碱性蛋白酶钝化胰蛋白酶抑制剂的研究
大豆中的胰蛋白酶抑制剂及其提取方法解读
大豆中的胰蛋白酶抑制剂及其提取方法解读大豆中的胰蛋白酶抑制剂是一种重要的生物活性物质，它能够抑制胰蛋白酶的活性，从而保护大豆不受胰蛋白酶的分解。
这种抑制剂在食品、医药等领域都有广泛的应用。
为了提取大豆中的胰蛋白酶抑制剂，可以采用以下步骤：1. 制备大豆胰蛋白酶抑制剂初级上清液：将干大豆加水浸泡过夜后磨碎并充分混匀成浆液，然后搅拌后加溶液用3层以上的纱布过滤，得到滤液和豆渣。
接着以2-5:1.5的比例添加柠檬酸钠和磷酸三钠，直至滤液ph值达到4.5～6.0，对添加柠檬酸钠和磷酸三钠后的滤液进行浸提并水浴，水浴后离心去除杂蛋白，得到初级上清液。
2. 制备大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物：将初级上清液加热，并在上清液中添加硫酸铵，直至硫酸铵浓度30%，搅拌后得到次级搅拌液。
将次级搅拌液用滤纸过滤去脂，并将滤液静置过夜，即可得到粗提上清液。
在粗提上清液中加入硫酸铵，直至硫酸铵浓度50%，搅拌沉淀后得到大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物。
以上步骤完成后，就可以提取到大豆中的胰蛋白酶抑制剂。
这种抑制剂的应用可以保护大豆不受胰蛋白酶的分解，同时也可以应用到食品、医药等领域中。
在提取过程中，需要严格控制各个步骤中的条件和操作，以保证提取的质量和效率。
除了作为食品和医药领域的原料，大豆胰蛋白酶抑制剂还可以用于研究胰蛋白酶的活性及其作用机制。
通过进一步纯化大豆胰蛋白酶抑制剂，可以获得更高纯度的抑制剂，从而更好地了解其结构和功能。
此外，大豆胰蛋白酶抑制剂的研究还可以与人工智能技术相结合，开发出更加智能化的方法来提取和纯化这种抑制剂。
例如，可以利用人工智能算法预测大豆胰蛋白酶抑制剂的活性，优化提取和纯化过程，提高抑制剂的产量和质量。
此外，大豆胰蛋白酶抑制剂的活性研究还可以与营养学、生理学等领域相结合，研究其在人体内的生理作用和营养价值。
例如，可以研究大豆胰蛋白酶抑制剂对人体肠道健康的影响，以及其在预防和治疗某些疾病方面的应用。
同时，大豆胰蛋白酶抑制剂的研究还可以与农业领域相结合，开发出更加环保和高效的农业生产方式。
常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度
常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步便是蛋白质的提取。
蛋白质的提取过程中，我们要经常加和蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。
另外在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可少的，本文总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF，Leupeptin 亮肽素，Aprotinin抑肽酶，Pepstatin胃蛋白酶抑制剂，EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠，Na3VO4 原矾酸钠，BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠，Na2P2O4 焦磷酸钠等。
对这些蛋白酶抑制剂的溶解配制，贮存液与工作液浓度，保存都做了详细的说明。
蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶（可逆的地面处理）。
