药物分析--旋光度测定法共28页
药物分析之西药分析——旋光度测定法
平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。
旋转的度数，称为旋光度。
偏振光透过长1dm并每 1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。
测定比旋度（或旋光度）可以区别或检查某些药品的纯杂程度，亦可用以测定含量。
本药典系用钠光谱的D线(589.3nm)测定旋光度,除另有规定外，测定管长度为1dm（如使用其他管长，应进行换算），测定温度为20℃。
测定旋光度时，用读数至0.01°并经过检定的旋光计。
将测定管用供试液体或溶液（取固体供试品，按各药品项下的方法制成）冲洗数次，缓缓注入供试液体或溶液适量（注意勿使发生气泡），置于旋光计内检测读数，即得供试液的旋光度。
使偏振光向右旋转者（顺时针方向）为右旋，以“＋”符号表示；使偏振光向左旋转者(反时针方向)为左旋，以“－”符号表示。
用同法读取旋光度3次,取3次的平均数，照下列公式计算,即得供试品的比旋度。
对液体样品α[α]D＝────ld 对固体样品100α[α]D＝────lc 式中[α]为比旋度；D为钠光谱的D线；t为测定时的温度；l为测定管长度, dm；α为测得的旋光度；d为液体的相对密度；c为每100ml溶液中含有被测物质的重量，g(按干燥品或无水物计算)。
旋光计的检定，可用标准石英旋光管进行，读数误差应符合规定。
【注意事项】(1) 每次测定前应以溶剂作空白校正，测定后，再校正1次,以确定在测定时零点有无变动；如第2次校正时发现零点有变动，则应重新测定旋光度。
(2) 配制溶液及测定时，均应调节温度至20±0.5℃(或各药品项下规定的温度)。
(3)供试的液体或固体物质的溶液应不显浑浊或含有混悬的小粒。
如有上述情形时,应预先滤过，并弃去初滤液。
旋光度的测定
一、实验目得1、了解旋光仪测定旋光度得基本原理2、掌握用旋光仪测定溶液或液体物质得旋光度得方法3、测定布洛芬得旋光度二、实验内容１、布洛芬溶液得配定.采用乙醇为溶剂配定一定溶度得布洛芬溶液。
2、旋光仪零点得校正3、布洛芬旋光度得测定三、实验原理只在一个平面上振动得光叫做平面偏振光,简称偏振光。
物质能使偏振光得振动平面旋转得性质，称为旋光性或光学活性。
具有旋光性得物质,叫做旋光性物质或光学活性物质。
旋光性物质使偏振光得振动平面旋转得角度叫做旋光度。
许多有机化合物,尤其就是来自生物体内得大部分天然产物,如氨基酸、生物碱与碳水化合物等，都具有旋光性。
这就是由于它们得分子结构具有手征性所造成得.因此,旋光度得测定对于研究这些有机化合物得分子结构具有重要得作用，此外，旋光度得测定对于确定某些有机反应得反应机理也就是很有意义得。
测定溶液或液体得旋光度得仪器称为旋光仪。
旋光仪得光学系统如图1所示.由单色光源发出得光线经起偏器后变为线偏振光,在放入待测溶液前调节目镜得焦距使视场更清晰，再调节检偏器，使视场最暗。
当放入待测溶液后由于旋光性，视场由暗变亮.旋转检偏器，使视场重新变暗，所转过得角度就就是旋转角,进而就可以代人公式（1)求出浓度。
图1中半波片为一长方形石英片，位于光路截面得中央，将光路得圆形截面直径分割为三部分,两侧为空气,通过物目镜组瞧到得视场就就是由此分割而成得三分视场。
石英晶片得光轴方向与起偏器、检偏器得透振方向同位于垂直于仪器光轴得平面内(图2中CD方向)。
实验时起偏器透振方向固定，旋转检偏器,使其透振方向在图2得平面内旋转,通过目镜可以观察到亮暗连续变化得三分视场.检偏器透振方向转过3６0°得过程中,将产生４个特殊得三分视场,以此为例说明三分视场得原理。
图2中P11就是起偏器得透振方向，Ｐ2就是检偏器透振方向,P11与半波片得光轴方向夹角为α,正常使用时通常为10°左右。
实验过程中，P11保持固定,α亦固定，仅P2可以连续改变.线ＡB与线ＣD垂直,钠光灯发出得光线经过起偏器后变成线偏振光,光路中央得线偏振光经过半波片后，振动方向转过２α,为Ｐ12。
