《BIOPROCESS NOW》2009年12月 第四期
《基于RNA-Seq技术分析藻蓝蛋白对自然衰老小鼠卵巢功能恢复的机理研究》范文
《基于RNA-Seq技术分析藻蓝蛋白对自然衰老小鼠卵巢功能恢复的机理研究》篇一一、引言随着人口老龄化问题日益突出，研究如何延缓卵巢功能衰退，提高老年女性生活质量已成为科研领域的重要课题。
藻蓝蛋白作为一种天然的生物活性物质，其具有抗氧化、抗衰老等生物活性，被认为对卵巢功能恢复具有潜在的作用。
本研究利用RNA-Seq技术，深入探讨藻蓝蛋白对自然衰老小鼠卵巢功能恢复的机理。
二、材料与方法1. 材料（1）实验动物：选用自然衰老小鼠作为研究对象。
（2）藻蓝蛋白：购买自正规生物制品公司，纯度较高。
（3）RNA-Seq技术：用于检测小鼠卵巢组织中基因表达的变化。
2. 方法（1）分组与处理：将小鼠分为对照组和实验组，实验组小鼠给予藻蓝蛋白处理，对照组则不作处理。
（2）卵巢组织收集：处理一段时间后，收集小鼠卵巢组织。
（3）RNA提取与测序：提取卵巢组织中的RNA，进行RNA-Seq测序。
（4）数据分析：对测序结果进行生物信息学分析，比较两组间基因表达差异。
三、结果与分析1. 基因表达差异分析通过RNA-Seq技术，我们发现在实验组小鼠卵巢组织中，有大量基因的表达发生了改变。
其中，与抗氧化、抗炎、细胞增殖和凋亡等相关的基因表达明显上调，而与衰老相关的基因表达则明显下调。
这表明藻蓝蛋白可能通过调节这些基因的表达，从而发挥其对卵巢功能的恢复作用。
2. 信号通路分析进一步分析发现，藻蓝蛋白处理的实验组小鼠卵巢组织中，与PI3K/Akt、MAPK等信号通路相关的基因表达发生了明显变化。
这些信号通路在细胞生长、增殖、存活和凋亡等过程中发挥重要作用，可能与藻蓝蛋白对卵巢功能的恢复有关。
3. 生物学功能验证为了进一步验证RNA-Seq结果的可靠性，我们通过Western blot、PCR等方法检测了部分关键基因和蛋白的表达情况。
结果表明，RNA-Seq结果与生物学功能验证结果基本一致，进一步证实了藻蓝蛋白对自然衰老小鼠卵巢功能恢复的作用。
海明斯德谦化学
海明斯德谦化学
海明斯德谦化学，又称为HMDB，是一款免费的、可搜索的生物医学数据库，包含了数千种不同的小分子化合物及其生物学活性信息。
HMDB的信息覆盖范围非常广泛，包括代谢物、药物及其代谢物、环境
污染物等。
该数据库除了提供基本的化学结构信息和物理化学性质外，还提供了丰富的生物学活性数据，如生理功能、代谢通路、生物转化等，能够帮助生物医学研究人员深入了解小分子化合物在生物体内的
作用机理，为疾病诊断、预防和治疗提供有力的支持。
世界卫生组织儿童标准处方集
WHO Model Formulary for ChildrenBased on the Second Model List of Essential Medicines for Children 2009世界卫生组织儿童标准处方集基于2009年儿童基本用药的第二个标准目录WHO Library Cataloguing-in-Publication Data:WHO model formulary for children 2010.Based on the second model list of essential medicines for children 2009.1.Essential drugs.2.Formularies.3.Pharmaceutical preparations.4.Child.5.Drug utilization. I.World Health Organization.ISBN 978 92 4 159932 0 (NLM classification: QV 55)世界卫生组织实验室出版数据目录：世界卫生组织儿童标准处方集基于2009年儿童基本用药的第二个标准处方集1．基本药物 2.处方一览表 3.药品制备 4儿童 5.