溶解性：溶于异丙醇，乙醇，甲醇和丙二醇果>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇，+25℃时稳定至少9个月分子量：174.2使用：贮存浓度：200mM，工作浓度：1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，纤溶酶，和组织蛋白酶B 溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。
4℃一周稳定,分成小份冷冻在-20℃至少6个月分子量：C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6使用：贮存浓度：1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶，激肽释放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如，tris，0.1M，pH8.0）。
pH约7-8的溶液在4℃可保存1周，分装保存在-20℃可至少保存6个月。
避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。
蛋白酶及其抑制剂的研究及其应用
蛋白酶及其抑制剂的研究及其应用蛋白酶是一种具有催化作用的生物酶，负责水解蛋白质中的肽键。
蛋白酶的活性能够调节生物体内的各种生物过程，如消化、免疫、信号传导等。
然而，如果蛋白酶的活性失控，就会导致一系列的疾病。
为了研究和控制这些疾病，科学家们一直在致力于开发蛋白酶抑制剂，既可以矫正蛋白酶活性，同时又避免过度抑制导致的副作用。
蛋白酶抑制剂是指那些能够调整蛋白酶活性的化学物质，其通过与蛋白酶分子中的特定结构相互作用，从而改变或者阻碍酶活性。
其中最重要的抑制剂类别是蛋白酶抑制剂类药物，具有多样的结构与功能，并在临床中被广泛应用。
通常，把蛋白酶抑制剂分为可逆和不可逆两类。
可逆抑制剂是指那些可以与蛋白酶非共价结合而轻松解离的化合物。
这类抑制剂的特点是具有较高的亲和力，可以与特异性受体紧密结合，从而降低酶的活性。
可逆抑制剂中，最常用的是竞争性抑制剂，如甲状腺素、抗生素和酪氨酸酶抑制剂。
不可逆抑制剂则是指那些通过共价碳-氧化物、碳-氮或者碳-硫等非常稳定的化学键与蛋白酶结合，从而永久性地阻碍酶活性。
由于不可逆抑制剂具有极高的亲和力和选择性，一般在科学实验中应用较多，如对组织酶、多肽酶和蛋白酶抑制剂进行研究时，一般都会选择这一类抑制剂进行研究。
在生物科技和医药领域，蛋白酶抑制剂还有很多应用。
例如，在医学上，许多蛋白酶抑制剂用来处理某些疾病，如心血管疾病、痉挛性肌病，以及白血病等；在生物科技中，蛋白酶抑制剂还可以用于控制蛋白酶的活性，以防止因蛋白酶引起的变质等问题。
此外，蛋白酶抑制剂在食品加工中也有重要的应用，能够控制酶的活性来改变美味和营养成分。
总之，蛋白酶抑制剂的研究和应用因其在生物学、医学和食品加工等领域具有重要的应用前景而备受关注。
将来，科学家们还将更加深入地研究蛋白酶抑制剂及其功能，为人们提供更好的生活品质。
豆制品中胰蛋白酶抑制剂的研究
·食品科技·豆制品中胰蛋白酶抑制剂的研究杨丽杰吴非霍贵成孙占海（东北农业大学）【摘要】对豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性进行了调查，发现水解蛋白、乳用蛋白、组织蛋白、水豆腐、干豆腐中胰蛋白酶抑制剂活性均被钝化了以上；对腐乳、豆酱中胰蛋白酶抑制剂活性进行检测，结果未检出。
无糖豆粉、豆粉、豆浆以及内酯豆腐中胰蛋白酶抑制剂钝化率低于。
比较了种热处理方式对胰蛋白酶抑制剂的钝化效果，得到巴氏杀菌可钝化胰蛋白酶抑制剂；高压杀菌可钝化，超高温灭菌可钝化。
