绿粘帚霉多菌灵耐药性菌株的筛选

合集下载

细菌耐药性检测方法

细菌耐药性检测方法

细菌耐药性检测方法1、细菌耐药表型检测:判断细菌对抗菌药物的耐药性可根据 NCCLS 标准,通过测量纸片扩散法、肉汤稀释法和 E 试验的抑菌圈直径、 MIC 值和 IC 值获得。

也可通过以下方法进行 检测:(1)耐药筛选试验:以单一药物的单一浓度检测细菌的耐药性被称为耐药筛选试验,临床 上常用于筛选耐甲氧西林葡萄球菌、 万古霉素中介的葡萄球菌、 耐万古霉素肠球菌及氨基糖 苷类高水平耐药的肠球菌等。

( 2)折点敏感试验:仅用特定的抗菌药物浓度(敏感、中介或耐药折点 MIC ),而不使用 测定 MIC 时所用的系列对倍稀释抗生素浓度测试细菌对抗菌药物的敏感性,称为折点敏感 试验。

(3)双纸片协同试验:双纸片协同试验是主要用于筛选产超广谱B 兰阴性杆菌的纸片琼脂扩散试验。

若指示药敏纸片在朝向阿莫西林 扩大现象(协同),说明测试菌产生超广谱B -内酰胺酶( 4)药敏试验的仪器化和自动化:全自动细菌鉴定及药敏分析仪如:Microscan 等运用折点敏感试验的原理可半定量测定抗菌药物的 MIC值。

2.B -内酰胺酶检测: 主要有碘淀粉测定法 ( iodometric test )和头孢硝噻吩纸片法 ( nitrocefintest )。

临床常用头孢硝噻吩纸片法,B -内酰胺酶试验可快速检测流感嗜血杆菌、淋病奈瑟 菌、卡他莫拉菌和肠球菌对青霉素的耐药性。

如B-内酰胺酶阳性,表示上述细菌对青霉素、 氨苄西林、 阿莫西林耐药; 表示葡萄球菌和肠球菌对青霉素 (包括氨基、 羧基和脲基青霉素) 耐药。

3.耐药基因检测:临床可检测的耐药基因主要有:葡萄球菌与甲氧西林耐药有关的MecA 基因,大肠埃希菌与B -内酰胺类耐药有关的 blaTEM 、blaSHV 、blaOXA 基因,肠球菌与万古 霉素耐药有关的 vanA 、 vanB 、 vanC 、 vanD 基因。

检测抗菌药物耐药基因的方法主要有:PCR 扩增、PCR-RFLP 分析、PCR-SSCP 分析、PCR-线性探针分析、生物芯片技术、自动 DNA 测序4.特殊耐药菌检测(1 )耐甲氧西林葡萄球菌检测:对 1u g 苯唑西林纸片的抑菌圈直径W10伽,或其MIC > 4u g/ml 的金黄色葡萄球菌和对 1u g 苯唑西林纸片的抑菌圈直径W17 mm,或MIC > 0.5u g/ml 的凝固酶阴性葡萄球菌被称为耐甲氧西林葡萄球菌( MRS )。

环境中抗药菌株的分离、鉴定及其抑菌活性研究

环境中抗药菌株的分离、鉴定及其抑菌活性研究

环境中抗药菌株的分离、鉴定及其抑菌活性研究作者:阎春兰央青卓玛韦英美王涛雷世庭王磊来源:《湖北农业科学》2018年第10期摘要:采用革兰氏染色技术、生理生化试验和16S rDNA序列分析,对分离筛选自土壤中的抗药菌株进行鉴定;测定菌株的生长曲线了解菌株的生长情况;耐药性和抑菌性试验检测菌株的特性。

结果表明,从土壤中分离得到11种抗药菌株,经鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas)、贪噬菌属(Variovorax)、溶杆菌属(Lysobacte)和短芽孢杆菌属(Brevibacillus)等。

其中,菌株XC-10、XN-4、XN-5和XN-6等分别对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和藤黄微球菌(Micrococcus luteus)等细菌的生长有不同程度的抑制作用;11种菌株分别对终浓度为10 μg/mL壮观霉素和20 μg/mL氨苄青霉素等具有显著的耐药性。