药物ISBN 978 92 4 159932 0 (美国国立医学图书馆分类：QV55)World Health Organization 2010All rights reserved. Publications of the World Health Organization can be obtained fromWHO Press, World Health Organization, 20 Avenue Appia, 1211 Geneva 27, Switzerland (tel.: +41 22 791 3264; fax: +41 22 791 4857; e-mail: ******************). Requests for permission to reproduce or translate WHO publications – whether for sale or for noncommercial distribution – should be addressed to WHO Press, at the aboveaddress(fax:+41227914806;e-mail:*******************).世界卫生组织2010版权所有。
类胡萝卜素羟化酶[发明专利]
![类胡萝卜素羟化酶[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/50308cf459eef8c75ebfb339.png)
专利名称：类胡萝卜素羟化酶专利类型：发明专利
发明人：Q·程,N·塞德科瓦,L·陶申请号：CN200580027567.7申请日：20050816
公开号：CN101432436A
公开日：
20090513
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：提供了从泡囊短波单胞菌DC263分离的用于生产羟化类胡萝卜素的新CrtZ类胡萝卜素羟化酶。
此外，发现以前从Novosphingobiumaromaticivorans鉴定的一种假定蛋白具有类胡萝卜素羟化酶活性。
两种羟化酶基因都表现出与以前报道的其它CrtZ羟化酶的低同源性。
羟化酶在异源宿主细胞中的表达使得能够生产羟化类胡萝卜素。
申请人：纳幕尔杜邦公司
地址：美国特拉华州
国籍：US
代理机构：中国专利代理(香港)有限公司
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红芪水提浓缩液对快速老化小鼠学习记忆和单胺类神经递质的影响
红芪水提浓缩液对快速老化小鼠学习记忆和单胺类神经递质的影响目的观察红芪水提浓缩液(HRCF)对快速老化小鼠学习记忆能力的改善作用和对脑组织内单胺类神经递质的影响,探讨其改善小鼠学习和记忆能力的作用机制。
方法将老化小鼠随机分为抗快速老化亚系1(SAMR1)对照组、快速老化亚系8(SAMP8)模型组、HRCF组和安理申组,每组20只,持续灌胃给药3个月。
给药结束后,通过Morris水迷宫测试各组小鼠学习和记忆成绩的变化,采用高效液相色谱法检测各组小鼠脑组织中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的变化。
结果模型组快速老化小鼠隐蔽平台的逃避潜伏期明显延长,脑组织中NE、DA、5-HT及5-HIAA含量显著降低(P＜0.01)。
与模型组比较,HRCF组小鼠隐蔽平台的逃避潜伏期明显缩短,脑组织中NE、DA、5-HT及5-HIAA含量明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01)。
结论HRCF能够改善痴呆模型小鼠的学习和记忆能力,其机制可能与调节脑组织内单胺类神经递质的含量有关。
Abstract：Objective To explore the influence of Hedysari radix concentrations fluid (HRCF) on learning and memory and its effect on cerebral monoamine neurotransmitters in senescence accelerated mice. Methods The senescence accelerated mice were randomly divided into the senescence accelerated mouse/resistance 1 (SAMR1) control group, senescence accelerated mouse/prone-8 (SAMP8) model group, HRCF treatment group and aricept treatment group. After 3 months of intragastrical treatment, the