旋光度测定法
旋光度测定法平面偏振光通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。
旋转的度数，称为旋光度。
在一定波长与温度下，偏振光透过每lml含有lg旋光性物质的溶液且光路为长ldm时，测得的旋光度称为比旋度。
比旋度（或旋光度）可以用于鉴别或检查光学活性药品的纯杂程度，亦可用于测定光学活性药品的含量。
在间上不能重叠，互为镜像关系的立体异构体称为对映体。
手性物质的对映异构体之间，除了使平面偏振光发生偏转的程度相同而方向相反之外，在非手性环境中的理化性质相同。
生物大分子如酶、生物受体等通常为手性物质，总是表现出对一种对映体的立体选择性，因此，对映体可在药理学与毒理学方面有差异来源于自然界的物质，例如氨基酸、蛋白质、生物碱、抗体、糖苷、糖等，大多以对映体的形式存在。
外消旋体一般由等量的对映异构体构成，旋光度净值为零，其物理性质也可能与其对映体不同。
最常用的光源是采用钠灯在可见光区的D线（589.3nm），但也使用较短的波长，如光电偏振计使用滤光片得到汞灯波长约为578nm、546nm、436nm、405nm和365nm处的最大透射率的单色光，其具有更髙的灵敏度，可降低被测化合物的浓度。
还有一些其他光源，如带有适当滤光器的氙灯或卤钨灯。
除另有规定外，本法系采用钠光谱的D线（589.3mn）测定旋光度，测定管长度为ldm（如使用其他管长，应进行换算），测定温度为20℃。
用读数至0.01°并经过检定的旋光计。
旋光度测定一般应在溶液配制后30分钟内进行测定。
测定旋光度时，将测定管用供试液体或溶液（取固体供试品，按各品种项下的方法制成）冲洗数次，缓缓注人供试液体或溶液适量（注意勿使发生气泡），置于旋光计内检测读数，即得供试液的旋光度。
使偏振光向右旋转者（顺时针方向）为右旋，以“+”符号表示；使偏振光向左旋转者（反时针方向）为左旋，以“一”符号表示。
用同法读取旋光度3次，取3次的平均数，照下列公式计算，即得供试品的比旋度对液体供试品 []ld t D αα=对固体供试品 []lc100t D αα= 式中[α]为比旋度；D 为钠光谱的D 线；f 为测定时的温度，℃；l 为测定管长度，dm ；α为测得的旋光度；d 为液体的相对密度；c 为每100ml 溶液中含有被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g 。
药物分析--旋光度测定法
三分视场 观察窗口
示数刻 度窗
样品管：
样品管 放置处
调节旋光度 数值旋钮
旋光仪的读数
旋光仪的读数
图中的读数是 多少？请发表 在评论区。
操作方法：
测定注意事项：
1、测定前以溶剂作空白校正，测定后，再校正一次， 以确定测定时零点有无变动；如第二次校正时发现 零点有变动，应重新测定旋光度。 2、配制溶液及测定时，应调节温度为20±0.5℃ （或各药品项下规定的温度） 3、供试的液体或固体药物的溶液应不显浑浊或含有 混悬的小颗粒，如有上述现象，应预先过滤，并弃 去初滤液。
呈线性关系。 测比旋度时，要求在一定浓度的溶液中进行。
（三）溶剂
溶剂对旋光度的影响比较复杂，随溶剂与药物而 有所不同：有些溶剂对药物无影响，有的溶剂影 响旋光的方向及旋光度的大小。
测定药物的旋光度和比旋度时，应注明溶剂的名 称。
（四）光线通过液层的厚度
光线通过液层的厚度越厚，旋光度越大
α
旋光度测定法
轻化工程系
概述
有机化合物的结构中含有手性碳原子，具有旋光 现象。利用测定药物的旋光度进行定性、杂质检 查和定量的分析方法，称为旋光度测定法。
手性碳原子，是指和四个不同的原子或基团连接
的碳原子，常用“＊”号予以标注
CH3CHCH2CH3 Cl
6CH2OH
H 5C* OH
O1
4*
O
3
2
C% =
α
α
t D
×L
×100%
例如：葡萄糖注射液的含量测定
精密量取本品适量（约相当于葡萄糖10g），置
