胰岛素释放、C肽释放和糖耐量实验
c肽释放实验做法
c肽释放实验做法C肽（C-peptide）是连接胰岛素的胰岛素前体分子中的一个段落，其释放实验通常用于研究胰岛素的合成和分泌。
以下是一种常见的C肽释放实验的基本做法：实验目的：测定胰岛素分泌的程度，通过测量C肽的释放来间接评估胰岛素的分泌。
材料与仪器：胰岛细胞（例如，INS-1胰岛细胞株）或胰岛样本细胞培养基实验室离心机无菌培养器具吸管和移液器收集样品的试管或微量离心管高灵敏度的C肽检测试剂盒细胞培养箱胰岛素刺激剂（例如葡萄糖）实验步骤：培养胰岛细胞：将胰岛细胞培养在适当的培养基中，维持其健康生长。
细胞处理：按照实验设计，将细胞分成不同的组。
在实验开始之前的一段时间（例如饥饿状态），对细胞进行处理，以模拟生理条件。
刺激剂添加：添加刺激剂，通常是葡萄糖，以模拟胰岛素的分泌刺激。
这可以在胰岛素释放实验中模拟餐后的生理状态。
样品收集：在刺激剂作用的不同时间点，收集培养液中的样品。
这可以通过轻柔地收集培养液，然后将其置于冰上进行暂时保存。
离心：将收集的样品进行离心，以去除任何残留的细胞或颗粒。
C肽检测：使用高灵敏度的C肽检测试剂盒，按照厂家提供的说明书进行检测。
通过检测C肽的浓度来评估胰岛素的释放程度。
数据分析：记录C肽的浓度，并将其与控制组进行比较。
通过实验设计和刺激条件的变化，分析胰岛素的释放模式。
这只是一个基本的C肽释放实验的概述，具体的实验步骤可能会根据研究的具体目的和条件而有所不同。
在进行实验之前，请确保遵循实验室的安全操作规程，并根据实验所需选择合适的胰岛细胞来源。
胰岛素释放试验C肽释放试验
胰岛素释放试验C肽释放试验SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#胰岛素释放试验胰岛素释放试验（Ins）就是令病人口服葡萄糖或用馒头餐来刺激胰岛B细胞释放胰岛素，通过测定空腹及服糖后1小时、2小时、3小时的血浆胰岛素水平，来了解胰β细胞的储备功能，也有助于糖尿病的分型及指导治疗。
临床意义单次测定空腹胰岛素只是一个初筛试验，用于检测升2型糖尿病，肥胖胰岛β细胞瘤，降低1型糖尿病等疾病。
试验方式该试验常与口服糖耐量试验同时进行，应禁食一夜后次日清晨空腹状态下采血。
许多生理和药物因素影响血糖值和胰岛素的分泌，如做试验时的情绪、禁食时间的长短等。
另外有些药物(如氨茶碱类，阻滞剂、糖皮质激素、口服避孕药等)应停服3天后再进行试验。
测定空腹、服糖后30分钟、60分钟、120分钟、180分钟的血清胰岛素，正常人的胰岛素分泌常与血糖值呈平行状态，在服糖后30～60分钟达到峰值，其浓度为空腹值的5～10倍，达到峰值后的胰岛素测定值较峰值应有一个明显的下降，180分钟的测定值应只比空腹值略高。
这组试验主要是用于判定胰岛素细胞的分泌功能。
胰岛素依赖型糖尿病空腹值低，服糖后仍无反应或反应低下，呈不反应型。
非胰岛素依赖性糖尿病空腹值正常或增高，服糖后胰岛素水平增加甚至过强，峰值到来的晚，常在120分钟，甚至180分钟出现，但该型糖尿病在晚期也可呈不反应型。
参考正常值成年人空腹胰岛素参考正常值：10～20mU/L。
餐后正常人血清胰岛素峰值约为空腹时的5～10倍，峰值一般出现在餐后30～60分钟(与进食种类有关：饮用葡萄糖峰值出现快，食用馒头则峰值出现慢)，2小时胰岛素<30mU/L，3小时后接近空腹值。
胰岛素释放试验是让患者口服葡萄糖或用馒头餐使血糖升高而刺激胰岛B细胞分泌胰岛素，通过测定空腹及餐后1小时、2小时、3小时的血浆胰岛素水平，了解胰岛B细胞的储备功能，从而有助于糖尿病的早期诊断、分型和指导治疗。
糖耐量-胰岛素释放试验演示文稿
概念
空腹血糖＞6.1，＜7.0，服糖后2小时血糖正常，故诊断