learning and memory ability changes and content of norepinephrine, dopamine, 5-hydroxytryptamine and 5-hydroxyindoleacetic acid were detected respectively using Morris water maze and high performance liquid chromatography. Results In the model group, the hidden platform test indicated that the latency to find the hidden platform was remarkably prolonged, and the content of norepinephrine, dopamine, 5-hydroxytryptamine as well as 5-hydroxyindoleacetic acid were significantly reduced (P＜0.01). Compared with the model group, the latency of hidden platform test was remarkably shortened (P＜0.05) and the content of norepinephrine, dopamine, 5-hydroxytryptamine as well as 5-hydroxyindoleacetic acid were obviously increased in HRCF treatment group (P＜0.01). Conclusion HRCF could improve learning and memory ability of SAMP8 and the influence may related to increasing the content of cerebral monoamine neurotransmitters.Key words：Hedysari radix concentrations fluid；senescence accelerated mice；maze learning；monoamine neurotransmitters随着我国人口老龄化的出现,老年性痴呆(Alzheimer disease,AD)患者数量显著增加,发病率约占老年人口的7.3%,给个人、家庭和社会带来沉重的负担[1-2]。
胎衣不下奶牛胎儿胎盘中IL-2含量的测定
正常 鼠无 此 现 象 。给 正 常 怀 孕 小 鼠注 射 Ｉ 一 Ｌ ２后 可 引起 附植 障 碍 ， 导致 流产 或 流产 率 提高 。但 是 ， 并 适
量 的 Ｉ － 是 胚 胎 发 育 所 必 需 的 。怀孕 病 率 高 达 １ ～ ２ ［ 。据 河 北 、 京 等 有 Ｏ ５ １ ］ 北
（ ．Ｃ ｌｅ ｅ ｆ Ｌ Ｓ ｉｎ ｅ Ｆｕ ｉｎＡｇ ｉ ｌｕ ｅａ ｄ Ｆｏ ｅｔｙ Ｕｎｖ ｒｉ Ｆｕ ｈ ｕ Ｆｕ ｉ ｎ ３ ０ ０ ， ｈ ｎ ； １ ｏｌｇ ｉ ｏ ｃｅ ｃ ， ｊａ ｒｃ ｔ ｒ ｎ ｒ ｓ ｉｅ ｓ ｙ， ｚ ｏ ， ｊ ａ ， ５ ０ ２ Ｃ ｉａ ｕ ｒ ｔ
关键 词 ： 衣 不下 ； 胎 胎盘 ；Ｌ ２ 奶 牛 Ｉ一；
中 图 分 类 号 ：８ ７ ２ ￥５．３ 文献标识码 ： Ａ
文 章 编 号 ： ０ ７５ ３ （ ０ ０ ０ — ０ １０ １０ —０ ８ ２ １ ）８０ ４－４
胎 衣 不 下 （ ｌｃｎａ ｒｔｎｉｎ 又称 胎 衣滞 留 、 Ｐ ａｅ ｔ ｅｅ ｔ ） ｏ 息胞 。母 牛分 娩后 ， 过 １ 经 ２ ｈ胎 衣 还 未 全 部 排 出 ， 即为胎 衣不 下 。胎衣 不下是 奶 牛 常见 的产 科 疾病 之
层 细胞产 生 ， 有 促 进 妊 娠 和 破 坏 妊 娠 双 重 作 用 。 具 研究 表 明［ ，Ｌ ２主要参 与子 宫黏 膜免 疫排 斥 反 应 ， ３ Ｉ－ ］ 不利 于妊 娠 的维持 。流 产模 型母 鼠怀 孕时母 胎 界 面 表达 Ｉ ＿ ｍＲ Ｌ２ ＮＡ， 产生 Ｉ ＿ 、Ｆ ７和 ＴＮ卜ａ 而 并 Ｌ ２ Ｉ Ｎ一 ，
健康 对 照组和 胎 衣不 下组 ， 集健 康奶 牛 和胎 衣 不下奶 牛 的胎 儿 胎盘 ， 采 制备 胎 盘 组 织 匀浆 液 ， 酶联 免 疫 吸 用