【关键词】豆制品；胰蛋白酶抑制剂；热处理中图分类号：文献标识码：文章编号：（）大豆营养价值高，是人和动物的主要蛋白质来源，但其中含有胰蛋白酶抑制剂，有碍营养素的吸收，导致食用后身体不适或豆制食品感官上的缺陷，严重时会造成人或动物的死亡。
豆制品中胰蛋白酶抑制剂的存在还没有引起人们足够的重视。
目前失活胰蛋白酶抑制剂主要采用热处理，为达到彻底钝化而采用的过度加热可使大豆中的蛋白质溶解度降低，营养物质遭到破坏。
而且，胰蛋白酶抑制剂比较耐热，热处理的效果也很有限。
本研究对市场上多种豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性进行了测定调查，比较了常用热处理方式对胰蛋白酶抑制剂的钝化效果，有利于人们对豆制品安全性的认识，为更彻底地失活胰蛋白酶抑制剂提供依据。
材料与方法材料与设备腐乳、干豆腐、内酯豆腐、豆浆、水豆腐、豆酱、豆粉为市售；无糖豆粉、水解蛋白、乳用蛋白、组织蛋白为大豆蛋白食品公司提供；生豆粉为实验室自备；所用化学试剂为分析纯或生化试剂。
牛胰蛋白酶、、均由美国公司生产。
仪器设备：振荡培养箱（上海医用仪表厂）、离心机（北京医用离心机厂）、型凯氏定氮仪（北京宜兴科教仪器研究所）、多功能恒温水浴锅型（沈阳市医疗器械厂）、紫外可见分光光度计型（日本岛津公司）、高压灭菌器（上海医用核子仪器厂）。
试验方法豆制品中常规营养成分测定d水分含量测定：常压干燥法。
i粗蛋白测定：微量凯式定氮法。
蛋白酶抑制剂
蛋白酶抑制剂引言蛋白酶抑制剂是一类用于抑制酶活性的化合物，其中蛋白酶是一种催化蛋白质水解的酶。
蛋白酶在生物体中起着重要的调控作用，参与多种生物反应的调节和控制。
然而，在某些情况下，蛋白酶的过度活化可能导致疾病的发生和发展。
因此，研发蛋白酶抑制剂成为一种重要的医药研究方向。
本文将介绍蛋白酶抑制剂的基本分类、作用机制以及在药物研发中的应用。
分类根据蛋白酶抑制剂对酶活性的抑制方式，蛋白酶抑制剂可分为两大类：1.反式抑制剂：反式抑制剂与酶结合后形成稳定的酶-抑制剂复合物，从而阻止酶催化反应的进行。
典型的例子是蛋白酶抑制剂Aprotinin，它通过与蛋白酶结合形成稳定的复合物，从而抑制蛋白酶的活性。
2.逆式抑制剂：逆式抑制剂通过与酶催化中心结合，改变酶的构象和活性。
这类抑制剂通常是模拟酶底物的分子结构，与酶催化中心发生特异性的相互作用。
逆式抑制剂的典型例子是酶的底物类似物，如硫氰酸酰胺（p-Tosyl-L-phenylalanine chloromethyl ketone，TPCK）可以选择性地抑制胰蛋白酶的活性。
作用机制蛋白酶抑制剂能够通过不同的机制来抑制蛋白酶的活性。
以下是几种常见的作用机制：1.受体拮抗作用：某些蛋白酶抑制剂能够与蛋白酶结合并阻断其与受体的相互作用，从而抑制了受体的活化。
这种机制在很多药物设计中都有重要的应用。
2.亲和力增强：一些蛋白酶抑制剂可以增强与酶的结合亲和力，从而阻止酶底物结合，进而抑制了酶的活性。
3.酶底物竞争：逆式抑制剂通过与酶催化中心竞争底物结合位点，从而阻断底物与酶的结合，进而抑制了酶活性的发生。
4.构象改变：某些蛋白酶抑制剂能够与酶发生特异性相互作用，改变酶的构象从而影响酶的活性。
应用蛋白酶抑制剂在医药领域有着广泛的应用。
以下是一些典型的应用示例：1.抗癌药物：蛋白酶在肿瘤细胞中起着重要的作用，因此蛋白酶抑制剂被广泛用于抗癌药物的研发。
例如，蛋白酶抑制剂Paclitaxel可以通过抑制肿瘤细胞内的蛋白酶活性来抑制细胞的增殖。
蛋白酶生产和应用的进展
蛋白酶生产和应用的进展蛋白酶是生物世界中一类重要的酶，具有广泛的应用价值。
它们能够分解蛋白质，使其转化为更容易被机体吸收的氨基酸或小分子肽。
在食品、医药、环保等领域，蛋白酶都发挥着重要的作用。
本文将围绕蛋白酶的生产和应用进行深入探讨，展望其未来的发展趋势。
蛋白酶的生产蛋白酶的生产方法主要有三种：微生物发酵、化学合成和生物合成。