“空腹血糖受损”(IFG)
空腹血糖正常，服糖后2小时血糖＞7.8mmol/L，
＜11.0mmol/L故诊断糖耐量低减“（IGT）
空腹血糖＞6.1mmol/L，＜7.0mmol/L，服糖后2小时血糖
7.8mmol/L ， 故 诊 断 “ 空 腹 血 糖 受 损 “ (IFG) 伴 糖 耐量低减”（IGT）
分析：血糖高峰在1小时 空腹血糖已达糖尿病诊断标准，服糖后血糖为糖耐量低减(IGT),应以空 腹血糖值诊断为糖尿病，但应复查OGTT，2次以上同样结果方能诊断。 肾糖阈应在8.9mmol/L左右。
分析：血糖高峰在1小时 空腹血糖已达到空腹血糖受损（IGF）标准，服糖后2小时已达到糖尿 病诊断标准，应以服糖后2小时血糖结果诊断。肾糖阈更接近 10.6mmol/L。
干扰胰岛素测定，而C肽与胰岛素之间有相当稳定的比例 关系，且不受胰岛素抗体的干扰，注射的外源性胰岛素又 不含C肽，所以测定血中C肽水平，即可反映内生胰岛素水 平，又可了解β细胞的功能。
3.测定C肽与胰岛素的目的
分析胰岛素（及C肽）测试5个点的数值与同时测试血糖的 关系，分析是否有胰岛素抵抗；
胰岛素（及C肽）分泌高峰是否延迟（2型糖尿病的特点）， 判断糖尿病的类型；
糖耐量-胰岛素/血清C肽释放试验报告单（样版）
血糖 实测值
mmol/L 参考值
C-肽 实测值
nmol／L 参考值
0
半小时 1小时 2小时 3小时
3.9-6.1 7.8-9.0 7.8-9.0 3.9-7.8 3.9-6.1 ＜7.8
0.3-1.3 其峰值为空腹的5-6倍
如何分析糖耐量实验及胰岛素释放曲线
2、正常人的胰岛素（及C肽）的释放曲线
0
胰岛素 8-20
½
1
2
3
小时
miu/ml
空腹的5-10倍
逐渐恢复到空腹水平
血糖
3.3－5.5
（60-99）
＜11.1
（＜200）
3.3－7.7
（60-139）
mmol/L
mg/dl
正常人的胰岛素（及C肽）的释放曲线
（1）
胰岛素
血糖
0
15
5.0 （90）
½
80
3
100 10.0 （180）
小时
miu/ml mmol/L mg/dl
分析：
1、空腹血糖及服糖后2小时血糖都达到糖尿病的诊断标准。 2、从胰岛素看，0点超过正常值，服糖后1/2小时胰岛素分泌减少，其他各
点水平都很高，但不能很好的控制血糖，更证明胰岛素抵抗及高胰岛素
血症，胰岛素早期分泌减少，且胰岛素分泌高峰后移，是2型糖尿病的 特征。
果是中老年人突然发病、消瘦、病情发展迅速，易出现酮症，应诊
越来越差，应考虑为2型糖尿病，ß 细胞功能极度衰竭。
异常胰岛素（及C肽）的释放曲线
（5）
胰岛素 血糖
0
6 10 （180）
½
8 13.0
1
7 15.0
2
8 16.0 （288）
3
7 15.0 （270）
小时
miu/ml mmol/L mg/dl
小时
miu/ml
mmol/L mg/dl
分析：
1、从血糖看是正常的糖耐量
2、从胰岛素看空腹高于正常值，说明有胰岛素抵抗。
3、腹糖后1/2、1小时胰岛素是空腹的5倍以上，为正常倍数，胰岛素呈代 偿性分泌，为高胰岛素血症。
胰岛素释放试验 C肽释放试验
胰岛素释放试验胰岛素释放试验（Ins）就是令病人口服葡萄糖或用馒头餐来刺激胰岛B细胞释放胰岛素，通过测定空腹及服糖后1小时、2小时、3小时的血浆胰岛素水平，来了解胰β细胞的储备功能，也有助于糖尿病的分型及指导治疗。
临床意义单次测定空腹胰岛素只是一个初筛试验，用于检测升2型糖尿病，肥胖胰岛β细胞瘤，降低1型糖尿病等疾病。
试验方式该试验常与口服糖耐量试验同时进行，应禁食一夜后次日清晨空腹状态下采血。
许多生理和药物因素影响血糖值和胰岛素的分泌，如做试验时的情绪、禁食时间的长短等。