警惕披上“科学”外衣的热卖保健品
2018年3月46相真Quality Observation警惕披上“科学”外衣的热卖保健品什么“信息茶”、“信息水”，近年来，又是披上了科学的外衣，以一些专业词汇讲些似是而非的理论，如什么离子水、远红外的床上用品、核酸纳米等等，在一个产品神话被戳穿后，总是会有新的产品神话被制造出来，直到它又被戳穿。
吃酵素并不能补酵素酵素，这个词来源于日本，在国内我们称之为“酶”。
首先酶是什么?酶是可以催化各种生物化学反应的高分子物质，大多数酶是蛋白质，具有高度的专一性，只催化特定的反应。
人体和哺乳动物含有，水果皮，植物等酿制酵素的行为也在不少地方风行起来。
网上的一些关于服用酵素的宣传语，发现其中存在大量的谬误。
例如，人类一生所能合成的酶，是一定量的，随着年龄的增加，这些酶不断减少；酶不足，会引起免疫力低下，易胖体质；通过服用酵素片或者酵素饮料可以补充体内所缺少的酵素。
从分子生物学的观点来看，这些说法，非常不科学。
体内的酶，并不是消耗品。
它作为催化剂在生物反应前后无变化，不能说使用一次就消失。
而且，人体内很多种特异酶，只有在需要的时候才会被合成。
维持人体生命活动的酶，往往是因为人类收到了某种生理信号，这个信号刺激细胞内的基因通过转写翻译等过程，才会在细胞内合成所需要的酶。
现代医学已经证明，因为某些酶在人体内不能正常工作，或者因先天性的原因导致某些酶先天不能合成，可能会导致疾病的发生。
酶是蛋白质的一种，所有的蛋白质又由小分子的氨基酸组成。
人们在吃肉或鱼时，其中的蛋白质会被体内的胃酸等消化酶分解成小分子氨基酸，这些进入肠道的氨基酸再被小肠吸收。
因此，酵素进入体内不会被吸收，也就是说人们摄取的不过是氨基酸而已。
因此在临床上有通过服用酶抑制剂帮助酶正常工作来缓解疾病的治疗手段。
比如，服用二肽基肽酶-4抑制剂可以治疗糖尿病，服用血管紧张肽I 转化酶抑制剂可以缓解高血压。
不过，体内的酶工作失常会引起疾病，但也不能一概而论地认为一定会造成免疫力低下、易胖或代谢紊乱，还需要具体问题具体分析。
国产牛肺表面活性物质治疗早产儿呼吸窘迫综合征的临床效果
国产牛肺表面活性物质治疗早产儿呼吸窘迫综合征的临床效果引言早产儿呼吸窘迫综合征（RDS）是早产儿常见的一种疾病，是由于肺部未充分成熟而导致严重的呼吸困难。
RDS的主要原因是早产儿肺泡内表面活性物质（Surfactant）的缺乏，使得肺泡不能足够展开，并增加了肺泡的表面张力，导致呼吸功能障碍。
为了治疗早产儿呼吸窘迫综合征，目前临床上广泛采用人工合成的表面活性物质，国产牛肺表面活性物质作为替代品也被越来越多的医院所采用。
本文旨在探讨国产牛肺表面活性物质治疗早产儿呼吸窘迫综合征的临床效果。
一、国产牛肺表面活性物质的制备与特点国产牛肺表面活性物质是由国内多家药企采用牛肺提取物为原料，通过一系列的精细提取和纯化工艺制备而成。
该产品主要含有磷脂、表面活性蛋白和神经酰胺等成分，具有良好的生物相容性和生物活性，可用于治疗呼吸窘迫综合征等疾病。
国产牛肺表面活性物质具有较低的成本和稳定的质量，受到了广泛的认可和应用。
二、临床研究进展随着国内外对于早产儿呼吸窘迫综合征治疗技术的不断提高，国产牛肺表面活性物质在临床应用中的疗效也不断得到验证。
近年来，在该领域展开的相关临床研究表明，国产牛肺表面活性物质治疗早产儿呼吸窘迫综合征具有显著的临床效果。
一项在多家医院进行的临床试验显示，使用国产牛肺表面活性物质治疗早产儿呼吸窘迫综合征，能有效缓解患儿的呼吸困难，改善氧合功能，减少机械通气时间和机械通气相关并发症的发生率。
另一项临床研究结果显示，使用国产牛肺表面活性物质治疗早产儿呼吸窘迫综合征，显著降低了病死率和并发症发生率，提高了早产儿的存活率和生存质量。
三、国产牛肺表面活性物质的优势与传统的人工合成表面活性物质相比，国产牛肺表面活性物质具有以下几点优势：1. 生物相容性好：国产牛肺表面活性物质来源于天然的牛肺提取物，其成分和结构与人体内源性表面活性物质相似，因此具有较好的生物相容性，能够减少对患儿的不良反应。
2. 生物活性高：国产牛肺表面活性物质含有丰富的表面活性成分，能够迅速降低肺泡表面张力，改善肺泡的稳定性，提高患儿的氧合功能，有效改善了呼吸功能障碍。
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图一 两种堵塞模型
经过研究发现不同的过滤模型均符合如下对应关系：