微生物发酵微生物发酵是生产蛋白酶的最常用方法。
通过选用合适的微生物菌种，在适宜的生长条件下进行培养，以获得大量的微生物菌体及分泌的蛋白酶。
该方法的优点是菌体生长快、产量高，而且生产成本相对较低。
但微生物发酵过程中，发酵条件及培养基的组成对蛋白酶的产量和性质有很大影响，需要严格控制。
化学合成化学合成是通过化学反应直接合成蛋白酶的方法。
该方法具有操作简便、成本低等优点。
但是，化学合成方法需要使用有机溶剂，有时还需加入重金属催化剂，可能导致环境污染和健康问题。
生物合成生物合成是利用细胞内基因表达系统合成蛋白酶的方法。
通过基因工程技术将目的基因导入受体细胞，在适宜的生长条件下进行培养，实现蛋白酶的高效表达。
生物合成的优点在于无污染、高效、定向，但需要具备基因工程技术的专业知识和技能，生产成本相对较高。
蛋白酶的应用食品领域在食品领域，蛋白酶主要用于肉类、奶制品、面制品等食品的加工过程中。
通过使用蛋白酶，能够提高食品的营养价值、改善口感、风味和质地等方面。
蛋白酶还被用于生产新型的功能性食品，如高纤维蛋白食品、低过敏性食品等。
医药领域在医药领域，蛋白酶主要用于药物生产和医学研究。
例如，胰蛋白酶被用于消化蛋白质，提高药物的吸收效果；胶原蛋白酶可用于治疗骨折、关节炎等疾病；弹性蛋白酶可用于治疗血管疾病等。
蛋白酶在疫苗生产和临床诊断方面也有广泛应用。
环保领域在环保领域，蛋白酶主要用于废水处理和污染环境的修复。
蛋白酶能够分解废水中的有机物，将其转化为更易被微生物降解的小分子物质，从而实现废水的净化。
酶法钝化大豆胰蛋白酶抑制剂研究
２结果与讨论
２１蛋 白酶活 力 ．
２１ 标 准 曲 线 制 作 ．１ ．
收稿 日期 ： ０２－５－５ ２０－０－０ － －
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１ ０
粮套 与油脂
Ｓ ０
２０ 第 ６期 ０２年
表 ２ 酪氨酶溶液浓度 （ 与吸光值 （ 关系 ｃ） Ａ）
时１ ０分钟 后， 加入 ０５ 升 ３ ％ 醋 酸终 止反应 ， １ ｍ 比 毫 ０ ４ ０ｎ 色。按 同样方法同时测定空白溶 液， 只是先加入 ３ ％ 醋酸 ， ０
０前言
大豆 是优质植物蛋 白源 ， 需氨基酸丰 富平衡， 必 但其中
含 有的 胰蛋 白酶 抑制 剂会苊 害人体 健康 ， 造成营 养价值 下 降。胰 蛋 白酶 抑制剂对人 的危害主要 是抑制人体分泌 胰蛋 白酶 ， 因此食用 未完全去 陈胰蛋 白酶抑制 剂的豆 制 品时 ， 不 仅抑制人体对蛋 白质吸收 ， 同时还可能会 引起胰腺肿大等 中 毒症状… ［ 。本 文 目的就在于 从几种常用 酶 中筛选 出能 够 水解胰蛋 白酶抑制剂的最佳酶， 从而 为食品领域钝化豆制品
一
邑６ ０
耋４ ０
啻 ２ ０
吸 光值 Ａ 为纵 坐 标 ， 氨 酸浓 度 Ｃ ｐ ／ ）为横 坐 酪 （ｇｍ１
标， 绘制标准 曲线 ， 如图 １
１材料与方法
１１材料 ． 低温 脱脂豆 粕 由黑龙 江三江 食 品公司提 供 ： 中性蛋 白 酶、 碱性 蛋 白酶、 酸性 蛋 白酶和 木瓜蛋 白酶 均 由广东江 门酶
制剂公司提供。 试剂 ：睫蛋 白酶 （ｉｍａ公司） Ｂ Ｐ Ｓｇ 、 Ａ ＮＡ（ｉｍａ公司） Ｓｇ 、 福林试 剂 （ 京鼎 国生物 技术发 展 中心 ）Ｔ ｉ（ 北 ｒ 上海 华舜生 ｓ
蛋白酶体抑制剂作用机制_概述说明以及解释
蛋白酶体抑制剂作用机制概述说明以及解释引言部分内容：1.1 概述蛋白酶体抑制剂是一类能够干扰细胞内蛋白酶体功能的化合物或分子。
蛋白酶体是细胞中主要负责蛋白质降解的细胞器，通过这一过程可以清除老化、变性或异常的蛋白质，并参与调控许多生物学过程。
因此，研究和理解蛋白酶体抑制剂的作用机制具有重要的理论和实践意义。
