血涂片制备染色及白细胞形态观察
血涂片制作与染色
姬姆萨染色法
总结词
姬姆萨染色法是一种高分辨率的血涂片染色方法，能够更好地显示出细胞的细节 和特征。
详细描述
姬姆萨染色法使用姬姆萨染料对血涂片进行染色，能够使细胞核呈蓝色，细胞质 呈红色，各种血细胞在染色后呈现出不同的颜色和形态，易于鉴别。该方法染色 效果较为稳定，但需要较长的染色时间。
苏木素-伊红染色法
05 血涂片制作与染色注意事项
CHAPTER
采血注意事项
采血部位
选择合适的采血部位，通常为手指或耳垂，确保 采血过程无菌操作，避免感染。
采血量
根据实验需求，控制采血量，确保足够用于制作 血涂片，同时避免过多采血造成浪费。
采血时间
选择合适的时间进行采血，避免在进食、运动后 等情况下采血，以免影响结果。
染色注意事项
染色剂选择
根据实验需求选择合适的染色剂，确保染色效果良好，能够清晰 显示细胞结构。
染色时间
控制染色时间，确保染色均匀，避免染色过度或不足。
冲洗与脱水
在染色完成后，进行充分的冲洗与脱水，去除多余的染色剂，使观 察效果更佳。
结果观察注意事项
观察方法
01
采用正确的观察方法，如显微镜观察，确保观察结果准确可靠。
观察指标
02
关注细胞形态、大小、染色情况等指标，综合分析结果，避免
片面解读。
结果解读
03
结合临床情况和其他检查结果，综合分析血涂片结果，为临床
诊断和治疗提供依据。
谢谢
THANKS
总结词
苏木素-伊红染色法是一种常用的组织学染色方法，常用于显 示组织结构和细胞形态。
详细描述
苏木素-伊红染色法使用苏木素染料和伊红染料对组织切片进 行染色，能够使细胞核呈蓝色，细胞质呈粉红色，便于观察 组织结构和细胞形态。该方法染色效果稳定，但对某些特殊 类型的细胞可能染色效果不佳。
血涂片的制备、染色、观察方法、复检
04
章节 PART
血涂片的复检
血涂片的复检
血涂片复检的意义，首先是复核该复检标本的血常规报告的准确性， 其次是在观察血细胞形态时，根据所观察到的外周血细胞形态，提供给临 床有效的信息，要做到保证血常规结果的准确、不漏检、不误诊、不误导。 切实的结合临床，关注已知的患者信息，查看患者的相关检查结果，了解
靠等待自然干燥章。节 PART
血涂片的染色
4、瑞氏染色是最经典，最常用的染色法，尤其对于细胞质成分，中 性颗粒等可获得很好的染色效果，但对细胞核的着色能力略差。姬姆萨染 液对细胞核着色较好，结构更清晰，但对细胞质成分的着色能力略差。采
用瑞-姬姆萨章复节合染PA液R可T使细胞质、颗粒、胞核等均获得满意的染色效果。
患者出现的体章征节、P症A状R（T 必要时要询问临床医生），在此基础上，了解临
床医生的诊断或治疗思路，然后在显微镜下有目的地进行查找，才能做到 有百密而无一疏。
红系统细胞形态
一、正常红细胞
章节 PART
红系统细胞形态
二、红细胞大小改变
章节 PART
红系统细胞形态
三、红细胞血红蛋白含量改变
章节 PART
章节 PART
红系统细胞形态
3、卡波环
章节 PART
红系统细胞形态
4、有核红细胞
章节 PART
红系统细胞形态
5、网织红细胞：是指晚幼红细胞脱核后到完全成熟的红 细胞之间的过度细胞，分为4型。Ⅰ型：丝球形，Ⅱ型：网型， Ⅲ型：破网型，Ⅳ型：点粒型（图2-165、2-166、2-167）
红系统细胞形态
章节 PART
血涂片的制备
二、将推片接近血滴处，然后轻轻接触血滴并压在血滴上，使血滴呈”一”字型展开, 充满推片宽度(如果能做到边缘血量较少,中间血量稍多为最佳)(图1-2,图1-3).