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其中： t = 过滤时间 V = 滤过体积 k = 常数 n = 堵塞模型
对于逐渐堵塞模型，上式中 n 为 1。即以 t/V 和 t 作图，可以发现两者为线性关系(图二)。因此， 如果过滤过程符合逐渐堵塞模型，我们就可以根据该直线预测较长时间后的堵塞情况，从而对工艺所 需要的过滤器面积进行预测。
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2009 年 12 月 第四期 导读
本期主要介绍滤器验证的相关信息，包括法规部门的要求及验证过程中责任划分等；并为大家简介过 滤器选择方法 Vmax 恒压载量测试实验，希望大家能了解如何选择适合您的生产需求的滤器。最后通 过对 NovAseptic 系列产品的解讲，帮助大家了解国内生物制药（含出口型）企业选用设备的标准。 供大家参阅。
附：除菌过滤器验证过程中供货商和用户的责任
1. 滤器使用者和滤器生产者一般用到的测试标准
标准
滤器使用者
过滤器
细菌截留与完整性测试相关数据
滤器生产者
滤膜
滤芯
Q
Q
完整性测试
水/溶剂
V
产品
V
完整性测试方法和选择
V
细菌 截留
水，SLB﹡等
产品
V
细菌截留、完整性测试方法
V
Q/R/L R
Q/L
Q
Q/R/L Q/L Q
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除菌过滤器验证过程中的责任划分
顿昕 ( 验证经理 bill_dun@)
随着人们对于药品过滤除菌工艺中存在风险的认识，以及国家相关法规的出台，越来越多的射
摘要： 简要介绍 PED 认证中有关产品设计、制造标准、认证模式选择、材料的特殊批准、材料的符合性认证、 无损检测人员资格认定和低于Ⅰ类的承压设备或组合件不得使用 CE 标志等规定与要求。
关键词： 承压设备指令（Pressure Equipment Directive，PED）、产品标准、认证模式、材料使用
以下为重组蛋白工艺中的典型 Vmax 和通量数据，仅供参考
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比率
(psi)
(psi)
（100%）
53.1psi
43.7
52.8 psi
43.6
53.1 psi
43.5
52.1 psi
42.4
52.1 psi
42.8
55.3 psi
46.1
55.4 psi
46.5
53.4(平均)
44.1(平均)
-82.6
用产品湿润的平均泡点除以用水浸润的平均泡点,比值为（0.826）。
自欧盟承压设备指令（Pressure Equipment Directive, 简称 PED）于 2002 年 5 月 29 日起强制 执行以来，法国国际检验局（BUREAU VERITAS，简称 BV）作为欧盟批准，编号为 0062 的授权检验 机构（Notified Body），已经在国内对 60 余家包括锅炉、压力容器、管道、阀门、压力锅、灭火器等 承压设备制造企业和材料（包括铸锻件）生产企业、焊工、焊接工艺评定项目执行了 PED 认证和符合 PED 认证。
在这个例子中用水为浸润液的最低泡点为 53.7psi（来自微生物截留测试）
在微生物截留测试中得到的水润湿的最低泡点值,用它乘以比率可计算得到产品润湿泡点值为
44.4psi(0.826*53.7psi）
计算第二列产品润湿起泡点的标准偏差(s)为 1.587psi。95%的置信限, n-1 的自由度时,单侧 t 检验值可
◇ 除菌过滤器验证过程中的责任划分— — — — — — — — — — — — — — — — — —2 ◇ 统计校正产品湿润起泡点— — — —— — — — — — — — — — — — — — — — —3 ◇ 过滤器选择系列——恒压载量测试实验 Vmax— — — — — — — — — — — — — — —4 ◇ 关于执行 PED 认证中的几个问题 — — — — — — — — — — — — — — — — — — 9 ◇ NovAseptic GMP 磁力搅拌器耐温情况说明— — — — — — — — — — — — — — — 16 ◇ NovAseptic 磁力搅拌器的性能：搅拌均一性检测 — — — — — — — — — — — — —17 ◇ 过滤器的验证(法规部门的要求\两级除菌过滤的考虑\双级除菌过滤器的在线蒸汽灭菌)— — — — — —20