100ml量瓶中，加氨试液0.2ml（促使葡萄糖溶液
的变旋现象达到平衡），用水稀释到刻度，摇匀，
旋光度测定法
目的：建立旋光度测定法的标准操作程序，规范旋光度测定法的操作。
范围：适用于旋光度测定法。
职责：检验室主任、检验员。
规程：1 简述旋光度测定法是利用平面偏振光，通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或右旋转，此种旋转在一定条件下有一定度数，称为旋光度。
使偏振光向右旋转者（顺时针方向）称为右旋物质，常以“十”号表示。
使偏振光向左旋转者（反时针方向），称为左旋物质，常以“一”号表示。
影响物质旋光度的因素很多，除化合物特性外，还有偏振光通过供试品液层的浓度和厚度，通过光线的波长和测定时的温度。
当偏振光通过长ldm、每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，使用光线波长通常用为钠光D线（589.3nm）汞的404. 7、546.1nm等谱线，测定温度为20℃时，测得旋光度称为该物质的比施度，以［a］20表示。
比旋度是物质的物理常数。
因此可用以区别或检查某些药品D的光学活性和药品的纯杂程度。
由于旋光度在一定条件下与浓度呈线性关系，故而还可以用来测定含量。
平面偏振光的产生，过去都是使用尼科尔棱镜，这是用一种天然的晶体如方解石等切割后制成，现在大都用塑料膜涂上某些具有光学活性的化学物质，使其产生偏振光。
最早的圆盘旋光仪，就是由钠光灯光源、起偏镜、检偏镜、测试管、半影板调零装置和支架六部分组成。
由于用人的眼睛观察视野光强是否一致，比较费力，而且主观误差也大，因此目前大都被光电机相互结合组成的自动指示旋光仪或数字显示仪所取代。
2 仪器与性能测试2.1 旋光仪又称旋光计，是较早出现的商品分析仪器。
六十年代前我们使用的仪器大都是国外的圆盘旋光仪，规格为0.05°或0.01°。
其后，我国上海等地仪器厂也生产一些圆盘旋光仪，但精密度不高。
七十年代后国外由于自动指示旋光仪的出现，圆盘旋光逐渐被淘汰，同时在我国也相继出现了不同形号的自指示旋光仪。
八十年代数显式自动指示旋光仪和投影式自动指示旋光仪相继出现。
旋光度测定法
[]=
l•
－液体的密度
注意事项
1、测定前应将仪器及样品置于20℃± 0.5℃ 恒温室中，也可用温水浴保持样品室或样 品测试管恒温1小时以上。
2、通电开机之前应取出仪器样品室内的物 品，各示数开关应置于规定位置。
先用交流供电使钠光灯预热启辉，启辉后 光源稳定约20分钟后再进行测定，
葡萄糖有变旋光现象
葡萄糖有变旋光现象，试验中加入 氨试液能使变旋光现象很快达到平 衡，因此加了氨试液只要放置10分 钟就能测定，10%以下的葡萄糖注 射液 ，配制好后已经放置一段时 间，本身旋光度已达平衡，故不需 再加氨试液。
旋光性和比旋光度
比旋度
[]= l•C
若被测物质是纯液体，则：
－样品的旋光度
右旋物质；
反之，叫做左旋物质。
通常用“d”（拉丁文dextro的缩写，“右” 的意思）或“+”表示右旋；
用“l”（拉丁文laevo的缩写，“左”的意思） 或“-”表示左旋。
物质旋光性的大小可用比旋光度表示。
旋光度测定法
平面偏振光通过含有某些光学活性的化合 物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏 振光的平面向左或向右旋转。
旋转的度数，称为旋光度，用“α”表示。 。 偏振光透过长1dm并每1ml中含有旋光性物
质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋 光度称为比旋度，用“ [] ”表示。
旋光度测定法
测定比旋度（或旋光度）可以区别或检查 某些药品的纯杂程度，亦可用以测定含量。
中国药典旋光度测定法主要用于某些药品 性状项下比旋度的测定，
仪器编号：
测定日期：
温 度：
旋光度测定法