另外有些药物(如氨茶碱类，阻滞剂、糖皮质激素、口服避孕药等)应停服3天后再进行试验。
测定空腹、服糖后30分钟、60分钟、120分钟、180分钟的血清胰岛素，正常人的胰岛素分泌常与血糖值呈平行状态，在服糖后30～60分钟达到峰值，其浓度为空腹值的5～10倍，达到峰值后的胰岛素测定值较峰值应有一个明显的下降，180分钟的测定值应只比空腹值略高。
这组试验主要是用于判定胰岛素细胞的分泌功能。
胰岛素依赖型糖尿病空腹值低，服糖后仍无反应或反应低下，呈不反应型。
非胰岛素依赖性糖尿病空腹值正常或增高，服糖后胰岛素水平增加甚至过强，峰值到来的晚，常在120分钟，甚至180分钟出现，但该型糖尿病在晚期也可呈不反应型。
参考正常值成年人空腹胰岛素参考正常值：10～20mU/L。
餐后正常人血清胰岛素峰值约为空腹时的5～10倍，峰值一般出现在餐后30～60分钟(与进食种类有关：饮用葡萄糖峰值出现快，食用馒头则峰值出现慢)，2小时胰岛素<30mU/L，3小时后接近空腹值。
胰岛素释放试验是让患者口服葡萄糖或用馒头餐使血糖升高而刺激胰岛B细胞分泌胰岛素，通过测定空腹及餐后1小时、2小时、3小时的血浆胰岛素水平，了解胰岛B细胞的储备功能，从而有助于糖尿病的早期诊断、分型和指导治疗。
胰岛素释放试验的临床意义糖尿病患者的胰岛素释放试验曲线可分以下3种类型：（1）胰岛素分泌不足型：为试验曲线呈低水平状态，表示胰岛功能衰竭或遭到严重破坏，说明胰岛素分泌绝对不足，见于胰岛素依赖型糖尿病，需终身胰岛素治疗。
胰岛素c肽糖耐量标准
在糖耐量实验当中检测胰岛素的情况，其实也可以叫做胰岛素释放实验，方法的话是口服75克无水葡萄糖或者是一百克标准面粉制作的馒头之后，血浆胰岛素在三十到六十分钟上升到高峰，高峰是基础值的五到十倍，3到4小时恢复到基础水平。
临床意义在于，能够反映基础和葡萄糖介导的胰岛素释放的功能，一般的正常值成人空腹的基础胰岛素参考值是五到二十个微个单位然后每毫升，餐后正常人，血清胰岛素峰值大约是空腹时候的五到十倍。
胰岛素释放实验，是让患者口服葡萄糖之后来测定它的水平，这个时候一定要结合血糖的情况。
对于有之前用过胰岛素的患者，可以在抽胰岛素的时候，加C肽的水平，因为C肽的水平是直接反应内源性胰岛功能的。
如何分析糖耐量实验及胰岛素释放曲线
异常胰岛素（及C肽）的释放曲线
（3）
胰岛素
血糖（A）
0
30
6.8 （122）
½
80
10 （180）
1
200
12.0 （216）
2
240
8.0 （144）
3
100
7.4 （133）
小时
miu/ml
mmol/L mg/dl
分析： 1、从血糖看，空腹血糖受损伴糖耐量低减。
2、从胰岛素看，0点超过正常值，服糖后1/2小时胰岛素分泌减少，
1
200 14.0 （252）
胰岛素（C肽）释放曲线的
非量化标准的分析
纠正错误概念
只测空腹血糖和空腹胰岛素：盲目使用HOMA公式， 观察不了胰岛素分泌高峰大小和延时状态，无法分析 胰岛β细胞衰竭的程度。 只测空腹、服糖后2小时的血糖和胰岛素：无法知道胰 岛素分泌延时的高峰时间，属概念错误。 只测空腹、服糖后1、2、3小时的血糖和胰岛素：无法 观察胰岛素的早期分泌缺陷。 用馒头餐代替葡萄糖：对胰岛素早期分泌刺激不敏感。 只测胰岛素不测血糖：无法分析胰岛素降糖的功能和 胰岛素抵抗的程度。
1、衡量B细胞的功能要分析以下几点：
（1）分析胰岛素（及C肽）测试5个点的数值与同时测试 血糖的关系，是否有胰岛素抵抗。 （2）胰岛素（及C肽）分泌高峰是否延迟（2型糖尿病的
特点）。
（3）胰岛素（及C肽）分泌高峰低平时，应分析是否有 高度抑制ß 细胞的结果，还是严重损害ß 细胞的结果， 是1型糖尿病，还是2型糖尿病。
3
100 6.0 （108）
小时
miu/ml mmol/L mg/dl