血涂片的制备与染色
血涂片制备与染色血涂片是通过特定的方法将血液按一定方向均匀涂开的过程，微观上使细胞是由球形变为平面形或近平面形平铺在载玻片上。
血涂片的显微镜检查是血液细胞形态学检查的基本步骤，特别是对于各种血液病的诊断和鉴别诊断，具有重要价值。
血涂片制备是否合格、染色的好坏直接关系到检验结果的质量。
（一）血涂片制备1.载玻片的准备新载玻片常带有游离碱质，须用浓度为lmol/L的HCl浸泡24h，再用清水彻底冲洗，干燥后备用。
旧载玻片要用含洗涤剂的清水中煮沸20min，洗掉血膜，再用清水反复冲洗，最后用0.95L/L乙醇浸泡1h，干燥备用。
使用载玻片时，不要用手触及玻片表面，保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。
2.血涂片制作方法取血液标本一滴置载玻片的一端，以边缘平滑的推片一端，从血滴前沿方向接触血液，使血液沿推片散开，推片与载玻片保持30～45○夹角，平稳地向前推动，血液即在载玻片上形成薄层血膜。
涂片的厚薄与血滴大小、推片与载玻片之间的角度、推片时的速度及血细胞比容有关。
血滴大、角度大、速度快则血膜越厚；反之则血膜越薄。
一张良好的血涂片，要求厚薄适宜，头体尾明显，细胞分布均匀，血膜边缘整齐并留有的空隙。
（二）血涂片染色染色的目的是使细胞的主要结构，如细胞膜、细胞质、细胞核等染上不同的颜色，以便于镜下观察识别。
血涂片染色包括两个过程：固定和染色。
固定是将细胞蛋白质和多糖等成分迅速交联凝固，以保持细胞原有形态结构不发生变化。
常用的染色方法有瑞特染色法（Wright）、姬姆萨染色法（Giemsa）等。
1.瑞特（Wright）染色法为发观察细胞内部结构，识别各种细胞及其异常变化，血涂片必须嘲行染色。
血涂片的各种染色方法大多是罗氏染色法衍变来的。
目前常用瑞特染色法。
（1）瑞特染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成有复合染料。
亚甲蓝为四甲基硫堇染料，有对醌型和邻醌型两种结构。
通常为氯盐，即氯化美蓝。
美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料。
血涂片染色操作流程
血涂片染色操作流程
血涂片染色操作流程主要包括以下步骤：
1. 制片：将新鲜抗凝血滴于载玻片上，利用推片机或角度适中的推片手法，将血液均匀分散，制成薄而透明的血膜。
2. 干燥：待血膜自然晾干或在空气中风干，不可加热，以防细胞形态改变。
3. 固定：使用甲醇或甲醇-乙醚混合液固定血膜，使细胞成分稳定，防止染色时细胞形态受损。
4. 染色：先用瑞氏染液（或瑞-吉染液）进行染色，浸泡一定时间后水洗去除多余染料。
5. 复染：如需区分白细胞种类，可进行姬姆萨复染，进一步区分颗粒细胞和淋巴细胞。
6. 擦干、封片：染色结束后吸去水分，晾干后加盖片，可用树脂封固。
7. 显微镜观察：在显微镜下观察血细胞形态和数量，进行细胞
学诊断。
临床血液学检验基础
正常血片中大颗粒细胞
白细胞数量异常
中性粒细胞增多 中性粒细胞减少 淋巴细胞增多 淋巴细胞减少 单核细胞增多 单核细胞减少 嗜酸性粒细胞增多 嗜酸性粒细胞减少 嗜碱性粒细胞增多 嗜碱性粒细胞减少
未成熟粒细胞（早幼粒细胞、中幼粒细胞和晚 幼粒细胞）
粒细胞数量增高
粒细胞数量减低
白细胞减少症的诊断 ：中性粒细胞＜1.5×109/L为粒细胞减少症； ＜0.5×109/L时称为粒细胞缺乏症。 白细胞减少症的鉴别诊断
或合成洗涤剂清洗。目的：保持玻片接近中性
二：手工推片：先后移，后前推（30-45度），匀速，平稳； 血滴大，角度大，速度快，血膜厚，反之，则血膜薄。
瑞氏染色（Wright染色）
瑞氏染料由酸性染料伊红（E-）和碱性染料亚甲蓝
（M+）组成。甲醇的作用：一是溶解美蓝和伊红； 二是固定细胞形态。 原理：既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。 各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力
染色质（H-J）小体
碱性点彩
卡博氏环
红细胞包涵体
胞内微生物：细菌、真菌、原生体或寄生
虫感染患者红细胞内或红细胞间游离
疟原虫
巴贝虫
红细胞包涵体
Pappenheimer小体(含铁血黄素颗粒) 红细胞内铁蛋白聚集物，血片瑞氏染色可见多 个大小不等、形状不定、通常分布在一个较限制的胞 浆局域内的嗜碱包涵体 ，铁染色（+）