标题：旋光度检验规程分发部门：质量技术部一份，生产制造部二份旋光度测定法1 定义1.1 旋光度：直线偏振光通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或右旋转，此种旋转在一定条件下有一定度数，称为旋光度。
使偏振光向右旋转者（顺时针方向）称为右旋物质，常以“＋”号表示。
使偏振光向左旋转者（反时针方向），称为左旋物质，常以“－”号表示。
由于旋光度在一定条件下与浓度呈线性关系，故可以用来测定含量。
影响物质旋光度的因素很多，除化合物特性外，还有偏振光通过供试品液层的浓度和厚度，通过光线的波长和测定时的温度。
1.2 比旋度：当偏振光通过长ldm 、每lml 中含有旋光性物质1g 的溶液，使用光线波长为钠光D 线（589.3nm ）、测定温度为20℃时，测得的旋光度称为该物质的比旋度，以[]αD 20表示。
比旋度是物质的物理常数，因此可用以区别或检查某些药品的光学活性和药品的纯杂程度。
2 仪器与性能测试：2.1 旋光仪2.2 仪器的性能测试：2.3 按照仪器测量结果的准确度，仪器分为0.01、0.02和0.03三种准确度等级，测定旋光度，可用读数至001.︒并经过检定的旋光仪。
仪器检定的项目，除准确度外，还有重复性和稳定性，其它尚有对测试管盖玻片内应力和测试管长度误差等的检查。
2.4 仪器的性能测试参照JJG675—90规定，用+︒5和-︒1标准石英管进行。
在规定温度下，记录仪器的零点值，再放上旋光标准石英管，读取仪器示值，如此反复测定6次，按规定处理测定结果，与示值不能超出±︒.。
另外并要求将测定管旋转不同角度和倒向测定，001误差都不得大于004.︒。
3 样品测定操作法：3.1 旋光度测定法主要用于药典某些品种性状项下比旋度的测定，或一些制剂的含量测定。
3.2 比旋度测定按各该品种项下规定的方法配制供试品溶液，在规定的温度和放置时间内测定，测定前首先应将室温调至规定温度，然后用配制供试品的空白溶液校正零点或测定停点，以便扣除零点。
第七节旋光度的测定
第七节旋光度的测定第七节旋光度的测定⼀、基本原理物质能使偏振光的振动⾯发⽣旋转的性质，称为旋光活性或光学活性，这些物质被称为旋光活性物质或光学活性物质，它们使偏振光的振动平⾯旋转的⾓度叫旋光度。
物质的旋光性与其分⼦结构有关，具有旋光活性的物质都是⼿性分⼦，不同的⼿性分⼦使偏振光的振动⾯旋转的⽅向和⾓度都是不⼀样的，它是有机化合物特征物理常数之⼀。
可见，旋光度的测定对于研究这些有机化合物的分⼦结构具有重要意义，此外，旋光度的测定对于确定某些有机反应的反应机理也是很有意义的。
测定⼿性化合物旋光度的仪器称为旋光仪。
⽬前使⽤的旋光仪有两种类型，⼀种是⽬测的，另⼀种是数显的。
⽬测的旋光仪基本结构如图2-25所⽰。
图2-25 ⽬测旋光仪的结构及⼯作原理⽬测的旋光仪主要是由光源、起偏镜、样品管（也叫旋光管）和检偏镜⼏部分组成。
光线从光源经过起偏镜形成偏振光，此光经过盛有旋光性物质的旋光管时，因物质的旋光性致使偏振光不能通过第⼆个棱镜（检偏镜），必须将检偏镜扭转⼀定⾓度后才能通过，因此要调节检偏镜进⾏配光，由装在检偏镜上的标尺盘上转动的⾓度，可指⽰出检偏镜转动的⾓度，该⾓度即为待测物质的旋光度。
使偏振光平⾯顺时针⽅向旋转的旋光性物质叫做右旋体，逆时针⽅向旋转的叫左旋体。
在测量中，由于⼈的眼睛对寻找最亮点和最暗点（全⿊）并不灵敏，故在起偏镜后⾯加上⼀块半阴⽚以帮助进⾏⽐较。
半阴⽚是由⽯英和玻璃构成的圆形透明⽚，当偏振光通过⽯英时，由于⽯英有旋光性，把偏振光旋转了⼀个⾓度，如图2-26所⽰。
图2-26 半阴⽚因此，通过半阴⽚的偏振光就⽣成振动⽅向不同的两部分，这两部分偏振光到达检偏镜时，通过调节检偏镜的晶轴，可以使三分视场出现以下三种情况，如图2-27所⽰。
图2-27 三分视场变化⽰意图图2-27（a ）表⽰视场左、右的偏振光可以通过，⽽中间的不能透过；图2-27（b ）表⽰视场左、右的偏振光不能通过，⽽中间的可以透过。