分析： 1、从血糖看，可诊断空腹血糖受损。
如何分析糖耐量试验及胰岛素释放试验(.5)
三.分析要点总结
分析要点
➢ 分析胰岛素（及C肽）测试各点的数值与同时测试 血糖的关系，是否有胰岛素抵抗。
➢ 胰岛素（及C肽）分泌高峰是否延迟（2型糖尿病 的特点）。
➢ 胰岛素（及C肽）分泌曲线低平时，应分析是1型 还是2型，对于2型进一步分析是高糖抑制ß细胞？ ß细胞功能衰竭？
FPG
正常
2Hபைடு நூலகம்G
IFG 6.1 7.8
IGT
7.0 DM
11.1
2003年国际糖尿病专家委员会
DM
7.0
IFG
5.6
NGT
IGR IGT
7.8
11.1
一.临床意义
基本概念
通常应用的空腹及试验餐后30、120和 180 min 4次采血测定血糖和胰岛素、c肽水平，称 为糖耐量试验（OGTT）和胰岛素、c肽释放试验。 4次血糖或胰岛素、c肽数值所连成的曲线称为糖耐 量曲线和胰岛素、c肽释放曲线。 试验餐：成人口服75g葡萄糖，溶于250-300ML水 中，5分钟内饮完。儿童按每公斤体重1.75g,总量 ≤75g
×3 0.78-5.19 ng/ml
2.异常曲线
空腹血浆胰岛素升高不伴峰值后延：糖 耐量正常、糖调节异常（IFG、IGT）、 早期2型糖尿病 空腹血浆胰岛素升高伴峰值后延：典型 的2型糖尿病胰岛素释放曲线。 空腹血浆胰岛素正常或偏低:1型、成人 晚发性自身免疫性糖尿病、长病程2型
1.空腹血浆胰岛素升高不伴峰值后延： 糖耐量正常
胰岛素检测临床意义
在糖尿病诊疗中的应用 低血糖综合征诊断中应用 在其它疾病诊疗中的应用：胰岛素自身 免疫综合征、胰岛素受体异常、 NIDDM 合并高血压、胰腺炎、胰岛素抗体阳性 者等
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C肽释放试验
C肽是胰岛β细胞的分泌产物，它与胰岛素有一个共同的前体——胰岛素原。
一个分子的胰岛素原在特殊的作用下，裂解成一个分子的胰岛素和一个分子的C肽，因此在理论上C肽和胰岛素是等同分泌的，血中游离的C肽生理功能尚不很清楚，但C肽不被肝脏破坏，半衰期较胰岛素明显为长，故测定C肽水平更能反应β细胞合成与释放胰岛素功能。
对已经用胰岛素治疗的病人，体内产生的胰岛素抗体可干扰胰岛素测定；同时现在采用的放免法测定胰岛素，也分辨不出是内生的还是外源性胰岛素，给了解β细胞的功能带来困难，而C肽与胰岛素之间有相当稳定的比例关系，且不受胰岛素抗体的干扰，注射的外源性胰岛素又不含C肽，所以测定血中C肽水平，可以反应内生胰岛素的水平，既可了解β细胞的功能。
1、C肽释放试验的做法与注意事项与葡萄糖耐量试验，胰岛素释放试验相同，它的临床意义是：
（1）测定C肽，有助于糖尿病的临床分型，有助于了解患者的胰岛功能。
（2）因为C肽不受胰岛素抗体干扰，对接受胰岛素治疗的患者，可直接测定C肽浓度，以判定患者的胰岛β细胞功能。
（3）可鉴别低血糖的原因。
若C肽超过正常，可认为是胰岛素手泌过多所致，如C肽低于正常，则为其它原因所致。
（4）C肽测定有助于胰岛细胞瘤的诊断及判断胰岛素瘤手术效果，胰岛素瘤血中C肽水平偏高，若手术后血中C肽水平仍高，说明有残留的瘤组织，若随访中C肽水平不断上升，揭示肿瘤有复发或转移的可能。
空腹1h 2h 3h 正常±±±±
1型DM ±±±±
2型DM ±±±±
胰岛素释放试验（Ins）就是令病人口服葡萄糖或用馒头来刺激胰岛β细胞释放胰岛素，通过测定空腹及服糖后1小时、2小时、3小时的血浆胰岛素水平，来了解胰β细胞的储备功能，也有助于糖尿病的分型及指导治疗。
本试验做法与注意事项均与葡萄糖耐量试验相同。
已确诊为糖尿病可吃含面粉100克的馒头，未确诊者用75 克葡萄糖。