关键词:抗药菌株;分离鉴定;16S rDNA;抑菌特性中图分类号:Q93-331 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2018)10-0060-05DOI:10.14088/ki.issn0439-8114.2018.10.014Isolation,Identification and Antimicrobial Traits of AntibioticResistant Strains in EnvironmentYAN Chun-lan,YANG-QING Zhuo-ma,WEI Ying-mei,WANG Tao,LEI Shi-ting,WANG Lei(College of Life Sciences,South-Central University for Nationalities,Wuhan 430074,China)Abstract: By using Gram stain, physiological property and phylogenetic trees based on 16S rDNA,the different antibiotic resistant strains which were screened and isolated from soil were identified. Then the growth chart of strains were measured,and the drug resistance and the antimicrobial characteriatics were detected. The results showed that 11 antibiotic resistant strains were isolated and identified from soil. According to morphological characteristics and the phylogenetical analysis of 16S rDNA,these strains were determined to belong to Pseudomonas, Variovorax,Lysobacte and Brevibacillus. And the strains of XC-10,XN-4,XN-5 and XN-6 had different inhibitory effects on the growth of bacteria such as Staphylococcus aureus,Bacillus subtilis,and Micrococcus luteus. Screened had obvious inhibiting effect on six common indicator strains. The 11strains all showed significant drug-resist ance to the final concentration of 10 μg/mL spectinomycin and 20 μg/mL ampicillin.Key words: antibiotic resistant strains; isolation and identification; 16S rDNA;antimicrobial characteriatics抗生素是在动植物或者微生物上提取的能够杀灭病菌的代谢产物[1],是人类对抗细菌感染的有效手段。

大肠杆菌抗药性菌株的筛选

大肠杆菌抗药性菌株的筛选

大肠杆菌抗药性菌株的筛选【实验目的】掌握微生物变异的原理,学习用梯度平板法分离抗药性突变株。

【实验原理】基因突变可分为自发突变和诱发突变。

许多物理、化学、生物因素对微生物都有诱变作用。

基因中碱基顺序的改变可导致微生物细胞的遗传变异。

这种变异有时能使细胞在有害的环境中存活下来,抗药性突变就是一个例子。

抗药性突变株是指野生型菌株基因突变产生的对某些化学药物的抗性变异类型,可在加有相应药物的培养基平板上选出。

抗药性突变是DNA 分子的某一特定位置的结构改变所致,有药物的存在无关,药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的鉴别手段。

在含有一定浓度抑制生长的药物平板上涂布大量的细胞群体,极个别抗性突变的细胞在平板上长成菌落。

纯化后进一步进行抗性试验,就可以得到所需的抗药性菌株。

为了便于选择适当的药物浓度,分离抗药性突变株常用梯度平板法。

本实验用梯度平板法分离大肠杆菌抗链霉素、青霉素和红霉素突变株。

【实验器材】大肠杆菌 ; LB液体培养基; LB琼脂培养基;链霉素、青霉素和红霉素;70%乙醇;无菌吸管,烧杯,试管,玻璃涂棒,水浴锅等。

【操作步骤】1.接种大肠杆菌与盛有5ml L B培养液的试管中,37℃震荡培养24h。

2.在水浴锅中融化LB培养基。

3.倒10ml已融化不含药物的LB琼脂培养基于无菌培养皿中,将培养皿一端垫起使培养皿表面在垫起的一端刚到培养皿的底与边的交界处凝固。

4.在凝固的平板底部高琼脂一边标上低,放平后在底层培养基上分别加入每毫升含有100ug链霉素、青霉素和红霉素的LB琼脂培养基10ml,凝固后制得链霉素浓度从0到另一端的100ug∕ml 的梯度平板。