以确定。在这个例子中，n=7，因此，t95,6=1.943，用标准偏差 s 乘以 t，得到矫正数值为 3.084psi （1.943*1.587psi）
计算矫正后润湿产品的泡点用等式：CPBP=PBPmin-（tаdf）s CPBP=44.4psi-3.084psi=41.3psi
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统计校正产品湿润起泡点
对于所有的分析测试，例如产品湿润泡点的计算，都有测量误差。一组数据变化越大，预测最
终泡点的不确定性就越高。为了弄清楚产品湿润泡点计算的不确定性，下面的例子含有一个数据统计
评价，来证明所选择的方法是否恰当。
例：在置信区间 95%的单侧 t 检验:
起泡点（水为浸润液） 起泡点（产品为浸润液）
化学相容性对滤器完整性影响
V
Q
Q
毒性测试
Q
Q
析出物
V
Q/R/L
Q/R/L
灭菌方法对滤器完整性的影响
V
Q
Q
Q: 确认 V：验证-具体工艺 R：建议验证 L ：过滤器放行标准 SLB﹡ ：含盐、乳糖的液体培养基
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产品应用专员 林红波 paul_lin@
以下文章有助于了解国内生物制药（含出口型）企业选用设备的标准、对 3.1 证书要求的原因
关于执行 PED 认证中的几个问题
摘自 /3asmeforum/5qz/STAM2006-31.htm（中石协 ASME 规范产品协作网(CACI)） 作者：沈行道 SHEN Xingdao；法国国际检验局北京办事处(BUREAU VERITAS)
无时间限制时，工艺所需的滤膜面积为：
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Area = Vb/Vmax, 其中 Vb 为工艺体积 具有工艺时间(Tb)限制时，所需的滤膜面积为： Area = Vb/Vmax + Vb/(QiTb)
通常情况下，Vmax 实验由 Millipore 工艺开发工程师按照如下步骤进行： 1 安装 Vmax 系统（压力罐，压力表，带阀门的出口，压缩空气入口，47mm 膜夹 具或 OptiScale 过滤器，天平或量筒）（图三）。 2 连接压缩空气到压力罐，调节压力至试验压力并检查有无泄漏，然后释放压力。 3 连接所需测试的过滤器（47mm 膜片或 OptiScale 过滤器），需事先润湿膜片，在 滤器下游安装阀门便于上游排气。 4 关闭滤器上下游阀门，在压力罐中装入料液。 5 调节压力至设定压力。 6 打开滤器上游阀门，润湿滤器；然后打开排气口阀门充分排出空气。 7 在润湿和排气后，打开下游阀门，当第一滴料液进入收集容器时开始秒表计时。 8 滤液收集在烧杯或其它合适的容器中。 9 在适当时间间隔测定滤液体积（通常可以测定重量进行转换），持续 8-15 分钟。 10 将数据输入软件，确定 Vmax 逐渐堵塞模型的有效性，试验曲线需满足 r²>0.99。 11 Vmax 试验结束后按要求清洁和消毒（如有必要）试验装置。 12 分析试验数据并完成报告。
我们可以从该直线求出 Vmax 和 Qi Vmax = 1/0.0008 =1250ml 由于该滤膜面积为 13.8cm2,所以单位面积 Vmax 为 1.25L/0.00138 m2= 905.8 L/m2 Qi = 1/0.0056 = 178.6ml/min = 10.7 L/h 单位面积 Qi 为 10.7L/h / 0.00138 m2 = 7765.2 LMH 因此，在无时间要求时，所需 Millipore Express SHF 最小面积为 Amin = Vb/Vmax = 1000L / 905.8 L/ m2= 1.10m2 要求在 2 小时内完成过滤，所需 Millipore Express SHF 最小面积为 Amin = Vb/Vmax + Vb/(QiTb) = 1000/905.8 + 1000/(7765.2X2) = 1.17m2 在通常情况下，需要在最小面积基础上设定一个 1.2~1.5 左右的安全系数。所以在该工艺中一个 30”的 Millipore Express SHF 滤芯过滤器(实际过滤面积为 1.62)，可以满足过滤工艺的要求，安全系 数为 1.38。