1.2 文章结构本文主要从以下几个方面对蛋白酶体抑制剂作用机制进行探讨：首先介绍了什么是蛋白酶体抑制剂以及其在细胞中的功能和调控；接着概述了常见的蛋白酶体抑制剂及其分类，并阐述了它们在药物研发中的应用和前景展望；然后解释了蛋白酶体抑制剂对蛋白降解途径和产生效果的机理，并探讨了其对生物学意义和影响因素；最后总结了文章的主要内容，并展望了蛋白酶体抑制剂在未来研究和应用方面的发展。
1.3 目的本文旨在对蛋白酶体抑制剂的作用机制进行综述，希望通过深入探讨蛋白酶体抑制剂对细胞内蛋白酶体的影响，加深我们对这类化合物或分子的理解，并为进一步研究和开发具有潜力的药物提供参考。
相信通过本文的阐述，读者能够更好地认识和理解蛋白酶体抑制剂在生物学领域中所扮演的关键角色。
2. 蛋白酶体抑制剂的作用机制:2.1 什么是蛋白酶体抑制剂:蛋白酶体抑制剂是一类能够干扰蛋白酶体功能的化合物或药物。
蛋白酶体是细胞内起着关键作用的小囊泡结构，负责进行细胞内的蛋白质降解和回收。
2.2 蛋白酶体在细胞中的功能和调控:蛋白酶体参与了多种生物学过程，包括细胞周期调控、免疫应答、应激响应以及疾病发展等。
蛋白酶体内含有多种不同类型的蛋白水解酶（即蛋白酶），它们协同作用来降解细胞内已经老化或异常的蛋白质，并将其分解成氨基酸片段供细胞再利用。
2.3 蛋白酶体抑制剂对蛋白酶体的影响与作用机制:蛋白酶体抑制剂可以干扰或阻止蛋白酶体的正常功能。
它们通过不同的机制影响蛋白酶体，例如抑制蛋白酶体中的水解酶活性、阻止蛋白质进入蛋白酶体或干扰蛋白质在蛋白酶体内的降解过程。
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酶用量 底物浓 度 钝化率 （ Ｌ／ Ｕ ｇ ） （ ％） （ ％）
１ ５ ０． １ ５ ０． ４． ６ ８ ４． ６ ８ ４． ６ ８ ４． ６ ８ １．４ ６ １ １．４ ６ １ １．４ ６ １ １ ．４ ６ １ １ ５ ０． ０ １ ５ ０． ０ １ ５ ０． ０ １ ５ ０． ０ ２ ０ １ １ ６ ５． ２ １６ ．２ １ ７ ０． ５ １ ７ ０． ５ １ ７ ０． ５ １ ７ ０． ５ １ ７ ０． ５ １ ７ ０． ５ １ ７ ０． ５ １ ７ ０． ５ ４ １ ．２ ４ １ ．２ ４ １ ．２ ４ １ ．２ ４ １ ．２ ４ １ ．２ ６ ６ ８． ５ ９ ．２ ３ ６ ．４ ５ ５ ０． １ ０ ２． ５ ７ ７ ４． ０ １ ２ ５． ８ ５ ３ ４． ０ ２ ９ ７． ５ ７ ２１ ５． ３ １ ２． ９ ７． ０ １ １ ９ ７． ０ １ ８ ５． ６ １ ９ ７． ８ １ ２ ８． ６
液 ，准 确 计 时 １ｍｎ 后 ， 加 入 ０ｉ ０ ５ ３ ％醋酸终止反应 ，４０ ｍ 比 ．ｍＬ ０ １ｎ
色。按同样方 法同时测定空白溶 液， 只是先加 入 ３ ％醋 酸 ，然 后加入牛 ０ 胰蛋白酶溶液。每一个待测样设 ３ 个
＜油 工 食 机 ＞ ｏ １ 圆 粮 加 与 品 械ｚ ￣ ２ ｏ ｚ 期
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糕
重复试验 ，结果取平均值。
④无糖豆粉溶液的水解。将无糖
豆粉 配制 成一 定 浓度 的 溶液 ，倒 入 水
・
开 发研 究 ・
式中 ，）为 ． Ｊ
吸光度；ｚ为浓 试验号
度。
表 ３ 试验方案及 数据
ｐ Ｈ值
９． ０ ０ ９． ０ ０ ７． ８１ １ １ ０． ９ ７． ８１ １ １ ０． ９ ７． ８１ １ １ ０． ９ ７． ８１ １ １ ０． ９ １１ ０ ．０ ７． ０ ０ ９． ０ ０ ９． ０ ０ ９． ０ ０ ９． ０ ０
１２ 试验 方法 ．
会导致氨基酸的降解和降低豆制品的 营养价值。考虑到胰蛋白酶抑制剂是
一
种蛋白质 ，是由 Ｌ一氨基酸通过肽