5.用1ml无菌吸管吸取0.2ml大肠杆菌培养液加到梯度平板上。

用无菌玻璃涂棒将菌液均匀涂布到整个平板表面。

如用蘸有乙醇并经火焰灭菌的玻璃涂棒,可在火焰旁或伸进培养皿在板盖上充分冷却以免烫死细胞。

6.将平板于37℃培养48 h.7.选择1—2个生长在梯度平板中部的单个菌落,用无菌接种环接触该菌落朝高药物浓度的方向划线。

哈茨木霉多菌灵耐药性菌株的筛选

哈茨木霉多菌灵耐药性菌株的筛选

哈茨木霉多菌灵耐药性菌株的筛选
鲁海菊;刘云龙;张云霞;杨海艳
【期刊名称】《云南农业大学学报》
【年(卷),期】2005(020)003
【摘要】用紫外线诱变哈茨木霉菌株,通过多菌灵耐药性筛选,获得耐药性菌株.为进一步筛选强根际能力木霉菌株提供优选材料.
【总页数】2页(P436-437)
【作者】鲁海菊;刘云龙;张云霞;杨海艳
【作者单位】红河学院生物系,云南,蒙自,661100;云南农业大学植物保护学院,云南,昆明,650201;云南农业大学植物保护学院,云南,昆明,650201;云南农业大学植物保护学院,云南,昆明,650201
【正文语种】中文
【中图分类】S432.4
【相关文献】
1.绿粘帚霉多菌灵耐药性菌株的筛选 [J], 闫晓星;朱天辉;谯天敏
2.哈茨木霉T2菌株耐药性的测定及其对几种病原菌的抑制作用研究 [J], 程东美;张志祥;区丽文;黄炽坤;刘任
3.紫外氯化锂复合诱变哈茨木霉产生多菌灵抗药性菌株的研究 [J], 于春生;张雨竹;张风娇;宋志儒;杨月;孙冬梅;李敏
4.用于虫生真菌遗传转化的苯菌灵抗性菌株筛选 [J], 赵津津;谢明;张艳军
5.紫外光诱导哈茨木霉产生对多菌灵抗药性的菌株 [J], 田连生
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

耐药性木霉T2菌株的筛选、紫外诱变与药剂驯化

耐药性木霉T2菌株的筛选、紫外诱变与药剂驯化

耐药性木霉T2菌株的筛选、紫外诱变与药剂驯化
尹婷;徐秉良;梁巧兰;古丽君;李荣峰
【期刊名称】《草业学报》
【年(卷),期】2013(022)002
【摘要】为获得对杀菌剂有抗药性的菌株,首先测定了深绿木霉T2菌株对6种常用杀菌剂的抗性,选择出了最敏感的杀菌剂速克灵.同时通过紫外光照射挑选出突变菌株,并在不同浓度的速可灵(50~800 μg/mL)培养基上驯化,最后得到了4株对速克灵抗药性较强的菌株:T2-1,T2-2,T2-5和T2-6.10次转化、菌落生长速度测定、产孢数量的测定和对灰葡萄孢菌的拮抗作用测定结果表明,此4个菌株生物学特性稳定,其中T2-6菌株显著优于其他3株.
【总页数】6页(P117-122)
【作者】尹婷;徐秉良;梁巧兰;古丽君;李荣峰
【作者单位】甘肃农业大学草业学院草业生态系统教育部重点实验室甘肃省草业工程实验室中-美草地畜牧业可持续发展研究中心,甘肃兰州730070
【正文语种】中文
【中图分类】Q948.1
【相关文献】
1.哈茨木霉T2菌株耐药性的测定及其对几种病原菌的抑制作用研究 [J], 程东美;张志祥;区丽文;黄炽坤;刘任
2.微波和紫外诱变对木霉T-YS菌株生长的影响 [J], 程开勇;毛维兴;徐秉良;刘永红;
郭耀霞;陈晶;张禄;张树武
3.木霉耐盐突变菌株的紫外诱变选育 [J], 张树武;徐秉良;刘佳;石成才
4.紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究──1出发菌株的筛选及产酶条件的研究 [J], 冯清平;沈剑敏;高燕
5.DS 9701菌株的紫外诱变及PHB解聚酶高产菌株的筛选 [J], 马晶;陈珊;何艳;刘东波;夏红梅;次素琴
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