正常人口服葡萄糖后，随血糖的上升，血浆胰岛素水平也迅速上升，高峰一般在服糖后1小时出现且为空腹值的5－10倍，然后逐渐下降，至3小时应接近空腹水平，即胰岛素释放试验与糖耐量试验同步。
1、糖尿病病人的胰岛素释放试验曲线可分三种类型：
（1）胰岛素分泌减少型。
患者空腹血浆胰岛素水平很低，口服100克馒头后，仍然很低，无高峰出现，说时患者胰岛素分泌绝对不足，β细胞的功能衰竭，见于胰岛素2型糖尿病病人或2型糖尿病病人的晚期，提示必需采用胰岛素治疗。
（2）胰岛素分泌增多型。
患者空腹血浆胰岛素水平正常或高于正常，刺激后曲线上升迟缓，高峰在2小时或3小时，其峰值高于正常（但仍低于无糖尿病而体重相似的单纯肥胖者），提示患者胰岛素相对不足，多见于非胰岛素依赖型的肥胖者，应严格控制饮食，增加运动，积极减轻体重。
（3）胰岛素释放障碍型。
患者空腹血浆胰岛素可高可低，但刺激后曲线上升延缓，且峰值低于正常人，此型应用磺脲类药物治疗有效。
2、参与正常值及参考病理值（x±SD）μu/ml
空腹 1h 2h 3h
正常±±±±
1型DM ±±±±
2型DM ±±±±
胰岛素释放和糖耐量的区别
糖耐量异常(IGT)
1、糖耐量通常的试验方法是先测定检查者早晨空腹血糖的含量,接着让患者在空腹情况下口服75克葡萄糖，然后隔
半小时、1小时、2小时及3小时分别测定血糖含量,并以时间为横坐标,血糖浓度为纵坐标,绘成曲线,称为耐糖曲线。
2、糖耐量异常(IGT)是指OGTT试验2小时后的血糖水平升高，超过正常的L，但仍未达到L的糖尿病诊断标准。
这些患者称为葡萄糖耐量异常。
3、糖耐量异常是一种正常人向糖尿病的过度状态，这部分人虽然现在还不是糖尿病，但是将来发生2型糖尿病危险性非常高。
胰岛素释放实验：
1、胰岛素释放试验主要是通过口服葡萄糖后刺激胰岛B细胞的分泌，在不同的时间检查血中胰岛素的浓度，来确定胰岛B细胞的功能。
2、1型糖尿病人胰岛素分泌严重缺乏，餐后胰岛素值分泌也无明显增加；2型糖尿病人早期空腹胰岛素水平可略高或正常，晚期则往往减低，餐后胰岛素分泌高峰多延迟在2-3小时出现。
3、C肽释放试验意义与胰岛素释放试验性同。
糖耐量试验
OGT T试验是一种口服葡萄糖负荷试验，用以了解人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力。
通过OGTT试验，可以早期发现糖代谢异常，早期诊断糖尿病。
1.做OGTT试验前3天，不应该控制饮食，每天饮食中碳水化合物含量不应低于150克，并且维持正常活动。
2.影响本试验的药物（引起血糖升高或降低的药物）应停用。
3.试验前病人应10～14个小时不进食。
4.试验当日早晨空腹静脉取血后在5分钟之内饮入300毫升含75克葡萄糖的糖水，喝糖水后30分钟、1小时、2小时分别静脉取血一次，并留取尿液做尿糖定性试验。
整个试验中不可吸烟、喝咖啡、喝茶或进食，应安静地坐在椅子上
试验结果判定
1.当静脉空腹血糖＜／L，OGTT两小时血糖＜／L，说明人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力正常，为糖耐量正常。
2.当静脉空腹血糖≥／L或OGTT两小时血糖≥／L，尿糖＋～＋＋＋＋，说明人体处理进食后葡萄糖的能力明显降低，已达到糖尿病的诊断标准。
3.当
静脉空腹血糖＜／L并且OGTT两小时血糖介于～／L之间，说明人体对葡萄糖的调节能力轻度下降，已达到糖耐量低减的诊断标准。
4.当静脉空腹血糖介于～／L之间，且OGTT两小时血糖≤／L，说明人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力尚好，但对空腹血糖调节能力轻度减退，已达到空腹血糖受损的诊断标准。