
旁栏思考
• 加入洗涤剂和食盐的作用分别是？ 洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利 于DNA释放；食盐有利于DNA溶解 • 如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？ 会使细胞核内DNA释放不完全，提取DNA量变少， 影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯 胺鉴定不显示蓝色等
(完整)人教 高中生物选修一 实验—DNA的粗提取和鉴定精品PPT资料精品PPT资料
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3、方法与过程
1).制鸡血细胞液
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中，玻棒搅拌，
利用细胞吸水破裂，细胞核内物质释放出来，后用纱布过滤取其滤液。 4）DNA和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、DNA热稳定性不同。
活鸡鲜血180mL 离心或静置沉淀。 二苯胺是一种有毒性的试剂,使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位.
色
，并沸水浴
鉴定DNA
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1.DNA的粗提取实验原理
1）不同浓度NaCl中DNA溶解度不同。 2）DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同，DNA不溶于酒精，细 胞中某些蛋白质则溶于酒精。 3）DNA和蛋白质对酶耐受性不同：酶的专一性——蛋白酶水解蛋 白质。但是对DNA没有影响。 4）DNA和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、DNA热稳定性不同。 大多数蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变 性。 5）DNA和蛋白质对洗涤剂耐受性不同：洗涤剂能够瓦解细胞膜， 但对DNA没有影响。
（4）若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 若使肝组织易分离，将肝细胞剪碎、研磨是一种简便易行的方法。程
序，使组织细胞更易分离。
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2)实验方法步骤：
提取细胞核物质：利用细胞吸水破裂，细胞核内物质释放出来，后用纱布过滤取其滤液。
血细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和核膜的破裂，据此可得出含核DNA的溶液。
④鉴定DNA时需沸水浴加热。
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关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验结果的比较， 最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题：
（新1陈）代鸡谢血旺中盛红，细因胞而含血有液完中整红的、细成胞形数的目细较胞多核，，可家以鸡提属供于丰鸟富类的，
【人教版】选修一生物：5.1《DNA的粗提取与鉴定》ppt课件
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