三种药用植物内生真菌抗菌活性菌株的筛选

三种药用植物内生真菌抗菌活性菌株的筛选

0;
==植物内生菌几乎存在于所有目前己研究过的植 物内部组织中由于内生真菌生境的特殊性其次生 代谢产物非常丰富 $ 自 从 $00! 年 [E6D-(D等 " 从 短叶红豆杉 L-G(4)7$6*&"#*- 中 分 离 到 一 株 产 紫 杉 醇 的内生真菌 L-G"B8+$4-1;7$-1-$以 来 已 经 从 不 同 植物的内生真菌中分离到多种结构新颖的化合物 这些物质具有多种生物活性如抗肿瘤! 抗菌% 免疫抑制; 抗 氧 化/ 等 活 性 因 此从 植 物 内 生 菌的代谢产物中寻找和发现新的活性化合物已成为 新药筛选的一个热点 菌株的筛选是药物研究开发 中的一个及其重要的环节是药物发现的源头之一 本研究对分别采自浙江文成庆元及天目山自然保 护区的三种药用植物天南星多花黄精银杏内生真 菌进行分离并对 分 离 获 得 的 内 生 真 菌 菌 株 采 用 平 板对峙培养法筛选对常见的植物病原真菌的抑菌作 用为发现具有抗菌活性的先导化合物做前期准备
P&3**($(F "0*()",29%$&0/(F$:$%2'(%$0/(F'#'&%$+$%$*. 03"- %23**-*)$&$('#,#'(%.
Ae+*@^68:IB8N T+*cG6:F68N cA+*@TB8N:5H8 ?3ed68N ^+2[GB':F68NV+*@?6:RD6
第 !" 卷第 " 期 "#$" 年 % 月
123 $#)!0/0 45)6778)$/9%:/%%0)"#$")#")##%

黏细菌的筛选及其抗菌活性的初步分析(河南农业科学)

黏细菌的筛选及其抗菌活性的初步分析(河南农业科学)

收稿日期:2007211215作者简介:刘冰花(19702),女,陕西西安人,讲师,硕士,主要从事生物化学教学及生物制药研究。

黏细菌的筛选及其抗菌活性的初步分析刘冰花(成都大学医护学院,四川成都610015)摘要:为了从黏细菌中筛选生物活性物质,以兔粪、腐木为原料,采用选择培养基、加热、冷冻等方法分离到3株黏细菌;重点研究了1号菌,发现1号菌胞外物、胞内物均具有抗菌活性,且抗菌谱不同,其中胞外物对G +细菌有较强的抑菌作用,胞内物对部分G +细菌及G -细菌有抑菌作用,两者对真菌均无抑菌作用。

将1号菌胞外物进行薄层层析和硅胶柱层析,得到了抑制放线菌生长的单一组分。

关键词:黏细菌;筛选;抗菌活性;纯化中图分类号:Q939.15 文献标识码:A 文章编号:100423268(2008)0420111204Screening of Myxobacteria and Preliminary Analysis ofIts Antibiotic ActivityL IU Bing 2hua(School of Medicine and Nurse ,Chengdu University ,Chengdu 610015,China )Abstract :In order to screen the bioactive compound from Myxobacteria ,three strains of Myxobacteria were obtained from dung of hare and rotting wood by means of selective medium ,heating treatment and freezing treatment ,etc.The antibiotic of the No.1strain intracellular and exterior was detected by filter paper method.Both the interior and the exterior matter of the No.1strain had the antibacterial activity ,showing different antibiogram.The intracellular matter inhibited both the growth of Gram 2positive bac 2teria and some Gram 2negative bacteria ,such as Escherichia coli ,but the bacteriostatic activity to Gram 2negative bacteria was more powerful.Neither the interior nor exterior matter of the No.1strain cell in 2hibits fungus.The antibiotic of the No.1strain extracellular was isolated by thin 2layer chromatography (TLC )and silica gel column chromatography.An anti 2S treptomyces microf lavus active component was obtained by purification with silica gel column chromatography.K ey w ords :Myxobacteria ;Screen ;Antibiotic activity ;Purification 黏细菌是最高等的原核生物类群,是以滑动方式运动的具有复杂的多细胞行为的革兰氏阴性细菌[1]。

(完整版)人体细菌的天然耐药表,特别有用

(完整版)人体细菌的天然耐药表,特别有用

1变形杆菌属对多粘菌素B/粘菌素耐药。

2普罗威登斯菌属对除了阿米卡星和链霉素外的所有氨基糖苷类耐药,对四环素耐药。

3沙雷菌属对呋喃妥因耐药。

4铜绿假单胞菌还对卡那霉素、新霉素、复方新诺明天然耐药。

F列细菌也对
唑胺天然耐药
常见
白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、葡萄牙念珠菌、杜氏念珠菌、暗色霉菌(链格孢属、离蠕孢属霉属)对表中所列抗真菌药物无天然耐药.。

参考文献
1 CLSI2011
2 EUCAST Expert rules in antimeicrobial susceptibility testing ,version 1 ,April 2008.
3马越,李景云,金少鸿细菌耐药性监测分析中应注意的问题.中国抗生素杂志,2005,30(12): 763.
4 Jay P. Sanford著;范洪伟等译.桑福德抗微生物治疗指南:新译第39版.北京:中国协和医科大学出版社, /弯孢霉属、外瓶
2009.。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