红细胞包涵体
有核红
NRቤተ መጻሕፍቲ ባይዱC存在，用于WBC分类或计数 校正
出现幼红细胞、巨幼红细胞
幼红细胞
巨幼红细胞
网织红细胞
RET是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡细胞，其胞质中残存的嗜碱性物 质RNA经碱性染料（如煌焦油蓝、新亚甲蓝）活体染色后，形成蓝色或紫色的点 粒状或丝网状沉淀物。网织红细胞自骨髓释放到外周血液后仍具有合成血红蛋白 的能力，约1-2天后，过渡为成熟红细胞
观察人血永久涂片实验报告
观察人血永久涂片实验报告摘要：本次实验主要通过观察人血涂片，了解人体血液成分的组成及其形态特点。
首先采集实验者的血液样本，并使用标本涂片制备永久涂片。
通过显微镜观察，我们发现人血液涂片中主要包含红细胞、白细胞和血小板。
红细胞呈现圆形，中间微凹，红细胞内无核且呈现淡红色。
白细胞呈现不同形态和颜色，其中淋巴细胞和中性粒细胞是最常见的。
血小板则呈现片状或球状。
通过观察血液涂片，我们可以进一步了解人体血液的组成与疾病诊断。
1.引言人血液是由红细胞、白细胞和血小板等成分组成的复杂液体。
观察人血液涂片是一种常见的实验手段，可以通过显微镜观察血液的细胞形态和数量，为疾病诊断和治疗提供参考。
2.实验方法2.1试验材料：-指示针-酒精纱球-细胞计数板-显微镜-干燥架2.2试验步骤：2.2.1清洁和消毒：使用酒精纱球清洁实验台面，避免污染样本。
2.2.2指示针消毒：将指示针放入酒精中，进行消毒处理。
2.2.3血液采集：用消毒的指示针尖刺破实验者小指尖的皮肤并挤压，将采集到的血液滴在细胞计数板上的四个小方格中。
2.2.4标本涂片制备：用细胞计数板刮取血液样本，将其均匀地涂抹在玻片上。
然后将玻片放置在干燥架上，等待干燥。
2.2.5永久涂片染色：将制备的干燥涂片放入染色盒中，进行常用染色处理，用甲苯脱水、均染、透明化。
最后用快干胶固定玻片。
3.实验结果通过显微镜观察，我们发现人血液涂片中主要包含红细胞、白细胞和血小板。
3.1红细胞：红细胞呈现圆形，中间微凹，红细胞内无核且呈现淡红色。
通过计算细胞计数板中红细胞的数量，可以了解血液的红细胞含量。
3.2白细胞：白细胞呈现不同形态和颜色。
其中淋巴细胞和中性粒细胞是最常见的。
通过计算细胞计数板中白细胞的数量和分类，可以了解血液中各类白细胞的比例。
3.3血小板：血小板呈现片状或球状。
其数量和质量的异常可以与出血疾病和凝血异常相关。
4.讨论与结论通过观察人血液涂片，我们可以进一步了解人体血液的组成与疾病诊断。
血涂片的制备及染色
血涂片的制备及染色血涂片的制备及染色摘要血涂片是世界上使用最广泛的实验室检测方法之一，应用于疾病的筛查，发现，诊断以及监控。
本文提供了在临床检验中制备及染色出优质血涂片的一种参考。
虽然在如何人工制备血涂片上仍存在某些“工艺”，但是已尽可能采用了客观标准使得临床实验室能准备和染色出优质血片。
本参考中包含固定和染色手工工艺中的问题解决方法。
关键词：血涂片制备，染色前言血涂片是世界上使用最广泛和最频繁的检测方法之一，但似乎没有关于血涂片制备要求，程序及潜在问题等的综合性文献。
虽然血涂片的制备是个简单的过程，但作为一种检测方法，有很多因素可导致检测失败或比其预期低效。
本文应国际血液学标准化委员会的请求所写，并作为实验室血细胞计数板的指导方针。
本文旨在提供临床检验中用于形态评价的血涂片制备及其染色的指导和标准化。
显微镜分析过程和解释不在本文的范围内。
列举的方法中包括最先进的技术以及发展中国家实验室的适用方法。
发展中国家不具备最高水平的指标，但应在所有条件下可达到其规定的指标，以确保诊断测试的质量，以免降低病人护理。
这点尤其重要，因为无论对于病例发现，诊断或疾病监测，血涂片显微镜分析所得数据通常在临床情况中起最终和决定性的作用。
为了方便参考使用，本文采用一种特殊的格式来描述涉及血涂片制备和染色的各个步骤。
血涂片制备载玻片载玻片应由最高纯度的耐腐蚀玻璃制成；通常不可接受其他材料如塑料。
典型玻片为75×25mm，约有1mm 厚度，必须平整，无扭曲和波痕，而且必须澄清无色（“水白，无色透明”）。
荧光显微镜检测必须使用无自发荧光的玻片。
最好使用预洗过的载玻片，但至少实验室必须确保载玻片无划痕，干净无尘、绒线，油脂（指纹），而且必须干燥。
这就意味着在潮湿环境中，载玻片必须能抗水。
在所处密闭容器开启后，载玻片必须保存于干燥器或装有无水（甲基）乙醇或乙醇与丙酮混合液（3:1）的容器内直至被使用。