键相互结合而成 ，所以采用酶法钝化 胰蛋白酶抑制剂是可行的。 作者通过前期试验研究发现，不 同蛋白酶都可在不 同程度上钝化豆制 品中胰蛋白酶抑制剂活性 ，其中碱性
营养价值即最大的蛋白质效率。有报 道表明，商品豆制品仍残留有很高的
胰蛋白酶抑制剂活性 ，在消除抗营养 因子的处理上是不充分的。 目前大豆中抗营养因子的失活仍 以热 处理 为主 ，如 浸煮、蒸 汽处 理 （ 常压、加压 ） 、烘 （ 、微 波加热 烤）
预热 １ｍｉ，加入 １ Ｌ牛胰蛋白酶溶 ０ ｎ ｍ
大 豆作 为一种 优质 蛋白质 的来 源 ，一直受到人民的喜爱。但是，其 含有妨碍营养物质消化 、吸收和利用 的抗营养因子，限制了大豆的直接食 用，诸如蛋白酶抑制剂 ，凝集素、致 敏因子、致甲状腺肿因子等 ，其中胰 蛋白酶抑制剂最为主要。 大豆胰蛋白酶抑制剂对动物体 的 抗营养作用主要表现为生长抑制、营 养物质消化利用率降低和胰腺功能亢 进等。虽然对人长期食用含有一定残 留量胰蛋白酶抑制剂的食品可能产生 的不 良影响仍未定论，但一般认为这 些胰 蛋白酶抑 制剂 应该被 去除或钝 化 ，以便改善大豆蛋白的营养价值。 当豆制品中天然的胰蛋白酶抑制剂活 性被钝 化 ９ ％时，便可 达到最高 的 ０
①缓冲液的配制。 ②蛋白酶活力测定采用福林 一酚
法。
蛋白酶钝化效果明显。本文是在原有
研究的基础上 ， 对碱性蛋白酶的钝化 条件作了较深入的探讨。
③胰蛋白酶抑制剂活性测定采用
改进 的 Ｐ Ｐ Ａ法 。 ＡＮ
准确 称 取 １ ｇ样 品 于 三 角瓶 中
（ 准确至 ０００ｌ） ． ，加入 ５ｍ Ｔ ｓ ０ ｇ ０ Ｌ ｆ— ｉ
和膨化 （ 热喷） 。但 为完全消除胰蛋 白酶抑制剂活性而过分地加热 ，可能
仪器 ：紫外 一可见光分光光度计
（ ｖ 一２ ０Ｐ ） Ｕ ４ １ ｃ 、振 荡 箱、离 心 机 （ 北京医用离心机厂） 、精密增力电动 搅拌器 （ 常州 国华 电器有 限公司） 、
精密 ｐ Ｈ计 （ 上海雷磁厂 ） 、水 浴锅 、 电子天平、移液器 （ 芬兰） 、温度计。
４ ．２ ４ ９ ℃ ；酶 用 量 １ ．ｕ ／ ；底 物 浓 度 ５ ９ ％ ～６ ７ ％ 。 ３ ２ ￣４ ．０ １５Ｌ ｇ ．９ ．２
【 关键词】碱性蛋白酶；水解；胰蛋白酶抑制剂活性；最优条件
中图分类号 ：Ｔ ２ １ ２ Ｓ ０ ． 文献标识 码 ：Ａ 文章编 号 ：１０ ０ ９—１ ０ （０ ２ ２—０ ４ —０ ８ ７ ２０ ）１ ０３ ３
１ 材 料 与方 法
１１ 材 料 ．
ＥＣ ａ ｈ缓 冲 液，振 荡 ３ ｈ后，２７０ ／ ０ ｒ
ｍｎ离心 ｌｍｉ，取 上 清液 ，稀 释。 ｉ Ｏ ｎ 取该 稀 释 液 １ Ｌ于 试 管 中，加 入 ｍ ２５ Ｌ Ａ Ｎ ，置于 ３ ℃ 水浴锅 中 ．ｍ Ｂ Ｐ Ａ ７
无糖豆粉为市售 ；碱性蛋白酶为 诺和诺德公司生产。 试剂 ：胰蛋 白酶 （ ｉｎ 公司） Ｓｇ ａ ｒ 、 Ｂ Ｐ Ａ Ｓ ｍａ Ａ Ｎ （ ｉ 公司） ｇ 、福林试剂 （ 北 京鼎国生物技术发展 中心） ｒ （ 、Ｔ ｉ 上 ｓ 海华舜生物工程有限公 司） 、无水氯 化钙 、盐酸、碳酸钠、三氯乙酸、磷 酸盐 、酪氨酸、酪蛋白、氢氧化钠。
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・
开 发研 究 ・
碱 Ⅱ 白 酶 生蛋 钝 化 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 昀 研 究
吴 非 霍 贵成
（ 东北农业大学食品学院）
【 摘 要 】 以碱性蛋白酶水解无糖豆粉溶液， 检测水解前后胰蛋白酶抑制剂活性的变化，采用四
因素五 水平饱和 最优试 验设 计 ，当作 用时间为 １ ｈ时 ，最佳酶解钝化条件 为 ： Ｈ值 ８ ８ ～９ ０ ；温度 ｐ ．８ ．８