绿 粘 帚 霉 多菌 灵 耐 药 性 菌株 的 筛选
闫晓星 朱天辉 , , 谯天敏
( 四川 农业大 学 1 资源环境 -院 ; 2 林 学 园- . 9 . g学院 ,四川 雅安 6 5 1 ) 2 0 4 摘要: 对培养 7d的绿粘 帚霉( l c du vrn ) 0 1分 生孢 子悬浮液 用 l 紫外灯 , G i l im. i sF 5 oa e 5w 距离 为 3 i 进行 照 0t n处 射, 并结合含 药培养 基培养 , 筛选得到 了2株绿粘 帚霉( vrn ) G. i s 的多菌灵耐 药性菌株。试验结果表 明 : e 紫外照射 3
v rn n a s db h mia o to. i me tc u e yc e c l n r 1 o c Ke r s ywo d :G ie s ab n ai ;fn iietlr c ;uta iltmu ain v rn ;c re d zm u gcd oea e lrvoe tt n o
m i ra it n i slce St eo t m tt n d s g n g mL fc re d zm o c n rt n n i dai s ee td a h pi o mu mu ai o a ea d 2f / o o ab n a i c n e tai o a ii u lt a fF 5 sM nm m h l 0 1:C mp rd wi h ae tsri ,rssa t1 v l fmu a t n ra e e o o ae t t ep rn tan eitn e e t n sice s4 h o s tme ,t erh p ag o o ed n l d t ers r lt n a it l mp o e ,whc sh lf lt i s h i y h r wsm r e s a h i p uai b l yas i r v s yn o o i o ih i ep u o
维普资讯
第 2 4卷
第 3期
四川农 业大学学报
J un fSc u n Ag iutrl iest o r a o ih a r lua v riy l c Un
Vo . 4 No 3 12 . Sp 0 6 e .2 0
20 0 6年 9月
Abt c: ecndao i l im . ieS( 0 1 s a t Th o ii fGl c d u vrn F 5 )whc r utrd fr7 d y r tetd
wi eUv 1 h (5W , 0c t t .g t 1 3 hh i m)rdai nP A meddwi abn ai ai o o D a n e t credz tn h m.T i l im . woGlca u o d
S r e ng o lo l d u vr n lr n o Ca b n z m c e ni f G ica i m ie s Toe a tt r e da i
Y N Xioxn H a —u A a - i ,Z UTinh i ,QIO Tinmi g A a -  ̄
mi n时, 绿粘帚霉 F 5 o 1分生孢子 的致死 率达 8 . %; 9 3 当照射 时 间达到 5mi , 子 的存 活率 为 0 故选 择照 射 3 n时 孢 ,
mi n为本试 验的最适诱 变剂量 ; F 5 使 0 1致死的多菌灵最低终 浓度 为 2 g钿L; 变菌株 与亲本 菌株 相 比, 药性提 诱 抗 高 了 4倍 , 产孢 能力更强 , 菌丝生长更为 密集 , 这有利于 生防真菌更快的抑制植物病原真菌的生长 , 减少农 药的使 用 量, 缓解 化学防治对环境 的压力 。
rpdy s p r  ̄ pa tp t o e n e u et ed sg fp siie a d t e e u et ep e s r fe — a il u p e ln a h g na d rd c h o a eo etc , d n h n rd c h r u eo n s
mi t h nwi teUv—gt(5W ,3 m)rdain h oii lhlrt fGl c du vrn h l h 1 i 0c ai o ,tecnda e a aeo i l im. i s t t oa e
( 0 1 ec e 8 . %.Wh n i a i e o n l so e odea dtes ria i 0 h n3 F 5 )rah s 9 3 e da dfr5mi ,a p rsi t i n h uvvl s ,te r t l s
( . ol eo eo r n n i lan ; 2 C lg f oet n otutr , 1 C lg f suc adE v o et e R e rm . l eo F r r a dH rcl e o e sy i u
Sc unA r utrl i rt , a 2 0 4 i un C ia i a gi l a Unv sy Ya 6 5 1 ,S h a , hn ) h c u ei n c
ie so ei a tt ab n a i we eo tie y t i wa .Th e ut s o t a : Ir da e o r frs t n oc r e d zm r b an d b hs s y ers l h w h t ra itd fr3 s
相关文档
最新文档