载玻片需一直保存于密闭容器中，只能在立即使用前开启。
血涂片实验报告
血涂片实验报告血涂片实验报告一、实验目的：通过观察和分析血涂片的形态特点，学习和掌握正常和异常血细胞的形态特征，为临床血液疾病的诊断提供依据。
二、实验原理：血涂片是将一滴血液均匀地涂在玻璃片上，通过染色和显微镜观察，以观察和分析血细胞的形态特征。
正常血涂片中，红细胞呈不同形态的牙齿状排列，白细胞则以单个或成块状分布；异常血涂片中，可出现红细胞形态异常、白细胞数量和类型异常等情况。
三、实验步骤：1. 取一片干净的玻璃片，用无菌棉球擦拭干净。
2. 用无菌针刺破指尖或耳朵尖，将一滴鲜血滴在玻璃片上。
3. 等待血液自然干燥，或用吹风机低温吹干。
4. 用梅尔列染剂滴在玻璃片上，静置5分钟。
5. 用蒸馏水轻轻冲洗玻璃片，使染剂洗净。
6. 反面贴上长方形标签，并在标签上注明样品序号或标志。
7. 将玻璃片倒立放在显微镜的样品夹中，调节显微镜，观察血细胞形态。
四、实验结果：通过显微镜观察，我们发现正常血涂片中，红细胞呈圆形或椭圆形，无明显变形和异常；白细胞种类多样，包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸细胞和嗜碱细胞等，数量适中，形态正常；血小板数量适中，无聚集现象。
而在异常血涂片中，红细胞出现变形、溶血、贫血等现象，如出现各种形态的红细胞，如椭圆形、钩形、球形等；白细胞数量明显增多或减少，并出现异常类型细胞，如原始细胞、异型淋巴细胞等；血小板数量增多或减少，出现聚集现象。
五、实验分析：通过本次实验，我们了解到正常血涂片和异常血涂片的显微形态特点。
正常血涂片的形态特征对于判断血细胞的正常与否具有重要意义，可以帮助医生快速了解患者的血细胞情况。
而异常血涂片则可能提示患者存在血液疾病，如贫血、白血病等，为临床诊断提供重要依据。
六、实验感想：本次实验通过实际操作和显微镜观察，使我们更加直观地了解了血细胞的形态特征。
通过对正常和异常血涂片的观察和分析，我们对血液疾病的诊断有了更深入的了解。
同时，实验还提醒了我们做好个人卫生防护措施和无菌操作，以确保实验结果的准确性和可靠性。
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试剂
液
瑞氏染液、磷酸缓冲
标本
抗凝血
血 涂 片制 备
将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚 薄取决于速度和角度：快、大(厚)。 慢、小（薄体 尾鲜明
涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号
B李123
四
血 涂 片 染色
涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ 涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ液5-8滴 滴 覆盖整个血膜1分钟 覆盖整个血膜 分钟 勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ 滴后将Ⅰ 勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后将Ⅰ液和 瑞氏染色 滴后将 液充分混匀静置10分钟 Ⅱ液充分混匀静置 分钟
直接流水冲洗3-5分钟 涂片经水洗干燥后用油镜 （切勿先倒掉染液） 分类计数100个白细胞 李 四 123 123 123
血涂片的观察
低倍镜观察 1.染色情况 满意、偏酸、偏碱） 染色情况( 1.染色情况(满意、偏酸、偏碱） 2. 细胞分布情况 油镜下分类计数：体尾交界处。 油镜下分类计数：体尾交界处。 油镜分类时应按一定走向，不要重复计数。 油镜分类时应按一定走向，不要重复计数
李 四 123
中性杆状核粒细胞
中性分叶核粒细胞
嗜酸性粒细胞
嗜碱性粒细胞
单核细胞
分析讨论
1.本次实验的关键环节是什么？ 2.每人分类的结果与本组其他人使用同 一标本的同学是否一致，分析原因。
血涂片制备染色及 白细胞形态观察
临床检验基础与输血教研室
目的
掌握血涂片的制备和染 色方法及白细胞的正常 形态
原理
根据不同的细胞种类及 细胞的不同成分，对酸 性及碱性染料的结合能 力不同，而使各种细胞 呈现出各自的特点。
器材
载玻片、推片、洗耳 球、显微镜、微量吸管、香 柏油、乙醇-乙醚溶液、拭镜 纸